T淋巴细胞免疫功能

T淋巴细胞免疫功能（共7篇）

T淋巴细胞免疫功能 篇1

溃疡性结肠炎(UC)病因及病理机制致今未明,多数认为与机体免疫功能失常有关。但对其免疫功能紊乱的类型报道结果各不相同,推测溃疡性结肠炎免疫功能紊乱存在异质性,笔者观察了102例溃疡性结肠炎病人T细胞亚群的变化,探讨了溃疡性结肠炎患者T细胞免疫功能紊乱的类型。

1 资料与方法

1.1 一般资料

102例患者为2001年1月～2008年1月门诊和住院病人,均符合2000年成都会议溃疡性结肠炎诊断标准[1]。年龄18～73岁,平均(46.6±26.4)岁,其中,男性58例,女性44例,病程3月～14年,平均(7.2±6.9)年。活动期77例,轻度38例,男21例,女17例,中度21例,男12例,女9例,重度18例,男10例,女8例,缓解期25例,男15例,女10例。另选31例健康体检者为对照组,男17例,女14例,年龄20-70岁,平均(45.2±25.1)岁。

1.2 方法

采集入选者清晨空腹肘静脉血4ml,肝素化后分别取1 00μl,加荧光单克隆抗体-PE、-PE、-PE,4℃孵育30min,溶血仪溶血,流式细胞仪计数,检测百分比。

1.3 统计学方法

实验数据采用表示,SPSS11.0软件进行分析,多组间两两比较采用方差分析,q检验。

2 结果

2.1 T细胞亚群检测结果:

见表1

注:与对照组相比,*p<0.05;**p<0.01

2.2 T细胞亚群类型检测分布情况:

见表2。

3 讨论

异常的免疫反应或正常的免疫调节的破坏是UC发病的重要环节。T淋巴细胞是免疫系统的重要组成部分,CD3为外周血成熟T细胞的表面标志。辅助T细胞(Th)细胞表面主要表达阳性细胞分子,细胞毒T细胞(Ts) Ts细胞表面主要表达阳性细胞分子,Th和Ts之间的相互诱导和制约构成T细胞免疫调控网络机制,对调节免疫应答和免疫自稳具有重要作用。比值是反映T淋巴细胞功能状态的重要指标。笔者研究显示,从总体来看,UC活动期增多,减少,比值增高,正常;UC缓解期,及比值与正常对照组无差异。但T细胞亚群异常类型存在异质性,研究显示,102例UC患者,T细胞亚群异常类型并不一致,其中,表现为正常,增多,减少,比值增高者比例最高,约占总人数的32.3%;其次,增多,增多,增多,比值降低者约占总人数的26.4%;正常,比值正常者约占总人数的22.6%,均为缓解期病人。本文结果显示,细胞免疫功能紊乱在UC发病中起着重要作用,比值异常与疾病的活动密切相关。细胞免疫功能紊乱类型争议较大,有报道比值增高[2];亦有报道比值降低[3]。笔者发现,UC患者部分表现比值增高,部分表现为比值降低,说明UC患者细胞免疫紊乱类型存在异质性和多样性,其临床意义不明。造成异质性和多样性的确切原因尚待进一步深入研究。

摘要：目的：观察不同中医证型溃疡性结肠炎患者T细胞免疫功能的变化。方法：采用流式细胞仪计数，对102例不同中医证型的溃疡性结肠炎患者外周血检测CD3+、CD4+、CD8+百分比。结果：UC活动期CD4+增多，CD8+减少，CD4+/CD8+比值增高，CD3+常；UC缓解期，CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比值与正常对照组无差异。CD4+/CD8+比值增高者占总人数的32.3%；CD4+/CD8+比值降低者约占总人数的26.4%；CD4+/CD8+比值正常者约占总人数的22.6%。结论：UC细胞免疫功能紊乱存在异质性，其具体机制有待更进一步研究探讨。

关键词：溃疡性结肠炎,细胞亚群

参考文献

[1]中华医学会消化病学分会．对炎症性肠病诊断治疗规范的建议[J]．中华内科杂志，2001；40(2)：138～141

[2]郁敏敏，求一秋，丁小云．活动性溃疡性结肠炎患者细胞免疫功能的观察．现代实用医学，2001；13(4)：190～191

[3]林燕，王新月，田德禄，等．温下法和温涩法对溃疡性结肠炎外周血T淋巴细胞亚群的影响．中国中西医结合消化杂志，2006；14(2)：78～81

T淋巴细胞免疫功能 篇2

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2008年2月至2010年2月收治的肝硬化患者64例, 男41例, 女23例;年龄28～85岁, 平均年龄41.8岁;全部患者肝硬化病症均由乙型肝炎所致, 其中LCC患者31例, CC患者33例。另选取经体检确定为健康者60例作为对照组患者, 包括34例男性和26例女性, 年龄22～81岁, 平均年龄37.8岁。各组患者在年龄、性别等方面的差异对比无统计学意义, 有可比性。

1.2 方法

患者在治疗前给予静脉血采集2～3mL及EDTA-K2抗凝。采用Beckman-Coulter XL4MCL型流式细胞仪进行T细胞亚群的检测, SSC FSC设门淋巴细胞, 对总T细胞、T4细胞、T8细胞、双阳性T细胞、双阴性T细胞的绝对含量和百分含量进行分析, 并对T4/T8的比值进行计算。

1.3 统计学方法

采用SPSS13.0统计学软件对相关数据进行统计分析, 采用t检验计量资料组间差异, 方差分析百分数组间差异, P<0.05说明各组差异对比具有统计学意义。

2 结果

对三组患者进行比较分析, 可知CC组患者T4/T8比值和T4细胞百分含量较对照组有所升高;总T细胞、T4和T8细胞、双阴性和双阳性T细胞的绝对含量有所下降;双阴性T细胞和T8细胞的百分含量有所下降。而LCC组患者与对照组患者相比, 总T细胞、双阴性T细胞、T8细胞的百分含量有所下降;T4/T8比值则有所升高;总T细胞、T4和T8细胞、双阴性和双阳性T细胞的绝对含量同样有所下降。就T4/T8比值而言, LCC组患者下降程度较CC组患者更为显著;对照组、CC组、LCC组T4/T8比值分别为 (1.55±0.52) 、 (3.14±1.49) 、 (2.44±0.79) 。外周血T淋巴细胞亚群具体检测结果见表1、表2。

3 讨论

本组病例研究显示, LC组患者体内T细胞免疫功能的异常问题较为明显, 存在T细胞生成抑制、T细胞免疫功能下降、T4细胞功能相对亢进、T4细胞应答能力减弱等异常现象[1]。由此可知, 在LC的影响下, 患者肝细胞容易生成炎性而坏死, 对肝细胞再生有一定的刺激性, 也会促使假小叶的形成, 而随着代偿向失代偿的转化, 肝组织内外血循环障碍也就会更加严重, 从而促成肝功能进行性恶化现象。当前, 对于LC的研究, 调节性T细胞、细胞因子的分析报告比较的多, 而总T细胞、T4和T8细胞等项目的分析报告则比较的少。而要掌握患者T淋巴细胞各亚群的变化规律, 就要对T细胞免疫功能状态进行全面掌握[2]。本组研究显示, LC患者T细胞各亚群的绝对含量与健康者相比均有所下降, 提示患者T细胞免疫功能受到抑制;而LCC组患者与健康者相比, T4细胞百分含量较高, T8细胞百分含量较低, 进而T4/T8比值有所提升, 显示LCC患者T细胞免疫功能受到抑制, 但T4细胞和T8细胞失衡, 有T4细胞功能相对亢进现象的存在;由于患者病情的进一步加重[3,4], 失代偿期后的T4细胞和T8细胞失衡会得到一定程度的缓解, 而这则是一种好转假象的呈现, 多是因为T4细胞应答减退所致。对于双阴性和双阳性T细胞而言, 其LC患者的的细胞含量相对减少, 说明T细胞生成得以减少。相关报告指出, 原发性胆汁性LC患者体内存在的CD8+细胞和CD4+细胞侵润至肝组织现象较为明显, 而肝组织中这两种细胞的数量则会有所增加。而事实上, 早期LC患者外周血T4和T8细胞可以向肝组织迁移[5], 而肝组织则会含有大量的T4和T8细胞, 外周血T4和T8细胞的数量则会降低;而当患者病情加重后, T细胞免疫就会受到抑制, T细胞生成、外周血及肝组织中的T4和T8细胞数量也会有所减少。与此同时, T4和T8细胞LC患者体内会出现失衡现象, T4细胞则相对比较亢进。在LC代偿期、失代偿期, 均有T4和T8细胞失衡问题的存在, 但与失代偿期T4和T8细胞失衡相比, 代偿期细胞失衡的程度更为明显[6]。

总之, 通过流式细胞术的应用, 检测外周血总T细胞、T4细胞、T8细胞、双阳性T细胞、双阴性T细胞的绝对含量和百分含量, 对T细胞免疫功能状态的信息掌握非常重要, 可促使患者病情判断、预后评估、疗效检测的有效开展和实施, 同时对疾病相关规律及机制的发现和总结也有着重要的研究意义。

摘要：目的 对肝硬化患者外周血T淋巴细胞亚群变迁及免疫功能状态进行分析。方法 选取64例肝硬化患者和60例健康者作为研究对象, 其中肝硬化患者分为31例LCC患者和33例CC患者。通过流式细胞术的应用, 对全组患者外周血T淋巴细胞亚群水平进行检测, 并对检测结果进行分析和对比。结果 LCC和CC组患者与对照组患者相比, 总T细胞及格亚群细胞的绝对含量均有所降低, 双阴性T细胞百分含量也有所降低, 而T4/T8比值则得以上升, 其中CC组患者T4/T8比值与LCC组患者相比, 升高程度更为显著。结论 LC组患者体内T细胞免疫功能的异常问题较为明显, 在病情加重的情况下, T4细胞的应答能力则会减退。

关键词：外周血T淋巴细胞亚群,免疫功能,肝硬化

参考文献

[1]吴继周, 周桂英, 罗光汗, 等.细胞免疫状态的慢性乙肝肝组织学及免疫组织化学变中的作用[J].中华传染病杂志, l997, l5 (3) :l58.

[2]吴本俨, 沙之阁, 司永仁, 等.肝硬化与肝癌患者T细胞亚群研究[J].中华消化杂志, l989, 9 (5) :284.

[3]张静, 徐维家, 王青.乙肝后肝硬化患者外周血T淋巴细胞亚群及HBV-DNA含量变化分析[J].国际检验医学杂志, 2006, 27 (12) :1081-1082.

[4]贾绮宾, 梁学亚, 吴改玲, 等.肝癌、肝硬化患者血清TNF-α, IL-2, sIL-2R检测的临床意义[J].胃肠病学和肝病学杂志, 2002, 20 (3) :243-244.

[5]吴丽娟, 刘霞, 赵文利.流式单平台和双平台计数定量检测外周血淋巴细胞亚群的实验研究[J].国际检验医学杂志, 2012, 33 (2) :143-145.

T淋巴细胞免疫功能 篇3

通过对中年人中医体质分型与T细胞亚群功能状态的相关性分析,有助于早期发现和早期预防疾病,降低个人的健康风险和疾病发生率,充分发挥中医 “治未病”理论在保障人民群众身体健康方面的作用。

现就2013年11月10日 - 2014年12月13日以来,到黑龙江中医药大学附属第一医院治未病中心进行体质辨识的中年人(45~59岁)共300例进行分析。

1材料与方法

1.1调查对象2013年11月10日 - 2014年12月13日,到黑龙江中医药大学附属第一医院治未病中心进行体质辨识的中年人(45~59岁),男性121例, 女性129例。

1.2方法2009年4月中华医药学会在王琦等研究的基础上正式发布中国第一部《中医体质分类与判定标准》(ZYYXH/T157-2009中医体质分类与判定)[4], 将中国人的基本体质分为九种:平和质、气虚质、湿热质、阳虚质、瘀血质、气郁质、阴虚质、痰湿质和特禀质。除平和质为正常体质外,其余8种都属偏颇体质, 即亚健康状态。采用中医体质量表的形式进行评分判断分型。中医体质量表共由60个条目组成,每个亚量表由7~8个条目构成。分型判断方法:中医体质量表每一条目为5级评分,通过计算原始分及转化分,对照标准进行体质分型。原始分 = 各个条目分值相加。 转化分数 =[(原始分 - 条目数)/(条目数×4)] ×100。 判定标准:平和质转化分≥60分,且其他8种单纯偏颇体质转化分均<40分时,判定为是;否则判定为否。某种单纯偏颇体质转化>40分,判定为是。根据上述判定标准,8种单纯偏颇体质中的一种体质转化分I>40分,且其他单纯偏颇体质转化分<40分,确定为某种单纯偏颇体质,被调查者出现两种或两种以上单纯偏颇体质转化分≥40分,为兼夹体质。

2结果

2.1一般情况共调查300例年龄在45~59岁的中年人,其中男性121例,女性129例。

2.2中年人中医体质分型分布调查对象中医体质分型结果见表1、表2。

2.3不同体质的T细胞表达比例气虚质、阳虚质、 湿热质、痰湿质、平和质、阴虚质及气郁质6种体质类型的T细胞比例分布水平比较无差别,气虚质T辅助性淋巴细胞(CD3+CD4+/CD45+)比例下降,与其他体质类型相比,无统计学意义差异(P>0.05)。见表3。

注:a 不同体质类型淋巴亚群相比 P>0.05

3讨论

3.1中年人体质分布类型从9种体质分布类型分析,中年人的体质类型分布比例依次为:气虚质 (39.0%)、阳虚质(23.7%)、湿热质(16.0%)、痰湿质 (15.3%)、平和质(15.0%)、阴虚质(8.3%)、气郁质 (4.0%)和特禀质(0.3%)。个体出现不止一种体质类型现象普遍,兼夹体质占有一定比例。个体体质类型分布前5位依次为:气虚质(23.3%)、阳虚质(20.7%)、气虚兼痰湿质(9.0%)、平和质(8.0%)和气虚兼湿热质 (5.0%)。分析其中原因,气虚质体质状态的主要特征为:元气不足,脏腑功能减退。

3.2中年人中医体质分型与T细胞免疫功能淋巴细胞亚群的功能状态与机体的免疫功能密切相关,机体的免疫功能又与体质分型具有一定的相关性。根据辅助性T淋巴细胞来判断淋巴细胞亚群的功能状态, 从而了解机体的免疫功能状态。检测6种主要中医体质类型的T细胞比例分布水平比较均无差别,但气虚质T辅助性淋巴细胞(CD3+CD4+/CD45+)比例出现下降表现。T细胞在免疫系统中处于核心地位,参与免疫应答,执行各种免疫功能,抵抗疾病,直接或间接参与细胞免疫应答[4]。近年的研究表明衰老过程免疫系统发生复杂的重塑,而淋巴细胞尤其是T细胞功能的改变最明显[5]。影响T细胞衰老的因素还有很多,如所T细胞处的微环境、个体的饮食习惯、锻炼情况、疾病和不同种群情况不一致,而老年前期(45~59岁) 是机体衰老加速的敏感时期[6]。T淋巴细胞由辅助性T淋巴细胞和抑制性T淋巴细胞组成。这两类亚群具有不同免疫功能,其中辅助性T淋巴细胞主要是CD4+淋巴细胞亚群,抑制性T淋巴细胞主要是CD8+淋巴细胞亚群。正常时这两种亚群动态的平衡,处于一定的比例范围内,机体免疫功能保持相对平衡。目前认为衰老时免疫功能的减退主要与T细胞有关[7]。T细胞水平的改变在机体免疫功能老化的过程中扮演着重要角色[8]。中年人处于向老年过渡的阶段,机体免疫功能出现下降趋势,是各种疾病的易感人群。

T淋巴细胞免疫功能 篇4

大蒜素能够刺激食欲, 提高营养物质的利用率, 增强新陈代谢;可预防疾病, 增强机体免疫功能;降低食品胆固醇;不在食用畜禽产品中形成有害残留, 无耐药性和公害;资源丰富, 且价格便宜, 使用方便, 因此, 大蒜素对于畜牧业生产有广阔的应用前景。

大蒜及大蒜素对心血管和免疫系统有有益影响[1]。大蒜素能提高体细胞的免疫功能, 可能是一种较好的免疫激发性中草药。黄霞[2]等在大蒜油对小鼠免疫功能影响的试验中发现, 服药组的脾脏、胸腺的重量均有增加, 提高细胞免疫、体液免疫和非特异性免疫功能。西山信好[3]等对绵羊红细胞PFC抗体试验表明, 大蒜提取液几乎能完全抑制胸腺摘除引起的免疫功能低下。大蒜素还能明显提高淋巴细胞转化率及T淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯 (ANAB) 阳性率的作用, 使中枢淋巴器官和外周淋巴器官增殖, 增强细胞免疫功能[4,5]。大蒜素作为一种免疫调节剂, 在抗CMV感染模型中, 能增强小鼠巨噬细胞功能, 通过上调IFN-γ水平而发挥抗CMV感染效应[6]。Ghazaanfari (2000) 报道, 大蒜新素可增强Th1细胞分化并发挥免疫效应[7], Lamm等 (2001) 报道, 大蒜新素能够刺激淋巴细胞增殖及增强巨噬细胞吞噬功能, 刺激释放IL-2, IFN-γ和Th1类细胞因子[8];在人医临床抗肿瘤研究中, 大蒜提取物能促进IL-2和IFN-γ的分泌, 增强NK细胞和淋巴细胞活性[9]。

本试验在肉鸡日粮中添加不同水平的大蒜素, 通过生长发育期主要免疫器官重量和T淋巴细胞阳性率指标的测定, 对大蒜素影响肉鸡免疫系统进行了初步探讨, 从而为大蒜素对肉鸡生产中的应用提供一定的理论依据。

1 材料和方法

1.1 试验动物及分组

将72只1日龄AA肉鸡随机分成4个组, 每组设3个重复, 每个重复6只鸡。试验期采用网上平养, 免疫与饲养管理按肉仔鸡饲养管理的常规程序进行, 饲养6周。

1.2 大蒜素

大蒜素 (纯品) 由山东省饲料监察所提供。

1.3 试验日粮

按NRC (1994) 肉鸡饲养标准, 配制玉米-豆粕型基础日粮, 其配方组成及营养水平见表1。I组饲喂基础日粮为对照组, II、III、IV组分别在基础日粮中添加12.5mg/kg、37.5mg/kg及62.5mg/kg的大蒜素。

(%)

1.4 免疫程序与饲养管理

免疫程序:7日龄新城疫Lasota系冻干苗点眼滴鼻, 12日龄法氏囊疫苗点眼滴鼻, 21日龄法氏囊疫苗点眼滴鼻, 28日龄新城疫Lasota系冻干苗肌肉注射。网上平养, 自由采食和饮水, 试验期6周。

1.5 样品采集与处理

于21、35日龄, 每个重复随机取2只 (公母各1只) 处死后剖开腹腔剥离法氏囊、脾脏和胸腺并称重;于28、42日龄, 每个重复随机取2只 (公母各1只) 翅静脉采血, 将采集的血液加肝素抗凝。

1.6 测定指标和方法

(1) 测定指标: (1) 免疫器官相对重量=免疫器官重 (mg) /活重 (100g) 。 (2) 血液中T淋巴细胞阳性率的测定, 将28、42日龄抗凝血1ml, 当日用酸性α-醋酸萘酯酶 (ANAE) 染色法[10]测定。 (2) 测定方法: (1) 主要试剂:淋巴细胞分离液 (由上海试剂二厂提供) 。2.5%的戊二醛 (固定液) , 在0.01mol/L p H值7.4磷酸盐缓冲液9ml中加入25%戊二醛1ml, 混合, 置4℃冰箱中保存备用。副品红液:将副品红4g加入2 mol/L盐酸100ml, 37℃溶解过滤, 4℃冰箱中保存。4%亚硝酸钠溶液:取亚硝酸钠400mg溶于蒸馏水10ml中, 临用前配制。六偶氮副品红溶液:取所配制的亚硝酸钠溶液3ml, 慢慢滴入副品红溶液3ml中, 边滴边搅拌, 此时有刺激性气体产生。充分混合1min后备用。α-醋酸萘酯溶液:2g溶于丙酮100ml。1/15mol/L p H7.6磷酸盐液 (甲液:KH2PO49.08g加蒸馏水至1000ml。乙液:Na2HPO49.74g加蒸馏水至1000ml) 。取甲液13ml, 加入乙液87ml, 即为1/15mol/Lp H7.6磷酸盐液。反应液:1/15mol/Lp H7.6磷酸盐液89ml, 缓慢加入六偶氮副品红溶液6ml, 缓慢加入α-醋酸萘酯溶液2.5ml, 充分混匀, 调p H5.8~6.0, 临用前配制。甲基绿染色液:甲基绿1g置37℃溶解于100ml蒸馏水中, 4℃冰箱中保存备用。 (2) 方法:分离淋巴细胞:取抗凝血1ml, 加入1ml Hank’s液稀释, 然后将其加到含有2ml淋巴细胞分离液的离心管中, 1500rpm离心10min, 将悬浮的淋巴细胞取出, 用Hank’s液洗涤后, 加少量Hank’s液摇匀。制片:取上述细胞悬液1滴, 加到洁净玻片上, 涂片, 自然干燥。固定染色:将制备的细胞涂片用2.5%戊二醛4℃固定10min, 流水冲洗, 待干。将玻片置于盛有反应液的染色缸内, 37℃孵育1h, 取出用水冲洗, 待干。复染:用甲基绿染色液染30S, 水洗, 吹干。油镜下观察计数。

1.7 数据统计分析

用SPASS统计软件进行方差分析, 用邓肯氏法进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 免疫器官重量

肉鸡21、35日龄法氏囊、脾脏和胸腺的相对重量。测定结果见表2。

注:同列数据肩标不同者表示差异显著 (P<0.05) ;无肩标者表示差异不显著 (P>0.05) 。

表2中, 21日龄法氏囊、脾脏的相对重量各组间相比无显著差异 (P>0.05) , 但有随大蒜素添加水平升高而增加的趋势;胸腺相对重量III、IV组比对照组显著增加 (P<0.05) 。35日龄法氏囊相对重量组间相比, II、III、IV组比对照组显著增加 (P<0.05) ;脾脏相对重量, IV组显著高于其余各组 (P<0.05) ;胸腺相对重量虽组间差异不显著 (P>0.05) , 但随大蒜素添加量升高有增加的趋势。

试验结果显示, 日粮中添加大蒜素对肉鸡法氏囊、脾脏和胸腺发育有促进作用。生长前期对胸腺发育影响最明显, 生长后期对法氏囊和脾脏的发育影响最明显。35日龄上述免疫器官相对重量值与21日龄比较, 法氏囊和脾脏明显降低, 胸腺有所提高。

2.2 T淋巴细胞阳性率

测定结果见表3。

(%)

注:同行数据肩标不同字母表示差异显著 (P<0.05) ;相同字母表示差异不显著 (P>0.05) 。

由表3分析:28和42日龄, 肉鸡的T淋巴细胞阳性率组间相比, III、IV组比对照组显著升高 (P<0.05) 。IV组T淋巴细胞阳性率最高。42日龄肉鸡T淋巴细胞阳性率与28日龄相比有降低的趋势, 这与后期免疫器官相对重量降低的趋势一致。

3 讨论

3.1 大蒜素对肉鸡法氏囊发育的影响

本试验添加大蒜素对肉鸡免疫器官发育的影响表明, 21日龄肉鸡试验组法氏囊的相对重量比对照组高, 35日龄肉鸡法氏囊相对重量显著高于对照组, 由于法氏囊是禽类B淋巴细胞发育成熟的地方, 大蒜素通过影响法氏囊的发育, 促进B淋巴细胞的生长, 从而提高肉鸡的免疫功能。肉鸡生长后期法氏囊相对重量较前期降低, B淋巴细胞生长受阻, 免疫机能降低。

3.2 大蒜素对肉鸡脾脏发育的影响

大蒜素对脾脏发育的影响表明, 在免疫后14d, 大蒜素3个处理组脾脏相对重量都高于对照组, 免疫后28d, 大蒜素3个处理组脾脏相对重量也都高于对照组, 而且IV组脾脏相对重量显著高于对照组。说明大蒜素有延缓脾脏萎缩的作用。

3.3 大蒜素对肉鸡胸腺发育的影响

大蒜素对胸腺的影响表明, 在免疫后14d, 大蒜素3个处理组鸡的胸腺相对重量都高于对照组, 而且III、IV组显著高于对照组;免疫后28d, 大蒜素3个处理组鸡的胸腺相对重量也都高于对照组。由于胸腺是机体T淋巴细胞发育的地方, 因此, 与对照组相比, 大蒜素3个水平都有不同程度的促进胸腺发育的功能, 促进T淋巴细胞增殖和成熟, 延缓胸腺的萎缩, 维持机体的正常免疫功能。

3.4 大蒜素对肉鸡T淋巴细胞阳性率的影响

T淋巴细胞是细胞免疫中不断再循环的主要成分, 在衰老过程中, 循环T细胞等发生质和量的变化引起免疫潜能的降低[11], 许多资料证明T淋巴细胞功能下降是机体老化的主要免疫学变化, 老年人的T淋巴细胞数量、单核细胞反应和T淋巴细胞对最适宜的丝裂原刺激作用, 均由于反应细胞的数目下降和细胞的倍增能力下降而降低[12]。因此, T淋巴细胞的数量、质量是否正常, 关系到机体细胞的免疫功能。酸性α—醋酸萘酯酶 (ANAE) 是成熟T细胞含有的酶, 用它识别外周血液中成熟T淋巴细胞。在一定条件下, T淋巴细胞阳性率 (ANAE+%) 反映T淋巴细胞数量的变化, 很好反映机体细胞免疫机能的高低和评价抗病力的强弱。本试验在肉鸡日粮中添加12.5~62.5mg/kg的大蒜素, 明显提高了肉鸡血液T淋巴细胞阳性率。Ghazaanfari (2000) 报道, 大蒜新素可增强Th1细胞分化并发挥免疫效应[7], Lamm等 (2001) 报道, 大蒜新素能够刺激淋巴细胞增殖及增强巨噬细胞吞噬功能, 刺激释放IL-2, IFN-γ和Th1类细胞因子[8]。IL-2, IFN-γ和Th1类细胞因子介导T淋巴细胞的大部分效应发挥免疫作用。可见, 大蒜素能够促进T淋巴细胞增殖和成熟, 进一步调节和提高肉鸡细胞免疫功能。

4 结论

该试验中, 12.5mg/kg的大蒜素添加量对21日龄脾脏和35日龄胸腺促进发育作用最明显;37.5mg/kg的大蒜素添加量对35日龄法氏囊促进发育作用最明显;62.5mg/kg的大蒜素添加量对21日龄法氏囊和胸腺、35日龄脾脏发育及28、42日龄T淋巴细胞增殖促进作用最明显, 且除35日龄脾脏外, 37.5mg/kg的大蒜素添加量与62.5mg/kg的大蒜素添加量对21日龄法氏囊和28、42日龄T淋巴细胞增殖差异不大。综上, 不同添加量的大蒜素可不同程度地促进21、35日龄肉鸡免疫器官发育和28、42日龄肉鸡血液T淋巴细胞增殖和成熟。

摘要：试验共选用72只1日龄AA肉鸡, 随机分成4组。Ⅰ组饲喂基础日粮为对照组, Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在基础日粮中添加12.5、37.5、62.5mg/kg的大蒜素。将肉鸡饲养至21、28、35、42日龄进行相应处理, 测定了21、35日龄肉鸡免疫器官的相对重量及28、42日龄肉鸡T淋巴细胞阳性率。测定结果表明, 大蒜素处理的Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组的肉鸡, 35日龄法氏囊重量均比对照组显著增加 (P<0.05) , Ⅲ、Ⅳ组21日龄胸腺和Ⅳ组35日龄脾脏重量均比对照组显著增加 (P<0.05) 。T淋巴细胞阳性率相比, Ⅲ、Ⅳ组28和42日龄T淋巴细胞阳性率明显高于对照组 (P<0.05) 。所以, 在日粮中添加大蒜素, 可促进21、35日龄肉鸡免疫器官发育和28、42日龄肉鸡血液T淋巴细胞增殖和成熟。

关键词：肉鸡,大蒜素,免疫器官,T淋巴细胞阳性

参考文献

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T淋巴细胞免疫功能 篇5

1资料与方法

1.1一般资料:选择2014年1月至2015年5月本院ICU的住院患者100例,其中男62例,女38例;年龄21~88岁,平均年龄(62.5±10.5)岁。所有病例均排除自身免疫性疾病和免疫缺陷性疾病,并且近期也未使用过影响免疫系统功能的药物。选择同期本院健康体检者50例为健康对照组,其中男29例,女21例;年龄23~79岁,平均年龄(60.3±11.6)岁。两组在年龄及性别构成比差异上无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2仪器与试剂:流式细胞仪为美国BD公司的FACSCalibur三色单平台仪器,检测试剂

CD4-FITC/CD8-PE/CD3-Per CP抗体、Trucount TM计数管、FACS(10X)溶血素、四色荧光标准微球也来自于BD公司,并严格按照使用说明书使用。所有检测项目均严格执行室内质量控制,质控品来自于BECKMAN COULTER(贝克曼)公司。

1.3方法:两组均采用相同的样本处理及检测方法,采集清晨空腹肘静脉血2.0 m L,加入含有EDTA-K2抗凝的专用真空采集管中,充分混匀抗凝。分别在Trucount TM计数管中加入CD3-FITC/CD4-APC/CD8-PE抗体20μL,用反向加样法准确加入抗凝全血50μL,充分混匀,室温避光放置15~20 min后再加入450μL专用FACS(10X)溶血剂,混匀,室温放置15 min后上机运行Multiset程序检测获取数据,处理好的样本在2 h内检测完毕。

注:*与健康对照组比较,差异具有极显著意义(P<0.01)

注:*与重症组比较,差异具有极显著意义P<0.01

1.4统计学处理:采用SPSS20.0软件对数据进行统计学分析,计量资料采用均数±标准差(±s)表示,组间统计比较采用方差分析和t检验,以P<0.05为差别有统计学意义。

2结果

2.1观察组与健康对照组比较,观察组外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数量、CD4+%、CD4+/CD8+明显低于健康对照组,差异均具有极显著意义(P<0.01);而外周血CD8+%明显高于健康对照组,差异具有极显著意义(P<0.01)。见表1。

2.2将观察组按序贯器官衰竭评估(S O FA)标准,分为重症组(SOFA<3分)和危重症组(SOFA评分≥3分)。两组比较,危重症组外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞数量、CD4+%、CD4+/CD8+明显低于重症组,差异具有统计学意义(P<0.01);CD8+T淋巴细胞变化不明显(P>0.05);而CD8+%明显高于重症组,差异均有统计学意义(P<0.01)。见表2。

3讨论

重症加强医疗病房(ICU)的住院患者,常常由于重大的创(烧)伤、手术操作、恶性肿瘤、出血、缺血缺氧、休克、急性中毒等非感染因素和多种病原微生物感染引发的脓毒血症所引起。患者病因错综复杂,病情危重且变化较快,患者机体往往处于一个急性应激状态,主要表现为蓝斑-交感-肾上腺髓质系统和下丘脑-垂体-肾上腺皮质系统兴奋,肾上腺糖皮质激素分泌旺盛。如果这种应激状态过于强烈而且持续时间较长,就会引起机体代谢和器官功能的变化以及组织器官的损伤。甚至会引发多器官功能障碍综合征(MODS)和多器官功能衰竭(MOF)。此时,患者机体就会发生一系列的病理生理变化,包括心血管系统、消化系统、凝血系统、免疫系统等方面的变化,而免疫系统功能的状况和ICU患者疾病的发生、发展与转归密切相关[3]。MODS/MOF是重症患者死亡的主要原因之一,因此,研究ICU患者的免疫功能状况,对于患者的病情判断以及指导治疗就显得尤为重要。

外周血中T淋巴细胞来源于骨髓,在胸腺中发育成熟。T细胞(抗原)受体与CD3分子复合物(TCR-CD3)是T淋巴细胞的特有标志。T淋巴细胞具有高度的异质性,根据其表面标志和功能特性,可以分为CD3+CD4+的辅助性T淋巴细胞(CD4+Th)和CD3+CD8+的抑制性T淋巴细胞(CTL)。CD4+T淋巴细胞在调节免疫系统中对免疫反应的启动、最终表现形式和强弱起着关键作用。CD4+Th细胞在初始阶段接受抗原刺激后,继续分化为分泌型的Th细胞亚群:Th1细胞、Th2细胞、Th3细胞和Th17细胞。Th1细胞能分泌γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-2(IF-2)。Th1细胞的主要功能是增强吞噬细胞介导的抗感染、抗肿瘤免疫,在细胞免疫应答中发挥重要作用,在病理情况下,Th1细胞还参与迟发型的超敏反应和器官特异性自身免疫性疾病。Th2细胞分泌一些细胞因子(IF-4、IF-5、IF-6、IF-10及IF-13),Th2细胞的主要功能是辅助体液免疫应答,并在过敏性疾病和感染性疾病中发挥重要作用。CTL细胞通过分泌穿孔素、颗粒酶、淋巴毒素以及通过Fas L途径导致靶细胞的裂解和凋亡。T淋巴细胞是细胞免疫中最主要的免疫细胞,几乎参与了所有的特异性免疫反应。既是直接抵御抗原和肿瘤细胞的效应细胞,又是体液免疫与细胞免疫反应之间的调节者[4]。其各亚群之间的动态平衡,对于维持与调节机体的免疫系统功能状态尤为重要。

正常情况下,CD3+细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞的数量处于一个动态平衡并且相互调节的状态。CD4+/CD8+的值反映了机体的免疫平衡状态,CD4+/CD8+明显降低、说明机体处于免疫抑制状态[5,6]。本文研究显示,ICU患者外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞数量、CD4+%、CD4+/CD8+明显低于健康对照组,CD8+%明显高于健康对照组,说明患者的免疫功能明显低下,细胞免疫功能处于明显抑制状态。其机制可能为:当机体遭受严重创(烧)伤、恶性肿瘤、急性中毒、休克、感染后所致脓毒症等,T淋巴细胞对特异性抗原刺激无增殖性反应,大量的T淋巴细胞发生凋亡。凋亡清除了大量活化的T淋巴细胞,使诱导T淋巴细胞克隆无反应,患者淋巴细胞数量明显减少,患者机体的特异性免疫功能处于抑制状态,而非特异性免疫功能则呈高度活跃状态;另一方面,一些严重的病因使得CD4+T淋巴细胞分化异常,CD4+/CD8+比值失衡,Th1细胞/Th2细胞平衡状态发生漂移,其分泌的细胞因子也随即发生改变,结果导致了机体免疫功能的障碍[7]。这样一来,ICU的患者就很容易丧失对迟发型过敏反应的能力、清除病原体无力、容易引起医源性感染和罹患恶性肿瘤以及病情迁延不愈,甚至恶化。本研究中,观察组CD8+T淋巴细胞绝对数量较对照组明显降低,而CD8+的百分比明显升高,是因为观察组中总T淋巴细胞绝对数量明显降低所致,并无矛盾之处。另外,本研究还显示,危重症组较重症组患者外周血CD3+、CD4+、CD8+淋巴细胞数量、CD4+百分比、CD4+/CD8+明显降低,CD8+的百分比明显升高,说明危重症组比重症组免疫功能障碍更严重,从而说明患者病情越严重,机体的免疫功能抑制越严重[8],患者的预后更差。当然,由于条件所限,未能同时进行如淋巴细胞亚群中B细胞、NK细胞以及免疫球蛋白,补体等的检测是本研究的不足之处,如能进行,将会对ICU患者的免疫功能监测更客观和全面。

综上所述,ICU患者存在免疫功能障碍,尽早和动态对其外周血T淋巴细胞亚群进行检测,对于ICU患者病情的判断、指导综合治疗具有重要的临床意义。

摘要：目的 探讨外周血T淋巴细胞亚群免疫分型在重症患者中的变化及临床意义。方法 收集2014年1月至2015年5月我院重症加强医疗病房(ICU)的住院患者100例为观察组,并选择同期健康体检人员50例为健康对照组,采用流式细胞仪分别检测两组人员的外周血T淋巴细胞亚群数量(绝对计数)和百分数。另将观察组按序贯器官衰竭评估(SOFA)标准,分为重症组(SOFA<3分)和危重症组(SOFA≥3分)进行比较,并进行统计分析。结果 观察组外周血CD3+淋巴细胞(简称CD3+)、CD3+CD4+T淋巴细胞数量(简称CD4+)、CD3+CD8~+T淋巴细胞数量(简称CD8+)、CD4+%、CD4~+/CD8+比值明显低于健康对照组,差异均具有统计学意义(P<0.01);而外周血CD8+%明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。重症组和危重症组比较,危重症组CD3+、CD4+细胞数量、CD4+%、CD4+/CD8+比值明显低于重症组,差异均具有统计学意义(P<0.01);而CD4+%明显高于重症组,差异有统计学意义(P<0.01);CD8+变化不明显(P>0.05)。结论 重症加强医疗病房(ICU)患者存在外周血T淋巴细胞水平异常,表明患者机体免疫功能存在障碍,且免疫功能状态与病情危重程度有关。尽早检测ICU患者外周血T淋巴细胞数量,对于ICU患者病情的早期诊断、评估及指导临床治疗具有较好的临床意义。

关键词：T淋巴细胞亚群,绝对计数,重症患者,免疫功能

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T淋巴细胞免疫功能 篇6

T淋巴细胞亚群计数、NK细胞计数对于对评定运动员细胞免疫机能有一定作用,一般采用流式细胞仪进行检测。用流式细胞仪进行检测时,根据细胞上的特异抗原CD分子(如CD3阳性即总T细胞、CD3/CD4双阳性即辅助性T细胞、CD3/CD8双阳性即抑制性T细胞、CD3阴性且CD16/CD56双阳性即NK细胞)不同,而需采用特异性荧光标记抗体。目前,有一种新推出的Biolegend的CD3-P E Cy5/C D4-P E/CD 8-F ITC鸡尾酒抗体和CD 3-F IT C(CD16+CD56)-PE鸡尾酒抗体,和传统抗体相比虽标记顺序略有差异但使用荧光相同且更经济。但在流式细胞仪上是否适用这种新抗体检测T细胞亚群和NK细胞,并未见有报道。

本研究的目的是在流式细胞仪上用此新抗体检测运动员T细胞亚群和NK细胞并和传统抗体进行比较,确定2种抗体的分析检测结果是否具有差异和可比性,从而明确在流式细胞仪上是否适用这种新抗体检测T细胞亚群和NK细胞。

2 对象与方法

2.1 研究对象

运动员男21人,年龄(17±1.20)岁,身高(176±4.28)cm,体重(71±5.10)kg,专项训练年限(3±1.19)年。女29人,年龄(18±2.40)岁,身高(166.5±2.69)cm,体重(61.4±4.98)kg,专项训练年限(2.4±1.25)年。

2.2 测试方法

2.2.1 仪器

贝克曼EPICS XL型流式细胞仪,白杨BFX5-320低速离心机,VORTEX涡旋混合器。

2.2.2 试剂

(1)荧光抗体:Coulter的抗人的CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PE Cy5三标抗体,同型对照鼠抗人IgG 1-FITC IgG 1-PE/IgG 1-PE Cy5抗体;Coulter的抗人的CD3-FITC/(CD16+CD56)-PE双标抗体,同型对照鼠抗人IgG 1-FITC/IgG1-PE抗体;Biolegend的抗人CD3-PE Cy5/CD4-PE/CD8-FITC Cocktail抗体,同型对照IgG 1-PE Cy5/IgG 1-PE/IgG 1-FITC抗体;Biolegend的抗人CD3-FITC/(CD16+CD56)-PE Cocktail抗体,同型对照IgG 1-FITC/IgG 2a-PE抗体;(2)其他试剂:Flow Check质控品,OptiLyse C溶血剂,15%EDTAK2溶液,1×PBS缓冲液,抗凝剂取5ul置于1.5mL离心管中。

2.2.3 血样采集

分3～4次,采集50例(男21例,女29例)运动员静脉血1mL;混匀。白细胞计数控制在5～10×109/L,全血采集后6小时内制备。

2.2.4 样本编号

(1)流式细胞仪上2种抗体检测T细胞亚群:每份血样制备4份,阴性对照管编号C1～N,用Coulter抗体标记的记做C_C1～N,用Biolegend抗体标记的记做B_C1～N。阳性测试管编号T1～N,用Coulter抗体标记的记做C_T1～N,用Biolegend抗体标记的记做B_T1～N。(2)流式细胞仪上2种抗体检测NK细胞每份血样制备4份,阴性对照管编号D1～N,用Coulter抗体标记的记做C_D1～N,用Biolegend抗体标记的记做B_D1～N。阳性测试管编号N1～N,用Coulter抗体标记的记做C_N1～N,用Biolegend抗体标记的记做B_N1～N。

2.2.5 测试方法

(1)100uL全血加入20uL阴性对照或荧光抗体混匀,25℃避光存放20min;(2)加入500uL溶血剂,25℃混匀避光存放10min;(3)加入500uL1×PBS缓冲液,25℃混匀避存放10min;(4)1500rpm,离心5min;(5)弃上清液,加入1mL1×PBS缓冲液;(6)上机分析。分析方案,FITC-FL1通道/PE-FL2通道/PE Cy5-FL4通道,进行T细胞亚群计数。FITC-FL1通道/PE-FL2通道,进行NK细胞计数。阴性对照要求FL1/FL2/FL4通道计数<2%。(7)分析指标:T细胞亚群(T3、T4、T8百分比、T4/T8比值)、NK细胞(T3、NK百分比)。

2.3 统计方法

用SPSS统计软件进行配对t检验。

3 结果

3.1 流式细胞仪上2种荧光抗体检测T细胞亚群的比较结果(表1)

表1显示,流式细胞仪上2种荧光抗体检测T细胞亚群,T3、T4、T8百分比、T4/T8比值等指标无显著性差异。

3.2 流式细胞仪上2种荧光抗体检测NK细胞比较结果(表2)

表2显示,流式细胞仪上2种荧光抗体检测NK细胞,T3、NK百分比等指标无显著性差异。

4 讨论

血液中T淋巴细胞亚群和NK细胞的检测是观察机体细胞免疫水平的重要方法。体育科研中也常检测外周血中T细胞亚群(CD3/4/8)和NK细胞(CD3/16/56)检测,并结合其他指标对于分析运动员的细胞免疫状况,进行运动员机能评定可以提供相当佐证。我中心运动病理实验室的贝克曼EPICS XL流式细胞仪进行T细胞亚群和NK细胞检测时,原使用Coulter抗体。如抗人的CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PE Cy5三标抗体及其同型对照用于检测T细胞亚群,抗人的CD3-FITC/(CD16+CD56)-PE双标抗体及其同型对照用于检测NK细胞。但在使用上述抗体时,我们发现并和同行交流后提出如下问题:

(1)原抗体实际使用过程中预处理时间较长,步骤繁琐,平均一个样本的预处理时间需要30min左右,如再加上阴性对照和上机分析的时间就非常耗时耗力,这常是制约大通道、快速检测样本的瓶颈。因此,寻找其他便捷、可替代的抗体标记方法和样本预处理方法,缩短检测时间就是我们必须考虑的任务之一。

(2)原抗体的成本较高。如这2种抗体的包装规格仅都是50Test/每瓶,不计其他耗才的情况下,每一个样本上述2种指标的检测成本都十分惊人。同样在临床上,这种检测也是相对昂贵的收费项目,但通过相对大的测试样本数仍可较好维持此项检测。但对于体育科研而言,检测样本无法与临床相比,因此社会效益就是我们必须考虑的任务之二。

(3)有报道的自制试剂或国产试剂由于多为单标抗体,不仅没有简化标本预处理步骤,反而增加了荧光抗体的互相干扰而检测结果差强人意。

最近一种新推出的Biolegend的CD3-PE Cy5/CD4-PE/CD8-FITC鸡尾酒抗体和CD3-FITC/(CD16+CD56)-PE鸡尾酒抗体和原抗体比较虽抗原标记荧光顺序略有差异但有如下特点,可一定程度上解决上述矛盾。

(1)标记荧光与原抗体完全一致保证了在流式细胞仪上使用的通用性和替换可能,而且是三标或双表抗体这一良好特性保证了预处理的简易性。

(2)新抗体具有更佳的性价比,而且临床实验室也已开始大量使用。

(3)在流式细胞仪上用这2种抗体检测T细胞亚群和NK细胞并进行比较,还未见报道。(1)临床上由于前述测试样本相对较大,基本不存在成本压力问题;(2)基础科研上多用单标抗体进行肿瘤标记物检测,开展正常人(如运动员机能评定)T细胞亚群和NK细胞的三标或双标荧光抗体法检测并不多见。因此,本研究不仅具有非常大的实际测试和工作必要性,而且有一定社会效益。

本研究的实验结果显示,流式细胞仪上2种荧光抗体检测T细胞亚群、NK细胞,T3、T4、T8、NK百分比、T4/T8比值等指标无显著性差异(P>0.05),结果具有高度可比性。Biolegend新抗体高度适用于流式细胞仪上检测运动员T细胞亚群、NK细胞,而且长期使用更经济,建议作为首选标记抗体。

摘要：目的 通过用2种不同免疫荧光抗体标记运动员T细胞亚群和NK细胞,在流式细胞仪上测定并进行结果比较。方法 采集50例运动员静脉血,分别用Coulter原抗体和Biolegend新抗体标记T细胞亚群和NK细胞,在流式细胞仪上检测T细胞(T3)、辅助性T细胞(T4)、抑制性T细胞(T8)、NK细胞(百分比)等指标,比较测试结果的差异。结果 用2种荧光抗体检测运动员上述指标无统计学差异(P>0.05),结果具有高度可比性。结论 Biolegend新抗体高度适用于流式细胞仪上检测运动员T细胞亚群、NK细胞检测,而且长期使用更经济,建议作为首选标记抗体。

关键词：免疫荧光,抗体,T细胞,NK细胞,流式细胞术

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T淋巴细胞免疫功能 篇7

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2010年1月—2012年1月上高县人民医院收治的行手术治疗的结肠癌患者100例, 按数字随机法将患者分为观察组和对照组, 每组50例。患者术后均经病理检查确诊为结肠癌。本研究经医院伦理委员会审核批准, 患者均签署知情同意书。观察组中男25例, 女25例;年龄26~78岁, 中位年龄49岁:体质量41~83kg, 平均 (68.2±28.5) kg。对照组中男23例, 女27例;年龄28~76岁, 中位年龄48岁;体质量42~81kg, 平均 (66.8±27.4) kg。两组患者一般资料比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2 治疗方法

患者均接受常规手术治疗。对照组患者术后采取常规治疗。观察组患者在对照组的基础上采取辅助化疗和免疫治疗, 具体如下:辅助化疗:采用方案:化疗第1天:奥沙利铂130mg/m2, 甲酰四氢叶酸钙 (CF) 200mg/m2, 静脉滴注, 2h内滴完;第2天之后:奥沙利铂130mg/m2, 5-氟尿嘧啶 (5-Fu) 500mg/m2, 4~6h滴完;治疗21d为1周期, 根据患者情况术后辅助化疗4周以上。免疫治疗:在手术和化疗的基础上, 患者在化疗期间接受树突状细胞免疫治疗, 将树突状细胞悬液置于0.9%氯化钠溶液2ml中并于腹股沟淋巴结处注射, 腹股沟两侧各注射1ml, 注射完成后观察30min, 患者无不良反应后方可离开。免疫治疗前2周为1次/周, 之后为1次/2周, 治疗期间每周检查患者的血常规, 对出现白细胞计数异常等患者进行升白药物治疗后继续行免疫治疗。

1.3 检测方法

外周血检测T淋巴细胞亚群数量:采用流式细胞分析仪 (美国BD公司的FACSCalibur流式细胞仪) 对血液样本的T淋巴细胞亚群数量进行检测, 荧光标记单克隆抗体亦由美国BD公司提供。术前和术后每3个月抽取空腹外周血100μl, 于血液标本中加入CD3+、CD4+和CD8+单克隆抗体并摇匀后于室温下静置20min后加入红细胞裂解液1.5ml, 再次静置10min后以3000/min离心处理10min, 去上清液并加入磷酸盐缓冲液1ml混匀后置于流式细胞仪检测。

1.4 统计学方法

采用SPSS 13.0统计学软件进行数据处理, 计量资料以±s表示, 组间比较采用t检验;计数资料采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

两组术前及术后3个月的外周血T淋巴细胞亚群数量比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) ;观察组术后6个月、12个月及24个月的外周血T淋巴细胞亚群数量高于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05, 见表1) 。

3 讨论

近年来结肠癌的发病率不断上升, 作为我国常见的消化道恶性肿瘤, 结肠癌具有起病隐匿、病情发展缓慢的特点, 因此大部分患者发现明显症状时已属于中晚期[5,6]。结肠癌的治疗常采用手术治疗结合放化疗等治疗方法, 然而长时间的放化疗可导致明显的毒副作用, 影响患者的化疗耐受性, 造成过度治疗[7]。近年来有研究表明, 免疫治疗可在一定程度上缓解结肠癌症状[8]。目前国内外免疫治疗在结肠癌综合治疗中应用的报道较少, 明确术后辅助化疗联合免疫治疗对结肠癌外周血T淋巴细胞亚群数量的影响可为结肠癌多学科综合治疗提供有力的临床依据。

本研究结果显示, 术后辅助化疗联合免疫治疗可使患者外周血CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+和CD4+CD8+等T淋巴细胞亚群数量明显增加, 且随着时间的延长, 患者外周血等T淋巴细胞亚群数量亦不断增加, 术后辅助化疗联合免疫治疗是增加患者外周血T淋巴细胞亚群数量、改善患者免疫力的有效方法。

综上所述, 术后辅助化疗联合免疫治疗可有效增加结肠癌患者外周血T淋巴细胞亚群数量, 增强患者免疫力, 是结肠癌的有效治疗方法。

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