意义的不确定性（共8篇）
意义的不确定性 篇1
在机械加工过程中, 合理确定机械加工余量, 具有十分重要的意义。通常情况下, 我们在机械加工时, 都会在机械零件上预留下一定的机械加工余量, 这样做的的目的就是为了切除以前机械加工工序所留下来的加工误差以及表面缺陷等, 诸如机械加工零件的表面冷硬层、气孔、夹砂层等, 有的机械加工零件表面的氧化皮、脱碳层、表面裂纹, 进行切削加工以后的内应力层和表面粗糙度等。而留下机械加工余量就可以不断提高机械加工零件的精度和表面粗糙度。由此可见, 机械加工余量的大小与机械加工的质量以及生产效率有很大程度的影响与制约。机械加工余量越大, 不仅增加了机械加工的劳动工作量, 而且大大降低了劳动生产率, 同时也增加了机械加工材料、工具以及电力的消耗, 大大提高了机械加工成本以及生产成本, 给机械加工企业带来了沉重的负担。反之, 若加工余量越小, 则既不能消除上道工序的各种缺陷和误差, 又不能补偿本工序加工时的装夹误差, 进而造成了废品。因此, 在机械加工过程中, 我们必须在尽量保证质量的前提下, 使机械加工余量尽可能减小。一般说来, 越是比较精密的机械加工, 其机械加工余量就越小, 反之则比较大。笔者由自身的工作实践出发, 结合机械加工的涵义、机械加工的重要意义以及机械加工影响因素等, 提出合理确定机械加工余量之我见。
1 机械加工余量的涵义
在机械加工过程中, 为了生产出质量合格、价格优廉的机械零件, 我们必须从机械加工的零件毛坯上切除其表面层金属的厚度, 通常称之为机械加工余量。机械加工余量一般可以分为工序余量和总余量两种。而在某一机械加工工序中, 需要我们切除的表面层金属厚度, 我们通常称之为该加工工序的加工余量。而称从机械加工零件到生产成品过程总计需要切除的余量为总余量, 其等于相应机械加工零件的表面层各个工序加工余量之和。由于机械加工余量具有十分重要的意义, 因此, 我们必须在机械加工过程中, 高度重视合理确定机械加工余量的意义, 并切实采取行之有效的措施认真加以解决, 进而逐步提高机械加工的质量与效益, 确保机械加工企业取得较好的经济社会效益。
2 确定机械加工余量的重要意义
在机械加工过程中, 由于加工余量具有非常重要的意义, 因此, 合理确定加工余量就极为重要和关键。我们知道, 机械加工余量的大小与机械加工的质量以及生产效率有着极为紧密的联系, 甚至可以对其产生很大程度的影响。一般情况都是机械加工余量越大, 机械加工的劳动工作量就越大, 劳动生产率也大大降低了。而且随着机械加工余量的增加, 机械加工过程中所需要的材料、工具将大大增加了, 而且电力等物资消耗也比较严重, 无形中大大增加了机械零件加工成本和生产成本, 给企业生产效益和经济效益带来了极为严重的影响。反之, 如果机械加工余量越小, 则既不能消除以前各道工序的各种机械加工缺陷与误差, 又不能尽量补偿机械加工过程中的装夹误差, 进而就使机械加工产生了一定的废品。所以, 在机械加工过程中, 我们必须在尽量保证机械加工质量的基础上使机械加工余量尽可能地减小。通常情况下, 越是比较精密的机械加工, 要求其加工余量就越小, 反之则越大。
在机械加工实际中, 为了合理确定机械加工余量, 我们一般都需要首先了解掌握影响机械加工余量的主要因素。通常情况下, 影响机械加工余量的主要因素有机械加工零件的表面粗糙度及缺陷、机械加工过程中的尺寸公差、机械加工工具相互位置的偏差以及机械加工过程中的装夹误差等几种。
3 合理确定机械加工余量的方法
在机械加工过程中, 为了合理确定机械加工余量, 我们通常采用计算、经验估计以及查表等三种方法来确定机械加工余量。
3.1 计算法
在机械加工过程中, 我们一般都会在掌握影响机械加工余量因素的具体数据以及具体情况的前提条件下, 采用计算方法来合理确定机械加工余量, 这样做的结果都比较科学合理。但是, 由于现有的统计资料以及数据等并不多, 计算起来一般比较困难, 所以这一方法目前运用得比较少。
3.2 经验估计法
除了计算法以外, 我们通常还采取经验估算法。这一方法一般是机械加工相关技术人员或者工人, 根据以前的实践经验来具体确定机械加工余量。但是, 由于这一方法的主观随意性比较大, 所以经验估计的机械加工余量一般偏差都比较大, 因而这一方法仅用于单件小批量的机械加工生产中。
3.3 查表法
查表法一般是以机械加工生产实践以及实验研究所积累的有关经验为基础, 进而制成各种相应的表格, 以相关的数据为基础, 再结合机械加工过程中的实际情况, 认真加以修改校正。这种方法比较简单, 操作极为简便, 而且比较接近机械加工的生产实际, 因而机械加工的生产实际中得到了极为广泛的应用。
4 结语
总之, 机械加工余量与机械加工的质量、生产效率有着极为紧密的联系。因此, 我们必须积极采取有效措施, 切实保证机械加工余量, 不断降低机械加工的成本, 全面提高机械加工的生产成本, 逐步减轻机械加工企业的负担。特别是极为精密的机械加工中, 我们更应该重视机械加工余量。
参考文献
[1]李淑娟, 李言, 等.铸件机械加工余量及尺寸公差快速确定方法的研究[J].铸造技术, 2005 (1) .
[2]任妙芳.浅析机械加工精度的影响因素及提高措施[J].机械研究与应用, 2010 (2) .
意义的不确定性 篇2
一、社会主义核心价值体系的相关概念的界定
全面理解社会主义核心价值体系问题，首先要搞清楚几个基本的概念。
（一）价值、核心价值的含义
价值在一般意义上具有两种含义。一是在政治经济学的理论体系中，指的是凝结在商品中的无差别的人类劳动。二是在研究价值观上，主要指的是价值的哲学意义。马克思指出：“‘价值’这个普遍的概念是从人们对待满足他们需要的外界物的关系中产生的。” 马克思主义认为，价值的本质是事物的性质、属性对人的需要的满足关系，也就是事物对人的有用性。价值作为一个关系范畴，是指人们在认识和改造世界的过程中形成的一种满足和被满足的关系。
相对于价值来说，核心价值是一个与价值既相联系又有区别的概念。如果把“价值”理解为一般价值，理解为一系列观念形态的多元集合，那么“核心价值”就是这个多元集合中居于中心地位、起主导作用的价值因子，即对一个社会发挥根本性指导作用、能够影响社会成员行为取向的最根本的价值理念或价值目标。核心价值来源于一般价值，但又是一般价值的“中心”，是对一般价值的高度凝练与概括，它反映了在具体的、特定的社会历史条件下，什么样的价值理念才是最为突出和最为重要的。
（二）价值体系、核心价值体系
价值体系是人们在认识世界和改造世界，创造和实现价值的过程中所形成和发展起来的价值观念体系，它是一定社会、民族在一定时代社会意识的集中反映。价值体系是一个系统的整体的概念，包含着丰富的内容和诸多要素，诸如世界观、人生观、价值观以及理想、信仰、信念、价值取向、价值评价等。
核心价值体系，是指社会生活中在多种价值体系中居于统领、引导地位的社会价值体系，是一个国家全体国民或大多数社会成员共同认可、共同遵循、自觉践行的主流价值观念、价值追求。
二、社会转型一社会矛盾强化和彰显的特殊时期
当前我国正处于社会转型的关键时期，改革开放以来我国传统的计划经济体制进一步向市场经济体制转换，政治和文化思想电在经历着不同程度上的改变，尤其是进入新的世纪以来，我们国家正在以科学发展观为指导，全面建设和发展有中国特色的社会主义，全面建设小康社会，构建和谐社会。在取得巨大的经济、政治和文化建设成就的同时，社会转型时期的各种负面效应和现象也不可避免地凸现出来。目前我国经济成分、经济利益和社会生活方式日益多样化；组织形式、就业岗位、管理方式等的多样化趋势也越来越明显；同时社会阶层、群体进一步分化，贫富差距拉大，腐败和其他丑恶现象的存在以及市场经济带来负面影响如个人主义、拜金主义、享乐主义等思潮不断蔓延并影响着我国公民的现实生活和他们的价值观念。
从世界历史的现实来看，社会转型时期是最容易发生贫富分化、社会失衡、信仰危机和政治腐败等问题的时期，就像亨廷顿曾指出的：“某一国家处于变革时期的腐化现象比该国在其它时期的腐化现象更为普遍”。可见，社会转型时期是我国各种社会矛盾强化和彰显的特殊时期，在这样的时期，各种经济和政治的问题都会通过人们的价值观念和思想意识表现出来：一方面人们的价值观念逐渐多元化；另一方面也面临着文化认同和价值冲突等新的问题，加上在全球化背景中我国社会主义意识形态和价值观念受到的冲击和挑战，这些都是影响社会稳定和社会良性发展的潜在威胁，是我们必须面对和解决的问题。因此，在社会转型时期加强社会主义核心价值体系，提升社会主义信仰和价值导向作用是关系到中国特毡社会主义事业成败的重大任务。
三、构建社会主义核心价值体系的意义
1．社会主义核心价值体系是坚持并发展马克思主义和社会主义学说的重要理论成果。建设社会主义的核心价值体系是我们党深刻总结我国社会主义建设和发展的历史经验和教训基础上，通过科学分析当前国内国际的形势而提出的重大任务，是我们党在思想文化建设上的一个重大理论创新，是坚持并发展马克思主义和社会主义学说的重要理论成果。
社会主义核心价值观是社会主义的首要内容，也是社会主义的理论基础，从马克思恩格斯创立科学社会主义学说以来，社会主义者和社会主义的思想家和理论家们就一直在强调并丰富着社会主义学说。与时俱进是马克思主义的精髓，实践性是马克主义哲学的根本特征。马克思主义一直在指导着社会主义的实践，并在社会主义建设和发展的伟大实践中不断地将马克思主义和社会主义学说的理论成果进～步丰富和完善。在建设和发展中国特色社会主义的实践中，提出建设社会主义核心价值体系的巨大任务，将我们党和人民在过去的历史实践中提过的关于社会主义价值观的一些思想通过一个有机的整体而系统化地提出，是我国关于价值观理论的重大飞跃，也是对建设社会主义和发展社会主义的理论提升。
2．社会主义核心价值体系是应对全球化的现实选择。当代中国社会正处于社会转型和发展的关键时期，全球化是我们面临的最基本的国际环境。总体上来说全球化为各个国家尤其是发展中国家加快发展，促进社会进步提供了重要契机，但是我们还可以看到当前的全球化并不是世人所期待的大家共同繁荣、共同进步的全球化，全球化也没有能够真正地消除分歧和距离，既没有实现西方国家希望的“普世价值”，也没有能够达到第三世界所期望的平等和公平。正如前文已经论述的全球化充满了意识形态陷进，在东西方的文明冲突中，实际上是“西方对付非西方的意识形态”。中国作为一个发展中国家，尤其我们是一个坚持并发展社会主义的国家和民族，在全球化的浪潮中，与西方国家在文化尤其在意识形态领域的冲突是不可避免而且是十分激烈的。资本主义和社会主义作为两种不同的社会制度，其在社会意识形态上是存在巨大差异甚至有时是根本对立的，虽然人权、平等、民主、自由和正义等人类共同的价值观在资本主义那里得到了强调并得到了不同程度的实现，但是社会主义也同样在追求着这些价值并且更加现实更加普遍地在努力实现着这些价值追求和目标。社会主义在努力实现着人类的全面自由和发展，这是资本主义社会不愿实现也不能真正实现的价值原则，因为这是与资本主义的本质相矛盾的。因此，资本主义和社会主义在意识形态领域的冲突和矛盾是不可避免，这也是当前全球化不能
解决反而会随着全球化的全面发展和渗透越来越明显和加劂的问题。
因此，我们在发展社会主义的关键时期必须要加强社会主义意识形态的功能，维护党和国家的政治合法性和政治权威，努力实现社会整合，用社会主义核心价值体系统领我国思想文化建设，将社会主义核心价值体系作为意识形态的最高指导，坚持马克思主义的指导地位，加强爱国主义和社会主义的教育，促进公民意识的增长，将社会主义的共同理想作为发展社会主义的核心理念，作为广大人民的精神力量和内在动力。
3．建设社会主义核心价值体系是社会主义市场经济进一步发展的必然要求。市场经济作为一种经济形态发展的同时，也将其平等、自由、竞争和法制等价值层面的基本原则通过各种形式寓于表达和强化。
在市场经济的发展中，人们的利益多元化，主体意识不断增强，价值观念也逐渐多元化，我国的社会思潮越来越具有差异性并呈现多元化的。态势。但同时市场经济的固有的一些弊端也充分暴露出来，目前人们不同程度地存在政治信仰迷茫、理想信念模糊、价值取向扭曲以及道德失范等问题。当前我们要坚持不懈地加强用马克思主义的基本原理和马克思主义中国化的最新成果来武装全党、教育人民，用社会主义的伟
大理想和中国特色社会主义的共同理想和每个阶段的现实目标作为我们巨大的精神凝聚力量，用社会主义荣辱观引领社会时尚，加强改革创新精神和爱国主义精神的教育，鼓舞人民的斗志，促进社会团结进步、奋发向上。在实践中，我们要将科学发展观和“三个代表”
重要思想落到实处，在具体问题和重大问题上，采取灵活务实的态度和实事求是的基本原则，坚持解放生产力、发展生产力，增进社会公平，努力并加快实现共同富裕，实现社会和谐和人的全面发展。总之，要使市场经济健康发展和良性循环必须建设中国特色社会主义核心价值体系，这是推进
改革开放，适应社会主义市场经济发展的必然要求。
4．社会主义核心价值体系是社会主义先进文化的根本和保障。文化力是一国综合国力的重要方面，随着全球化的不断发展，世界各个国家和民族的文化和文明在全球性的交往中越来越占有重要地位，世界各国对于文化力在综合国力中的地位和作用的认识也愈加深入。文化实力不但能够反殃一国综合国力的总体情况和发展趋势，而且是一个国家其他方面势力发展的重要基础。在经济全球化的不断推进中，中国同世界文化的交流也在各个层次、各个领域不断展开，文化安全问题和文化主动权问题显得日益重要而且愈加突出。中国现代化进程中对传统文化的继承和发展、对世界文化和外来文化的批判和吸收、对社会主义主流文化和亚文化的关系处理等重大问题在新的时期显得更加重要和紧迫。在建设中国特色社会主义先进文化的过程中，我们必须坚持用马克思主义及其中国化的最新成果作为指导，结合中国社会发展的实际不断增强国家和民族文化自身的凝聚力和创新能力，使民族精神和民族文化不断被认识、凸显和弘扬。同时要用民族精神和时代精神凝聚力量、激发活力，在全社会大力倡导爱国主义、集体主义、社会主义思想，提倡创新精神和开放意识，在全社会形成百花齐放、百家争鸣的思想氛围和健康向上、积极进取的精神面貌。坚持以人为本，充分发挥群众的主体作用，在社会生活中加强社会主义荣辱观的宣传和教育，推进社会主义道德建设和社会主义精神文明建设的全面进步。总之，社会主义核心价值体系为社会主义先进文化的发展提供了根本的价值导向和主体内容，是先进文化的根本和保障。
5．建设社会主义核心价值体系是构建和谐社会的前提和基础。建设社会主义和谐社会是我们党在新的历史时期提出的一项重要战略目标。和谐社会的构建是针对在社会主义发展过程中存在的一系列问题而提出的重要价值目标和价值导向。可以说社会的和谐本身就是社会主义价值追求和价值观的重要内容。在建设和发展中国特色社会主义的过程中，我们不能忽视价值观的引导和价值体系的建设，不能忽视社会主义政治文化和社会主义意识形态的发展和建设。尤其是在全球化和社会转型的关键时期，我国社会矛盾和问题表现突出，存在着社会分化、分配不公、腐败堕落等各种社会问题，导致社会主义主流意识形态遭到冲击、政治信仰发生动摇，导致社会存在着许多不稳定和不和谐的因素。因此，当前我们要努力消除不和谐的因素和一切不利于社会主义发展和人的全面发展进步的因素，充分发挥社会主义社会的优越性，将和谐文化和和谐思想作为党和人民自觉的思想指导，在社会生活和政治、经济、文化的建设中不断加强和教育人民，促进社会和谐，加强世界观和人生观的改造。
但是，政治制度和政治文化是相互作用、相互支撑点，社会主义和谐社会的构建需要与之相适应的和谐文化，和谐社会的构建需要和谐文化在整个社会领域里成为人们自觉的观念意识，指导并规范着人们的行为。从一定意义上来说，社会主义和谐文化的建设和加强决定着构建社会主义和谐社会伟大事业的成败。社会主义核心价值体系是和谐社会构建的基本内容和前提，设有社会主义核心价值体系的引领和主导，和谐文化建设就会迷失方向、失去根本，和谐社会建设就会失去精神支撑，用社会主义核心价值体系引领和整合多样化的社会意识是构建和谐社会的必然要求，是构建社会主义和谐社会的前提和基础。
总之，社会主义核心价值体系是坚持和发展马克思主义和社会主义学说的重要理论成果，是在思想文化建设上的重要理论创新。在中国社会转型的关键时期，它是应对全球化的现实选择，对发展社会主义市场经济，建设社会主义先进文化以及构建和谐社会都具有特别的意义和作用。
幼儿教育本质的规定性及其意义 篇3
【关键词】幼儿教育 本质 意义
0.引言
幼儿时期的教育对一个孩子未来的成长方向有很大的影响，引发了社会各界对幼儿教育问题的广泛关注和探讨。家长也从孩子的幼儿时期开始就对其加注了太多期望，很多家长无论孩子是否有兴趣就依据自己的想法或者自己儿时没能实现的梦想来要求孩子参加各种兴趣班，送孩子去双语教学的幼儿园学习，用小学的教学模式去教育幼儿，为的就是让自己的孩子能够从小接受“精英教育”，起步比别人早。这样的幼儿教育方式是否真的有利于孩子的健康成长，与幼儿教育的本质是否达成一致就是本文要研究探讨的主要问题问题，进而论述回归幼儿教育本质的重要意义。
1.我国幼儿教育的现状
为了能更好地探讨幼儿教育的本质特征，我们通过去幼儿园实地考察，与幼儿园里的孩子进行沟通交流，采访大量的幼儿园老师和幼儿家长后，了解到现今我国幼儿教育存在以下问题：1.家长以自己的意愿给孩子报名参加各种各样家长认为有用的兴趣班，如珠心算、英语、绘画、舞道、跆拳道等等，有的孩子从幼儿时期开始时间就被安排得满满的，没有周末没有休闲娱乐的时间；2. 《幼儿园教育指导纲要（试行）》规定幼儿园教育要把带领孩子进行游戏互动作为幼儿园教学的基础，这些年来，国家和各地省市也相继发布相关文件强调进行游戏互动的重要性。可实际上，有很大一部分幼儿园尽管努力为孩子创造轻松的校园环境，但是教学模式日趋接近于小学教育；3.幼儿园在孩子拼音都还没学会的情况下，就对幼儿进行双语教学，容易造成幼儿混淆拼音与英文，大大增加了幼儿的学习压力；4.幼儿园为了增加收益，提升竞争力吸引生源，开展很多的兴趣班，提前传授小学知识。
2.幼儿教育的本质及其意义
国内外许多著名的教育家学者，如卢梭、福禄贝尔等，经过对幼儿教育本质问题的研究探讨后，他们都认为幼儿的成长教育要遵循他们自身的本性，解放孩子的天性，为他们创造一个愉悦自在的生活环境，让孩子的禀赋能够被挖掘得到更好的发展。陕西师范大学教育学院的程秀兰副教授运用扎根法研究发现，快乐幸福、理解尊重、保教关爱、身心健康、生命成长、习惯养成、心智启蒙和适宜环境是进行幼儿教育的本质[1]。
教育本就应该是一件会让人觉得内心充满幸福感受快乐的事情，对于幼儿教育来说更应如此，才能要促进幼儿身心共同发展。让学龄前儿童提前接受学习教育是人之常情，每个家长都对自己的孩子充满期望，希望孩子日后能够比别人优秀更具竞争力。但是在幼儿教育中，家长应该尊重孩子自身的意见，根据孩子的性格兴趣进行引导，进行个性化教育，加以培养，给孩子留出娱乐游戏的时间，减轻孩子的负担，而不是依据自己的意愿去决定孩子未来的生活轨道。让孩子展现自己的天性，健康快乐地成长比学习来得重要，更有利于他们以后的成长。比如家长可以选择孩子的一两个兴趣点进行培养，或唱歌或书法或舞蹈等；在节假日的时候家长还可以带孩子出去旅游或者去爬山野餐等多接触大自然，进行户外活动；幼儿园的教育要丰富多彩，在适当的学习之余，多带领孩子进行一些生动有趣的游戏，在不违背道德和规章制度的前提下，让孩子充分释放自己的天性，获得真正的快乐。
在孩子的幼儿时期，对身边亲近的人会有很强的依赖，需要老师家长给予更多的关爱和支持理解。当幼儿犯错的时候，老师家长应该帮助他们分析对错，耐心地教导他们什么能做什么不能做，保护他们的自尊心，让他们感受到爱的存在，而不是一味地当众批评甚至打骂。同时，这个时期的孩子心智、行动力都还未成熟，不太懂判断对错，却有很强的模仿力，他们会下意识地模仿身边人的行为习惯，家长和老师最为他们最经常接触的人群，应该为他们树立不乱扔垃圾，待人接物有礼貌，乐于助人的良好榜样。
幼儿教育是一个与小学教育接轨的阶段，主要是要对幼儿进行思想启蒙，让他们初步认识并感受这个世界，而不是提前进入学科学习，像小学一样安静坐着听老师上课，进行精英教育。很多时候，当幼儿被迫去上兴趣班，产生了他们这个年纪不该有的学习压力之后，不仅他们没有对其产生兴趣反而会对学习产生厌恶的情绪。家长要意识到压抑幼儿活泼好动的天性，让他们痛苦地学习，不能感受到幸福快樂对孩子身心健康的成长是非常不利的；幼儿园不能为了收益和为了吸收更多的生源，一味地按照家长的期待去办学，把幼儿教育搞得和小学教育一样，这样幼儿园就失去了它自身的意义。幼儿园应该是一个能够带给孩子思想启蒙，认识自己认识他人认识世界，学会沟通，体验快乐的地方，老师应该是在带领幼儿玩乐的同时加以启发学习。
3.结语
幼儿教育本质的规定性是指幼儿教育内在要素之间的根本联系以及幼儿教育作为一种教育活动区别于其他阶段教育活动的根本特征[2]。也就是说幼儿教育的本质要符合孩子在幼儿阶段的本性和学习能力，跟中小学教育区分开来，要给孩子创造一个宽松自主的成长环境，适合孩子的个性化发展。幼儿教育的本质是为了能够让孩子的思想得到启蒙，身心健康都能发展，养成良好的行为习惯，更有利于孩子未来的成长。改变日愈趋向“小学化”，学习压力大的幼儿教育状态，回归幼儿教育本质是现今许多幼儿园和家长应该加以重视的一件事。总之，幼儿教育应当是生活导向或成长导向的，而不应是学习导向的[3]。
【参考文献】
[1]程秀兰. 当代幼儿教育本质研究[J].陕西师范大学学报，2012，09.
[2]程秀兰. 幼儿教育本质的规定性及其意义[J].学前教育研究，2014，09.
幼儿教育本质的规定性及其意义 篇4
一、幼儿教育本质在当今社会的体现
多年来随着经济社会的发展,人们对教育的重视程度有了前所未有的高度。但很多家长为了不让自家的孩子输在起跑线上,加大了对幼儿的小学化教育。甚至一些幼儿教育工作者,忽略了去思考“幼儿教育本应该是什么样的”这个问题,而是去迎合一部分家长的心理,弱化幼儿教育的游戏精神,通过“小学生化”、“兴趣班化”等畸形态势,来让幼儿教育的本质发生了变化,甚至可以说是变了味道。这种幼儿教育如果不能及时修正回本质要求,那么将会对幼儿产生非常不利的影响,甚至说会带来一个混沌、没有系统的知识以及厌学心理的产生。
关于幼儿教育本质的规定性探讨,蒙台梭利和卢梭等大教育家都不约而同的认为应当顺应小儿的天性,根据自身的天赋来自由生长、正常发育,幼儿的教育应当是开放性、解放性、挖掘性的而非补救性。幼儿教育作为一种特有的教学艺术,必须给孩子足够多的空间,来通过释放天性在生活、游戏中愉快的接受知识。
二、幼儿教育本质的规定性体现
幼儿教育本质就是一种特殊的交往形式。幼儿并不是缩小的成年人,他们与成年人之间的差距不仅仅体现在身材高矮、体重胖瘦上,虽然幼儿的身体弱小、智商及心理状态正处于成长萌芽阶段,但并不代表他们是没有自己思维和主张的小动物。而当今的成年人,特别是幼儿家长由于对孩子的过分偏爱,导致了对幼儿的教育侧重于了宠物饲养阶段。所谓的宠物饲养,指的是不让幼儿有自己的权力和独立性,家长一味要求幼儿要听话,幼儿园老师要求画画,那么太阳就必须是红色的,如此被家长、教师等成年人控制、操作的幼儿世界,很大程度上缺乏了自我意识,一切都变得墨守成规。
其次,幼儿教育本质的规定性还体现在强调游戏精神与生活经验的体现与应用。游戏作为幼龄儿童最向往的活动之一,教育部提出的“游戏精神”又为游戏带上了寓教于乐的光环,现阶段幼儿教育界提倡的游戏是应该成为幼儿成长的一个重要组成部分,幼儿可以通过游戏来对这个世界进行探索,在这个游戏的世界里,孩子们可以尝试一些平时成年人不允许或者无法实现的事,而成年人加入到幼儿游戏中,则会将游戏变成一座拉近成年人与幼儿的桥梁。最终幼儿通过游戏明白了很多道理,而幼儿教师和幼儿家长则通过游戏,向孩子们传递了自己的想法与知识。
最后,生活即教育在幼儿教育本质的规定性中也充分得到体现,生活作为无论是成年人还是幼儿重要的学习途径,生活这所大课堂是一个庞大的知识体系,幼儿教育通过生活实践来进行,会比课堂上所接触的知识更为具体、可操。其中包括认知方面、情绪表达方面等。在培养过程中,家长、老师仅仅重视了他的知识养成,而忽略了生活上的动手能力养成,如果不及时更改,将会影响到幼儿日后的总体发展与心理自我成长。
三、幼儿教育本质的意义
第一,幼儿教育本质的意义在于强调教师与学生之间的互动。我们倡导的规定性幼儿教育,并不是传统意义上的画地为牢,让幼儿单纯的学会“听话”,这里更加强调幼儿教师与学生的互动,虽然幼儿对成年人的依赖程度较高,所以幼儿教育更要突出尊重幼儿主体参与性,从孩子们的兴趣、爱好入手,赋予幼儿主动学习、自由发展的权力。
第二,幼儿教育强调师生平等的意义。幼儿虽然处于心智发育阶段,但孩子们也有自己的思想和人格,幼儿教师如果一味的强调自己的权力,强迫幼儿完全的服从、遵守,除了抹杀孩子们的想象力外,还容易造成不健全的人格。实际的教学中,我们会看到一些孩子,叫着老师的名字,像朋友一样的交流、嬉戏,这种平等的关系让幼儿能够勇敢的提出问题、提出自己内心的秘密,让教师不仅仅是在课堂上,还能在课堂下对学生进行言传身教,对个别性格较为敏感的孩子进行及时的辅导。从而让学生学会主动学习,勇于提出问题。
第三,幼儿教育的规定性会让幼儿从启蒙阶段便了解什么是规则、什么是规定。我们知道走上了违法犯罪道路的成年人,其中会有相当一部分人是受到年幼时候的不良影响,有的人自幼生活在家暴的环境中,成年的法律意识也过于单薄,做事往往很偏激,甚至导致了走向违法的道路。而幼儿教育在给予孩子自由的同时,还会给孩子一定范围的限制,让幼儿从小就学会遵守法律、法规。
四、小结
从上面的各种实例我们不难看出,幼儿教育本质的规定性并不是让孩子们学会墨守成规、一味的听话,更多的是让幼儿从启蒙阶段,就学会理解、尊重、勇敢、守法等优良品质,虽然目前的幼儿教育不会、也不可能直接培养出高精尖人才,但从未来来看,幼儿教育的意义旨在与为未来的人才进行素质基础进行奠基,如果我们每一名幼儿教育从业工作者都能够与时俱进的对幼儿教育本质及意义进行不断学习,相信在不远的将来,幼儿教育的这个摇篮中必定会诞生出一批优秀的人才,为国家及社会的可持续发展供应出源源不断的高能力、高素质的人才。
参考文献
意义的不确定性 篇5
塔里木盆地西南缘浅变质岩的时代确定及其地质意义
根据新发现的晚泥盆世标准化石,把塔里木盆地西南缘原归属于元古界、志留系-中泥盆统、上寒武统-中奥陶统的一套浅变质岩的`原岩时代重新确定为晚泥盆世.浅变质岩的物质组成、空间分布和区域地质特征表明,其原岩在沉积之后不久就受到低温动力变质作用改造,动力变质作用与北昆仑造山带在志留纪-泥盆纪期间的碰撞造山作用相关.上泥盆统浅变质岩的确定为北昆仑碰撞造山作用提供了新的时代约束.
作 者：罗金海 周鼎武 柳益群 曹宣铎 胡云绪 LUO Jin-hai ZHOU Din-wu LIU Yi-qun CAO Xuan-duo HU Yun-xu 作者单位：罗金海,周鼎武,柳益群,LUO Jin-hai,ZHOU Din-wu,LIU Yi-qun(大陆动力学国家重点实验室,西北大学地质学系,陕西西安,710069)曹宣铎,胡云绪,CAO Xuan-duo,HU Yun-xu(西安地质矿产研究所,陕西西安,710054)
刊 名：地层学杂志 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF STRATIGRAPHY 年，卷(期)： 31(4) 分类号：P534.44 关键词：浅变质岩 碰撞造山作用 晚泥盆世 北昆仑造山带 塔里木盆地 新疆意义的不确定性 篇6
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2014年9月至2016年3月我院病理科确诊的浅表软组织肿块患者236例,男143例,女90例。组织肿块均为体表可触型,患者有或无症状,肿块直径0.45~12.67 cm,平均(8.29±3.26)cm。经病理学诊断236例肿块中良性病变201例,包括38例血管瘤,50例脂肪瘤,35例纤维瘤,29例神经纤维瘤,26例结核,16例淋巴管瘤,7例炎性肿块;恶性病变35例,包括12例纤维肉瘤,5例腺泡状肉瘤,6例血管上皮癌,6例皮脂腺癌,3例恶性纤维组织细胞瘤,3例神经母细胞瘤。
1.2 方法
仪器选择东芝Aplio-500彩色多普勒超声诊断仪,探头频率选择3~11 MHz。患者受检时使肿块充分暴露,检查前对肿块部位涂适量耦合剂[2]。对肿块进行多切面检查,测量患者肿块的大小、直径、厚度、形态、边界和圆度系数,并使用挤压法观察肿块弹性及内部回声。再使用彩色多普勒血流显像技术观测肿块的收缩期峰值流速(PSV)、阻力指数(RI)和获动脉频谱比例。检测完成后保存超声影像图。
1.3 测量指标
(1)超声定性诊断结果:对比236例患者的超声诊断结果和病理分析诊断结果。(2)超声定量诊断结果:分析超声影像图,根据其影像特征确定是否有肿块存在及其大小。(3)获动脉频谱、肿块边缘清晰情况、PSV和RI,对比良性肿块和恶性肿块的上述超声影像图差异。
1.4 统计学处理
采用SPSS 17.0统计软件统计分析,计量资料±s表示,采用t检验,计数资料用率表示,采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 比较超声定性诊断结果和病理结果
彩色多普勒超声检测236例浅表软组织肿块病变,检出良性病变209例,恶性病变27例,检出率为100.00%(236/236)。病理检测结果显示超声检测的209例良性病变中有197例为良性病变,12例为恶性病变。27例恶性病变中有3例为良性病变,24例为恶性病变。彩色多普勒超声对恶性肿块的敏感度为68.57%(24/35),对良性肿块的敏感度为94.25%(197/209),诊断总符合率为93.64%(221/236)。
2.2 比较良、恶性肿块的血流信号特征和声像图特征
恶性肿块中肿块边缘不规则和获动脉频谱的比例大于良性肿块,差异有统计学意义(P<0.05);恶性肿块的PSV和RI大于良性肿块,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。
3 讨论
浅表软组织肿块是指可触及或肉眼可见的突出性肿块,多发生在人体的肌肉、外周神经、脂肪组织和结缔组织部位[3]。且由于其声透性强、声吸收会逐渐衰弱、血流信号易捕捉等特点,彩色多普勒超声成为临床诊断浅表软组织肿块的首选方法[4]。
注:与恶性肿块比较,aP<0.05
本研究结果显示,彩色多普勒超声诊断浅表软组织肿块的检出率为100.00%,定性诊断准确率为93.64%。恶性病变肿块多具有边缘不清,内部组织分散不均,后方回声衰弱等特点,所以,整体而言恶性病变肿块的定性诊断符合率不高。随着超声技术的快速发展,彩色多普勒超声也能通过检测血流信号诊断肿块的性质。恶性病变肿块会产生异常增生和大量的血管生成因子,导致肿块生长速度过快,新生血管丰富,血流供血充足。所以通常情况下,恶性病变肿块呈高速高阻型血流动力学特征,获得动脉频谱的概率要明显高于良性肿块,且其PSV和RI均显著上升。本研究结果显示,恶性病变肿块的PSV和RI小于良性肿块(P<0.05),获动脉频谱大于良性肿块(P<0.05)。
综上所述,彩色多普勒超声定性诊断浅表软组织肿块,检出率高,诊断符合率较好,可作为临床诊断浅表软组织肿块的首选辅助检查手段。
摘要：目的 分析彩色多普勒超声定性诊断浅表软组织肿块的意义。方法 选取医院病理科确诊的浅表软组织肿块患者236例并对其采用彩色多普勒超声定性诊断,分析浅表软组织肿块的二维声像图和血流显像。结果 彩色多普勒超声检测需手术的浅表软组织肿块病变的检出率为100.00%,对恶性肿块的敏感度为68.57%(24/35),对良性肿块的敏感度为94.25%(197/209),诊断总符合率为93.64%(221/236);恶性肿块中肿块边缘不规则和获动脉频谱的比例大于良性肿块,差异有统计学意义(P<0.05);恶性肿块的收缩期峰值流速(PSV)、阻力指数(RI)均大于良性肿块,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 彩色多普勒超声诊断浅表软组织肿块检出率及良恶性准确率高,操作方便,价格低廉,有重要的临床应用价值。
关键词：彩色多普勒超声,定性诊断,浅表软组织肿块
参考文献
[1]汪轶亭.运用彩色多普勒超声诊断浅表软组织肿块临床价值探究[J].临床医药文献电子杂志,2015,2(31):6520.
[2]许莹.高频彩超在浅表软组织肿块诊断中的应用价值[J].中国现代医药杂志,2015,17(3):39-41.
[3]彭基,刘滨月,朴春玉,等.探讨超声弹性成像对浅表软组织良恶性肿块的鉴别诊断价值[J].中国现代药物应用,2015,9(11):34-36.
意义的不确定性 篇7
关键词：醉酒驾驶,行为,定性
一、“醉酒驾驶”行为入罪必要性分析
(一) “醉酒驾驶”行为是否应当单独入罪
尽管《刑法修正案 (八) 》已经明确规定“醉酒驾驶”行为构成危险驾驶罪, 但刑法学界对于其是否应当单独入罪的争论并没有停止。
一部分学者主张“醉酒驾驶”行为应单独入罪, 主要理由有:第一, 我国当前危险驾驶导致重大伤亡的交通事故的机率非常高, 为了从根本上遏制危险驾驶机动车辆导致重大交通事故的发生, 减少对公共安全的危害;第二, 醉酒驾驶屡禁不止显示了醉酒驾驶违法成本太低, 行政处罚不足以遏制醉酒驾驶行为;第三, 我国已步入了风险社会, 刑法应该对危险驾驶这样的高风险行为提前介入;第四, 单独设立危险驾驶罪, 对人民的法益提前予以保护, 复合国际形势立法的潮流。 (1)
一些学者则认为, “醉酒驾驶”行为不应单独入罪, 主要有:首先, 按照当前的刑法罪名 (如交通肇事罪、以其他危险方法危害公共安全罪) 完全可以对“醉酒驾驶”行为予以定罪处罚, 对于较为轻微的酒后驾驶机动车的行为, 也完全可以用行政处罚予以规制; (2) 其次, 即使当前不存在对“醉酒驾驶”行为处罚具有比较有针对性的罪名设置, 仍然可以通过对刑法进行必要的解释来对此类行为进行规制。 (3)
笔者赞同对“醉酒驾驶”行为采取高压态势, 严厉打击醉酒驾驶危害公共安全的行为, 这是刑法保护法益的功能所决定的。同时, “醉驾入刑”的积极性, 主要表现为“宣示”其对“醉驾”行为的明确否定, 正如刑法理论界指出的, 危险驾驶行为除“飙车”和“醉驾”之外, 还包括吸毒后驾驶机动车、无证驾驶机动车等。然而立法者仅选择前两种行为作为危险驾驶罪的行为方式, 绝不是因为由于“飙车”和“醉驾”具有更大的社会危险性关键原因在于:同“飙车”行为一样, 根源于我国独特的“酒文化”, (4) 醉酒驾驶机动车的行为在现实社会中更具普遍性, 民众对其深恶痛绝。由此, 立法者在刑法对“民愤”给予回应, 显示出国家层面对“醉酒驾驶”行为的否定, 从而更加“醒目”的对“醉酒驾驶”行为敲响警钟。
(二) 是否一切“醉酒驾驶”行为都应当入罪
《刑法修正案 (八) 》规定:“在道路上醉酒驾驶机动车的, 处拘役, 并处罚金。”基于此, “醉酒驾驶”行为成立危险驾驶罪只需行为人有在醉酒状态下驾驶机动车的行为即可。然而, 理论界和实务界并为达成一致。比如, 最高人民法院副院长张军指出, 对“醉酒驾驶”行为追究刑事责任不应仅从文义上理解《刑法修正案 (八) 》的规定, 对这类行为处理应当慎重。此种表态引起了舆论的热议, 质疑这种表态有造成司法不公的可能。
根据刑法通论, 犯罪是指具有严重的社会危害性、刑事违法性和应受惩罚性的行为。据此, 作为犯罪行为, 必须具有严重的社会危险性, 其他适用法律不足以对其进行恰当的处罚。不具有社会危害性或是社会危害性不大的行为, 即使表面上符合犯罪的形式要件, 仍然不能作为犯罪, 不能纳入刑事处罚的范围, 这是刑法补充性和谦抑性的要求, 是保障公民自由的要求, 《刑法》“但书”也将这类行为排除在犯罪圈以外。基于此, “醉酒驾驶”行为尽管在法律文本中并未对危害结果或情节等有具体要求, 仍然不能将一切行为都以危险驾驶罪论处。认定“醉酒驾驶”行为为醉酒驾驶罪仍然要考虑具体案件中的醉驾行为是否确实具有社会危害性, 详言之, 即该行为是否确实会置公共安全于现实危险。该行为确实会造成对公共安全的威胁, 且符合危险驾驶罪的主客观要件, 理所应当的以危险驾驶罪定罪处刑;倘若行为人的“醉酒驾驶”行为确实不会对公共安全造成任何危害, 则不应对其科以刑罚, 比如行为人凌晨时分在公路上 (行为人平时多日观察该段路程凌晨时分几乎无任何车辆行驶) 醉酒驾驶机动车回家。此外, 笔者认为对将一部分“醉酒驾驶”行为作非罪化处理并不会招致司法不公, 理由在于:将“醉酒驾驶”行为中的一部分作非罪化处理只是将那些社会危害性不大或是根本不具有社会危害性的“醉酒驾驶”行为出罪, 即此种出罪是有一定的标准可依, 而非人为的任意出罪;并且, 这类出罪的标准———“是否确实会对公共安全造成威胁”是可以通过具体的案件事实来反映的, 并非不可捉摸。因此, 在司法认定的过程中, 严格把握对“醉酒驾驶”行为认定的标准是不易导致司法不公的。
二、“醉酒驾驶”行为入罪方式分析
(一) 造成危害结果“醉酒驾驶”行为主观方面定性分析
要准确对造成危害结果“醉酒驾驶”行为进行定性, 首要的问题是对该行为主观方面有正确的认识和界定。目前刑法理论界就此行为在主观方面主要存在两种观点:一是认为属于过于自信的过失;二是认为行为人的主观方面是间接故意, 认为过于自信的过失的成立, 需以“根据” (作出能够避免危害结果这一结论的“依据”) 客观存在为前提, 如确实有通常能避免结果发生的技术、体力、外在环境等等。但若该赖以亲信的“根据”不是客观的, 而是行为人臆想的, 则这时行为人的主观意志因素就不是“轻信能够避免”, 而是“放任”。 (5) 笔者赞同后一种观点, 认为行为人在此种情形下主观方面应为间接故意。不可否认, 在间接故意的犯罪行为中, 行为人对危害结果的发生当然也不是积极追求的。然而在任何间接故意犯罪的情况下, 都是以追求某种目的结果为前提的, 正是这种目的结果, 导致了行为人原先的不希望意志状态发生性质上的变化, 一旦行为人在这种目的支配下决意实施预定行为, 于是原有的不希望意志形态自行消灭, 转化为对危害结果的发生报听之任之的放任意志形态。 (6) 现实生活中, 一般人应有这种认识:酒精的摄入会降低机动车驾驶人员对机动车的驾驶能力, 人在醉酒状态下驾驶机动车与在正常状态下驾驶机动车是存在明显的驾驶感觉偏差。在这种认识下, 行为人仍然在公共交通道路上驾驶机动车, 显然是对造成公共安全遭到损害这一危害结果的发生持包容态度。
(二) 造成危害结果“醉酒驾驶”行为具体罪名认定分析
1. 造成危害结果“醉酒驾驶”行为与交通肇事罪, 造成危害
结果“醉酒驾驶”行为如果构成犯罪, 其主观方面为间接故意, 故应当排除性地认定为以危险方法危害公共安全罪。因为根据理论通说, 交通肇事罪是我国刑法中典型的过失犯罪。然而笔者看来不然, 交通肇事罪的主观方面值得进一步分析。根据我国《刑法》规定, 交通肇事罪是指违反交通运输管理法规, 因而发生重大事故, 致人重伤、死亡或者使公私财产遭受重大损失的行为, 毫无疑问行为人在主观方面是过失。然而《最高人民法院关于审理交通肇事刑事案件具体应用法律若干问题的解释》规定:交通肇事致一人以上重伤, 负事故全部或者主要责任, 并具有下列情形之一的, 以交通肇事罪定罪处罚: (一) 酒后、吸食毒品后驾驶机动车辆的; (二) 无驾驶资格驾驶机动车辆的; (三) 明知是安全装置不全或者安全机件失灵的机动车辆而驾驶的; (四) 明知是无牌证或者已报废的机动车辆而驾驶的; (五) 严重超载驾驶的; (六) 为逃避法律追究逃离事故现场的。在这几种危险驾驶行为下的交通肇事构成犯罪的, 实际上在主观方面应当定性为间接故意。由此, 在这些情形下也是一种间接故意的犯罪。因而在理论界也有关于“复合罪过形式”罪名的提法。” (7) 但笔者并不认同交通肇事罪是这种“复合罪过形式”罪名的观点, 因为复合罪过形式是指一个行为是在多种罪过形式的支配下实施的。笔者所提出的故意的交通肇事罪的情形下, 其实交通肇事行为仍然是在间接故意的支配下实施的, 并不存在多个罪过形式。综上所诉, 在醉酒的状态下交通肇事的行为只要符合交通肇事罪的构成要件, 仍然应当以交通肇事罪论处, 只是这种情形下交通肇事罪的主观方面和传统的交通肇事罪有所不同, 表现为间接故意。
2. 造成危害结果“醉酒驾驶”行为与以危险方法危害公共安全罪
最高人民法院发布的《关于醉酒驾车犯罪法律适用问题的意见》 (下称《意见》) 规定:“醉酒驾车, 肇事后继续驾车冲撞, 放任危害后果的发生, 造成重大伤亡, 构成以危险方法危害公共安全的, 应当依照《刑法》第115条第一款的规定定罪处罚。”该规定为处理这一类案件提供了统一裁判的依据, 有必要对此作出较为详尽的分析, 从而正确的对造成危害结果“醉酒驾驶”行为进行正确的定性, 从而找到在此类行为中交通肇事罪与以危险方法危害公共安全罪的界限, 以做到罪责性相适应。
意义的不确定性 篇8
颈椎病是开始于单个或多个颈椎间盘的进行性退行性病变,并可导致周围骨和软组织的结构改变,影响相关血管、神经根或(和)脊髓,所以患者常伴头痛、血压升高、心率增快,特别老年病人常伴记忆力减退、嗜睡、乏力、行为异常等组织器官衰老病症。为深入探讨颈椎稳定性异常导致脑细胞凋亡的机制,采用免疫组化、逆转录聚合酶链反应和Western blot观察bcl-2和bax蛋白在小鼠颈椎稳定性异常病理模型[1]脑组织中的表达变化,探讨颈椎稳定性异常与AD发病的分子生物学机制。
2. 试剂配制和方法
2.1 主要试剂配制
0.01M柠檬酸缓冲液:3g柠檬酸三钠+0.4g柠檬酸溶入1000m1蒸馏水,用0.1M Na OH溶液调定至p H 6.0。
4%多聚甲醛溶液:40g多聚甲醛溶于1000m1PBS溶液中,加热溶解。
盐酸乙醇:70%乙醇100ml+1%盐酸lml混合均匀。
DAB配制:1ml蒸馏水中加入一滴浓缩缓冲液,混合均匀;滴加DAB溶液和浓缩过氧化氢溶液各一滴,再次混匀。避光保存,30分钟内使用。
Hams苏木素染色液:用200ml蒸馏水加热溶解15g硫酸铝钾,用l0ml无水乙醇溶解1g苏木精,再倒入已溶解的硫酸铝钾蒸馏水中,煮沸1分钟后,稍冷却,慢慢加入0.5g红色氧化汞,继续加热至染液变为紫红色,用纱布盖瓶口,用前滤纸过滤后每100m1加冰醋酸10ml。
2.2 取材方法
8月龄ICR小鼠60只,随机分为3组,即模型A组、模型B组和正常对照组,模型组第一与第二颈椎关节囊被膜周围分别注射30%乳酸溶液,模型A组15μl/次,1次/日,连续注射3周。模型B组30μl/次,1次/周,连续注射3周。正常组未经任何处理。
造模三个月时,经行为学检测后,将动物眼球取血处死、取脑,部分放入10%甲醛,经蜡块包埋留做病理观察,部分投入液氮中l分钟速冻,然后置-80℃冰箱内保存。
2.3 RT-PCR和琼脂糖凝胶电泳
提取脑组织总RNA,通过逆转录得到c DNA,然后进行PCR扩增,观察bcl-2和bax的基因表达情况。
2.3.1 总RNA提取
每组取双侧海马和皮层组织各100mg(每组4只小鼠,每只鼠取25mg)置5ml离心管中,加预冷的异硫氰酸胍变性溶液1ml,匀浆。加0.1ml Na Ac(2mol/L,p H4.0),1ml酚-氯仿-异丙醇混合液,震荡,4℃、10000g离心20分钟。吸取上清,加等容积异丙醇,-20℃放置2h以上,4℃、10000g离心15分钟。吸去上清。向沉淀中加0.5ml变性溶液,搅拌至RNA溶解。加Na Ac(2mol/L,p H4.0)0.05ml,酚-氯仿-异戊醇混合液0.5ml,震荡,4℃、10000g离心20分钟。上层水相转移到1.5ml离心管中,加等容积异丙醇,-20℃放置2h以上,4℃、10000g离心15分钟。以预冷的75%乙醇5ml洗涤沉淀,并按前法离心。吸去乙醇,在真空干燥器中干燥沉淀15分钟,用0.3~0.5ml DEPC水溶解RNA沉淀。紫外分光光度计测定(260/280)nm吸光值,估算RNA样品纯度。
RNA浓度(μg/ml)=OD260值×40μg/ml×稀释倍数。
2.3.2 引物设计
从Genebank中找到小鼠bcl-2、bax的全长c DNA序列,利用Primer5.0和Oligo6.0软件设计引物,以β-actin做内参用于RT-PCR。
经检验引物内部无发夹结构,引物之间无二聚体形成,引物与基因库之间无非特异性同源区域。
2.3.3 逆转录反应合成c DNA
在0.5ml Eppendorf管中加入:(1)取总RNA10μg加DEPC水至12.5μl;(2)加入Olig-d T(1μg/μl)2.5μl;(3)混匀后置65℃水浴10分钟,冰浴2分钟;(4)另取一个0.5ml Eppendorf管加入5×RT-buffer10μl,d NTP(10m M)2.5μl,MMLV(100U/μl)2.0μl,灭活的DEPC水21.5μl;(5)将(4)混匀后加入(3)中,42℃水浴1h,然后70℃水浴10分钟灭活逆转录酶;(6)逆转录所得c DNA摸板放于-20℃保存备用。
2.3.4 PCR反应扩增
设置反应程序:94℃变性1分钟,55℃退火1分钟,72℃延伸1.4分钟,共34个循环,最后72℃延伸10分钟。
反应总体积25μl:c DNA2.5μl,2×Taq PCR Plus Mix 12.5μl,primer1.0μl,dd H2O;9.0μl。
混匀,进行PCR。反应结束后,拿出样品取5ul PCR产物在2%琼脂糖凝胶板上电泳,电压50V大约20分钟。电泳条带跑开后,将琼脂糖凝胶用图像分析仪进行图像分析。
3. 结果
3.1 免疫组织化学染色结果
免疫组化阳性细胞特征:细胞内(胞膜或胞浆或核膜)有棕色阳性反应物。
3.1.1 bcl-2蛋白免疫组织化学染色
模型组小鼠脑海马、额叶和颞叶阳性细胞数比正常对照组均明显减少,说明颈椎稳定性异常可致脑组织bcl-2表达下调。见图1。
3.1.2 bax蛋白免疫组织化学染色
模型组小鼠脑海马、额叶和颞叶bax阳性细胞数较正常对照组均明显增多,大小形态较均一,说明颈椎稳定性异常可致脑海马区bax表达上调。见图2。
3.2 半定量RT-PCR产物的电泳图谱
模型组bcl-2基因表达较正常对照组明显下调,bax和caspase-3基因表达明显上调,见图3。
与正常对照组相比,模型组脑组织bcl-2含量明显降低,bax含量明显升高,差异显著,见表1。
*模型组与正常组相比,P<0.05,**模型组与正常组相比,P<0.01。
3.3 Western blot实验结果
模型组(A组、B组)小鼠脑组织中bcl-2蛋白表达较正常对照组明显减少,bax蛋白表达明显增加,详见图4。
4. 讨论
定位于线粒体外膜、内质网膜和核外膜原癌基因bcl-2能阻止细胞凋亡,延长细胞寿命并增加细胞对多种凋亡刺激因素抵抗性。正常情况下,bcl-2呈周期性低水平表达且与其它基因表达相适应,过低表达可促进细胞凋亡。
本实验结果显示:模型组小鼠脑组织bcl-2基因水平、蛋白水平表达水平较正常对照组显著降低,提示在老年性痴呆发生过程中可能抑制bcl-2基因。
bcl-2能够编码bcl-2A和bcl-2B两种蛋白质,是膜的整合蛋白。其作用机制可能为:(1)阻断从内质网释出钙离子,降低依赖钙离子的核酸内切酶活性,阻断DNA消化和细胞凋亡;(2)抑制氧自由基的产生或起抗氧化剂作用而阻断细胞凋亡[2];(3)作用并控制线粒体与核孔复合体上的信号分子转导来延长细胞生存,bcl-2蛋白可与bax蛋白相结合,抑制细胞凋亡,bcl-2/bax比值决定了细胞接受凋亡信号后细胞存活与否;(4)bcl-2通过阻断凋亡最后基因通路(激活caspases)抑制凋亡[3]。
Bax的基因产物蛋白由192个氨基酸组成,21%氨基酸与bcl-2同源,生物作用是促进凋亡,拮抗bcl-2功能。
本实验应用免疫组化染色和western blot试验检测同一组小鼠脑组织凋亡调控基因bcl-2/bax蛋白表达情况,发现AD演变过程中bcl-2蛋白表达阳性率逐渐减少,bax蛋白表达阳性率则逐渐增加,bcl-2与bax阳性率比值逐渐降低,说明颈椎稳定性异常使脑组织bcl-2表达下调、bax表达上调,促进脑细胞凋亡。
参考文献
[1]林桂渺,赵洪艳,范文静,等.寰枢椎长期乳酸堆积对老年小鼠学习记忆能力的影响[J].吉林大学学报,2006,32(6):968-970.
[2]张晓铃.450例颈椎病患者的临床流行病学分析[J].中华流行病学杂志,1995,16(1):35.