葡萄籽提取物

2024-08-04

葡萄籽提取物(精选10篇)

葡萄籽提取物 篇1

葡萄籽是葡萄加工废弃物中的重要成分。葡萄籽含有丰富的人体必需脂肪酸、氨基酸、植物甾醇、甾醇、维生素、矿物质以及多糖等生物活性物质。其中植物甾醇具有免疫调节、消炎退热、抗肿瘤、降低血脂和胆固醇、清除自由基及护养皮肤等生理功效[1,2,3,4]。本试验采用超声波辅助提取法提取葡萄籽甾醇, 通过正交试验进行工艺优化, 为植物甾醇的进一步开发和利用奠定理论基础[5,6]。

1 材料与试验方法

1.1 试验仪器

800B型离心机 (上海安亭科学仪器厂) ;DS-1型组织捣碎机 (上海精密仪器仪表有限公司) ;FA2104型电子分析天平 (上海舜宇恒平科学仪器有限公司) ;755B紫外可见分光光度计 (上海菁华科技仪器有限公司) ;高频超声波清洗器 (深圳洁康有限公司) 。

1.2 试验材料与试剂

葡萄籽 (酿造技术工程中心提供) 、谷甾醇 (阿拉丁试剂提供) ;乙酸乙酯、活性炭、无水乙醇、石油醚、氢氧化钾、冰乙酸等均为分析纯试剂。

1.3 试验方法

1.3.1 工艺流程。葡萄籽→清洗→烘干→粉碎→超声波辅助萃取→离心→过滤→脱色→过滤→粗甾醇。

1.3.2 葡萄籽中甾醇提取率的计算。

以谷甾醇为标品, 在一定条件下绘制标准曲线, 将试验所得葡萄籽粗甾醇提取液移取适量, 按下式计算出甾醇的提取率:粗甾醇提取率 (%) =C×V×D/m。

式中:C—根据标准曲线计算出的样品溶液粗甾醇浓度 (mg/m L) ;V—样品溶液的总体积 (m L) ;D—样品溶液的稀释倍数;m—葡萄籽样品质量 (g) 。

2 结果与分析

2.1 单因素试验

选取超声温度、超声时间、料液比、超声功率为4个考察因素, 提取率为考察目标, 通过甾醇提取率变化进行分析, 对提取工艺做初步探索。

2.2 正交试验

对超声温度、超声时间、料液比、超声功率4个因素进行正交试验, 采用L9 (34) 正交设计, 研究北葡萄籽甾醇提取率的最优的提取工艺参数。试验因素水平的设计见表1。

根据表2中正交试验和极差分析结果可知, 影响北葡萄籽甾醇提取率的主次因素是A>C>B>D, 即主要因素是超声温度, 其次是料液比、超声时间, 而超声功率的影响因素最小。葡萄籽甾醇的最佳工艺参数为A2B2C3D2。

3 结论

在使用超声波法提取葡萄籽甾醇的试验过程中, 选用超声温度、超声时间、料液比、超声功率作为考察因素进行正交试验。结果得知:影响葡萄籽甾醇的提取率的主要因素是超声温度, 其次是料液比、超声时间, 超声功率影响最小。确定最佳提取工艺条件为A2B2C3D2, 超声温度为50℃, 超声时间为25min, 料液比为1︰25, 超声功率为500W, 在此条件下提取葡萄籽甾醇的提取率最高。

参考文献

[1]李月, 陈锦屏, 段玉峰.植物甾醇功能及开发前景展望[J].粮食与油脂, 2004, 5:11-13.

[2]彭莺, 刘福祯, 高欣.天然植物甾醇的应用与提取工艺[J].化工进展, 2002, 21 (1) :49-53.

[3]管伟举, 谷克仁.植物甾醇研究进展[J].粮食与油脂, 2006, 3:5-9.

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[5]刘海霞, 王峰, 赵雁武, 等.苹果籽油中植物甾醇的提取及分光光度法含量测定研究[J].食品科学, 2009, 30 (6) :146-150.

[6]彭丽霞, 朱亿竹, 魏阳吉, 等.葡萄籽油中植物甾醇的提取与鉴定[J].中国食品学报, 2012, 12 (3) :185-191.

吃葡萄不吐葡萄籽? 篇2

有网友在网上说朋友每次吃葡萄都不吐葡萄籽,都是直接吃掉。然后她就很想问,生吞葡萄籽真的有用吗?真的能抗衰老吗?

葡萄籽有“神奇”成分?

一瓶葡萄籽保健品打着抗衰老的名号在卖,我们不禁要问问究竟有什么“神奇”成分可以抗衰老,毕竟卖得还不便宜。

目前国内外对葡萄籽的研究有很多。研究发现,葡萄籽中有一些抗氧化物质,这些抗氧化物质包括没食子酸、儿茶素、白藜芦醇、鞣酸及原花青素等,主要是一些多酚和类黄酮物质。现在的研究普遍认为,葡萄籽中起抗氧化抗衰老作用的主要成分就是这个原花青素。原花青素又分為低聚原花青素OPCs和高聚原花青素PPCs,其中生物活性最强的是OPCs。20 世纪70 年代人们就发现,葡萄籽是提取原花青素的最好资源库。现在市面上的葡萄籽提取物多为红色粉末状物质,是一种混合提取物,主要成分就是这种原花青素。

早在80年代初,原花青素抗氧化抗衰老和预防癌症的功能就被一些研究发现。最新的美国学会报告发表的研究成果宣布,红葡萄籽中丰富的多酚含量能够预防心脏病、动脉硬化,还能够改善有发痒现象的异位性皮肤炎症,使肌肤润泽,能使癌细胞死亡。医学权威刊物《毒理学期刊》报道说,葡萄核提取物的抗氧化能力是维生素的数倍,是天然物中最理想的抗自由基成分之一。《血管硬化医学杂志》报道,葡萄核提取物能抑制低密度胆固醇的氧化作用,达到保护血管、避免血管硬化的作用。

吃葡萄究竟要不要吐籽?

既然葡萄籽有这么好的作用,那吃葡萄还吐籽干吗呢?直接吃了算了。

生吃葡萄籽有没有效果首先要看究竟吃多少。虽然葡萄籽中的原花青素含量基本上是所有植物中最多的,但是,这个含量也不会非常高,而且不同品种的葡萄籽中原花青素的含量略有差异。有研究对新疆特色果品葡萄、黑加仑、枸杞、桑葚、欧洲李、樱桃李、杏、核桃、沙枣、石榴等果品中的原花青素含量进行测定,结果发现葡萄籽中原花青素含量最高,为31. 817μg/ g (约3.18mg/100g)。可以看出,这个含量相比我们平时吃饭来说还是很低的。

现在很多研究中使用的葡萄籽提取物都是浓度很大的,有动物实验用量为10mg/kg体重,如果换成葡萄籽的量就得要差不多半斤葡萄籽。有的用量更大,那就要吃几斤葡萄了。吃几斤葡萄对于有些人来说还是可以做到的,但是,吃几斤葡萄籽这种事情对于绝大多数人来说是比较困难的。所以,吃葡萄的时候吞那点葡萄籽对抗衰老并不会产生多大效果。

生吃葡萄籽有没有效果还得看消化吸收。

对葡萄籽的研究要采用一系列复杂的方法将葡萄籽中的抗氧化物质,尤其是原花青素提取出来,使用到各种有机试剂,但提取率依然不高,通常只有50%左右,主要是因为原花青素是一种高分子复合物,提取比较困难。联系生活实际,生吃葡萄籽,对原花青素的消化吸收及利用率就更低。葡萄籽很硬,外面还有一层坚硬的壳,嚼过的人应该知道还挺硬的。吞过西瓜籽、葡萄籽的经历应该都有过,最后都是穿肠而过。消化吸收率就更不容乐观,对人体能产生多大作用就更要怀疑。

所以,生吞葡萄籽能抗衰老这种事情还是不要抱太大希望的好,还是吐葡萄籽吧。

葡萄籽提取物 篇3

该项研究选取了29名有高血压前兆的中年人, 受试者持续6周每天服用含有300mg葡萄籽提取物或安慰剂的果汁两次。在干预期间和实验4周后, 受试者血压降低5.6%。在停止服用葡萄籽提取物4周后, 受试者的血压恢复到了起测点。在此次实验中最高起始血压的受试者受益最大。

研究发现, 葡萄籽提取物不仅安全, 且可以改善有高血压前兆病人的血压状况。研究结果支持将葡萄籽提取物作为一种功能性成分应用于低能量饮料中来控制血压。

葡萄籽提取物

早在几千年前, 葡萄的医学价值就已被人发现。葡萄籽提取物中含有的原花青素是一种新型高效抗氧化剂, 是目前为止所发现的最强效的自由基清除剂。

此项研究发现, 葡萄籽提取物中含有的血管舒张化合物可以帮助患有代谢综合征的受试者降低血压。通常, 葡萄籽提取物以液体剂型或片剂的形式作为膳食补充剂。

降低心脏疾病的风险

根据Blood Pressure UK的调查数据显示, 每3个成年人中就有一个高血压患者, 特别是在60岁以后高血压的患病率会显著增加。基于该现象, 葡萄籽提取物对于降低人体心脏收缩压的研究显得尤为重要。

针对此次研究结果, 伊利诺伊理工大学食品安全与健康学院营养研究中心的研究员Britt Burton-Freeman认为:“研究中部分受试者的数据结果可以证明, 每日摄入一定量的葡萄籽提取物对降低心脏舒张压、控制血压具有重要意义。”

一些研究指出通过减少盐的摄取量、增加水果和蔬菜食用量等方式可降低血压。对此Blood Pressure UK主席Graham Mac Gregor教授则表示怀疑, 他认为上述方式并不是降低血压的有效途径。

葡萄籽的保健没那么神 篇4

抗氧化成分并无特别之处

葡萄籽提取物的出现是葡萄酒行业废物利用的结果。葡萄酒行业希望从废弃物葡萄籽中淘弄点钱出来,于是对它进行研究,发现它含有大量的维生素E、类黄酮、亚油酸以及一类叫做“低聚原花青素复合物(简称OPCs)”的成分。除了亚油酸资质平平之外,其他这些都具有很好的抗氧化性能。现在一般认为,“氧化应激”与衰老以及多种疾病的发生有关。虽然转了几个弯,但“抗氧化”似乎能与衰老和疾病搭上关系。于是乎,各种“抗氧化剂”保健品应运而生。

记者了解到,目前市售的与葡萄籽提取物相关的保健产品较多样,产品形式包括一些葡萄籽提取物胶囊、粉末等,这些产品也宣称具有多种保健功效,其中包括可以辅助降血脂、美容、祛斑、抗癌等。

“葡萄籽提取物中主要是原花青素和一些酚类物质。其中,原花青素主要由表儿茶素、儿茶素及表儿茶素没食子酸酯组成的。需要说明的一点是,这些成分并非葡萄籽中独有,在葡萄果皮及果肉中也都存在,可能具体的含量有差别。”国家二级公共营养师杨文娇介绍。她同时表示,与其他蔬菜水果中含有的抗氧化成分相比,葡萄籽中的物质并没有太多特别之处,只要膳食平衡,就能从食物中摄取一些抗氧化成分,并没有必要专门依靠葡萄籽或其提取物来补充体内抗氧化物质。

保健功效可能来自于复方

杨文娇介绍,一些动物实验及人体试验已经表明,一定浓度的葡萄籽提取物具有抗氧化性及自由基清除能力,目前利用一些工艺,可以直接从葡萄籽中获得提取物并制作成胶囊等形式的保健食品,的确具有一定的抗氧化性,可以抵抗自由基。有些研究也支持葡萄籽提取物具有一定的降血脂等功能,但目前仍缺乏大量的研究来支持这一结果,有些功能尚未被普遍认可。

中国保健协会副秘书长张大超解释,在一些宣称具有增强机体免疫力、调节血脂功效及美容、祛斑等功能的保健食品中均含有葡萄籽提取物成分。因此,不少含有葡萄籽提取物的保健食品宣称具有某种保健功能,也可能是由于葡萄籽提取物与其他成分相配合的缘故。而目前我国的保健食品功能审批仅针对产品,并不针对某种成分。

张大超告诉记者,葡萄籽提取物中一般含有一些多酚类物质,包括一些花色素、花青素等,其生理活性主要表现在其抗氧化活性,葡萄籽提取物保健食品的功能主要为抗氧化功能。在已经获得审批的保健食品中,有些为单方葡萄籽提取物,有些则为与复方葡萄籽提取物,即与其他成分相配合。葡萄籽提取物在与其他成分复配后,也会具有其他的一些功效。

抗癌功效是“美好的愿望”

抗癌自然是最有吸引力的。在一些体外细胞实验中,葡萄籽提取物或者其中的OPCs对某些种类的癌细胞展示了更好的抑制作用。但“体外实验能够抑制癌细胞”跟“吃了能抗癌”之间,还有着遥远的距离。一方面,它只是对某些特定的癌细胞有效。另一方面,体外细胞实验只能作为一种筛选工具,“有效”只是说明它没有被淘汰。各个制药公司和癌症研究机构,每年都会发现大量“体外细胞实验有效”的物质。越往后研究,被淘汰出局的就越来越多,最后能够通过临床试验证明“确实有效”的,实在是凤毛麟角。

保健品喜欢宣称的一类功能是“辅助治疗”。2006年,英国学者发表了一项葡萄籽提取物辅助癌症病人的二期临床研究。66位早年进行过乳腺癌放疗、有中等或者明显乳房硬结的志愿者,被随机分为两组。一组44人服用葡萄籽OPCs,每天三次,每次100毫克。另一组22人服用安慰剂。12个月之后复查,检测乳房硬结和乳房外观,并由志愿者自己描述乳房硬度和疼痛感。结果是:两组没有差别。

除此之外,各种美容、护肤、抗衰老之类的功能,都是“美好的愿望”,没有科学证据的支持。葡萄籽提取物成分比较复杂,也没有经过系统充分的安全性研究。从谨慎稳妥的角度出发,孕妇、产妇和孩子,还是不要服用的好。

没必要直接咀嚼葡萄籽

既然葡萄籽提取物有一定的抗氧化性等保健效果,平时吃葡萄时直接将葡萄籽嚼碎并吞咽,这种方法是否可行?

事实并非如此。生吃葡萄籽时,直接吃葡萄籽难以下咽,而且人体对其成分的消化吸收率有限,并不会起到保健效果。吃葡萄时如果直接将葡萄籽吞咽,固然也可以得到其中的一些营养物质,但数量是非常小的,微乎其微。这是因为单纯靠咀嚼很难将葡萄籽彻底嚼碎,能够被人体消化、吸收的量也就更加微小,几乎可以忽略不计。因此,并没有必要为了获取葡萄籽中的营养物质而咀嚼葡萄籽。

另外,除了葡萄之外,其他蔬菜水果中同样含有大量抗氧化物质,没必要非得硬着头皮吃葡萄籽,而且葡萄籽中本身对人体有益成分的含量也有限。

河南一家中医院的中医内科专家称,新鲜的葡萄还能起到中和体内酸碱平衡和补充维生素的作用。“吃葡萄不吐葡萄皮”其实有科学道理。首先葡萄皮中富含白藜芦醇,能降低坏胆固醇,增加好胆固醇,延缓动脉硬化;同时吃葡萄皮能刺激大脑中松果腺分泌褪黑素,帮助调节睡眠周期。

但是,不少专家提醒,葡萄籽或是葡萄籽提取物可以少吃,但不要过量。因为吃葡萄籽可能会对肠胃带来不适,而葡萄籽保健品里面毕竟要加入防腐剂等添加成分,从谨慎稳妥的角度出发,孕妇和小孩还是要慎吃。(综合自《新京报》《长江商报》《中新网》等)

葡萄籽提取物 篇5

1 实验部分

1. 1 仪器与试剂

美国waters2795 HPLC,配2996 二极管阵列检测器( PAP) 及Empower色谱工作站; 甲醇( 色谱纯,禹王试剂) ; 娃哈哈纯净水; 没食子酸( 110831 -201204,89. 9% ; 中国药品生物制品检定研究院) ,儿茶素( 110877 - 201203,97. 2% ,中国药品生物制品检定研究院) ; 表儿茶素( 878 - 200102,中国药品生物制品检定研究院) 。

1. 2 药材

1. 3 色谱条件

检测波长: 280 nm,流动相: 乙腈( A) : 水( B,1% 甲醇+ 0. 15% 三氟乙酸) ,色谱柱: Agilent zobax SB C18 柱,流速1. 0 m L / min,进样体积: 20μL,柱温40 ℃ ,梯度: 0 ~ 10 min 0% ~ 7% A; 10 ~ 30 min 7% ~16% A; 30 ~ 40 min 16% ~ 90% A; 40 ~ 50 min 90% A;50 ~ 55 min 90% ~ 0% A; 55 ~ 65 min 0% A。

1. 4 溶液的制备

1. 4. 1 对照品溶液的配制

取适量没食子酸、儿茶素、表儿茶素置10 m L量瓶中,配制成浓度分别为0. 02 mg /m L、0. 056 mg /m L、0. 048 mg / m L的混合溶液。

1. 4. 2 样品溶液的配制

精密称取葡萄籽提取物20 mg置10 m L量瓶中,加20% 的甲醇溶液稀释至刻度,摇匀; 再3 000r / min离心15 min,取上清液,即得样品溶液。

2 结果与讨论

2. 1 方法学考察

2. 1. 1 仪器精密度考察

取“1. 4. 1”项下的对照品溶液,精密吸取20 μL注入液相色谱仪,连续进样6 次,记录色谱图中各峰的保留时间与峰面积,计算相应的RSD值,结果保留时间与峰面积的RSD值均小于2% ,表明仪器精密度良好。

2. 1. 2 稳定性试验

取对照品溶液分别在0、4、8、12、24、48、72 h精密吸取20 μL注入液相色谱仪,记录色谱图,结果表明色谱峰保留时间与峰面积RSD值均小于2% ,表明溶液在72h内稳定。

2. 1. 3 重复性实验

分别精密称取样品6 份,各20 mg,置10 m L量瓶中,照“1. 4. 2”项下配制样品溶液,精密吸取20μL注入液相色谱仪,记录色谱图,结果显示各色谱峰保留时间与峰面积RSD值分别为2. 27% 、2. 95%均符合指纹图谱要求。

2. 2 葡萄籽提取物的指纹图谱的建立

在上述色谱条件下,分别取12 个不同产地的葡萄籽提取物照“1. 4. 2”项下配制成样品溶液,各取20 μL注入液相色谱仪,记录色谱图,选择归一化法峰面积大于3% 的色谱峰作为指纹峰,共选择了6个共有指纹峰,确定了3 个主要的指纹峰。

通过与对照品保留时间和紫外光谱检测的结果进行比较,如图1( b) 所示,发现保留时间分别在8min、18. 4 min、24. 7 min左右的峰分别是没食子酸、儿茶素、表儿茶素,即确定了3 个单体酚类物质。

按照国家食品药品监督管理局推荐的“中药指纹图谱相似度软件评价系统( 2004 A版) ”,将12 个产地的葡萄籽提取物色谱图导入该软件后,通过多点校正的方法,对12 个色谱峰进行自动匹配,匹配结果如表2,并自动生成对照指纹图谱R( 图2) ,图2 为各个样品匹配前后的色谱图。

2. 3 指纹图谱相似度评价

指纹图谱的相似度评价是指将各样品的色谱图和该品种的对照指纹图谱进行相似度计算和比较,且相似度必须在0. 900 以上[4]。对照葡萄籽提取物共有模式的指纹图谱,利用“中药指纹图谱相似度评价系统( 2004 A版) ”对12 个葡萄籽提取物样品进行计算,计算结果见表3。

从表3 可以看出,12 个样品的相似度均在0. 900 以上。从表3 可知,10 号样品第一个峰面积即没食子酸峰面积明显低于其他11 个产地的样品,表明该成分与对照指纹谱相比有较大的差异,其余各峰基本保持一致。中药指纹图谱是一种基于整体性、模糊性的方式,进行可量化的、综合的质量控制手段[5],它作为一个质量控制指标,为植物药的质量控制提供了一个有效的参考方法。

2. 3 指纹峰的特征性

通过比较对照品的方法,已确定葡萄籽提取物中的6 个共有指纹峰中的3 个葡萄籽提取物的酚酸类的活性成分,即保留时间分别在8 min( 没食子酸) 、18. 4 min( 儿茶素) 、24. 7 min( 表儿茶素) 左右的指纹峰。

3 结论

色谱指纹图谱已经深入到中药质量控制的各个环节,在中药的真实性鉴定、有效性和安全性领域其应用分量不可小觑。本实验样品处理方法上做了大量的实验优化,所建立方法的精密度、重复性、稳定性符合食品药品监督管理局的技术要求,为葡萄籽提取物的质量控制提供了科学的依据。

摘要:葡萄籽提取物是一种高效的抗氧化剂,其抗氧化效果远高于绿茶等。利用反相HPLC建立葡萄籽提取物的中药指纹图谱,以便于对其质量的优劣进行监测。实验分析了12个不同产地的葡萄籽提取物样品,采用了国家食品药品监督管理局推荐的“中药色谱指纹图谱相似度软件评价系统(2004 A版)”计算处理。建立了25个指纹峰、6个共有峰,确定了3个主要的指纹峰。通过夹角余弦法计算了12个产地的葡萄籽提取物的相似度。建立的指纹图谱可以用来评价不同产地葡萄籽提取物的优劣;并依此为标准,为进一步控制葡萄籽提取物的质量提供依据。

关键词:HPLC,指纹图谱,葡萄籽提取物,质量控制

参考文献

[1]董海胜,陈斌.葡萄籽提取物生理活性及其提取研究.食品工业科技,2008;12(81):271—274Dong H S,Chen B.Physiological activity of grape seed extract and its extraction.Science and Technology of Food Industry,2008;12(81):271 —274

[2] 邵云东,高文远,苏艳芳,等.葡萄籽提取物的质量标准.中国中药杂志,2005;30(18):1406—1407Shao Y D,Gao W Y,Su Y F,et al.The quality specification of grape seed extract.China Journal of Chinese Materia Medica,2005;30 (18):1406—1407

[3] 付绍平,杨博,陈彤,等.北五味子的液相色谱指纹图谱的建立.色谱,2008;26(1):64—67Fu S P,Yang B,Chen T,et al.Establishment of high performance liquid chromatographic fingerprint of fructus schisandrae chinensis.Chinese Journal of Chromatography,2008;26(1):64—67

[4] 卢红梅,彭丽华,郭方遒,等.鱼腥草中黄酮类成分的高效液相色谱指纹图谱分析.色谱,2010;28(10):965—970Lu H M,Peng L H,Guo F Q,et al.High performance liquid chromatographic fingerprint analysis of flavonoids from Houttuynia cordata thunb.Chinese Journal of Chromatography,2010;28(10):965—970

葡萄籽油的提取与精制 篇6

葡萄加工企业的下脚料, 葡萄籽的含油量约为14%~17%[3]。葡萄籽油属于含有不饱和脂肪酸的半干性油脂, 其脂肪酸组成中的主要成分为亚油酸, 含量达7 0%以上。葡萄籽油具有软化血管、降低血液黏度和防止血栓形成等多种生物学功效, 还可产生维持上皮与神经细胞正常结构与功能及抗氧化、抗衰老、保护视力、促进儿童生长发育等各种生理作用[4,5]。

目前提取葡萄籽油的方法主要有:水蒸气蒸馏法、有机溶剂提取法、超临界流体萃取法[6]和生物酶提取法[7]。对葡萄加工副产物的综合利用研究, 具有十分重要的意义。它既可避免环境污染, 又可提高经济效益, 变废为宝。但是现阶段工业生产上对从葡萄籽中提取葡萄籽油的研究, 大多仅是从提取剂选择、提取温度、提取时间及提取料液比等方面进行改进。

对葡萄籽油的提取方法进行了稍加改进:先对葡萄籽粉碎水选将籽和壳分离, 再用籽仁直接进行提取。这样节省了提取时间, 也可以节约提取剂的用量, 水选分离的葡萄籽壳还可以直接进行低聚原花青素 (O P C) 、单宁、蛋白质等的提取, 提高了效率, 降低了成本, 也减少了污染。

为与现阶段工业大规模生产工艺相适应, 本文探讨用有机溶剂提取法和索氏提取法, 均以石油醚作为溶剂从葡萄籽中提取葡萄籽油, 并就常规操作方法和改进方法进行实验对比。

1 实验

1.1 原料及试剂材料

葡萄籽;石油醚 (60℃~90℃) 、过氧化氢 (30%) 、氢氧化钠、活性炭、0.5mol/L氢氧化钾-乙醇溶液、酚酞、0.1mol/L盐酸标准溶液、0.1mol/L硫代硫酸钠溶液、15%碘化钾溶液、0.5%淀粉指示剂、四氯化碳或氯仿、盐酸、硫酸、碘、高锰酸钾、冰乙酸、重铬酸钾、韦氏液。

组织捣碎机、索氏提取仪、高速冷冻离心机、恒温水浴锅、烘箱、玻璃器皿等。

1.2 工艺流程

常规工艺方法:葡萄籽→粉碎→提取→分离→精制→鉴定→葡萄籽油[8];改进后工艺方法:葡萄籽→粉碎→水选→离心分离→提取→分离→精制→鉴定→葡萄籽油。

在葡萄籽粉碎后, 用水作溶剂将葡萄籽仁和壳先进行分离, 可为后续的葡萄籽油提取缩短时间, 节约提取剂的用量。此外分离出的葡萄籽壳也能做为低聚原花青素 (OPC) 、单宁、蛋白质等提取的原生态无污染原材料。

1.3 实验

(1) 葡萄籽仁的水选粗分离。

(1) 取100g干燥葡萄籽加水 (1 0 0 m L, 1 5 0 m L, 2 0 0 m L, 2 5 0 m L, 3 0 0 m L, 3 5 0 m L40 0m L) , 用组织捣碎仪粉碎10 mi n。

(2) 将上述粉碎物用高速冷冻离心机离心12min (5000r/min) 。

(3) 离心后产物分三层 (水层、粗葡萄籽仁层、葡萄籽壳层) , 取粗葡萄籽仁层。

(4) 将粗葡萄籽仁进烘箱在3 5℃下烘干2 4h。

(5) 称量粗葡萄籽仁质量M1。

(6) 计算粗葡萄籽仁的分离率。

葡萄籽仁分离率

式中:M0为干燥葡萄籽质量, 100g。

(2) 提取与精制。

索氏提取法和石油醚浸提法。

常规方法:高温精制, 活性白土脱色, 得到具有透明黄色, 核桃仁味道的葡萄籽油[9]。

优化后方法:将粗油进行离心, 高速冷冻离心机离心5min (4500r/min) , 分层后取油层 (上层) 即得具有透明黄色, 核桃仁味道的葡萄籽油精油。

(3) 鉴定。

用常规方法测定精制葡萄籽油的皂化值、碘价和密度, 评价油品质量。

1.4 提取条件优选

因本实验主要针对工业上生产葡萄籽油的改进, 故要考虑提取条件的可行性, 操作要简单方便。设备投资成本低, 最好是常温常压;提取剂毒性小、用量少, 减少污染。具体实验条件设计为常温 (10℃左右) , 提取剂:石油醚 (60℃~90℃) , 提取时间分别是:2 h, 4 h, 6 h, 8 h, 1 0 h, 1 2 h, 料液比:1∶7。

2 实验结果

2.1 葡萄籽粉碎水选分离结果

对葡萄籽仁进行粉碎水选分离实验, 并就8组水选料液比实验所测出的葡萄籽仁分离率进行比较分析:当水选料液比 (葡萄籽质量/水体积) 在1∶2.5时, 最经济, 分离效果好。

2.2 葡萄籽油提取实验结果

葡萄籽仁索氏法和溶剂法浸提两种提取方法均用石油醚做溶剂, 具体提取结果见表1。

2.3 常规方法和改进方法的提取率进行对比, 具体数据及结果

见表2

2.4 两种提取方法消耗溶剂量对比, 其实验结果见表3

传统的葡萄籽直接提取法和改进后的葡萄籽粉碎水选分离取仁提取法进行了2 h, 4 h, 6 h, 8 h, 1 0 h, 1 2 h的六组对比实验中, 对消耗的相同溶剂的量按每提取出1 g葡萄籽油所需的提取剂-石油醚的量换算, 并进行比较, 结果见表3。

2.5 葡萄籽油质量鉴定结果

根据常规油品质量检测方法, 分别对葡萄籽油的皂化价、碘值和密度做了质量鉴定, 其结果均符合国标要求。

2008.4

3 实验结果分析

3.1 水选分离料液比的确定

确定合适的水选分离料液比对提取葡萄籽油实验至关重要, 在生产上更是收益与成本核算最经济化的一个指标值。本实验定为干葡萄籽质量︰水体积=1︰2.5, 分离率为4 8.3%, 由实验结果看出, 当水的体积增大时, 料液比为1︰0.5~1︰2.5时分离率上升越明显, 当料液比大于1︰2.5时, 相对前者分离率上升不是明显。

其次, 查阅相关资料, 一般葡萄籽中, 葡萄籽仁占葡萄籽质量的50%~55%, 本实验定的料液比下葡萄籽仁分离率已达到4 8.3%, 分离出了9 0%以上的仁。葡萄籽是一种廉价原材料, 如果用提高水溶剂量来提高分离率是不经济的。

最后, 工业生产要衡量它的产出效益和投入成本, 用水作溶剂分离提取就是为降低成本, 投入大量的水能提高分离率, 姑且不计水的成本, 但过量的水会增大后续的离心分离成本。

3.2 常规提取方法和改进后提取方法的实验结果比较分析

(1) 提取时间结果分析。

由表2结果可以看出, 葡萄籽油的索氏提取和石油醚浸提两实验中, 葡萄籽经水选分离后取仁进行提取的效果要比直接进行提取的效果好, 首先在提取时间上明显缩短, 改进后的提取方法在2 h的提取率超过了常规提取方法10h提取时间的提取率。这也就是在工业生产中, 如果要求4.2%的提取率时, 改进后方法的提取时间是常规方法所需提取时间的五分之一, 在相同提取时间里, 企业可以增加四倍的产值。

(2) 提取剂用量结果分析。

由单位提取葡萄籽油量所需提取剂量的换算数据及表3结果可以看出, 葡萄籽油的索氏提取和石油醚浸提两实验中, 在提取时间较短时, 葡萄籽经水选分离后取仁进行提取所需溶剂-石油醚的量要远远少于直接进行提取需提取剂-石油醚的量。这也就是在工业生产中, 如果是2 h提取时间, 提取相同质量葡萄籽油, 改进后的提取方法所需提取剂量是常规提取方法所需提取剂的五分之一;这又可以为企业节约了四倍的提取剂成本, 减少了环境污染。

3.3 提取油质量鉴定结果分析

经鉴定, 在上述工艺条件下精制得到的葡萄籽油的各项指标均符合葡萄籽油的理化指标 (引用国际标准) 。改进后提取方法所提取出的葡萄籽油在品质上符合国标要求。

4 结论及讨论

4.1 葡萄籽油提取工艺条件

葡萄籽油提取工艺中, 各影响因素很多, 但鉴于是工业上的规模化和产业化, 必须考虑成本、安全和环境保护。具体条件为常温常压, 料液比为1∶7, 提取剂为毒性较小的石油醚 (60℃~90℃) , 粉碎度为工业生产上要求的普通粉碎即可。

4.2 葡萄籽油提取的改进方法和常规方法对比

改进后的葡萄籽油提取方法和常规提取方法相比较, 工业生产上同样量的葡萄籽原料进行提取, 改进后的方法比常规方法缩短了四倍的时间;改进后的方法用水作溶剂进行初选, 比常规方法节约了四倍的提取剂-石油醚 (60℃~90℃) , 大大降低了成本, 保护了环境。

4.3 葡萄籽壳的利用

葡萄籽中, 葡萄籽仁和壳基本是各占一半, 葡萄籽壳中含有大量有效成分, 改进方法中, 葡萄籽粉碎水选分离后, 葡萄籽仁进行葡萄籽油的提取, 而葡萄籽壳就可进行其他成分的提取和分离了。

4.4 讨论

(1) 在葡萄籽仁的水选粗分离实验时如果分离效果不太明显时, 可以延长离心时间, 或者提高离心转速, 也可以进行多次水选离心分离等方法。

(2) 在葡萄籽油精制中, 延长离心时间或者提高离心转速, 精油纯度会更纯。

2008.4

2008.4

摘要:对常规的葡萄籽油的有机溶剂提取法加以改进, 先将葡萄籽粉碎, 水选, 离心分离后取仁, 再用有机溶剂提取。对常规葡萄籽油的精制方法加以优化, 减化常规方法中繁琐的油浴、加药、调pH、洗涤等操作, 而将葡萄籽粗油直接进行水选离心分离。此方法依然满足工业上规模化和产业化的要求, 为企业降低成本, 减少环境污染, 提供理论依据。

关键词:葡萄籽油,水选分离,提取,精制

参考文献

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葡萄籽提取物 篇7

1 葡萄籽油的提取技术

当前提取葡萄籽油的主要三种方法是:超临界CO2萃取法、有机溶剂萃取法和机械压榨法。

1.1 机械压榨法

最广泛的将油脂从植物种子中提取出来的方法就是机械压榨法。该方法也以使用较少的设备和资金并且操作简单为优点, 榨出的油最能保持植物原本的天然特色。

机械压榨法提取葡萄籽油主要涉及烘干→清理→破碎→软化→轧坯→烘干葡萄籽→浸出→蒸发→毛油等一系列工艺流程。葡萄先经榨汁发酵处理后除去葡萄皮, 再经烘干分离后得到葡萄籽, 经过筛选清理后去除杂质, 使用粉碎机强制破碎处理;然后用软化锅进行软化, 其中要控制软化水分在18%~20%为宜, 同时加温至80℃, 停留时间约40 min;然后通过轧坯机进行轧坯, 控制坯片厚度约为0.4 mm;之后进入平板烘干机烘干水分, 葡萄籽坯的水分要控制低于12%, 控制浸出时间约为1.5 h, 使用的溶剂比例为1∶1.2, 混合油进入蒸发器及汽提塔进行脱溶, 即可得到毛油, 而籽粕则进入蒸脱机进行脱溶后进粕库[1]。

机械压榨法存在的不足为:葡萄籽的出油率低, 且所得产品含有其他杂质, 不纯净, 容易腐败。

1.2 有机溶剂萃取法

于宝成等[2]采用有机溶剂萃取法对葡萄籽油制取进行了研究, 认为预处理是制取葡萄籽制油的关键工序, 即葡萄籽软化时水分含量19%~20%, 预处理时间45 min, 加热温度85℃, 制取效果最好。王敬勉等[3]采用脱壳和一次性浸出制油工艺, 不仅提高了油脂的出油率, 而且还能使制油后饼粕中的纤维素含量降低, 蛋白质含量提高, 从而大大增加饼粕的营养价值。

有机溶剂萃取法涉及:烘干→清理→分离剥壳→破碎仁→软化→轧坯→烘干葡萄籽→溶剂浸提→毛油→筛选过滤→脱酸→脱色→脱臭→精油等工艺流程。

有机溶剂萃取法主要存在的不足为:工艺流程繁杂、有机溶剂消耗多, 耗时长, 生产成本高, 得到的产品或多或少都存在着溶剂的残留, 且溶剂外泄对环境造成的污染, 从而带来生产设备复杂, 投资操作费用高, 成本增加等诸多问题。

1.3 超临界C O2萃取技术

超临界流体萃取技术是近几年才发展起来的较新型分离技术, 具有超临界流体这一特性被利用做为萃取剂, 将液体或固体进行萃取分离组分, 该技术高效分离的效果很好, 而且加快了分离速度。李延辉等使用超临界CO2萃取法研究葡萄籽油的萃取, 克服了传统方法提取葡萄籽油的缺点。研究结论表明:利用超临界CO2萃取法提取葡萄籽油的最佳工艺条件是: (1) 萃取压力25 Mpa; (2) 萃取温度40℃; (3) 萃取时间1.5小时。刘颖等[4]采用超临界CO2萃取技术提取葡萄籽油及对其理化性质进行了研究, 研究结果表明其工艺条件最佳为:葡萄籽的粒度大小为40目, 4.62%的含水量, 压力控制在30 MPa, 而萃取时间控制在93 min, 萃取温度则控制在43℃, 一级分离温度为45℃, 分离压力为30 MPa;二级分离温度为35℃, 则分离压力为6 MPa, 则最终葡萄籽油萃取率达到93.3%。

超临界CO2萃取法存在的不足为:设备昂贵, 投入高, 若产量不大, 一时无法见效, 成本高。

1.4 酶法提取

将微生物所产生的酶作为工具, 利用它的催化或者转换等作用, 来达到将油脂中的抗营养因子选择性脱出的一种技术就叫酶法提取技术。

国内外已研究的酶法提油工艺主要有:酶解冷浸出法、水酶法、酶解萃取法、酶解冷榨法等四种方法。这些提取方法既有优点又有缺陷, 优点是可避免高温处理油料, 其蛋白质性能得到良好的保持, 此方法提取出的油脂质量优于传统方法。

酶法提取存在的不足之处为:对操作条件的要求高, 不容易控制酶的用量以及酶解时间, 不能进行大规模的工业化生产。

1.5 微波提取技术

微波萃取处理技术主要是利用了微波以及适当的溶剂的作用, 对该物质的化学组成成分进行提取。作为一项新工艺新技术, 其优点有低溶剂的消耗、节约能源、减少废物的产生、生产时间短, 同时也具有增加产品的收率和纯度的优势。对香精油的提取过程中以油脂为载体, 可发挥利用微波的选择性, 对提取菇烯成分的效果更佳, 例如利用微波技术提取马郁兰油, 其产量可接近1%。此外, 微波提取法操作简捷快速, 提取过程中能减少油脂损失, 尤其是油脂当中热敏性成份, 例如利用微波提取技术来提取鱼肝油, 能使油脂溶性维生素损坏率降低到最小。若采用微波萃取法萃取低挥发或者非挥发活性成份, 也可以大幅度提高提取速率。例如提取棉酚, 只需要用常规方法的50%溶剂用量, 就可以在十几分钟之内完成萃取。

微波提取法主要存在萃取介质的选择对产物组分影响大, 使得部分成份损失等不足。

2 葡萄籽粗油的精炼工艺

2.1 脱胶

胶溶性杂质不仅影响油脂中油脂的稳定性, 而且对油脂精炼深加工的效果也有影响。因此, 脱胶就是指脱除毛油中的胶溶性杂质的过程。在脱胶实际生产应用中, 我们经常使用水化脱胶法当中的特殊湿法脱胶。即在油中混入定量的电解质溶剂, 充分利用胶溶性杂质如磷脂等亲水的特性, 使得胶体杂质吸水凝结后与油脂分离。其中胶质中以磷脂为主。在水分很少时, 以内盐结构形式存在的磷脂溶解并分布于油中;当水分增多时, 所具有的亲水性使其体积增大形成胶体粒子, 并相互吸引形成较大的胶团, 形成比重差而分离出来。

2.2 脱酸

植物油脂中的游离脂肪酸的含量取决于油料的质量。脱酸的主要方法为碱炼和蒸馏法。蒸馏法又称物理精炼法, 应用于高酸值、低胶质的油脂精炼, 我们主要采用碱炼法。烧碱遇到粗油中游离脂肪酸随即中和, 产生的钠盐不易溶解沉降成为絮状物。钠盐又可作为表面活性剂, 在沉降的过程中将其他杂质 (如蛋白质、粘液质、色素、磷脂及带有羟基和酚基的物质) 也带入沉降物。甚至悬浮固体杂质也可被絮状皂团携带下来。因此, 碱炼具有脱酸、脱胶、脱固体杂质和脱色素等综合作用。

2.3 脱色

油脂脱色常用吸附脱色法。吸附脱色法是利用吸附剂的吸附能力能去除色素及其他杂质, 最后再过滤去除吸附剂, 同时除掉被吸附的色素及杂质从而达到脱色净化的目的。

2.4 脱臭

不同种类的植物油有其本身独特的风味和滋味, 仅仅经脱酸脱色处理后的油脂还会留有微量的醛、酮、烃类、甘油酯的氧化物、低分子脂肪酸或残留溶剂的气味等。因此, 脱臭是指去除这些不良气味的工序。脱臭主要有真空汽提法、加氢法、气体吹入法等方法。其中最常用的方法是真空汽提法, 就是采用高温高真空结合, 直接蒸汽汽提等办法蒸馏除去油脂中的气体成分。

脱臭的原理是在相同条件下, 甘三酯的蒸汽压远小于臭味小分子组分的蒸汽压, 即利用臭味物质更容易挥发的特点, 应用水蒸气蒸馏的原理进行汽提脱臭。而水蒸气蒸馏脱臭的机理是水蒸气通过含有臭味组分的油脂时, 即汽-液表面接触, 水蒸气被挥发的臭味组分所饱和, 并按其分压的比率逸出, 从而达到了脱除臭味组分的目的。

3 国内外葡萄籽油研究状况

3.1 国外葡萄籽油的开发利用状况

大多数欧美国家近80%的葡萄用于酿酒, 而酿造葡萄酒后的下脚料—葡萄皮渣、葡萄籽等也有70%以上都得到了充分的利用, 据统计, 全世界年产葡萄籽208.2万t, 可产葡萄籽油29.1万t, 生产葡萄酒最多的法国、意大利等国家已有80%以上的葡萄籽得到了利用, 由于葡萄籽油中亚油酸含量占全部不饱和脂肪酸含量的75%以上, 近年来, 日、美等一些国家已有大量的含有亚油酸的功能食品面世, 巴西的苏瓦兰果皮公司用葡萄籽油代替进口的甜杏仁油、椰子油和棕榈油, 作为理想的食用油和工业及化妆品用油。除此之外, 欧美等发达国家如法国、西班牙、德国等对葡萄皮渣中葡萄籽油的开发利用已经建立了自己的生产加工企业。

3.2 国内葡萄籽油的开发利用状况

我国葡萄酒业的发展起步较国外晚一些, 大多数的葡萄酒厂家对于酿酒葡萄的利用都仅仅停留在酿造葡萄酒的这个认识上, 而对于酿造过程中所产生的葡萄籽的深层次的综合开发利用至今未成规模。随着现代社会市场的需求, 我国有越来越多的葡萄酒企业扎根落户, 这也意味着每年伴随葡萄酒产量的提高也会产生数万吨的酿酒废渣。这些废渣或用作动物养殖饲料, 或被作为肥料, 或用于其他方面的综合开发利用, 但较深层次综合利用的比例和程度还有上升的空间。目前, 随着我国人民的科学素养和健康理念的提高, 对葡萄籽油中天然活性物质认识的逐步深入, 开始对葡萄籽油中的有效成分进行研究。

4 我国葡萄籽油开发利用中主要存在的问题

4.1 葡萄籽中有效成分没有得到充分利用

随着我国每年葡萄种植面积的扩大, 葡萄产量的增加, 酿酒过程中所排放的葡萄籽的数量也越来越多, 我国80%的酒厂将这批数目可观的葡萄籽简单的当作饲料或者肥料处理, 有的酒厂甚至将其排放到环境中, 给环境带来了一定的污染源, 葡萄籽中丰富的油脂和粗蛋白, 它们优良的生物价值和药理作用得不到充分的利用。

4.2 缺少葡萄籽油综合利用的技术设备

我国葡萄酒厂用于酿酒的设备大多数都是从国外进口而来的, 而这些进口的设备大多是由于不够节约能源或者在某些方面存在缺陷已被国外酒厂所淘汰的。并且目前我国对酿酒皮渣的综合利用还没有开始实施, 所以像适合国内企业的葡萄籽的深加工、皮渣的综合利用设备, 节约能源的速冻设备等目前在国内还很少有厂家生产。

4.3 重视度低, 产业滞后

由于我国葡萄产业起步较其他国家晚, 发展缓慢, 国家政策对该产业的重视度不够高, 随着人们对葡萄酒认识度的提高, 近年来我国也加强了这方面的政策扶持力度, 使得葡萄产业成为我国十大支柱产业之一。

因此, 我国当前酿酒葡萄的开发利用已经不能满足人们对于酿酒葡萄价值开发的需要, 迫切需要更深层的对酿酒废渣进行综合开发利用, 更加全面的实现葡萄皮渣的生物价值、经济价值和社会价值。

参考文献

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[3]宋文章.掌握时机建立优质、稳定的葡萄原料基地[J].中外葡萄与葡萄酒, 2000 (2) :52-53.

葡萄籽提取物 篇8

1 材料与方法

1.1 试剂、葡萄籽与仪器

95%乙醇、硫酸、盐酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸、考马斯亮蓝G-250(分析纯),购自丹阳市永丰化学试剂厂;菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、牛血清蛋白标准品,购自上海源叶生物有限公司;葡萄籽,取自宁夏玉泉葡萄酒厂。

高效多功能粉碎机(RHP-500A型),购自永康市荣浩工贸公司;数显恒温干燥箱(DH6-9073),购自常州博宏高科技设备有限公司;电子天平(FA1104),购自上海舜宇恒平科学仪器有限公司;高速冷冻离心机(GL-21M),购自上海市离心机械研究所有限公司;数显恒温水浴锅(B-260),购自上海亚荣生化仪器厂;循环水真空泵(SHZ-DⅢ),购自巩义市予华仪器有限责任公司;紫外可见分光光度计(UV-7502),购自上海欣茂仪器有限公司;KDN-05A定氮仪,购自上海贝特仪电设备厂;PHSJ-3F酸度计,购自上海雷磁仪器厂。以上仪器均来源于常州工程职业技术学院生物制药生产性实训基地分离纯化技术实验室。

1.2 试验设计

1.2.1 工艺流程及蛋白质的提取

葡萄籽粉碎后加水离心,脱去种皮、干燥籽仁(胚乳和胚);加入磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液和一定量的酶,在一定温度、p H值条件下酶解一定时间后,90℃灭酶活10 min;反应液以7 000 r/min低温离心15 min,收集上清液,膜过滤,测定蛋白质含量;滤液在等电点沉淀蛋白质,用纯化水洗涤沉淀蛋白质3~5次,干燥,得蛋白质提取物。

1.2.2 葡萄籽仁蛋白质含量的测定

葡萄籽粉碎后加40%纯化水,10 000 r/min离心15 min;将分离出的籽仁干燥,采用凯氏定氮法测定蛋白质。酶提液中的蛋白质含量采用考马斯亮蓝染色法测定。

1.2.3 混合酶提法的单因素试验

将2 g葡萄籽仁粉溶于0.2 mol/L磷酸缓冲溶液中,分别以混合酶浓度、酶解温度、p H值和料液比(籽仁粉与磷酸缓冲溶液的比例)进行单因素变量平行试验(重复3次),试验设计见表1。

1.2.4 混合酶提法的正交试验

根据单因素试验结果,采用L9(34)正交表设计正交试验,以此确认混合酶提取葡萄籽蛋白的最佳提取条件,由于酶浓度受料液比影响较大[1],故本试验固定选择料液比为1∶30。

2 结果与分析

2.1 葡萄籽仁蛋白质含量测定结果

葡萄酿酒后的皮渣中,籽重占总重量的78.48%,皮渣重占21.52%。将葡萄籽仁高速粉碎,离心,得籽仁干重占籽重的43.25%。

2.2 蛋白质标准曲线

以0~30μg/m L标准浓度制作标准曲线,首先取6只干净的具塞试管,按表2取样。具塞后倒转混匀,静置2 min后在595 nm波长测定吸光度(A),以结果绘制蛋白质标准曲线,见图1。

由图1可知,线性方程为y=0.004 1x-0.000 9(x表示提取液中蛋白质含量,y表示吸光度,R2=0.990 1)。说明该曲线线性关系良好,线性方程可用。

2.3 单因素试验结果

2.3.1 混合酶浓度对蛋白质提取率的影响

见图2。

由图2可知:在料液比1∶30、时间50 min、温度50℃、p H值为7的条件下,蛋白质提取率随着混合酶用量的增加而上升,当混合酶用量为0.30 g/m L时蛋白质提取率高达90.2%;但在混合酶用量为0.18~0.30 g/m L时蛋白质提取率的上升幅度较小。结合生产工艺的经济性,选择用酶量为0.18~0.22 g/m L。

2.3.2 酶解温度对蛋白质提取率的影响

见图3。

由图3可知:在料液比1∶30、混合酶量为0.18 g/m L、p H值为7.5、反应时间50 min的条件下,蛋白质提取率随着混合酶反应温度的上升而提高,当反应温度为55℃时蛋白质提取率达89.4%;当混合酶反应温度大于55℃后,酶活性逐渐降低,导致蛋白质变性,酶失活,故温度应控制在50~55℃之间。

2.3.3 酶解时间对蛋白质提取率的影响

见图4。

由图4可知:在料液比1∶30、混合酶量为0.18 g/m L、p H值为7.5、温度为55℃条件下,混合酶反应时间越长蛋白质提取率越高,且随着提取时间的延长提取率提高,在25~55 min内增长速率很快;55 min后,随着时间的延长,蛋白提取率变化不大。因此,从缩短生产周期考虑,提取时间应选择55 min为宜。

2.3.4 p H值对蛋白质提取率的影响

见图5。

由图5可知:在料液比为1∶30、混合酶量为0.18 g/m L、温度为55℃、时间为50 min条件下,p H值5.5~7.5范围内,蛋白质提取率随着p H值的升高而提高;当p H值为7.5时达到峰值;随后p H值与酶活性呈反比关系,当p H值超出8.0,溶液变为强碱性时,蛋白质过度水解,提取率降低。因此,提取蛋白质的最适p H值为7.5。

2.3.5 料液比对蛋白质提取率的影响

见图6。

由图6可知:在混合酶量为0.18 g/m L、温度为55℃、时间为50 min、p H值为7.5的条件下,蛋白质提取率随着料液比在1∶5~1∶30间的变化而提高;但当料液比1∶30之后,蛋白质提取率增幅较小,符合酶促反应动力学,料液比增大则反应体积也随之增加。从试剂成本和降低浓度消耗等因素考虑,混合酶提取葡萄籽仁蛋白质的料液比在1∶25~1∶30间最佳。

2.4 正交试验结果

见表3。

注:M1、M2、M3分别为酶量0.10,0.20,0.24 g·m L-1,S1、S2、S3分别为温度45,50,55℃,P1、P2、P3分别为p H值7.0,7.5,8.0,T1、T2、T3分别为时间50,55,60 min。

由表3可知:在料液比1∶30时,各因素对蛋白质提取率的影响混合酶浓度>反应温度>p H值>反应时间,最佳工艺组合为M3S3P2T1,此时蛋白提取率达92.7%。通过对M3S3P2T1进行3次重复验证试验,平均提取率为92.3%,其中酶浓度与酶解温度对提取率影响较大,酶解时间与p H值的影响较接近。

3 讨论与结论

提取葡萄籽仁中的蛋白质,本试验在葡萄籽仁与0.2 mol/L磷酸缓冲溶液之比为1∶30、混合酶浓度为0.24 g/m L的菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶1∶1等量混合、反应温度55℃、提取时间50 min的工艺条件下,提取率达到90%以上,此结果与吴炳云等[2]、仵昱舟等[3]采用单一酶提法(89.9%、94.1%)提取蛋白质的结果相近。而葡萄籽仁优选分离后,具有酶用量少、提取的蛋白质外观色泽纯白、不需进一步脱色处理、分离出的籽壳和皮渣可进一步提取原花青素等优点,此法对综合开发利用酿酒葡萄的下脚料具有较好的应用价值。

摘要:以酿酒葡萄籽为原料,将籽仁分离后,用干燥籽仁,在料液比1∶30条件下,对菠萝蛋白酶与木瓜蛋白酶等量混用量、酶解温度、时间、pH值4个因素,采用正交试验法对籽仁中蛋白质提取最佳工艺参数进行探讨。结果表明:各因素对蛋白质提取率的影响次序为酶量>温度>pH值>时间;最佳工艺参数:混合酶量为0.24 g/mL,提取温度为55℃,pH值为7.5,提取时间为50 min。在最佳工艺下酿酒葡萄籽仁蛋白提取率达92.7%。

关键词:葡萄籽仁,蛋白质,混合酶,正交试验,提取工艺,优化

参考文献

[1]谭志光,唐书泽,汪勇,等.酶法制取早籼米浓缩蛋白[J]食品与发酵工业,2006,31(4):54-57.

[2]吴炳云,黄晓辉,杨振杰,等.酶法提取葡萄籽中蛋白质的工艺研究4[J].化学工程与装备,2014(2):34-38.

葡萄籽提取物 篇9

2008年春节过后,29岁的张丽雯在北京大兴租下了一个10亩地大的樱桃园,种植法国大樱桃,这种樱桃属于水果中的“贵族”,价格高但储存期却很短。

2009年6月的一天,张丽雯到京郊去看望一位大学同学。女同学端出洗好的几大串葡萄招待她,一不留神,张丽雯被葡萄籽咯了牙。

女同学说,葡萄好吃籽难咽,吃葡萄的时候费时费力,可是对于葡萄深加工企业来说,这点小麻烦真算不上什么。见张丽雯听得一头雾水,女同学解释说,她供职的单位是一家生产葡萄酒的大企业,那些原料经过发酵后剩下大量的葡萄籽没处扔,日积月累堆积如山,让老总颇感头疼。

因为葡萄籽的外壳非常坚硬,牛羊不吃,想沤成肥料又很难腐烂,所以,企业曾动员农民将它们拉回家烧火,可是现在的农村,很多家庭早就用液化气和电磁炉做饭了,谁还愿意受那种烟熏火燎的罪?后来,酒厂专门与种植户签下协议:“我收购你的葡萄,但你必须负责把籽给拉走。”就这样,处理废料的苦差事,就落到了那些卖葡萄的农民头上。女同学调侃说,北京周围的葡萄酒厂和罐头厂那么多,估计这小小的葡萄籽把他们折腾惨了。

张丽雯却琢磨开了:这种讨人嫌的废弃物,能否有效利用起来呢?

一天,张丽雯在网上聊天时,顺便提到了这件事。有网友在欧洲留学时,曾在世界著名葡萄酒产地法国波尔多地区看到农场主用葡萄籽榨油,这种植物油颜色很漂亮,有一股淡淡的香味,据说还有美容的特殊功效,不仅价格不菲,在欧洲甚至比大名鼎鼎的橄榄油还受欢迎。

张丽雯登录一家国外的农业网站,一查,还真有这方面的信息。更让她高兴的是,网上还有一些提炼葡萄籽油的小型成套加工设备出售,而且厂家负责提供加工技术方面的资料,甚至可以免费培训。

经过一番调查,张丽雯发现在京津塘地区,生产葡萄酒和其他从事葡萄深加工的企业很多,比如葡萄罐头、葡萄饮料等等。对这些企业来说,葡萄籽是毫无用处的废弃物,处理起来是一件很麻烦的事,如果有人主动上门拉走,他们肯定求之不得。“资源非常丰富,而且不用花一分钱!”张丽雯敏锐地感觉到,这是个商机。

2009年8月,张丽雯赴法国考察。据专家介绍,葡萄籽里蕴含丰富的营养成分,比如,原花青素的含量大概在4%左右,亚油酸含量在70%左右,此外还有维生素E、维生素A等多种人体需要的矿物质。

“花生、大豆能榨油,这么小的葡萄籽还能榨油?”张丽雯有些搞不懂。专家解释,葡萄籽的外壳是一层坚硬的木质,是不含有油的。外壳里面有一层小仁,主要的营养价值都在这个仁上,可以出油。不过,要从小小的葡萄籽里压榨出食用油来,可真不是一件容易的事,需要有很丰富的经验和独到的技术,而且对葡萄籽的湿度、压榨温度还有机械设备都有很高的要求。

张丽雯和男友筹资300万元从法国采购成套压榨设备,建起“葡萄籽榨油厂”。100斤葡萄籽,大概可以压榨出10斤植物油,出油率很高。张丽雯给葡萄籽油的定价很低,每公斤仅20元,别说跟芝麻油相比,甚至比花生油都便宜。但是,很多人对葡萄籽油还不了解,需要进行市场推广。

葡萄籽油刚上市时几乎无人问津,粮油经销商摇头,农贸市场的小贩不愿代销。张丽雯在网上向人们推介:“北京的网友可以免费得到赠品试吃。”这一招挺灵,渐渐地开始有人下订单了。

2010年初,一位老板主动找上门,大大咧咧地对张丽雯说:“从现在开始,你的葡萄籽油我全部负责收购,只要保证长期供应就行了,价钱仍按每公斤20元。” 张丽雯心想,天上怎么忽然掉下个大馅饼,他不会是骗子吧?对方一点都不含糊,写好合同后,一下拿出40万元定金。不过,他也立了一条很严厉的“规矩”,那就是张丽雯生产的油只能供应给他,若私下卖给别人,必须支付50万元违约金。他还鼓励张丽雯添置设备、增加产量,并答应帮她拿到一笔低息贷款。张丽雯感到自己像在做梦似的,简直不敢相信这是真的!

后来,张丽雯在北京一家大型超市里看到了自己的产品,标价让她大吃一惊:450毫升一瓶的葡萄籽油卖价98元,700毫升的卖价146元。她故意同身边的一位中年女士搭讪:“这是什么油啊,价位可不低呀!”对方说:“葡萄籽油是高档货,几个月前朋友到家里玩时送来两瓶,觉得挺稀罕。平时我就用它拌菜吃,味道确实很不错。它不含没有胆固醇,据说对皮肤保养也很有好处。”还有一位先生告诉张丽雯:“我媳妇特别喜欢吃这油,主要是能美容养颜,所以就总买。”

有关资料显示,葡萄籽油一个最大的特点是,其不饱和脂肪酸含量特别高,达到90%左右,而不饱和脂肪酸对人体有降血压、降血脂、降血糖的效果。由于产品不愁销路,原料又基本不花钱,第一年张丽雯就赚了500多万元。接着,她采购了新设备,将生产能力一下提高了好几倍。

随着产量的不断增加,张丽雯遇到了一件很棘手的事:用机器剥离出来的葡萄籽外皮,渐渐堆成了一座小山。这些废弃物该如何处理呢?她向中国农业大学和中国农科院的专家请教,对方给她支了一招:用葡萄籽外皮和杏仁壳混合,经过高温炭化、活化后加工成活性炭。

专家说,炭化就是木材热解的过程,活性炭能吸附空气中的杂质,以及有净化水质的作用,可以广泛应用于饮用水、工业用水和废水的深度净化。5吨葡萄籽废壳,可以加工出1吨的活性炭,每吨可卖1.5万元左右。张丽雯又产生了新的想法:能否进一步挖掘活性炭的市场潜力,提升其使用价值?

技术人员攻关、反复试验,将活性炭压制成炭板,经过上色、绘制等工序后,一件件美轮美奂的炭雕工艺品就诞生了。葡萄籽壳和杏仁壳做成的活性炭韧性强,不易变形。不少人家里装修完房子后,想去除屋里的异味,便挂上这种炭雕工艺品。

张丽雯的炭雕和壁画,一件能卖到几百甚至上万元,在海外很受欢迎。现在,她每年加工上万吨的葡萄籽,开发出的系列活性炭产品多达几十个品种。这些一文不值的“垃圾”,摇身一变成了时尚宝贝。

2011年秋天,一位日本商人登门来找张丽雯合作。对方坦言,是看上了她手里有稳定的原料来源。此时的张丽雯已和国内很多家葡萄深加工企业,签订了废弃物承包利用合同。

日方表示,他们会提供技术和设备,从葡萄籽中萃取精华,生产一种美容口服软胶囊。这种保健品能够从深层保护皮肤,使皮肤免受环境污染。同时,它还能起到起到保护大脑细胞、保护眼睛和防辐射等方面的作用。

对张丽雯来讲,经过萃取后的葡萄籽,仍然可以榨油、制作活性炭,仅仅多出一道工序而已,却增加了一块非常客观的利润蛋糕。

后来,张丽雯看到北方农民在收割小麦时大量焚烧秸秆,造成高速公路上的“雾霾”,导致多起交通事故。日方合作商告诉她,秸秆粉碎后可制成高档压缩板,在日本,有关技术已相当成熟。

张丽雯计算了一下,如果将全国的秸秆都利用起来,一年就是上百亿的产值。更重要的是,如果用这些压缩板代替实木,每年就相当于再造几十万亩森林。张丽雯计划扩大与日商的合作,涉足这一绿色环保产业。

到2012年夏天,短短3年的时间,张丽雯就从废弃的葡萄籽中挖掘到了2000多万元的财富。她的成功创业说明:世上没有真正的垃圾,只有放错地方的宝贝!

编辑 魏光

戳一戳葡萄籽的神话 篇10

【葡萄籽里有什么】

经过成分分析, 发现葡萄籽含有大量的维生素E、类黄酮、亚油酸以及一类叫做“低聚原花青素复合物 (简称OPCs) ”的成分。除了亚油酸资质平平之外, 其他这些都具有很好的抗氧化性能。人体内会因为氧化产生一些自由基, 而自由基能够攻击细胞膜以及DNA等。现在一般认为, “氧化应激”与衰老以及多种疾病的发生有关。虽然转了几个弯, 但“抗氧化”似乎能与衰老与疾病搭上关系。于是乎, 各种“抗氧化剂”保健品应运而生。

直接吃葡萄籽难以下咽, 即使吞了下去, 也多半穿肠而过, 其中的“活性成分”很难被人体吸收。于是, 把活性成分提取出来, 做成保健品, 就成了利用它的必由之路。“葡萄籽提取物胶囊”就此诞生。

【关于葡萄籽那些声称】

因为葡萄籽提取物有那么多抗氧化成分, 对人体是不是真有保健功能也就引来了科学家们的许多关注。实验发现, 人们吃下葡萄籽提取物之后, 血液中的抗氧化剂含量显著增加了。也就是说, 葡萄籽提取物中的抗氧化成分, 的确可以被人体吸收。

这自然让商人们很兴奋——“能够被吸收进入血液”这一点, 可以让更多的人掏钱了。法国人喜欢美食, 吃的高胆固醇高脂肪的食物不少, 得心血管疾病的比例却比其他国家要低——这个现象被称为“法国悖论”。对这个悖论的一种解释是法国人喝葡萄酒很多, 其中含有的类黄酮成分有助于降低血脂和胆固醇, 从而保护心血管。葡萄籽提取物中含有大量的类黄酮以及其他抗氧化剂, 也就被演绎成可以“保护心脏”。不过, 这基本上是一种臆测, 迄今没有什么实验证据——把“法国悖论”归结于葡萄酒本身就不靠谱, 因为和葡萄酒一样含有类黄酮就说它能够“保护心脏”, 就更不靠谱了。

当然, 除了类黄酮, 葡萄籽提取物中有其他抗氧化剂。“整体”的提取物, 是不是能够保护心脏呢?有过一些很初步的动物实验, “似乎”对于降低胆固醇、保护血管有一定作用。不过这些实验太初步了, 仅仅只能是“没有否定这种可能”, 完全不能作为证据。在没有进一步可靠的人体实验出来之前, 还是不要当真的好。

抗癌自然是最有吸引力的。在一些体外细胞实验中, 葡萄籽提取物或者其中的OPCs对某些种类的癌细胞展示了更好的抑制作用。这也就是广告商们宣称“抗癌”的依据。需要说明的是, “体外实验能够抑制癌细胞”跟“吃了能抗癌”之间, 还有着遥远的距离。一方面, 它只是对某些特定的癌细胞有效。另一方面, 体外细胞实验跟体内的情况完全不同。体外细胞实验只能作为一种筛选工具, “有效”只是说明它没有被淘汰, 可以进行更进一步的研究。各个制药公司和癌症研究机构, 每年都会发现大量“体外细胞实验有效”的物质。越往后研究, 被淘汰出局的就越来越多, 最后能够通过临床试验证明“确实有效”的, 实在是凤毛麟角。

保健品喜欢宣称的一类功能是“辅助治疗”。2006年, 英国学者发表了一项葡萄籽提取物辅助癌症病人的二期临床研究。66位早年进行过乳腺癌放疗、有中等或者明显乳房硬结的志愿者, 被随机分为两组。一组44人服用葡萄籽OPCs, 每天三次, 每次100毫克。另一组22人服用安慰剂。12个月之后复查, 检测乳房硬结和乳房外观, 并由志愿者自己描述乳房硬度和疼痛感。结果是:两组没有差别。能够算得上“可能有效”的, 大概是缓解“慢性静脉功能不全”和水肿。前者是血液汇集在腿部, 引起疼痛、肿胀、乏力。而后者则可能跟受伤、手术或者久坐有关。一些研究显示服用葡萄籽提取物可能对这些症状有一定的缓解作用。除此之外, 各种美容、护肤、抗衰老之类的功能, 都是“美好的愿望”, 没有科学证据的支持。

【结论】

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