血清内分泌激素论文（共7篇）
血清内分泌激素论文 篇1
EMS为临床病发率较高病症, 未及时发现并给予有效治疗, 将促使患者出现不孕症, 给患者自身以及家庭造成严重影响。结合我院临床数据统计可见, 该类病症的病发率存在明显上升的趋势, 对女性健康产生严重影响[1]。当前, 临床针对该类病症的诱发机制尚未形成统一定论, 使得治疗方案缺乏一定针对性。本次我院就主要对EMS合并不孕患者血清内分泌激素水平及自身免疫抗体情况进行分析, 旨在为临床研究以及质量方案的完善提供有效依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取本院2015年1月~2016年6月所接诊的不孕患者患者50例作为研究对象, 视为对照组, 以及EMS合并不孕患者50例视为观察组。对照组年龄23~34岁, 平均年龄 (28.48±1.69) 。其中月经失常23例, 正常27例。观察组年龄24~37岁, 平均年龄 (31.51±1.94) 。其中月经失常22例, 正常28例。在入院前未使用过任何药物进行治疗。经年龄等方面资料比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) 。
1.2 方法
所有患者于卵泡期且清晨取空腹静脉血20 m L, 分别放置于2支试管中, 10 m L/支。分别用于对血清内分泌激素水平及自身免疫抗体含量进行检测。对内分泌激素主要使用化学免疫荧光法检测, 免疫抗体主要用ELISA制剂检测。各类试剂以及检测人员操作方法均符合卫生部标准。
1.3 观察指标[2]
对两组患者血清中黄体生成素、睾酮激素、卵泡刺激素以及雌二醇含量, 抗绒毛促性腺激素抗体、抗卵巢抗体以及抗精子抗体阳性率进行统计。
1.4 统计学方法[3]
采取SPSS 19.0统计学软件对数据进行分析处理, 计量资料以“±s”表示, 采用t检验, 计数资料以百分数 (%) 表示, 采用x2检验, 以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
EMS合并不孕患者血清中雌二醇激素 (137.14±1.59) u U/m L、黄体生成素 (8.6 8±1.2 6) m I U/m L、睾酮激素 (2.14±0.59) ng/m L、卵泡刺激素 (6.28±1.47) m IU/m L, 对照组对应为 (1 1 7.4 5±1 2.0 4) u U/m L, (6.74±1.51) m IU/m L, (0.64±0.33) ng/m L, (3.28±1.03) m IU/m L, 观察组明显高于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。同时, 观察组患者抗绒毛促性腺激素抗体阳性率为48.00% (24/50) , 对照组为8.00% (4/50) , 观察组抗卵巢抗体阳性率为54.00% (27/50) , 对照组为22.00% (11/50) , 观察组抗精子抗体阳性率为68.00% (34/50) , 对照组为24.00% (12/50) , 差异有统计学意义 (P<0.05) 。
3 讨论
内分泌紊乱是导致女性不孕的主要因素, 其中黄体生成素对于促进卵泡的发育具有关键性作用, 兼备改善黄体功能的特点。若患者因内分泌异常导致该激素含量下降, 将使得卵泡无法正常发育, 而过高则会导致卵泡提前发育, 影响正常受孕。同时睾酮激素、卵泡刺激素以及雌二醇均会对受孕过程造成影响, 其中睾酮激素与受精卵着床相关, 卵泡刺激素影响卵泡的合成。雌二醇则会诱发子宫内膜增生。此外, 抗绒毛促性腺激素抗体则会对卵巢排卵产生作用, 使得黄体部分功能受到抑制, 抗卵巢抗体则影响卵母细胞的形成, 其含量过高将使得精子无法正常着床, 导致不孕。抗精子抗体则会对精子在女性体内的运动造成阻碍, 使得顶体反应降低。通过本次研究可见, 子宫内膜异位症 (EMS) 合并不孕患者血清内分泌激素及自身免疫抗体情况, 与常规不孕症患者相比, 其含量均存在明显差异, 临床可将上述各类激素以及抗体检测作为对该类病症诊断的主要依据, 提升诊断效率。
参考文献
[1]杨晓霞, 李萍.探讨子宫内膜异位症 (EMS) 合并不孕患者血清内分泌激素水平及自身免疫抗体情况[J].世界最新医学信息文摘 (连续型电子期刊) , 2016, 16 (22) :132-132, 133.
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血清内分泌激素论文 篇2
关键词：绝经,Luminal型乳腺癌,血清生殖激素,内分泌治疗,血管舒缩
乳腺癌是一种常见的女性恶性肿瘤, 绝经前的患者能够占到50%以上[1]。这种恶性肿瘤有一定的激素依赖性, 可以让乳腺癌生长的内分泌环境改变[2], 来达到内分泌治疗乳腺癌, 让肿瘤的生长得到一定的抑制, 这也是对于Luminal型绝经前乳腺癌患者的治疗标准[3]。目前, 对于乳腺癌的相关致病机理尚未明确, 女性患者的生殖激素水平和乳腺癌的产生有一定的关系, 而对乳腺癌患者采取内分泌治疗时, 也存在对患者造成血管舒缩功能障碍的可能[4]。为了进一步了解绝经前Luminal型乳腺癌患者血清生殖激素水平与内分泌治疗后血管舒缩功能障碍的相关性探究, 选择我院收治的绝经前Luminal型乳腺癌患者140例为研究对象, 现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2014年6月~2016年2月我院收治的绝经前Luminal型乳腺癌患者140例为研究对象, 年龄34~50岁, 平均年龄 (43.1±2.4) 岁, 患者的月经周期以及经量在正常范围之内。患者在就医时接受了常规检查, 确诊后接受乳腺手术, 术后进行常规的病理检查, 明确诊断之后进行内分泌治疗, 通过他莫昔芬药物对患者进行内分泌治疗。此次调查的140例乳腺癌患者经相关病理检查结果确定为Luminal型乳腺癌。
1.2 方法
血清生殖激素的检测:分别在患者入院时以及采取内分泌治疗后经外周静脉进行静脉取样, 通过放射免疫的方法来对血清的各项生殖激素进行测定:泌乳素 (PRL) 、睾酮 (T) 、卵泡刺激素 (FSH) 、促黄体生成素 (LH) 、孕酮 (P) 、雌二醇 (E2) 。
采血时间为患者月经来潮后的第一周之内。使用的仪器为DPC_IMMULIT发光仪以及其配套的试剂, 生产厂家为天津德普公司。
1.3 观察指标
140例患者在临床上血管舒缩功能障碍主要表现为潮热, 记录治疗前后血清生殖激素的水平以及潮热率, 并进行对比分析。
1.4 统计学方法
使用SPSS 18.0统计学软件对数据进行分析, 计量资料以“±s”表示, 采用t检验, 计数资料采用x2检验, 以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 治疗前后血清生殖激素的水平对比
治疗后, 患者血清PRL、LH、E2以及P的检测值显著高于治疗前, 两组数据, 差异有统计学意义 (P<0.05) ;血清T检测值显著低于治疗前 (P<0.05) ;血清FSH检测值在治疗前后无明显变化, 差异无统计学意义 (P>0.05) 。见表1。
2.2 治疗前后两组患者的潮热率对比
治疗后, 患者的潮热率高达85.71%, 明显高于治疗前的22.86%, 两组数据, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。见表2。
3 讨论
女性最常见的一种恶性肿瘤是乳腺癌, 其发病的年龄主要是在患者的围绝经期[5], 在这些患者之中, 绝经前的女性发病率达到了50%以上[6]。在围绝经期时, 女性在生殖激素的水平变化方面有着明显的阶段, 乳腺癌对于激素有着一定的依赖性, 目前, 对于乳腺癌患者的发生因素是否和异常变化的生殖激素水平相关存在一定的争议性[7]。
通过我们这次的研究可知, 治疗后, 患者血清PRL、LH、E2以及P的检测值显著高于治疗前, 血清T检测值显著低于治疗前, 血清FSH检测值在治疗前后无明显变化;治疗后, 患者的潮热率高达85.71%, 明显高于治疗前的22.86%。综上可知, 绝经前Luminal型乳腺癌患者在内分泌治疗后表现出血管舒缩功能障碍, 主要症状为潮热, 与血清P值升高和T值降低有一定关系, 可做为中医治疗重要依据。
参考文献
[1]刘小花, 杜惠兰, 成秀梅, 等.月经病实寒证患者卵巢子宫血流动力学变化及对生殖激素的影响[J].北京中医药大学学报, 2014, 37 (08) :568-571.
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[4]刘艳芹, 段彦苍, 杜惠兰.月经病虚寒证患者T细胞亚群与生殖激素的变化[J].中国中医基础医学杂志, 2013, 19 (07) :796-798.
[5]覃涛, 袁中玉, 彭柔君, 等.托瑞米芬治疗Luminal型年轻乳腺癌疗效和安全性的回顾性研究[J].中山大学学报 (医学科学版) , 2013, 34 (03) :402-406.
[6]唐丹艺, 曹阳, 吴旻禧, 等.运动改善女性围绝经期综合征症状的研究进展[J].中国中医基础医学杂志, 2014, 20 (06) :864-866.
血清内分泌激素论文 篇3
关键词：内分泌病症,糖皮质激素,病因
人体的各个腺体比如说, 甲状腺、肾上腺、垂体等等分泌各种激素, 进入血液后发挥着组织与调节功能。各个内分泌系统之间的相互制约和影响, 保证机体正常生理机能的运行。任何内分泌功能性失调都会影响着整个系统的正常运行, 导致紊乱随着出现生理病变。为了进一步研究糖皮质激素在治疗内分泌疾病中的临床应用以及用药的合理性, , 为患者提供更佳的治疗和服务。本文收集了2009年3月至2010年12月来我院治疗的24例内分泌疾病患者的临床资料进行了详细研究。研究结果如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料
本文收集了2009年3月至2010年12月来我院治疗的24例内分泌疾病患者的临床资料进行了详细研究。其中10例患者肾上腺皮质衰退, 2例患者糖皮质类醛固酮增多, 2例患者是先天性的肾上腺增生。6例为甲状腺疾病, 红斑狼疮1例, 淋巴细胞垂体炎1例, 胰岛素免疫综合症1例, 糖尿病伴胰腺炎1例。上述患者的性别、年龄、病情没有差异统计学意义, P>0.05.
1.2 方法
原发性的肾上皮质衰退患者, 氢化考的松口服, 清晨15mg, 晚上5mg。糖皮质类醛固酮增多患者, 每天口服0.5mg, 再换泼尼松。对于先天性的肾上腺增生患者, 口服20mg, 分两次服用。甲状腺功能亢进的患者, 进行糖皮质激素包括在内的综合性治疗方法。治疗初期甲状腺危象, 每天口服200mg氢化考的松, 根据患者的病情进行药量的调整, 直到停药。亚急性的甲状腺炎, 每天清晨口服15mg泼尼松, 服药两周之后, 减轻药量, 直到停药。红狼斑疮患者, 开始每天口服40mg泼尼松, 之后进行1g甲基泼尼松静脉冲击方式进行治疗。细胞性垂体炎患者, 静脉滴注3d甲基泼尼松龙, 之后每天口服40mg泼尼松, 口服两周。胰岛素免疫综合症患者, 静脉滴注100mg氢化考的松, 症状改善之后, 口服泼尼松。糖尿病伴胰腺炎患者, 每天口服30mg泼尼松。
2 结果
对于上述患者进行糖皮质激素的治疗, 均有效果。肾上腺皮质衰退10例患者, 在服药数日之后, 临床症状发生了明显的改变, 患者的皮肤色素正在逐步的变浅。甲状腺疾病6例患者, 在服用药物之后, 甲状腺疼痛消失, 在经过一段时间的用药之后, 甲状腺肿大出现变软、缩小情况, 不再坚硬。上述患者胰管狭窄的症状得到了全面改善, 胰腺也不在肿胀, 糖含量也控制在正常的范围内。
3 讨论
根据本文的研究显示, 通过对于原发性的肾上皮质衰退患者, 糖皮质类醛固酮增多患者, 先天性的肾上腺增生患者, 甲状腺功能亢进的患者, 亚急性的甲状腺炎, 红狼斑疮患者, 细胞性垂体炎患者, 胰岛素免疫综合症患者, 糖尿病伴胰腺炎患者, 对于上述患者进行糖皮质激素的治疗, 均有效果[1]。肾上腺皮质衰退10例患者, 在服药数日之后, 临床症状发生了明显的改变, 患者的皮肤色素正在逐步的变浅。甲状腺疾病6例患者, 在服用药物之后, 甲状腺疼痛消失, 在经过一段时间的用药之后, 甲状腺肿大出变软、缩小, 不再坚硬。上述患者胰管狭窄的症状得到了全面改善, 胰腺也不在肿胀, 糖含量也控制在正常的范围内。这就充分的说明了在治疗内分泌疾病中, 可以使用糖皮质激素进行代替治疗[2]。
综上所述, 在治疗内分泌疾病中, 不仅可以使用糖皮质激素进行代替治疗, 而且, 糖皮质激素还拥有强大的抗炎性能和抑制免疫的作用, 值得在临床上大范围应用。
参考文献
[1]姚伟峰, 黄友, 顾浩初, 等.糖皮质激素治疗内分泌疾病的适应证和方法[J].中国煤炭工业医学杂志, 2009, 7 (1) :12-13.
血清内分泌激素论文 篇4
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2012年1月~2015年1月我院门诊以甾体激素治疗生殖内分泌疾病患者284例作为研究对象。其中PCOS患者80例, 年龄18~44岁、平均年龄 (27.2±7.5) 岁, 合并不孕53例, 月经紊乱73例, Honma-IR异常41例, 多毛25例, 合并高血糖28例、高血脂21例、超重或肥胖51例。青春期功血104例, 年龄12~19岁、平均年龄 (16.1±2.0) 岁, 其中初潮即发病者14例、初潮后12个月内发病31例、初潮12个月以上发病56例。更年期DUB患者50例, 年龄41~50岁、平均年龄 (43.6±4.4) 岁, 以月经过多、经期过长或阴道间断流血为主要症状表现, 贫血30例, 病程4个月~20个月、平均病程 (8.1±2.1) 个月。围绝经期综合征50例, 年龄45~53岁、平均年龄 (49.3±3.1) 岁, 病程4~34个月、平均病程 (18.4±4.4) 个月, Kupperman评分等级轻度10例、中度23例、重度17例。
1.2 方法
1.2.1 PCOS治疗
自然月经后第5日, 口服炔雌醇环丙孕酮片, 1片/d, 连服3周。必要时联合维生素D、盐酸二甲双弧治疗。若有生育需要者, 2个月后, 开始促排卵治疗。
1.2.2 青春期功血
结合雌激素 (倍美力) , 口服1.25 mg/次, 3~4次/d, 间隔2天服药1次, 每次减量1/3, 直至维持量0.25~0.3 mg/次, 再连用20天。若有贫血, 直至血红蛋白回升至90 g/L以上方可停药。最后10天, 给予安宫黄体酮, 4 mg/次, 2次/d; (或黄体酮胶囊0.2 g/次, 2次/d) 。
1.2.2 更年期功血治疗
给予炔诺酮片, 5 mg/次, 3次/d, 间隔8 h用药1次, 并评价止血疗效。若无活动性出血, 再次服药减服1/3, 每隔3天日服药次数减少1次, 直至2.5~5 mg/次, 维持量, 持续20~22天。治疗期间, 每隔2周复查1次, 子宫内膜厚度, 调整用药。
1.2.4 围绝经期综合征
给予口服替博龙, 2.5 mg/次, 1次/d, 持续3周;停药1周, 再服3周;持续3个疗程。
1.3 观察指标
显效、有效、无效例数, 随访疾病复发或加重例数, 不良反应发生例数。
1.4 疗效判定标准
参照《妇科学》[1], 将疗效分为显效、有效、无效三个等级, 显效:临床症状与体征基本消失, 实验室指标转归, 6个月内无复发;有效:临床症状与体征有所改善, 实验室指标达到或接近正常, 6个月内无复发或加重;无效:临床症状与体征无明显改善, 实验室指标无明显改善, 6个月内复发或加重。总有效率=显效率+有效率。
1.5 统计学方法
数据资料以Excel录入, 运用SPSS 20.0统计学软件进行分析, 计数资料以例数 (n) 、百分数 (%) 表示, 采用x2检验或秩和检验, 以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 疗效
青春期功血、更年期功血显效率在70%以上, 青春期功血、更年期功血、围绝经期综合征总有效率均在90%以上, PCOS无效率在10%以上。见表1。
2.2 随访结果与不良反应
治疗后, 均随访1个月~12个月, 按照疾病复发或加重率从高到低分别为围绝经期综合征34.00% (37/284) 、PCOS17.50% (14/80) 、青春期功血4.81 (5/104) 、更年期功血2.00% (1/50) , 差异有统计学意义 (x2=23.26, P=0.0 0<0.0 5) 。按照不良反应发生率从高到低分别为PCOS8.75% (7/80) 、围绝经期综合征8.00% (4/50) 、更年期功血8.00% (4/50) 、青春期功血1.92% (2/104) , 差异无统计学意义 (x2=4.39, P=0.36>0.05) 。发生17例不良反应, 其中体重增加11例、恶心与呕吐5例、潮热1例。
3 讨论
不同类型生殖内分泌疾病临床表现、病因、病机、疾病变化、进展与预后均存在一定差异[3]。通过甾体激素, 补充、替代内源性性激素分泌, 以缓解症状, 治疗疾病。研究显示, 甾体激素治疗生殖内分泌疾病整体疗效90%以上, 需注意的是PCOS无效率为20.00%, 相对较高。PCOD是一种多因性、临床表现多态性的内分泌紊乱综合征, 发病机制十分复杂, 疾病发生、进展、预后影响因素较多, 即使经过甾体激素等药物综合治疗, 疗效也难以让人满意, PCOS从广义上来看是一种终身性疾病, 许多患者长期受该病困扰[4,5]。
在严格掌握禁忌症条件下, 甾体激素治疗生殖内分泌疾病较安全, 少见严重不良反应, 本组不良反应发生率为5.99%, 其中体重增加占64.71%。卵巢、胰岛素相互之间存在竞争关系, 有报道称IR、高胰岛素血症可能是PCOS血脂异常重要原因, 给予甾体激素可能影响胰岛素敏感度, 增加血脂、代谢紊乱风险, 进而增重。此外, 需注意的是, 长期应用甾体激素存在致癌风险, 对于长病程PCOS、围绝经期综合征, 不宜长期用药。
摘要：目的 观察甾体激素类药物治疗女性生殖内分泌疾病的疗效与安全性。方法 选取2012年1月2015年1月我院以甾体激素治疗生殖内分泌疾病患者284例, 其中多囊卵巢综合症 (Polycystic ovary syndrome, PCOS) 患者80例, 青春期功能失调性子宫出血 (DUB, 简称功血) 104例, 更年期DUB患者50例, 围绝经期综合征50例。结果 青春期功血、更年期功血显效率70%以上, 青春期功血、更年期功血、围绝经期综合征总有效率均90%以上, PCOS无效率为20.00%、围绝经期综合征无效率为10.00%;围绝经期综合征、PCOS、青春期功血、更年期功血疾病复发或加重率分别为34.00%、17.50%、4.81%、2.00%, 差异有统计学意义 (P<0.05) ;PCOS、围绝经期综合征、更年期功血、青春期功血不良反应发生率8.75%、8.00%、8.00%、1.92%。结论 在掌握适应证、禁忌症基础上, 甾体激素类药物治疗女性生殖内分泌疾病的疗效显著, 不良反应发生率低, 但部分疾病复发率、增重风险较高。
关键词：女性,生殖,内分泌,多囊卵巢综合征,甾体激素
参考文献
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[2]张前.雌激素在生殖内分泌疾病的临床应用[J].临床合理用药, 2011, 4 (2) :8-9.
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血清内分泌激素论文 篇5
关键词：激素替代治疗,绝经,内分泌,脂代谢
绝经是指女性卵巢功能随着年龄的不断增长而逐渐衰竭, 最终形成永久性停经的生理现象[1]。绝经后女性由于缺乏雌性激素, 常引起泌尿系统萎缩、内分泌失调或脂代谢异常, 进而导致出现潮热出汗、情绪波动、骨质疏松等症状, 严重影响患者健康生活[2]。因此治疗女性绝经并发症的关键在于如何弥补由雌性激素缺乏所带来的生理问题。本研究分析激素替代治疗对绝经后女性内分泌及脂代谢水平的影响, 现报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料选择2014年11月~2015年11月本院存在绝经症状的80例患者, 年龄47~60岁, 平均年龄 (54.83±4.62) 岁, 停经时间1~4年, 平均停经 (2.34±0.62) 年。选取标准:排除乳腺疾病、内外科并发症及代谢类疾病, 停经时间>1年, 停经年龄≤60岁, 6个月内未使用其他激素类药物。所有患者均完全知情并同意, 本研究经本院伦理委员会审核批准。
1.2方法所有患者均给予激素替代法治疗。服用1 mg戊酸雌二醇片 (浙江仙琚制药股份有限公司, 国药准字H20020299) , 1次/d, 持续服用21 d;11 d后加服地屈孕酮片 (雅培生物制品有限公司, 批准文号H20130110) , 10 mg/次, 1次/d。21 d后间隔1周, 进行下一个疗程的治疗。治疗过程中密切监测患者乳头胀痛、水肿、胃肠道反应等不良反应, 根据患者临床表现合理用药, 出现严重不良反应者, 停止用药。
1.3观察指标比较所有患者治疗前后HDL-C、LDL-C、血清E2、LH和尿FSH。
1.4统计学方法采用SPSS20.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差 (±s) 表示, 采用t检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。
2结果
2.1治疗前后性激素水平比较治疗后血清E2、LH、尿FSH优于治疗前 (P<0.05) 。见表1。
2.2治疗前后脂代谢水平比较治疗前HDL-C、LDL-C水平分别为 (1.02±0.31) 、 (3.24±0.27) mmol/L, 治疗后分别为 (1.28±0.23) 、 (2.77±0.38) mmol/L, 治疗后优于治疗前 (P<0.05) 。
3讨论
自然绝经属于女性正常的生理功能, 因疾病导致双侧卵巢切除或采用放化治疗而引起的绝经称为人工绝经[3]。临床研究表明[4,5], 无论自然绝经还是人工绝经均会对女性身体内分泌水平、脂代谢水平或其他生理功能造成不同程度的影响, 进而对女性生理、心理或生活等方面产生不良影响。因此积极探寻有效措施对绝经女性内分泌系统、脂代谢水平等生理功能进行合理调节非常重要。
由于女性卵巢功能衰退或切除后, 卵泡丧失对促腺激素的反应或缺乏卵泡, 导致雌性激素分泌量减少, 下丘脑垂体功能减弱, 造成血清E2、尿FSH等性激素水平及低密度脂蛋白等脂蛋白指标出现异常, 进而引发相关生理指标异常, 造成患者出现衰老加快、情绪激动、皮肤干燥、头痛等临床症状, 甚至引发骨质疏松、阴道炎、关节炎、尿失禁等并发症[6,7,8]。为有效调节绝经女性内分泌与脂代谢水平, 本院给予绝经患者激素替代疗法进行治疗, 激素替代疗法主要根据患者体内所缺失激素, 采用合理的用药方式对其体内所缺失激素进行适当补充或替代。而临床上治疗绝经症状的药物主要有戊酸雌二醇与地屈孕酮, 其中戊酸雌二醇可有效补充绝经后女性相关缺失激素, 从而改善身体机能;地屈孕酮可较好的治疗因缺乏内源性孕酮所引起各种疾病, 具有显著的治疗或预防绝经并发症。本研究结果与王海静等[3]研究结果一致, 说明该疗法能有效调节绝经女性内分泌与脂代谢水平, 从而对绝经后外阴萎缩、关节炎、尿失禁等并发症起到了良好的预防作用。
总之, 激素替代疗法治疗绝经后女性可有效调节内分泌及脂代谢水平异常, 效果显著。
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血清内分泌激素论文 篇6
1 材料
加丽素红 (含10%角黄素) , 瑞士罗氏公司生产;角黄素标准品 (纯度96.0%) , 购于德国Dr.Ehrenstorfer公司。蛋鸡基础饲料, 由某动物保健公司提供。贝克曼DXI800化学发光仪、罗氏ROCHE E411电化学发光仪、罗氏ROCHE 6000电化学发光仪, 均产自美国;贝克曼DXI800配套LH试剂盒、贝克曼DXI800配套FSH试剂盒、贝克曼DXI800配套E2试剂盒、贝克曼DXI800配套T试剂盒, 均由天津德普诊断产品有限公司提供。
2 方法
2.1 动物分组与染毒
取120只19周龄的海兰蛋鸡, 根据体重基本对等的原则随机分为对照组、试验组 (低剂量组和高剂量组) , 其中对照组、高剂量组、低剂量组各40只。对照组饲喂基础饲料 (不含加丽素红) , 高剂量组、低剂量组在基础饲料的基础上按每千克饲料分别添加加丽素红8 000 mg和80 mg;对照组饲喂基础饲料30 d;试验组前30 d饲喂试验饲料, 之后改喂基础饲料。分别在试验前、试验第30天和停喂饲料后第10天和第30天对海兰蛋鸡进行颈静脉采血, 4 000 r/min离心15 min, 分离血清, 于-20℃保存, 备用。
2.2 测定项目
采用化学发光法测定血清中胰岛素 (ISN) 、生长激素 (GH) 、雌二醇 (E2) 、促黄体生成激素 (LH) 、促卵泡激素 (FSH) 、孕酮 (P) 、三碘甲状腺原氨酸 (T3) 、甲状腺素 (T4) 含量。观察对照组和高剂量组、低剂量组在饲喂前、饲喂30天和停喂含加丽素红饲料第10天和第30天的激素水平变化情况。
2.3 数据处理
试验数据表示为“平均值±标准差”, 使用SPSS17.0软件的比较均值进行单因素方差分析和比较。
3 结果 (见表1~3) 与分析
注:同行数据无肩标或肩标含有相同字母表示差异不显著 (P>0.05) , 字母不同表示差异显著 (P<0.05) 。
由表1可知:低剂量组甲状腺素含量显著低于对照组 (P<0.05) ;胰岛素、生长激素、雌二醇、促卵泡激素含量随剂量增加有上升趋势但无统计学意义 (P>0.05) ;低剂量组、高剂量组促黄体生成激素、孕酮、三碘甲状腺原氨酸含量较对照组有变化, 但无统计学意义 (P>0.05) 。
由表2可知:改喂基础饲料10 d后, 胰岛素含量有一定的下降趋势, 对照组胰岛素含量显著高于高剂量组 (P<0.05) ;低剂量组促黄体生成激素含量极显著低于对照组 (P<0.01) ;高剂量组促卵泡激素含量显著高于低剂量组 (P<0.05) ;高剂量组孕酮含量极显著低于对照组 (P<0.01) ;高剂量组、低剂量组生长激素、雌二醇、甲状腺素、三碘甲状腺原氨酸含量与对照组之间未见明显变化。
注:同行数据无肩标或者肩标含有相同字母表示差异不显著 (P>0.05) , 小写字母不同表示差异显著 (P<0.05) , 大写字母不同表示差异极显著 (P<0.01) 。
注:同行数据无肩标或者肩标含有相同字母表示差异不显著 (P>0.05) , 肩标小写字母不同表示差异显著 (P<0.05) , 大写字母不同表示差异极显著 (P<0.01) 。
由表3可知:改喂基础饲料30 d后, 高剂量组、低剂量组胰岛素、生长激素、促黄体生成素、甲状腺素、三碘甲状腺原氨酸含量与对照组中没有明显变化 (P>0.05) ;高剂量组、低剂量组促卵泡激素含量与对照组有随剂量增加呈上升趋势, 但无统计学意义 (P>0.05) ;低剂量组雌二醇含量与高剂量组存在显著差异 (P<0.05) , 高剂量组高于对照组, 低剂量组低于对照组差异均不显著 (P>0.05) ;高剂量组、低剂量组孕酮含量与对照组存在极显著性差异 (P<0.01) , 低剂量组与高剂量组均低于对照组。
4 讨论
4.1 加丽素红对海兰蛋鸡血清甲状腺激素水平的影响
甲状腺素主要的生理功能是:促进生长发育, 促进机体内糖类、脂肪和蛋白质的代谢;生热及温控, 甲状腺激素增加细胞的氧化速率, 产生热量, 同时也受营养、环境、内分泌的影响与调控[4]。三碘甲状腺原氨酸大部分是由甲状腺素脱碘转化而来, 生理功能与甲状腺素大体相同。甲状腺激素 (甲状腺素、三碘甲状腺原氨酸) 能通过生殖轴影响禽类的繁殖活动, 是启动和维持雌禽产蛋所必需的。有资料表明, 高产蛋鸡甲状腺功能强, 甲状腺激素水平高[5]。
本试验结果表明:饲喂添加低剂量加丽素红饲料30天, 甲状腺素的含量低于对照组, 低剂量组显著低于对照组 (P<0.05) ;在停喂添加加丽素红饲料以后甲状腺素水平又恢复正常。这表明长期饲喂添加一定剂量加丽素红的饲料, 可能影响海兰蛋鸡产蛋率, 使其低于饲喂基础饲料的产蛋鸡, 也可能会对机体生长造成影响。
4.2 加丽素红对海兰蛋鸡血清胰岛素水平的影响
胰岛素是机体内最重要的降糖激素, 也是影响产蛋鸡脂类代谢的重要激素之一。胰岛素能促进合成代谢, 促进营养物质的储存, 调节血糖的浓度。胰岛素能结合下丘脑参与促性腺激素释放激素, 影响生殖机能。胰岛素、生长激素等在卵巢和子宫有受体, 可能直接或者协作与受体结合参与生殖机能的调控[6]。
本试验结果表明:海兰蛋鸡改喂基础饲料10 d后, 胰岛素呈降低趋势, 对照组与高剂量组差异显著, 说明加丽素红对胰岛素的分泌有影响;停喂添加加丽素红饲料30天后胰岛素水平恢复正常。结合本试验结果, 在长期适应添加加丽素红饲料之后改喂基础饲料, 胰岛素水平明显低于正常值, 过一段时间之后又恢复正常水平, 说明加丽素红可促进胰岛素的分泌, 长期的低胰岛素水平可能延缓性发育。
4.3 加丽素红对海兰蛋鸡血清性激素水平的影响
促卵泡激素和雌激素在调控雌禽卵泡发育的过程中有极其重要的作用。促卵泡激素作用于卵巢, 在促黄体生成激素的协同下, 促进卵巢上的卵泡发育并分泌雌激素, 是刺激卵泡发育成熟的最主要因素。雌激素调控多种脂蛋白和载脂蛋白在肝脏合成, 促黄体生成激素可促使卵巢血流加速, 在促卵泡激素作用的基础上引起卵泡排卵和促进黄体的形成。雌激素调控多种脂蛋白和载脂蛋白在肝脏的合成, 能刺激雌性羽毛的生长, 维持雌禽第二性征;刺激输卵管的生长, 使耻骨扩张;促进蛋白、蛋壳的分泌等, 为卵泡的生长发育及排卵后卵的形成而产卵准备良好的物质条件[7]。
本试验结果表明:停喂添加加丽素红饲料第10天, 促卵泡激素与促黄体生成激素含量都会低于正常水平, 可能会影响禽类的性成熟和卵泡发育, 进而影响海兰蛋鸡的产蛋率。但在停喂第30天, 高剂量组、低剂量组与对照组又无明显差异, 说明停喂添加加丽素红饲料30 d后, 促卵泡激素与促黄体生成激素水平会自动恢复到正常水平。
雌二醇与孕酮都属性腺类固醇激素, 由性腺产生。在雌性禽类, 由卵巢卵泡的膜层和颗粒层产生。类固醇激素调节卵泡和生殖道的生长发育、排卵及换羽等生殖行为。本试验停喂添加加丽素红饲料30天, 高剂量组海兰蛋鸡雌二醇的含量显著高于低剂量组 (P<0.05) ;在停喂添加加丽素红饲料第10天, 高剂量组孕酮含量极显著低于对照组 (P<0.01) ;停喂添加加丽素红饲料第30天, 高剂量组、低剂量组中孕酮含量都极显著低于对照组 (P<0.01) 。在停喂添加加丽素红饲料后, 雌二醇与孕酮含量依然低于正常水平。据M M.Mashaly报道, 鸡的产蛋率变化是由血浆孕酮浓度变化引起的, 当孕酮浓度降低时, 产蛋率下降, 反之升高。由本试验结果可知, 加丽素红会对雌二醇与孕酮水平造成影响, 进而可能影响卵泡和生殖道的发育和排卵, 使产蛋率下降。
尽管对性激素水平的变化能否直接反映污染物对生物体内类固醇激素的合成和代谢的影响还存在分歧;但目前已证实, 外来化合物导致水生生物血清性激素浓度的改变, 能反映出对生物繁殖功能的损害[8]。
4.4 加丽素红对海兰蛋鸡血清生长激素及三碘甲状腺原氨酸水平的影响
生长激素的主要生理功能是控制和调节动物的正常生长。本试验中, 与对照组相比, 高、低剂量组生长激素含量在饲喂添加加丽素红饲料第30天和改喂基础饲料后第10, 30天均无显著差异, 说明加丽素红对于海兰蛋鸡生长激素水平无影响, 即对于蛋鸡生长无影响;与对照组相比, 高、低剂量组三碘甲状腺原氨酸含量在饲喂添加加丽素红饲料第30天和改喂基础饲料第10, 30天均无显著差异, 即加丽素红对三碘甲状腺原氨酸无影响。
5 结论
研究表明:加丽素红对海兰蛋鸡胰岛素、甲状腺素、促卵泡激素、孕酮、雌二醇激素水平有影响;生长激素、促黄体生成激素、三碘甲状腺原氨酸含量虽有一定变化, 但无统计学意义。加丽素红和禽体内激素水平之间的剂量-效应关系以及加丽素红对各激素水平影响的作用机理, 加丽素红与机体甲状腺、垂体、性腺等内分泌腺体的分泌功能之间的关系仍需进一步研究, 以期为科学评价加丽素红使用安全性提供科学依据。
摘要：为了研究饲料着色剂加丽素红对海兰蛋鸡内分泌激素水平的影响, 试验采用化学发光法对饲喂添加加丽素红饲料的海兰蛋鸡血清中胰岛素 (ISN) 、生长激素 (GH) 、雌二醇 (E2) 、促黄体生成激素 (LH) 、促卵泡激素 (FSH) 、孕酮 (P) 、三碘甲状腺原氨酸 (T3) 、甲状腺素 (T4) 含量进行测定。结果表明:饲料着色剂加丽素红对蛋鸡胰岛素、甲状腺素、促卵泡激素、孕酮、雌二醇等激素代谢水平有影响;生长激素、促黄体生成激素、三碘甲状腺原氨酸含量虽有一定变化, 但无统计学意义。
关键词：着色剂,蛋鸡,加丽素红,内分泌,激素水平,影响
参考文献
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血清内分泌激素论文 篇7
1 材料与方法
1.1 实验材料
MDA-MB-231及MCF-7细胞株来源于中山大学附属第三医院中心实验室, 1640培养基、优级胎牛血清来自美国GIBCO, 小鼠抗人ERβ多克隆一抗购自美国SANTA公司, 真核表达质粒p Reveicer-M72-ERβ由美国Gene Copoeia公司提供, Lipofectamine TM LTX购自美国Invitrogen。
1.2 细胞培养
MCF-7细胞及MDA-MB-231细胞培养于含10%胎牛血清的1640培养基中, 37℃, 5%二氧化碳置于细胞培养箱中培养, 每1~2天换液, 当细胞融合度达70%~80%时, 按1∶3进行细胞传代。
1.3 质粒提取和鉴定
重组质粒用去内毒素转染级别QIAGEN Plasmid mini Kits小提质粒试剂盒提取, 对提取的质粒行琼脂糖凝胶电泳鉴定。
1.4 细胞转染
利用Lipofectmine LTX和Lipofectmine PLUS转染试剂, 按照试剂盒说明书进行转染, 并按说明书进行转染条件优化, 同时设置非转染对照组。
1.5 转染效果检测
细胞转染后20 h, 通过荧光显微镜、免疫荧光及Western Blot等方法验证ERβ基因在细胞中的表达。
1.6 药物干预实验
将细胞分为MCF-7组、MCF-7ERβ组、MCF-7空组、MDA-MB-231组、MDA-MB-231 ERβ组、MDA-MB-231空组, 对各组细胞进行雌二醇、他莫昔芬处理, 并同时设置未处理组作为对照。用MTT法绘制各组细胞在不同处理因子作用下的生长曲线。
1.7 统计学处理
用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析。多组间比较采用方差分析, P<0.05为差异有显著性。
2 实验结果
2.1 重组质粒的鉴定
对提取的质粒p Receiver M72-ERβ、p Reveicer-M72进行行琼脂糖凝胶检查, 电泳结果见图1所示, 所提取的目的条带扩增清晰, 参照标准DNA分子量, 与预期大小相一致, 条带中无非特异性扩增。正反引物分别为:Forward:5'-GCGGTAGGCGTG TACGGT-3';Reverse:5'-AGCAGTCCCCAAGTCAGT-3'。
1:M;2:ERβ;3:空载
2.2 Western blot结果
相对光密度检测显示MCF-7 ERβ和MDA-MB-231ERβ组ERβ基因表达与各自空载体及空白对照组比较差异具有显著性 (P<0.05) 见图2、3及表1、2。
1:MCF-7;2:MCF-7空;3:MCF-7ERβ
2.3 药物干预及MTT检测
无处理因子的情况下, 外源基因ERβ在MCF-7细胞的表达能抑制细胞生长。外源性基因ERβ在MCF-7细胞中的表达不增加对他莫昔芬的耐药, 但使细胞对于雌激素的敏感性下降。
1:MDA-MB-231;2:MDA-MB-231空;3:MDA-MB-231ERβ
在无处理因子的情况下, 外源性基因ERβ在MDA-MB-231细胞中的表达能促进肿瘤生长。ERβ在MDA-MB-231细胞中的表达不改变MDA-MB-231细胞对于雌二醇、他莫昔芬的反应性。
注:1) 与MCF-7组和MCF-7空组比较, P<0.05;2) 与MCF-7+E2组和MCF-7空+E2组比较, P<0.05
注:覮与MDA-MB-231组和MDA-MB-231空组比较, P<0.05
3 讨论
ERβ能够与ERα形成二聚体, 且各类二聚体与DNA的结合能力不相同, ERβ的功能很大程度上受到ERα存在的影响, ERβ在ERα-和ERα+的不同条件下, 可能具有不同的生物功能。因此, 通过本次试验, 将ERβ转染给ERα阳性的MCF-7细胞以及ERα阴性的MDA-MB-231细胞, 与对照组一起, 形成ERα+/ERβ-、ERα+/ERβ+、ERα-/ERβ+和ERα-/ERβ-四组观察细胞, 通过细胞试验分组, 模拟临床中乳腺癌细胞雌激素受体的不同状态。观察四组细胞的细胞生长特性及对雌二醇和他莫昔芬的反应性, 探讨ERβ在ERα-和ERα+的不同条件下的生物学功能。
3.1 ERβ在ERα阳性的乳腺癌细胞中的作用
ERα能与ERβ优先形成有功能的异型二聚体并与DNA结合, ERα/ERβ异型二聚体的活性与ERα/ERα同型二聚体非常相似, 但是明显高于ERβ/ERβ同型二聚体[4]。一些基于细胞实验的研究表明, ERβ可能对于ERα的功能起负性调节的作用, 当ERα和ERβ共同转染ERα和ERβ都是阴性的细胞, ERβ可以抑制ERα的转录活性, 并且降低细胞对于E2的敏感性[5]。在另外一项试验中, 研究者将ERα和ERβ共转染Hela细胞, ERβ能够抑制E2对于cyclin D1基因的激活作用, 提示ERβ能够抑制细胞的增殖活性[6]。
另外, ERβ也能够影响乳腺癌细胞中内源性ERα的活性, ERβ过表达可以降低ERα的转录活性, 并且能够降低E2引起的VEGF、PR等基因的活性[7]。染色体免疫沉淀实验表明ERβ能够改变ERα介导的c-Fos和c-Jun的募集反应[8]。ERβ能够增加E2诱导的ERα的降解, 降低MCF-7中ERα的m RNA和蛋白质水平, 以此直接影响ERα的反应[9]。
通过将ERβ转染给MCF-7细胞, 经荧光报告基因和Western Blot检测, 证明ERβ蛋白的表达明显高于空载体组和空白对照组, 表达ERβ的MCF-7细胞株成功转染。通过与未转染的MCF-7细胞相比较, 可以观察到ERβ的表达在不同作用因子下对ERα阳性细胞株MCF-7的影响。试验中, 无处理因子条件下, MCF-7ERβ组与对照组比较细胞生长受抑制, 机制可能为ERβ改变某些信号通路而影响乳腺癌的细胞活性。在雌二醇作用下, MCF-7ERβ组细胞明显减慢。国内周艳等[10]的研究结果与笔者一致。也有研究认为, 在雌二醇作用下, 转染ERβ使细胞的生长速度明显减慢, 但是在无处理因子作用下, ERβ的表达本身并不会改变细胞的增值活性[11]。通过对同样为ERα阳性的T47D细胞进行ERβ转染, STROM等[12]发现在雌激素作用下, ERβ的表达可以减少细胞的增长, 并且能够引起与细胞周期增生相关成分的下降。
实验中结果为ERβ在ERα中的表达能够抑制细胞生长。部分研究者发现在ERα阳性的患者中, ERβ阳性的患者比ERβ阴性的患者具有更好的预后, 与实验吻合。ERβ可以与ERα一起共同预测患者的预后, 临床上检测ERα的同时, 检测ERβ的表达具有重要的意义。
3.2 ERβ在ERα阴性的乳腺癌细胞中的作用
通过文献复习, 笔者发现越来越多的学者倾向于ERβ在不同的ERα表达状态下具有不同的生物功能。因此, 试验中本组将ERβ转染给ERα阳性的MCF-7细胞和ERα阴性的MDA-MB-231细胞, 以此进行对比。实验结果发现与对照组相比, 转染ERβ能够促进MDA-MB-231细胞的增长, 且呈非激素依赖。国内候意枫等[13]的研究结果与本组类似, 通过将ERβ转染给ERα阴性的MDA-MB-435细胞, 研究者发现ERβ的表达能促进乳腺癌细胞增殖, 并且呈非激素依赖性, 作者发现ERβ的表达能够提高细胞S期所占比例。也有研究者得出不同的结果, LAZENNEC等[14]应用腺病毒载体将ERβ转染给MDA-MB-231细胞, 结果发现无论有无雌激素存在, 与对照组相比, 细胞的增殖率均下降。国内陈莉等[15]持同样观点, 通过脂质体转染实验, 研究者发现ERβ的表达可以上调MDA-MB-231细胞的p53基因表达从而促进乳腺癌细胞的凋亡。各家研究结果的不同可能与实验所用的转染载体、转染技术以及所用细胞不同有关。
ERβ在ERα阴性的MDA-MB-231细胞中的表达能够促进细胞的生长, 临床中ERα阴性的患者, 现阶段未给予内分泌治疗, 预后较差, 部分患者ERβ阳性, ERβ可能在其中扮演重要的作用, 如果能找到特异性结合ERβ的雌激素受体拮抗剂, ERα阴性ERβ阳性的乳腺癌患将可能从内分泌治疗中获益。
3.3 ERβ的表达与他莫昔芬耐药关系