丹蛭胶囊（精选4篇）
丹蛭胶囊 篇1
丹蛭降糖胶囊是由太子参、牡丹皮、水蛭等组成的复方, 具有益气、养阴、活血等功效, 适用于2型糖尿病 (气虚、阴亏、血瘀型) 。本文观察了丹蛭降糖胶囊对四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖、耐力及免疫力的影响, 报告如下。
1实验材料
1.1 动物
健康昆明种小鼠, 雄性, 体重18～22g, 安徽省医学科学研究所实验动物中心提供, 合格证号:皖实动准字第01号。空调控制室温为20～25℃, 相对湿度40%～60%, 并通风换气。
1.2 药品与试剂
丹蛭降糖胶囊:由太子参、牡丹皮、水蛭等组成, 安徽中医学院第一附属医院制剂中心提供, 批号:021203, 临用时胶囊内容物以纯化水配成所需浓度的混悬液。降糖灵片:苏中制药厂, 批号:000413;糖脉康颗粒:成都中汇制药公司出品, 批号:000303。四氧嘧啶 (ALX) :Sigma公司;血糖试纸:罗氏诊断试剂公司。
1.3 主要仪器
II型GLUCOTREND血糖仪:美国ROCHE公司;BS200S电子天平:德国赛多利斯公司。
2实验方法和结果
2.1 对四氧嘧啶致糖尿病小鼠体重和血糖的影响
取雄性昆明种小鼠100只, 实验前禁食8小时, 自小鼠眼球后静脉丛插入毛细玻管取血, 于血糖仪上测空腹血糖值, 选<6.0mmol/L者为合格, 称重, 一次性尾静脉注入ALX 90mg/kg, 3天后复测体重和血糖, 选血糖>13.8mmol/L者作为糖尿病模型小鼠[1]。60只小鼠随机分为模型对照组 (生理盐水) 、胶囊高剂量组 (16.6g生药/kg) 、中剂量组 (8.3g生药/kg) 、低剂量组 (4.1g生药/kg) , 降糖灵组 (90mg/kg) , 糖脉康组 (2.0g/kg) , 每组10只;另选10只未注射ALX的小鼠为正常对照组。各组按0.2ml/10g灌胃给药 (或生理盐水) , 每天1次, 连续15天, 末次给药前禁食12小时, 末次给药后1小时复测体重和血糖, 结果见表1。
t检验;与正常组比较#P<0.05, ##P<0.01;与模型组比较*P<0.05, **P<0.01
2.2 对四氧嘧啶致糖尿病小鼠耐力的影响
小鼠造模、分组、给药同2.1。末次药后1小时进行游泳试验。每鼠在尾部1/4处系一4g重物, 放入水深25cm、水温20℃的缸中, 按动秒表记时, 当小鼠头部沉入水中超过10秒不能浮出水面时, 停止记时, 记录小鼠游泳时间。
t检验;与正常组比较#P<0.05, ##P<0.01;与模型组比较*P<0.05, **P<0.01 (下同)
2.3 对四氧嘧啶致糖尿病小鼠免疫器官脏体系数的影响
小鼠造模、分组、给药同2.1。末次药后1小时将动物处死,
分离胸腺和脾脏, 称重, 计算脏体系数。结果见表3。
4 结论
本研究表明, 丹蛭降糖胶囊能够降低实验性糖尿病小鼠空腹血糖水平, 表明丹蛭降糖胶囊可能减弱四氧嘧啶对胰岛β细胞的损伤或改善受损伤的β细胞的功能。同时丹蛭降糖胶囊能改善实验性糖尿病小鼠的体重降低, 增强小鼠耐力, 对糖尿病小鼠免疫器官胸腺和脾脏脏体系数也有升高作用。具有益气养阴、活血化瘀作用的中药丹蛭降糖胶囊可有效地治疗糖尿病。
参考文献
[1]王北婴, 李仪奎.中药新药研制开发技术与方法.上海:上海科学技术出版社, 2001:595.
丹蛭胶囊 篇2
1 资料与方法
1.1 一般资料
经内科确诊为2型糖尿病, 眼科散瞳眼底检查和眼底血管荧光造影检查证实有糖尿病性视网膜病变者78例89只眼。患者年龄31～68岁, 平均53岁。病人给予随机分组, 中药联合激光为治疗组, 共40例48只眼, 单独激光为对照组, 共38例41只眼。
1.2 治疗方法
治疗组:加服丹蛭胶囊, 为安徽中医学院第一附属医院研制, 国家发明专利 (ZL 2003 1 0112845.1) , 口服, 1次3～5粒, 1d3次, 3个月为1个疗程, 或遵医嘱, 后期减量。对照组:口服维生素C、ATP等, 2周为1个疗程, 通常治疗4个疗程。
1.3 激光治疗
散瞳至6～7mm, 0.25%地卡因表面麻醉, 根据眼底荧光素造影的不同表现分别采用视网膜光凝、黄斑周围格栅样光凝及限局性光凝。视网膜无灌注区和 (或) 新生血管者, 采用视网膜光凝。一般分3～4次完成。
我院采用德国Zeiss公司生产的532倍频半导体激光, 激光参数:功率100～350μW, 光斑直径200～500μm, 曝光时间0.1～0.3s, 激光光凝反应Ⅱ～Ⅲ级, 光凝术后1～5周随访, 3～4个月复查FFA, 根据造影情况补打视网膜光凝, 并随访1～6次。
1.4 疗效标准
根据视力与眼底出血、渗出、吸收等情况综合评判, 视力采用国际视力表查远视力。显效:视力恢复至正常 (1.0) 或原有水平, 出血灶、渗出全部或大部分吸收, 微血管瘤数明显减少或消失。有效 (眼病变减轻) :视力提高3行以上, 出血灶、渗出有所吸收, 微血管瘤数减少。进步 (眼底情况稳定) :视力提高到2行以上 (含2行) , 出血灶、渗出略有吸收, 无新鲜出血。无效 (眼底病变加重) :视力下降, 眼底出现新的病灶, 病情加重。
2 结果
本组78例89只眼治疗后随访最短6个月, 最长1年, 患者视力前后比较, 视力提高总有效率治疗组40例中有效39例 (97.5%) , 无效1例 (2.5%) 。对照38例中, 有效30例 (79%) , 无效8例 (21%) 。治疗组和对照组比较差异显著 (P<0.05) , 见表1。
患者前后疗效比较, 眼底病变加重者治疗组有2只眼占4.6%, 对照组有9只眼占22.2%, 2组经统计学处理差异有显著性意义 (P<0.001) , 见表2。
3 讨论
目前治疗糖尿病视网膜病变包括多方面, 激光光凝是最有效的治疗方法之一, 主要是利用激光的光凝固效应, 破坏视网膜光感受器复合体, 降低视网膜氧耗量, 改善视网膜的缺血状态[1]。不仅可减少血管增生因子的产生, 还可促进视网膜色素上皮新生血管抑制因子, 从而防止新生血管的形成, 促进已形成的新生血管消退;激光光凝同时破坏视网膜外屏障, 有效改善视网膜循环, 减轻黄斑区局部水肿, 另外, 激光光凝可直接封闭扩张的毛细血管及微血管瘤, 降低血管通透性, 提高视网膜血管的氧分压, 减少对黄斑部的毛细血管灌注区, 从而减少黄斑区毛细血管渗漏[2], 还可更新视网膜色素上皮细胞, 改善视网膜内屏障功能。
中医理论认为, 本病属消渴症, 在中医眼科根据症状不同归属于视瞻昏渺或暴盲。其基本病理是阴津亏耗, 燥热内盛, 两者互为因果, 燥热灼伤目中血络, 表现为视网膜血管的一系列改变[3], 血瘀是消渴目疾的主要病机, 从而发生微血管瘤和视网膜循环无灌注区形成等。
丹蛭胶囊中成药, 为安徽中医学院第一附属医院研制, 国家发明专利 (ZL 2003 1 0112845.1) 。功能主治:益气养阴, 活血化瘀。用于气阴两虚、血瘀引起的口渴多饮, 多尿易饥, 2型糖尿病;处方药物的组成:正常处方量的太子参、地黄、牡丹皮、泽泻、菟丝子、水蛭等中草药为原料配制而成。太子参、地黄、牡丹皮、具有活血化瘀、益气养阴调节血糖之功效, 可改善视网膜微循环, 降低毛细血管通透性、促进组织修复与再生功能, 从而促进了视网膜出血、水肿和渗出的吸收, 在增加局部血流量的同时, 还有显著的免疫功能、双向调节作用;泽泻、菟丝子滋阴降火;生地凉血, 健脾利水, 水蛭破血活血[4]。以上药合用, 能降低血糖、血脂, 扩张血管, 改善微循环, 提高组织局部营养, 促进瘀血吸收, 防止新生血管形成, 从而有效治疗糖尿病视网膜病变。
现代研究表明丹蛭胶囊还具有一定的降低血糖、降脂作用[5], 使受体环节的胰岛素抵抗减轻, 可以增强胰岛素的生物学效应从而改善了胰岛素抵抗, 改善2型糖尿病胰岛素抵抗和糖尿病的症状, 预防和治疗糖尿病及其并发症。并可对糖尿病患者由于血流速度缓慢所致的视网膜缺血、缺氧所引起的一系列改变进行活血化瘀、通经活络, 改善病变部位的微循环, 从根本上改善糖尿病性视网膜病变, 加快视网膜出血、水肿及瘀血吸收。丹蛭胶囊还具有抗自由基损伤和抑制非酶糖基化作用乙应用中药可减轻视网膜的光损伤和改善视网膜血循环, 提高组织缺氧耐力和改善高糖、高脂、血液高粘状态。
激光光凝治疗眼底病是采取一个病理过程替代另一个病理过程, 它是眼组织中各种色素吸收不同波长的光, 光被色素组织吸收后, 光能转化为热能, 于瞬间散发出高热, 使靶组织凝固, 破坏, 结瘢, 其目的是破坏视网膜的缺血、缺氧区, 改善视网膜内屏障的功能[6]。激光光凝只是治标, 不能治本。若光凝后, 血糖控制不理想, 还会产生新的病变, 我治疗的这78例患者中, 就有1例2只眼因血糖控制不佳而导致视力进一步下降, 这与患者对糖尿病的认识程度有关。故对糖尿病视网膜病变的患者来说, 需要进行视网膜光凝时即行激光治疗, 同时还要控制糖尿病使血糖达标。
4 结语
激光联合口服我院生产的丹蛭胶囊治疗糖尿病视网膜病变, 有协同作用, 总的有效率比单独用激光治疗效果好, 视网膜新生血管消退率高, 疗效确切, 无不良反应, 是一种安全有效的治疗方法。
摘要：目的 观察丹蛭胶囊联合激光治疗糖尿病视网膜病变疗效。方法 本组病例在内科控制血糖、降低血压及血脂基础上, 根据眼底荧光造影 (FFA) , 选取视网膜病变患者78例, 随机分成2组, 治疗组40例48眼, 对照组38例41眼, 2组均行视网膜光凝治疗, 治疗组同时加服我院研制生产的丹蛭胶囊。观察2组患者视力变化及疗效情况。随访观察时间1～6个月, 最长1年。结果 治疗组总有效率97.5%;对照组总有效率79%, 统计学处理P<0.001, 差异显著。结论 丹蛭胶囊联合激光对治疗糖尿病视网膜病变是有效的。
关键词：丹蛭胶囊,激光,糖尿病性视网膜病变
参考文献
[1]王康孙.眼科激光新技术[M].北京:人民军医出版社, 2002:22.
[2]Agardh E, Agardh CD, Torfvit O, et a1.J Intern Med, 1994, 235:5.
[3]李迎舒.中西医结合治疗糖尿病性视网膜病变[J].中西医结合眼科杂志, 1998, 16 (3) :137.
[4]李传课, 曹建辉.中医眼科学[M].北京:人民卫生出版社, 1999:641.
[5]方朝晖, 张念志, 韩明向.益气养阴活血法对2型糖尿病患者免疫功能的影响[J].中国中医药信息杂志, 2001, 8 (11) :47～78.
丹蛭胶囊 篇3
中医药对2型糖尿病的治疗作用现一般认为是可以防治其慢性并发症的发生与发展而非微弱的单一降糖,采用中医药方法早期干预2型糖尿病患者内皮细胞受损应当是具备了理论基础的可能性和临床价值。本文通过观察纯中药制剂丹蛭降糖胶囊对2型糖尿病血管内皮细胞粘附状态及炎症反应导致血管损伤的影响,初步探讨其延缓血管并发症的作用机制。
1 对象与方法
1.1 研究对象
观察患者共46例,均为安徽中医学院第一附属医院十五病区住院和门诊的2型糖尿病患者,随机分成治疗组(丹蛭降糖胶囊+西药常规治疗)和对照组(西药常规治疗),其中治疗组24例,男14例,女10例,年龄(51.6±7.0)岁;对照组22例,男13例,女9例,年龄(52.3±7.0)岁。2组患者一般情况无差异,具有可比性。
1.2 使用药品
丹蛭降糖胶囊:安徽中医学院第一附属医院药物制剂中心提供(批号为20051215),主要成分为太子参、生地、丹皮、水蛭、菟丝子、泽泻等;达美康(格列奇特)每片80 mg(法国施维雅药厂);拜糖苹(阿卡波糖)每片50 mg(德国拜耳公司)。
1.3 方法
对照组22例患者常规使用达美康,每次1片,2次/d;拜糖苹,每次1片,3次/d。治疗组24例患者在常规治疗基础上加用丹蛭降糖胶囊,每次5粒(含生药有效成分1.8 g),3次/d。所有患者分别于用药前和用药20周后抽清晨空腹静脉血,高速离心分离血清,-20 ℃冰箱保存备用。
1.4 血糖、血清胰岛素和胰岛素抵抗指数的测定
葡萄糖氧化酶法测血清葡萄糖,磁性分离酶联免疫法测血清胰岛素,根据修正公式算胰岛素抵抗指数: IRI=(FINS×FPG)/(PG2 h+PG1 h-7.0)[1]。
1.5 可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)和超敏c反应蛋白(hs-CRP)的测定
采用酶联免疫吸附法,sVCAM-1、 hs-CRP试剂盒由中国军事医学科学院提供,操作过程严格按说明书进行。
1.6 统计学方法
所有数据以均数±标准差
2 结果
2.1 丹蛭降糖胶囊对患者血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数的影响
对照组治疗20周后,胰岛素抵抗指数等指标与治疗前相比,无显著变化。而治疗组治疗后与治疗前及对照组治疗后相比空腹及餐后2 h血糖改善但P>0.05,无统计学意义;血清胰岛素、胰岛素抵抗指数均明显改善(P<0.05,见表1)。
注:与同组治疗前及对照组治疗后比较,*P<0.05,与治疗前及对照组治疗后相比**P>0.05
2.2 丹蛭降糖胶囊对患者血清可溶性血管细胞粘附分子-1和超敏c反应蛋白水平的影响
治疗组治疗后血管细胞粘附分子-1和超敏C反应蛋白水平含量下降,分别为(1132.5±58.7)μg/L和(1.37±1.21)mg/L,与本组治疗前(1242.43±63.2)μg/L和(2.35±1.33)mg/L相比及与对照组治疗后(1215.87±48.46)μg/L和(2.19±1.34)mg/L比较,P均<0.05,差异有统计学意义。见表2。
注:与治疗组治疗前及对照组治疗后比较,*P<0.05
3 讨论
近年来大量研究结果表明,VEC功能异常贯穿T2DM发病始终。T2DM与心血管疾病都存在于同一种由基因和环境决定的先天体质中,因而将T2DM与心血管疾病相联系起来的就是VEC功能障碍机制。
研究表明T2DM和AS具有共同的病因基础-慢性炎症和VEC功能异常。前瞻性研究证实,hs-CRP不仅可用来评估未来6～10年出现心血管疾病发作的危险性,而且还是首次发生心血管疾病危险性的非常有效的预测指标[2]。存在于血管壁的hs-CRP可通过单核细胞趋化蛋白的介导,引起可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)的表达。hs-CRP可通过促进单核细胞产生组织因子而促进血栓的形成,直接参与动脉粥样硬化的发生[3]。有研究发现2型糖尿病患者的胰岛素抵抗程度与血清超敏C反应蛋白水平呈正相关,超敏C反应蛋白是粥样硬化性血管疾病的独立危险因子[4] 。
本研究中2型糖尿病患者血清hs-CRP明显高于健康对照组,表明糖尿病发生发展过程也是一个血管内皮慢性炎症的过程,应用丹蛭降糖胶囊合并西药治疗后hs-CRP水平得到改善(P<0.05),从而减轻了炎症对内皮细胞的损害。这可能与方中太子参益气养阴,能扩张冠状动脉、改善心肌代谢,水蛭能阻止凝血酶对纤维蛋白原的作用,阻碍血液凝固和生地清热、解毒、抗炎等有关。现代研究也表明,本方中的菟丝子100%煎剂在体外对金黄色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌和伤寒杆菌有抑制作用,从而在对抗炎症因子的损伤方面起到一定的作用。sVCAM-1在血管病变中的作用是近年来研究的热点,其异常表达可介导血管内皮细胞与单核细胞粘附,引起内皮损伤、血管通透性增加、血小板聚集增多以及血栓形成等,导致微血管闭塞和大动脉粥样硬化[5]。有研究结果证实,在早期动脉粥样硬化形成过程中血管内皮细胞粘附分子的表达和与白细胞相互粘附具有重要的病理生理学意义[6]。
2型糖尿病及并发症患者在长期高血糖作用下非酶糖化作用增强,糖基化终产物增加以及二酰基甘油激活蛋白激酶C、β,使众多细胞因子释放[7],从而导致sVCAM-1表达增强。因此,sVCAM-1在加速糖尿病大血管病变和微血管病变方面起潜在作用[8],它介导了血管内皮损伤的病理过程,可作为评估2型糖尿病血管并发症的一个重要参数。
本研究发现DM患者的血清sVCAM-1明显高于健康对照组,提示DM患者的炎症反应及冠脉病变程度比健康人增加,与文献一致。本实验中丹蛭降糖胶囊合并西药降低sVCAM-1表达的作用表明,其在改善2型糖尿病患者血糖代谢、干预炎症反应的同时还有助于延缓血管并发症的发生发展。作用机制有可能在于方中水蛭、丹皮活血化瘀,能抑制白细胞粘附所引起的血管堵塞,血流停滞,从而减轻局部血管和微血管内皮损伤,改善临床症状[9]。
本研究表明,丹蛭降糖胶囊除了具有辅助降糖的作用外,还能降低患者的hs-CRP水平和sVCAM-1的表达,改善机体炎症损伤。以往的研究表明,具有益气养阴活血功效的丹蛭降糖胶囊能改善糖尿病机体的胰岛素抵抗(IR),保护胰岛B细胞功能[10,11],这也是它干预内皮细胞粘附、保护内皮功能的可能机制。
中医药在治疗2型糖尿病方面不良反应小,可以防止或延缓其并发症。传统中医辨证施治,多途径、多靶点综合治病、调节机体整体功能状态的复方治病模式,越来越显示出独特的光彩。
摘要：目的观察具有益气养阴活血功效的纯中药制剂丹蛭降糖胶囊(DJC)对2型糖尿病(T2DM)患者血管内皮粘附状态及炎症损伤的影响,探讨其延缓2型糖尿病血管并发症的机理。方法将46例2型糖尿病气虚阴亏血瘀证患者随机分为治疗组(n=24)和对照组(n=22)(2组基线水平无显著性差异),2组均常规给予西药口服降糖治疗;治疗组在此基础上,加用丹蛭降糖胶囊,2组疗程均为20周。治疗前后分别检测空腹及餐后2h血糖(PG)、血清胰岛素(INS)和胰岛素抵抗指数(IR)、可溶性血管细胞粘附分子-1(sVCAM-1)、血清超敏c反应蛋白(hs-CRP)水平。结果治疗组在应用丹蛭降糖胶囊20周后,INS、IR、sVCAM-1含量及hs-CRP水平均明显改善(P<0·05)。结论丹蛭降糖胶囊能干预2型糖尿病患者血管内皮粘附状态及炎症反应,改善内皮损伤,对于延缓2型糖尿病血管并发症有积极的意义。
丹蛭胶囊 篇4
丹蛭降糖胶囊是安徽中医药大学第一附属医院药物制剂中心生产的院内复方制剂。本文作者先前研究发现它可提高肥胖模型大鼠骨骼肌葡萄糖转运蛋白4的表达, 发挥胰岛素增敏效应, 具体机制尚不完全清楚[6]。本实验首先建立营养性肥胖SD大鼠模型, 观察大鼠骨骼肌组织中三酰甘油 (TG) 沉积情况, 并应用丹蛭降糖胶囊进行干预, 观察其对骨骼肌TG沉积以及骨骼肌ERs相关因子IRE1α、磷酸化IRE1α (p-IRE1α) 、JNK、磷酸化JNK (p-JNK) 表达的影响。
1 材料与方法
1.1 肥胖大鼠模型建立、分组及给药
清洁级4周龄雄性SD大鼠40只, 体重 (150±30) g, 购自安立实验动物公司。造模前先用基础饲料适应性喂养1周。明暗周期12/12 h, 自由摄食、饮水。随机挑选10只大鼠作为普通饮食对照组 (NC组) , 给予普通饲料喂养, 至实验结束。其余30只给予高脂饲料喂养, 作为高脂饮食组 (HD组) 。12周后20只符合肥胖模型的大鼠则按体重再随机分为高脂对照组 (HF组) 、高脂+丹蛭降糖胶囊组 (FD组) 各10只, 继续高脂饮食, 同时每组分别给予溶剂 (0.9%生理盐水) 2 m L/ (kg·d) 、丹蛭降糖胶囊470 mg/ (kg·d) 灌胃。NC组继续普通饲料喂养, 给予蒸馏水灌胃。治疗持续4周。
1.2 实验方法
1.2.1 标本收集
16周时3组大鼠禁食过夜8 h后, 麻醉 (10%水合氯醛) 状态下准确称取体重, 分离采自下腔静脉的血样, 离心后获得的血清置-80℃冰箱保存。迅速分离附睾及肾周脂肪, 称取内脏脂肪重量。随后分离大鼠股四头肌组织, 置于液氮罐中保存以备提取TG。
1.2.2 血液生化指标检测
应用强生稳步倍加型血糖仪检测空腹血糖 (FBG) 。应用全自动生化分析仪检测TG、总胆固醇 (TC) 。放射免疫法检测血清空腹胰岛素 (FINS) 。铜显色法测定血清游离脂肪酸 (FFA) 。
1.2.3 相关指数计算
胰岛素抵抗指数 (HOMA-IR) 以及腹脂指数的计算方法参见作者先前的文献报道[7]。
1.2.4骨骼肌中TG (IMTG) 含量的测定
取100 mg大鼠股四头肌组织, 剪碎, 制备骨骼肌匀浆[7], 离心半径为15 cm, 6000 r/min低温离心10 min (Eppendorf 5804) , 应用全自动生化分析仪测定骨骼肌匀浆中IMTG含量。
1.2.5 Western blot法检测骨骼肌组织中IRE1α、p-IRE1α、JNK、p-JNK蛋白表达:
制备组织裂解液, 冰上裂解股四头肌组织, 4℃, 12 000 r/min离心10 min, 取上清, BCA法测蛋白含量。提取蛋白经100℃5 min变性后上样, 电泳, 转膜, 封闭。加入IRE1α (1∶1000) 、p-IRE1α (1∶800) 、JNK (1∶700) 、p-JNK (1∶2000) 蛋白一抗, 孵育过夜。第2天加入二抗孵育2 h, ECL显影, 曝光, 扫描。凝胶图象处理系统分析目标条带灰度值, 以磷酸甘油醛脱氢酶灰度值作为校正, 计算目的蛋白IRE1α、p-IRE1α、JNK、p-JNK的相对表达量。
1.3 统计学方法
采用SPSS 13.0软件进行统计学分析, 计量资料数据用均数±标准差 (±s) 表示。组间比较采用单因素方差分析 (ANOVA) , 相关性分析采用Pearson检验。以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组大鼠体重、摄食量、生化指标、腹脂指数和HOMA-IR的比较
HF组的体重、FBG、FINS、TG、TC、腹脂指数、HOMA-IR、FFA均较NC组明显升高 (P<0.05或P<0.01) , 摄食量则较NC组明显降低 (P<0.05) ;虽然FD组体重、摄食量、FBG、FINS、TG、TC、腹脂指数、HOMA-IR、FFA均较HF组有所降低, 但差异无统计学意义 (P>0.05) 。见表1。
2.2 各组大鼠IMTG含量的比较
HF组IMTG含量显著高于NC组, 差异有高度统计学意义 (P=0.005) ;与HF组比较, FD组大鼠IMTG明显下降, 差异有统计学意义 (P=0.024) 。见表1。
注:与NC组比较, *P<0.05, **P<0.01;与HF组比较, ▲P<0.05;FBG:空腹血糖;FINS:空腹胰岛素;TG:三酰甘油;TC:总胆固醇;HOMA-IR:胰岛素抵抗指数;FFA:游离脂肪酸;IMTG:骨骼肌中TG
2.3 各组大鼠骨骼肌IRE1α、p-IRE1α、JNK、p-JNK蛋白表达的比较
各组大鼠骨骼肌组织JNK及IRE1α的表达比较差异无统计学意义 (P>0.05) ;与NC组比较, HF组大鼠骨骼肌组织p-IRE1α/IRE1α以及p-JNK/JNK均明显升高, 差异有统计学意义 (P<0.05) ;与HF组比较, FD组肥胖大鼠骨骼肌组织p-IRE1α/IRE1α以及p-JNK/JNK均明显降低, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。见表2、图1。
2.4 骨骼肌内TG含量与HOMA-IR、p-IRE1α/IRE1α以及p-JNK/JNK相关性分析
相关分析发现, 大鼠IMTG与HOMA-IR、p-IRE1α/IRE1α以及p-JNK/JNK均呈正相关 (r=0.63、0.66、0.57, 均P<0.01) 。
注:与HF组比较, ▲P<0.05;IRE1α:激酶肌醇需求激酶1α;p-IRE1α:磷酸化IRE1α;JNK:c-jun氨基末端激酶;p-JNK:磷酸化JNK;与NC组比较, *P<0.05
IRE1α:激酶肌醇需求激酶1α;p-IRE1α:磷酸化IRE11α;JNK:c-jun氨基末端激酶;p-JNK:磷酸化JNK
3 讨论
在研究人类营养性肥胖发病机制过程中常采用高脂诱导的SD肥胖大鼠模型。本研究发现, 该肥胖模型大鼠的内脏脂肪堆积、糖脂代谢紊乱明显, 胰岛素抵抗程度严重, 与过去的报道一致[8,9]。
内质网是真核细胞中蛋白质合成、折叠、成熟与分泌的重要细胞器。高脂饮食、缺氧、饥饿、氧化应激、钙离子稳态失衡、药物、自由基侵袭等多种原因可导致ERs的发生。目前研究认为ERs在IR的发生、发展过程中扮演关键角色[3,4]。本研究显示, 高脂饮食组大鼠骨骼肌中TG的含量明显增高, TG含量与反映胰岛素抵抗程度的指标HOMA-IR以及ERs状态的p-IRE1α/IRE1α、p-JNK/JNK均呈正相关。表明在高脂环境诱导的肥胖大鼠中, 骨骼肌中脂质沉积增加可能与IR以及ERs的发生存在内在联系。
IRE1是介导ERs信号转导的跨膜蛋白之一, IRE1α是IRE1的主要结构, 在许多组织中皆有表达, IRE1α经自身磷酸化被激活, 形成p-IRE1α。当ERs长期得不到缓解时, 会启动细胞凋亡[10]。IRE1α可能是诱导细胞凋亡过程中关键的信号分子, 可通过其激酶的作用, 结合肿瘤坏死因子受体相关因子2 (TNF receptor associated factor 2, TRAF2) , 并与凋亡信号调节激酶 (TNF-dependent apoptosis-signaling kinase 1, ASK1) 共同形成TRAF2-ASK1-JNK复合体, 激活JNK通路[11]。JNK是一种丝裂原活化蛋白激酶, 一方面可以调节凋亡相关基因Bcl-2, 甚至直接激活Bcl家族中Bax基因促进凋亡[12], 另一方面, JNK可通过调节胰岛素受体底物1 (IRS1) 的磷酸化调控IR的发生[13]。为消除总IRE1α蛋白及总JNK蛋白变化对观察结果的干扰, 本研究采用活化后的蛋白指标与相应总蛋白指标比值, 即p-IRE1α/IRE1α和p-JNK/JNK来反映IRE1α-JNK信号通路蛋白表达的变化。结果发现, 与NC组比较, 尽管HF组大鼠骨骼肌组织中IRE1α及JNK的蛋白表达无显著改变, 但其p-IRE1α/IRE1α以及p-JNK/JNK均明显升高, 表明HF组大鼠骨骼肌组织存在明显ERs。
丹蛭降糖胶囊是由太子参、丹皮、生地黄、泽泻、菟丝子、水蛭组成的复方制剂。研究表明, 丹蛭降糖胶囊可提高肥胖大鼠网膜脂肪组织中PPAR-γ以及骨骼肌中葡萄糖转运体4 m RNA表达, 具有改善IR的功效[6,14,15,16]。然而, 在本组资料中, 笔者未发现丹蛭降糖胶囊对肥胖大鼠中反映IR状态指标 (FINS、HOMA-IR) 的显著改善效应。由于FINS以及HOMA-IR难以准确反映大鼠IR状态, 而高胰岛素正葡萄糖钳夹技术则为测定IR的金标准, 因此上述结果有待进一步研究以明确。同时, 本研究还发现, 与HF组大鼠比较, 应用丹蛭降糖胶囊干预的FD组大鼠中, 尽管血清糖脂生化指标无显著改变, 但其骨骼肌内TG含量却显著降低。已有研究发现, 丹蛭降糖胶囊可下调肥胖大鼠骨骼肌细胞脂肪酸转位酶 (FAT/CD36) 的表达, 降低骨骼肌中TG的含量, 从而改善骨骼肌脂质沉积和IR[7]。此外, 尽管与HF组大鼠比较, FD组大鼠骨骼肌组织IRE1α、JNK蛋白表达无明显差异, 但p-IRE1α/IRE1α以及p-JNK/JNK却均显著降低。上述研究发现提示丹蛭降糖胶囊可能通过改善肥胖大鼠骨骼肌脂质沉积, 调节IRE1α-JNK信号通路, 缓解ERs, 从而改善骨骼肌IR。本研究结果将为揭示丹蛭降糖胶囊改善骨骼肌IR提供了一个新的机制认识。