植物标本的采集与保存(精选6篇)
植物标本的采集与保存 篇1
《动物寄生虫学》作为一门形态学科, 实践观察非常重要, 是动物寄生虫病诊治的基础。动物寄生虫学一方面要求学生掌握寄生虫的形态、生活史, 另一方面要求掌握寄生虫的致病性、实验室诊断、治疗等内容。试验根据当地动物寄生虫病的流行情况着重介绍几种动物肠道寄生虫标本的正确采集、保存方法, 以期为《动物寄生虫学》的实验教学提供充足的虫种资源, 从而达到提高教学质量的目的。
1 材料和方法
1.1 动物及其样本来源
成年鸡、鸭各50只, 雌雄各半;犬35只, 雌雄不限;猪78头, 雌雄不限;奶牛52头, 雌雄不限。在宰杀鸡、鸭时留取肠道粪便及内容物;猪和奶牛的粪便样本在猪场和奶牛场取得;犬的粪便在西南大学动物实验中心取得。对被检动物取刚排出的新样粪便, 分别装入干净的塑料袋中, 标上编号、年龄标签, 置于4 ℃冰箱, 备查[1]。
1.2 寄生虫检查方法
1.2.1 寄生虫虫卵检查方法
饱和盐水漂浮法:取5~10 g待检样本, 先用10 mL清水搅拌均匀, 再加入40 mL清水搅拌均匀, 用60目和150目金属筛双层过滤, 将滤液以3 000 r/min离心10 min;弃上清液, 加入50 mL饱和食盐水用干净的玻璃棒搅拌均匀, 再以1 500 r/min离心10 min;用金属圆环轻触表层液制片, 在显微镜 (10×40) 下观察。
虫卵沉淀法:取5~10 g待检样本置于烧杯中, 加适量清水调匀, 将其过滤于另一干净烧杯中, 取滤液静置20 min;弃去上清液, 再加入清水搅匀, 再沉淀, 如此反复进行2~3次, 至上清液清亮为止;弃去上清液, 用滴管取少许放于载玻片上, 再加1滴清水调匀, 加盖玻片镜检。
锦纶筛兜淘洗法:取待检样本5~10 g, 加水搅匀, 先通过40目 (260 μm) 或60目 (250 μm) 的铜丝筛过滤;取滤液再通过260目 (58 μm) 锦纶筛兜过滤, 并在锦纶筛兜中继续加水冲洗, 直到洗出的液体清澈、透明为止;而后挑取锦纶筛兜内的粪渣抹片, 以10×40倍镜检。
改良抗酸染色法:每个粪样取10~15 g, 加5倍自来水搅匀, 用60目尼龙筛过滤, 取滤液涂片, 自然干燥, 以改良抗酸染色法[2]染色, 以10×100倍油镜镜检。
1.2.2 寄生虫体检查方法
从十二指肠开始, 把大肠、小肠及盲肠分开, 将各段肠管用剪刀剪开, 分别收集其内容物, 仔细检查肠的内容物, 如发现有寄生虫, 应用解剖针或眼科镊取虫体放于75%乙醇中 (尤其注意细小的绦虫, 不要将头节拉断) 。将寄生在黏膜上的小虫体及刮下的黏液夹在两玻片间放低倍镜下检查。如发现虫体, 用解剖针轻轻挑出, 放于保存液内。
1.3 标本的收集与保存
1.3.1 虫卵标本的收集与保存
对用上述方法获得的阳性标本采用沉淀法进一步浓缩、收集寄生虫标本[3]。取粪便30~50 g, 加入生理盐水调成混悬液, 经金属筛过滤, 静置1 h;轻轻倾出上清液, 再加等量生理盐水静置;如此反复清洗、沉淀数次, 直至上清液清澈、透明为止;轻轻倾出上清液, 向沉淀物中加入适量5%甲醛保存, 备用。
1.3.2 蠕虫标本的采集与保存
吸虫的采集:若在动物肠道的冲洗沉淀物中发现吸虫, 可用弯头解剖针或毛笔将虫体挑出 (不宜采用镊子夹取, 以避免使虫体变形) , 放入生理盐水中, 洗净血迹、粪渣、黏膜等。有些虫体肠管内含有大量食物, 可以在生理盐水中透洗过夜, 等食物消化或排出。如需制作染色整体标本, 应根据虫体的大小、厚薄分别用玻片将虫体压平、压薄, 然后用固定液进行固定。凡用含有升汞的固定液固定的标本会产生许多汞盐沉淀, 沉积于组织内影响今后制片观察[4], 故需用0.5%碘乙醇 (似葡萄酒色) 浸泡12 h以除去汞盐沉淀, 再放入70%乙醇中退去碘的颜色, 最后将虫体保存于70%乙醇中。
绦虫的采集:绦虫的头节多吸附在动物肠管壁, 采集时不能用力拉, 应将附有虫体的肠段剪下, 连同虫体浸入水中, 虫体会自行脱落, 体节也会自行伸直。绦虫标本较长, 最好用10%甲醛生理盐水固定保存[5,6]。如要鉴定虫种则需要制作染色玻片标本, 须将虫体按厚、薄分段置于两玻片中加压或将虫体夹于2张玻片中, 玻片两端用橡皮筋绑紧, 使虫体压平、压薄后放入5%甲醛生理盐水固定液中固定24~48 h。在操作过程中切勿损坏虫体。
线虫的采集:解剖动物后, 在肠道中发现虫体, 可用弯头解剖针或毛笔将虫体挑出, 放入生理盐水中。线虫是雌雄异体, 雄虫一般较小, 而在虫体鉴定时, 常需要依据雄虫的形态特征作为依据, 依次采集时不要忽视了小的虫体。对一些口囊特别大或有发达交合伞的虫体, 如圆线虫、钩虫等, 其口囊或交合伞含有大量杂质, 会妨碍以后的观察, 应在固定保存前用毛笔洗去或振荡洗去, 最后将虫体放入70%乙醇或巴氏液 (3%甲醛生理盐水) 中保存。
2 结果
2.1 动物肠道寄生虫的感染情况
在家禽中, 鸡体内常见的寄生虫主要有鸡球虫、鸡蛔虫、赖利绦虫和异刺线虫;鸭体内常见的寄生虫主要有鸭球虫、绦虫和隐孢子虫。鸡、鸭常见寄生虫的感染率见表1。
猪体内常见的寄生虫有结肠小袋纤毛虫、猪球虫、鞭虫和蛔虫;犬体内常见的寄生虫有犬弓首蛔虫、犬复孔绦虫和犬钩虫;奶牛体内常见的寄生虫有食道口线虫和球虫。猪、犬和奶牛常见寄生虫的感染率见表2。
2.2 肠道寄生虫虫卵标本的保存结果
经过近5年的教学实践与应用, 采用沉淀法进一步浓缩并保存于5%甲醛溶液中的寄生虫虫卵, 形态完整, 无溶解、肿胀或破裂现象。采用中性树胶封片法制作永久性寄生虫虫卵玻片标本, 虫卵保持原来的形态及色泽, 清晰可见, 易于辨认, 可长久保存。
2.3 肠道寄生虫标本的保存结果
寄生虫成虫标本采用瓶装保存。有些动物寄生虫虫体较长, 装入标本瓶时还需用细线将其固定于一固定支持物上 (如绦虫) , 否则容易断裂, 导致不能观察到虫体的大体完整形态。瓶装的标本应定时更换固定液, 以防固定液挥发导致标本干裂。近5年的教学实践证明, 将标本瓶装化后既能有效地保存标本, 又不影响教学观察, 同时还能减少甲醛、乙醇等对环境的污染。
3 讨论
动物寄生虫学是我国高等农业院校动物医学、动物检疫等专业的专业课和骨干课程之一, 在动物寄生虫病学系列课程中, 实验课尤为重要。充足和多样的寄生虫标本是寄生虫学实验教学顺利进行的前提和保证。本研究结果显示, 动物肠道寄生虫感染率较高, 采用沉淀法浓缩动物肠道寄生虫虫卵标本并保存于5%甲醛溶液中, 寄生虫虫卵形态完整, 无溶解、肿胀或破裂现象, 取得了较好的教学效果。经过近5年的教学实践应用表明, 该标本完全适用于动物医学教学需要。试验采用的采集与保存肠道寄生虫虫卵与虫体标本的方法简单易行, 费用低, 有效地解决了教学实验中寄生虫虫卵标本缺乏的问题, 对提高教学质量、节约教学经费具有重要意义。
摘要:为了探讨动物肠道寄生虫感染情况及收集、保存寄生虫卵和虫体标本的方法, 试验分别采用锦纶筛兜淘洗法、饱和食盐水漂浮法、虫卵沉淀法和改良抗酸染色法检测不同动物肠道寄生虫成虫及虫卵感染情况;用沉淀法浓缩收集虫卵标本, 于5%甲醛溶液内保存;成虫标本采用瓶装保存, 于70%乙醇中保存。结果表明:动物肠道寄生虫感染率较高, 不同动物感染的肠道寄生虫种类及感染率不同。沉淀浓缩法收集并保存于5%甲醛溶液的寄生虫虫卵形态完整;成虫标本瓶装化后既能有效地保存标本, 又不影响教学观察。
关键词:寄生虫,肠道,动物,教学,标本
参考文献
[1]常正山.寄生虫标本的采集和保存[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2006, 24 (增刊) :576-581.
[2]梁楠, 菅复春, 宁长申, 等.牛隐孢子虫和隐孢子虫病的研究进展[J].中国兽医科学, 2006, 36 (12) :1024-1030.
[3]汪明.兽医寄生虫学[M].3版.北京:中国农业出版社, 2003.
[4]徐静.常见寄生虫标本的固定与保存[J].中外医疗, 2008 (12) :108.
[5]徐兴河.几种寄生虫标本的收集、固定和保存方法[J].地方病通报, 2004, 19 (3) :99.
[6]武海燕, 赵海龙.青海地区寄生虫标本采集途径[J].青海师范大学学报, 2005 (4) :90-91.
植物标本的采集与保存 篇2
## 摘要:通过采集与制作药用植物标本,认识了一些药用植物及其功效等。关键词:药用植物;标本;心得体会
暑假期间,在屏南县际头村进行了标本的采集与制作,学习了许多中草药的形态、别名、主治、功效,通过此次药用植物标本的采集与制作,加深了对书本内容的理解。
一、标本采集与制作
首先,翻阅资料,查找本地都有哪些草药,准备这些中草药的名称以及图片,然后找个晴朗的天气,准备一个标本夹、一些报纸、小铲、枝剪、铅笔、棉线、钢卷尺、照相机、记录本和标号签等工具,在自己所在的村落、山中找寻草药。
在马路边、田里、菜园、山上,都可以看到有许多的草药,车前草、酢浆草、艾草等等,几乎随处可见,带着一片欣喜,一个早上就采到了许多草药。
采集完整的标本:根茎叶花果实:29×42厘米;木本植物:剪一段长25~30厘米带花或果的带叶枝;草本植物:选择中等大小、高约40厘米左右挖取带根的全草,如果全株在标本夹内压不开,可折成“V”或“N”字形,特别高大的,则需把中段剪除,只留上半部和基部茎叶压在一起。雌雄异株的植物,分别采集雄株和雌株。
采集下来的标本立即放进标本夹,下面垫2~3张吸水纸。放置时要小心地把卷曲的枝、叶拉开,伸展,把其中一二片叶子翻过来,背面朝上。如果叶子太多,遮盖了花朵,要摘除一些叶片。如果标本太长,可以把它折曲成“N”字形。标本上面盖2~3张吸水纸,汁液多的大标本要多盖些纸。把采集地点、日期、标本编号等写在小纸条上,再用棉线把小纸条拴在标本上。
将采集的标本迭放在一起,上面放一块木板,压上一些重物。标本压制过程中,开始,每五六小时换一次纸;次日改为早晚各换一次;两三天后,每天换一次了。一周左右标本就全干了。
可能是因为后来的天气原因以及没有勤换纸,一些标本就开始发霉变色了,后来找个时间又去山上采了一些,这回更加注意标本的压制问题,小心的压制。
最后,固定标本,将标本固定在台纸上。
二、标本观察
观察采集到的各种药物的形态:根、茎、叶、花、果实等。对照参考资料,鉴别植物,了解他们的性状、别名、功能主治:
1、积雪草[1]
科名:伞形科
别名:崩大碗、缺碗草、马蹄草、雷公根
性状:该品常卷缩成团状。根圆柱形,长2~4cm,直径 1~1.5mm,表面浅黄色或灰黄色。茎细长弯曲,黄棕色,有细纵皱纹,节上常着生须状根。叶片多皱缩、破碎,完整者展平后呈近圆形或肾形,直径1~4cm,灰绿色,边缘有粗钝齿;叶柄长3~6cm,扭曲。伞形花序腋生,短小。双悬果扁圆形,有明显隆起的纵棱及细网纹,果梗甚短。气微,味淡
功效:清热解毒,利湿消肿。是东方人的长寿药,可益脑提神。研究表明具有滋补、消炎、愈合伤口、利尿通便和镇定作用。对麻风病、溃疡也有疗效,对血液净化及免疫力有激活作用,因其可刺激深层皮肤细胞的更替。它是神经滋补剂,能提高记忆力,减轻精神疲劳;还可降血压,治疗肝病等野牡丹,蒴果坛状球形,与宿存萼贴生,密被鳞
[1] 片状糙伏毛;种子镶于肉质胎座内
2、艾草[1]
别名:冰台、遏草、香艾、蕲艾、艾蒿、艾﹑灸草﹑医草﹑黄草﹑艾绒、艾叶 科属分类:菊科, 蒿属
性状:茎类圆柱形,长短一一,直径可达5mm。绿色,表面有纵棱,可见互生的枝、叶或叶基。上部有较密的柔毛。质坚脆,易折断,断面纤维性,中央有白色髓。叶皱缩或已破碎,完整叶片展平后二至三回羽状深裂,裂片线形,两面均被柔毛。头状花序较多,半球形,直径3-6mm,总花梗细瘦,总苞叶线形,总苞片2-3列,边缘有白色宽膜片,背面被短柔毛;花托卵形;边缘为雌花,内层花两性,均为管状。成熟花序可见倒卵形的瘦果。气浓香,味微苦
功效:艾草性味苦、辛、温,入脾、肝、肾。全草有调经止血﹑安胎止崩﹑散寒除湿之效。治月经不调﹑经痛腹痛﹑流产﹑子宫出血, 根治风湿性关节炎﹑头风﹑月内风等。因它可削冰令圆,又可炙百病,为医家最常用之药。现代实验研究证明,艾叶具有抗菌及抗病毒作用;平喘、镇咳及祛痰作用;止血及抗凝血作用;镇静及抗过敏作用;护肝利胆作用等。艾草可作“艾叶茶”、“艾叶汤”、“艾叶粥”等食谱,以增强人体对疾病的抵抗能力。艾草具有一种特殊的香味,这特殊的香味具有驱蚊虫的功效,所以,古人常在门前挂艾草,一来用于避邪,二来用于赶走蚊虫
3、星宿菜[3]
科名:报春花科
别名:假辣蓼、泥鳅菜,红根草,红气根、红七草、金鸡脚、百煎草、蛙霓草,黄鳅窜、红头绳、血丝草
性状:叶互生;阔披针形,或倒披针形,长4~9厘米,宽1~2厘米,先端短尖或渐尖,基部渐狭,近于无柄,表面具黑褐色腺,干后凸起。花序长总状,稍有腺毛;苞片三角状披针形,长约2毫米,花梗长1~3毫米;萼5裂,裂片椭圆状卵形,先端钝尖,边缘有缘毛,膜质,中部有黑色点,长约1.5毫米:花冠白色,长约3毫米,喉部有短腺状毛,裂片5,倒卵形,先端钝尖,背面有黑色点;雄蕊5,着生于花冠中部,花丝短,有腺状毛;花柱较雄蕊短
功效:活血,散瘀,利水,化湿。治跌打损伤,关节风湿痛,妇女经闭,乳痈,瘰疬,目赤肿痛,水肿,黄疸,疟疾,痢疾
4、天胡荽[5]
科名:伞形科
别名:鸡肠菜,滴滴金,翳草,铺地锦,肺风草,破铜钱,满天星,落地金钱
性状:多年生草本。茎纤弱细长,匍匐,平铺地上成片,秃净或近秃净;茎节上生根。单叶互生,圆形或近肾形,直径0.5~1.6厘米,基部心形,5~7浅裂,裂片短,有2~3个钝齿,上面深绿色,光滑,下面绿色或有柔毛,或两面均自光滑以至微有柔毛;叶柄纤弱,长0.5~9厘米。伞形花序与叶对生,单生于节上;伞梗长0.5~3厘米;总苞片4~10枚,倒披针。形,长约2毫米;每伞形花序具花10~15朵,花无柄或有柄;萼齿缺乏;花瓣卵形,呈镊合状排列;绿白色。双悬果略呈心脏形,长1~1.25毫米,宽1.5~2毫米;分果侧面扁平,光滑或有斑点,背棱略锐。花期4~5月
功效:清热,利尿,消肿,解毒。治黄疸,赤白痢疾,淋病,小便不利,目翳,喉肿,痈疽疔疮,跌打瘀肿
5、鱼腥草[5] 别名:折耳根、臭菜、侧耳根、臭根草、臭灵丹、朱皮拱 科名:三白草科
性状:鱼腥草为多年生草本,高30~50厘米,全株有腥臭味;茎上部直立,常呈紫红色,下部匍匐,节上轮生小根。叶互生,薄纸质,有腺点,背面尤甚,卵形或阔卵形,长4~10厘米,宽2.5~6厘米,基部心形,全缘,背面常紫红色,掌状叶脉5~7条,叶柄长1~3.5厘米,无毛,托叶膜质长1~2.5厘米,下部与叶柄合生成鞘。花小,夏季开,无花被,排成与叶对生、长约2厘米的穗状花序,总苞片4片,生于总花梗之顶,白色,花瓣状,长1~2厘米,雄蕊3枚,花丝长,下部与子房合生,雌蕊由3个合生心皮所组成。蒴果近球形,直径2~3毫米,顶端开裂,具宿存花柱。种子多数,卵形。花期5-6月,果期10-11月。鱼腥草是治肺痈之要药 功效:清热解毒;排脓消痈;利尿通淋
三、收获与体会
在查阅相关资料时,认识了许多常见的草药,了解了它们的性能,比如:积雪草,湿热
[4]黄疸,中暑腹泻,砂淋血淋,痈肿疮毒,跌扑损伤。野牡丹,消积利湿,活血止血;清热[5][6]解毒。艾草,祛风,除湿,调经。
一些常见的普通的草,其实都有许多用途,日常生活中我们经常忽略了。在植物采集时必须注意维护好其根、茎、叶、花、果实,采集全株或带叶枝,雌雄异株的植物,分别采集雄株和雌株。注意有些植物很相像,可是却不是相同的种类,要注意微小的差别加以区分。
压制标本时必须勤换吸水纸以免其发霉变色。
在上山采集的过程中,更多的认识了自然界生物的多样性,增加了学习的浓厚兴趣,贴近自然,感受自然。感受到中国的种草药的丰富,有许多的利用空间。
参考文献
[1]张贵君,常用中药鉴定大全,哈尔滨,黑龙江科学技术出版社,1993年。[2]吴淑荣等,实用中药材鉴别手册,天津,天津科学技术出版社,1988年。[3]钱信忠,中国本草彩色图鉴,北京,人民卫生出版社,1996年
采集植物标本 篇3
1.去多少羊
慢羊羊村长刚宣布完,沸羊羊就大声问:“村长,明天我们要去多少羊呀?”
村长慢腾腾地说:“去的羊当中,老师羊数是最小的一位数;男生羊数:四个相同数的和恰巧与三个相同数相乘的积相等;女生羊数:两个相同数的和恰巧等于这两个相同数的积。沸羊羊,你说去多少羊?”
沸羊羊一时算不出来。你知道去多少羊吗?
2.有几种走法
就要出发了!慢羊羊村长仔细研究着地图,从大肥羊学校到森林里有好多路可走。只往前和左右方向走,一共有几种走法?哪几种走法所走路程较近呢?
3.采集标本
到了森林,慢羊羊村长将小羊羊们分为两组。
大家采集得可认真了,就连懒羊羊都没有偷懒。
慢羊羊村长和一组同学采集了18种标本,慢羊羊村长和二组同学采集了16种标本,一组和二组同学共采集了30种标本。
你知道羊羊们一共采集了多少种植物标本吗?
4.猎人的枪声
突然,一个猎人对着一只野鸭开了一枪,枪声惊动了在附近采集植物标本的羊羊们。喜羊羊、沸羊羊、美羊羊都说是自己最先发现猎人开枪的。
沸羊羊说:“我的耳朵最灵敏,枪声一响就听见了。”
美羊羊说:“我看见野鸭中弹从空中跌下来,所以,我是最先发现开枪的。”
喜羊羊说:“我是第一个发现开枪的,因为枪口刚一冒火花我就看见了。”
他们三羊争论不休,慢羊羊村长走过来,听了他们三人所说的理由,作出了是喜羊羊先发现开枪的结论。
请你想一想,慢羊羊说得对吗?
5.带个路吧
羊羊们嘻嘻哈哈地采着标本,慢慢地就迷失了方向。他们准备走回学校,就得朝西走。天上满是乌云,看不见太阳。他们又没有指南针,怎么知道哪个方向是西呢?
这时,又下起了小雨。小朋友,快帮个忙,给羊羊们指个路吧!
6.羊羊巴士过桥
羊羊们走出森林,天空还下着雨。慢羊羊村长提议:“咱们坐车回家吧。”这辆羊羊巴士长16米,每秒行12米,经过44米长的桥,要用多少时间?
羊羊巴士载着可爱的羊羊们回到了大肥羊学校。
采集植物标本之行,让小羊羊学到了好多知识。
植物标本的采集与保存 篇4
1 材料和方法
1.1 标本来源
随机选取湖北科技学院附二医院80例体检者, 前40例体检者同时分别用分离胶促凝真空管 (标记为A组) 和无抗凝真空管 (标记为B组) 采集血液标本, 后40例体检者用分离胶促凝真空管 (标记为C组) 采集血液标本, 尽快离心分离血清备用。分离胶促凝真空管和无抗凝真空管由广州阳普医疗用品有限公司生产。
1.2 仪器
日本日立公司7170A型全自动生化分析仪, B320A白洋离心机, BCD-280e伊莱克斯冰箱。
1.3 试剂及校准品
SOD试剂由北京华宇亿康生物工程技术有限公司提供, 试剂批号为111014。伯乐质控物, 批号为45613。分析参数参照说明书设定。
1.4 方法
1.4.1 测定原理
本试剂盒为双试剂, 采用速率法测定。即邻苯三酚自氧化法, 在碱性条件下, 邻苯三酚自氧化成红桔酚, 同时产生·O2-, SOD催化·O2-发生歧化反应从而抑制邻苯三酚的自氧化, 样品对邻苯三酚自氧化速率的抑制率可反映样品中的SOD含量。
1.4.2 测试方法
(1) 所有体检标本采集后室温放置, 观察血液凝固时间, 待血样完全凝固后以3 000 r·min-1离心10 min, 观察血清分离效果, 并于每次上机测定前肉眼观察是否溶血、黄疸或脂血。 (2) A组血清放置于室温, 分别于0、4、6、8、10 h测定SOD活性;B组血清放置于室温, 于0 h检测SOD活性;C组血清置于2~8℃冰箱, 分别于0、10、14、21 h测定SOD活性。
1.4.3 统计学处理
测定结果以±s表示, 应用SPSS 17.0统计软件分析, 两组样本比较采用配对t检验, P<0.05为差异有统计学意义。
1.4.4 临床可接受范围
本研究基于临床经验和被分析物 (SOD) 检测试剂盒的分析性能, 确定允许总误差 (TEa) 为20%, 检测结果偏倚<1/2TEa (即10%) 为满足临床应用。
2 结果
分离胶促凝真空管和无抗凝真空管SOD检测结果的比较 (0 h) , 差异无统计学意义 (P>0.05) , 见表1。室温下保存的分离胶促凝真空管血清SOD于4、6、8、10 h检测, 与0 h比较差异具有统计学意义 (P<0.01) , 见表2;与0 h比较相对偏倚分别为3.719%、5.341%、6.807%和8.306%。2~8℃冰箱保存的分离胶促凝真空管血清SOD于10、14、21 h检测, 与0 h比较差异具有统计学意义 (P<0.01) , 见表3;与0 h比较相对偏倚分别为3.213%、4.552%和5.816%。
两种采集管比较, t=1.431, P>0.05
与0 h比较, a P<0.01
与0 h比较, a P<0.01
3 讨论
血清分离胶具有抗氧化、耐高温、抗低温、高稳定的特性。其结构中含有大量氢键, 容易缔合形成网状结构, 在离心力的作用下网状结构被破坏, 变成黏度低的流体;当离心力消失之后又重新形成网状结构, 恢复成黏度高的流体, 这种性质被称为触变性 (thixotropy) 。分离胶置于试管底部, 当分离胶与凝固后的血液在同一试管中离心时, 由于比重不同, 在离心力的作用下移到管中央, 离心后固化形成屏障, 使血清和血细胞完全分离[1,2]。
为了评价血清分离胶对SOD测定结果的影响, 笔者以无抗凝真空管的血清标本为标准, 观察血清分离胶对血液凝固时间、血清分离质量及对SOD结果的影响, 根据日常工作中测定SOD的均值和标准差, 设定样本量为40例, 然后进行配对t检验, 显示差异无统计学意义 (P>0.05) 。不少医院检验科常规生化标本采用分离胶促凝真空管, 这样可与其它生化项目合并, 减少采血管数, 节约人力、物力。更重要一点, 血清分离胶可使血清和血细胞完全分离, 由于红细胞膜上存在SOD, 这样可减少假阳性率。因此, 可以采用分离胶促凝真空管采集标本。
血清分离胶可加速血流凝固、简化样品处理步骤;防止血细胞对血清的干扰, 提高检验准确度;样品可原位进行仪器分析;吸取血清方便;便于血清贮存和远途传递;避免了纤维蛋白和溶血的影响[3]。此外, 血样在分析前、分析中、分析后都在同一支管中进行, 防止血液中病毒的感染, 减少了医疗废物。
在实际工作中, 由于各种不同的原因不一定能尽快检测, 为了进一步探讨血清分离胶在保存温度和保存时间上对SOD检测的影响, 笔者分别检测在室温保存和在2~8℃冰箱保存的样本, 根据北京华宇亿康生物工程技术有限公司提供说明书样本要求, 15~25℃保存可稳定4 h, 2~8℃保存可稳定10 h, 因此, 从采血后实时送检、待凝固后实时离心并实时上机测定, 以此为0 h测定值, 同一批样本随后计时, 在室温保存样本分别在4、6、8、10 h测定, 在2~8℃冰箱保存样本分别在10、14、21 h测定。结果显示:室温下保存样本4、6、8、10 h SOD检测结果与0 h比较, 差异具有统计学意义 (P<0.01) , 相对偏倚均小于10%;同样, 2~8℃冰箱保存样本10、14、21 h SOD检测结果与0 h比较, 差异具有统计学意义 (P<0.01) , 相对偏倚均小于10%, 但下降幅度较室温下保存的为小。t检验要求严格, 只要少许差异都能被检出, 本研究虽然显示差异有统计学意义, 然而, 在临床上更多是采用临床可接受范围, 实验设定检测结果偏倚<10%为满足临床应用。血清中SOD相对保存时间较短, 研究结果证明, 置于室温、2~8℃冰箱保存时间都较说明书的延长1倍以上, 且结果差异在临床可接受范围, 这为实际工作带来方便。另外, SOD随时间而逐渐下降, 可能由于环境中存在自由基, SOD会与超氧阴离子自由基发生歧化反应所致, 因此必须尽快上机测定, 否则需用分离胶促凝真空管离心后置于2~8℃冰箱保存, 这样能减缓其下降速度。
有文献报道, 实验前误差频率占总误差的46.0%~68.2%[4]。分析前的质量控制, 常被临床医生和检验工作者所忽视, 不恰当地收集标本、不注意影响标本成分变化的各种因素, 常是导致实验不可靠的主要因素, 且又不容易被发现, 因而必须加以重视[5,6]。
摘要:目的:探讨标本采集管与保存方式对超氧化物歧化酶 (SOD) 测定结果的影响。方法:随机选取湖北科技学院附二医院80例体检者, 前40例体检者同时分别用分离胶促凝真空管 (标记为A组) 和无抗凝真空管 (标记为B组) 采集血液标本, 离心分离血清, 两组都放室温, A组分别于0、4、6、8、10 h测定SOD活性, B组于0 h检测SOD活性;后40例体检者用分离胶促凝真空管 (标记为C组) 采集血液标本, 离心分离血清, 置于28℃冰箱下保存, 分别于0、10、14、21 h测定SOD活性。采用配对t检验分析各组结果差异性。结果:分离胶促凝真空管和无抗凝真空管血清的SOD比较 (0 h) , 差异无统计学意义 (P>0.05) ;室温下保存的分离胶促凝真空管血清 (A组) 的SOD于4、6、8、10 h检测, 与0 h比较差异具有统计学意义 (P<0.01) , 与0 h比较相对偏倚分别为3.719%、5.341%、6.807%、8.306%;28℃冰箱保存的分离胶促凝真空管血清 (C组) 的SOD于10、14、21 h检测, 与0 h比较差异具有统计学意义 (P<0.01) , 与0 h比较相对偏倚分别为3.213%、4.552%、5.816%。结论:可采用分离胶促凝真空管采集标本;室温下放置10 h及28℃冰箱放置21 h对结果的影响均在临床可接受范围内, 与产品说明书上要求的时间相比, 室温与冰箱中放置时间都能延长1倍以上。
关键词:分离胶,超氧化物歧化酶,保存方式
参考文献
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现代植物标本采集技术 篇5
1 植物标本的采集
1.1 植物标本及其采集的意义和作用
植物标本就是将新鲜植物的全株或一部分用物理或化学方法处理后保存起来的实物样品。而现代对于植物标本的定义有所扩展,植物标本可以分为植物实体标本与植物数字标本,其中数字化标本是这个时代一大特点。
植物标本的采集与制作有着重大的意义和作用。首先,植物标本在教学中有着重要的作用,在生物教学中标本能帮助教师讲授教材中的重点、难点并帮助同学们理解、掌握课堂教学内容。其次,在植物标本的采集过程中,教师带领学生到野外调查、采集标本,实地了解到植物与人类的密切关系,可培养学生热爱大自然、热爱生物学、研究生物学的兴趣。更为重要的是植物标本中隐含着重要的信息,是植物学研究工作者不可少的研究材料,对植物形态学、植物分类学、中草药工作者来说尤为重要。同时,植物标本对于珍惜种的保护和研究也有着重要意义。
1.2 野外条件的改善对采集工作的意义
为保证采集到的植物标本尽量为未受人为干扰的原始状态,更准确地反映出植物的各种信息,野外工作十分重要。但是过去的野外采集工作十分复杂,路途艰辛,有的地方住宿及饮食条件很差或不具备,有的地方受道路和交通工具的影响根本无法到达的,而导致相当多野生植物无法采集到。野外采集还是一项具有挑战性的工作,崎岖的山路、陡峭的山峰,容易迷失方向,且深山里易遇各种无法预料的危险,对采集者的人身安全存在很大威胁。
随着技术的进步以及有关部门对野外植物标本采集条件重视性的提高,采集者的采集条件有了非常明显的改善。采集者可以去采集地所属的行政部门申请帮助,如军用越野车、武装人员及山路地图或合法带路人等,保证了野外标本采集者的人身安全及采集工作有效进行。现在的交通更为畅通,采集旅途大大减短。而且,市面上的各种野营用具较为齐全,大大改善采集者野营的条件。
1.3 采集工具的革新
植物标本的采集需要到野外,随着科学技术的发展和较为发达的交通系统及运输工具,采集效率提高了很多,比起以前的采集工具,我们可以拥有有各式各样的枝剪,较长的枝剪可以方便的采集到高处的标本,锋利的枝剪可以很方便的剪断硬的树枝,还可利用发达的定位技术方便的定位出所采集的标本的准确位置,如GPS定位系统,罗盘等,记录更加详尽的标本和环境信息。
根据人们的需求以及现代科技的发展,我们可以使用拍照、录像等手段记录植物数字信息,使今后的植物分类研究以及植物物种的辨析更加准确,还能利用计算机将这些图像用数字的形式存储在相应的数据库进行更有效的管理和使用(图1)。
1.4 采集制作流程的变革
过去的采集流程为:采集新鲜样品压制或烘干→杀虫→保存。
由于现代对于标本的定义有所扩充,出现数字标本,因而采集流程也有所改变。现代的采集可以为植物数字信息的采集而不仅限于植物实体的采集(图2)。
1.5 现代植物标本的数字信息采集
利用照相机或录像机等摄像设备,将植物的图像,生境记录下来,输入数字标本数据库,避免了野外采集时背负沉重的压制工具和繁琐的纸质信息记录表,减轻了野外采集后复杂的标本文字信息与影像资料的对应整理工作。可减少许多体力劳动和繁杂的手工制作过程以及避免因消毒、防虫过程中与有毒物质的接触(图3)。
2 植物标本的制作
2.1 植物标本的压制
标本压制是个需要耐心和细致工作,这个环节除了问题,采集工作就可能前功尽弃。目前研制了一种便于携带的红外辐射植物蜡叶标本快速干燥器。该干燥器压制标本时,不需要人工频繁地更换和晾晒吸水纸,所需时间仅为传统的1/10新增的同步红外辐射杀菌、防虫和防霉变特点有利于植物蜡叶标本的永久保存(图4)。
2.2 植物标本的保色
传统的植物标本为直接压制,通过自然风干。这种方法制作的植物标本时间一长会退色,影响标本质量。目前比较简便易行的保色方法为用一种特殊的保色液处理。经过保色处理后的标本,分子结构比较稳定,不受阳光或其他外界因素影响而退色。因此,在使用和收藏时不需要避光,长期使用不退色。另外,目前也有单位采用过塑的方法,利用过塑机给植物蜡叶标本过塑,效果很好,易于保存。
3 植物标本的保存
3.1 防虫保存的技术改进
在生物标本室常常发现一些好端端的植物标本被虫咬坏。目前采用的杀虫方法多为微波杀虫法及熏蒸法,常用熏蒸药物有敌敌畏、氢氰酸等不易燃、不易爆的药物。
3.2 标本使用模式的改变
植物标本的使用,传统的方法都是拿出实物标本进行观察学习和研究,前面已经提到这样对于植物标本会有很大的损害。随着计算机技术的发展,我们现在可以采用一种数据库存放植物标本,方便数据信息的提取,且不易损害。
4 结语
现在的植物标本采集和制作技术都有了很大的改善,对于植物标本的采集和保存都有很大的帮助,但也正随着采集地的可达性和采集强度增加,采集时对物种破坏和环境的影响是个值得深思的问题。现代网络技术发达,人们也越来越倾向于使用网络,而且网络更便捷,且可以节约空间、时间和植物资源,所以新型的运用网络技术手段来实现植物标本的采集和使用将有着广阔的空间和美好的应用前景。
参考文献
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谈如何采集制作植物腊叶标本 篇6
1 标本采集事项
1.1 怎样采集标本
首先要选择并采集完整的标本, 一个完整的标本除根、茎、叶外, 还要采集花或果实, 因为鉴别种类时, 花、果是区别科、属的重要依据。草本植物要选择中等大小、高40cm左右挖取带根的全草, 如果全株在标本夹内压不开, 可折成“V”或“N”字形, 特别高大的, 则需把中段剪除, 只留上半部和基部茎叶压在一起。木本植物可以剪一段长25~30cm带花或果的带叶枝。经济价值的植物, 还要采集它的应用部分, 如树皮、果实、根茎等。雌雄异株的植物, 要分别采集雄株和雌株。寄生植物, 如菟丝子、列当则应连同寄主一起采下。地下根茎、块茎、鳞茎、块根的植物应将其地下部挖出编号保存。
1.2 采集地点和时间
各种植物的开花、结果的季节不同, 生长地点不同, 要了解植物的生活习性、生态环境和分布规律。如玉竹、黄精喜生于阴坡林下, 而荆条、黄草生长于低山向阳山坡上, 野罂粟、小丛红景天必须到2000m以上的亚高山草甸上才能采到, 采集榆、榛的花要在早春, 而采收五味子、榛果则需在秋季。
1.3 采集工具及野外记录与编号
标本夹是压制腊叶标本主要工具, 用2块木板或木条钉成长43cm、宽30cm的标本夹, 用绳子捆牢, 为了便于携带, 可以加活动背带, 里面夹上一叠吸水力强的草纸或旧报纸。采集箱一般用马口铁制成, 长40cm, 宽20cm, 深20cm。也可用大塑料袋代替采集箱。还要预备枝剪、高枝剪、掘根器、手锯、海拔表 (测海拔高度) 、钢卷尺、方位盘、10倍放大镜、照相机、广口瓶、酒精、福尔马林、地图等。还有野外记录本和号签。野外采集应有现场记录, 记在专用野外记录本上, 按格式填写, 但其中几项最为重要, 如植物的土名、经济用途、生态环境、海拔高度、花、果的颜色等。因为花、果的颜色经标本夹压制后很容易变色, 影响正确鉴定种类。野外记录的同时对每份标本进行编号, 号码写在号签和野外记录本上, 二者必须一致, 这样可按号签查找野外记录。同一地点在同一时间内采的同一种标本, 一般要采集2~3份, 可编同一号数, 但不同地点、时间采集的认为是同种某一植物时, 则应分别编不同的号, 每份标本都应拴上号签, 以免差错。
1.4 植物腊叶标本的压制和整理
野外采集的标本开始夹在标本夹内还是湿的, 需要经过不断换纸吸水把它压干, 干得越快, 原来的色彩越容易保持, 否则可致标本变黑, 叶子脱落。刚压的标本, 头3天要每天换纸1~3次, 至少换1次, 压后第1次换纸时, 植物已基本压软了, 这时应对标本进行整理, 过多的重叠枝叶应剪去, 折皱的叶和花瓣应适当展开, 剪下或脱落的花、果、叶片应收集到小纸袋中, 和原标本放在一起, 以备将来解剖观察之用。3天过后每天换纸1次, 至完全干燥为止, 换下的湿纸应放日光下通风处晒干, 在极潮湿天气应将草纸加火烘烤。标本压干后要进行消毒, 将标本上的虫和虫卵杀死, 通常的方法是用升汞、四氯化碳或二硫化碳进行气熏消毒灭虫, 约熏3天即可取出, 也可放在-40℃低温冰箱中进行低温杀虫。杀虫后即可将标本取出装帧成合格的腊叶标本。 (将植物铺展在2层吸水纸和2层瓦楞纸中;将捆紧的标本夹放在架子上, 用100W的加热灯加热烤干) 。
1.5 腊叶标本的制作
压干的腊叶标本需要装贴在台纸上。台纸一般用厚道林纸、铜板纸或白板纸, 裁剪成29cm×42cm的尺寸, 此为国际标准尺寸。也可按8开裁剪, 即27cm×39cm的通用尺寸, 可节省纸张。
2 腊叶标本制作的具体方法与保存
2.1 修整
从数株同一植物中选择各器官最完整的植株做标本。先去残叶, 适当疏掉一些过密的枝条和过繁的花、叶、果。如果10朵大花聚集在一起时, 一般只留4~5朵为宜, 不过应留一小段花、果、叶梗, 以表明原来的生长情况。要使一个立体实物变为平面时, 则要剪去1/2或2/3才不致堆积。在吸水前必须整形, 即将标本的枝、叶、果、花展开平放, 避免重叠。尽量使标本既保持自然状态, 看上去很美观。对一些不便压制的浆果、块茎、块根, 则应进行浸制保存。
2.2 压制
在标本夹上铺上吸水纸数张, 将夹着植物标本的对折吸水纸放在上面, 压制前, 把对折吸水纸打开, 检查与矫正花、叶的位置, 把少数叶片和花翻过来, 以便对它们做全面观察。摆正后, 将吸水纸对折, 上面再铺几层吸水纸, 就可再放另一份植物了, 这样一层层加上去, 放齐。最后, 将标本夹用粗绳捆紧, 压上几十公斤重的大石块, 置通风处。次日换干纸时, 须再仔细加工整理标本。压制的第1天, 每隔5小时换干纸, 次日可每天换干纸2次, 再过2天, 24小时换1次, 一般植物标本需要3~7天。也可在第3天换纸后, 增加压力 (夹内有250~300份标本的夹板, 可施加125~150kg压力) 。置直射日光中, 使水分迅速蒸发, 可防止过度变色或发霉。多雨地区, 每日换干纸2次, 可置于微火上烘烤, 大约3~4日可制干。
标本的干燥程度怎样才是适度呢?可用手把标本拿起来, 没有干透的标本, 个别部分柔软易弯曲;过于干燥的标本, 很脆硬易折断;干燥适度的标本是有弹性的。
在压制过程中, 落下来的花、果、叶, 要用纸袋装起, 注明标本的号码, 以便上台纸时附上。
2.3 上台纸、贴标签
将干燥好了的标本放在台纸上, 摆好位置, 进行固定。固定时要注意标本的科学性、艺术性。固定可用结实的细纸条或玻璃纸条贴在枝条上, 再将纸条两端粘在台纸上, 或用小刀在固定处切一道小口, 把纸条的端头穿过小口, 贴在台纸的背面。也可用白棉线把标本钉在台纸上。小植物标本或枝条柔软的标本, 可用胶水涂在标本的背面, 直接粘贴在台纸上。上完台纸后, 要在台纸下方贴上标签。最后将一张与台纸同样大小的标本衬纸贴在台纸上端边缘上, 使标本得到保护。
再用线或纸条将枝干、果等部分缝牢, 或将台纸穿孔将纸条贴在背面。装订标本时, 在根、枝条和叶柄的两侧用扁锥穿通台纸, 穿进坚韧的纸条, 在台纸背面, 将纸条两端用胶水紧贴于台纸上。过小的标本如浮萍、小龙胆可将其装入纸袋中, 再把纸袋贴在台纸上。台纸的左上角贴1份已抄好的野外记录签, 台纸右下角贴定名签, 经过仔细鉴定后写出拉丁学名, 鉴定者应签上自己的名字, 以示负责。装有脱落花、果的纸袋也随之用曲别针卡在台纸上。
3 标本保存与注意事项
3.1 保存
腊叶标本本应分类放在标本柜或标本箱内, 标本之间应放樟脑丸, 以防虫蛀。春天和多雨季节应将标本放在通风干燥处, 以防标本发霉。如有标本室, 最好在初春关好门窗, 将福尔马林溶液在酒精灯上加热, 使蒸汽熏杀虫菌3天, 可防虫蛀霉烂。
3.2注意事项
采集时要保证叶片完整, 不受破损;制作时要用镊子, 避免留下指纹及污点;不宜在阴雨天进行;尽可能根茎叶花果实种子采集齐全;采集记录完整详细;有条件可以拍下生态照片。
摘要:本文阐述了标本的采集事项、腊叶标本的具体制作方法以及标本采集中应该注意到的问题。
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