奶牛血清论文（精选7篇）
奶牛血清论文 篇1
布氏杆菌病 (brucellosis) 又称马尔他热或波状热, 是由布氏杆菌引起的人畜共患的自然疫源性传染病, 是一种全世界广泛分布的人兽共患慢性细菌传染病。本病常常引起动物流产、不孕, 故又称之为传染性流产病[1,2]。本病流行广泛, 几乎遍布世界各地[3], 由于其在不同种之间的流行特点、免疫原性等有较大差异, 且有交叉抗体存在以及人工免疫等原因, 快速、准确地检测该病一直是国内外研究的热点[4,5]。根据GB/T186462—2002规定, 虎红平板凝集试验 (RBPT) 、试管凝集试验 (SAT) 等为我国动物布氏杆菌病的诊断方法。酶联免疫吸附试验 (ELISA) 是世界动物卫生组织 (OIE) 规定的在国际贸易中的检测诊断方法之一[6]。
试验对疑似患布氏杆菌病奶牛作了上述3种方法的血清学诊断, 旨在探讨不同诊断方法对奶牛布氏杆菌病的诊断率, 比较几种方法的优缺点, 以期筛选出较为实用的诊断方法, 为该病的诊断提供科学的理论依据。
1 材料
1.1 试验动物
10头疑似患布氏杆菌病奶牛, 由崂山市北宅镇某养殖场提供。
1.2 主要药品和试剂
虎红平板凝集抗原、布氏杆菌病试管凝集抗原, 农业部动物检疫所提供;布氏杆菌病阴性血清和阳性血清, 中牧实业股份有限公司成都药械厂提供;酶标SPA, 上海复生生物工程研究有限公司生产;0.5%石炭酸生理盐水、含0.05%吐温的PBS、封闭液 (2 mol/L H2SO4溶液) 、碳酸盐缓冲液 (pH值为9.6) 、3% H2O2、柠檬酸盐缓冲液、邻苯二胺 (OPD) 等, 均由青岛农业大学动物科技学院动物疫病研究室提供。
2 方法
2.1 待检血清的制备
奶牛颈静脉无菌采血, 每头10 mL, 制备血清。
血清的制备:将无抗凝剂的血液盛于离心管中, 静置, 待血液凝固、有轻微析出时, 3 000 r/min离心5～10 min;吸出上清液 (即血清, 注意切勿吸出细胞成分) , 分装, 备用。
2.2 虎红平板凝集试验
2.2.1 步骤
将玻璃板清洗干净, 划成50个方格, 横行10个格, 纵行5个格, 每格4 cm×4 cm, 每格中再划1 cm宽的小格, 各格标上被检血清号。每个横行做2份待检血清, 同时做阴性、阳性对照。
在玻璃板上加入相应的被检血清30 μL, 在被检血清旁加30 μL虎红平板凝集抗原, 用牙签搅动被检血清和抗原使之均匀混合, 形成直径约2 cm的液区。轻微摇动, 室温下于4 min内观察结果, 同时作阳性血清和阴性血清对照。
2.2.2 判断标准
++++, 出现大的凝集块, 液体完全清亮、透明 (100%凝集) ;+++, 有明显的凝集片, 液体几乎完全透明 (75%凝集) ;++, 有凝集片, 液体不甚透明 (50%凝集) ;+, 液体浑浊, 有小的颗粒状物 (25%凝集) ;-, 液体均匀, 浑浊。
当阴性血清对照不出现凝集 (-) , 阳性血清对照出现凝集 (+) 时, 试验成立, 可以判定结果。在4 min内出现肉眼可见凝集现象者判为阳性 (+) , 不出现凝集者判为阴性 (-) 。
2.3 试管凝集试验
2.3.1 被检血清的稀释
在一般情况下, 用1∶25、1∶50、1∶100、1∶200 4个稀释度。
每份待检血清准备小试管5支:第1管加入2.3 mL石炭酸生理盐水, 第2管不加, 第3, 4, 5管各加入0.5 mL;用1 mL吸管取受检血清0.2 mL加入第1管中, 混匀;用吸管吸取混合液, 向第2, 3管中各加0.5 mL, 混匀;从第3管中吸取0.5 mL加入第4管, 混匀, 再从第4管吸取0.5 mL加入第5管, 混匀后弃去0.5 mL, 得到血清稀释度分别为1∶12.5, 1∶25, 1∶50, 1∶100。
2.3.2 抗原的添加
先用0.5%石炭酸生理盐水将抗原原液作20倍稀释, 然后从第2管起每管加入抗原稀释液0.5 mL (第1管不加, 作血清蛋白凝集对照) , 振摇均匀。加入抗原后, 第2～5管混合液的体积为1 mL, 血清稀释度依次变为1∶25, 1∶50, 1∶100, 1∶200。
2.3.3 阴性、阳性血清对照
阴性、阳性血清的稀释和加抗原的方法与被检血清相同。
2.3.4 抗原对照
在0.5 mL稀释液中加0.5 mL抗原 (1∶20) 。
2.3.5 孵育
全部试管充分振荡后置于37～38 ℃温箱中孵育22～24 h, 检查并记录结果。
2.3.6 判断标准
根据各管中、上层液体的透明度、抗原被凝集的程度及凝集块的形状来判定凝集反应的强度 (凝集价) :++++, 液体完全透明, 菌体完全凝集呈伞状沉于管底, 振荡时沉淀物呈片、块或颗粒状 (100%菌体被凝集) ;+++, 液体基本透明 (轻微浑浊) , 沉于管底, 振荡时情况如上 (75%菌体被凝集) ;++, 液体不甚透明, 管底有明显的凝集沉淀, 振荡时有块状或小片絮状物 (50%菌体被凝集) ;+, 液体透明度不明显或不透明, 有不显著的沉淀或仅有沉淀的痕迹 (25%菌体被凝集) ;- , 液体不透明, 管底物凝集, 有时管底中央有小圆点状沉淀, 但立即散开呈均匀浑浊。
确定每份血清的效价时, 应以出现++以上凝集现象的最高血清稀释度为血清凝集价。于1∶50血清稀释度出现“++”以上的凝集现象时, 被检血清判定为阳性反应。
2.4 酶联免疫吸附试验
2.4.1 步骤
1) 包被:
用碳酸盐缓冲液稀释布氏杆菌抗原至1 μg/mL, 每孔加样100 μL, 置温箱内37 ℃包被2～3 h。
2) 洗涤:
以含0.05%吐温的PBS冲洗96孔酶标板, 共洗涤5次, 每次3 min。
3) 封闭:
在每孔内加1%PBS封闭液200 μL, 置温箱内37 ℃封闭3 h。
4) 洗涤:
方法同2) 。
5) 加待检血清:
在每孔内加100 μL PBS, 在酶标板的第1孔加100 μL待检血清, 反复吹吸几次混匀后, 吸100 μL加至第2孔, 依次倍比稀释至第12孔, 剩余的100 μL弃去, 同时设立阳性、阴性血清对照, 置温箱内37 ℃作用2 h。
6) 洗涤:
方法同2) 。
7) 加酶标SPA:
以PBS将酶标SPA 按1∶20稀释至工作浓度, 在每孔加100 μL, 置温箱内37 ℃作用2 h。
8) 洗涤:
方法同2) 。
9) 加底物显色:
取10 mL柠檬酸盐缓冲液, 加OPD 4 mg和3% H2O2100 μL, 每孔加50 μL置温箱内37 ℃避光显色10 min。
10) 终止反应:
每孔加2 mol/L H2SO4溶液100 μL终止反应。在ELISA检测仪上, 于波长490 nm处检测各孔OD值。
2.4.2 判断标准
用ELISA测定仪测定样本的光密度 (OD) 值。其波长随底物供氢体不同而异, 如以OPD为供氢体, 测定波长为490 nm。每次试验都需设阳性和阴性对照。 样本的OD值与阴性样本OD值平均值之比, 即为P/N比值。若样本的P/N比值大于2.1, 即判为阳性。
3 结果
3.1 虎红平板凝集试验结果
出现100%凝集的有2例, 出现75%凝集的有3例, 出现50%凝集的有3例, 未出现凝集的有2例。
3.2 试管凝集试验结果
出现100%凝集的有1例, 出现75%凝集的有2例, 出现50%凝集的有5例, 出现25%凝集的有1例, 未出现凝集的有1例。
3.3 酶联免疫吸附试验结果
P/N值为分别为2.2, 2.1, 2.3, 2.2, 2.4, 1.9, 2.4, 2.3, 2.5, 2.2。
3.4 疑似病例的诊断结果
用虎红平板凝集试验、试管凝集试验、酶联免疫吸附试验对布氏杆菌疑似病例进行了诊断, 结果见表1。
由试验结果计算可知:虎红平板凝集试验的检出率为70%, 试管凝集试验的检出率为80%, 而酶联免疫吸附试验的检出率为90%。
4 讨论与分析
凝集试验的原理是细菌或其他凝集原都带有相同的电荷 (负电荷) , 在悬液中相互排斥而呈均匀的分散状态。抗原与抗体相遇后, 由于抗原和抗体分子表面存在着相互对应的化学基团, 因而发生特异性结合, 形成抗原抗体复合物, 降低了抗原分子间静电排斥力, 抗原表面的亲水基团减少, 由亲水状态变为疏水状态, 此时已有凝集的趋向, 在电解质参与下, 由于离子的作用, 中和了抗原抗体复合物外面的大部分电荷, 使之失去了彼此间的静电排斥力, 分子间相互吸引, 凝集成大的絮状或颗粒, 出现肉眼可见的凝集反应。
虎红平板凝集试验要求条件不高, 比较简单, 容易操作, 其反应比较迅速, 但由于特异性不高, 受试验温度和凝集时间相对较短的影响, 不易准确判定结果, 此法检出率为70%, 较试管凝集试验和酶联免疫吸附试验的检出率低;因此, 此试验方法主要用于初筛。故对虎红平板凝集试验阳性者, 还必须经试管凝集试验检测为阳性才能最终判定为阳性[7]。
试管凝集试验的原理是菌体抗原和其相应的抗体在电解质参与下, 抗原颗粒在试管内相互凝集形成肉眼可见的凝集小块, 同时, 根据菌体抗原凝集的数量也可以测定血清中相应的抗体含量。该试验方法判定容易, 具有较高的诊断价值, 但操作比较繁杂、费时, 不适于现场采用。此法的检出率为80%, 比虎红平板凝集试验高, 但比酶联免疫吸附试验检出率低。该方法是我国布氏杆菌病诊断的法定方法, 但由于试验条件要求比较高, 基层兽医站难以采用[8]。
酶联免疫吸附试验的基本原理是将抗原或抗体吸附在固相载体表面, 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体反应形成复合物, 再加入酶标记的抗原或抗体。此时固相载体上的酶量与标本中受检物质的量呈一定比例。加入与酶反应的底物后, 底物被酶催化成为有色产物, 产物的量与标本中受检物质的量直接相关, 根据底物被酶催化产生的颜色及其OD值即可进行定性或定量分析。试验结果表明, 酶联免疫吸附试验比其他血清学反应的敏感性和特异性高, 病例检出率为90%, 较其他两种试验方法都高。因此, 用酶联免疫吸附试验对动物的布氏杆菌抗体进行检测, 具有特异、灵敏、快速的优点。用酶联免疫吸附试验检查各种疾病及传染病已有许多报道, 用于布氏杆菌的诊断也已取得很好的成果。目前, 市场上已有成熟的布氏杆菌酶联免疫吸附试验快速诊断试剂盒出售[9,10]。
5 结论
虎红平板凝集试验的检出率为70%, 试管凝集试验的检出率为80%, 而酶联免疫吸附试验的检出率为90%。酶联免疫吸附试验的检出率最高, 具有特异、灵敏、快速的优点;因此, 用酶联免疫吸附试验对动物的布氏杆菌抗体进行检测是比较理想、实用的诊断方法。
参考文献
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奶牛血清论文 篇2
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 被检血清
遴选宁夏石嘴山-银川-吴忠奶牛核心养殖带具有代表性的奶牛养殖场 (牧场、养殖园区等) , 按照5%的比例随机采血546份, 室温下静置2~3 h, 4℃下3 000 r/min离心5 min, 析出血清-20℃保存备用。所选牛群均未免疫接种各种类型的BVDV疫苗。
1.1.2 检测试剂
牛病毒性腹泻病毒 (BVDV) 抗体检测试剂盒:美国RD公司生产, 批号:DZE50017。
1.1.3 主要检测仪器设备
H-1850R台式高速冷冻离心机 (长沙湘仪离心机有限公司) , i Mark酶标仪 (美国BIO-RAD公司) , RT-3000全自动洗板机 (深圳雷杜生命科学股份有限公司) , 微量移液器 (德国Eppendorf公司) 。
1.2 方法
1.2.1 编号
将样品对应微孔按序编号, 每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔 (空白对照孔不加样品及酶标试剂, 其余各步操作相同)
1.2.2 加样
分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μL。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μL, 然后再加待测样品10μL。加样时将样品加于酶标板孔底部, 尽量不触及孔壁, 轻轻晃动混匀。
1.2.3 温育
用封板膜封板后置37℃温育30 min。
1.2.4 配液
将30倍浓缩洗涤液加纯化水至600 m L备用。
1.2.5 洗涤
小心揭掉封板膜, 弃去液体, 甩干, 每孔加满洗涤液, 静置30 s后弃去, 如此重复5次, 拍干。
1.2.6 加酶
每孔加入酶标试剂50μL, 空白对照孔除外。
1.2.7 温育
操作同1.2.3。
1.2.8 洗涤
操作同1.2.5。
1.2.9 显色
每孔先加入显色剂A 50μL, 再加入显色剂B 50μL, 轻轻震荡混匀, 37℃避光显色15 min。
1.2.10 终止
每孔加终止液50μL, 终止反应。
1.2.11 测定
以空白孔调零, 450 nm波长依序测量各孔的吸光度 (OD值) 。测定在加终止液后15 min以内进行。
1.2.12 结果判定
试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00, 阴性对照平均值≤0.10;临界值 (CUTOFF) 计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15;阴性判定:样品OD值<临界值 (CUT OFF) 者为牛病毒性腹泻病毒 (BVDV) 抗体阴性;阳性判定:样品OD值≥临界值 (CUT OFF) 者为牛病毒性腹泻病毒 (BVDV) 抗体阳性。
2 结果与分析
不同地区奶牛BVDV血清抗体测结果见表1, 不同奶牛场 (园区) BVDV血清抗体检测结果见表2。
13个奶牛小区的546份血清中共检出BVDV抗体阳性血样14份, 平均血清阳性率为2.56%, 在3个被检牛场中有4个奶牛场有BVDV血清阳性牛存在, 场感染阳性率为30.77%, 其中最高血清阳性率为10.00%, 最低为3.57%。
3 小结与讨论
3.1 检测方法
双抗夹心ELISA法与过去常用的病毒分离和直接免疫荧光抗体检测方法相比较, 具有检测快速、简便易行、灵敏度高、人为主观因素影响小的特点, 既可行又可靠, 是目前BVD检测最常用的方法之一, 可用于大批量样本的检测。
3.2 宁夏奶牛BVDV血清学检验结果
通过对宁夏奶牛进行的BVDV血清学调查结果显示, 被检牛场血清阳性率为30.77%, 被检奶牛血清阳性率平均为2.56%, 表明该病在宁夏奶牛群中的感染处于一个比较低的水平。但因其对奶产业健康发展的巨大危害, 还是应引起主管部门及广大奶农的高度重视, 并要制定一系列防控措施, 控制BVDV在宁夏的传播。
3.3 奶牛BVD预防
3.3.1 加强饲养管理
规范奶牛场 (牧场、园区等) 奶牛饲养管理, 科学调配饲料, 增强奶牛体质, 提高奶牛抗病性, 减少该病的感染。
3.3.2 加强检疫
引进牛只一定要进行检疫, 避免将BDV病牛引入牛场。
3.3.3 定期监测, 强制淘汰阳性牛只
奶牛血清论文 篇3
布鲁杆菌病(Bruccellosis)简称布病，是由布鲁杆菌引起的人畜共患慢性传染病。健畜通过消化道、呼吸道或皮肤感染，还可经吸血昆虫叮咬而传播。主要表现为流产、不育等症状，经一定潜伏期后急性发生，在妊娠牛群中常常暴发流行。被世界动物卫生组织(OIE)规定为强制性报道的疫病。
近年来，宁夏地区的牛场有不同程度的母牛流产现象，为了查清原因，笔者对银川地区的4个奶牛场进行了随机采血，并进行了衣原体和布鲁杆菌病的血清学检测，以期为这两种病的防控提供依据，现将调查结果报道如下。
1 材料及方法
1.1 试剂
(1)衣原体IHA稀释液，批号为070302;衣原体IHA标准阳性血清，批号为070302;衣原体IHA标准阴性血清，批号为070302。以上试剂均由中国农科院兰州兽医研究所提供。
(2)布鲁杆菌平板凝集试验抗原由农业部动物检疫所提供，批号为090204。
1.2 血清来源
试验分别从宁夏地区4个奶牛场采集牛血清样本共63份，于-15℃保存备用。
1.3 试验器械及设备
(1) 96孔V型板、可调式移液器、滴头、滴管、玻璃板、微量振荡器。
(2)高压锅。立式自动电热压力蒸气灭菌锅，由上海申安医疗器械厂提供;型号：LD2X-40SⅡ型;编号：03-94-12;出厂日期：03.11。
(3)冰箱。新飞牌转换型冷藏冷冻箱，由河南新飞电器有限公司提供;型号：BC/BD-625型;编号：809199;出厂日期：04.11。
(4)烤箱。电热恒温鼓风干燥箱，由上海精宏实验设备有限公司提供;型号：DHG9-123A型;编号：L-404 (3);出厂日期：04.04。
1.4 调查方法
1.4.1 衣原体间接血凝试验（IHA)
(1) 铺板，每孔加稀释液75μL。 (2) 稀释血清，用移液器吸取被检测血清25μL加入第1孔，然后呈4倍递增分别稀释3孔(即1∶4～1∶64)，第三孔弃去25μL，孔内液体量仍为75μL。在板子上同时设阴性对照和空白对照各2组。 (3) 加抗原，每孔加稀释好的抗原25μL，置于微型振荡器上振荡2 min，盖上玻璃板，在37℃温箱内作用2 h。 (4) 结果判定，对照各孔均成立，则被检测血清1∶16孔出现“++”以上者为阳性;1∶4孔出现“+”以下者为阴性;1∶4孔“++”至1∶16孔“+”以下者为可疑。
1.4.2 布鲁杆菌虎红平板凝集试验
(1) 铺板，每块平板上滴加布鲁氏抗原25μL，待用。 (2) 加血清，向抗原中央加25μL血清，涂匀，置室温2～3 min，观察结果。 (3) 结果观察，将布鲁氏平板在阳光下旋转，用肉眼观察，发现其中有明显细小颗粒物为阳性，细小颗粒物不明显为可疑，无颗粒物为阴性。
2 调查结果
2.1 衣原体间接血凝试验（IHA）检测结果
对宁夏地区4个牛场63份血清样本进行检测，结果见表1。
由表1看出，63份血清中总阳性率为12.7%，最高阳性率为40.0%(8/20)，最低为0。
2.2 布鲁杆菌病检测结果
对宁夏地区4个牛场63份血清进行检测，结果见表2。
由表2看出，63份血清中总阳性率为11.1%，最高阳性率为35.0%(7/20)，最低为0。
3 讨论
(1)试验在衣原体检测中共采集血清样本63份，总阳性数为8份，总阳性率为12.7%。最高阳性率为40.0%，为3号牛场。近年来宁夏地区牛场的繁殖障碍现象较多，有些牛场怀孕母牛流产和死胎率达40%以上，且不同程度地存在犊牛肺炎、肠炎、关节炎等，但确切病因不明。这次血清学调查说明，宁夏地区牛群中存在牛衣原体的感染，衣原体的感染很可能是导致牛繁殖障碍的主要原因之一。所以需要对病原体进行分离鉴定，作进一步确定。
(2)试验在布鲁杆菌病检测中共采集血清样本63份，总阳性数为7份，总阳性率为11.1%，最高阳性率为35.0%，为4号牛场，说明此牛场布鲁杆菌病发病率较高。可能原因是由于从外地购回牛，未经检疫混群饲养而感染。
奶牛血清论文 篇4
1 材料
甜菜碱,山东某药业有限公司生产;50%氯化胆碱、50%维生素E粉,宜兴某饲料添加剂有限公司生产。
2 方法
2.1 试验设计
选择体重、产奶日龄和产奶量相近、健康的娟姗奶牛32头(广西壮族自治区畜牧研究所实验牛场提供),采用单因子随机分组试验设计,随机分成4组,每组8头。试验1组、试验2组、试验3组分别在基础日粮中添加50%氯化胆碱20 g/d、甜菜碱20 g/d、50%维生素E 2 g/d,对照组饲喂基础日粮作空白对照。牛群在相同条件下进行饲养,预试期7 d,正试期30 d,共计37 d。试验牛基础日粮组成及营养水平见表1。
注:每千克预混料中含维生素A 50万IU,维生素D 15万IU,维生素E 3 000 IU,铁4.0 g,铜1.3 g,锰3.0 g,锌6.0 g,碘80 mg,硒50 mg,钴80 mg。
2.2 饲养管理
试验牛群根据产奶量定量投喂精料,每天08:00、16:00、22:00分3次定点投喂。自由采食粗料,自由饮水。牛群每天早、晚各挤奶1次,其他按正常生产管理进行。
2.3 测定项目及方法
试验期间测定牛舍内温度、产奶量、乳成分、血清热休克蛋白70(HSP70)等指标。
2.4 数据的统计与分析
采用SPSS 19.0软件及Excel对试验数据进行统计与分析,结果以“平均值±标准差”表示,P<0.01表示差异极显著,P<0.05表示差异显著,P>0.05表示差异不显著。
3 结果与分析
3.1 牛舍温度的测定
见292页彩图1。
由292页彩图1可知,试验期间牛舍平均最高温度为(32.58±2.41)℃,平均最低温度为(24.55±1.08)℃。经计算最高温湿度指数(THI)为94.32,最低THI为63.36,说明试验期间试验牛均处于热应激状态。
3.2 不同添加剂对热应激娟姗奶牛产奶量的影响
见表2。
kg
注:经统计学分析,组间差异不显著(P>0.05)。
由表2可知,在热应激状态下,日粮中添加氯化胆碱、甜菜碱、维生素E均有提高产奶量的作用,各组奶牛产奶量均高于对照组,但组间差异不显著(P>0.05)。
3.3 不同添加剂对热应激娟姗奶牛乳成分的影响
见表3。
%
注:同行数据肩标字母不同表示差异显著(P<0.05),字母相同或无肩标表示差异不显著(P>0.05)。
由表3可知:在热应激状态下奶牛乳成分中乳脂率和非脂固形物试验1组、试验2组和试验3组均略高于对照组,但组间差异不显著(P>0.05);乳蛋白率、乳糖含量试验2组显著高于对照组(P<0.05),其他各组之间均差异不显著(P>0.05)。
3.4 不同添加剂对热应激娟姗奶牛血清HSP70含量的影响
见表4。
ng·m L-1
注:同行数据肩标字母不同表示差异显著(P<0.05),字母相同表示差异不显著(P>0.05)。
由表4可知,在热应激状态下试验2组奶牛血清HSP70含量显著高于对照组(P<0.05),试验1组和试验3组均高于对照组,但差异不显著(P>0.05),各试验组之间差异不显著(P>0.05)。
综合以上试验结果可知,氯化胆碱、甜菜碱、维生素E均有提高娟姗奶牛产奶量及牛奶品质的作用,其中甜菜碱能显著提高牛奶中的乳蛋白和乳糖的含量P<0.05)。在热应激环境下,3种添加剂均有提高血清HSP70含量的功能,从而达到提高机体抗热应激能力,保护自身免受有害应激的损害,提高奶牛热应激环境下产奶性能等作用。
4 讨论与结论
4.1 不同添加剂对娟姗奶牛产奶性能的影响
张继慧[1]研究表明,在荷斯坦奶牛日粮中添加20 g/d瘤胃保护氯化胆碱能明显提高牛奶中乳蛋白及总乳蛋白含量。韩永利[2]研究表明,在奶牛日粮中添加全血保护氯化胆碱可使奶牛产奶量、4%标准乳含量明显增加;添加氯化胆碱120 g/d可使乳脂率提高5.67%。本试验结果表明,在娟姗奶牛日粮中添加氯化胆碱能够提高产奶量和牛奶品质,但与对照组之间差异不显著(P>0.05)。
连红[3]研究发现,随着包膜甜菜碱添加量的增加,奶牛产奶量逐渐提高,其中20 g/d组较10 g/d组提高了0.58 kg/d,30 g/d组较10 g/d组提高了1.17 kg/d,但差异均不显著。张丽等[4]研究发现,在奶牛日粮中添加15 g/d和20 g/d的甜菜碱,试验组奶牛产奶量较对照组分别提高了5.27%和4.22%,且乳糖、乳蛋白含量等指标较对照组均有所提高。
维生素E能够保护细胞膜和抵抗自由基引起的脂质过氧化反应,在热应激时具有维持细胞正常功能的作用。本试验在日粮中添加维生素E,结果表明,产奶量和乳成分各项指标较对照组均有所提高,但差异不显著(P>0.05),与陈雯雯[5]的研究结果一致。
4.2 热应激对娟姗奶牛血清HSP70含量的影响
热休克蛋白也称热应激蛋白,其中HSP70是最保守、最重要的一种,在热应激状态下HSP表达明显增加,对机体发挥主要的保护作用。细胞的耐热能力与HSP70的浓度呈正相关,其耐热能力随着HSP70表达水平的升高而增强,当细胞内HSP70浓度达到最高时,耐热能力最强;另一方面,已经获得耐热能力的细胞重新回到正常温度下培养,耐热能力逐渐消失,其减弱速度与HSP70的降解速度一致[6]。研究指出,荷斯坦成乳牛在热应激和非热应激条件下均可表达HSP70,HSP70表达量与THI呈强度正相关(R=0.91)(P<0.01),奶牛血液淋巴细胞HSP70的表达量可作为评估其耐热性能的血液生化指标之一[7]。
本试验中,热应激情况下在娟姗奶牛日粮中添加氯化胆碱、甜菜碱及维生素E,奶牛血清HSP70含量均较对照组升高,其中添加甜菜碱的试验2组奶牛血清HSP70含量显著高于对照组(P<0.05)。说明在保护期限范围内以及相同的热应激环境下,添加氯化胆碱、甜菜碱及维生素E均能诱导HSP70的表达,使试验牛群血液HSP70浓度升高,从而提高牛群的耐热性,使其在热应激环境下能自我抵抗应激损伤,保证了热应激条件下的生产水平不会发生大幅度的降低。
摘要：为研究在高温环境下不同添加剂对娟姗奶牛产奶性能的影响,筛选出能更好缓解奶牛热应激的添加剂,试验采用单因子随机分组设计,选择体重、产奶日龄和产奶量相近、健康的娟姗奶牛32头,随机分成4组,每组8头。试验1组、试验2组、试验3组分别在基础日粮中添加50%氯化胆碱、甜菜碱和50%维生素E,对照组饲喂基础日粮作空白对照。对试验牛群产奶量、乳成分等产奶性能指标和血清热休克蛋白70(HSP70)含量进行测定。结果表明:氯化胆碱、甜菜碱、维生素E均有提高奶牛产奶量的作用,但各组间差异均不显著(P>0.05);试验2组乳蛋白和乳糖含量显著高于对照组(P<0.05),氯化胆碱、甜菜碱和维生素E均有提高乳脂率和非脂固形物的作用,但组间差异均不显著(P>0.05);试验2组奶牛血清HSP70含量显著高于对照组(P<0.05),试验1组和试验3组血清HSP70含量均高于对照组,但差异不显著(P>0.05)。说明在热应激状态下,日粮中添加甜菜碱可明显提高娟姗奶牛牛奶中的乳蛋白和乳糖的含量,同时能提高血清HSP70含量,从而提高娟姗奶牛的抗热应激能力。
关键词：氯化胆碱,维生素E,甜菜碱,娟姗奶牛,产奶性能,热休克蛋白70(HSP70)
参考文献
[1]张继慧.瘤胃保护氯化胆碱对荷斯坦奶牛产奶性能和血清生化指标的影响[D].乌鲁木齐:新疆农业大学,2008.
[2]韩永利.日粮中添加胆碱、烟酸和维生素C对奶牛生产性能和部分血液理化指标的影响[D].保定:河北农业大学,2002.
[3]连红.不同剂量包膜甜菜碱对热应激奶牛产奶性能、血液指标及Hsp70mRNA含量的影响[D].南京:南京农业大学,2011.
[4]张丽,韩兆玉.甜菜碱对夏季热应激奶牛产奶性能和HSP70及其mRNA表达的影响[J].南京农业大学学报,2013,36(6):89-94.
[5]陈雯雯.维生素E对夏季泌乳水牛抗氧化性能、生产性能的影响[D].南宁:广西大学,2012.
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奶牛血清论文 篇5
牛传染性鼻气管炎(Infectious bovine rhinotracheitis,IBR)是以高热、上呼吸道感染、有时引起脑膜脑炎及生殖道感染等多种症状为特征的传染病。目前几乎世界上所有国家都有血清抗体阳性牛检出,给养牛业造成了巨大的经济损失。我国大部分地区的各种牛群均存在IBR感染,且有逐年上升的趋势。
结核病(Tuberculosis,TB)是以贫血、渐进性消瘦、体虚乏力、精神萎靡不振和生产力下降为特征的慢性人畜共患病。在全球22个结核病高负担国家中,我国位居第2名,每年新发病例达130万人,每年因结核病死亡人数达15万。我国人的结核病病原有10%来源于牛,因此做好牛结核的检疫防控工作意义重大。
为了解目前山东省潍坊市及周边地区奶牛BVD-MD、IBR、TB的流行情况,从而为牧场的疫病防控提供依据,笔者于2014年8月份—2015年2月份,随机选取了潍坊市及周边地区的9个规模化奶牛场及养殖小区进行了血清学调查,现报道如下。
1 材料
1.1 试验动物
随机选取山东省潍坊市及周边地区9个规模化奶牛场,从中随机选择荷斯坦奶牛进行血样的采集。奶牛均饲喂TMR饲料,每天挤奶2次。
1.2 试剂
牛病毒性腹泻-黏膜病抗体检测试剂盒、传染性鼻气管炎病毒g B抗体检测试剂盒,美国IDEXX公司产品;奶牛结核病诊断试纸条,韩国安捷动物诊断试剂生物公司产品。
2 方法
2.1 血样的采集
用10 m L注射器随机采取奶牛尾静脉血约5 m L,采后立即注入真空采血管中,静置,冷藏,尽快以3 000 r/min离心10 min,分离血清以备检测。
2.2 检测
牛病毒性腹泻-黏膜病抗体的检测、传染性鼻气管炎病毒g B抗体的检测、结核病的检测均按试剂盒使用说明书进行。
2.3 统计分析
检测结果按照阳性、阴性进行判定,统计每个奶牛场BVD-MD、IBR和TB的血清抗体阳性率。BVD-MD血清抗体阳性率超过80%的牛场判定为牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(BVDV)高风险牛场(至少有1头BVDV持续感染牛的存在)[2]。牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)血清抗体阳性率超过40%的小区和牛场判定为IBR高风险牛场(可能出现明显的临床表现)[3]。TB血清抗体按照阳性、阴性计数,计算阳性率。
3 结果与分析
3.1 样品检测结果
对潍坊市及周边地区9个规模奶牛场奶牛进行了检测,结果见表1。
3.2 结果分析
3.2.1 BVD-MD血清学调查结果
依据BVD-MD血清抗体阳性率超过80%的牛场判定为BVDV高风险牛场(至少有1头BVDV持续感染牛的存在),在被调查的9个牛场与养殖小区中,有5个被判定为高风险牛场,其中牛场2阳性率达100%,牛场1,4阳性率在90%以上,说明被调查的牛场中有55.6%的牛场存在BVDV的持续感染;山东潍坊地区BVD-MD血清平均抗体阳性率为68.49%(163/238)。
3.2.2 IBR血清学调查结果
依据曹杰等[3]提出的IBR血清抗体阳性率超过40%的小区和牛场判定为IBRV高风险牛场(可能出现明显的临床表现),在被调查的9个牛场与养殖小区中,有3个被判定为高风险牛场,其中牛场2阳性率达100%,牛场1,6阳性率在80%以上;山东潍坊地区IBR血清平均抗体阳性率为45.93%(96/209)。
3.2.3 TB血清学调查结果
在被调查的9个牛场与养殖小区中,牛场1,3阳性率0,牛场6,8阳性率在40%以上;山东潍坊地区TB血清平均抗体阳性率为24.60%(46/187)。
4 讨论
4.1 BVD-MD的血清学调查
2006—2013年间,很多专家调查了BVD-MD的流行情况,奶牛血清阳性率为22.5%~94.1%[4]。本次被调查的9个牛场与养殖小区中,BVD-MD血清抗体阳性率为68.49%,55.6%的牛场有BVDV持续感染牛(PI牛)存在,说明山东潍坊地区牛场BVDV感染严重,应进行BVDV-MD清除和控制。
由于BVDV普遍存在,而且致病机理复杂,给该病的防控带来了很大困难,到目前为止尚无有效的控制方法。BVD-MD感染给奶牛养殖带来的损失巨大,应引起从业者的重视。目前德国、瑞士、挪威、苏格兰等国家已实现BVD-MD的净化[5]。国外控制该病的最有效办法是对经鉴定为持续感染的动物立即屠杀及疫苗接种。但实际应用中活苗效果不稳定,而且会引起胎儿感染,所以国外大多数学者主张采用灭活苗免疫。
BVD-MD持续性感染牛是重要的传染源,其检疫、淘汰、监控是清除BVD-MD的重要战略。防治BVD-MD应加强检疫,防止引入带毒牛、羊或造成本病的扩散。检疫是指全群抗原筛查,通过RT-PCR检测大缸奶样和混合血液样本,对阳性混合样本中的单个样本再利用抗原ELISA法逐一检测[6]。
目前,耳组织检测已应用于BVD-MD持续性感染牛的鉴定[7],连续1年无新生BVD-MD持续性感染牛即表明牛群已经净化。在BVD-MD净化策略中,BVD-MD疫苗发挥了积极的作用,通过联合应用灭活疫苗和弱毒疫苗,能有效防止胎儿的持续性感染和临床感染。牛群长久保持净化状态,仍需加强防疫检疫措施,严格执行新进牲畜的隔离检疫、消毒措施,严格产地、运输和交易市场及其进出口检疫,及时掌握牛场中BVDV的流行动态[1]。各大牛场必须制订BVD-MD的清除计划,加强持续性感染牛的检测,全群筛查并淘汰PI牛,逐步达到净化的目的。我国BVDV疫苗的研制尚处于起步阶段,对BVDV的认识和其危害的重视程度不足,尚未有上市的商品化疫苗。因此,及早研制和生产BVD-MD疫苗是防治本病的关键。
4.2 IBR的血清学调查
IBR是由IBRV引起的一种高度接触性传染病。IBRV被世界动物卫生组织(OIE)列为法定报告性动物疫病,我国也将其列为进出口牛的必检疫病。IBRV是牛呼吸系统疾病的重要病原之一,除直接致病外,还可引起机体的免疫抑制,进而继发细菌感染,降低牛群生产性能,严重时引起死亡。牛感染IBRV后以潜伏感染和持续性感染为特征,长期甚至终生带毒,排毒期最长可达1年半,在高养殖密度下迅速传播,造成牛群的大范围感染[8]。该病对养牛业危害极大,在美国每年至少造成5亿美元的损失,我国IBR造成的损失尚未见官方统计数据。据李栋梁等[2]调查,北京地区IBR阳性率为50.52%。在本次被调查的9个牛场及养殖小区中,总体IBR血清抗体阳性率为45.93%。IBR造成的犊牛肺炎在冬季多发,并经常继发支原体、肺炎球菌、巴氏杆菌,导致牛只的死亡。IBR引起的流产可常年发生,一般成母牛年流产率高于10%的牛场,除监测布鲁氏菌病以外,应加强对IBR的检测。结合本次调查情况,下一步应密切监测阳性牛场特别是高风险牛场的成母牛流产及犊牛肺炎情况,并制订相应的防控策略。
目前,许多发达国家推行IBR控制和净化计划,使用基因缺失疫苗降低发病率和感染率,同时利用鉴别诊断试剂盒检测、筛选出野毒感染牛,进行隔离饲养或直接淘汰,逐步使牛群得到净化。
我国IBR感染形势严峻,应加大力度研发疫苗和检测方法,借鉴发达国家的做法和经验,结合我国的实际情况,逐步实施IBR的控制和净化。
4.3 TB的血清学调查
在被调查的9个牛场及养殖小区中,牛场1,3阳性率为0,牛场6,8阳性率在40%以上,平均阳性率为24.60%。
目前奶牛场对结核病的防控工作重视不够。大部分奶牛场放松了对结核病的防控工作,一些养殖场只注重经济效益,极少主动开展结核病检测,难以做到早发现、早处置。本次检疫的牛场1和牛场3感染率为0,这两个牛场为新建牛场。奶牛养殖小区管理混乱,结核病感染率较高。此外,疫病综合防控能力不强,饲养管理不到位,使得一些饲养管理条件较差的牛场结核病检出率较高。结核病是牛场两病之一,也是人畜共患病,要想控制人的结核病,必须要先控制牛的结核病。为降低感染率,应该定期组织所有参与检测的人员集中学习相关技术规程,同时要加大防控结核病的宣传力度,让人们了解牛结核病的流行病学、人畜感染症状、净化历程、防控关键措施。政府也要做好配合,为奶牛养殖户提供扑杀补贴经费,为奶牛健康养殖保驾护航。
目前我国奶业在高速发展,但疫病频发,缺乏相应的管控手段,防疫管理制度、措施落实不到位等问题严重威胁着奶牛养殖业的健康发展。最近几年来,奶牛病毒性腹泻—黏膜病、传染性鼻气管炎、结核病发病率与日俱增,而我国奶牛疾病的诊断防控尚未形成成熟的技术平台,奶牛疾病防控专业队伍亟待建立培养,疫苗和诊断试剂盒急需研发,相关部门应抓紧时间建立起奶牛疾病的防控体系,从而促进我国奶业少走弯路、健康可持续地发展。
摘要：为了解目前山东省潍坊市周边地区奶牛病毒性腹泻-黏膜病(BVD-MD)、传染性鼻气管炎(IBR)、结核病(TB)的流行情况,于2014年8月份—2015年2月份,随机选取潍坊市及周边地区9个奶牛场奶牛进行BVD-MD、IBR、TB的血清学调查。结果表明:BVD-MD的平均阳性率为68.5%,IBR的平均阳性率为42.6%,TB的平均阳性率为24.6%。
关键词：潍坊市,牛病毒性腹泻-黏膜病(BVD-MD),传染性鼻气管炎(IBR),结核病(TB),血清学调查
参考文献
[1]王洪梅,侯佩莉,宋玲玲,等.国内外奶牛主要病毒病的流行现状及防控技术研究进展[J].中国畜牧杂志,2014,50(10):42-49.
[2]李栋梁,赵景义,沈俊乐,等.北京地区奶牛场牛传染性鼻气管炎、牛病毒性腹泻病风险评估及流行情况分析[J].中国奶牛,2013(11):31-33.
[3]曹杰,刘英霞,齐长明.当前奶牛重大传染病的现状及思考[J].中国奶牛,2011(6):47-49.
[4]朱礼倩,周艳君,于海,等.牛病毒性腹泻在中国的流行现状分析[J].中国动物传染病学报,2011,19(5):83-86.
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[6]BRODERSEN B W.Bovine viral diarrhea virus infections:manifestations of infection and recent advances in understanding pathogenesis and control[J].Vet Pathol,2014,51(2):453-464.
[7]BEDEKOVI T,LEMO N,LOJKI I,et al.Development of an indirect immunofluorescence assay for diagnosis of bovine viral diarrhea virus on ear notch tissue samples in cattle infected persistently[J].J Virol Methods,2011,178(1/2):59-62.
奶牛血清论文 篇6
1 材料与方法
1.1 试验日粮
试验在新疆克拉玛依市绿成农业开发有限责任公司奶牛场进行。试验日粮由玉米青贮、芦苇干草、精料补充料 (阴离子盐添加剂自行研制生产) 组成, 在前期试验的基础上拟定4种不同阴离子盐添加剂日粮, 用直接混合处理的加工方式配制4种日粮。精料组成见表1, 日粮组成及营养成分见表2。
1.2 试验设计与饲养管理
试验采用两因素完全随机试验设计。选择二胎以上的荷斯坦奶牛12头分成4组, 每组3头奶牛, 配对奶牛的年龄、体重、上一胎平均产奶量等基本一致。4组分别饲喂4种阴离子盐添加剂日粮。日粮根据NRC (2001年) 奶牛营养需要[1]配制。日粮的饲喂方式参考试验牛场的饲喂制度, 每天饲喂2次 (8:00和20:00) , 每次约2 h, 饲喂结束后赶入运动场自由活动, 同时保证充足的饮水。每头牛每天饲喂精料4.5 kg、玉米青贮10 kg, 自由采食粉碎芦苇干草。试验牛在预产期前30天进入产房, 预产期的前3周开始饲喂阴离子盐添加剂日粮。产后饲喂奶牛场自行配制的产奶高峰料。根据恢复情况, 通常产后7天左右离开产房, 到产奶舍饲喂。
1.3 测定指标
测定奶牛采食量、日粮中的干物质含量, 计算每头牛每天的实际干物质采食量;测定尿液pH值;测定奶牛泌乳量;测定血清离子指标:采用722型分光光度计测定血清Ca2+ (采用核固红染色法) 、P5+ (采用钼酸铵比色法) 、Mg2+ (采用汰黄比色法) 。
1.4 统计分析
采用SPSS17.0软件进行统计学分析, 用邓肯氏法进行多重比较。
2 结果与讨论
2.1 对奶牛干物质采食量的影响 (见图1)
在正常情况下, 随着分娩的临近, 奶牛的食欲会出现一个减退的过程。开始饲喂阴离子盐时, 加剧了个别奶牛食欲减退, 影响了其干物质采食量, 但经过2～3 d的适应都能够恢复正常采食。图1反映了饲喂阴离子盐后奶牛干物质采食量的变化。饲喂阴离子盐的最初几天内, 产前奶牛的干物质采食量降低, 随后干物质采食量恢复至稳定水平。饲喂4种阴离子盐日粮的奶牛干物质采食量从产前1周开始不同程度下降。有研究表明, 日粮中钙水平会影响动物的采食量。但在本试验中除了产前1天低钙低镁组奶牛干物质采食量显著高于高钙高镁组外, 其他时间点4组差异均不显著。结果表明, 1.50%钙水平的阴离子盐日粮对干物质采食量影响不大。
2.2 对奶牛尿液pH值的影响 (见图2)
很多研究者认为, 饲喂添加阴离子盐的日粮后能够在奶牛体内产生一种亚急性代谢酸中毒状态, 在这种应激状态下动物能够动员体内的各种调节机制, 维持体内Ca2+的平衡。尿液pH值在5.5～6.5之间时, 表明阴离子盐的饲喂量比较理想, 能够防止产后血钙的降低;如果尿液pH值大于6.5, 表明该日粮对动物体酸碱平衡的影响可能还不足以维持血钙的浓度[1]。以羊草作为粗饲料的试验结果表明, 饲粮中添加阴离子盐5 d后可将pH值降至6.0, 显著低于对照组[2]。通过监控尿液的pH值能够较好地调节阴离子盐在实际生产中的添加量, 避免由于过量添加而对奶牛健康造成的损害。但在实际生产中, 定时、有规律地收集尿样是一个比较困难的工作。
图2显示:饲喂阴离子盐日粮3 d后, 各组尿液pH值在5.5～6.5之间变化, 各组之间差异不显著, 其原因可能是由于各组饲粮的DCAD值相同造成的, 同时也表明阴离子盐酸化日粮不同钙、镁水平对围产期奶牛尿液pH值没有影响。
2.3 对奶牛血清钙、磷、镁浓度的影响 (见图3、表3、表4)
从图3可以看出产前21天至产后7天奶牛血清Ca2+浓度的变化趋势。4组奶牛在试验期间血清Ca2+浓度均高于8 mg/dL, 没有低血钙情况的发生。也可以看出, 除个别时间点外, 饲喂不同阴离子盐日粮后奶牛产犊当天 (产后10小时左右采血) 的血清Ca2+浓度均较低, 这与Romo G A等[3]与Abu D H等[4]的试验结果相近。他们的试验结果表明, 在饲喂阴离子盐日粮的前提下, 产犊当天或产后1小时奶牛血清Ca2+浓度可达最低点。
注:同行数据肩标小写字母相同或未标注字母表示差异不显著 (P>0.05) , 字母完全不同表示差异显著 (P<0.05) 。
从表3可以看出:产前4组之间血清Ca2+浓度差异不显著 (P>0.05) ;产犊当天, 高钙高镁组血清Ca2+浓度高于其他3个组, 并显著高于低钙低镁组 (P<0.05) ;产后1天和产后3天, 低钙低镁组血清Ca2+浓度显著低于其他3组 (P<0.05) , 其他3组之间差异不显著 (P>0.05) ;产后7天, 各组之间血清Ca2+浓度显著不差异 (P>0.05) 。
各时间点各组间血清P5+的浓度没有显著性差异 (P>0.05) 。在产犊当天高钙高镁组血清Mg2+浓度高于其他3组, 并显著高于低钙低镁组 (P<0.05) ;在产前和产后4组间血清Mg2+浓度差异不显著 (P>0.05) 。
从表4可以看出:产犊当天、产后1天和产后3天, 阴离子盐酸化日粮中钙水平对围产期奶牛血清Ca2+浓度有显著影响 (P<0.05) , 对其他时间的影响均不显著 (P>0.05) ;产犊当天, 阴离子盐酸化日粮中镁水平对血清Ca2+浓度有显著影响 (P<0.05) , 对其他时间的影响均不显著 (P>0.05) ;在产后1天, 阴离子盐日粮钙、镁互作对奶牛血清Ca2+浓度有显著影响 (P<0.05) , 对其他时间的影响均不显著 (P>0.05) 。关于阴离子盐日粮钙、镁水平及钙、镁互作对围产期奶牛血清Ca2+浓度影响的研究国内外均无报道。
注:同列数据肩标*表示差异显著 (P<0.05) , **表示差异极显著 (P<0.01) , 无肩标表示差异不显著 (P>0.05) 。
2.4 对奶牛产后健康状况的影响 (见表5)
由表5可以看出, 低钙低镁组有胎衣不下的情况发生, 而其他3组则没有。乳房水肿是奶牛产后常见的症状, 在试验中, 低钙高镁组、低钙低镁组各有1例发生乳房水肿, 而其他2组则没有。4组均没有发生产乳热。 尽管在试验中每种日粮的样本数量有限, 以上数据缺乏一定的可靠性, 但可以看出阴离子盐酸化日粮对产后疾病有一定的缓解作用, 也可以看出高钙高镁组和高钙低镁组的效果更好一些, 有待增加试验牛数加以验证。
2.5 对奶牛泌乳量的影响 (见图4)
注:*表示在此月份该组显著高于其他组 (P<0.05) 。
在产后的3个月内, 各组间奶牛泌乳量差异不显著 (P>0.05) 。高钙高镁组在第1, 2个泌乳月份的泌乳量稍高于其他3组 (P<0.05) , 此结果与国外的一些报道一致。可以看出阴离子盐酸化日粮钙、镁水平对奶牛泌乳性能的影响不大。
3小结
试验结果显示, 从提高血清Ca2+、Mg2+浓度来看, 高钙高镁组的效果好于其他3组, 显著高于低钙低镁组, 最优组合为高钙高镁组。不同钙、镁水平阴离子盐酸化日粮对奶牛干物质采食量和奶牛泌乳量的影响不显著;对产后疾病均有一定的缓解作用。
摘要：为了研究阴离子盐酸化日粮钙、镁水平对奶牛血清离子平衡及生产性能的影响, 选择12头二胎以上围产期奶牛, 采用配对试验设计分成4组 (高钙高镁组、高钙低镁组、低钙高镁组、低钙低镁组) , 从产前3周开始饲喂4种阴离子盐添加剂日粮, 日粮阴阳离子差 (DCAD) 值均为-65mEq/kg。结果表明:各试验组奶牛的干物质采食量不同程度下降 (P>0.05) ;尿液pH值在5.5～6.5之间变化 (P>0.05) 。产犊当天、产后1天和产后3天, 阴离子盐酸化日粮中钙水平对围产期奶牛血清Ca2+浓度有显著影响 (P<0.05) ;产犊当天, 阴离子盐酸化日粮中镁水平对奶牛血清Ca2+浓度有显著影响 (P<0.05) ;在产后3天, 阴离子盐日粮钙、镁互作对奶牛血清Ca2+浓度有显著影响 (P<0.05) 。各试验组奶牛产奶量差异不显著 (P>0.05) 。
关键词：阴离子盐,钙,镁,血钙,奶牛
参考文献
[1]HORST R L, GAFF J P, REINHARD T A, et al.Strategies for preventing milk fever in dairy cattle[J].J Dairy Sic, 1997, 80:1269-1280.
[2]李斌.奶牛干奶期应用阴离子盐对瘤胃发酵、离子平衡和泌乳性能的影响[D].北京:中国农业大学, 2004.
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奶牛血清论文 篇7
关键词：奶牛,应激反应,三碘甲腺原氨酸,甲状腺激素,促甲状腺激素
随着畜牧业的快速发展, 环境因素成为制约畜牧业生产的重要因素。高海拔应激已成为青海省引进奶牛品种最普遍的应激因素之一。高海拔应激可引起动物神经内分泌及免疫功能紊乱, 伴随奶牛生理机能、营养代谢状况异常, 甚至引发疾病。
在动物机体复杂的系统调控中, 内分泌系统起着重要的作用。大量研究表明, 胰岛素、甲状腺激素对动物的补偿生长具有调节作用。甲状腺是动物体内十分重要的内分泌器官, 它分泌的三碘甲腺原氨酸 (T3) 、甲状腺激素 (T4) 、促甲状腺激素 (TSH) 是动物机体发挥正常生理机能所必需的重要激素, 对物质代谢和能量代谢、生长发育及神经系统、心血管系统和皮肤维持正常功能等都有重要作用。其分泌受到下丘脑分泌的促甲状腺激素释放激素 (TRH) 和腺垂体分泌的促甲状腺激素的调节[1,2,2,1]。
高海拔对于动物来说是一个重要的应激刺激, 从澳大利亚及天津引进到青海省乐都县的奶牛由于受到高海拔的刺激, 发生了不同程度的应激反应, 表现为食欲减退、咳嗽、呼吸困难、心跳加快、体温升高等, 个别还出现了肺炎症状。为了使引进奶牛迅速适应高原环境, 在进行对症治疗的同时对其血清中的三碘甲腺原氨酸、甲状腺激素、促甲状腺激素进行了测定, 现报道如下。
1 材料与方法
1.1 试验动物
由青海省天露奶牛有限责任公司从澳大利亚 (平均海拔700 m) 及天津 (平均海拔500 m) 引进 (10 d) 青海省乐都县 (平均海拔2 000 m) 的奶牛中分别随机选择30头作为试验组, 同时从本地奶牛中选择30头作为对照组。
1.2 血清的采集与测定项目
用真空采血器进行空腹颈静脉采血, 分别标号。每头牛每次采血15 mL, 分离血清, -25 ℃冷冻保存, 待测。
采用罗氏E601全自动电化学发光免疫仪测定血清中的三碘甲腺原氨酸、甲状腺激素、促甲状腺激素含量。
1.3 数据处理
试验数据采用SSPS17.0 软件进行分析。
2 结果
由澳大利亚及天津引进的奶牛和本地奶牛血清中的三碘甲腺原氨酸、甲状腺激素、促甲状腺激素含量见表1。
由表1可以看出, 从低海拔地区 (澳大利亚及天津) 引进到高海拔地区 (青海省乐都县) 奶牛的三碘甲腺原氨酸、甲状腺激素、促甲状腺激素含量均低于本地奶牛。另外, 引进奶牛还出现了一系列食欲减退、咳嗽、呼吸困难、心跳加快、体温升高等临床表现, 个别还出现了肺炎等高原反应。
注:同列数据肩标字母不同表示差异显著 (P<0.05) , 相同表示差异不显著 (P>0.05) 。
3 讨论与分析
1) 甲状腺激素是一组含碘氨基酸, 对机体的生长、发育、代谢及组织分化具有重要作用, 全部由甲状腺合成和分泌, 是甲状腺的主要分泌产物;而三碘甲腺原氨酸只有20%由甲状腺合成和分泌, 80%由甲状腺激素在外周血转化而来。甲状腺激素本身活性很低, 只有转化成三碘甲腺原氨酸后才具有较强的活性, 其活性是甲状腺激素的数倍。甲状腺激素的合成和分泌受大脑垂体分泌的促甲状腺激素控制, 其分泌过程又直接与大脑皮层接受外界刺激程度有关[4]。哺乳动物对寒冷刺激的反应会引起下丘脑-腺垂体-甲状腺轴功能的改变。急性寒冷刺激经皮肤感受器通过传入神经传至下丘脑, 导致促甲状腺激素释放激素分泌增加[3]。本试验结果表明, 从低海拔的天津 (平均海拔500 m) 及澳大利亚 (平均海拔700 m) 引进到青海省乐都县 (平均海拔2 000 m) 的奶牛血清中三碘甲腺原氨酸、甲状腺激素、促甲状腺激素水平均低于本地奶牛, 说明引进的奶牛对高原应激没有及时产生相应的生理性反应, 因此出现了一系列食欲减退、咳嗽、呼吸困难、心跳加快、体温升高等临床表现, 个别还出现了肺炎等高原反应。
2) 提高奶牛的生产潜力是大力发展奶牛业的关键环节之一, 其中品种、营养、环境和防疫是影响奶牛生产潜力发挥的四大技术因素。在保证引进优良的奶牛品种、提供全价的营养水平和完善防疫措施的同时, 如何采取有效措施控制和改善引进奶牛对环境的适应性是当前青海省奶牛引进中存在的关键问题之一。对于本试验中出现不同程度高原反应的奶牛采取对症治疗, 特别是应用肾上腺皮质激素 (地塞米松、氢化可的松) 后, 症状得到了及时缓解, 减少了高原应激造成的损失。对高原应激奶牛在对症治疗的同时应用肾上腺皮质激素, 可以调节奶牛的内分泌, 有利于促进机体的生长发育、物质代谢和组织分化, 对提高机体抗应激反应具有重要意义。
参考文献
[1]徐尚荣.引进澳洲荷斯坦奶牛在青海东部地区的适应性观察[J].青海畜牧兽医杂志, 2008, 38 (3) :58.
[2]梁鸿雁, 贾永全, 苗树君, 等.慢性冷应激对荷斯坦奶牛血清某些激素水平的影响[J].黑龙江八一农垦大学学报, 2011, 23 (1) :34-36.
[2]吕晓伟.慢性冷热应激对荷斯坦奶牛血清酶活力、内分泌激素水平及维持行为的影响[D].呼和浩特:内蒙古农业大学, 2006.
[1]张家庆, 黄庆玲.非甲状腺疾病的甲状腺功能改变[J].国外医学:内科学分册, 1985, 12 (7) :318.