甲酸的固定作用

甲酸的固定作用（精选4篇）

甲酸的固定作用 篇1

锈赤扁谷盗(Cryptolestes ferrugineus)隶属鞘翅目(Coleoptera)扁谷盗科(Laemophloeidae),是我国主要储粮害虫之一[1],近些年在我国大部分地区尤其是南方的储备库中发现锈赤扁谷盗大量发生,且都反映其治理难度相当大。

甲酸乙酯(Et F)在澳大利亚已使用多年[2],除被用作储粮熏蒸剂外还被登记作为食品添加剂,在一些食品中自然存在的浓度为0.05~1.00mg/m3。它在常温下是无色液体,具有杀虫效果快,降解快,不会在储藏物中残留[3]等特点。

为了寻求锈赤扁谷盗的有效治理方法,本文测定了Et F对锈赤扁谷盗的杀虫效果,发现Et F的杀虫效果随温度的升高而降低,选用L9(34)正交表设计方案研究Et F与PH3、Et F和CO2混合熏蒸处理3个品系锈赤扁谷盗。研究结果表明:Et F对PH3和CO2有明显的增效作用,通过试验得到了每个试验条件下的最佳熏蒸方案。

1 试验材料和方法

1.1 试虫及培养

供试锈赤扁谷盗分别采自福建厦门、湖北麻城和福建莆田等地的粮库,分别记为XMCF、MCCF和PTCF,并在试验室培养了数代。

选取大小、健康程度和日龄一致的成虫约200头置于装有约80g饲料的饲养瓶中,用透气良好的细布封口。试虫均以燕麦片和全麦粉(洗净、高温消毒、磨粉)加酵母粉(6∶3∶1)混合磨碎为饲料,在35℃、75%RH的条件下培养。

1.2 试验试剂

甲酸乙酯,天津科密鸥化学试剂有限公司;聚四氟乙烯溶液,上海三爱新材料股份有限公司;磷化锌粉剂,山东济宁化工试验厂。

1.3 试验用具

101-E型电热鼓风恒温干燥箱,北京永光明医疗仪器厂;HH-B11-420型隔水式电热恒温培养箱、PH3检测报警仪,上海精宏试验设备有限公司生产;CLJB-01型磁力搅拌器,湖北省科学器材公司;50μL微量进样器等。

1.4 试验方法

1.4.1 试虫PH3抗性测试

用快速击倒法估算该品系锈赤扁谷盗的抗性水平,再用FAO法测定害虫抗性,数据使用DPS软件处理。

1.4.2 Et F对试虫作用的测定

参考FAO测定害虫对PH3抗性的方法。

1.4.3 混合熏蒸

取羽化7~14d健康、活泼的试虫装入虫笼,每个虫笼装试虫50头,然后用绢纱封住虫笼。将备好的试虫放入熏蒸室,用凡士林密封熏蒸室,稳定12h,根据所设定浓度计算PH3、CO2和Et F的量注入熏蒸室,为使注入熏蒸室的气体快速均匀分布,将熏蒸室放到磁力搅拌器上搅拌3~5min。每组处理设3次重复,并设空白对照。

2 数据与分析

2.1 锈赤扁谷盗磷化氢抗性测定

采用快速击倒法对试虫抗药性水平进行初步估算,结果见表1。

由表1可知:锈赤扁谷盗各品系的KT50值从小到大依次是XMCF为1 866min、MCCF为3 112min和PTCF为3 226min,3个品系的试虫都表现出了非常高的抗药性,使用磷化氢防治害虫的难度较大。

使用FAO推荐方法对3个品系试虫抗药性进行测定,试验数据用DPS软件进行处理,可以得到各品系锈赤扁谷盗成虫的LC50、LC99和回归方程及相关系数,而根据FAO的对敏感害虫的鉴别剂量可知这3种害虫都不是敏感害虫,本次试验选取的敏感品系使用FAO规定的敏感锈赤扁谷盗的鉴别剂量作为参照,进而计算出抗性倍数Rf值,结果见表2,Rf计算公式为:

由表2可知:FAO推荐方法测得锈赤扁谷盗的LC50值,厦门品系为3.314 2 g/L、麻城品系为3.538 5 mg/L和莆田品系为4.249 6 mg/L。以敏感品系为基准,计算出各品系对锈赤扁谷盗的抗性系数,这3个品系都表现出了较强的磷化氢抗性,抗性水平由低到高分别为厦门品系、麻城品系和莆田品系,其抗性倍数分别为301、322和386,与快速击倒试验测定的结果有一致的趋势。

2.2 Et F对锈赤扁谷盗的毒力测定

试验前进行预试验,摸索合理的Etf浓度,每个品系试虫选取孵化14d,健康活泼的幼虫30头,每10头为1组。按等比数列设定7个浓度,每个浓度下放入10头试虫,注气后密闭处理20h,散气后在30℃、70%RH条件下培养14d后检查死亡率,经数次预试验后摸索出较为合理的浓度。参考FAO推荐的熏蒸剂毒力测定方法,测定Et F对3个品系锈赤扁谷盗的毒力,结果见表3。

由表3可知:对于同一品系的试虫,LC50随着温度的升高也随之增大,试虫表现出对甲酸乙酯忍耐力有所增强,这与Et F随着温度的升高分解加速有关。在使用Et F处理锈赤扁谷盗时,LC99/LC50约为2,而由表2可知,使用磷化氢处理20h时LC99/LC50约为30,这说明锈赤扁谷盗对甲酸乙酯的敏感性较强,适当增加药剂的浓度就可以大幅提高熏蒸效果。

在同一温度条件下,不同品系试虫Et F的LC50由大到小的顺序时是PTCF、MCCF和XMCF,这与这3个锈赤扁谷盗品系的磷化氢抗性测定结果相一致,这反映了锈赤扁谷盗对磷化氢和甲酸乙酯可能有交互抗性。

2.3 混合熏蒸对锈赤扁谷盗治理效果的测定

储藏过程中单独使用PH3防治锈赤扁谷盗很难达到理想的效果,但采用Et F、CO2、PH3混合熏蒸,能达到理想的防治效果,此处采用L9(34)正交试验法,具体方案见表4、表5和表6。

表7为PH3和CO2混合熏蒸方差分析表,由表7可知:3个因素对3个品系的试虫死亡率的影响顺序为PH3浓度>CO2浓度>温度,其中XMCF试虫和MCCF试虫因素A的F值超过超过F0.05(2,2),为显著因素,PTCF的F值超过F0.1(2,2),接近F0.05(2,2),CO2浓度、温度对3个品系试虫熏蒸效果的影响均不显著,结合对极差分析结果并综合考虑经济效益因素,可降低CO2的浓度在熏蒸时可采用PH3浓度为576m L/m3,CO2浓度为2%,温度为35℃时进行熏蒸。

表8为PH3和Et F混合熏蒸方差分析表,3个因素对3个品系的试虫死亡率的影响顺序为PH3浓度>Et F浓度>温度,结合方差分析,因素B取水平3时较之取水平2时杀虫效果增幅较大,并且当PH3浓度为576m L m3、Et F浓度为12.1μL/L时,3个品系的害虫在经过48h的处理后死亡率接近100%,在粮食仓储企业实际熏蒸时可以参考这个浓度,并延长处理时间可取得良好效果。对比表7,采用PH3分别与CO2和Et F混合熏蒸,同样条件下PH3与Et F混合熏蒸处理3个品系试虫的死亡率高于采用PH3与CO2混合熏蒸的结果,可见Et F对PH3的增效强于CO2对PH3的增效作用。

表9为Et F和CO2混合熏蒸方差分析表,由表9可知:3个因素对3种试虫死亡率的影响顺序为Et F浓度>CO2浓度>温度,结合极差分析,Et F和CO2混合熏蒸效果最佳的方案组合为:Et F浓度12.1μL/L、CO2浓度8%和温度25℃。

根据表7~表9可知:PH3浓度、CO2浓度、Et F浓度和温度对锈赤扁谷盗对熏蒸结果影响的顺序为PH3浓度>Et F浓度>CO2浓度>温度。

3 结果与讨论

目前我国用得最多的储粮熏蒸剂是磷化氢,具有毒力高和穿透作用强等特点,是一种性能优良的粮食熏蒸剂[4],而在长期的使用过程中,由于使用方法不科学和仓房气密性差等原因,致使害虫对磷化氢的抗性越来越严重,尤其是锈赤扁谷盗等害虫对磷化氢的抗性在逐渐加强,因此,甲酸乙酯作为一种环境友好型杀虫剂又重新引起了人们的重视。但甲酸乙酯作为熏蒸剂的应用也有一些需要问题亟待改进,如其降解快且易于被粮食吸附,并且极易燃烧或爆炸,不易单独作为粮食熏蒸剂使用。

试验表明:甲酸乙酯、二氧化碳和磷化氢混合熏蒸处理磷化氢抗性锈赤扁谷盗,可以将磷化氢浓度维持在较低水平情况下,辅以甲酸乙酯或二氧化碳长时间混合密闭熏蒸,可以对锈赤扁谷盗起到理想的防治效果。

参考文献

[1]Howe R.W.,Lefkovitch L.P..The distribution of the storage species of Cryptolestes(Col.,Cucujidae)[J].Bull.Entomol.Res.1957,48:795-809.

[2]Plarre R.,Reichmuth C..Effects of carbonyl sulfide(COS)on Sitophilus granarius,Fusarium avenaceum,and Fusarium culmo-rum,as with regards to possible corrosion on copper[J].Nachricht-enblatt des Deutschen Pflanzen schutzdienstes,1996,48(5):105-112,129.

[3]Allen S.E.,Desmarchelier J.M..Ethyl formate as a fast fumigant for disinfestations of sampling equipment at grain export terminals[C]//Australian Postharvest Technical Conference,Adelaide,2000:1-4.

[4]曹阳,赵英杰,王殿轩.谷蠹和米象的PH3抗性品系对3种粮食保护剂的交互抗性研究[J].粮食储藏,2000(4):13-17.

甲酸的固定作用 篇2

维甲酸及其化合物是较早运用于临床的肿瘤诱导剂, 近年来研究发现, 维甲酸可阻滞某些实体肿瘤细胞生长, 诱导其分化[1,2,3]。维甲酸具有多种同分异构体, 包括全反式维甲酸 (al1-transretinoic acid, ATRA) 、13-顺式维甲酸 (13-cis-retinoicacid, 13-cisRA) 、9-顺式维甲酸 (9-cis-retinoicacid, 9-cis RA) , 近年来对ATRA的研究尤为注重。目前, AT-RA已成功地应用于急性早幼粒细胞白血病及其它血液系统恶性疾病[4,5], 并能诱导许多恶性肿瘤的分化并抑制增殖[6,7]。

本研究观察ATRA对人卵巢癌细胞株HO 8910干预前后细胞增殖及细胞周期的变化, 同时分析RARαmRNA的表达情况, 探讨其作用的分子机制。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 细胞株

人卵巢癌细胞株HO 8910 (人卵巢上皮性腺癌) 购自南京凯基生物科技发展有限公司。

1.1.2 主要药品和仪器

ATRA、四甲基偶氮唑蓝 (MTT) , 购自Sigma公司。ATRA以无水乙醇配制成10-2mol/L的贮存液, -20℃避光保存。EASYspin组织/细胞RNA快速提取试剂盒购自北京博迈德科技发展有限公司。BioRT逆转录扩增 (RT-PCR) 试剂盒购自杭州博日科技有限公司。

酶标仪 (深圳雷社会生命科学股份有限公司) , 流式细胞仪 (美国BD公司) , PCR仪 (ThermoElectionCorporationUSA) , 图像分析处理系统 (北京亚力恩机电研究所) 。

1.1.3 PCR引物

RARα引物参考文献[8], 另设计β-微球蛋白 (β-actin) 作为内参照, 引物由上海生工生物技术有限公司合成。RARα上游引物序列5GACACGTGT ACACCA TGTTCTTCT 3, RARα下游引物序列5CAGAGCAGC AGTTCTGAA GAG ATA 3, 产物长度为184bp;β-actin上游引物序列5TTCCAG CCT TCCTTCCTG 3, β-actin下游引物序列5CGG ACT CGTCATACTCCTGCT 3, 产物长度为313bp。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养

卵巢癌细胞HO 8910在含100U/mL青霉素、链霉素, 10%胎牛血清的RPMI-1640完全培养基中, 于37℃、湿度100%、5%CO2条件下培养, 细胞换液为 (2～3) d, 取对数生长期细胞进行实验。

1.2.2 MTT比色法测定细胞生长抑制率

取对数生长期细胞, 制备成单细胞悬液, 以 (2～3) ×104个细胞/mL的密度接种于96孔板, 每孔200μL, 待细胞贴壁后, 实验组分别加入含有不同浓度ATRA (10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L) , 对照组加等体积无水乙醇, 每组设6个平行孔 (n=6) , 孵育24h, 48h, 72h后, 每孔加入20μLMTT (5mg/mL) , 置培养箱中再孵育4h, 吸出上清液, 每孔加150μLDMSO, 轻轻震荡摇匀, 酶标仪492nm处测定吸光度值 (A492) , 计算细胞生长抑制率 (inhibitiverate, IR) , IR=[ (A对照-A实验) /A对照]×100%。

1.2.3 流式细胞术检测细胞周期

细胞准备及实验分组同1.2.2, 各组细胞培养72h后, 收集1×106个细胞, PBS洗涤, 缓慢加入3mL 70%预冷乙醇, 4℃固定过夜。细胞经PI染液染色后, 用流式细胞仪测定细胞周期的分布, ModFit软件分析, 计算细胞增殖指数 (ProliferationIndex, PI﹡) , PI﹡=[ (S+G 2/M) / (S+G 2/M+G 1) ]×100%。

1.2.4 细胞总RNA的提取

细胞准备及实验分组同1.2.2, 各组细胞经药物作用72h后, 收集5×106个细胞, PBS洗涤2次, 0.25%胰酶消化, 转至经1‰DEPC处理过的EP管中, 1 000rpm离心5min, 按照细胞RNA快速提取试剂盒说明及参考文献提取细胞总RNA, 以30μL DEPC水溶解沉淀, 所提取的细胞总RNA经1%琼脂糖凝胶电泳鉴定其完整性, -80℃保存。

1.2.5 逆转录cDNA合成

取上述细胞总RNA 3μL进行逆转录反应 (10μL体系) , 加入oligodT 0.5μL, 混匀, 70℃保温10min, 迅速置冰上。依次加入5×RT Buffer 2μL、dNTPMixture 1μL、RNaseinhibitor 0.5μL、AMV ReverseTranscriptase 0.5μL、RNasefreeH2O 2.5μL, 充分混匀。按以下条件进行逆转录反应:42℃45min, 95℃5min, 4℃5min。逆转录产物于-20℃保存。

1.2.6 PCR反应检测RARαmRNA的表达

取2.5μL逆转录产物, 依次加入10×PCR Buffer 2.5μL、dNTPMixture 0.5μL、RARα上游引物0.5μL、RARα下游引物0.5μL、β-actin上游引物0.5μL、β-actin下游引物0.5μL、TaqmixDNA Polymerase 0.5μL、ddH2O 17μL至25μL体系。按以下条件进行PCR反应:94℃预变性5min, 94℃变性30s, 55℃退火30s, 72℃延伸45s, 共30个循环, 最后再72℃延伸8min。PCR产物用2%琼脂糖凝胶电泳鉴定, 图像分析处理系统拍照并进行PCR半定量分析。

1.3 统计学分析

采用SPSS13.0软件进行分析, 实验数据用均数±标准差表示, 组间比较采用方差分析, 以P<0.05为差异有显著性标准。

2 结果

2.1 ATRA对卵巢癌细胞增殖的影响

由表1可知, 在10-5mol/L～10-7mol/L浓度范围内, ATRA对HO 8910细胞均有抑制作用, 但程度不同, 各剂量组对癌细胞的抑制率均低于27%。3个剂量组对卵巢癌细胞的抑制率随作用时间的延长和浓度的上升而增加, 且呈明显的剂量时间效应关系。各实验组与对照组之间差异有显著性 (P<0.05) 。

各实验组与对照组比较, P<0.05, 差异有显著性。

2.2 ATRA对卵巢癌细胞周期的影响

ATRA对细胞株HO 8910干预72h后, 细胞周期分布及细胞增殖指数PI﹡见表2和图1。不同浓度ATRA作用后, 各实验组HO 8910G 1期细胞分别为 (80.93±0.66) %、 (83.56±0.30) %、 (86.48±0.56) %, 较对照组 (73.43±0.88) %明显增多 (P<0.05) , 细胞增殖指数明显减少 (P<0.05) 。

各实验组与对照组比较, P<0.05, 差异有显著性。

2.3 卵巢癌细胞RARαmRNA的表达

RARαmRNA表达见图2。RT-PCR结果显示, 不同浓度ATRA对细胞株HO 8910作用72h后, 除10-7mol/L ATRA组RARαmRNA表达 (1.06±0.26) 差异无显著性外 (P>0.05) , 其它各实验组RARαmRNA表达 (1.15±0.20) 、 (1.36±0.25) , 较对照组 (0.85±0.18) 明显上调, 差异有显著性 (P<0.05) 。

3 讨论

卵巢癌是妇科常见恶性肿瘤, 其发病率在女性生殖系统恶性肿瘤中仅次于宫颈癌和宫体癌居第3位, 死亡率却居首位[9]。尽管有手术及术后化疗等多种治疗方法, 但长期化疗对骨髓抑制明显, 停药后复发率高, 其5年生存率仅为20%～30%[10], 使化疗也受到限制。因此, 寻找既能控制癌细胞增殖、诱导分化, 又能尽量减少骨髓抑制的治疗方法, 对于改善患者的生存质量有重要意义。

维甲酸受体属类固醇激素核受体超家族 (steroidnuclearreceptorsuperfamily) , 包括维甲酸受体 (retinoicacidreceptor, RAR) 和维甲酸X受体 (retinoidX receptor, RXR) [11]。ATRA通过其胞内特异受体RAR发挥生物学功能, 而RXR仅与9-cisRA结合。在细胞内, RAR和RXR可形成二聚体, 与靶基因上游启动子或增强子的维甲酸反应元件 (retinoic acidresponseelement, RARE) 结合而调控靶基因的转录, 抑制细胞DNA合成, 改变细胞周期和信号传导途径, 从而产生生物学效应。

有研究发现, 肿瘤抑制基因基因启动子中含有RARE[12], 因此ATRA能够通过RAR参与p21WAFl/CIP1基因转录的调控, 增强p21WAFl/CIP1蛋白的表达, 诱导肿瘤细胞发生G 1期细胞周期阻滞。Gartel等[13]研究证实, 在p21WAFl/CIP1基因上游的调控区内存在多种转录因子的结合序列, 如p53、RAR和E 2F等。本研究发现, 不同浓度的ATRA作用后, HO 8910G 1期细胞分别为 (80.93±0.66) %、 (83.56±0.30) %、 (86.48±0.56) %, 较对照组 (73.43±0.88) %明显增多, 卵巢癌细胞发生G 1期阻滞, 细胞增殖受到抑制。

维甲酸受体分为α, β, γ三个亚型, 主要定位在核, 均有传导信号的功能[14], 其中与卵巢上皮性癌关系最为密切的核受体主要为RARα[8]。本研究发现, RARα在卵巢癌HO 8910细胞中的基础含量极低, 用不同浓度的ATRA诱导, HO 8910细胞的RARαmRNA的表达上调, 与对照组比较差异有显著性, 这与大多数文献报道的免疫组化结果一致[15]。

本研究表明, 毒副作用较小的ATRA在一定浓度范围内, 能够抑制卵巢癌细胞HO 8910增殖, 诱导细胞周期时相改变, 上调RARαmRNA的表达, 从而抑制卵巢癌细胞增殖。随着研究的深入, ATRA在卵巢癌临床防治上将具有更广泛的应用, 作为卵巢癌新的辅助治疗药物越来越受到关注。

甲酸的固定作用 篇3

关键词：氨基甲酸酯类农药中毒,心肌损害,谷胱甘肽

氨基甲酸酯类农药中毒是常见的急症之一, 常引起各科脏器损害。主要损害的器官是中枢神经系统、肺部、肌内、心肌等, 前几种器官损伤后临床表现比较突出, 而心脏损害往往被掩盖, 常常出现心力衰竭和严重心律失常等, 可导致患者病情恶化及猝死, 因此, 对于氨基甲酸酯类农药中毒患者可引起的中毒性心肌损害也是治疗的重要环节, 几年来, 本院采用谷胱甘肽治疗氨基甲酸酯类农药中毒致心肌损害患者, 观察其对肌酸激酶 (CK) 、肌酸激酶同工酶 (CK-MB) , 肌钙蛋白Ⅰ (c Tn I) 、心电图 (ECG) 的影响, 现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2005-01~2010-12在我院就诊的60例氨基甲酸酯类农药中毒患者, 随机分为治疗组和对照组 (各30例) 。治疗组:男性10例, 女性20例, 中位年龄36.24 (18~85) 岁;对照组:男性8例, 女性22例, 中位年龄38.71 (16~82) 岁;两组患者均无肝病及心脏病史, 近期没有使用肝损害药物及保护心肌的药物。诊断标准依据文献[1]。中毒农药类型:治疗组呋喃丹中毒19例、除螨威中毒9例, 抗蚜威中毒2例;常规组分别为20例、9例和1例。中毒程度:治疗组轻度3例, 中度15例, 重度12例;常规组分别为4例、16例和10例。两组患者均口服中毒, 在年龄、性别及中毒程度上两组比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2 方法

两组患者就诊时急查静脉血胆碱酯酶 (CHE) 、电解质, 同时查心肌酶及肝肾功能。给予洗胃、洗头及导泻 (甘露醇250ml) , 静脉补液并应用阿托品、维生素C和泮托拉唑, 治疗组加用谷胱甘肽注射剂100mg+5%葡萄糖注射液250ml中静滴, 1次/d;常规组加用葡酸内酯注射液0.2g+5%葡萄糖注射液250ml中静滴, 1次/d;两组均连续使用, 轻度中毒5d, 中度中毒7d, 重度中毒12d。

1.3 统计学处理

应用SPSS 13.0软件进行分析, 计量资料用均数±标准差表示, 组间比较采用配对t检验, 率的比较采用卡方检验, 以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CTnI水平变化

32%的患者CTnI逐渐升高, 24h达到高峰, 以后逐渐下降, 在0h、12h时两组间无统计学意义;在24h、48h及72h时加入谷胱甘肽治疗显著低于常规组, 见表1。

注:与常规组比较:*P<0.05

2.2 CK水平变化

接诊后24h内升至高峰, 以后逐渐下降, 在0h、12h及24h时两组间比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 48h、72h时加入谷胱甘肽治疗组显著低于常规组 (P<0.05) , 见表2。

注:与常规组比较:*P<0.05。

2.3 心电图检测

全部患者中心电图检查异常者48例 (80%) , 治疗组加入谷胱甘肽72h后心电图检查异常者6例 (20%) , 明显低于常规组18例 (60%) , 差异有统计学意义 (P<0.05) 。

3 讨论

氨基甲酸酯类农药中毒在我国农村比较常见, 主要表现为胆碱能神经兴奋时的临床表现, 如头痛、头晕、乏力、恶心、呕吐、流涎、多汗、视力模糊和瞳孔缩小等, 氨基甲酸酯类农药中毒特别是重度中毒者, 常见出现不同程度的心脏损害, 主要表现为心肌酶谱改变, 心律不齐, ST-T改变和QT间期延长等。由于心脏损害前有较明显的胆碱能神经兴奋症状, 且难以排除重度中毒缺氧、电解质紊乱等对心脏的影响, 故心脏损害未列为诊断和分级的依据。

氨基甲酸酯类农药中毒机制可能为氨基甲酸酯类农药可直接损害心脏细胞, 使乙酰胆碱在体内大量蓄积, 导致K+-Ca2+通道异常, 心肌及传导系统受到抑制, 引起严重的血流动力学异常, 血流外周阻力的增加, 增加心肌耗氧量, 加重心肌损害[3]。

谷胱甘肽含有疏基 (-SH) , 是人类细胞质中自然合成的一种肽, 是一种细胞内重要代谢调节物, 广泛存在于细胞中, 对细胞有多种生化作用。谷胱甘肽参与体内三羧酸循环, 促进胆酸代谢, 与肝脏氨基甲酸酯类毒物结合, 加快毒物的排泄, 迅速降低毒物在肝脏中的浓度, 并能激活多种酶, 促进糖、脂肪及蛋白质代谢以修复损伤的心肌细胞, 各胱苷肽还可以通过疏基与体内自由基结合, 加速自由基的排泄, 对中毒造成的全身或局部低氧血症患者能减轻组织损伤, 促进修复[4]。

本讨论结果显示, 谷胱甘肽对氨基甲酸酯类农药中毒患者的心肌细胞通过以上机制发挥其保护作用, 在疾病早期 (24h内) 统计学意义虽然不明显, 但已经可以看出观测指标在逐渐下降, CTnI及CK-MB在治疗24h后与对照组比较差异有统计学意义;CK48h后与对照组比较差异有统计学意义, 说明氨基甲酸酯类农药中毒患者谷胱甘肽的使用对改善心功能, 帮助度过急性危险期是有积极意义的。葡醛内酯在体内也可与毒物结合, 形成低毒或无毒结合物由尿排出, 有保护肝功能及解毒作用。本研究显示, 葡醛内酯对心肌保护作用不明显。

在临床工作中, 医生应重视氨基甲酸酯类农药中毒对心脏的损害, 为减轻对心肌损害, 可常规使用各胱甘肽, 加上使用方便, 价格低廉, 应大力推广使用。

参考文献

[1]中华医学会传染病与寄生虫病专业委员会肝病学分会, 病毒性肝炎诊断标准[J], 中西医结合肝病杂志, 2001, 11 (1) :55-60.

[2]陈文彬, 潘祥林, 诊断学[M].6版.北京:人民卫生出版社, 2004:424-427.

[3]陆雨英, 终南山.氨基甲酸酯类杀虫药中毒//.内科学[M].7版.北京:人民卫生出版社, 2008:931-932.

甲酸的固定作用 篇4

新型金属配合物的生物效应为人们所关注, 而DNA作为生命遗传的物质基础, 研究金属配合物与DNA的相互作用具有重要意义[1,2]。DNA与金属配合物的结合模式主要有嵌入和非嵌入模式等[3]。

2 实验部分

2.1 试剂与仪器

实验试剂:邻-甲基苯甲酸, 邻菲罗啉钐配合物, 河北师范大学测试中心提供;小牛胸腺DNA, 生化试剂, Sigma公司, 美国;三羟甲基氨基甲烷 (Tris) , 生化试剂, Sigma公司, 美国;氯化钠, 优级纯, 天津市河东区红岩试剂厂;盐酸, 分析纯, 石家庄市诺特化工厂;N, N-二甲基酰胺 (DMF) , 分析纯, 天津市风船化学试剂科技有限公司;高纯水。

实验仪器:电子天平, FA1104N, 上海精密科学仪器有限公司;紫外可见分光光度计, TU-1901, 北京普析通用仪器有限责任公司。

2.2 紫外光谱法研究

以pH为7.4的Tris-HCl溶液为参比, 待测液中加入20μL的邻-甲基苯甲酸, 邻菲罗啉钐配合物溶液 (1×10-4mol·L-1) , 再分别加入浓度为2.2×10-5mol·L-1DNA (0-200μL) (DNA浓度及纯度经由光度法确定) , 每次加样后等待15min进行光谱测量。测试参数——波长:400-200 nm;扫描速度:快速;纵坐标:0-9;光度方式:Abs;扫描次数:1。

3 结果与讨论

紫外-可见光谱法是研究稀土配合物与DNA相互作用的最常用的方法[4,5]。研究表明:在配合物的浓度保持不变下, 加入D N A后, 如果配合物的吸光度减小 (减色) , 波长红移, 可以认为配合物可能与DNA发生了嵌入作用。因为配体的嵌入部分与DNA碱基对能够发生π电子堆积, 配体的空轨道π*与碱基的电子轨道发生耦合, 使能级下降导致π→π*跃迁能量减少, 从而产生红移现象。同时, 耦合后的π*轨道因部分填充电子, 使π→π*跃迁几率减少, 导致减色效应。红移与减色效应强弱还能反映出配合物嵌入D N A能力大小, 嵌入能力越强, 红移与减色效应越大。

固定邻-甲基苯甲酸, 邻菲罗啉钐配合物浓度, 每次加入不同量DNA溶液滴定, 扫描吸收光谱。图1自下而上依次为加入DNA为0, 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140, 160, 180, 200μL时邻-甲基苯甲酸, 邻菲罗啉钐配合物体系吸光度的变化趋势。由图1可知, 随着DNA的加入, 配合物的紫外吸收在265.5nm左右有蓝移现象, 并且峰的强度增强 (增色) 。所以邻-甲基苯甲酸, 邻菲罗啉钐配合物与小牛胸腺DNA不是以嵌入方式结合的。

另外, 邻-甲基苯甲酸, 邻菲罗啉钐配合物与DNA的结合常数可以利用双倒数法求算。依照双倒数公式:1/ (A0-A) =1/A0+1/ (K×A0×CDNA) 作图。式中A0和A分别为加入DNA前后配合物的吸光度, K为结合常数。由图2得到邻-甲基苯甲酸, 邻菲罗啉钐配合物与D N A的结合常数K=4.389×103L·mol-1, 线性相关系数为0.99894。

4 结论

通过紫外光谱法初步发现:邻-甲基苯甲酸, 邻菲罗啉钐配合物可能通过沟槽结合或静电作用等外部键合方式与D N A结合, 结合强度较弱。

参考文献

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