化学成分鉴定

化学成分鉴定（共12篇）

化学成分鉴定 篇1

亚贡Smallanthussonchifolius,又名Yacon,雅贡,又有别名雪莲果、菊薯、雪莲薯等。菊科属植物,属多年生草本[1],是南美药食两用植物之一[2]。不仅在缓解二型糖尿病方面,特别适合糖尿病人及减肥者食用,而且在包括肠道功能紊乱在内的多种慢性疾病以及消化道和循环系统疾病、结肠癌等治疗领域[3,4,5]都有着较为显著的治疗作用。亚贡原产地出于南美的安第斯地区,在诸多国家均得到了广泛的研究与开发[6],亚贡后也被引种到多国,包括日本、美国、新西兰和欧洲等等。除此之外,亚贡同时也在我国的云南省、台湾省、海南省、江苏省、辽宁省等地有大量种植,并已被成功引种[2],随着成功引进,对亚贡的相关研究也越来越多。亚贡叶也具有广泛的药理活性,具备降血糖、抗菌、抗癌作用等临床作用[7],对亚贡叶中的化学成分进行分离并鉴定,可为广泛利用及分析亚贡叶中的成分打下基础。

1 仪器与材料

BRUKER-ARX-500核磁共振波谱仪,德国Bruker;ODS,日本富吉;890/5975C气相色谱/质谱联用仪,美国Agilent公司;HITACHI7100制备型高效液相色谱仪,日本;Agilent 1260高效液相色谱仪,美国安捷伦Agilent科技公司;色谱柱(YMC-PackODS-A,5μm,10 mm×250 mm,日本);柱色谱及TLC所用硅胶,青岛海洋化工厂;FA-1004电子天平,上海精科天平厂;旋转蒸发仪,予华仪器有限责任有限公司;DZF-6050真空干燥箱,上海一恒科技有限公司。

液相用甲醇(色谱纯级别),天津市大茂化学试剂厂;其它试剂为分析纯级别;亚贡叶于2012年采于辽宁省大连市开发区德胜镇,经辽宁中医药大学药学院康廷国教授鉴定,为菊科植物亚贡Smallanthussonichifolius的叶。

2 提取与分离

将干燥的亚贡叶(5.0 kg)粉碎至粗粉,用10倍量95%乙醇浸泡2 h,在60℃水浴下进行回流提取,过滤提取液,将剩余药渣再加入10倍量的95%乙醇提取,过滤,将两次滤液合并,用旋转蒸发仪,回收乙醇,旋至近干,置于真空干燥箱中进行干燥。上述提取所得干燥浸膏,用甲醇溶解,拌样采用100~200目硅胶,后进行分离,采用200~300目硅胶,梯度洗脱以二氯甲烷-甲醇作为洗脱剂,得到6个馏分,分别通过ODS和LH-20柱色谱以及半制备HPLC将馏分进行分离,最终从第1个馏分中分离得到化合物1,并将其波谱鉴定,从第3馏分中分离并鉴定得到化合物2和3,乙烷-甲醇洗脱,第2个馏分中分离并鉴定得到化合物4。

3 结构鉴定

3.1 化合物1

液体,无色油状。C20H36O2,在13C-NMR中,共给出20个碳信号数据,通过δ173.9可提示结构中含有1个羰基,δ130.23,130.07,128.07,127.94提示结构中含有4个烯碳原子,δ60.18,14.05提示机构中可能含有一个OCH2CH3,δ14.26提示结构中还含有另一个甲基。δ34.41,34.36,31.54,29.6,29.36,29.17,29.12,29.04,27.21,25.65,24.99,22.58则为剩余长脂肪链烃信号,经查阅文献[8]发现,化合物碳谱数据与亚油酸乙酯基本一致,因此初步判断化合物为亚油酸乙酯。信号归属如下:δ:173.9(C-1),130.23(C-9),130.07(C-10),128.07(C-12),127.94(C-13),60.18(C-1′),14.05(C-2′),22.58(C-17),14.26(C-18),δ24.99-34.41(C-2~C-8,C-11,C-14~C-16)。GC-MS,给出分子离子峰[M]+308.3,离子碎片峰279.3,263.3,245.2,220.2,195.2,178.2,150.1,123.1,95.1,67.1,41,数据库给出结果为亚油酸乙酯,结合碳谱数据最终确定化合物为亚油酸乙酯,结构如图1所示。

3.2 化合物2

白色无定型粉粉末无色针晶ent-18-hydroxykauran-16-en-19-oic acid,13C-NMR共给出20个碳信号,δ179.8(19-C)为羰基碳信号,δ156.8(16-C),δ103.7(17-C)为末端双键碳特征信号。δ70.1(18-C)为连氧碳特征信号,推测为ent-kaurane类化合物。将化合物光谱数据与文献[9]对比发现二者基本完全一致,因此鉴定该化合物为已知化合物ent-18-hydroxykauran-16-en-19-oic acid。其NMR数据归属如下:13C-NMR(CD3OD):179.8(19-C),156.9(16-C),103.7(17-C),70.8(18-C),56.6(5-C),52.3(9-C),50.8(4-C),50.1(15-C),49.4(8-C),45.2(13-C),42.2(3-C),41.7(7-C),40.8(1-C),40.5(10-C),34.2(14-C),33.1(12-C),22.8(6-C),19.8(11-C),19.5(2-C),16.5(20-C)。结构如图2所示。

3.3 化合物3

无定型粉末,白色,13C-NMR数据中共给出20个碳信号,δ183.7(19-C)为羰基碳信号,160.3(16-C),106.3(17-C)为末端双键碳特征信号。82.8(15-C)为连氧碳特征信号,推测为ent-kaurane类化合物。将化合物光谱数据与文献[10]对比发现二者基本完全一致,因此鉴定该化合物为已知化合物ent-15β-hydroxy-kaur-16-en-19-oic acid(Grandiflorolic acid)。其NMR数据归属如下:13C-NMR(CDCl3):183.7(19-C),160.3(16-C),108.3(17-C),82.8(15-C),57.1(5-C),53.4(9-C),47.8(8-C),43.8(4-C),42.4(13-C),40.8(1-C),39.9(10-C),37.9(3-C),36.3(7-C),35.3(14-C),32.6(12-C),29.0(18-C),21.0(6-C),19.1(2-C),18.3(11-C),15.9(20-C)。结构如图3所示。

3.4 化合物4

白色粉末,C20H24O6,13C-NMR共给出3个羰基信号,化学位移值分别为169.54,167.43,166.08,给出8个烯碳信号,化学位移值分别为142.37,137.7,135.85,135.45,131.2,126.14,126.02,120.49,提示结构中含有4个双键,化学位移75.78,67.34,52.04,提示可能存在3个连氧碳信号,52.04证实可能含有一个甲氧基,由上述低场区信号推测该结构可能为倍半萜内酯类化合物,剩余高场碳信号为结构中其它甲基,亚甲基,次甲基信号化学位移值分别为49.78,37.15,30.24,25.69,18.29,17.02。经文献[11]检索,发现碳谱数据与化合物8β-methacryloxymelampolide-14-oic acid methyl ester基本相同,因此确定化合物结构为8β-methacryloxymelampolide-14-oic acid methyl ester,信号归属如下:142.37(1-C),25.69(C-2),37.15(C-3),137.7(C-4),126.02(C-5),75.78(C-6),49.78(C-7),67.34(C-8),30.24(C-9),131.2(C-10),135.45(C-11),169.54(C-12),120.49(C-13),167.43(C-14),17.02(C-15),166.08(C-1′),135.85(C-2′),18.29(C-4′),52.04(C-COOMe)。结构如图4所示。

4 讨论

采用回流提取法对亚贡叶化学成分进行了提取分离以及鉴定,乙醇作为提取溶媒,可以提取亚贡叶中的大部分小分子化学成分,为阐明亚贡叶的药效物质基础奠定了基础。通过硅胶柱色谱,以不同比例和溶剂组成的流动相进行反复的柱层析,最终确定以二氯甲烷-甲醇为流动相,通过分离将亚贡叶醇提物按照极性大小分为不同部位,继而采用反相ODS柱色谱以不同浓度甲醇-水为洗脱剂继续进行洗脱剂洗脱,采用LH-20柱色谱,联合半制备高效液相色谱仪等分离手段联合应用,分离得到了单体化合物,并通过采用化学和13C-NMR、GC-MS等波谱技术,对分离得到的化合物进行了结构解析。本研究对亚贡叶的化学成分进行了进一步的了解,也为后期亚贡叶的研究奠定基础。

5 结论

采用硅胶柱色谱,ODS与凝胶柱色谱以及半制备色谱对亚贡叶乙醇提取物进行分离和纯化得到4个化合物,通过13C-NMR、GC-MS等谱学数据与文献进行对照分析,确定这些化合物分别是亚油酸乙酯(9E,12E)enyloctadeca-9,12-dienoate,ent-18-hydroxykautan-16-en-19-oic acid,Grandiflorolic acid。其中化合物1为首次从该植物中分离得到。

摘要：对亚贡叶中化学成分进行进一步分离研究,并对分离化合物进行结构鉴定和分析。通过采用ODS,硅胶柱色谱,凝胶柱色谱以及半制备色谱结合谱学数据鉴定的方法,对亚贡叶乙醇提取物进行分离。通过谱学鉴定,分离得到4个单体化合物,并将其分别确定为亚油酸乙酯(9E,12E)enyloctadeca-9,12-dienoate,ent-18-hydroxykautan-16-en-19-oic acid,Grandiflorolic acid和8β-methacryloxymelampolide-14-oic acid methyl ester。其中化合物亚油酸乙酯为首次从亚贡叶中分离得到。

关键词：亚贡叶,亚油酸乙酯,分离鉴定

化学成分鉴定 篇2

课题：鉴定骨的成分

课型：实验课

一、目的要求：

1、 知道骨的成分和物理特性

2、 学会鉴定骨的成分，通过实验，培养学生的实验能力和分析、综合的思维能力。

二、材料用具：

大鱼的肋骨或小动物的一段骨，镊子，酒精灯，试管，质量分数为15%的盐酸，清水，火柴。

三、教学过程()：

1、 诊断补偿：

1) 骨的结构包括那三部分?

2) 骨髓填充在 和 的空隙内。

2、 实验步骤：

1)、骨的.煅烧：用镊子夹住一段骨，放在酒精灯上煅烧，同时注意观察骨的颜色变化，待骨变得 时，将酒精灯移开，轻轻地敲打这根煅烧骨，看结果如何? 。

2)、骨的脱钙：将大鱼的一根肋骨浸入试管里质量分数为 的盐酸中，过15分钟左右，用镊子夹住 ，看它是否变得软了，如果已经变柔软，即可取出，用 洗去盐酸。试一试，能否将这根肋骨弯曲或打成结?

讨论：

1)、在骨的煅烧或脱钙过程中，你观察到哪些现象?这些现象说明了什么?

2)、煅烧后的骨和脱钙的骨各有什么物理特性?

3)、实验结果说明了什么?

3、 注意的问题：

1)、酒精灯正确使用

2)、鱼骨从盐酸中取出要用清水冲洗去盐酸，并避免损伤皮肤。

4、 讨论、分析归纳，得出结论：

1)、实验结果说明骨是由硬脆的无机物和柔韧的有机物组成。

2)、骨的物理特性主要表现在硬度和弹性两个方面。

5、 填写实验报告册，小组讨论矫正。

东当归化学成分分析 篇3

方法：理化特性及波谱分析。

结果：东当归中含有四种化合物。

结论：经波谱分析为十七烷酸、甾醇类化合物、挥发油物质及多炔类化合物。

关键词：东当归 化学成分 波谱分析

East Angelica chemical composition analysis

Wu Yang

Abstract：Objective：East Angelica chemical composition analysis

Methods：Physical and chemical properties and spectral analysis.

Result：East Angelica contains four compounds.

Conclusion：The spectral analysis of heptadecanoic acid， sterols， volatile oil substances and acetylene compounds.

Keywords：East Angelica Chemical composition Spectral analysis

【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1008-1879（2012）09-0015-02

当归是伞形科（Umbelliferae），当归属（Angelica）植物属，主要分布在北温带（中国、朝鲜、韩国、日本）和新西兰，国常用中药，性温，味甘、辛，始载于《神农本草经》，列为中品，能补血活血、调经止痛、润肠通便。用于血虚晕眩，月经不调，经闭痛经，虚寒腹痛的功效[1]。入药部位为伞形科植物东当归Angelica acu tiloba（siebl etZucc）kigusticum acu tilobuml Siebet Zuce的根[2]。

1 仪器材料

Bruker DRX 500超导核磁共振波谱仪；Pekin-Elmer 983G型红外光谱仪；ZAB-HS型质谱仪。200～300目柱色谱硅胶，GF254薄层色谱硅胶。

色谱纯为实验用甲醇和乙腈，水为三蒸水，其他试剂均为分析纯。

2 提取分离

取东当归根干燥品1.0kg，85%乙醇冷浸，2次，分别为20、30d。将2次滤液合并，浓缩回收乙醇，得到东当归粗浸膏110.0g。用水混悬粗浸膏，然后经乙醚萃取，再除去溶剂后得干浸膏质量为25.0g。取15.0g干浸膏进硅胶柱层析分离，以正己烷∶乙酸乙酯=12∶1→2∶1梯度洗脱，得到Fr.EA（10∶1），Fr.EB（8∶1），Fr.EC（5∶1），Fr.ED（2∶1）4个粗组分。经反复硅胶柱层析及Sephadex LH-20凝胶柱层析纯化，由Fr.EC（5∶1）部分分得化合物1（30mg），Fr.EB（8∶1）部分分得化合物2（45mg），Fr.ED（2∶1）部分分得化合物3（40mg）和4（70mg）。

3 鉴定结构

3.1 化合物1。化合物1为白色粉末（氯仿），mp.60～61℃。IR（KBr）vmax：2918，2849，1702，1468，1410，1294，1272，觀察红外谱，可得一系列饱和烃基存在，同时还具有羰基的吸收峰及C-O伸缩振动的吸收峰，为十七烷酸。

3.2 化合物2。化合物2为白色粉末（正己烷-乙酸乙酯），mp.127～128℃，Liebermann-Burchard反应呈阳性。通过对比参考文献，此化合物为甾醇类化合物。

3.3 化合物3。棕黄色油状化合物，EI-MSm/z：126；IR（KBr）vmax：3386，2846，1673，1522，1397，1192，1023，811cm-1；1H NMR（600MHz，CDCl3）δ：3.91（-OH），4.67（H-6），6.49（H-4），7.21（H-3），9.51（CHO）；13CNMR（125MHz，CDCl3）δ：57.4（C-6），161.1（C-5），110.0（C-4），123.4（C-3），152.2（C-2），177.8（CO）。以上数据与文献报道的5-羟甲基糠醛一致，为东当归的挥发油物质。

3.4 化合物4。化合物4为淡黄色针晶（甲醇），mp.108～109℃。EI-MS m/z：234，205，138，125，109（基峰），95；TOF-HRMSm/z：235.0585[M+H]+（235.0606），分子式为C12H10O5；IR（KBr）vmax：3111，2849，1671，1523cm-1。碳谱核磁共振谱（δ177.7）和质子核磁共振谱（δ9.62）信号表明该化合物含醛基。质子核磁共振谱显示出四组峰号，峰面积比值为1∶1∶1∶2，碳谱核磁共振谱有6个碳信号，说明其为对称结构的化合物。13CNMR（125MHz，CDCl3）δ：64.6（C-6，C-6’）177.7（CO），具4个芳碳信号，鉴定为呋喃环；1HNMR（600MHz，CDCl3）δ：4.63（H-6，H-6’，-CH2O-部分结构），对比参考文献[8]为多炔类化合物。

4 结论

本文通过对东当归进行提取分离，并对其分离物进行分析，得到东当归中所含有的四类化合物，分别为十七烷酸、甾醇类化合物、挥发油物质及多炔类化合物。为今后对东当归的药理活性研究提供基础依据。

参考文献

[1] 杨连菊，钟风林，胡世林，等.当归与日本当归挥发油中化学组分的比较[J].中草药，2004，35（10）：1093

化学成分鉴定 篇4

1材料与方法

1.1材料

原材料野艾购于深圳市福田区中医院, 产地广东, 超临界萃取装置、气相色谱-质谱联用仪等均为国内研发制作。试验所用蒸馏水均采用自动双重纯水蒸馏器制作。 菌株均来自武汉大学的菌种保藏中心, 实验采用牛肉汁蛋白胨培养基 (酵母浸膏1 g, 牛肉浸膏4 g, 蛋白胨10 g, 葡萄糖10 g, 琼脂15 g, 水1 L, pH= 7.0, 121℃灭菌30 min) 培养。

1.2方法

1.2.1挥发油提取

采用超临界CO2萃取法进行挥发油提取[1,2]:①将收集的野艾地上部分洗净阴干切碎, 称重为8.9 kg, 装入萃取装置;②萃取装置温度设置为35℃, 通入CO2, 排出装置中的空气;③打开压缩机, 调节仪器内部压强保持在16 MPa, 调节CO2出口阀, 保存20 kg/h;持续80 min, 打开分离器, 取出萃取物;④关闭萃取装置, 放空CO2, 取出挥发油粗制提取物, 然后放入2倍的无水乙醇, 搅拌均匀, 静止24 h;⑤真空抽滤, 再除去蜡质沉淀物, 最后将滤液在30°回收乙醇, 得到精制野艾挥发油。

1.2.2抑菌圈测定

试验对野艾挥发油的抑菌效果测定使用的是滤纸片琼脂平板扩散法[3]。 首先, 在三个固体平板均匀涂上牛肉汁蛋白胨培养液;其次, 取已灭菌的滤纸片 (7 mm) 粘取约15 μL已稀释好的挥发油样品置于平板上, 每个菌种取6个平行组;最后, 放入培养箱中培养, 细菌组温度为36℃, 24 h, 真菌组温度为27℃, 48 h, 测算菌落直径3次求取平均值, 并以左旋氧氟沙星为对照。

1.2.3最低杀菌浓度 (MIC) 和最低抑菌浓度 (MBC) 的测定

采用稀释法对MCI和MBC进行测定[4]。 在96孔的平板上涂上液体培养基、接种菌落、再加入已稀释好的各浓度挥发油样品。 放入培养箱中培养, 细菌组温度为36℃, 24 h, 真菌组温度为27℃, 48 h, 后观察, 每个菌种的每个挥发油样品相同稀释度的实验各三组, 重复两次。 MIC的确定标准[5]:肉眼无法观察到培养基内培养物浑浊的样品为最低抑菌浓度。 MBC的确定标准:首先是取出培养后无浑浊的平板再培养, 以再培养后平板无菌落生成为最低样品的抑制浓度。 并以左旋氧氟沙星为对照。

1.2.4使用质谱联用仪对野艾挥发油进行化学成分分离鉴定

首先, 将挥发油样品以1∶5的比例溶于乙酸乙酯, 摇匀, 分流进样。 鉴定分以下两个部分:

1.2.4.1色谱条件色谱柱 (25 m×0.25 mm) , 柱温:前两分钟保持45℃, 再以5℃每分钟的速度提高至100℃, 保持2 min, 再以10℃每分钟提高到220℃, 进样量:0.5 μL, 流速:1 mL/min, 载气:He, 分流比:30。 采用归一化法计算其相对的百分比含量。

1.2.4.2质谱条件进物口温度220℃, EL电离方式, 电离电压为70 EV, 离子源温度为330℃, 扫描范围为35~350 amu, 各组成成分分子式通过NIST进行检索。

1.3统计学方法

采用统计软件SPSS 15.0对实验数据进行分析, 计量资料数据以均数±标准差 (x±s) 表示, 采用t检验。 计数资料以率表示, 采用 χ2检验。 以P < 0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1野艾挥发油结果和化学成分GC-MS分析

经气相色谱分离出挥发油中的39种成分, 再经质谱图NIST检索确认, 再用面积归一化法, 分析出其各自的相对含量, 其余成分因各种原因未能确认。 表1结果显示, 野艾挥发油主要的五种成分分别是蒿酮 (15.52% ) 、 蒿醇 (9.63% ) 、 顺式丁香烯 (8.71% ) 、 艾醇 (7.37%) 和桉叶素 (6.47%) 等。

2.2野艾挥发油对三类菌的抗菌效果

对革兰阳性菌的抗菌效果相对较好, 对真菌的效果一般, 对革兰阴性菌无效。 具体见表2。

3讨论

试验对野艾挥发油的化学成分研究采用了气-质联用的分析方法, 首先通过使用超临界CO2萃取法对野艾挥发油进行分类提纯鉴定[6], 其次再使用气相色谱对挥发油进行成分分离鉴定, 查出挥发油中所含有的各化学成分组成, 再利用归一法测算挥发油中各化学成分的相对百分含量, 最后再通过质谱联用仪进行确定, 采用NIST计算机分子库进行自动检索, 确定挥发油中的各种化学成分及其含量[7]。

注:DD:抑菌圈直径;MIC:最低杀菌浓度;MBC:最低抑菌浓度

试验中对于野艾的杀菌抑菌研究也表明野艾挥发油对测试菌种有较强的抑制和杀灭作用, 尤其是对革兰阳性菌的杀菌活性很强[8]。 在过往的研究中也曾有过类似的报道[9,10,11], 蒿酮、蒿醇和桉叶素对革兰阳性菌有很强的的杀灭作用, 对部分真菌和革兰阴性菌也有抑制作用, 在这种也可以看出这三种物质是野艾抗菌的物质基础, 野艾挥发油对几种细菌的生长抑制作用会随着挥发油浓度的提高而加强[12,13,14,15]。

本文对挥发油抗菌活性的研究还利用了挥发油中芳香类化合物包括柠檬烯、 蒎烯等的抗菌作用, 尤其是萜类的化合物。 有数据显示[4], 芳香族化合物 (例如柠檬烯) 的特点是:其一, 具有较强的香气;其二, 具有较好的抗菌效果;其三, 具有较高的药物成分;其四, 具有较大的生物活性。 因此可将其作为制作生态抗病毒杀菌剂的合理材料。

摘要：目的 对中药野艾的药用价值进行研究, 主要对其挥发物进行抑菌活性研究及化学成分进行分离鉴定, 进而为野艾的药用价值寻找依据。方法 ①采用超临界二氧化碳 (CO2) 萃取法提取野艾的挥发油, 然后测定挥发油对于革兰阳性菌、革兰阴性菌和真菌的杀菌抑制作用;②使用气相色谱-质谱联用仪对挥发油进行化学成分分离鉴定。结果 ①挥发油对革兰阳性菌杀菌效果较好, 对真菌的效果一般, 对3种革兰阴性菌无杀菌活性;②分离鉴定出39种成分, 野艾挥发油主要成分是蒿酮 (15.47%) 、蒿醇 (9.55%) 、顺式丁香烯 (8.85%) 、艾醇 (7.28%) 和桉叶素 (6.78%) 等。结论 挥发油对所测试的菌落有很好抑制作用, 对革兰阳性菌有很好的杀菌作用。

卤水的化学成分 篇5

矿化很强的.水。常用以提取某些化工原料，如食盐、碘、硼、溴等。中国四川自贡自古即以盛产卤水闻名。

定义一：盐类含量大于5%的液态矿产。聚集于地表的称表卤水或湖卤水。聚集于地面以下者称地下卤水。与石油聚集一起的称石油卤水。

定义二：在烹饪美食过程中，经过各种食用香料调制而成的液状物质，也被常称之为卤汁，用于制作各类卤菜。

华南金粟兰的化学成分研究 篇6

关键词：华南金粟兰；化学成分；分离

中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2011）-04-0101-2

0 前言

华南金粟兰 Chloranthus seeilifolius K.F.Wu Var. austro-sinensis K. F. Wu是金粟蘭科(Chloranthaceae)，四川金粟兰(Chloranthus seeilifolius K. F.Wu)的变种，本种产于江西等地。生于阴凉地，海拔560-1200m[1]。据《本草纲目》等多种历代本草文献记载，该属中的大多数植物都有一定药用记载，如治疗风湿疼痛，跌打损伤，咳嗽，干血痨等症状，被中国药典或地方中药标准收载[2]。金粟兰属药用植物的化学成分主要为挥发油成分，其中倍半萜化合物居多，特有的倍半萜多聚体，此外，一些酰胺类化合物和香豆素类化合物，生物碱类也有报道，该属中的及已，金粟兰银线草等有效成分研究的较多，主要报道的化合物类型为桉烷型，钓樟烷形等基本种骨架类型倍半萜，以及它们的多聚体[3-5]。

为进一步寻找具有结构新颖活性较高的化合物，笔者对华南金粟兰化学成分进行研究，从中分离得到了3个化合物，经过波谱解析并结合文献对照，分别鉴定为7-(4-acetylphenyl)-1′-butyl-2-methyl-benzopyranyl(1)8-hydroxy-6,7-dimethoxy-2H-chromen-2-one(2)，(8R,8′R)-4′,3-二甲氧基-4-乙酰基-9-氧代-8-8′,9-9′-木脂素(3)。

1 仪器和材料

旋光仪用Hobiba SEPA-300型旋光光度计；ESI质谱使用Water 2695 HPLC-Thermo 1D-NMR使用Bruker AM-400 核磁共振仪测定。柱层析所用的硅胶（200-300目），硅胶H（10-40μm），硅胶GF254,GF254硅胶板(青岛美高化工有限公司)；凝胶为Sephadex LH-20(40-70μm)；反向填充材料RP-18（40-63μm）。

2 提取和分离

干燥经粉碎的华南金粟兰（7kg）用80%乙醇室温下提取，共5次，每次48h。将提取液回收乙醇得到浸膏经过大孔树脂，用40%，70%，90%乙醇洗脱，得到三部分，分别为214g，360g，30g。经过TLC检测，10%硫酸乙醇显色。I：70%与90%部分的经过硅胶柱用石油醚乙酸乙酯为流动相，得谷甾醇及色带物；II：40%乙醇洗脱部分经过氯仿-甲醇（1:0→1:4）硅胶柱，洗脱分段，各部分经过正向硅胶，重结晶等分离方法具体分离，得到化合物1(23g)，2(18g)，3(25g)。

3 结构鉴定

化合物 1：白色粉末，分子式为C21H24O3，分子量为： 324.17。 1H NMR: H-2′(6.2 s), H-3′(5.87 d J=2.4 Hz), H-6′(6.2 d J=5.8 Hz), H-7′(2.4 dd J=12.8, 10.3 Hz), H-8′(2.0 dd J=12.6, 4.3 Hz), H-9′(0,85 s), H-2(7.6 d J=1.9Hz), H-3(7.4 d J=8.0 Hz), H-5(7.4 d J=7.8 Hz), H-6(7.4 d J=1.8 Hz), H-7(4.2), H-8(5.4), H-9(0.89 s)；13C NMR: C-1′δ115.2; C-2′δ115.6;C-3′δ126.8； C-4′δ158.2； C-5′δ115.2； C-6′δ115.0； C-7′δ36.8； C-8′δ28.0； C-9′δ13.5；C-1 δ132.1； C-2 δ115.4； C-3 δ129.8； C-4 δ144.8； C-5δ129.8； C-6 δ115.3； C-7 δ80.2； C-8 δ44.9； (OAC δ168.5；δ20.5； CH3δ18.8； CH3 δ13.5)；通过查阅文献并且与分析手册第7分册（核磁波谱）中苯并呋喃类木脂素C，H化学位移相近，得出化合物1的结构如图，为文献中报道的化合物一致[6]。

化合物2：白色粉末，分子式为C11H10O5，分子量为：1H NMR:222.05，H-3(6.24)，H-4(7.60 d J=8.4Hz)，H-5(7.3)， H-8(6.6)，H-OMe(3.9 s，4.0s)；13C NMR：C-2 δ160.8；C-3δ113.3；C-4δ143.9；C-5 δ160.8；C-6δ134.4；C-7δ142.5；C-8 δ142.9；C-9 δ144.6；C-10δ111.1；OCH3- C6 δ56.4；OCH3- C7 δ61.5；根据谱图数据解析得香豆素[7]。

化合物3：白色粉末，分子式为C22H24O6，分子量为：384.16。1H NMR:H-2′(6.65 d J=1.7Hz)，H-3′(6.75 d J=2.3Hz)，H-5′(6.75 d J=4.1Hz)，H-6′(6.75 d J=1.9Hz)，H-7′(2.66 d，3.05d. J=10.3，4.5Hz)，H-8′(3.84 m)，H-2(7.11 d J=1.8Hz)，H-5(7.11 d J=1.6Hz)，H-6(7.21 d J=2.0Hz)，H-7(2.45 d，3.16 d. J=12.1，7.8Hz)，H-8(3.90 m)，H-9(4.28). H-OMe(3.8 s, 3.9s)13C NMR:C-1′δ129.1；C-2′δ127.0；C-3′δ128.5； C-4′δ136.6；C-5′δ128.6；C-6′δ126.7；C-7′δ37.4；C-8′δ54.9； C-9′δ170.7；C-1δ129.1；C-2δ127.1；C-3δ131.8；C-4δ136.7；C-5δ128.7；C-6δ128.5；C-7δ38.4；C-8δ54.9；C-9δ64.6；OAc(δ167，δ20)，经鉴定为丁烷衍生物类木脂素[8]。

4 讨论

华南金粟兰中分离得到的化合物1和3，因为苯环上多连有OCH3，而化学位移在55-62，苯环上的各碳的化学位移基本上与取代的苯环的化学位移相同，低场区的C较多，多为苯环，符合木脂素的基本特征，故而解析正确为木脂素。化合物2，在C NMR中具有在低场区的159-162的羰基，C-9，C-10的化学位移，由于受到α-吡喃环的氧的影响，一般情况在149-154双峰，苯环上多具有羟基，甲氧基取代基，符合香豆素的特征峰，故而化合物2为香豆素。

参考文献

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[8] Miller R W et al.J.N.P.,1982,45,78.

蕲艾化学成分研究 篇7

1 实验

1.1 仪器

LCQ fleet LC/M Sn液/质联用仪(Thermo scientific公司),UV/V-16/18型紫外/可见分光光度计(上海美谱达仪器有限公司);BRUKER DRX-500MHz和AM-400MHz型超导核磁共振仪;Ultimate-3000半制备高效液相色谱仪(DIONEX公司);薄层层析硅胶板GF254(青岛海洋化工厂);HP-20大孔吸附树脂(郑州勤实科技有限公司);MCI GEL CHP-20(Mitsubishi Chemical公司);Sephadex LH-20(18-111um)(GE Amersham公司);SP-120-10-C18-BIO半制备柱(10mm×250mm,苏州环球色谱有限责任公司),其它试剂均为分析纯。

1.2 植物材料

艾叶(Artermisia argyi Levl.et Vant)的叶于2009年端午节采于湖北蕲春县,品种鉴定和药材提供由湖北省蕲春县医药工业办公室郭双喜工程师完成,药材标本(编号20090025B)存放于中南民族大学药学院标本室。

1.3 提取与分离

干燥的艾叶3kg粉碎后均分成3份后,分别置于25L酒精桶中以60%乙醇20L浸提2次,每次7天,过滤,合并滤液用减压回收溶剂,浓缩至小体积后用旋转蒸发仪蒸干得浸膏686g。取400g粗提物浸膏用一定量的蒸馏水(1.0L)混悬后置于3 000mL分液漏斗中,分别用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取3次,合并萃取液后回收溶剂,得石油醚部位34.2g,二氯甲烷部位92.7g,乙酸乙酯部位30.8g,正丁醇部位53.4g。

取30.8g乙酸乙酯部位上HP-20大孔吸附树脂柱分离,依次用10%、30%、50%、70%MeOH进行洗脱,TLC板检测,合并洗脱液得到5个不同流分(Fr1~Fr5)。取Fr3(4.43g)干法拌样上CHP-20 MCI gel,用甲醇-水(1∶9~1∶0)梯度洗脱,200mL/份收集,TLC板检测合并分成4个组分。631mg组分2经Sephadex LH-20(1000mm×20mm)柱层析,甲醇洗脱,以去除色素,经纯化的组分A进行高效液相色谱半制备得化合物1(13.5mg)、化合物2(21.4mg)和化合物3(9.6mg);用同样方法,548mg组分3经Sephadex LH-20纯化后,进行高效液相色谱半制备得化合物4(7mg)、5(142mg)和6(210mg)。

2 结构鉴定

5,7,3′,4′-四羟基二氢黄酮(1):黄白色粉末(MeOH);TLC遇10%硫酸乙醇加热显黄色;UV(MeOH)λmax(nm):219,289;EIS-MS:m/z 287[M+H]+;1 H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.16(1H,s,OH),6.89(1H,s,H-5′),6.78(2H,d,J=,H-2′,6′),5.90(1H,s,H-6,8),5.40(1H,dd,J=3.2,12.4Hz),3.32(1H,dd,J=12.4,17.2 Hz,H-3α),2.70(1H,dd,J=3.2,12.4Hz),3.32(1H,dd,J=12.4,17.2Hz,H-3β);13C-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ196.4(C-4),166.8(C-7),163.5(C-5),162.9(C-9),145.8(C-3′),145.2(C-4′),129.5(C-1′),118.0(C-6′),115.4(C-5′),114.4(C-2′),101.8(C-10),95.8(C-6),95.0(C-8),78.5(C-2),42.1(C-3)。其波谱数据与文献[6]报道的5,7,3′,4′-四羟基二氢黄酮一致,故鉴定化合物1为5,7,3′,4′-四羟基二氢黄酮,并且该化合物系首次从艾叶中分离得到。

5,7,3′,4′-四羟基,6-甲氧基黄酮(2):黄色针晶(MeOH);TLC遇10%硫酸乙醇加热显黄色;UV(MeOH)λmax(nm):214,274,347;EIS-MS:m/z 317[M+H]+;1 H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.10(1H,s,5-OH),10.84(1H,s,7-OH),7.43(2H,m,H-2′,6′),6.91(1H,d,J=8Hz,H-5′),6.68(1H,s,H-3),6.58(1H,s,H-8),3.73(3H,s,OCH3);13C-NMR(500MHz,DMSO-d6),δ182.0(C-4),163.9(C-2),157.9(C-7),152.8(C-9),152.5(C-5),149.8(C-4′),145.8(C-3′),131.5(C-6),121.5(C-1′),119.0(C-6′),113.4(C-2′),103.9(C-10),102.4(C-3),94.2(C-8),59.9(C-OCH3)。其波谱数据与文献[7]报道的5,7,3′,4′-四羟基,6-甲氧基黄酮一致,故鉴定化合物2为5,7,3′,4′-四羟基,6-甲氧基黄酮,并且该化合物系首次从艾叶中分离得到。

5,7,4′,5′-四羟基,3′,6-二甲氧基黄酮(3):黄色粉末(MeOH);TLC遇10%硫酸乙醇加热显黄色;UV(MeOH)λmax(nm):215,257,351;EIS-MS:m/z 347[M+H]+;1 H-NMR(500MHz,DMSO-d6):δ12.95(1H,s,5-OH),7.14(2H,d,J=5.5Hz,H-2′,6′),6.80(1H,s,H-3),6.55(1H,s,H-3),3.73(3H,s,OCH3);13C-NMR(500MHz,DMSO-d6),δ182.3(C-4),164.1(C-2),159.2(C-9),153.1(C-5),153.0(C-7),149.1(C-3′),146.5(C-5′),139.3(C-4′),132.1(C-6),120.8(C-1′),107.9(C-2′),104.0(C-10),103.1(C-3),102.8(C-6′),94.9(C-3),60.3(3′C-OCH3),56.7(6C-OCH3)。其波谱数据与文献[8]报道的5,7,4′,5′--四羟基,3′,6-二甲氧基黄酮一致,故鉴定化合物3为5,7,4′,5′-四羟基,3′,6-二甲氧基黄酮,并且该化合物系首次从艾叶中分离得到。

芹菜素(4):黄色粉末(MeOH);TLC遇10%硫酸乙醇加热显黄色;UV(MeOH)λmax(nm):220,269,335;EIS-MS:m/z 271[M+H]+;1 H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.95(1H,s,5-OH),7.94(2H,d,J=8.8Hz,H-2′,6′),6.97(2H,d,J=8.4Hz H-3′,5′),6.80(1H,s,H-3),6.51(1H,d,J=1.6Hz H-6),6.20(1H,d,J=1.6Hz H-8);13C-NMR(500 MHz,DMSO-d6),δ181.7(C-4),164.7(C-7),163.7(C-2),161.5(C-5),161.3(C-4′),157.4(C-9),128.5(C-2′,6′),121.2(C-1′),116.0(C-3′,5′),103.5(C-10),102.8(C-3),99.0(C-6),94.1(C-8)。其波谱数据与文献[9]报道的芹菜素一致,故鉴定化合物4为芹菜素(apigenin)。

木樨草素(5):淡黄色粉末(MeOH);TLC遇10%硫酸乙醇加热显黄色;UV(MeOH)λmax(nm):214,253,349;EIS-MS:m/z 287[M+H]+;1 H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.99(1H,s,5-OH),7.42~7.44(2H,m,J=8.8Hz,H-2′,6′),6.91(1H,d,J=8 Hz H-5′),6.88(1H,s,H-3),6.47(1H,d,J=2Hz H-8),6.20(1H,d,J=2 Hz H-6);13C-NMR(500 MHz,DMSO-d6),δ181.7(C-4),164.1(C-7),163.9(C-2),161.5(C-5),157.3(C-9),149.7(C-4′),145.7(C-3′),121.6(C-1′),119.0(C-6′),116.0(C-5′),113.4(C-2′),103.7(C-10),102.9(C-3),98.9(C-6),93.9(C-8)。其波谱数据与文献[10]报道的木樨草素(5)一致,故鉴定化合物5为木樨草素(luteolin)。

槲皮素(6):黄色粉末(MeOH);TLC遇10%硫酸乙醇加热显黄色;UV(MeOH)λmax(nm):207,256,370;EIS-MS:m/z 302[M+H]+;1 H-NMR(400 MHz,DMSO-d6):7.70(1H,d,J=2.4Hz,H-2′),7.56(1H,dd,J=8.4,2.0 Hz,H-6′),6.91(1H,d,J=8.8 Hz,H-5′),6.43(1H,d,J=1.6Hz,H-8),6.22(1H,d,J=2.4Hz H-6)。其波谱数据与文献[11]报道的槲皮素一致,故鉴定化合物6为槲皮素(quercetin)。

化合物1~6的化学结构式见图1。

参考文献

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白鹤藤化学成分研究 篇8

1 仪器与材料

BRUKER AV-500型核磁共振波谱仪;JEOLJMS-700型质谱仪;X-4型显微熔点测定仪(温度计未校正);RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);柱色谱用硅胶(200～300目);薄层色谱用硅胶板(GF254) (青岛海洋化工厂,批号:20111008);羧甲基纤维素钠(广东汕头市西陇化工厂,批号:20110623);水为重蒸馏水;其它试剂均为分析纯。药材购自广州清平药材市场,标本存放于广东省食品药品职业技术学校。

2 提取与分离

取白鹤藤药材5kg,粉碎,加95%乙醇(液料比为5∶1)进行回流提取3次,2h/次,过滤,减压回收乙醇得乙醇提取物240g。取乙醇提取物200g,将其用水分散,并依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到氯仿部位90g。氯仿提取物经硅胶柱色谱分离,用石油醚-乙酸乙酯 (100∶0～7∶3),每500mL收集1份,经薄层色谱检查,合并相同斑点的流分,共得到3个流分(Fr.A～Fr.C)。Fr.A经反复硅胶柱分离,以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱(100∶0～1∶1),得化合物(Ⅳ)(60mg); Fr.B经反复硅胶柱分离,以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱(9∶1～1∶1),得化合物(Ⅰ) (25mg)、(Ⅱ)(30mg)、(Ⅲ)(13mg);Fr.C经反复硅胶柱分离,以氯仿-甲醇梯度洗脱(9∶1～7∶3),得化合物(Ⅴ)(50mg)。

3 结构鉴定

化合物Ⅰ:白色粉末(乙酸乙酯),mp 271～272℃,Liebermann-Burchard反应阳性。1H-NMR (500MHz,CDCl3)δ:0.82,0.86,0.94,0.95,0.95,1.09,each 3H,s,0.91,0.91,6H,s;3.40(1H,t,J=3.5Hz),5.52(1H,dd,J=10.5,4.0Hz)。13C-NMR(125MHz,CDCl3)δ:38.0(C-1),26.1(C-2),76.2(C-3),39.2(C-4),55.9(C-5),18.8(C-6),35.1(C-7),38.8(C-8),48.9(C-9),37.5(C-10),17.4(C-11),35.8(C-12),37.7(C-13),158.2(C-14),116.7(C-15),36.7(C-16),37.4(C-17),49.3(C-18),41.2(C-19),28.8(C-20),33.8(C-21),33.1(C-22),28.2(C-23),15.2(C-24),15.4(C-25),29.8(C-26),25.1(C-27),29.9(C-28),33.3(C-29),21.2(C-30)。通过与文献[5]对照将Ⅰ鉴定为蒲公英萜醇。

化合物Ⅱ:白色粉末(乙酸乙酯),mp 72～73℃。1 H-NMR(500MHz,CDCl3)δ:0.88(3H,t,J=6.5Hz),1.25(30H,m),1.55(2H,dd,J=14.5,7.0Hz),3.64(2H,t,J=6.5Hz)。13C-NMR(125MHz,CDCl3)δ:62.6(C-1),32.4(C-2),31.5(C-3),25.3(C-4),29.3～28.9(C-5～16),22.3(C-17),l 3.7(C-18)。通过与文献[6]对照将Ⅱ鉴定为十八烷醇。

化合物Ⅲ:无色针状结晶(乙酸乙酯),mp 128～130℃。Liebermann-Burchard反应阳性。1 H-NMR(500MHz,CDCl3)δ:0.69,1.02(each 3H,s),0.82(3H,d,J=8.5Hz),0.85(3H,d,J=4.5Hz),0.93(6H,d,J=8.0Hz),3.51(1H,m),5.03(1H,dd,J=19.0,10.5Hz),5.17(1H,dd,J=19.0,10.5 Hz),5.36(1H,d,J=6.5 Hz)。13 C-NMR(125MHz,CDCl3)δ:31.6(C-1),31.8(C-2),71.8(C-3),39.7(C-4),140.7(C-5),121.7(C-6),31.8(C-7),31.7(C-8),50.1(C-9),36.5(C-10),21.0(C-11),39.7(C-12),42.2(C-13),56.0(C-14),24.4(C-15),29.0(C-16),56.8(C-17),12.0(C-18),19.4(C-19),40.5(C-20),21.2(C-21),138.3(C-22),129.2(C-23),129.2(C-24),31.9(C-25),21.0(C-26),19.0(C-27),25.4(C-28),12.2(C-29)。通过与文献[7]对照将Ⅲ鉴定为豆甾醇。

化合物Ⅳ:无色针晶(石油醚-乙酸乙酯),mp139～141℃。El-MS m/z:414[M]+。Liebermann-Burchard反应阳性,提示其为不饱和甾醇类化合物。与β-谷甾醇标准品混合后在薄层色谱上显示为同一个斑点,与β-谷甾醇标准品混合熔点不下降,由此将Ⅳ鉴定为β-谷甾醇。

化合物Ⅴ:白色粉末(氯仿-甲醇),mp 279～282℃。Liebermann-Burchard反应阳性,提示其为不饱和甾醇类化合物,Molish反应阳性,提示为苷类化合物,与胡萝卜苷标准品混合后在薄层色谱上显示为同一个斑点,与胡萝卜苷标准品混合熔点不下降,由此将Ⅴ鉴定为β-胡萝卜苷。

参考文献

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蜂蜜化学成分研究概况 篇9

蜂蜜 (honey) 是由蜜蜂科昆虫意大利蜜蜂A.mellifera L.及中华蜜蜂Apiscerana Fabricius从植物活体上或植物活体分泌物中吸收植物花粉, 并与自身分泌物结合后, 经充分转化、脱水、在蜂巢中存放酿造待成熟后而形成的天然甜物质, 是目前人们公认的一种营养丰富、健康的天然食品。国内外学者对其化学成分、生物活性、功能性及质量安全的研究探讨也日渐深化。

1 糖类

糖类物质是蜂蜜中含量最高的物质, 包含单糖, 低聚糖和多糖, 如, 果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等, 其中以果糖和葡萄糖含量最高, 占总糖的85%~95%, 蜂蜜的结晶程度与这2种糖的含量及比例相关, 其中葡萄糖的含量直接影响蜂蜜的结晶量。在成熟蜜所含的各种寡糖中, 麦芽糖含量较高。根据GB14963-2011中规定, 蜂蜜中果糖和葡萄糖含量≥60 (g/100g) , 一些学者利用HPLC、紫外光谱或近红外光谱等方法, 对蜂蜜中的糖进行了定性、定量分析, 为蜂蜜中糖含量测定提供了一定实用价值。

2 多酚类化合物

蜂蜜中酚类的含量仅次于糖, 是致使蜂蜜颜色产生差异的主要物质, 蜂蜜的颜色、抗氧化性与酚类物质的含量成正相关。蜂蜜中的多酚类物质主要包括黄酮类和酚酸类化合物。

2.1 黄酮类物质

黄酮是一类重要的抗氧化成分。蜂蜜中黄酮主要来源于植物花粉、花蜜和蜂胶, 多以配基和糖苷黄酮的形式出现。黄酮类化合物主要有:木犀草素、白杨素、芹菜素、三粒小麦黄酮、杨芽黄素、黄芩素、汉黄芩素;二氢黄酮类:乔松素、橙皮素;黄酮醇类化合物有:山奈酚、槲皮素、异鼠李素、山杨梅酮、高良姜素、菲瑟酮、桑色素;异黄酮类:染料木素以及黄烷类:柚皮素、儿茶素和短叶松素。

蜂蜜中黄酮的含量因受到蜜源植物, 地理因素, 气候特征等条件的影响差异很大:如北半球产地的蜂蜜, 蜂胶是黄酮类化合物的主要来源;赤道地区和澳大利亚蜂蜜中的黄酮类化合物则主要来源于蜜源植物的花蜜和花粉。Aline Meda等研究发现, 蜂蜜的抗氧化性与其中黄酮醇含量有较高的相关性。因此, 黄酮的含量也逐渐成为检测蜂蜜质量和区分蜜种的一项重要参考因素。

2.2 酚酸

酚酸是蜂蜜中的又一重要组成部分, 其中有以苯丙素为基本骨架的咖啡酸、阿魏酸、芥子酸等, 有以苯甲酸为基本骨架的没食子酸、原儿茶酸等, 且不同蜜源、不同产地的蜂蜜中酚酸含量和种类也存在很大的差异。同一地域所采集蜂蜜往往具有某种相同的酚酸类成分, 如在葡萄牙东北地区产的蜂蜜中发现原儿茶酸。酚酸类成分更是蜂蜜中抗氧化和清除自由基的主要活性成分。

3 其他成分

蜂蜜中除上述介绍的糖类和酚类两大化合物外, 还含有多矿物质、维生素、氨基酸、酶、蛋白质和一些挥发性物质, 这些物质虽然在含量上微少, 但确是构成蜂蜜营养价值体系中不可缺少的部分。

3.1 矿物质

研究表明, 蜂蜜中含有丰富的矿物质, 其中K、Ca、Zn (≤25mg/kg) 、Na、Mg、Fe含量较高。在不同蜂蜜中, 矿物质的种类和含量上也存在着差异。如, 枣花蜜中铁和铜的含量较高, 而洋槐蜜中则钙和锌的含量较高, 蜂蜜中矿物质的含量与人体血液接近。

3.2 氨基酸

蜂蜜中含有17种氨基酸, 包括精氨酸、色氨酸、苏氨酸、亮氨酸、脯氨酸以及天冬氨酸等, 其中, 脯氨酸含量最高, 依蜜种和蜜源不同而异, 一般占氨基酸总量的50%~80%。Ruoff K等测定了144份不同植物来源的蜂蜜样品的20个不同参数, 因脯氨酸在蜂蜜所含氨基酸种类中含量最大且相对比较恒量, 将其选为氨基酸参数指标。

3.3 有机酸

有机酸在蜂蜜中的含量一般低于0.5%, 包括脱落酸, 柠檬酸和葡萄糖酸, 少量的乙酸、丁酸、苹果酸、甲酸、乳酸等。其中脱落酸的含量均相对较高, 这些物质的含量决定蜂蜜特殊的口味、酸度及抗菌能力。酸类物质的存在使蜂蜜呈酸性, 所以B族、C族维生素不易被破坏。脂肪酸还可建立指纹图谱来判别蜜源, 有学者以新西兰蜂蜜的200个样品作为研究对象, 发现了2个可作为新西兰金银花蜜的标记物。

朱晓玲通过对湖北产荆条蜜、紫云英蜜、油菜蜜、柑橘蜜4种蜂蜜脂肪酸组成进行分析, 共鉴定出14种脂肪酸, 结果表明不同植物源蜂蜜其脂肪酸的组成及含量上, 存在一定的差异。

3.4 酶类

蜂蜜中含有多种人体所需的酶类。蜂蜜中酶类物质主要是在酿蜜过程中混入蜜蜂唾液分泌物而形成的, 主要有蔗糖酶 (转化酶) 、淀粉酶 (DN) 和葡萄糖氧化酶。很多因素都影响着蜂蜜中酶的含量和活性, 如蜜种、蜜源、酿蜜时间、贮存时间及温度等。过长的储藏时间及高温热处理, 都会使酶活性降低。因此, 在评价蜂蜜新鲜度上, 酶的活性就成了一项重要指标。酶保持稳定性需要一定条件, 以淀粉酶为例, 枣花蜜和洋槐蜜的淀粉酶值较高, 且能经受较高的温度和时间, 50℃保持24h后仍能维持8.0以上。而枸杞蜜淀粉酶值较小, 且不耐受较高温度和时间。一般蜂蜜在温度为40℃以下, p H为5.3时, 淀粉酶最稳定。

3.5 挥发油类成分

蜂蜜中的挥发性化合物是决定蜂蜜气味的主要成分。挥发性化合物大致分为7大类:醇类、酮类、醛类、酯类、环状化合物、碳水化合物以及氯化化合物。有研究学者, 通过分析8种蜂蜜, 共鉴定出100多种化合物, 但含量有较大差异。Alissandrakis等在研究过程中发现, 某些挥发物质仅存在于某种单花蜜中, 其他花蜜中根本不存在或者含量极少, 则可认为此挥发物是此种蜂蜜特有的挥发物质, 并且可作为鉴定该种蜂蜜的标记物质[79]。张丽珍等对野桂花蜜、洋槐蜜和油菜蜜进行挥发香味成分物质分析, 发现3种蜂蜜中醇类几乎占挥发性及半挥发性香味成分一半的比例, 这说明醇类在3种蜂蜜香味中起重要作用。各蜂蜜也有各自含有和不含有的物质, 为建立指纹图谱鉴别蜂蜜种类及质量评价提供一定价值。

4 小结

蜂蜜的营养价值以及对人类的贡献已经被人们所熟知, 随着人们对健康要求的日益提高, 认识更加深刻, 对蜂蜜的质量评价也不再局限于感官条件。我国虽然是蜂蜜的出口大国, 但是由于各种原因, 蜂蜜的质量反而随着生产技术的日益提高, 变的良莠不齐, 有的商贩以次充好, 更有不法商贩在蜂蜜中掺假, 干扰含量测定和质量检测, 这就要求在蜂蜜质检上把好关。一直以来以蜂蜜中黄酮含量来鉴别蜂蜜质量好坏, 但是一些商家已经有娴熟的蜂蜜中掺入槲皮素或芦丁的造假技术。随着技术的成熟, 且对蜂蜜研究的深入, 发现蜂蜜中很多物质的含量和种类, 会因为蜜源、地域、温度等条件而有差异, 这就说明可以利用其作为鉴别蜂蜜来源和产地的依据。利用蜂蜜中所含物质的特点, 对蜂蜜更深入的分析并且通过指纹图谱, 可以找寻出新的标志性物质, 从而制定出新的质量评价标准, 使蜂蜜成为真正健康的药食同源的食品。

参考文献

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枳实的化学成分研究 篇10

1 仪器和材料

1.1 仪器

红外光谱用FT/IR 4100(Jasco Meadowbank Sydney,Australia) 型红外分光谱仪(KBr压片)测定;核磁共振用BRUCKER DRX-300核磁共振仪测定;薄层硅胶和柱色谱硅胶均为青岛海洋化工厂生产;Sephadex LH-20为Pharmacia公司产品;ODS为Merck C-18型;所用试剂均为分析纯,购自南京晚晴化玻有限公司。

1.2 材料

实验用的枳实来自江西赣州,经冯锋教授鉴定为芸香科植物枳实(Citrus aurantium L.)。

2 化学成分的分离与鉴定

2.1 化学成分的分离

枳实粗粉10kg,用8倍量75% 乙醇回流提取2 次,1.5h/次,滤过,合并提取液,减压回收乙醇,得提取物约100g,经柱色谱硅胶 (100~200目) 柱层析依次以石油醚-乙酸乙酯系统(2/1-1/2)、乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇系统(20/1-8/2)洗脱,以硅胶GF254板作TLC检查合并相同组分,共得10个组分,各个组分经反复正反相硅胶柱层析,Sephadex LH-20凝胶柱层析,反复重结晶等方法进行分离纯化了10个化合物,分别为圣草次苷(1),新北美圣草苷(2),5,7-二羟基香豆素(3),柚皮芸香苷(4),东莨菪内酯(5),橙皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6),花椒毒酚(7),枳属苷(8),异樱花苷(9),柚皮素(10). 其中(3)、(5)、(6)为该植物中首次分离得到。

2.2 化学成分鉴定

化合物1:白色粉末,UV λundefined285nm; IR νundefined3423,1641,1578,1065cm-1; ESI/MS m/z 594.92 [M-H]-。 1H-NMR (300 MHz,DMSO-d6) δ:12.02 (1H,s,5-OH),9.03 and 8.99 (each 1H,s,3',4'-OH),6.89 (1H,s,H-2'),6.76 (2H,m,H-5',6'),6.14 (1H,d,J=3.0 Hz,H-8),6.11 (1H,d,J =3.0 Hz,H-6),5.46 (1H,dd,J=12.0,3.0 Hz,H-2),4.98 (1H,t,H-1"),4.52 (1H,s,H-1"'),3.10-3.81 (10H,m,糖环质子),3.10-3.15 (1H,H-3α,与糖环质子重叠),2.75 (1H,dd,J=15.0,3.0 Hz,H-3β),1.09 (3H,d,J=6.0Hz,6"'-CH3)。13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6) δ:197.1 (C-4),165.0 (C-7),163.0 (C-5),162.6 (C-9),145.7 (C-4'),145.1 (C-3'),129.2 (C-1'),118.1 (C-6'),115.3 (C-5'),114.3 (C-2'),103.3 (C-10),100.6 (C-1"'),99.4 (C-1"),96.3 (C-6),95.5 (C-8),78.6 (C-2),76.2 (C-3"),75.4 (C-5"),72.9 (C-2"),72.0 (C-4"'),70.7 (C-3"'),70.2 (C-2"'),69.5 (C-4"),68.3 (C-5"'),66.0 (C-6"),42.2 (C-3),17.8 (C-6"')。上述数据与文献[3]中圣草次苷的数据一致,故鉴定化合物1为圣草次苷(eriodictin,C27H32O15)。

化合物2:类白色针晶,UV λundefined285,330 nm; IR νundefined3407,1641,1578,1088 cm-1; ESI/MS m/z 594.92 [M-H]-H-NMR (300 MHz,DMSO-d6) δ:12.05 (1H,s,5-OH),9.08 and 9.04 (each 1H,s,3',4'-OH),6.89 (1H,d,J=4.1 Hz,H-2'),6.76 (2H,br.s,H-5',6'),6.10 (1H,d,J=2.4 Hz,H-6),6.09 (1H,d,J=2.4Hz,H-8),5.47 (1H,dt,J=13.2,2.5 Hz,H-2),5.11 (1H,br.s,H-1"),4.72 (1H,br.s,H-1"'),3.13-3.69 (10H,m,糖环质子),3.13-3.17 (1H,H-3α,与糖环质子重叠),2.71 (1H,dt,J=14.5,2.5 Hz,H-3β),1.16 (3H,d,J=5.9 Hz,6"'-CH3)。13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6) δ:197.2 (C-4),164.8 (C-7),162.9 (C-5),162.7 (C-9),145.8 (C-4'),145.2 (C-3'),129.2 (C-1'),118.1 (C-6'),115.3 (C-2'),114.4 (C-5'),103.3 (C-10),100.4 (C-1"'),97.4 (C-1"),96.2 (C-6),95.1 (C-8),78.7 (C-2),77.1 (C-3"),76.8 (C-5"),76.1 (C-2"),71.8 (C-4"'),70.4 (C-2"',3"'),69.6 (C-4"),68.2 (C-5"'),60.4 (C-6"),42.2 (C-3),18.0 (C-6"')。上述数据与文献[4]中新北美圣草苷的数据一致,故鉴定化合物2为新北美圣草苷(neoeriocitrin,C27H32O15)。

化合物3:白色粉末,UV λundefined255,330 nm;ESI/MS m/z 176.95 [M-H]-H-NMR (300 MHz,DMSO-d6) δ:8.15 (1H,d,J=9.6 Hz,H-4),6.53 (1H,d,J=2.0 Hz,H-6),6.38 (1H,d,J=2.0 Hz,H-8),6.14 (1H,d,J=9.6 Hz,H-3)。13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6) δ:162.0 (C-7),160.7 (C-2),156.4 (C-9),155.9 (C-5),139.5 (C-4),108.6 (C-3),101.8 (C-10),98.2 (C-6),94.0 (C-8)。上述数据与文献[5]中5,7-二羟基香豆素的数据一致,故鉴定化合物3为5,7-二羟基香豆素(5,7-dihydroxylcoumarin,C9H6O4)。

化合物4:白色针晶,UV λundefined285,330 nm; IR νundefined3424,1642,1572,1065 cm-1; ESI/MS m/z 579.07 [M-H]-1H-NMR (300 MHz,DMSO-d6) δ:12.03 (1H,s,5-OH),9.55 (1H,s,4'-OH),7.36 (2H,d,J=9.0 Hz,H-2',6'),6.82 (2H,d,J=9.0 Hz,H-3',5'),6.14 (2H,br.s,H-6,8),5.52 (1H,br.d,J=12.0 Hz,H-2),4.99 (1H,t,H-1"),4.54 (1H,s,H-1"'),3.16-3.65 (10H,m,糖环质子),3.16-3.18 (1H,H-3α,与糖环质子重叠),2.75 (1H,br.d,J=15.0 Hz,H-3β),1.10 (3H,d,J=6.0 Hz,6"'-CH3)。13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6) δ:197.1 (C-4),165.1 (C-7),163.0 (C-5),162.9 (C-9),157.7 (C--4'),128.6 (C-2'),128.4 (C-6'),128.2 (C-1'),115.1 (C-3',5'),103.2 (C-10),100.5 (C-1"'),99.4 (C-1"),96.4 (C-6),95.4 (C-8),78.6 (C-2),76.2 (C-3"),75.5 (C-5"),72.9 (C-2"),72.0 (C-4"'),70.7 (C-3"'),70.2 (C-2"'),69.6 (C-4"),68.2 (C-5"'),66.0 (C-6"),42.2 (C-3),17.7 (C-6"')。上述数据与文献[4]中柚皮芸香苷的数据一致,故鉴定化合物4为柚皮芸香苷(isonaringin,C27H32O14)。

化合物5:类白色结晶性粉末,UV λundefined330,345 nm; IR νundefined3338,1704,1566,1291cm-1; ESI/MS m/z 190.97 [M-H]-H-NMR (300 MHz,DMSO-d6) δ:7.84 (1H,d,J=9.5 Hz,H-4),7.19 (1H,s,H-5),6.80 (1H,s,H-8),6.17 (1H,d,J=9.5 Hz,H-3),3.90 (3H,s,-OCH3)。13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6) δ:160.6 (C-2),151.1 (C-7),149.5 (C-9),145.2 (C-4),144.4 (C-6),111.6 (C-5),110.5 (C-10),109.6 (C-3),102.7 (C-8),56.0 (-OCH3)。上述数据与文献[6,7]中东莨菪内酯的数据一致,故鉴定化合物5为东莨菪内酯(scopoletin,C10H8O4)。

化合物6:黄色粉末,UV λundefined285,330nm; ESI/MS m/z 462.99[M-H]-H-NMR (300 MHz,DMSO-d6) δ:12.05 (1H,s,5-OH),9.10 (1H,s,3'-OH),6.92 (3H,m,H-2',5',6'),6.15 (1H,br.s,H-6),6.14 (1H,br.s,H-8),5.49 (1H,dd,J=12.2,3.2 Hz,H-2),4.96 (1H,d,J=10.2 Hz,H-1"),3.77 (3H,s,4'-OCH3),3.13-3.69 (6H,m,糖环质子),3.13-3.17 (1H,H-3α,与糖环质子重叠),2.77 (1H,dd,J=17.4,3.2 Hz,H-3β)。13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6) δ:197.0 (C-4),165.2 (C-7),162.9 (C-5),162.6 (C-9),147.9 (C-4'),146.5 (C-3'),130.9 (C-1'),117.8 (C-6'),114.1 (C-2'),112.0 (C-5'),103.2 (C-10),99.6 (C-1"),96.5 (C-6),95.5 (C-8),78.4 (C-2),77.0 (C-3"),76.3 (C-5"),73.0 (C-2"),69.5 (C-4"),60.6 (C-6"),55.7 (4'-OCH3),42.1 (C-3)。上述数据与文献[8]中橙皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷的数据一致,故鉴定化合物6为橙皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(hesperetin-7-O-β-D-glucoside,C22H24O11)。

化合物7:无色针晶,UV λundefined250,270,315 nm; IR νundefined3329,1706,1595,1448 cm-1; ESI/MS m/z 200.95 [M-H]-H-NMR (300 MHz,DMSO-d6) δ:11.30 (1H,s,8-OH),8.26 (1H,d,J=9.8 Hz,H-4),7.91 (1H,d,J=2.0 Hz,H-3'),7.19 (1H,s,H-5),7.16 (1H,d,J=2.0 Hz,H-2'),6.25 (1H,d,J=9.8 Hz,H-3)。13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6) δ:160.6 (C-2),147.4 (C-7),145.5 (C-2'),145.4 (C-4),139.7 (C-8a),130.0 (C-8),125.2 (C-6),116.2 (C-4a),113.8 (C-3),110.1 (C-5),107.0 (C-3')。上述数据与文献[9]中花椒毒酚的数据一致,故鉴定化合物7为花椒毒酚(xanthotoxol,C11H6O4)。

化合物8:白色针晶,UV λundefined285,330nm; IR νundefined3421,1645,1576,1083 cm-1; ESI/MS:m/z 593.19 [M-H]-H-NMR (300 MHz,DMSO-d6) δ:12.01 (1H,s,5-OH),7.45 (2H,d,J=9.0 Hz,H-2',6'),6.99 (2H,d,J=9.0 HZ,H-3',5'),6.13 (1H,br.s,H-6),6.10 (1H,br.s,H-8),5.59 (1H,dd,J=12.0,3.0Hz,H-2),5.04 (1H,d,J=6.0 Hz,H-1"),4.63 (1H,d,J=6.0 Hz,H-1"'),3.78 (3H,s,4'-OCH3),3.18-3.27 (10H,m,糖环质子),2.78 (1H,dd,J=15.0,3.0 Hz,H-3β),1.16 (3H,d,J=6.0 Hz,6"'-CH3)。13C--NMR (75 MHz,DMSO-d6) δ:196.9 (C-4),164.8 (C-7),162.8 (C-5),162.5 (C-9),159.5 (C-4'),130.3 (C-2',6'),128.2 (C-1'),113.9 (C-3',5'),103.3 (C-10),100.3 (C-1"'),97.4 (C-1"),96.3 (C-6),95.1 (C-8),78.3 (C-2),76.1 (C-3"),76.8 (C-5"),73.0 (C-2"),71.8 (C-4"'),70.4 (C-3"'),70.3 (C-2"'),69.6 (C-4"),68.2 (C-5"'),66.2 (C-6"),42.0 (C-3),17.9 (C-6"')。上述数据与文献[10]中枳属苷的数据一致,故鉴定化合物8为枳属苷(poncirin,C28H34O14)。

化合物9:白色结晶性粉末,UV λundefined285,330nm; ESI/MS m/z 446.96 [M-H]-H-NMR (300 MHz,DMSO-d6) δ:12.03 (1H,s,5-OH),7.46 (2H,d,J=7.6 HZ,H-2',6'),6.98 (2H,d,J=7.6 HZ,H-3',5'),6.17 (1H,br.s,H-8),6.14 (1H,br.s,H-6), 5.55 (1H,dd,J=12.3,2.3 HZ,H-2),4.95 (1H,d,J=7.0 Hz,H-1"),3.77 (3H,s,4'-OCH3),3.10-3.69 (6H,m,糖环质子),3.10-3.15 (1H,H-3α,与糖环质子重叠),2.79 (1H,dd,J=17.4,2.3 Hz,H-3β)。13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6) δ:197.0 (C-4),165.3 (C-7),162.9 (C-5),162.6 (C-9),159.5 (C-4'),130.4 (C-1'),128.3 (C-2',6'),113.9 (C-3',5'),103.2 (C-10),99.6 (C-1"),96.5 (C-6),95.5 (C-8),78.4 (C-2),77.1 (C-3"),76.3 (C-5"),73.0 (C-2"),69.5 (C-4"),60.6 (C-6"),55.2 (4'-OCH3),42.1 (C-3)。上述数据与文献[11]中异野樱苷的数据一致,故鉴定化合物9为异樱花苷(isosakuranin,C27H32O15)。

化合物10:白色针晶,UV λundefined290 nm; IR νundefined1630,1602,1157,832 cm-1; ESI/MS m/z 270.91 [M-H]-H-NMR (300 MHz,DMSO-d6) δ:12.14 (1H,s,5-OH),10.75 (1H,s,7-OH),9.56 (1H,s,4'-OH),7.31 (2H,d,J=7.4 Hz,H-2',6'),6.80 (2H,d,J=7.4 Hz,H-3',5'),5.88 (2H,br.s,H-6,8),5.44 (1H,dd,J=12.6,2.7 Hz,H-2),3.25 (1H,dd,J=17.0,12.6 Hz,H-3α),2.68 (1H,dd,J=17.0,2.7 Hz,H-3β)。13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6) δ:196.3 (C-4),166.5 (C-7),163.4 (C-5),162.8 (Cv9),157.6 (C-4'),128.9 (C-1'),128.2 (C-2',6'),115.0 (C-3',5'),101.9 (C-10),95.7 (C-6),94.9 (C-8),78.3 (C-2),41.9 (C-3)。上述数据与文献[12]中柚皮素的数据一致,故鉴定化合物10为柚皮素(naringenin,C15H12O5)。

摘要：目的:研究枳实的化学成分。方法:应用溶剂萃取及柱层析进行化学成分分离、纯化,并利用各种光谱技术分析鉴定结构。结果:从枳实中得到10个化合物,分别为圣草次苷(1),新北美圣草苷(2),5,7-二羟基香豆素(3),柚皮芸香苷(4),东莨菪内酯(5),橙皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6),花椒毒酚(7),枳属苷(8),异樱花苷(9),柚皮素(10)。结论:化合物(3)、(5)、(6)为该植物中首次分离得到。

关键词：枳实,化学成分,光谱技术

参考文献

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化学成分鉴定 篇11

【关键词】 中药化学成分；提取分离方法；研究观察

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2013.06.574 文章编号：1004-7484（2013）-06-3328-01

中药对于我国来说，具有悠久的历史，可以说是我国的瑰宝。但是对于一些具有临床疗效的中药来说，我们无法确定是中药中的哪种化学成分在起作用，这一点也是中药在国际医学上不能得到普遍认可以及接受的原因。目前，人们公认为中药药效的来源是中药的化学成分。因此，人们为了能够更加合理有效地使用中药，开始了对中药化学成分提取分离方法的研究工作。并且，随着我国科学技术的发展，一些新的中药化学成分提取分离方法诞生。本文笔者就近年来的一些中药化学成分提取分离方法进行了研究和观察，做了简单地综述。

1 传统的中药化学成分提取分离方法

传统的提取分离技术主要有普通柱层析、重结晶等方法。普通柱层析是指固定相是一些常用的吸附材料，如硅胶、氧化铝等，流动相是不同比例的有机溶剂，以此来洗脱样品，使中药的化学成分得到分离。这种方法的优点就是操作简单易行，缺点是当遇到成分复杂或者是结构相近的化学成分时，不能够使化学成分完全地分离。重结晶的原理是通过固体混合物当中的被分离成分在不同温度下溶解度发生明显的变化，在温度较高的时候，该成分的溶解度就比较大，当温度较低的时候，该成分的溶解度就比较小，以此来达到分离提纯的目的。但这种方法具有极强的局限性，所以无法将其广泛地用于中药化学成分的提取分离的过程中。

2 减压层析技术

减压层析的提取分离技术的原理和普通柱层析技术一样，操作简单，能够快速高效的达到分离的效果。相比其他的层析技术，减压层析技术的优点是采用的设备简单、操作易行、所用时间短等，可以防止由于吸附时间长而导致的药品变质现象，这种方法对稳定性不高的化合物适用。但是这种也存在不足，其溶剂用量比较大，而且无法通过对色带的直接观察来切割洗脱。

3 应用大孔树脂来提取分离的技术

大孔树脂吸附提取分离技术是使用一种有机吸附剂，利用吸附和分子筛的原理，将中药中的有效成分有选择地提取分离出来，将没有效用的成分去除掉，这是一种用来提取分离的新工艺。这种分离技术的优点就是大孔树脂的再生性好，用一些溶剂就可以实现，但也有不足，就是无法保证有机溶剂的残留物是绝对安全的，可能会对环境带来一些污染。

4 膜分离技术

这种提取分离技术是将具有选择透过性的薄膜作为分离介质，由于中药中各种化学成分的分子量存在着差异，所以当薄膜两侧有某种推动力存在的时候，这种推动力可能是浓度差、电位差或者压力差等等，使得原料一侧的成分有选择性地经过薄膜，从而实现化学成分的分离和提纯。这种技术的特点是在进行分离的过程中不用加热、所耗费的能量少、不会产生二次污染、分离的效率高，所以这种技术适用于中药化学成分的提取分离。

5 高效逆流色谱分离技术

这种技术是依据处于动态下液体和液体之间的分配原理，将螺旋管的方向性以及高速行星式运动结合起来，令在两相中互不混溶的溶剂能够在螺旋管内达到较好地接触、混合、分配以及传递的目的，以此把不同分配比的样品成分成功地分离出来。和其他的液相色谱分离技术进行比较，这种技术的固定相没有采用固相载体，而是样品在两种互不相溶的液相中达到分配的效果，把由于固相载体而带来的一些样品吸附、污染以及损失等不足弥补过来，而且还可以重复进样，具有比较高的应用价值。另外，用于高效逆流色谱技术的设备具有可靠的性能、较低的价格特点，使这种技术的分析成本降低，使分离操作变得简单易行，虽然和高效液相色谱分离技术比较起来偶尔会产生柱效不高的现象，但是这种技术可以很好地防止其对样品的吸附。

6 介绍两种联合使用技术

6.1 联合使用多种分离纯化技术 近年来，从事药学研究的工作者为了能够将中药成分更好地提取和分离，应用了将两种或者两种以上的分离技术联合使用的工艺。根据相关报道，有研究者利用含量为65%的银杏叶和大孔吸附树脂技术来提取醇溶液，提取效果较好。另外，联合使用大孔吸附树脂和超滤法来精制六味地黄丸，通过相关的实验结果，发现提取物的重量是原药材的45%。还有在制备菖蒲益智口服液的过程中应用了吸附澄清、高速分离以及微滤技术，通过相关的实验，说明这种纯化技术可以使制剂的稳定性提高，能够在制备中药口服液的过程中达到连续无醇化的生产。

6.2 将水性二相系统和逆流色谱技术联合使用 近年来，逆流色谱技术的发展是由水性二相系统的发展推动起来的。从事医药研究的工作者通过高速色谱技术，利用水性二相溶剂系统来展开对纯化中药多糖的研究，并且这种联合技术已成功用于牛膝多糖的分离纯化中。

7 结 语

目前，应用于中药化学成分的提取分离的技术有很多，本文仅介绍和叙述了几种。从上文的论述中，我们可以发现用于中药化学成分提取分离的技术获得了比较快速的发展，并且这些发展和进步也使中药结构、药理以及药效等方面的研究得到了促进，可以帮助我们找到先导化学物，研制开发出具有新药效的药物。伴随着中药化学成分提取分离技术的不断进步和完善，对中药化学成分的研究也会发展成为一个诱人的领域。并且，目前的药物成分分离技术已经朝着操作简单化、分离快速高效、不产生污染、被测组分和基体能够得到有效的分离、使分析的灵敏度和准确度进一步提高的方向发展。当然，中草药成分的提取分离技术也包括其中。除本文介绍的提取分离技术外，还有很多技术，并且各自具有不同的特点，在实际使用中应依据被提取成分的特点以及性质，来选择合适的方法。

参考文献

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大皮伞化学成分研究 篇12

1 试验部分

1.1 仪器和材料

UV由UV-210A型分光光度计测定;IR由BioRad FTS-135型红外光谱仪测定;EI-MS由VG Auto Spec-3000质谱仪测定, 高分辨质谱HR-MS由APIQSTAR Pulsar质谱仪测定;NMR光谱由Bruker DRX-500或AV-400测定, 内标为TMS, 其中1H-NMR在400 MHZ和500 MHZ下测定, 13C-NMR在100MHZ和125 MHZ下测定。

柱层析硅胶 (200-300目及80-100目) 和薄层层析材料均为青岛海洋化工厂生产, Sephadex LH-20由瑞典Amersham Biosciences公司生产。

1.2 发酵培养与提取分离

采用平皿转摇瓶液体培养的方法。培养基:葡萄糖20 g, 去皮土豆200 g, Mg SO41.5 g, KH2PO43 g, VB110mg, 加水混合搅拌至1 000 m L。温度:25℃;转速:150r/min;于暗中培养发酵28 d后共得发酵液约18 L, 经过过滤后分为发酵液和菌丝体两个部分。发酵液以乙酸乙酯萃取3遍, 经减压浓缩后最终得到浸膏6.6 g (乙酸乙酯可溶部分) ———采用正相硅胶柱粗分, 以氯仿/丙酮为洗脱剂。

由氯仿/丙酮=98/2洗脱部分A, 通过Sephadex LH-20柱, 以氯仿/甲醇=1/1为洗脱剂, 得到的组分B经过反复正向硅胶柱分离, 最后得到化合物3 (28.9mg) 。氯仿/丙酮=95/5洗脱部分B, 经Sephadex LH-20柱细分后得组分B1~B4, 其中从组分B3中分离得到化合物4 (6.0 mg) , 从组分B4中分离得到化合物1 (7.8mg) , 化合物2 (3.3 mg) 。由氯仿/丙酮=90/10洗脱部分C, 反复硅胶柱层析得到化合物5 (4.0 mg) 。

2 结构鉴定

Ergosta-4, 6, 8 (14) , 22-tetraen-3-one (1) :浅黄色晶体, C28H40O;EI-MS m/z (rel.int.) :392[M]+ (25) , 377 (2) 349 (2) , 268 (100) ;13C-NMR (100 MHZ, CDCl3) :δ199.3, 164.2, 156.0, 135.0, 133.9, 132.6, 124.5, 124.5123.0, 55.8, 44.4, 44.0, 42.9, 39.2, 36.8, 35.7, 34.2, 34.1, 33.1, 27.7, 25.4, 21.2, 20.0, 29.7, 29.0, 18.9, 17.6, 16.7;根据波谱数据与文献[2,3]值, 鉴定为:麦角甾-4, 6, 8 (14) 22-四烯-3-酮。

(22E, 24R) -Ergosta-7, 22-dien-3β, 5α, 6β-triol (2) :无色针晶;EI-MS m/z (rel.int) :430[M]+ (1) , 412 (42) , 394 (34) , 379 (45) , 365 (8) , 269 (33) , 251 (53) , 81 (45) , 69 (100) ;1H-NMR (500 MHZ, CDCl3) :0.65 (3H, s, H-18) , 0.84 (3H, d, 6.7, H-26) , 0.85 (3H, d, 6.7, H-27) , 0.94 (3H, d, 6.8, H-28) , 1.05 (3H, d, 6.6, H-21) , 1.53 (3H, s, H-19) , 4.33 (1H, br.d, 4.8, H-6) , 4.84 (1H, m, H-3) , 5.16 (1H, dd, 15.3, 8.3, H-22) , 5.23 (1H, dd, 15.3, 7.4, H-23) , 5.74 (1H, m, H-7) ;13C-NMR (100MHZ, CDCl3) :δ141.6, 136.2, 132.2, 120.5, 76.1, 74.3, 68.5, 56.1, 55.3, 43.8, 43.8, 43.1, 42.0, 40.9, 39.9, 38.1, 33.9, 33.4, 32.7, 28.5, 23.5, 22.4, 21.4, 20.2, 19.9, 18.8, 17.9, 12.5;根据波谱数据与文献[4]]值, 鉴定为: (22E, 24R) -麦角甾-7, 22-二烯-3β, 5α, 6β-三醇。

Diisobutylphthalate (3) :C16H22O4, 无色油状物;EI-MS (70 e V) m/z (%) :279 ([M+H]+, 2) , 223 (18) , 205 (12) , 167 (11) , 149 (100) , 132 (3) , 121 (9) , 104 (14) , 93 (9) , 76 (10) , 65 (9) , 57 (42) ;1H-NMR (500 MHZ, CDCl3) :7.72 (2H, m, H-3 and H-6) , 7.53 (2H, m, H-4 and H-5) , 4.08 (2H, d, 6.7, H-2'and H-2") , 2.03 (2H, m, H-3'and H-3") , 0.98 (12H, d, 6.7, H-4'and H-4", H-5'and H-5") ;13C-NMR (100 MHZ, CDCl3) :167.7 (s, C-1'and C-1") , 132.3 (s, C-1 and C-2) , 130.9 (d, C-4 and C-5) , 128.8 (d, C-3 and C-6) 71.8 (t, C-2'and C-2") , 27.7 (d, C-3'and C-3") , 19.1 (q, C-4', C-4", C-5', C-5") 根据波谱数据值, 鉴定为:邻苯二甲酸二异丁酯。

5-Hydroxymethl-1-2-furancarboxaldehyde (4) :黄色油状物;C6H6O3;EI-MS (70 e V) m/z (%) :126 ([M]+, 3) , 125 (13) , 111 (21) , 97 (31) , 85 (42) , 71 (55) , 57 (69) ;1H-NMR (400 MHZ, CDCl3) :δ9.60 (1H, s, 2-CHO) , 7.21 (1H, d, 3.4, H-3) , 6.52 (1H, d, 3.4, H-4) , 4.72 (1H, s, 5-CH2OH) ;13C-NMR (100 MHZ, CDCl3) :δ152.4 (s, C-2) , 122.8 (d, C-3) , 109.9 (d, C-4) , 160.5 (s, C-5) , 177.7 (d, CHO) , 57.6 (t, CH2OH) ;根据波谱数据与文献[5]值, 鉴定为:5-Hydroxymethl-1-2-呋喃甲醛。

Trilinolein (5) :C57H98O6, 无色油状物;FAB-MS (pos.) :879[M+H]+ (5) , 599 (100) , 337 (15) , 263 (12) ;1H-NMR (400 MHZ, CDCl3) :5.28~5.40 (12H, m) , 5.26 (1H, m) , 4.28 (2H, dd, 11.9, 4.3) , 4.13 (2H, dd, 11.9, 6.0) , 2.75 (6H, t, 6.6) , 2.29 (2H, t, 7.5) , 2.28 (4H, t, 7.5) , 2.00~2.07 (12H, overlap) , 1.60 (6H, m) , 1.22~11.38 (overlap) , 0.87 (9H, t, 6.7) ;13C-NMR (100 MHZ, CDCl3) :173.1 (s) , 172.7 (s) , 130.1 (d) , 129.9 (d) , 128.0 (s) , 127.8 (s) , 68.8 (d) , 62.0 (t) , 34.1 (t) , 33.9 (t) , 31.4 (t) , 29.0~29.6 (t) , 27.1 (t) , 25.5 (t) , 24.8 (t) , 24.7 (t) , 22.5 (t) , 14.0 (q) ;根据波谱数据与文献[6]值, 鉴定为:三亚麻油酸甘油酯。

3 结果与讨论

食用真菌不仅味美, 而且具有较高的食用价值, 是集多营养、低热量、易消化于一身的理想食物。随着人们对食用真菌的了解, 近年来由于市场需求及经济利益的驱动, 过度滥采已导致野生食用菌的生存条件趋于恶化。为了更好的探究大皮伞的化学成分, 为其接下来可能的人工种植和产业化发展做准备, 我们对产自云南的大皮伞发酵液进行了较细致的化学成分提取分离, 共分离得到化合物5种, 包括:麦角甾-4, 6, 8 (14) 22-四烯-3-酮、 (22E, 24R) -麦角甾-7, 22-二烯-3β, 5α, 6β-三醇、邻苯二甲酸二异丁酯、三亚麻油酸甘油酯、5-Hydroxymethl-1-2-呋喃甲醛。

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