淋巴细胞免疫治疗

淋巴细胞免疫治疗（共12篇）

淋巴细胞免疫治疗 篇1

临床中反复性流产也被称为反复性自然流产, 属于妇科常见病之一, 反复性流产不仅受患者本身遗传因子的影响, 还会受到生活规律、生殖器官等因素的影响。研究显示, 反复性流产的发病原因很多, 如果得不到及时、准确地诊断和治疗, 会发生反复性流产, 给患者及家庭带来严重影响[1,2]。本研究探讨了淋巴细胞免疫治疗反复性流产的临床疗效, 现报道如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料选取2013 年4 月—2014 年3 月珠海市平沙医院收治的63 例反复流产性患者作为对照组。并选取2014年4 月—2015 年3 月收治的63 例反复性流产患者作为观察组。对照组患者年龄20 ~ 42 岁, 平均 ( 32. 7 ± 0. 9) 岁; 其中2 次流产35 例, 3 次流产24 例, 4 次流产4 例; 妊娠2 个月内流产29 例, 2 ~ 3 个月流产28 例, 3 个月以上流产6 例。观察组患者年龄21 ~ 41 岁, 平均 ( 30. 9 ± 0. 8) 岁; 其中2次流产32 例, 3 次流产26 例, 4 次流产5 例; 妊娠2 个月以内流产25 例, 2 ~ 3 个月流产31 例, 3 个月以上流产7 例。两组患者一般资料比较, 差异无统计学意义 ( P > 0. 05) , 具有可比性。

1. 2 方法对照组给予临床常规治疗, 观察组在对照组基础上给予淋巴细胞免疫治疗, 抽取配偶外周全血25ml, 通过对其进行细胞分离得出淋巴细胞, 将细胞数调整到30 × 106/ ml。每隔1 周给予患者双侧前壁内免疫注射, 每次注射约0. 4ml, 患者接受4 周治疗, 治疗后1 周给予患者封闭抗体检查, 在其封闭抗体升高情况下可嘱咐患者妊娠。

1. 3观察指标检测两组患者治疗前后的血清CA125水平[3]。

1. 4 临床疗效判定标准显效: 治疗后患者的临床症状腹痛、腰酸下坠等完全消失, B超检查显示妊娠正常。有效:治疗后患者的临床症状得到明显改善, B超检查显示妊娠正常。无效: 治疗后患者的腹痛、腰酸下坠等临床症状无明显变化, 甚至出现恶化, 发生流产[4]。总有效率= 显效率+ 有效率。

1. 5 统计学方法采用SPSS 15. 0 软件进行数据分析, 计数资料采用 χ2检验; 计量资料以± s表示, 采用t检验。以P< 0. 05 为差异有统计学意义。

2 结果

2. 1 两组患者临床疗效比较观察组总有效率高于对照组, 差异有统计学意义 ( P < 0. 05, 见表1) 。

注: 与对照组比较, *P < 0. 05

2. 2 两组患者治疗前后血清CA125 水平比较治疗前两组患者血清CA125 水平比较, 差异无统计学意义 ( P > 0. 05) ; 治疗后观察组患者血清CA125 水平低于对照组, 差异有统计学意义 ( P < 0. 05, 见表2) 。

3 讨论

随着我国卫生事业的不断发展, 生殖免疫学的研究水平不断进步, 很多学者对早期妊娠复发性流产更加关注, 近年来我国复发性流产的发病情况调查显示, 其发病率接近40% 。对于原发性习惯自然流产, 患者机体不能产生封闭性抗体, 可引起排斥胚胎的现象, 从而引发起流产, 另外机体对半同种抗原反应较低, 也会引发反复性流产[5]。

在妊娠早期可检查出封闭抗体, 封闭抗体的高峰主要在孕中期出现, 封闭抗体也具有一定的特征, 通常情况下, 可在妊娠初期血清中检出封闭性抗体, 同时随着妊娠周期的增加, 其血清中封闭抗体显示越来越多。同时对血清中的Ig G检出可有效显示封闭抗体的活性。另外, 血清Ig G封闭抗体与胎盘组织的Ig G活性具有同性。对于反复性流产患者, 其主要的发病原因是缺乏封闭抗体, 从而降低母体对胚胎的保护作用, 进而严重攻击胚胎, 导致流产[6]。

本研究主要给予观察组反复性流产患者淋巴细胞免疫治疗, 应用配偶淋巴细胞对患者进行治疗, 通过诱导淋巴细胞对母体产生刺激, 进而形成同样的免疫反应, 最终对封闭抗体产生相应的免疫保护作用[7]。本研究结果显示, 观察组总有效率高于对照组, 血清CA125 水平显著低于对照组, 差异显著。

综上所述, 淋巴细胞免疫治疗反复性流产的临床疗效显著, 能够有效改善患者的临床症状, 妊娠率较高, 具有较高的临床推广和使用价值。

参考文献

[1]王晓艳, 景军宁, 王文弟, 等.淋巴细胞免疫治疗不明原因复发性流产妊娠结局分析[J].兰州大学学报:医学版, 2013, 26 (1) :30-36.

[2]邢琪, 张坤, 滕雪峰, 等.淋巴细胞主动免疫治疗反复不明原因自然流产的临床效果分析[J].新疆医学, 2013, 38 (7) :58-60.

[3]朱芳芳, 申沛, 林耀蕙, 等.淋巴细胞主动免疫治疗不明原因复发性流产89例分析[J].中国医药指南, 2014, 16 (21) :32-33.

[4]张秦芳, 邓二丽, 秦兰.淋巴细胞主动免疫治疗反复性流产48例的观察与护理[J].中国误诊学杂志, 2012, 29 (17) :4159-4160.

[5]林慧, 王蕾, 段金良.淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产的疗效观察[J].中国优生与遗传杂志, 2015, 10 (3) :59-60, 62.

[6]杨学煌, 陈亚军, 曾宪琪, 等.淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产的疗效分析及妊娠结局观察[J].中国初级卫生保健, 2013, 16 (12) :63-64.

[7]白静, 赵芳, 李岩, 等.淋巴细胞主动免疫治疗母-胎免疫识别低下型反复性流产疗效分析[J].中国优生与遗传杂志, 2013, 39 (10) :67-68.

淋巴细胞免疫治疗 篇2

浅谈T细胞介导的细胞免疫应答及展望

文/李春华

摘 要：在人体的免疫系统中细胞免疫具有重要的作用，T淋巴细胞在细胞免疫中起着主导作用，同时在体液免疫中T淋巴细胞又有着递呈抗原的作用。对T淋巴细胞介导的免疫应答进行了一个简要综述。

关键词：T细胞；免疫应答；细胞免疫

成熟T细胞经血液分布至外周免疫器官的胸腺依赖区定居，并可经血液→组织→淋巴→血液，再循环周游全身以发挥免疫调节和细胞免疫功能。当T细胞识别某一特异性抗原，并由此启动T细胞免疫应答的活化、增殖、分化、效应阶段。另外，对发展与细胞外的微生物和细胞内栖息地转运的微生物战斗所需的体液免疫提供帮助方面也是重要的。

一、T细胞介导的细胞免疫应答

1.感应阶段

抗原是一类能刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞，并能与相应的抗体或致敏淋巴细胞特异性结合，发生免疫应答的物质，是引起特异性免疫的激发原。细胞毒性T淋巴细胞（CTL）可通过其细胞表面的受体（TCR），检查在所有人体细胞表面表达的MHCI类复合体的身份标记。

2.T细胞的活化、增殖和分化

免疫应答的重要过程是淋巴细胞的活化，（本文出自范文.先.生网 www.fWsir.com）而T细胞活化是细胞介导的免疫应答中的`不可缺少的内容。T细胞活化主要表现为细胞分裂增殖、克隆扩增，并出现分化，由静止状态转变为效应细胞并执行各种功能。

3.效应阶段

介导效应的T细胞有Th1细胞、Th2细胞、CTL。其中Th2细胞通过分泌细胞因子促进B细胞对TD-Ag的应答，Th1细胞主要介导炎症反应，CTL主要介导对靶细胞的杀伤作用。

二、T细胞的展望

T细胞介导的细胞免疫具有重要的病理生理学意义。具有抗感染、抗肿瘤和免疫损伤作用。一些原发性细胞免疫缺陷病，如，先天性胸腺发育不全（CTH），由于胚胎早期第Ⅲ、Ⅳ对咽囊神经脊皮发育不全所致，胸腺和甲状腺分别有第Ⅲ、Ⅳ对咽囊神经发育而成，所以CTH患者T细胞成熟受阻。移植胚胎胸腺以重建免疫功能，对本病有明显近期疗效。

我们相信随着细胞分子生物学技术的应用和研究手段的不断创新，T细胞许多未知机制将被逐渐阐明，人类将有可能调控影响T细胞功能的各种因素。对T细胞抗原识别和活化机理的进一步深入了解，不但有助于治疗各类感染疾病、抑制脏器移植时的排异反应、激活免疫反应，且将为开发这方面的新药物打下良好基础，也为自身免疫性疾病，移植排斥及多种肿瘤的治疗开辟新的途径。

参考文献：

郑武飞。医学免疫学［R］。人民卫生出版社，1985-05.

淋巴细胞免疫治疗 篇3

【摘要】目的：探讨精益管理在复发性流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）免疫治疗中的应用效果。方法：2016年4月至5月在我院围产期保健科收集650名RSA免疫治疗患者作为精益管理前组，2016年6月至7月600例RSA免疫治疗患者作为精益管理后组，比较实施精益管理前后的病人满意度。结果： 精益管理后组患者的治疗及等候时间少于管理前组（P<0.05），满意度明显高于管理前组（P<0.05）。结论：在RSA免疫治疗中应用精益管理，从细节出发，能缩短患者的治疗及等候时间，提高患者满意度，提高治疗的成功率，促进医院的可持续发展。

【关键词】精益管理；复发性流产；淋巴细胞免疫治疗室；满意度

【中图分类号】R-0 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2016）05-01290131-02

精益管理的核心就是以最小的资源投入，包括人力、设备、资金、材料、时间和空间，创造出尽可能多的价值，为顾客提供新产品和及时的服务[1]。精益化管理从企业管理发展而来的一种文化理念，是医院发展中重要的一种管理方式[2]。在医院门诊复发性流产淋巴细胞免疫治疗流程中，运用精益管理的方法和理念改善工作。通过对比应用精益管理前后患者满意度，初显成效。现报告如下：

1. 资料与方法

1.1 一般资料

选择将2016年4月至5月在我院围产期保健科650名免疫治疗患者作为管理前组，年龄20～38岁，平均年龄28.5 2±4.84岁。将2016年6月至7月600名免疫治疗患者作为管理后组，年龄20～38岁，平均年龄27.92±5.12岁。两组免疫治疗患者的一般资料无差异（P>0.05）。

1.2 分析抗体治疗室存在的问题

改造前RSA免疫治疗室存在的问题：①治疗的物品摆放不规范；②抗体治疗室上班由一名专科护士负责，人手短缺，专科性强；③每次抽血治疗前需要供血者参与，采血治疗前需要等待医生开单收费；④供血者需早上空腹抽血，赶时间上班，未到上班时间治疗不能交费；⑤采血前家属需要自己排队写名字；⑥护士运送标本，过程耗时较长，周末不安排治疗；⑦每位供血者及患者治疗前等候时间较长；⑧皮内注射病人疼痛感不一，易晕针；⑨治疗的病人较多，外地患者预约及咨询电话难打；⑩患者对疾病缺乏相关知识，情绪低下缺少信心。

1.3精益管理方法的制定

结合RSA免疫治疗的特点，召集全科室人员将精益管理作为主题，集思广益，从细节出发，提出改善方法。合理分析存在问题及时提交讨论和持续改进，合理安排相关工作，在原有流程的基础上进行优化和改进，为病人提供优质的服务，降低医患纠纷，提高病人的满意度，获取最大经济效益。经会议讨论的治疗流程为：多名护士协助→排队刷卡获取病人的相关资料→护士收费→打印抽血条形码粘贴注射器→排队等号→等待采血→导医运送标本→分离提取淋巴细胞→淋巴细胞免疫治疗→预约下次治疗。

1.4 精益管理方法

①对治疗室进行5S优化管理，营造良好舒适的环境，治疗室物品摆放整齐设置专柜，按规范化摆放，位置固定，标识明确；②构建完善的管理体系、分层次组织学习、加强护士培训、定时派送相关人员进修学习，提高人员专业技术水平；③设置采集新鲜血与库存血的办法供家属选择，节约每次往返医院的时间和费用。第一次抗体治疗后由护士收费，实行弹性排班，高峰期增加人员密切搭配，提高效率和服务质量；④门诊各楼层设置实现24小时自助挂号缴费机，解决了患者上班排长队交费的现象，缩短患者等候时间；

⑤在治疗室添加无线叫号系统，患者通过医卡通读取患者相关信息，患者在等候区等待，护士通过电脑信息及条形码对患者身份识别并核对；⑥由导医运送标本，护士把时间留给病人；⑦周末安排免疫治疗，以照顾上班患者，保证患者的治疗需求得到满足；⑧医护人员热心服务，晕针患者加强与其沟通交流，了解患者心理状态，转移注意力，消除不良情绪，出现不良反应及时告知、安慰患者，避免患者害怕、恐慌。鼓励家属与患者进行沟通，增加情感交流，引导丈夫参与其中；

⑨分时段治疗模式：根据患者治疗的特点，合理设置每小时治疗的数量，患者不需太早到医院候诊，分流治疗人群，避免无效等候和拥挤；⑩实施多元化预约咨询方式：开通网络、电话、现场、自助机、QQ、微信、公众号等途径，同时自助机、就诊卡绑定银行卡等能实时支付，减少人员滞留；?发放宣传册、现场咨询等多种形式向患者宣传RSA病因与治疗相关知识，指导患者配合治疗，建立免疫治疗专项病历，记录治疗时间、检查结果，定期电话随访，提高患者满意度。

1.5效果评价

采用自行设计的问卷对两组接受RSA免疫治疗患者进行满意度调查，其中调查表包含“满意、比较满意、一般满意、不满意”四个等级，其中满意度=1-（不满意人数/总调查人数）×100%。满意度的内容包括：环境设施、护患沟通、技术操作、服务态度、等候时间等5个方面。共发放问卷及满意度测评表1250份（其中管理前组650份，管理后组600份），全部回收，有效回收率为100%。

1.6 统计分析

将所采集到的数据全部录入excel表格中，采用SPSS 20.0软件进行数据统计及分析，计量资料采用均数±标准差表示，计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1.实施精益管理前后病人满意度比较

分析精益管理前、后淋巴细胞免疫治疗患者对护理服务的满意度，结果显示管理后组明显优于管理前组，针对健康宣教、护患沟通、服务态度、受尊重和等候时间等内容进行比较，管理前组和管理后组5项内容均有统计学意义（P均<0.05），见表1。

3. 讨论

门诊是医院的重要窗口，接触患者最多，病人满意度对医院的形象和效益有着重要影响。如何从细节做起，要求医护人员站在患者的角度，着眼于患者的心理感受换位思考，以患者实际需求为出发点，从每个措施步骤入手，急病人所急，想病人所想，为病人提供方便、快捷、增值的服务[3]。针对流程的某些环节进行合并、删减、纠错，将浪费转化为价值，从而达到改善的目的。通过精益化管理对抗体治疗流程进行持续改善，为病人提供优质服务。充分利用医疗资源，降低医院运行成本，缩短患者候诊时间，提高治疗效率，提高患者满意度及医疗服务质量[4]。能真正意义上体现“以病人为中心”，同时促进医院文化建立与发展，增强医院竞争力，推动医院的可持续发展[5]。本次研究结果表明，在淋巴细胞免疫治疗流程改造中应用精益管理后，病人满意度明显高于治疗前组，且差异具有统计学意义。

参考文献：

[1][1]练冬慧.精益管理在抽血室流程改造中的应用[J].医药前沿， 2015， 5（8）： 322-323.

[2][2]陈书人，王跃建，杨智才，等.应用精益管理优化门诊流程的实践与效果[J].中华医院管理杂志，2013， 29 （6）：430-432.

[3][3]胡峥毅，俞红英. 精益化管理在门诊服务品牌建设中的应用[J]. 医院管理论坛， 2013， 30（7）：19-20.

[4][4]苟相国.自然流产患者封闭抗体检测及免疫治疗临床研究[J]. 医学信息， 2014，12 （27）：439 -440.

淋巴细胞免疫治疗 篇4

1 对象和方法

1.1 研究对象

选择2009年7月—2012年6月连续发生2次或2次以上的自然流产并经病因筛查排除遗传、解剖、内分泌、感染及男方因素;夫妇抗精子抗体 (As Ab) 、抗子宫内膜抗体 (Em Ab) 、抗心磷脂抗体 (ACA) 均阴性;患者年龄24岁~33岁, 平均年龄28.2岁, 既往无活产史, 自然流产2~6次, 流产时孕周5周~14周, 平均9.14周的21例患者作为研究对象。

1.2 方法

清晨空腹时抽取患者男方或健康第三者的静脉血20~25 m L, 加肝素抗凝, 以淋巴细胞分离液分离出淋巴细胞, 生理盐水洗涤3~4次制成淋巴细胞悬液。于女方前臂内侧分5~6次皮内注射形成小皮丘, 皮丘直径1 cm~1.5 cm, 观察30 min。治疗后第3, 7天继续观察局部反应, 每3周治疗1次, 3次为1个疗程, 1个疗程结束后复查封闭抗体, 可计划怀孕, 孕后继续治疗至孕20周。

2 护理干预

2.1 相关知识宣教

向患者讲解URSA的发生机制、诊断标准、注意事项及主动免疫治疗的操作规程。反复自然流产传统定义为3次或3次以上连续自然流产, 有关研究显示连续2次流产后再次发生的风险与传统3次流产后相似, 通常把反复自然流产者2次及以上、经过筛查未发现异常者定义为URSA。

治疗前询问患者的过敏史, 有无过敏性体质。治疗时注意观察, 让患者知晓若局部出现红、肿、热、痛、痒等反应均属正常的免疫反应, 无需特殊处理, 一般1周内会逐渐减弱至消失;若发生体温升高至38℃或出现全身瘙痒等症状时要及时就诊, 切记不要抓挠, 防止皮肤破溃导致感染。

治疗期间注意避孕, 治疗3次后可以妊娠, 一旦妊娠立即保胎治疗, 讲解注意事项, 注意休息, 缓解精神紧张, 避免剧烈活动和性生活, 遵医嘱使用保胎药。

2.2 心理护理

良好的心理状态是保证治疗成功的重要前提。大多患者在婚后经过数次反复流产而导致了焦虑和恐惧心理, 这些精神因素会使子宫对交感神经的兴奋性增加而导致流产和早产[3]。指导患者保持良好的心理状态, 取得患者的信任与合作, 建立良好的护患关系, 做患者的朋友, 鼓励患者说出心中的疑虑, 了解她们的心理问题并正确评估其心理状态。有针对性地因人施教, 注意沟通技巧, 及时解答患者的疑问, 使患者以积极的心态正视自己的病情。同时, 做好患者家属的思想工作, 适时进行宣教, 家属的理解支持是患者心理健康的坚强后盾。充分利用患者的社会支持网络进行心理干预, 鼓励患者上网交流, 如患者愿意可以互留电话, 交流心得。同时, 尊重患者的隐私权, 为患者保密。

2.3 饮食宣教

习惯性流产患者大多体质虚弱, 需要合理饮食, 多食高蛋白、高维生素、易消化的饮食[4], 禁食酸、辣、冷、油腻等刺激性食物。

3 结果

21例患者经过1~2个疗程的免疫治疗, 复查后17例患者封闭抗体从阴性转为阳性, CD3、CD4、CD8其中一项转阳3例, 两项转阳7例, 全部转阳性者7例;妊娠13例, 妊娠成功率为61.9%。

4 讨论

通过护理干预, 患者能充分认识自己的病情, 了解主动免疫治疗的方法、过程、结果等, 使其树立战胜疾病的信心;并且能正视自己的疾病, 放下心理负担, 解除疑虑, 更好地配合治疗及护理, 从而显著提高URSA患者的妊娠成功率。

摘要：目的 观察淋巴细胞免疫治疗不明原因复发性流产 (URSA) 患者的治疗后反应及护理干预对提高妊娠成功率的作用。方法 对采用淋巴细胞主动免疫治疗的URSA患者进行观察、分析。结果 21例患者经过12个疗程的治疗, 17例患者封闭抗体从阴性转为阳性, 从而降低了受孕后发生流产的概率。其中妊娠13例, 妊娠成功率为61.9%。结论 淋巴细胞主动免疫治疗可提高URSA患者的保护性免疫反应, 提高妊娠成功率。个体化的护理干预是提高妊娠成功率的关键。

关键词：不明原因复发性流产 (URSA) ,护理干预,淋巴细胞主动免疫治疗,妊娠成功率

参考文献

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免疫细胞的分离和保存技术 篇5

用体外方法对机体各种具有免疫反应的细胞分别作鉴定、计数和功能测定，是观察机体免疫状态的一种重要手段。为此，须将各种参与免疫反应的细胞从血液或脏器中分离出来。参与免疫反应的细胞主要包括淋巴细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等。由于检测的目的和方法有同，分离细胞的需求和技术也异。有的仅需分离白细胞，有的则需分离单个核细胞（mononuclearcell），其中含淋巴细胞和单核细胞（monocyte），有的则需分离T细胞和B细胞以及其亚群。分离细胞选用的方法应力求简便可行，并能获得高纯度、高获得率、高活力的细胞。现用分离细胞群的原则，一是根据各类细胞的大小、沉降率、粘附和吞噬能力加以组分，另一则按照各类细胞的表面标志，包括细胞表面的抗原和受体加以选择性分离。

一、白细胞的分离

（一）血液中红细胞与白细胞比例约600～1000:1，两者的比重不同其沉降速度亦异，通常用两种方法加以分离。

本法是利用血细胞自然沉降率的分离法，采集血液后应及时抗凝，通常选用肝素抗凝法。肝素能阻止凝血酶原转化为凝血酶，从而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白而防止血液凝固。操作原则是将含抗凝血的试管直立静置室温30～60min后，血液分成明显三层，上层为淡黄色血浆，底层为红细胞，紧贴红细胞层上面的灰白层为白细胞，轻轻吸取即得富含白细胞的细胞群，离心洗涤后加入少量蒸馏水或含氯化铵的Gey溶液，经短时间的低渗处理，使红细胞裂解，经过反复洗涤可得纯度较高的白细胞悬液。

（二）聚合物加速沉淀法

本法是利用高分子量的聚合物如明胶、右旋糖酐、聚乙烯吡喀烷酮（polyvinylpyrolidone，PVP）等使红细胞凝集成串，加速红细胞沉降，使之与白细胞分离。本法的细胞获得率比自然沉降法高。

二、外周血单个核细胞的分离

外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同，红细胞和多核白细胞密度较大，为1.090左右，而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075～1.090，血小板为1.030～1.035。为此利用一种密度介于1.075～1.092之间而近于等渗的溶液（分层液）做密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。常用的分层液有Ficoll和Percoll两种。

（一）Ficoll分层液法

主要用于分离外周血中的单个核细胞，是一种单次密度梯度离心分离法。聚蔗糖－泛影葡胺是一种较理想的细胞分层液，其主要成分是一种合成的蔗糖聚合物称聚蔗糖（商品名为Ficoll），分子量为40kD，具有高密度、低渗透压、无毒性的特点。高浓度的Ficoll溶液粘性高，易使细胞聚集，故通常使用60g/L的低浓度溶液，密度为1.020，添加比重为1.200的泛影葡胺（urografin）以增加密度。国外常用商品Isopaque或Hypaque，故又称Ficoll-Hypaque分层液，将适量340g/L泛影葡胺加入Ficoll溶液中即可配制成密度合适分层液。分离人外周淋巴细胞以密度为1.077±0.001的分层液最佳，因为人的红细胞密度为1.093，粒细胞密度为1.092，单个核细胞在1.076～1.090之间。而不同动物血中的单个核细胞对分离液的密度要求各不相同，如小鼠为1.088，马为1.090。分离时先将分层液置试管底层，然后将肝素化全血以Hanks液或PBS液作适当稀释后，轻轻叠加在分层液上面，使两者形成一个清晰的界面。水平式离心后，离心管中会出现几个不同层次的液体和细胞带（图20-1）。

红细胞和粒细胞密度大于分层液，同时因红细胞遇到Ficoll而凝集成串钱状而沉积于管底。血小板则因密度小而悬浮于血浆中，唯有与分层液密度相当的单个核细胞密集在血浆层和分层液的界面中，呈白膜状，吸取该层细胞递经洗涤高心重悬。本法分离单个核细胞纯度可达95％，淋巴细胞约占90％～95％，细胞获得率可达80％以上，其高低与室温有关，超过25℃时会影响细胞获得率。

（二）Percoll分层液法

这是一种连续密度梯度离心分离法。Percoll是一种经聚乙烯吡喀烷酮(PVP)处理的硅胶颗粒，对细胞无毒性。利用Percoll液经高速离心后形成一个连续密度梯度的原理，将密度不等的细胞分离纯化。用Percoll原液(密度1.135)与约等量双离子强度的磷酸缓冲液均匀混合，高速离心后，使分层液形成一个从管底到液面密度逐渐递减的连续密度梯度，再将已制备的单个核细胞悬液轻轻叠加在液面上，低速离心后，便得四个细胞层。表层为死细胞残片和血小板，底层为粒细胞和红细胞，中间有两层，上层富含单个核细胞(75％)，下层富含淋巴细胞(98％)(图-2)。该法是纯化单核细胞和淋巴细胞的一各较好的方法，但操作流程较长，手续较多。

图-2 连续密度梯度离心法分离单个核细胞中各细胞成分的分布示意图

三、淋巴细胞及其亚群的分离

为研究免疫细胞的功能，常需高纯度的淋巴细胞或其亚群，分离方法介绍如下。

（一）、纯淋巴细胞群的采集

通常利用单核细胞在37℃和Ca2+存在条件下，能主动粘附在玻璃、塑料、尼龙毛、棉花纤维或葡聚糖凝胶的特性，据此建立许多从单个核细胞悬液中去除单核细胞的方法，藉以获得高纯度的淋巴细胞群。

（1）粘附贴壁法

将已制备的单个核细胞悬液倾于玻璃或塑料平皿或扁平小瓶中，移至37℃温箱静置1h左右，单核细胞和粒细胞均贴于平皿壁上，而未贴壁的非粘附细胞几乎为纯淋巴细胞，继用橡皮刮下贴壁的细胞即为纯单核细胞群。因B细胞也有贴壁现象，用本法分离的淋巴细胞群中B细胞有所损失。

（2）吸附柱过滤法

将单个核细胞悬液注入装有玻璃纤维或葡聚糖凝胶SephadexG10的柱层中，凡有粘附能力的细胞绝大部分被吸附而粘滞在柱层中，从柱上洗脱下来的细胞主要是淋巴细胞。此法简单易行，对细胞极少损害。

（3）磁铁吸引法

利用单核细胞具有吞噬的特性，在单个核细胞悬液中加直径为3μm的羰基铁颗粒，置37℃温箱内短时旋转摇动，待单核细胞充分吞噬羰基铁颗粒后，用磁铁将细胞吸至管底，上层液中含较纯的淋巴细胞。

（二）、淋巴细胞亚群的分离

分离相当纯化的淋巴细胞亚群是细胞免疫检验的基本技术。其原则是根据相应细胞的特性和不同的标志加以选择性纯化。凡根据细胞的特性和标志选择纯化所需细胞的方法是阳性选择法；而选择性去除不要的细胞，仅留下所需的细胞是为阴性选择。常用以下几种方法：

（1）E花环沉降法

本法是将淋巴细胞与一定比例的绵羊红细胞混合，待淋巴细胞形成E花环后，继用淋巴细胞分层液分离细胞。浮悬在分层界面而不形成E花环的群则富含B细胞，而沉降在管底的形成E花环的细胞用低渗法处理，使围绕细胞周围的绵羊红细胞快速裂解，则获得纯的T细胞。

（2）尼龙毛分离法

本法利用B细胞和单核细胞具有易粘附于尼龙纤维表面的特性，可将T和B细胞分开。操作原则是取松散而经过处理的尼龙毛（聚酰胺纤维），均匀充填在内径5～6nm的聚乙烯塑料管（饮料管即可）内，经Hanks液浸透保温，将单个核细胞悬液加入柱内，放37温箱静置1～2h。用预温的含10％～20％小牛血清培养液灌洗，洗脱液内含有非粘附的T细胞，重复灌洗几次以除去管内残留的T细胞。再用冷或温培养液边冲边洗边挤压塑料管，此时洗脱液内富含B细胞。如此得到的T细胞纯度在90％以上，B细胞纯度可达80％。

（3）亲和板结合分离法

利用亲和层析法分离淋巴细胞亚群，其原理是各种淋巴细胞亚群具有不同的抗原性，将相应抗体结合于塑料平板上，继加细胞悬液，凡抗原阳性的细胞则与相应抗体结合，抗原阴性的细胞可从未吸附的细胞悬液中获取（图-3）。同样若用特异性抗原交联在塑料板上，则可分离得具有特异抗原受体的淋巴细胞。淋巴细胞受体与特异抗原或抗体接触，可引起细胞激活，因此，凡欲去除细胞悬液内某一细胞亚群时，本法更适用。如要分离CD4+或CD8+细胞，则可用抗CD4或CD8单克隆抗体吸附。用抗Ig抗体则可分离B细胞。同样，用活化的C3包被，可分离出有C3受体的细胞。

图-3 亲和分离法图解

（4）荧光激活细胞分离仪分离法

荧光激活细胞分离仪（fluorescenceactivatedcellsorter，FACS）主要由4部分组成：①细胞流动系统及气压流速控制系统，②激光系统，③检测与讯号处理系统，④细胞分选系统。其主要原理是细胞经荧光染色后，通过高速流动系统，细胞排成单行，逐个流经检测区进行测定。当细胞从流动室喷嘴处流出时，超声振荡搅动液流，使液流断裂成一连串的均匀小滴（40000个/s），每小滴内最多含一个细胞（其中只有百分之几的液滴中含细胞），细胞经激光束照射产生荧光和散射光，由光电倍增管接收，转换成脉冲信号，数据经电脑处理，分辨细胞的类型。如识别的是预计所需的细胞时（如T细胞、B细胞要其亚群），在细胞样品流断裂成小滴时，使液滴瞬即感应阳电荷、阴电荷或不带电荷，使所需的细胞在电场偏转下进入不同的收集管（图-4）。用FACS分离细胞准确快速，能保持细胞活力，并可在无菌条件下进行，但仪器昂贵，极少用于常规，而多数仅作为研究的手段。

图-4 荧光激活细胞分离仪简图

四、吞噬细胞的分离和收集

人外周血中单核－巨噬细胞可通过Pecoll密度梯度分离法获取，但数量较少，用血量多。用斑蝥敷贴法可从人体组织液中获取较纯的巨噬细胞，不需作进一步体外分离，细胞量损失较少。该法是用滤纸蘸取10％中药斑蝥酒精浸出液，贴敷在臂内侧皮肤表面，4～5h后皮肤局部充血，48h后局部形成水疱，吸取疱中的组织液，内含巨噬细胞。但此法对病人皮肤有一定损伤，有时可引起局部感染，应慎用。

欲获取小鼠、大鼠、豚鼠等小动物的巨噬细胞，可经腹腔内注入少许石蜡油，3～4天后冲洗出腹腔渗出液，所得细胞悬液中70％～80％为巨噬细胞。

五、淋巴细胞的保存和活力测定

（一）、分离细胞的保存

在某些情况下，分离所得细胞需要加以保存，否则活力迅速下降，甚至死亡。

（1）短期保存技术

将分离到的细胞用适量含10％～20％灭活小牛血清的Hanks、Tc-199、RPMI1640或其他培养液稀释重悬。所用培养液要求等渗，具缓冲作用，并对细胞无毒性。通常置4℃保存较好，可减低细胞代谢活动。要注意不要迅速改变细胞所处的温度，以免造成细胞“温度”休克。

（2）长期冷冻保存技术

利用液氮深低温（－196℃）环境保存细胞，是当前世界上通用的细胞长期保存技术。其原理在于深低温环境可中断细胞的代谢，但在降温过程由于冰晶的形成和渗透压的改变均可导致细胞的损伤和部分死亡，所以在冷冻过程中一定要加用冷冻保护剂，常用的保护剂为二甲亚砜（dimethylsulfoxide，DMSO）。冷冻时的降温速度和细胞解冻时的升温速度对细胞活力的保存有很大影响。条件合适时，冻存细胞一旦复苏，恢复37℃培养，其形态和代谢活动均可恢复正常。操作的原则是先对需冻存的细胞作活细胞计数，低速离心后，取沉积细胞用含10％二甲亚砜的小牛血清配制成适当浓度的细胞悬液，分装于冻存管内，速即放入降温过渡站中，避免二甲亚砜对细胞的损伤。继而进行降温冷冻，目前常用两步降温法，即迅速降温至一选择好的临界温作为过渡站，如－80℃低温冰箱过夜，或在液氮罐液面以上的一层空间放置片刻，然后再放入液氮中。如需复苏细胞，则需迅速解冻以恢复细胞的活力，要求在20s以内完全融化。将冻存管自液氮中取出，立即放入40℃温水中，融化后即从水中取出，吸出细胞悬液，加入10倍的培养液中混匀，继而低速离心，尽快洗去保护剂，再悬于新培养液中，计数并检查细胞活力，然后置37℃培养箱内培养。

（二）、细胞活力测定

细胞活力常用百分比表示，活力的大小对试验结果有很大影响。细胞活力的测定有许多方法，最简便常用的方法是台盼蓝（trypanblue）染色法。台盼蓝又称锥蓝，是一种阴离子型染料，这种染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不着色，但死亡细胞的细胞膜通透性增加，可使染料通过细胞膜进入细胞内，使死细胞着色呈蓝色。免疫检测试剂中常用的防腐剂有硫柳汞、叠氮钠、抗生素等。

1.叠氮钠是HRP的抑制剂，凡是和HRP接触的试剂，一定不能用；

2.硫柳汞在ELISA试剂中可普遍使用，但因其有毒，较少使用；

3.市面许多试剂盒产品，用抗生素做防腐剂较多，如庆大。

4.如果试剂仅在实验室短期使用，其实并不需加防腐剂，常规试剂放4度冰箱，抗体、酶等加甘油分装冻存即可。

5.梅里埃生产的HIV诊断试剂中提到：对照血清的防腐用0.1g/L硫酸庆大霉素和0.2ml/L肉桂醛。

6.防污染可添加0.02%的叠氮钠，或0.01%的硫柳汞。叠氮钠在多数情况下有用且有效，但在有些实验中却不合适，因为它能阻断细胞的电子传递链，对许多生物体都有毒医学 教育网 搜 集整理性，因此不能用于活体实验；因为含有氨基而能干扰许多标记方法；不能用于辣根过氧化物酶标记的抗体。而硫柳汞不含氨基，不影响基质的稳定性。如果将抗体应用于生物活性检测、体内实验，一般不使用任何防腐剂，这些实验用的抗体应少量分装冷存，切忌反复冻融。

干细胞技术制造免疫细胞 篇6

研究小组所采用的技术包含使用已知的基因来把成熟的免疫淋巴细胞复原成诱导性多功能干细胞（iPSCs），这种细胞可以分化成几乎是身体任何的细胞类型。研究人员扩展这些iPSCs，然后巧妙地把它们再分化回淋巴细胞。重要的是，新造的淋巴细胞“恢复了青春”，有着增强了的成长潜力和寿命，同时保持着原有的识别癌细胞和艾滋病毒感染细胞的能力。这些发现暗示，使用iPSC技术来操控淋巴细胞可能有助于有效免疫疗法的未来发展。

在一个研究中，调查人员使用了一个艾滋病毒感染病人的淋巴细胞造出再分化细胞，这种细胞有着无限的寿命并在它们的染色体末端包含着俗称“帽子”的长形染色体端粒，而这种物质能保护细胞免于衰老。这是非常有意义的，因为淋巴细胞的正常衰老限制了它们的扩张，使它们效率低下而不能成为治疗手段。

另一个研究小组集中研究一个恶性黑色素瘤患者的淋巴细胞。他们造出的再分化细胞辨别出通常呈现在黑色素瘤中的蛋白质MART-1。下一步科学家要做的是检测这些再生的淋巴细胞能否选择性地杀死肿瘤细胞而不是其他健康组织。如果这些细胞被研发出来，它们可能会直接应用于病人。

淋巴细胞免疫治疗 篇7

1 资料与方法

1.1 一般资料

研究对象为2009年11月—2012年6月来我院生殖医学中心就诊的RSA患者115例。治疗对象年龄分布:21~44岁,平均31.3岁,其中:21~25岁6人,26~30岁51人,31~35岁38人,35~40岁13人,40岁以上7人。治疗对象选择标准:连续2次或2次以上自然流产,排除夫妇双方染色体异常,患者生殖解剖异常、内分泌异常、感染和环境因素等,BA检测呈阴性患者采取淋巴细胞主动免疫治疗,治疗须在取得患者知情同意并签署知情同意书的情况下进行。

1.2 方法

1.2.1 治疗前准备:

患者术前检查项目包括染色体、优生4项、不孕3项、内分泌6项、生殖道感染和BA检测。丈夫或健康第三方血源供给方检查项目包括乙肝、丙肝、梅毒和艾滋病等传染性疾病检测。凡血源供给方有传染性疾病则不适合做免疫治疗血源供者。治疗期需避开月经期及发烧、感冒。

1.2.2 淋巴细胞分离:

全过程要求无菌操作,尽可能在无菌超净工作台上进行操作。方法如下:(1)抽取丈夫或第三方静脉血20 ml,肝素钠抗凝。(2)取15 ml洁净无菌试管2只,每管加入7 ml淋巴细胞分离液(淋巴细胞分离液由天津市灏洋生物制品科技有限责任公司提供),将7 ml肝素钠稀释血液小心沿管壁缓慢加在每管淋巴细胞分离液面上,使分离液和抗凝血分层明显。(3)3 500 rpm水平式离心30 min后,管内分四层。(4)收集乳白色淋巴细胞层至另2只15 ml无菌试管,加入无菌生理盐水10 ml充分洗涤。(5)3 000 rpm,离心10 min,去上清液。(6)再次加入无菌生理盐水10 ml,3 000 rpm,离心10 min,去上清液。(7)重复上一步骤1次,每管加入0.5 ml无菌生理盐水充分混匀得所需淋巴细胞待治疗。

1.2.3 免疫方法:

用1.5 ml注射器吸取淋巴细胞悬液,在患者双侧上臂内侧皮内各注射2~3个皮丘,间隔2~3周1次,共计4次为1个疗程。注射后嘱咐患者注意休息,情绪保持稳定,禁止用手抓挠注射部位。1个疗程后检测BA,BA未转阳者继续免疫治疗1个疗程。BA转阳后建议半年内怀孕,半年内未受孕者建议重新治疗后再怀孕,成功怀孕后加强治疗1~2次。

1.2.4 封闭抗体检测方法:

免疫治疗前、后抽取患者外周血2 ml,分离血清,BA用ELISA法进行测定,按试剂盒说明书操作,所用试剂由美国莱姆德公司生产,北京索奥生物技术有限公司提供。

1.2.5 疗效观察及随访:

治疗有效标准:经免疫治疗后BA检测呈阳性者视为治疗成功。临床妊娠成功标准:成功分娩活胎或者妊娠5个月以上B超显示胎儿未发现异常者视为临床妊娠成功。随访内容包括:治疗期间有无不良反应,经治疗后BA检测有没有转为阳性,经治疗后有没有成功怀孕、有没有发生再次流产现象及妊娠结局。

1.3 统计学方法

对治疗后BA阳性与BA阴性患者妊娠成功率采用率的u检验,检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 治疗成功率

治疗对象115例,经淋巴细胞主动免疫治疗后检测BA,BA转阳98例,治疗成功率为85.2%,与治疗前比较,差异有高度统计学意义(P<0.01)。

2.2 随访结果

治疗后有90例患者再次妊娠,临床成功分娩活胎及妊娠5个月以上B超显示,未见异常72例,再次妊娠成功率为80.0%。其中BA转阳76例中,有68例妊娠成功(治疗成功后再次妊娠成功率为89.5%)。BA未转阳14例中,有4例妊娠成功(再次妊娠成功率为28.8%)。主动免疫治疗后BA阳性者与阴性者的妊娠成功率比较,差异有高度统计学意义(P<0.05),见表1。有1例宫外孕,1例发生下肢皮肤过敏不良反应。

注:两组比较有显著性差异,P<0.05。

3 讨论

近年来,随着生殖免疫学研究的发展,人们对妊娠早期RSA越来越关注。随着生殖免疫学的研究深入,认为多数原因不明的RSA与免疫因素有关。免疫因素引起的RSA大体可分为自身免疫型和同种免疫型两种。自身免疫型RSA可在患者体内检测出自身抗体,如抗磷脂抗体、抗核抗体和抗甲状腺抗体等。同种免疫型则主要与人类白细胞抗原(HLA)相容性等有关,患者与正常生育妇女的免疫状态不同,表现在体液免疫的异常及血清中缺乏BA等方面[3]。BA是妊娠时母体免疫识别父系抗原,针对人类白细胞抗原HLA和滋养层淋巴细胞交叉抗原TLX产生的Ig G型抗体,使母体自身对胎儿胎盘等妊娠组织的免疫排斥进行免疫保护,是维持妊娠正常进行的保护性抗体[4]。BA产生障碍或不足,不能形成有效的妊娠免疫耐受和免疫保护状态,会对孕囊的种植和胎盘的生长产生免疫排斥而导致早期流产。

采用淋巴细胞主动免疫治疗BA不足性RSA已成为当今妇产科学研究的热点,也有较多文献报道[5,6]。即应用配偶或第三方外周血淋巴细胞对BA缺乏的RSA患者进行免疫治疗,目的是淋巴细胞免疫诱导刺激母体产生同种免疫反应,产生具有免疫保护作用的BA,从而增加患者体内BA水平,而防止胚胎或胎儿父系抗原被母系免疫系统识别和杀伤,产生免疫保护,使其再次妊娠得以成功。本文对115例BA阴性RSA患者采取淋巴细胞主动免疫治疗后,98例BA水平显著提高。90例再次妊娠,获得妊娠成功72例,妊娠成功率为80.0%,与之前报道基本相符。治疗后无论BA转阳与否自然流产率都降低,且BA水平提高者妊娠成功率明显高于BA阴性患者。这说明免疫治疗后,封闭抗体的产生,增加了母体免疫耐受,使胎儿易于存活,妊娠成功率提高。这支持RSA的发病机理与免疫反应低下有关,也一定程度上证实了主动免疫疗法的合理性。另外,免疫治疗后,BA未转阳者妊娠也获得成功,可能是因为主动免疫治疗使这些患者诱发了由细胞免疫参与的免疫抑制,使封闭效应增强所致[7],整个治疗过程中只有1例出现不良反应。

综上所述,有足够充分的理由认为利用淋巴细胞主动免疫疗法治疗母体BA缺乏所致的RSA,其免疫反应强,持续时间短,无明显不良反应,是一种简单可行、安全及有效的治疗方法,具有临床应用价值及较好的发展前景。

参考文献

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[2]汪丹,李伟莉.封闭抗体与反复自然流产的研究进展[J].中国优生与遗传杂志,2009,15(11):124-125.

[3]刘晓芹,田连霞.封闭抗体与早期反复流产的关系及淋巴细胞主动免疫治疗的疗效观察[J].中国优生优育,2012,18(5):276-278.

[4]李大金.生殖免疫学[M].上海:复旦大学出版社,2008:149-153.

[5]谢淑如.主动免疫法治疗复发性流产的临床疗效观察[J].临床和实验医学杂志,2012,11(10):769-770.

[6]李杰兰,马卫军.主动免疫治疗不明原因复发性自然流产的临床分析[J].齐齐哈尔医学院学报,2012,33(14):1865-1866.

[6]植自勤,黄惠萍,黄小静.大剂量免疫球蛋白在封闭抗体阴性反复自然流产孕妇中的应用[J].广州医药,2010,41(3):33-34.

淋巴细胞免疫治疗 篇8

1资料与方法

1.1一般资料选取本院生殖科2014年2月~2015年11月连续发生2~5次的复发性流产患者共100例, 所选资料均具备以下条件:夫妻染色体正常、胚胎染色体正常、母体生殖道正常、内分泌正常、生殖道不存在感染等情况, 经流式细胞仪检测显示封闭抗体均为阴性, 夫妻双方对本研究中的淋巴细胞主动免疫疗法都有充分的了解, 同时签署了知情同意书。随机分为干预组 (80例) 和对照组 (20例) 。干预组患者年龄23~36岁, 平均年龄 (30.10±2.96) 岁, 对照组患者年龄21~37岁, 平均年龄 (29.10±2.89) 岁。两组患者一般资料比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2方法 (1) 常规检查:妇科超声排除子宫内膜异常、双方同型半胱氨酸、双方四项病毒检查、抗精子抗体、抗心磷脂抗体、阴道分泌物支原体衣原体, 男方精液常规检查。 (2) 免疫治疗前化验:双方传染病化验:乙肝、丙肝、梅毒、艾滋病、肝肾功能、血常规, 若丈夫传染病阳性, 采用无关第三方男性血液替代。 (3) 免疫治疗过程:抽取丈夫或第三方血液20 ml, 肝素抗凝, 在超净工作台下使用天津灏洋生物有限公司生产的淋巴细胞分离液, 来提取淋巴细胞, 用0.9%Na Cl离心洗涤3次, 加0.9%Na Cl 1 ml稀释成悬液备用, 观察淋巴细胞数≥20~30个/ml, 皮内注射于患者前臂, 孕前注射3次, 间隔3周, 复查封闭抗体。如果转阳性, 可以计划妊娠;进行巩固加强治疗, 每3周1次, 持续治疗至孕12周。 (4) 干预组受孕前进行淋巴细胞免疫治疗3次 (间隔21 d) , 受孕后继续进行淋巴细胞免疫治疗 (间隔21 d) 至受孕12周。 (5) 黄体支持:排完卵后给予地屈孕酮片2次/d, 1片/次, 至妊娠85d逐渐减量停药。

1.3观察指标及疗效评价标准对比两组临床治疗效果、封闭抗体转阳效果。治疗期间严密观察腹痛及阴道流血情况, 在妊娠12周时彩超检查显示宫内活胎, 即视为治疗成功。发生自然流产或彩超显示胚胎停止发育即视为治疗未成功。

统计学方法采用SPSS22.0统计学软件对研究数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差 (±s) 表示, 采用t检验;计数资料以率 (%) 表示, 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2结果

2.1两组患者临床治疗效果比较干预组患者经治疗后有71例妊娠成功, 另外9例再次妊娠失败 (5例妊娠后于7~8周再次发生自然流产, 4例9~11周胚胎再次停止发育) , 治疗妊娠成功率为88.8% (71/80) ;对照组患者有7例妊娠成功, 另外13例再次妊娠失败 (妊娠后于12周内再次发生自然流产或胚胎停止发育) , 治疗妊娠成功率为35.0% (7/20) 。两组治疗成功率比较差异有统计学意义 (P<0.05) 。

2.2两组患者封闭抗体转阳效果比较干预组免疫治疗后封闭抗体阳性率为91.25% (73/80) , 封闭抗体阳性成功妊娠率为93.15% (68/73) ;对照组分别为35.00% (7/20) 、42.86% (3/7) ;比较差异均有统计学意义 (P<0.05) 。

3讨论

近代生殖免疫研究结果表明, 不明原因的复发性流产与妊娠母体封闭抗体的缺陷有明显的相关性[3,4]。发生复发性流产的病因很复杂, 并且危害大, 目前治疗原因不明, 复发性流产的方法主要是淋巴细胞主动免疫治疗法, 是通过注射父方或者无关第三方的淋巴细胞, 达到刺激母体产生足够的封闭抗体, 以结合父系CD3, CD4和CD8等抗原, 使胚胎免受母体免疫系统的排斥, 维护了胚胎的正常发育。本研究显示100例原因不明复发性流产中干预组成功妊娠率为88.8%;对照组为35.0%, 两组比较差异有统计学意义 (P<0.05) , 说明主动免疫治疗干预不明原因复发性流产疗效显著, 且治疗方法操作简单, 安全性强, 保胎成功率高, 治疗效果显著。

综上所述, 对于不明原因复发性流产患者而言, 采用淋巴免疫疗法进行孕前干预治疗可以显著提高临床治疗效果, 治疗方法操作简单, 安全性强, 保胎成功率高, 值得临床推广使用。

摘要：目的 分析研究淋巴细胞免疫治疗干预封闭抗体阴性复发性流产 (RSA) 的临床效果。方法 100例封闭抗体阴性的复发性流产患者, 随机分为干预组 (80例) 和对照组 (20例) 。干预组于备孕前进行淋巴细胞免疫治疗3次, 受孕后应用地屈孕酮黄体支持, 继续进行淋巴细胞免疫治疗至孕3个月;对照组单纯给予地屈孕酮黄体支持治疗。比较两组治疗效果。结果 干预组治疗成功率为88.8%, 免疫治疗后封闭抗体阳性率为91.25%, 封闭抗体阳性成功妊娠率为93.15%, 均高于对照组的35.0%、35.00%、42.86% (P<0.05) 。结论 淋巴细胞免疫治疗干预封闭抗体阴性的复发性流产患者效果显著, 改善妊娠结局, 值得临床推广。

关键词：复发性流产,免疫治疗,封闭抗体

参考文献

[1]钟向真.自身免疫型习惯性流产的临床治疗.中国优生与遗传杂志, 2006, 14 (11) :70-71.

[2]杨章莉, 周春慧, 李新蓉, 等.淋巴细胞主动免疫联合地屈孕酮治疗封闭抗体阴性所致复发性流产的临床观察.生殖医学杂志, 2014, 23 (2) :128-130.

[3]张艳华, 刘梅梅, 李佩玲, 等.淋巴细胞主动免疫联合丙种球蛋白治疗复发性流产的研究.国际免疫学杂志, 2012, 35 (5) :398-402.

淋巴细胞免疫治疗 篇9

关键词：肺结核,免疫调节治疗,T细胞

肺结核是由结核分枝杆菌侵犯肺部从而引发的感染性肺疾病, 本病具有高死亡率、高传染性等特点, 是危害性最强的传染性疾病[1]。身体健康的人群感染MTB后不一定会立刻发病, 在免疫力下降后逐渐发病。据临床资料显示, 全世界范围内每年因PTB而死亡的患者高达150万, 超高的死亡率引发了人们的普遍关注[2]。肺结核不仅持续消耗患者机体, 且结核菌的耐药性较高, 促使治疗的难度增加。免疫调节治疗的出现给肺结核患者带来了希望。本研究采用Th1型免疫应答细胞因子IL-2及免疫抑制剂糖皮质激素等免疫调节疗法治疗肺结核患者, 现将临床效果报告如下。

资料与方法

2014年9月-2015年9月收治肺结核患者60例, 将其随机分成两组, 每组30例。对照组男19例, 女11例;年龄65~73岁, 平均 (69.3±0.5) 岁;病程3~8年, 平均 (4.3±2.2) 年。观察组男16例, 女14例;年龄66~74, 平均 (70.4±0.3) 岁;病程4~7年, 平均 (5.4±1.6) 年。两组患者的基本资料比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) 。

纳入和排除标准:纳入标准:所有患者均符合肺结核相关诊断标准, 行体格检查、胸片X线检查、痰液培养确诊为肺结核, 年龄≥65岁。排除自身免疫系统疾病、肝脏功能受损、肠胃炎症、不愿意在实验授权书上签字的患者等[3]。

方法:对照组采用2HRZE/4HR治疗方案, 观察组在对照组基础上采用母牛分枝杆菌菌苗肌内注射治疗, 22.5μg/次, 1次/周, 8次注射治疗为1个疗程。检测方法:ELISPOT检测配套试剂盒、ELISA检测配套试剂盒均由达科为生物公司提供;实验中使用的淋巴细胞分离液由太平洋生物科技公司生产;RPMI1640则由US.Thermo Scientific公司生产。 (1) 血样单个核细胞分离:分别采集患者肘静脉血10 m L, 经离心处理将红细胞、血清和淋巴细胞进行分离, 然后吸取白色细胞层4 m L放置于1640中, 再将该溶液移入离心管中 (预先放入4 m L淋巴细胞液) , 使用密度梯度离心法分离单个核细胞。 (2) IFN-γ分泌量的检测:采用ELISPOT法进行检测, 操作步骤详见配套试剂盒说明书。 (3) IL-2分泌量的检测:使用ELISA法进行检测, 具体操作详见试剂盒说明书。 (4) T细胞增殖检测:完全培养基的制备 (1640) , 即链霉素、青霉素各100 U/m L, Hepes、灭活的10%胎牛血各10 m M, 丙酮酸盐、L-谷氨酰胺各2 m M, β-巯基乙醇0.1 m M;分别在细胞培养的第3、5天更换培养基, 然后在第7天测定T细胞增殖情况。

观察指标:观察两组患者治疗前后IL-2、IFN-γ分泌量的变化, 同时统计两组患者治疗后T细胞增殖情况。

统计学方法:采用SPSS 20.0统计学软件处理数据, 计量资料采用 (±s) 表示, 组间比较采用t检验, P<0.05表示差异具有统计学意义。

结果

两组患者治疗前后IL-2、IFN-γ变化:观察组患者治疗前IL-2分泌量 (21.2±4.0) pg/m L, IFN-γ分泌量 (15.3±2.5) 3×105;对照组治疗前IL-2分泌量 (21.6±3.2) pg/m L, IFN-γ分泌量 (15.4±2.0) 3×105。治疗后两组患者的该两种指标均明显增加, 对照组IL-2分泌量 (28.4±6.3) pg/m L, IFN-γ分泌量 (23.7±5.2) 3×105, 观察组患者IL-2分泌量 (45.8±5.3) pg/m L, IFN-γ分泌量 (37.3±11.6) 3×105。观察组治疗后IL-2、IFN-γ均高于对照组, 差异具有统计学意义 (P<0.05) 。

两组患者治疗前后T细胞增殖能力和免疫功能对比:治疗后两组患者T细胞增殖能力均得到改善, 免疫功能明显恢复。采用免疫调节疗法治疗的观察组T细胞增殖能力、免疫功能均优于对照组, 差异具有统计学意义 (P<0.05) 。见表1。

讨论

肺结核是由结核杆菌入侵肺脏引发的一种慢性感染性疾病。医学研究者发现TB患者中T细胞的增殖能力不断下降, T细胞分泌的IL-2以及IFN-γ含量也会出现明显锐减现象。肺结核患者在抗原刺激下T细胞的自效应和功能也会出现衰退现象。在结核菌感染的初期病毒会被体内的抗原不断消灭, 所以抗原刺激不显著, 消耗的T细胞会逐渐恢复。而发病后T细胞的自身功能由于消耗严重而无法恢复[4]。因此在临床治疗时可以通过测定IL-2分泌量、IFN-γ分泌量、T细胞增殖率, 以及CD3+、CD4+和CD8+等指标变化判断药物的有效性。

CD3+、CD4+均具有协调B细胞产生抗体的作用, 后者在机体感染结核菌的早期具有一定的保护作用, 相反CD8+则抑制抗体的分化生成, 该三种细胞因子均是判定机体细胞免疫功能是否良好的重要指标。相关研究资料显示, PTB患者体内CD3+和CD4+含量低于健康人群, 相反CD8+的计数却明显升高[5]。本研究观察组30例患者使用免疫调节疗法, 母牛分枝杆菌菌苗能够刺激T细胞增殖, 促使T细胞功能效应恢复, 从而增强患者机体的免疫能力, 有效杀灭结核菌, 延缓病情的进展。同时母牛分枝杆菌菌苗能够缩短患者的治疗周期, 提升结核杆菌的吸收率, 能够抑制变态反应造成的各种病理性损伤。国内外医学研究者进行大量的实验研究, 结果显示成人在特定剂量范围内安全性较高, 很少有ADR和并发症的发生[6]。本研究中相比于仅使用常规抗结核疗法的对照组, 观察组患者T细胞增殖率得到恢复, 相应地, 由于T细胞分泌的IL-2和IFN-γ量均有所升高, 患者的免疫功能得到改善;对照组患者治疗后的IL-2、IFN-γ、CD3+以及CD4+/CD8+也都发生改变, 观察组改善幅度明显大于对照组 (P<0.05) 。

综上所述, 免疫调节疗法治疗肺结核能够提升细胞免疫能力, 起到控制患者病情的目的, 延缓疾病恶化, 为以后肺结核治疗方案的研究提供参考和依据。

参考文献

[1]郭云.结核相关抗原对初治结核病患者树突状细胞的免疫调节作用的研究[J].河北医科大学学报, 2015, 13 (4) :660-663.

[2]傅向东, 刘水腾, 李文郎, 等.HIV合并结核潜伏感染患者CD4+细胞免疫功能影响的研究[J].临床肺科杂志, 2015, 20 (7) :1212-1214.

[3]刘荣海, 高孟秋, 张立群, 等.卓干扰素释放分析实验在糖尿病合并肺结核中的诊断价值[J].中国医刊, 2014, 49 (6) :86-87.

[4]王鸿程, 谢银芳.扶正中药对活动性肺结核患者细胞免疫功能调节作用的研究[J].泸州医学院学报, 2012, 13 (2) :134-136.

[5]胡耀, 宋锁言, 张艳芳, 等.免疫调节治疗对于老年肺结核患者细胞免疫功能的影响研究[J].中国医刊, 2015, 50 (10) :94-96.

淋巴细胞免疫治疗 篇10

1资料与方法

1.1一般资料

选择2011年5月 -2013年5月在本院接受治疗的原发性肝癌患者100例作为研究对象,按照随机数表法将所有入组患者分为观察组及对照组,每组各50例。观察组患者接受过继免疫细胞治疗,其中男27例,女23例,年龄54~77岁,平均(63.79± 6.21)岁;对照组患者接受临床原发性肝癌常规介入治疗,其中男26例,女24例,年龄56~78岁,平均 (62.19±6.55)岁。两组患者的年龄、性别等一般资料比较差异无统计学意义(P >0.05)。本研究经患者及家属知情同意,并经医院伦理委员会批准实施。

1.2治疗方法

对照组患者接受介入治疗,具体如下:常规消毒铺巾后做腹腔动脉造影,作肿瘤供血动脉选择性插管,灌注抗癌药物(阿霉素30 mg,顺铂60 mg,5- 氟尿嘧啶0.75 g,四氢叶酸0.3 g),用明胶海绵栓塞。4周后复查,必要时再次进行介入治疗。观察组患者在介入治疗基础上联合过继免疫细胞治疗,具体如下:治疗组介入手术前1~3 d行外周血采集:1CIK细胞培养:将分离的患者外周全血经Ficoll淋巴分离液梯度离心得到单个核细胞,分离后淋巴细胞加入IFN-γ 2 000 U/ml,24 h后加入IL-2 1 000 U/ml, CD3McAb 100 ng/ml,IL-1 10 U/ml,每3天换液1次,同时补加IL-2 500 U/ml。于细胞培养第9天检测CIK表面标记CD3、CD56、CD4、CD8,得到的细胞经台盼蓝染色检测细胞活力在90%以上,不含细菌和内毒素,方可治疗。2CIK细胞回输:介入治疗后2周将制备的CIK细胞悬液静脉输注,CIK细胞数2~8×108/ 次,1次 / 天,7 d为一个疗程。

1.3观察指标

1.3.1血清HIF-1α、VEGF、TNF-α 含量两组患者接受不同治疗后1月,均采集外周静脉血5 ml, 离心后取上清采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA) 测定血清缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长 因子 (vascular endothelial growth factor, VEGF)、 肿瘤坏死 因子 (tumor necrosis factor, TNF-α)含量。

1.3.2血清GPC3、AFP、IGF-Ⅰ、s Fas水平两组患者接受不同治疗后1月,均采集外周静脉血5 ml,采用ELISA法测定血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖(Glypican 3,GPC3)、甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)、胰岛素样生长因子Ⅰ (insulin-like growth factor-Ⅰ, IGF-Ⅰ)、可溶性Fas(soluble Fas,s Fas)。

1.3.3 T细胞亚群水平两组患者接受不同治疗后1月,均采集外周静脉血5 ml,采用流式细胞仪测定两组患者的T细胞亚群水平,具体包括CD3+、CD4+、 CD8+、CD4+/CD8+。

1.4统计学方法

本研究所有数据均采用SPSS 18.0软件进行统计学分析,计量资料采用均数±标准差(±s),两两比较采用t检验,P <0.05为差异具有统计学意义。

2结果

2.1血清HIF-1α、VEGF、TNF-α含量

观察组患者接受过继免疫细胞治疗后的血清HIF-1α、VEGF、TNF-α 含量均明显低于对照组患者(P <0.05),见表1。

(± s)

2.2血清GPC3、AFP、IGF-Ⅰ、sFas水平

观察组患者接受过继免疫细胞治疗后的血清GPC3、AFP、IGF-Ⅰ、s Fas水平均明显低于对照组患者(P <0.05),见表2。

2.3T细胞亚群

观察组患者接受过继免疫细胞治疗后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明显高于对照组患者 (P < 0.05),见表3。

(± s)

( ± s)

3讨论

我国为全球原发性肝癌第一大国,目前肝癌发病率逐年上升,严重威胁人民的生命健康。传统的治疗方法通常专注于肿瘤本身,包括手术和化疗等, 常忽略了患者全身免疫状态对于肿瘤发生发展过程中的重要影响以及治疗后短期内肿瘤增殖转移、癌症复发[3]。过继免疫治疗是指通过向肿瘤患者输注具有抗肿瘤活性的免疫细胞,直接杀灭或者激发机体免疫反应来杀伤肿瘤细胞。肿瘤的细胞免疫治疗是通过回复机体自身的免疫监测及杀灭肿瘤的功能,有效杀灭患者化疗后体内残存的肿瘤细胞,提升抗癌治疗效果,且对于预防治疗后肿瘤转移复发也具有积极意义[4]。

血管内皮生长因子(VEGF)是目前已知的对血管新生促进作用最强的因子,在恶性肿瘤细胞的增生、转移过程中扮演重要角色[5]。缺氧诱导因子 (HIF-1α) 是调节细胞内氧代谢的关键因子之一, 可以诱导血管生长因子表达并刺激新生血管生成, 是恶性肿瘤细胞增生的关键环节,其中以对VEGF的调节最 为明显 。 有研究显 示在恶性 肿瘤中HIF-1α 表达水平高,可能是由于组织浓度降低所致。血清HIF-1α、VEGF水平变化主要与癌细胞缺氧坏死相关,其促进HIF-1α 释放、诱导VEGF表达,最终导致肿瘤组织生长、浸润转移。故HIF-1α、 VEGF可以作为肿瘤治疗效果的一个判断指标。肿瘤坏死因子 α (TNF-α) 主要由单核巨噬细胞分泌,具有直接抗肿瘤作用,可以进行自身合成并聚集于病变区域。已经证实在肝癌患者中TNF-α 水平明显高于肝硬化患者,并随肝癌的有效治疗其血清水平逐渐下降,故可成为判断肝癌治疗效果的重要指标之一[6]。本研究发现观察组患者治疗后的血清HIF-1α、VEGF、TNF-α 含量均明显低于对照组患者(P <0.05),提示过继免疫细胞治疗可以有效降低肿瘤血管新生能力,保证临床治疗效果。

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)属于硫酸乙酰肝素糖蛋白家族,分布在细胞膜表面并参与细胞增殖分化、黏附转移。在成人仅于胎盘组织有GPC3高表达,在肺、肾脏、卵巢等组织中受低水平表达,而在正常肝组织中未见GPC3表达[7]。研究显示GPC3可以通过Wnt信号途径,使得Wnt蛋白增加并与细胞表面受体结合,引起靶基因表达,导致肝细胞增生失控并致癌。甲胎蛋白(AFP)是国内外临床诊断原发性肝癌的一个重要肿瘤指标,与肿瘤恶性程度及病情严重程度存在正相关关系,可以作为病情变化的判断指标。胰岛素样生长因子 -Ⅰ(IGF-Ⅰ)在肝细胞癌变过程中发挥重要作用,可以刺激RNA、DNA合成和细胞增殖[8]。已经有研究证实IGF-Ⅰ在肝癌组织中及外周血中存在异常过度表达,提示肝癌细胞可以自分泌大量IGF-Ⅰ,造成胞浆内循环短路, 加速肝癌细胞自主生长并维持其恶性表型。 本研究发现观察组患者接受治疗后的血清GPC3、AFP、 IGF-Ⅰ、s Fas水平均明显低于对照组患者(P <0.05), 提示过继免疫细胞治疗可以有效抑制肿瘤细胞增殖相关因子的表达,为避免肝癌患者治疗后复发转移奠定基础。

在肿瘤形成及发展过程中,产生可溶性免疫抑制因子,可以阻止CD4+形成及成熟,直接导致CD4+/CD8+比值降低,机体细胞免疫功能降低、对肿瘤细胞的杀伤作用减弱,抗癌治疗后肿瘤复发概率极高[9]。过继免疫细胞治疗可以诱导抗肿瘤效应细胞特异性激活,将其转入宿主体内建立长期的特异性抗肿瘤免疫效应,最终提升患者的全身细胞免疫功能、增强抗肿瘤效果。本研究发现观察组患者接受治疗后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明显高于对照组患者(P <0.05),提示过继免疫细胞治疗可以显著提升肝癌患者的全身免疫状态、促进抗癌治疗效果。

冠昊生物：免疫细胞银行落地长沙 篇11

记者求证：记者致电公司证券部，工作人员表示消息属实。

近期有消息称，冠昊生物（300238）免疫细胞银行正式落地长沙。公司回复表示消息属实。

资料显示，6月6日，冠昊生物科技股份有限公司与湖南昊吉娅健康管理有限公司牵手合作，标志着拥有国际先进健康管理理念的“免疫细胞银行”正式落地长沙万达广场，开启了为湖南人民储存自体免疫细胞的服务。今后，湖南民众可将从自身血液中分离的免疫细胞进行存储，用以日后癌症治疗，抗击衰老及消除亚健康。

免疫细胞疗法是利用先进细胞生物学技术，将从血液中分离出来的免疫细胞，在体外进行修饰、诱导、激活和扩增，再回输到体内攻击癌细胞，达到治疗癌症的目的。目前生物免疫治疗已在我国多家三甲医院开展，帮助众多癌症患者减轻了痛苦，改善了生活质量，延长了生存期。自2012年起，中国一些省份已陆续将免疫细胞治疗纳入了社会医疗保障体系，最高可报销80%。

作为技术平台型公司，冠昊生物在生物医学衍生材料领域的临床应用走在世界的前列，积极布局细胞治疗业务领域，非常重视国内巨大的市场空间。公司公告称，将收购部分明兴生物股权，并对公司增资，收购和增资完成后，上市公司将持有明兴生物80%的股权。明兴生物在国内软骨细胞治疗技术领域具有渠道资源优势，根据公告，明兴生物目前已和10 家医院进行了合作。

业绩方面，公司2015 年一季报显示，冠昊生物营业收入3950 万元，同比增长3.92%；母公司净利润901 万元，同比增长7.13%；基本每股收益0.07元。从过往情况看，一季度通常为公司淡季，在全年业绩占比较小，难以改变全年公司的业绩预期。

淋巴细胞免疫治疗 篇12

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2011年7月-2014年6月120例BA阴性不明原因复发性流产患者为免疫原, 年龄21~34岁, 平均 (27.30±5.24) 岁, 流产次数2~4次, 平均 (2.76±0.15) 次, 夫妻染色体正常, 内分泌正常, 无生殖道畸形, 免疫检查结果显示抗心磷脂抗体阴性, 封闭抗体阴性。抽签随机法分为观察组与对照组, 各60例。两组年龄、流产次数等基线资料差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2 方法

对拟抽取对象进行肝炎病毒学、艾滋病抗体、梅毒抗体等检查, 抽取观察组患者丈夫静脉血30 m L, 2%肝素抗凝, 放入含淋巴细胞分离液的离心管中, 淋巴细胞分离液比重1.020, 保持淋巴细胞分离液与血浆之间界面清晰, 250 g/min离心15 min, 抽取淋巴细胞层。后用磷酸盐缓冲液2次洗涤, 并用生理盐水制成淋巴细胞悬液, 浓度为20×106~40×106/m L, 抽取0.5~0.8 m L悬液在患者双侧前臂各分4~6点皮注射, 3次为1疗程, 每次注射后于3~4周后再次注射。BA转阳性 (酶联免疫吸附测定) 后, 尽量使患者在3月内妊娠。两组均在孕4、5周时采雌二醇、人绒毛膜促性腺激素等检查, 孕酮低时给予黄体酮支持治疗。

1.3 观察指标

(1) 抽取患者外周血2 m L抗凝, 通过Beckman Coulter公司制造的Coulter Epics XL流式细胞仪测定CD4+、CD8+水平, 计算CD4+/CD8+及CD16+CD56+NK; (2) 观察两组患者妊娠结局。

1.4 统计学方法

采用统计学软件SPSS 19.0进行统计分析, 计数资料与计量资料行χ2检验和t检验, 以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗前后T淋巴细胞亚群改变

治疗前两组各T淋巴细胞亚群比较无显著差异 (P>0.05) , 而CD4+治疗后显著降低, CD8+治疗后升高, CD4+/CD8+、CD16+CD56+NK降低, 组间比较观察组显著较低 (P<0.05) 。见表1。

注:*对照组比较, P<0.05

2.2两组治疗后妊娠结局分析

观察组妊娠成功率显著高于对照, 妊娠失败率低于对照组 (P<0.05) , 流产率观察组较低, 但组间差异无统计学意义 (P>0.05) 。见表2。

3讨论

正常妊娠中封闭抗体介导的免疫耐受较为关键, 封闭抗体和表达于滋养层细胞的滋养细胞淋巴细胞的交叉反应抗原结合, 从而避免胚胎受到母体杀伤性T细胞的影响[3]。产妇妊娠过程中若缺少保护性抗体, 则会导致母体对胎儿的排斥增强, 进而导致流产。本研究对120例BA阴性不明原因复发性流产患者采取淋巴细胞主动免疫治疗, 妊娠率得到显著提高, T淋巴细胞水平得到改善, 表示治疗后母体免疫耐受增强, 胎儿存活率上升, 妊娠成功得到保障。

外周血T淋巴细胞可表达CD3+抗原, 分为CD4+/CD8+、CD4+/CD8+两大亚群, 而CD4+细胞为辅助、诱导性T淋巴细胞, 介导细胞免疫, 其比率上升导致母体细胞免疫功能上升, 对胚胎免疫排斥反应上升, 终止妊娠[4]。CD8+细胞为杀伤、抑制性T淋巴细胞, 主要对产妇的免疫应答产生负调节作用。而NK细胞表面特异性标识分子为CD56, 另还可分为CD56+CD16-和CD56+CD16+, 前者具有免疫抑制、免疫营养效果, 受Th1刺激后转化为后者, 细胞毒性上升, 能够提高免疫防御能力, 释放颗粒酶等物质促使靶细胞死亡, 本研究中CD16+CD56+NK在治疗后显著下降, 表示细胞毒性反应被抑制, 胚胎的正常发育得到保障。

综上所述, 本研究通过患者及其丈夫或者健康者外周血淋巴细胞对患者进行主动免疫治疗, 结果可见CD4+明显降低, 而CD8+明显上升, CD4+/CD8+下降, 主动免疫治疗能够矫正患者的免疫紊乱, 缓解对胚胎的免疫排斥, 最终达到较高的妊娠率。

摘要：目的 研究淋巴细胞主动免疫治疗封闭抗体 (Blocking antibody, BA) 阴性不明原因复发性流产患者的临床效果。方法 选取我院120例BA阴性不明原因复发性流产患者, 抽签随机分为观察组与对照组, 各60例, 对照组常规保胎指导, 观察组行主动免疫治疗, 比较两组淋巴细胞亚群变化及妊娠结果。结果 观察组CD4+ (37.88±6.59) 与对照组 (42.18±6.34) 比较显著降低, CD8+ (35.61±6.87) 与对照组 (29.40±5.97) 比较显著升高 (P<0.05) , CD4+/CD8及CD16+CD56+NK+比较观察组显著较低 (P<0.05) ;观察组妊娠成功率显著高于对照组 (P<0.05) 。结论 淋巴细胞主动免疫治疗BA阴性不明原因复发性流产效果显著, 可改善妊娠结局, 调节异常的细胞免疫, 具有一定的临床推广价值。

关键词：淋巴细胞,主动免疫,复发性流产

参考文献

[1]高克非, 许红雁, 刘宝玲, 等.正常早孕及不明原因复发性流产主动免疫治疗前后血清蛋白组学的比较[J].广东医学, 2014, 35 (13) :2069-2072.

[2]田葱, 李娟, 攸毅, 等.3种疗法用于不明原因复发性流产的临床对比研究[J].现代中西医结合杂志, 2012, 21 (14) :1487-1489.

[3]李键, 邵小光, 吴隆琦, 等.不明原因复发性流产的发病机制及治疗策略的探讨[J].医学与哲学, 2012, 33 (20) :56-58.