不明原因性高血压

不明原因性高血压（共6篇）

不明原因性高血压 篇1

头晕是目前临床工作中常见病,其中原因不明者达20%[1,2],其一般分为眩晕、平衡失调感、晕厥前状态、晕动病、精神性头晕,通常可通过相关实验室检查、血管造影、MRI及相关量表等检查诊断,但临床上仍可见不少原因不明的头晕,且治疗方案不明确。笔者所在科通过使用黛力新治疗不明性头晕,取得较好治疗效果,并且未出现不良反应,报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年1-12月在笔者所在医院神经内科就诊的72例原因不明头晕患者,所有病例病程都达到2周以上,在来笔者所在科前诊断后循环缺血49例,颈椎病7例,良性发作性位置性眩晕16例。72例患者中男29例,女43例,年龄41~82岁,平均59.8岁。病史有高血压23例,糖尿病5例,腔隙性脑梗死3例,余无基础病。临床表现:表现为长时间头昏、头胀等,无客观不稳体征。所有患者入院时检查不支持眩晕、平衡失调感、晕厥前状态、晕动病、精神性头晕。参考不明原因头晕诊疗[3],严格参照头晕诊治流程[4],所有检查与头晕无明显相关性,均原因不明确。随机分为对照组和治疗组,各36例,两组患者年龄、性别构成比、病程比较差异无统计学意义(P>0.05),有可比性。

1.2 诊治方法

对于72例患者作血常规、心肌酶、血沉、甲状腺功能、心电图、头颅MRI、MRA等相关检查,五官科会诊,焦虑抑郁量表检测等无显著异常。入院后即开始治疗,对照组予以常规治疗,加用眩晕停25 mg,3次/d,连续治疗2周;治疗组予以常规治疗,同时予以黛力新0.125 g,2次/d治疗,连续治疗2周。

1.3 疗效判定标准

显效:头晕及相关症状明显减轻或消失;有效:头晕及相关症状减轻;无效:头晕及相关症状与治疗前相同或加重。总有效率=显效率+有效率。

1.4 统计学处理

所得数据采用PEMS 3.1处理,计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

治疗组总有效率86.11%,对照组总有效率19.44%,两组总有效率比较,差异有统计学意义(χ2=5.001,P<0.01),见表1。两组未见明显的不良反应。

3 讨论

头晕是一种常见症状,属于症状学诊断,比较多见的是便是眩晕,其常分为真性眩晕和假性眩晕。真性眩晕是对空间关系有平衡感觉障碍,发作时感觉有视物旋转,常有站立不稳,耳鸣,听力下降,呕吐,面色苍白,出汗,血压改变。平衡一般有赖于视觉,感觉,前庭系统的协调。假性眩晕为头昏、头重等。

一般讲的眩晕症是指前庭系统眩晕。前庭周围性眩晕是前庭感受器及前庭神经颅外段病变引起的眩晕,中枢性眩晕是指前庭神经颅内段及颅内疾病导致的眩晕。前庭周围性眩晕患者临床症状较重,持续时间短,常有耳鸣,听力下降,恶心呕吐,而前庭中枢性眩晕患者大多数症状较轻,持续时间长,一般无耳鸣、听力下降,通过临床表现及检查,一般能够诊断,由于患者的描述,接诊者的理解等多种原因,确实存在部分开始诊断似乎明确,但患者治疗后仍存在头晕或难以描述的头晕患者,以及部分患者确实难以分类,予以常规治疗效果不佳。笔者认为,对于前者,此类患者可能存在原有的基础病,有一定的焦虑、担心存在,这导致慢性主观性头晕[5],如患者有高血压患者,存在担心,有腔隙性脑梗死患者,可能并不是头晕的责任灶,患者及接诊者都容易认为是动脉硬化、后循环缺血等,有的患者由于X线片或者MRI提示有颈椎病,总是先入为主的认为是颈椎病导致,而往往治疗效果不佳,这可能跟脑血流动力学有关[6];有的眩晕患者,如良性位置性发作性眩晕,由于复位不成功,而患者前庭功能适应功能尚未恢复,也容易导致长期眩晕,有研究表明周围性眩晕最为常见,其中就是良性位置性发作性眩晕[7]。部分原因不容易诊断的,如偏头痛性眩晕及不典型心因性眩晕。偏头痛性眩晕:女性多见,有疲劳、饮酒、睡眠不足、紧张等诱发,无偏头痛病史,急性发病,持续1 min~24 h眩晕后,出现与头部位置变换有关的眩晕,持续数日至数周,不伴有听觉障碍,不伴恶心、呕吐。如为首次发作,不易诊断[8]。对于此类患者即使相关量表达不到焦虑症抑郁症的诊断标准,可以使用黛力新治疗观察。

黛力新是由小剂量氟哌噻吨与四甲蒽丙胺组成的两种成分组成的新抗抑郁新型制剂,具有提高突触间隙多巴胺、去甲肾上腺素及5-羟色胺等多种不同神经递质的含量,调节中枢神经系统的功能。该药通过调节中枢神经系统协调功能,消除多虑,紧张,阻断植物神经功能紊乱。由于治疗的病例尚少,对于黛力新治疗头晕,在临床实践中可进一步总结及观察。临床医生应当全面分析排除不同疾病所致头晕,在明确头晕的诊断时候不能随意与盲目,避免了头晕的诊断错误率,提高治疗的正确率[4]。相信随着国内部分医院逐步设立了头晕诊疗中心,多专科协作更是推动了头晕的诊治进展[9]。

摘要：目的:分析黛力新治疗笔者所在医院神经内科住院的原因不明性头晕患者的疗效。方法:选取2015年1-12月在笔者所在医院神经内科就诊的72例原因不明头晕患者,随机分为治疗组和对照组,对照组予以常规治疗,加用眩晕停25 mg,3次/d,治疗组予以常规治疗,同时予以黛力新0.125 g,2次/d治疗。结果:治疗组疗效明显好于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。两组均未见不良反应。结论:黛力新治疗不明性头晕,取得较好治疗效果,无明显不良反应。

关键词：头晕,黛力新,原因不明

参考文献

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[9]李勇,程瑞年.头晕(眩晕)的病因诊断[J].临床误诊误治,2015,28(3):53-56.

不明原因性高血压 篇2

1 资料和方法

1.1 一般资料

以2006年1月—2009年12月在我院妇科就诊的218例复发性流产合并早孕的病人为研究对象, 根据其既往病史及相关检查分为不明原因复发性流产和原因性复发性流产。不明原因复发性流产入组标准:排除具有明显流产原因, 如宫颈功能不全等解剖疾病、感染、内分泌及自身免疫等疾病、染色体异常、血清封闭抗体阴性等。其中112例入组不明原因复发性流产, 将该组病人随机分为心理干预组和对照组, 每组56例。两组年龄、怀孕时间、流产次数比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 研究工具

使用中文版知觉压力量表 (chinese perceived stress scale, CPSS) 对218例复发性流产病人的知觉压力状态进行调查。CPSS:评价个体的生活事件在怎样的程度上被觉察为压力。量表包括正向和负向问题, 从0分～4分对最近1个月来觉察到的压力进行评价。0分=从来没有, 1分=几乎没有, 2分=有时有, 3分=经常有, 4分=总是有。得分表示个体觉察到的心理压力水平, 得分越高说明被调查者觉察到的压力越大。

1.2.2 心理干预

对照组给予常规治疗、护理。心理干预组在常规治疗、护理的基础上进行心理干预。心理护理由专一护师实施, 每周进行1次, 每次20 min～30 min, 连续4周, 以后2周1次, 连续2次, 继续妊娠者到产科定期检查。心理干预治疗4次后, 再次使用CPSS对两组不明原因复发性流产病人进行压力状态调查。

1.2.2.1 一般性心理干预

通过讲座、宣传手册宣传优生优育知识, 介绍保胎期间的注意事项, 介绍孕妇营养和孕期保健知识, 使病人对正常孕期所出现的情况有一定的心理准备, 了解习惯性流产疾病的防治知识及对母婴的危害性, 促进病人自觉到医院进行定期产前检查及心理干预。

1.2.2.2 个体化心理干预

个体化心理护理干预由专一的护师实施, 耐心听取病人倾诉, 取得病人的信任与合作。根据病人的具体情况给予个体化的心理疏导, 鼓励和诱导病人以积极的心态面对现实, 特别指出让病人了解在压力状态下人体激素的变化, 使病人开始重视紧张、焦虑、担忧等不良精神因素对不孕及对妊娠结局的影响。

1.2.2.3 心理压力释放治疗

病人通过倾诉、定期音乐胎教、孕期健康操等身心放松训练达到身心放松及压力释放, 使病人保持心态平静, 淡化病人角色。

1.2.2.4 社会家庭干预

了解病人生活环境压力及家庭情况, 指导家庭对病人提供及时的情感支持、经济支持和心理支持, 从而稳定病人情绪, 使其保持积极的心态面对治疗。

1.2.3 疗效评定标准

治愈:活产 (分娩或剖宫产出正常新生儿) ;未愈 (未活产) :自然流产。

1.2.4 统计学方法

用SPSS16.0统计软件, CPSS测量值数据用均数±标准差表示, 进行组间单因素方差分析;治愈率采用χ2检验, P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

3 讨论

曾经有过自然流产病史的女性, 再次妊娠时, 自然流产的复发风险随着自然流产次数的增多而增加。有文献报道, 第1次妊娠时, 自然流产发生率为11%～13%;有1次自然流产史者再次妊娠后, 自然流产发生率为13%～17%;2次自然流产后, 流产的复发风险约为第1次的3倍, 发生率达38%;连续3次自然流产, 下次妊娠流产的风险升高到45%, 有4次以上流产史者, 如得不到适当治疗, 多数再次妊娠流产。因此, 既往流产史影响复发性流产的发生。复发性流产病人因不育感受着来自于社会、家庭压力, 再次妊娠后担心再次流产, 因而产生焦虑、恐惧、忧郁等心理, 心理压力程度高[5], 这些不良的精神心理因素, 影响免疫系统, 导致心理内分泌失衡[6]。研究表明, 在较高心理压力合并流产的妇女子宫内膜局部 CD8+T细胞和 TNFα增高, 提示心理压力、免疫异常与流产三者相关[6]。有研究表明, 压力应激可以诱导小鼠流产。本研究发现, 复发性流产病人, CPSS评分高于一般社会群体, 其原因可能为复发性流产病人因不育感受着来自于家庭社会及自身担心再次流产的双重压力。本研究发现, 相对于原因性反复流产病人, 不明原因复发性流产病人具有更大的心理压力。推测可能因为原因性复发性流产病人, 大部分可以对因治疗, 而一些不明原因复发性流产病人, 因为没有对应的治疗措施, 因此具有更大的心理压力。通过心理干预治疗, 不明原因复发性流产病人心理压力降低, 临床结局提示心理干预后, 活产率增加。因此, 对于不明原因复发性流产病人, 心理、内分泌失衡可能是其重要的病因之一, 而心理干预是一项有效的治疗措施。

摘要：[目的]探讨心理干预对不明原因复发性流产的治疗作用。[方法]应用知觉压力量表 (CPSS) 对218例复发性流产病人进行压力状态调查, 并将其中112例不明原因复发性流产病人随机分为心理干预组和对照组, 每组56例, 通过压力状态评定和活产率判定两组病人的疗效。[结果]与原因性复发性流产病人相比, 不明原因复发性流产病人压力程度显著增高;心理干预可以显著降低不明原因复发性流产病人心理压力, 可增加活产率。[结论]心理干预对不明原因复发性流产病人具有治疗作用。

关键词：心理干预,复发性流产,压力

参考文献

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不明原因性高血压 篇3

关键词：低分子肝素,URSA,临床疗效

Curative effect analysis of low molecular heparin in the treatment of unexplained early recurrent spontaneous abortion in 60 cases

Liang Qingfen

Department of Gynaecology and Obstetrics, the Maternal and Child Health Hospital of Lingshan County, Guangxi 535400

Fund project Guangxi Qinzhou City Science and Technology Bureau research project of science and technology (Number:20134405)

资料与方法

2014 年2 月-2015 年2 月收治URSA患者60 例。入选标准: (1) 综合分析患者的病史、临床表现、实验室化验结果和超声检查结果等资料符合RSA诊断; (2) 夫妻双方的染色体正常; (3) 夫妻双方抗HLA-Ⅰ/Ⅱ-抗体均呈阴性; (4) 内分泌指标正常; (5) 抗子宫内膜抗体和抗磷脂抗体阴性; (6) 母体生殖系统解剖结构和生理功能正常; (7) 无严重的心脑血管疾病、肝肾功能不全、恶性肿瘤和凝血功能障碍; (8) 对本次研究知情同意并签署知情同意书。入组患者60 例, 采用前瞻性随机对照研究方法将患者随机分为观察组和对照组, 两组患者的年龄、婚龄、流产次数和体重等临床资料的差异无统计学意义 (P>0.05) , 见表1。

方法:全部患者自血β-HCG和超声等检查结果确定宫内妊娠时开始接受药物治疗, 直至妊娠满12 周。 (1) 对照组:对照组患者接受黄体酮和绒毛膜促性腺激素进行治疗。黄体酮注射液20 mg肌内注射, 1次/d;绒毛膜促性腺激素注射液1000 U肌内注射, 1次/d。 (2) 治疗组:观察组患者在接受黄体酮和绒毛膜促性腺激素治疗的同时应用低分子肝素进行治疗。注射用低分子肝素, 脐周皮下注射5000 U, 1 次/d。密切观察患者腹部皮下注射部位瘀斑、硬结及是否有渗血情况, 是否有阴道流血、皮肤瘀点、瘀斑等出血情况。定期复查血常规、凝血功能、D-二聚体, 如果出现血小板减少50%、APTT升高>1.5倍、TT升高>4倍3种情况中任意1种情况即停止使用低分子肝素肝素。

统计学方法:采用SPSS 13.0 统计软件进行数据分析。对年龄、婚龄、流产次数和体重等计量资料采用表示, 并采用t检验进行组间比较。对妊娠结局、药物不良反应和新生儿情况等计数资料采用率 (%) 表示, 并采用χ2检验进行组间比较。P<0.05为差异有统计学意义。

结果

观察组患者的治疗成功率90% (27/30) , 对照组66.67% (20/30) ;观察组的药物不良反应发生率23.33% (7/30) , 对照组20% (6/30) 。观察组的治疗成功率高于对照组 (P=0.028) , 药物不良反应发生率低于对照组 (P=0.754) 。 观察组患者的新生儿畸形发生率0% (0/30) , 对照组3.33% (1/30) , 两组之间的差异无统计学意义 (P=0.313) , 见表2。

讨论

URSA是临床产科上难治性疾病之一, 对患者及其家属的身心健康和生活质量有很大的影响。有研究报道URSA患者血液纤溶功能降低、凝血功能增强, 在患者的胎盘蜕膜血管中形成血栓, 从而导致胎盘血液循环不畅、胎盘血液灌注不良, 进而导致自然流产[1]。

针对这类URSA患者, 采用低分子肝素进行治疗, 可以促进内源性肝素物质和前列环素样物质释放、提高血浆纤溶酶原激活剂浓度、激活纤溶酶而增加纤溶、激活血管活性物质和血管紧张素等, 可以有效抗凝、溶解血栓、改善胎盘的血流灌注, 从而有助于胎儿的发育和存活[2]。本次研究中, 观察组患者应用低分子肝素, 活产儿27例 (90%) , 显著高于未应用低分子肝素组的患者, 结果提示:对URSA患者应用低分子肝素可以获得满意的妊娠结局。

低分子肝素在有效抗凝、溶解血栓、改善胎盘的血流灌注的同时, 可以导致患者出现血小板减少、出凝血功能异常等药物不良反应。结果提示:对URSA患者应用低分子肝素对胎儿影响不大, 安全可靠。

综上所述, 对URSA患者应用低分子肝素进行治疗, 可以有效促进胚胎生长发育, 有效改善患者的妊娠结局, 安全可靠, 临床疗效满意。不足之处:本次研究纳入样本量较少, 随访观察时间短, 可能导致研究结论存在一定偏差。

参考文献

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不明原因性高血压 篇4

关键词：不明原因性复发性流产,低分子肝素,特殊护理

复发性流产 (RAS) 指同一女性连续发生2次或以上自然流产, 病因包括遗传、内分泌、感染等, 但有相当部分患者为不明原因流产[1]。目前, 临床治疗RAS主要以低分子肝素治疗为主[2]。随着人们生活水平的不断提高, 对RAS的护理需求也更为严格。本研究就特殊护理在低分子肝素治疗不明原因性RAS患者中的应用价值进行探讨, 现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料选取2014年12月至2015年12月我院收治的120例不明原因RAS患者作为研究对象。本研究拟案已转交医学伦理部门审阅并批准, 患者及家属均同意参与本研究, 所有患者均满足不明原因性RAS的临床诊断标准, 且均需行低分子肝素治疗, 同时排除: (1) 治疗无效或效果差的患者; (2) 精神疾病。按随机数字表法将患者分为观察组和对照组, 各60例。观察组患者年龄20~41岁, 平均 (30±6) 岁;对照组患者年龄23~42岁, 平均 (30±5) 岁。两组患者年龄比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2护理方法所有患者入院后完善相关辅助检查, 均采用低分子肝素进行治疗:妊娠5~10周患者给予低分子肝素钙腹部皮下注射, 第1天10 000 IU, 1次/12 h;每两天检测凝血酶时间1次, 根据检测结果调节药物使用剂量, 凝血酶时间达正常孕妇的1.5倍左右后, 每月进行1次抗心磷脂抗体 (ACA) 检测, 结果阴性后停药;ACA检测结果转阳则恢复治疗。6个月后减少剂量为每天5000 IU, 1次/d, 治疗时间以胎儿成熟情况为准。同时, 对照组患者给予常规护理, 包括入院指导、治疗前准备、定期巡房与用药护理等。观察组患者则在对照组基础上实施特殊护理, 具体如下。

1.2.1用药前对患者进行相关健康教育指导患者进行自我监测与管理, 包括日常生活中遇到的容易引起出血的状况, 并对患者病情进行全方位评估, 掌握其具体差异, 有效避免药物相互作用导致的出血风险。

1.2.2改进注射排气手段注射前针头向下并轻弹注射器, 使空气悬浮于药液上方后直接注射, 减少注射时误伤表皮血管。注射时捏起注射部位皮肤与皮下组织, 于皮褶顶部垂直进针7 mm后回抽, 确认无明显回血现象后缓慢推注药物, 完成注射后取无菌棉球进行按压, 时间3 min左右。

1.2.3治疗期间的观察与护理治疗前细致检查注射部位, 仔细询问并检查患者有无出血倾向或药物治疗不良反应。定期为患者讲解治疗和有关护理的重要性及具体注意事项等, 同时建立私人档案, 监督患者按时参加检查。

1.3观察指标比较两组患者的不良反应发生情况、护理满意度。护理满意度:采用我院自行设计的护理满意度问卷进行测定, 总分100分, 非常满意:90~100分;满意:80~89分;较满意:70~79分;不满意<70分。总满意度 (%) = (非常满意例数+满意例数+较满意例数) /总例数×100%[3]。

1.4统计学分析采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析, 计数资料以百分率表示, 组间比较采用χ2检验, P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1不良反应发生情况比较观察组患者的不良反应发生率明显低于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 见表1。

2.2护理满意度比较观察组患者的护理满意度明显高于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 见表2。

注:与对照组比较, χ2=6.536, *P<0.05

注:与对照组比较, χ2=11.581, *P<0.05

3讨论

随着医疗技术的不断发展与革新, 低分子肝素在RAS治疗中的使用愈加广泛, 与之相对应的护理操作要求也随之提升, 高效率的临床治疗方法与成熟的护理操作相辅相成, 才能取得最佳的治疗效果[4]。特殊护理操作是在临床科室中常使用的护理模式, 是根据疾病本身制订的治疗护理模式, 并参照临床路径表进行护理, 使护理操作更加循证化与流程化, 可有效缩短恢复周期, 降低医疗成本[5]。低分子肝素钙是一种抗凝和抗血栓药物, 其最危险不良反应之一就是大出血, 可对患者造成明显的心理创伤, 也可影响患者凝血功能, 引发出血、皮下气肿等严重并发症, 因此患者治疗用药期间的监管和护理尤为关键, 存在治疗意义的特殊护理则显得异常关键[6]。

本研究结果显示, 观察组患者的不良反应发生率明显低于对照组, 护理满意度明显高于对照组。提示对采用低分子肝素治疗不明原因性RAS患者实施特殊护理, 可明显提高患者护理满意度, 降低不良反应发生率, 对于提高治疗效果、改善病情具有积极作用。

参考文献

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不明原因性高血压 篇5

1 对象与方法

1.1 对象

收集2005年9月至2007年3月鹤壁煤业集团总医院门诊就医的URM患者35例,非孕期,排除染色体、生殖道解剖结构、内分泌异常和生殖道感染,年龄27～34(30.33±3.25)岁;NNP妇女40例,年龄23～32(28.36±5.23)岁。

1.2 方法

(1)标本收集:分别采集受试者外周静脉血2mL,肝素抗凝。(2)细胞培养:96孔培养板中取2孔,每孔加入同一份血样标本肝素钠抗凝全血100μL和RPMI-1640培养基100μL,加入刺激剂佛波乙醇脂25ng,离子霉素1μg和莫能霉素2μL。37℃体积分数为0.05的CO2培养箱孵育18h。(3)流式CD4+淋巴细胞胞内细胞因子检测:取2只试管,分别为测定管和阴性对照管,上述培养细胞混匀,各取100μL,均加入10μLPE-cy5标记的鼠抗人CD4单抗,混匀,4℃避光孵育20min,加1mL溶血素裂解液,混匀,室温放置10min,离心弃上清,PBS洗涤1次。加入500μL破膜剂,混匀,室温放置10min,离心弃上清后进行细胞内因子标记。测定管中加入0.5μg异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)和PE标记的白细胞介素10(interleukin-10,IL-10),对照管加入相应的同型对照,混匀,4℃避光孵育20min,PBS洗涤一次后上机检测。上述试剂均购自美国eBioscience公司。应用FAC-CALIBUR型流式细胞仪,对FL1和FL2通道分别以相应的同种型IgG染色细胞为阴性对照,设置各通道之间的荧光补偿后,对CD4+细胞胞内的Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子IL-10进行检测。测出相应的Th1型细胞和Th2型细胞百分比。

1.3 主要观察指标

35例URM患者及40例NNP外周血中Th1和Th2细胞的百分率。

1.3 统计学处理

实验数据以χ—±s表示,使用SPSS12.0统计软件进行方差分析及两两比较,组内前后比较用配对t检验,P<0.05为有统计学意义。

2 结果

URM组与NNP组比较,前者的CD4+IFN-γ+表达水平升高,CD4+IL-10+表达水平降低,Th1/Th2值升高,见表1。

与NNP比较*P<0.05

3 讨论

T辅助细胞的功能性分化是近年来免疫学研究的热点之一。T辅助细胞分化后产生Th1/Th2两类不同细胞的细胞因子,以调节人体的免疫平衡。最近的研究表明[1],Th1/Th2型细胞因子的调节机制也开始用于解释母胎界面的细胞调节现象。胎儿作为一种同种的半异体抗原能够在母体内生存、生长和发育而不被排斥,其中发生在母胎界面的特殊免疫现象起着关键性作用。

Th1细胞分泌I类细胞因子(T辅助l类细胞因子),包括IL-2和IFN-γ,主要介导细胞免疫功能。Th2细胞分泌Ⅱ类细胞因子(T辅助2类细胞因子),包括IL-4、-6、-10,主要介导体液免疫功能。两类细胞都可产生IL-3、12和粒-巨噬细胞集落刺激因子;两类细胞都有共同的前体Th0细胞。事实上,Thl和Th2细胞是在抗原的刺激及细胞因子参与下由成熟但未致敏的Th0细胞分化而来,分别介导细胞免疫和体液免疫。Th1细胞以分泌IFN-γ为主要特征,参与细胞介导的促进抗体IgG2α的产生。Th2细胞主要分泌IL-4,参与体液免疫应答,即IgG1和IgE抗体产生和嗜酸粒细胞活化。Th2类的细胞因子属于炎症性细胞因子。这些细胞因子及其受体在免疫排斥反应中扮演主要的角色。Th2细胞因子被认为是免疫调节性因子。这些反应的产物可刺激B细胞生长并下调Th1反应,诱导母体对胎儿同种移植产生免疫耐受,可能是促进成功妊娠滋养层生长的自然反应。Th2细胞因子的产生缺陷,可能导致反复自然流产。已有研究证明[2],反复自然流产妇女蜕膜免疫细胞产生过量胚胎毒性细胞因子,Thl/Th2平衡偏向Th1,但促成其向Th1偏向的原因尚不清楚。有学者认为,Th1细胞与某种特定抗原反应的倾向是由Ⅱ类组织相容性白细胞抗原基因决定的。另有研究表明[3],Th1类的细胞因子在正常妊娠前3个月胎盘组织中没有表达,这可能导致局部IL-10的产生增高,有利于胚胎的着床。国外有学者分析相同孕周的正常孕妇及不明原因的反复自然流产患者的淋巴细胞,经反复证实,正常孕妇淋巴细胞培养的上清液中以Th2类细胞因子为主。所以研究者认为,成功的妊娠同样是以Th2细胞为主的,而Th1类细胞因子对胚胎有害。通过分析针对丈夫淋巴细胞免疫治疗的HUA患者发现,其中能够正常妊娠的HUA患者外周血Th1类细胞因子,如IL-2、IFN-γ下降,而Th2类细胞因子,如IL-10则明显升高。对滋养层组织的研究表明,滋养层具有特殊的免疫学特性,在整个孕期为胎儿提供特殊的植入保护,合体滋养层和细胞滋养层都不表达典型的I型或Ⅱ型HLA抗原,但绒毛外细胞滋养层表达非典型I类主要组织相容性复合物,即组织相容性白细胞抗原G。这一抗原具有限制性分布和非多态性的特点,可降低滋养层对天然杀伤细胞介导的、溶细胞的细胞毒作用的敏感性。当人体组织的相容性白细胞抗原G表达异常或在接触其他机体组织相容性白细胞抗原G时释放细胞因子异常,将会对滋养层生长产生负性影响,导致流产。邱丽华等[4,5]报道,正常妊娠与非妊娠妇女外周血Th细胞亚群差别无统计学意义,而URM妇女外周血Th2细胞亚群较正常非妊娠妇女显著下降。陈巧英等[6]发现,早孕期正常妊娠者外周血Th1/Th2比例显著低于早孕期自然流产患者及黄体期育龄妇女。Nishikawa等[7]证实Th2细胞具有强的抑制CD4+CD-25T细胞和T8细胞增殖的活性。Taams等[8]发现,Th2细胞与单核细胞/巨噬细胞共培养,单核细胞仅产生最小剂量的细胞因子,而与CD4+CD-25T细胞共培养,则使后者产生大量亲炎症因子(TNF-α,IFN-γ和IL-6)。因此,Th2细胞亚群数量的相对减少不能正常有效地诱导孕妇免疫耐受,容易发生对异型抗原的免疫排斥反应,乃至影响胚胎着床而流产。董琳等[9]应用环孢素A上调孕鼠外周Th2细胞,诱导母胎免疫耐受,可降低孕鼠自然流产模型胚胎吸收率,改善妊娠预后。杨金英等[10]以正常生育非孕妇女(n=20)为对照,以URM(n=25)为研究对象,采用实时荧光定量PCR分析外周血单个核细胞Foxp3转录水平,以流式细胞术分析外周血CD4+CD+25T细胞Foxp3翻译水平,结果显示URM患者的Foxp3转录水平明显低于正常对照组(P<0.01)。杨卉等[11]对URM妇女实施主动免疫治疗,妊娠成功者Th2细胞显著多于妊娠失败者。本试验中,通过检测URM患者及NNP者细胞因子发现URM患者Th1型细胞因子IFN-γ表达增高,Th2型细胞因子IL-10水平降低,也表明在URM患者体内存在Th1/Th2细胞功能失调。Th1/Th2升高导致炎症介质大量增加,抗炎细胞因子增加不明显或者降低,致使URM患者细胞因子网络失衡及外周血T细胞杀伤功能增强。

本研究表明,URM患者由于Th1/Th2细胞群的失衡,激活病理性免疫反应,导致一系列的病理生理改变和免疫功能紊乱。孕妇体内Th1细胞亚群升高及Th2细胞亚群相对减少可能是URM发病重要机制之一,并有望成为临床免疫治疗的靶点和疗效监测指标之一。

摘要：目的观察原因不明复发性流产(URM)患者外周血Th1型细胞因子干扰素γ及Th2型细胞因子白细胞介素10水平的变化。方法选择2005年9月至2006年4月河南省鹤壁煤业集团总医院妇产科35例URM(非孕期)患者和40例正常非孕(NNP)妇女,采用流式细胞分析法对各组患者进行CD4+Th1型细胞因子干扰素γ和Th2型细胞因子白细胞介素10水平进行检测,从而测出相应Th1、Th2细胞的百分比。结果URM患者CD4+干扰素γ表达水平和Th1/Th2值高于NNP组(P<0.05),CD4+白细胞介素10表达水平低于NNP组(P<0.05)。结论URM患者存在Th1/Th2失衡,且可能与URM发病有一定关联。

不明原因性高血压 篇6

1 材料与方法

1.1 研究对象

6～8周龄清洁级雌性CBA/J、雄性Balb/c 及DBA/2近交系小鼠,原种来源于日本国立遗传研究所,由中国科学院上海实验动物中心遗传室保种提供,该品系经遗传质量检测符合国际标准。

1.2 实验试剂及仪器

主要试剂:PE-Cy5标记的抗鼠FoxP3单抗及相应同型对照PE-Cy5-IgG,FITC标记的抗鼠CD4单抗,PE标记的抗鼠CD25单抗(eBioscience),兔抗小鼠TSLP抗体(BioVision),RNA抽提试剂盒(Cat#Z3100)、cDNA逆转录试剂盒(Cat#A3500)均购自Promega公司,测定白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)检测试剂盒(eBioscience),GENMED红细胞裂解液(上海杰美基因医药科技有限公司)。主要仪器:DNA扩增仪9700(ABI),ABI Prism 7900测序仪(Applied Biosystems公司,美国),流式细胞仪(BD),Thermo紫外分光光度计,Thermo酶标仪。

1.3 实验方法

1.3.1 动物分组

①自然流产小鼠模型组(雌CBA/J×雄 DBA/2),15组小鼠,6～8周,活泼健康,雌性CBA/J 30只,雄性DBA/2 15只。②正常妊娠小鼠模型组(雌CBA/J×雄Balb/c),15组小鼠,6～8周,活泼健康,雌性CBA/J 30只,雄性Balb/c 15只。随机分组,各组雌、雄性小鼠按2:1合笼,自合笼之日起每天8:00和14:00分别观察1次,如见明显阴栓即确定为怀孕第1天,在怀孕第14天取材。

1.3.2 标本收集

两组模型小鼠怀孕第14天,采用摘眼球取血,肝素抗凝,采集小鼠外周血,3000 rpm离心20分钟分离血清,避免溶血,-70℃冰箱保存,留IL-4、IFN-γ及TSLP。血细胞采用流式细胞仪检测两组模型小鼠Treg细胞表面FoxP3阳性(+)的表达。分离小鼠的绒毛、蜕膜组织,0.9%氯化钠液洗去血液,置于液氮中保存,留做免疫印迹(Western Blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测。

1.3.3 RT-PCR检测

模型小鼠孕14天拉颈处死,取绒毛、蜕膜组织,立即液氮保存。引物序列如下:TSLP-1-F:5′-TGAGAGCAAGCCAGCTTGTC-3′,TSLP-1-R:5′-GTGCCATTTCCTGAGTACCG-3′,GAPDH:Sense:5-G

GCTACACTGAGGACCAGGTT-3,Antisense:5-TGCTGTAGCCGTATTCATTGTC-3,由上海生工生物工程有限公司合成。50 mg绒毛、蜕膜组织分别加1 ml苯酚(TRIzol)充分匀浆,RNA的抽提和cDNA合成按照普洛麦格(Promega)逆转录试剂盒说明进行,用紫外分光光度计测得总RNA OD260/280在1.8～2.0。每个标本做3个副孔,进行40个循环,由实时荧光定量基因扩增仪(ABI Prism)7900测序仪分析各孔CT值,计算出标化后的△△CT值。△△CT=(CT处理组-Ctaction处理组)-(CT对照组-Ctaction对照组)。

1.3.4 Western Blot检测

取约50 mg绒毛、蜕膜组织,加裂解液,25000 rpm,5秒匀浆6分钟离心,吸取上清,蛋白定量,计算562 nm处蛋白浓度,95℃加热5分钟,15%的SDS-聚丙烯酸胺凝胶电泳,转膜,分别加一抗、二抗孵育,DAB显色。X线胶片经扫描及凝胶成像(Scnlmage)分析系统处理,以目的蛋白条带的吸光度容积与β-Actin条带吸光度容积的比值作为目的蛋白的相对含量。

1.3.5 酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)

测定孕14天小鼠血清中细胞因子TSLP、IL-4及IFN-γ的含量,测定过程按试剂盒说明书进行 。

1.3.6 流式细胞仪检测

孕14天小鼠摘眼球取血,离心,取200 μl血细胞加入流式管,裂解红细胞后,用抗鼠FITC-CD4单抗、抗鼠PE-CD25单抗标记,4℃避光孵育30分钟,加穿孔液过夜,加PE-Cy5标记的抗鼠FoxP3单抗,4℃避光孵育30分钟,200 μl磷酸盐缓冲液(PBS)重悬,上流式细胞仪检测。

1.4 统计学处理

用SPSS 16.0统计软件分析数据。计量资料以undefined表示,组间比较用t检验,P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 TSLP mRNA的表达

选取两组于10月份怀孕的雌鼠各15只,于孕14天处死,取其绒毛组织,因其中部分老鼠有阴栓未孕,未将其列入统计,于是正常妊娠模型组12只,自然流产模型组11只。RT-PCR显示,12只正常妊娠模型组小鼠绒毛TSLP mRNA△△CT值均值为14.2740±4.70299,11例自然流产模型组小鼠绒毛TSLP mRNA△△CT值均值为8.4791±3.85851,两者比较差异有统计学意义(t=2.327,P<0.05)。

2.2 TSLP蛋白的表达

正常妊娠模型组孕14天小鼠绒毛、蜕膜组织中TSLP蛋白表达水平明显高于自然流产模型组孕鼠,正常妊娠模型组蜕膜TSLP/β Action半定量比值为:0.7263±0.34533,自然流产模型组蜕膜TSLP/β Action半定量比值为:0.1941±0.19358,两组比较差异有统计学意义(t=3.168,P<0.05);正常妊娠模型组绒毛TSLP/β Action半定量比值为:0.9693±0.13622;自然流产模型组绒毛TSLP/β Action半定量比值为:0.1971±0.1069,两组比较差异有统计学意义(t=8.918,P<0.05),见图1、图2。

(1A:正常妊娠小鼠模型;1B:自然流产模型)

(Fig1A The mouse models of normal pregnancy Fig1B The mouse models of spontaneous abortion)

(2A:正常妊娠小鼠模型;2B:自然流产模型)

(Fig1A The mouse models of normal pregnancy Fig1B The mouse models of spontaneous abortion)

2.3 血清中TSLP、IL-4及IFN-γ的水平

选取12月份怀孕雌鼠各10只,正常妊娠模型组孕14天小鼠血清中TSLP、IL-4的水平明显高于自然流产模型组,差异有统计学意义(P<0.05);自然流产模型组孕鼠血清中IFN-γ的水平高于正常妊娠模型组孕鼠,但两者比较差异无统计学意义(P>0.05),见表1。

2.4 流式细胞仪检测CD4+CD25+Treg细胞及细胞内FoxP3阳性的表达

选取2月份怀孕雌鼠各17只,于孕14天处死,取其绒毛、蜕膜组织,因为其中部分老鼠有阴栓未孕,未将其列入统计,于是正常妊娠模型组16只,自然流产模型组12只。自然流产模型组小鼠外周血中CD4+CD25+Treg细胞及细胞内FoxP3阳性所占比例均明显低于正常妊娠模型组小鼠,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2、图3。

(标号XYJ.011:正常妊娠小鼠模型;标号XYJ.023:自然流产小鼠模型;CD25PE:PE标记的抗鼠CD25单抗;CD4FITC:FITC标记的抗鼠CD4单抗;FOXP3PECY5:PE-Cy5标记的抗鼠FoxP3单抗)

3 讨 论

复发性流产是指连续发生3次或3次以上的自然流产,发生率约占妊娠总数的1%[3],其病因除了经典的染色体异常、生殖道解剖学异常、感染以及内分泌异常以外,临床上40%的患者流产原因不明,长期以来给临床治疗带来相当大的困难。

新近研究发现,URSA的发生主要与妊娠免疫耐受机制紊乱有关,表现为URSA患者的外周血和蜕膜面T细胞上CD4/CD8比值异常[4];CD4+T细胞中Th1/Th2平衡向Th1偏离;NK细胞上抑制性受体[KIR、CD94/NKG2、免疫球蛋白样转录物(ILTs)分子]和杀伤性受体(KAR、CD16)之间的平衡失调;NKT细胞穿孔素表达增加;巨噬细胞表面协同刺激分子CD80、CD86表达异常;胚胎绒毛滋养细胞表面非经典的主要组织相容性抗原复合物HLA-G表达下降,从而使自然杀伤(NK)细胞的活化能力下降[5];滋养细胞Fas配体表达下降,使得表达Fas的活化的母体淋巴细胞活力增强[6];补体C3的调节因子衰变加速因子(DAF)表达下降,使保护胚胎免受补体攻击的能力下降。趋化因子及其受体的表达异常,Fas和FasL系统表达异常,而经过FasL修饰的树突状细胞(DC)能诱导妊娠免疫耐受[7]。外周血和(或)蜕膜CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及其表面FoxP3的表达异常与URSA的发生有关。

近年来关于hTSLP体外研究发现,hTSLP能促进树突状细胞(DC)的激活并促使其成熟,而激活的DC能诱导胸腺CD4+CD8-CD25-Treg细胞增殖分化为具有强大免疫抑制功能的FoxP3+CD4+CD25+Treg[8];hTSLP诱导成熟的DC能够通过其产生Th2型趋化因子,如趋化因子17(CCL17)及趋化因子22(CCL22),产生Th2型的免疫反应。对mTSLP研究发现,mTSLP能促使2天龄小鼠胸腺Treg细胞表达FoxP3[9];hTSLP在正常妊娠蜕膜和绒毛滋养细胞均有高表达,可能与早孕调节性T细胞的扩增和功能变化有关[10]。

本研究表明,正常妊娠模型组小鼠TSLP基因转录、蛋白表达及血清中TSLP细胞因子的分泌明显高于自然流产模型组,且Th2型细胞因子IL-4明显增高,有利于维持妊娠母-胎免疫耐受[11]。有关CD4+CD25+Treg细胞及组成性表达转录因子FoxP3阳性有利于维持母-胎界面免疫耐受的研究[12]与本实验研究结果一致。本研究证明,正常妊娠模型组小鼠CD4+CD25+Treg细胞及细胞内FoxP3阳性的表达明显高于自然流产模型组。根据本次有关TSLP的研究以及我们和国外有关URSA的研究结果,我们推测正常孕妇妊娠免疫耐受的形成是外周血或蜕膜中抗原递呈细胞和免疫效应细胞等多种免疫活性细胞相互作用、相互协调的结果,而这种细胞间的相互作用相互协调受TSLP的调控,如果孕妇外周血或蜕膜中TSLP的表达异常,则可导致妊娠免疫耐受失调,而引发流产。我们则可以通过诱导TSLP的表达模式的改变使妊娠免疫耐受恢复正常,从而达到保护胎儿,免受排斥、流产的危险,为URSA的治疗找到新的靶点。

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