促生长激素神经肽（共8篇）
促生长激素神经肽 篇1
促红细胞生成素(EPO)是一个调节血细胞生成的细胞因子。近年来,在中枢神经系统中也发现EPO及其受体的表达。EPO作为一个新的神经保护因子,其神经保护作用已成为新的研究热点。本研究采用大鼠ICH模型,观察重组人促红细胞生成素(rhEPO)对ICH后神经细胞凋亡与神经生长因子(NGF) 、脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,并探讨rhEPO的干预作用及机制。
1 材料与方法
1.1 材料
清洁级Wistar雄性大鼠110只,体重220～270克,由中国医科大学实验动物部提供。rhEPO为沈阳三生制药股份公司生产。原位末端标记检测(TUNEL)试剂盒,兔抗鼠NGF、BDNF多克隆抗体,SABC试剂盒及DAB显色试剂盒(博士德);鼠脑立体定位仪(日本)。
1.2 方法
1.2.1 分组
110只大鼠随机分成四组:正常组(5只)、假手术组、ICH对照组、rhEPO治疗组,后3组分为6h、12h、24h、48h、72h、120h、168h 7个亚组,每组5只。
1.2.2 ICH模型制备:
参照Xue[1]的方法制备大鼠ICH模型。大鼠称重后给予10%水合氯醛腹腔注射麻醉(300mg/kg),随后脑立体定位仪上固定,沿头皮正中切开长约10mm纵切口,钝性分离暴露前囟,微型手钻于定位处钻直径0.5mm小孔,用微量注射仪取大鼠自体不凝血50ul,注入大鼠尾状核,以20ul/min速度注入。术后留针5min,缓慢退针,缝合切口。假手术组除不注血外,其余步骤同上。术后5min治疗组給予rhEPO(3000UI/Kg,用生理盐水稀释成0.5mL)腹腔注射。模型组及假手术组术后相应时间给予生理盐水0.5mL腹腔注射。正常组大鼠不予手术及给药。
1.3 统计学处理
采用统计软件SPSS13.0处理数据,所有结果用均数±标准差undefined表示,两样本比较用t检验,多样本比较用LSD-t检验,P<0.05为显著性差异。
2 结果
2.1 各组大鼠TUNEL阳性细胞数的比较,见表1。
2.2 各组大鼠NGF阳性细胞表达的比较,见表2。
2.3 各组大鼠BDNF阳性细胞表达的比较,见表3。
3 讨论
本实验结果显示,和模型组相比EPO的使用可大大减少48～168 h TUNE阳性细胞数,改善脑出血大鼠的神经功能缺损症状(P<0.05)。治疗作用主要表现在48 h后,而6 h、24h大鼠的神经功能缺损症状无明显改善(P>0.05)。TUNEL染色阳性凋亡细胞在ICH后6h出现,24h后逐渐增多,72h达高峰,之后下降,但168h仍高于假手术组,提示细胞凋亡存在于出血灶周围脑组织损伤的过程,并可引起ICH后的神经元脱失。TUNEL染色显示,出血侧脑组织中的凋亡细胞大部分为神经元,少部分是星形胶质细胞及血管内皮,并特异性分布于血肿内部及周边区域,表明在出血性脑损伤中神经元比胶质细胞更易受损,内皮细胞凋亡可能是导致血脑屏障破坏及血管源性脑水肿的原因之一,与国外相关报道基本一致[2]。给与rhEPO治疗的ICH大鼠与ICH对照组比较,血肿周围的凋亡细胞数明显减少,提示rhEPO对出血后的脑损伤有抑制凋亡,减轻脑损害的作用。
本实验对NGF和BDNF表达的研究显示,假手术组NGF少量表达,BDNF很少表达。ICH对照组NGF和BDNF的表达均明显高于假手术组,在72h达高峰,说明脑出血发生后,凋亡系统被启动。本实验rhEPO治疗组大鼠NGF和BDNF的表达明显高于ICH对照组,提示rhEPO能明显提高抗凋亡作用,阻止凋亡程序的启动及进程,使结果向有利与神经细胞存活的方向转化,减轻脑损害。
本研究结果表明促红细胞生成素对脑出血后神经元损伤有保护作用,其作用可能通过提高NGF、BDNF的表达或合成,消除自由基,抑制凋亡,从而发挥脑保护作用。
摘要：目的 研究促红细胞生成素(EPO)对脑出血后神经功能缺损、细胞凋亡及神经生长因子表达的影响。方法用立体定向技术,将自体不凝血注入大鼠尾状核区制备脑出血模型。110只Wistar雄性大鼠,随机分成四组:正常组、假手术组、ICH对照组、rhEPO治疗组。应用免疫组化及原位细胞凋亡检测脑出血灶周组织NGF、BDNF表达及凋亡细胞。统计学方法采用t检验和LSD-t检验。结果与对照组比较,rhEPO治疗后48～168 h大鼠神经行为学评分明显减少(P<0.05)。ICH对照组及rhEPO治疗组术后6h血肿周围皮质TUNEL、NGF、BDNF阳性细胞明显增加,72h达到高峰,120h下降,各时间点与假手术组比较差异有显著性(P<0.01)。rhEPO治疗组TUNEL阳性细胞数明显少于同时点ICH对照组(P<0.01),但NGF、BDNF阳性细胞数明显增加(P<0.01)。结论凋亡机制参与脑出血后继发性损伤过程,EPO能促进神经元BDNF、NGF的表达,对脑出血后神经损伤起保护作用。
关键词：促红细胞生成素,神经生长因子(NGF),脑源性神经营养因子(BDNF),脑出血,凋亡,TUNEL,神经保护,损伤
参考文献
[1] Zhou XM ,Marc R,Del Bigio.Intracerebral injection of autologous whole blood in rat:time course of inflammation and cell death[J].Neuroscience Letters,2000,283(3):230-232.
[2]Semkova I,Krieglstein J.Neuroprotection mediated via neurotro-phic factors and induction of neurotrophic factors[J].Brain ReRev,1999,30(2):176-188.
创时效德育 促德行生长 篇2
关键词：实效德育；德育重心；底线伦理；道德评鉴
德育即育德，更多的是以一个人正确价值观、态度和情感的养成为目的。当今学校德育的紧迫性和必要性有目共睹，笔者在此不再赘述。关键是如何能够创时效德育，促德行生长。
一、净化学校环境，重建底线伦理
底线伦理的核心是最基本的“仁爱”，操作上看可以说是“不以任何理由伤害别人，不以正确的理由做错事”，这是一个人应该具备的最基本的底线，它是有普世意义的，像我们中国传统文化中的核心价值观。教师具体可以从以下几个方面加以引导：
第一，课堂上，需要注意的礼仪有：关手机，不迟到，对教师的问题有回应、倾听，不吃东西、不打断别人的发言等。
第二，宿舍里，彼此要打招呼，不经别人允许不碰别人的东西，别人帮自己做了事后要记着说“谢谢”。
第三，公共场所，不随地吐痰，不乱扔杂物，不高声喧哗，不攀折公园花草；遵守秩序，先下后上，不拥挤，不加塞；礼让老弱妇孺，礼让行人，不占座（道），不抢行等。
二、发挥教师的率先垂范作用
传道、授业、解惑是对教师的基本职责，在所要传的“道”中，除古今中外“命脉所系的圣经贤传”是教师必须要教给学生以帮助学生“站在巨人的肩上”之外，还有一“道”，就是此时此刻就需要实践的礼仪、礼节和纪律与规则。小到课堂纪律，大到严谨学风，做教师的唯有在课堂上同时坚持了这一“道”，才有可能将圣贤之说化作学生的日常行为习惯，帮助学生做到知行合一。
客观地说，绝大部分教师热爱并全身心地投入到自己的工作当中，热爱学习追求进步，教学水平很高。但是也有一部分教师的教学水平不高，而且不积极想办法提高。建议这部分教师在态度、水平还没改之前不要进行教学。因为这样的教学实际上是与德育相违背的，也是最坏的德育。
三、创时效德育课堂
职教德育好课的基本标准主要看三度：教学目标的达成度、教学预设和生成的结合度及职业教育特点的体现度。
第一，教学目标是一堂好课的灵魂。最好的目标是针对学生把大纲的目标具体化。重点不可更改，难点可以变动。
第二，对学生研究的深度和宽度决定着教学的最终效果。这包括以下几个方面：学生个体对于所要学习内容的已有经验和个体差异、学生个体对于所要学习内容的各种可能与困难障碍分析、学生发展的需要和对学生可能达到的发展水平的估计、学生的学习风格、学生的个性特点、学生的专业、学生的生涯规划、学生的需求等。
第三，注重在教学实践中丰富教学内容，注重教学艺术，优化教学语言，创新教学载体，应用教学技术，完善教学评价。每设计一堂课必须自问：目标为谁而定？方法为谁而用？案例为谁而选？评价为谁而做？德育课有多少是仅仅上在黑板上，有多少是教到学生心中的？
四、健全多元化的道德评鉴标准
对于“说起来重要，做起来次要，忙起来不要”的德育来说，多元评价手段在德育课上的应用多元课堂教学、多元课堂评价机制尤为重要。学校要注意发展性教学评价的价值观内化，设定多元化评价要素。
第一，重视课堂学习表现。课堂学习表现包括课堂纪律、讨论问题参与度等。
第二，重视实践表现评价。实践表现评价必须以实践教学活动为基础。职业生涯规划——职场演讲与表演，职业道德与法律——搜集法律案例并制作成报栏，经济政治与社会——上台讲练、案例分析、竞赛等，哲学与人生——搜集哲理故事并分析讲解。
第三，进行合作学习评价。既考察全面又考虑个别，既发挥了学习骨干的作用，也带动了学习困难学生，相互促进。
第四，多元课程考核。一是课业形式要突出理解和运用能力的训练，包括常规性练习题、知识竞赛、案例分析、资料收集、制作剪报、社会调查等。二是采取灵活多变的题型进行测试，可以是实例题、客观题、一句话说明、案例判断和选择、想一想、算一算、写一写、知识点连线等题型。
第五，多元评价结构。课堂学习表现（含课堂纪律、讨论问题参与度等）占10%，实践活动表现和成果、平时测试、日常品德表现和道德素质评分等占40%，课业占25%，期末考试占25%。
百年大计，教育为本。德育作为学校教育工作的重中之重，某种程度上可以被看作学校教育的灵魂所在。视教育为神圣、视学生为未来国家栋梁的热爱学生的教师，应该认真履行自己的职责，在以“育人”为核心的教育价值观的引领下，创时效德育，促德行生长。
参考文献：
[1]邓达，叶华玲.对提高学校德育实效的理性思考[J].乐山师范学院学报，2003（8）.
促生长激素神经肽 篇3
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2010年8月-2013年1月本科室收治的60例重型颅脑损伤昏迷患者为研究对象, 所有患者均经脑CT或MRI明确诊断, 纳入标准:外伤致昏迷时间<6 h;GCS评分为3~8分;均经外科积极治疗。排除标准:罹患有严重基础疾病者, 伴心、肺、肝及肾等重要脏器功能不全者;脑干损伤严重不可逆者;严重精神疾病患者。将上述60例患者按照入院顺序及患方意愿分为观察组和对照组, 每组30例。两组患者在性别、年龄、病程、脑损伤原因及GCS评分等方面比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性, 所有患者治疗之前均签署治疗知情同意书。
1.2 治疗方法
两组患者均接受常规治疗, 即早期外科手术治疗、降低脑组织周围水肿及脑组织耗氧、改善脑血管循环、稳定脑细胞清除氧自由基并给予抗炎等对症支持治疗。观察组患者在此基础上, 给予神经生长因子联合高压氧等治疗, 具体如下: (1) 注射用鼠神经生长因子 (苏肽生, 舒泰神药业有限公司生产, 国药准字S20060023) , 临用前每瓶用2 m L氯化钠注射液 (或灭菌注射用水) 溶解, 肌肉注射, 30μg/d, 1次/d, 3~6周为一疗程; (2) GY3200型大型加压医用氧舱 (烟台宏远氧业有限公司, 当舱内压力升至0.2 m Pa时吸纯氧2次, 30 min/次, 中间休息10 min改吸舱内空气, 1次/d, 连续治疗10次为一疗程。对于气管切开患者给予三通管连接气囊给氧, 氧流萤控制在3~4 L/min, 气管切开患者在进舱前及中间休息时予以吸痰处理, 以防咳痰时气流冲突形成气压伤[2]。
1.3 疗效评价标准
(1) 于治疗后1个月进行GCS评分, 具体标准如下: (1) 睁眼:自发睁眼4分、语言吩咐睁眼3分、疼痛刺激睁眼2分、无睁眼1分; (2) 语言:正常交谈5分、言语错乱4分、只能说出 (不适当) 单词3分、只能发音2分、无发音1分; (3) 运动:按吩咐动作6分、对疼痛刺激定位反应5分、对疼痛刺激屈曲反应4分、异常屈曲 (去皮层状态) 3分、异常伸展 (去脑状态) 2分、无反应1分;将上述评分进行相加, <8分时评为昏迷, ≥10分时判定为清醒[3]。 (2) 于治疗后1个月进行GOS评分, 具体标准如下:恢复良好5分, 恢复正常生活, 尽管有轻度缺陷;轻度残疾4分, 残疾但可独立生活, 能在保护下工作;重度残疾3分, 清醒、残疾, 日常生活需要照料;植物生存2分, 仅有最小反应 (如随着睡眠/清醒周期, 眼睛能睁开) ;死亡1分。 (3) 治疗1个月后, 比较两组重型颅脑损伤患者的清醒率及清醒时间[4]。
1.4 统计学处理
采用SPSS 17.0软件对所得数据进行统计分析, 计量资料用 (±s) 表示, 比较采用t检验, 计数资料采用X2检验, 以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组GCS评分比较
治疗前两组重型颅脑损伤患者GCS评分差异无统计学意义 (P>0.05) ;经过积极治疗后, 两组患者GCS评分较治疗前有不同程度改善, 两组同治疗前比较差异均有统计学意义 (P<0.05) ;其中观察组患者改善更为明显, 治疗后两组GCS评分比较差异有统计学意义 (P<0.05) , 见表1。
分
*与同组治疗前比较, P<0.05;△与治疗后对照组比较, P<0.05
2.2 两组GOS评分比较
经积极治疗后, 观察组重型颅脑损伤患者GOS分级良好的患者明显多于对照组, 比较差异有统计学意义 (P<0.05) , 见表2。
例
*与对照组比较, P<0.05
2.3 两组清醒率及清醒时间比较
治疗1个月后, 比较两组患者清醒率和清醒时间, 结果发现观察组重型颅脑损伤患者的清醒率和清醒时间均明显优于对照组, 比较差异均有统计学意义 (P<0.05) , 见表3。
*与对照组比较, P<0.05
3 讨论
重型颅脑损伤是各类外伤中最为严重的损伤, 具有较高的致残率和死亡率, 其发病率约占所有颅脑损伤的13%~21%, 死亡率接近50%。该病较高致残率和死亡率的主要因素包括脑实质的严重损伤、呼吸道的梗阻、颅内血肿及迟发型出血等[5]。重型颅脑损伤的主要治疗手段是外科手术治疗, 可迅速缓解患者颅内压、防止脑疝发生, 同时彻底清除颅内血肿及坏死的脑组织[6]。重型颅脑损伤的患者往往伴随有长时间昏迷, 病情变化多端, 后期并发症较多, 其意识的恢复是一个较为漫长的阶段, 虽然经过积极手术和药物治疗, 部分患者自然进入清醒期, 而有的患者则进入植物状态, 甚至病情恶化死亡。因此, 需要早起正确诊断以及后期合理科学的治疗, 以促进重型颅脑损伤患者早日苏醒, 减少伤残发生率。有相关研究表明, 重型颅脑损伤患者自然发生的大脑皮质功能重组是有限的, 而高压氧、电针刺激及正中神经电刺激对重型颅脑损伤患者均有良好的促醒作用[7]。本文尝试使用神经生长因子联合高压氧治疗重型颅脑损伤患者, 以观察这种联合方式对患者的促醒作用。
神经生长因子是一类可以促进哺乳动物神经细胞生长的、且具有复合生物活性的蛋白, 对神经细胞及系统可以产生重要的营养和修复作用, 可以促进神经元的产生、生长及发育, 同时通过抗氧自由基、减少一氧化氮毒性作用、降低钙超载以及抑制神经元凋亡途径保护神经元, 缓解外伤后继发性脑损伤, 还能够通过促进血管生成在神经损伤康复中发挥重要作用[8,9]。脑组织是人体代谢最为旺盛且耗氧量最大的组织, 同时也对缺氧最为敏感, 当患者发生重型颅脑损伤后, 脑组织同时伴有缺血缺氧, 迫使生成大量氧自由基, 释放某些负性内因子, 对脑实质造成第二次打击, 加重患者病情。重型颅脑损伤患者可通过高压氧治疗而提高血氧分压, 提高脑组织血氧含量, 改善病损脑组织的缺氧状态, 阻断脑缺氧原脑水肿的恶性循环, 从而降低颅内压, 减轻脑水肿。在高压氧舱中呼吸, 因肺泡与肺静脉氧分压差的增大, 血氧弥散量可增加近20倍, 从而大大提高脑组织氧含量, 中断因脑缺血缺氧所致脑水肿的恶性循环[10,11]。本组研究证实, 神经生长因子联合高压氧治疗重型颅脑损伤患者, 可以有效改善患者的GCS评分, 有利于患者康复, 提高了昏迷患者的促醒率, 明显减少其昏迷时间, 加快了重症颅脑损伤患者的清醒时间。
综上所述, 神经生长因子联合高压氧可促进重型颅脑损伤患者神经功能的恢复, 具有促醒及改善预后的作用。
摘要：目的:探讨神经生长因子联合高压氧对重型颅脑损伤患者的促醒作用。方法:60例重型颅脑损伤昏迷患者按照随机数字表法分为观察组和对照组, 每组30例。两组患者均接受常规治疗, 观察组患者在此基础上使用神经生长因子联合高压氧。于治疗1个月后, 比较两组患者GCS评分、GOS等级及清醒率和清醒时间。结果:治疗1个月后, 两组患者GCS评分均较治疗前有不同程度改善, 差异均有统计学意义 (P<0.05) ;其中以观察组患者改善更为明显, 与对照组患者GCS评分比较差异有统计学意义 (P<0.05) ;观察组重型颅脑损伤患者GOS良好患者明显多于对照组, 比较差异均有统计学意义 (P<0.05) ;观察组重型颅脑损伤患者的清醒率和清醒时间明显优于对照组, 比较差异均有统计学意义 (P<0.05) 。结论:神经生长因子联合高压氧可促进重型颅脑损伤患者神经功能的恢复, 具有促醒及改善预后的作用。
促生长激素神经肽 篇4
鱼类生长激素 (growth hormone, GH) 是由鱼脑垂体前叶的生长激素细胞合成和分泌的一种多肽激素, 约173～190个氨基酸组成, 分子量22 kDa左右[1]。GH对鱼类最明显的作用有:能增进鱼类食欲, 提高饲料转换率, 促进鱼类增长, 促进发育, 参与生长代谢调节[2,3]。1976年Farmer等采用与分离哺乳动物GH类似的方法, 从罗非鱼垂体中分离GH[4]。80年代中后期形成研究热点。随着研究的深入, GH的分离技术也不断发展。目前国际上已经有近20种鱼类的GH被分离纯化[5]。将生长激素应用于水产养殖业需要解决两方面的问题, 一是利用基因工程技术大量提供产品, 二是生长激素的应用方法, 因为像牛、猪那样注射使用, 对鱼、虾是不可能的。近年的研究用生长激素浸渍或加入饲料中喂食, 生长激素表现对鱼、虾有促进生长的效果[6]。
Tsai H J等 (1995) 将黄鳍鲷GH基因重组到大肠杆菌中, 表达产物经复性后对鲻注射, 12周后试验组的体重和体长增长分别比对照组快65%和22%[7]。白俊杰等用大肠杆菌表达的鲑鱼生长激素作为饲料添加剂投喂罗非鱼, 5周后试验组的体重和体长增长分别比对照组快119.35%和64.46%[8]。江世贵等利用RT-PCR技术从鲮脑垂体组织中克隆出GH cDNA片段, 并在大肠杆菌中高效表达。表达量占菌体总蛋白的32.13%, 重组蛋白经包涵体变性、复性及亲和层析纯化后腹腔注射莫桑比克罗非鱼, 也表现出显著的促生长作用[9]。
近年来, 以酵母作为工程菌表达外源蛋白的技术日益引起重视, 与大肠杆菌相比, 酵母是低等真核生物, 除了有细胞生长快、易于培养、遗传操作简单等原核生物的特点外, 又具有真核生物时表达的蛋白质进行正确加工、修饰, 合理的空间折叠等功能, 如形成正确的二硫键等, 并不会形成不溶性的重组蛋白包含体, 避免了繁琐的提纯步骤, 应用上酵母表达pcGH还有一个重要的优点, 即可直接作为饲料添加剂喂养鱼类, 从而免除了纯化目的蛋白的程序。所以, pcGH在酵母中表达比在原核系统更有实际应用意义。本研究选择毕赤酵母系统表达大黄鱼GH, 并将含有pcGH的酵母作为饲料添加剂饲喂大黄鱼和眼斑拟石首鱼 (美国红鱼) 鱼苗, 探讨其对大黄鱼和眼斑拟石首鱼的促生长作用。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试剂
大黄鱼生长激素基因工程菌为本实验室构建及保存, 基因序列已登陆NCBI/Gene Bank数据库, 登陆号AF231941。Yesat Extract、Trypton均为OXIOD公司产品;其他均为国产分析纯试剂。
1.1.2 试验地点
试验在福州市水产技术推广站连江大官坂基地鱼苗车间进行。大黄鱼饲养池为室外水泥地 (2.5 m×2 m×2 m) , 水深1.5 m。眼斑拟石首鱼饲养容器为200 L圆形玻璃钢鱼苗孵化桶, 清水养殖。水源为沉淀砂滤海水, 水温19～25℃。
1.1.3 试验鱼
大黄鱼、眼斑拟石首鱼购自当地海水网箱养殖基地。大黄鱼平均体长10.0±0.5 cm, 均重20.0±5.0 g;眼斑拟石首鱼平均体长15.0±0.5 cm, 均重50.0±5.0 g。试验前驯养10 d。
1.2 方法
1.2.1 培养基的配制
YPD、BSM等培养基与PTM1微量元素溶液按美国Invitrogen公司Pichia Expres鄄sion kit手册中介绍的方法配制。
1.2.2 自控罐发酵
应用上海高机生物工程有限公司BIOF-5000A型5 L全自动发酵罐, 在发酵罐中装入含有4%甘油的发酵基础培养基 (BSM) 2.5 L, 然后灭菌。将灭菌后的培养基冷却至30℃, 调整转速1 200 r/min和通风量1.0 vvm, 通过pH自控装置利用氨水设定培养基pH5.0。无菌条件下每升培养基添加4.35 mLPTM1微量元素溶液。将种子液按2%接种量接种, 待酵母生长, 直至甘油完全消耗殆尽, DO增加至接近100%, 打开恒流泵流加50%w/v甘油 (每1 000 mL含有12 mLPTM1微量元素溶液) , 流加速度:18.15 mL/h/L初始发酵体积。待细胞生长至湿重达到180～200 g/L时, 停止流加甘油, 开始流加甲醇 (100%甲醇, 每升甲醇含有12 mLPTM1微量元素溶液) , 流加速度:3.6 mL/h/L初始发酵体积。保持该甲醇流加速度1～2 h后, 将流加速度提高1倍, 即7.3 mL/h/L初始发酵体积, 保持该流加速度培养2 h后, 将流加速度增加到10.9 mL/h/L初始发酵体积, 并保持至发酵结束。发酵结束后, 将发酵液 (含酵母菌体) 冷冻干燥, 研磨制成粉剂。
1.2.3 饲喂试验
(1) 试验分组:大黄鱼设2个不同剂量组, 发酵冻干粉 (含重组大黄鱼生长激素) 添加量分别为0.1%、0.5%;眼斑拟石首鱼设3个不同剂量组, 冻干粉添加量分别为0.1%、0.5%、1%;每种试验鱼均设1个添加转空质粒酵母空白对照组。大黄鱼试验组每组试验鱼100尾, 眼斑拟石首鱼试验组每组试验鱼80尾。 (2) 投喂方式:饱和投喂法, 早晨、傍晚各投喂1次。 (3) 饲料的制作:按方案要求的添加量与“海马牌”海水鱼配合饲料混合, 再加适量淡水混匀, 捏成团块, 每天定时投喂。 (4) 日常管理:充气增氧。大黄鱼试验池每天定时换水10%～20%, 眼斑拟石首鱼试验桶每次投饵1 h后吸污、换水30%。死亡鱼及时捞取。每天做好日常管理记录。 (5) 检测项目如下:体长增长率 (%) = (Lt-Lo) ×100;增重率 (%) =[ (Wt-Wo) /Wo]×100;日增长率 (%) = (Wt-Wo) /T;肥满度 (CF, %) =体重 (g) /[体长 (cm) ]3;饲料系数=G/ (Wt×Nt-Wo×No) ;饲料效果 (%) =1/饲料系数×100;成活率 (%) =[ (Nt-No) /No]×100。其中Lt、Wt、Nt和Lo、Wo、No分别为试验结束时和放养鱼时的平均体长、平均体重、数量;G为摄饵的总量;T为试验总天数。
2 结果
2.1 大黄鱼生长激素基因工程菌的发酵
应用上海高机生物工程有限公司BIOF-5000A型5 L全自动发酵罐发酵含大黄鱼生长激素基因酵母。发酵结束后, 菌体湿菌达到320 g/L, 发酵液上清中可溶性蛋白总量达到415 mg/L, 经SDS-PAGE电泳验证, 该大黄鱼生长激素分子量为22 kDa。发酵结果见图1, 电泳结果见图2。
注:M为蛋白质分子量标准;1、2、3、4、5、6、7、8、9分别为发酵48 h、72 h、90 h、110 h、132 h、140 h、156 h、178 h、186 h发酵液上清
2.2 发酵液冻干粉的促生长作用
经过45 d的对比试验, 测量试验鱼体重和体长, 统计总投饵量, 大黄鱼饲养结果见表1、眼斑拟石首鱼饲养结果见表2。
注:浓度1试验组、浓度2试验组分别添加0.1%、0.5%发酵冻干粉 (含大黄鱼生长激素) 。
注:浓度1、浓度2、浓度3试验组分别添加0.1%、0.5%、1%发酵液冻干粉 (含大黄鱼生长激素) 。
3 讨论
1) 从图1、图2可以看出, 该基因工程菌发酵周期为200 h, 菌体湿重达到310 g/L, 发酵液上清中可溶性蛋白含量达415 mg/L, 经过电泳证明, 该重组大黄鱼生长激素分子量约为22 kDa, 与前期分子生物学试验结果一致[10]。
2) 从表1、表2可看出, 利用基因工程技术生产的重组大黄鱼生长激素, 对大黄鱼和眼斑拟石首鱼鱼苗均具有促生长作用。大黄鱼试验组, 在0.1%发酵冻干粉的剂量下, 经过45 d的喂养试验后, 幼年大黄鱼平均增重率提高27.9%。经差异显著性t检验统计分析, 大黄鱼鱼苗的平均体重与对照组比较, 均差异极显著 (P<0.01) 。从表1数据显示, 大黄鱼喂养后, 体长没有明显增加。试验1组 (冻干粉添加量为0.1%) 鱼苗的增重率、成活率、肥满度、饲料系数等均好于其他浓度添加组, 可见较高的重组酵母添加量可造成鱼体消化器官负担过高, 影响消化吸收。在眼斑拟石首鱼试验组, 表现出类似大黄鱼试验组的现象。在0.1%发酵冻干粉的剂量下, 经过喂养后的美国红鱼比幼年美国红鱼平均增重率提高51%, 而体长增长并不明显, 因此, 较高浓度的添加量并没有体现更好的增重率和肥满度等。
重组大黄鱼pcGH作为饲料添加剂, 不仅对大黄鱼本身起作用, 而且在眼斑拟石首鱼喂养试验中也表现了明显的促生长作用。在这种情况下, 养殖周期缩短了, 成本降低了。这也说明了重组pcGH应用的广泛性, 可作为饲料添加剂应用于不同的水产养殖品种, 特别是名贵品种的养殖, 其经济价值将会相当可观。
摘要：利用构建的高效表达的大黄鱼生长激素 (pcGH) 酵母工程菌, 制成促生长饲料, 进行海水经济鱼类喂养试验, 对大黄鱼 (Pseudosciaena crocea) 和眼斑拟石首鱼 (Sciaenops ocellatus) 2种海水经济鱼类进行生长状况对比。结果显示, 重组大黄鱼pcGH对大黄鱼和眼斑拟石首鱼均表现明显的促生长作用, 经过45d的喂养试验后, 幼年大黄鱼平均增重率提高27.9%, 眼斑拟石首鱼平均增重率提高51.0%。该重组大黄鱼pcGH可作为饲料添加剂应用于水产鱼类特别是名贵品种的养殖, 提高经济效益。
关键词：大黄鱼,眼斑拟石首鱼 (美国红鱼) ,生长激素
参考文献
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哺乳仔猪早期补饲促生长 篇5
当仔猪出生后5日龄即开始强制性补料, 将仔猪料拌成糊状, 抹入仔猪嘴里, 1日2次。7-15日龄即开始补饲饲料, 把煮黄豆或煮玉米放入盆或干净地面内对仔猪实施诱食, 对个别诱食困难的仔猪, 也可用粉状饲料拌成糊状饲喂。为了提高饲料的适口性, 补饲的黄豆或玉米在煮沸时加入少许食盐或往粉状料中加入少许白糖, 让仔猪添食。一般经1-2天即可自行认食采料。
仔猪到哺乳中期, 即15-25日龄时, 将颗粒饲料调成配合饲料 (饲料中加少许食盐) , 每日喂食3-4次。配合饲料的适口性必须好, 日粮中粗蛋白质含量不能低于18%。如果在日粮中添加适量赖氨酸和微量元素, 效果更佳。
哺乳仔猪生长到后期, 即25-35日龄时, 母猪的泌乳量下降, 不能满足仔猪的生长需要。为了使仔猪生长不受影响, 给仔猪所补的饲料中配合饲料与青饲料按3∶1的比例拌匀, 青饲料要切细。在补饲时, 水槽和水槽要保持长期有水, 冬季最好用温水, 让仔猪自由饮用。
35日龄以后是仔猪脱离母乳向仔猪过渡、以吃料为主的关键时期, 这时仔猪的生长加快, 进入旺食期, 此时要让仔猪吃到更多适口性好而营养全的饲料。要加强饲养管理, 做到少喂勤添, 每日饲喂5-6次, 晚上10点左右再增喂1次, 同时减少青料喂量。为了满足仔猪的快速生长速度, 最好在仔猪7-15日龄对仔猪进行阉割。
45日龄时要做好仔猪疾病预防保健, 给仔猪进行健胃、驱虫。保持环境卫生, 并与母猪按时分群饲养管理。
推广应用温室除雾防病促生长系统 篇6
(1) 可预防病害的发生。对芹菜、油菜、青椒、番茄、甜瓜、草莓、葡萄、樱桃、菊花等设施栽培。对气传疾病的综合防效大于70%, 土传疾病的综合防效大于52%, 每棚用药次数可减少80%。
(2) 可优化质量。对甜瓜、西瓜、葡萄等果蔬产品类可提高果实含糖量19%~23%。水萝卜、白萝卜等果蔬产品类可提高含糖量21%~30%。
(3) 可提高产量。叶菜类蔬菜的增产幅度一般保持在17%~34%, 果菜类21%~40%, 根菜类23%~40%。
(4) 可节水节肥。由于植物土壤为空间电场的阴极, 根据阴极聚水的原理, 空气中的水分将时刻聚向地面。每公顷年节水450吨或减少浇灌次数30%。空间电场的上空电极线可电离空气而将空气中的氮气转化为植物可以利用的氮肥, 1/15公顷 (1亩) 温室年产生氮肥34千克, 可节约氮肥40千克以上。
由于我区设施农业面积大、品种多, 是农民增收的重要途径。为此区农机中心把此项技术列为为农民增产增收技术推广的应用项目, 在服务过程中首先做好项目宣传推广工作, 在农机中心领导的带领下, 深入到有关乡镇和单位提供以上技术信息, 介绍该项实用新技。同时, 邀请了大连市农机推广站的技术人员到项目实施地安装、调试了3DFC-660型温室电除雾防病促生长系统, 并安排了专人负责操作使用和对照记录。在使用期间经常走访, 随时随地了解使用情况, 做好技术指导和技术服务方面的工作。
促甲状腺激素异常对优生的影响 篇7
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取我院2012—2014年收治的353例促甲状腺激素异常妊娠妇女作为试验组,平均年龄(25±8)岁。入选标准:血清促甲状腺激素(TSH)增高(大于2.5μmol/L)、血清游离四碘甲酰原氨酸(FT4)减低(小于12 pmol/L)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)阳性(大于50 U/ml)。排除先天智力低下及甲状腺以外所有疾病。同时选取353名来我院同期接受健康体检孕妇作为对照组,平均年龄(26±9)岁。两组研究对象一般资料对比,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2 方法
检测试验组孕妇所生产的婴幼儿在新生儿期、12个月、24个月、36个月时的甲状腺功能,运用由瑞士罗氏公司生产的Elecys 2010全自动电化学发光免疫分析仪检测血清游离三碘甲酰原氨酸(FT3)、FT4,TSH等,同时检测婴儿体质量、发育商及身长,同时对对照组孕妇生产的婴儿实施相同的检测。
运用首都儿科研究所制造的0~6岁儿童智能诊断箱对婴幼儿的智力、运动发育情况进行测评,使用GESELL量表制作的发育测评表考察婴幼儿的大运动、精细运动、个人—社较、语言及适应性行动等方面,小于75分则表示为发育不良。由3名儿科心理医师评价婴幼儿智力和运动发育,测试采用复核法和单盲法,以避免主观偏差及保证测试质量。
1.3 统计学处理
本研究所收集数据采用SPSS 15.0统计软件进行处理与分析,计量资料以±s表示,组间比较采用t检验,计数资料以例(%)表示,组间比较采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组甲状腺功能
与对照组相比,试验组新生儿时期的TSH水平均有所提高(P<0.05),血清FT3,FT4水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组在12月、24个月及36个月时的TSH,血清FT3,FT4水平比较,差异无统计学意义(P>0.01),见表1。
2.2 两组婴幼儿发育商和身体发育
两组婴幼儿新生儿期、12月、24个月及36个月的体质量、身长、发育商等各项情况比较,差异有统计学意义(P<0.05),见表2。
3 讨论
甲状腺功能减退即由于甲状腺激素合成及分泌减少或其生理效益不足,从而导致机体代谢降低。甲状腺激素作为人体生长发育的必需激素,在机体的所有器官和组织中起着关键作用,还会影响人体各项功能,如组织分化、生长、生殖、发育等[2]。充足的碘和正常的T3浓度是人体大脑发育的主要依赖来源,其中神经细胞的增殖、分化、移行、神经树突和触突的发育和生长激素都来自T3。可以说一旦缺乏T3,产生的损害是不可逆的。一般引起母体甲状腺激素缺乏的主要原因为甲减,近年来临床广泛重视母体甲状腺激素异常对胎儿脑发育的影响[3]。本研究结果显示,与对照组相比,试验组新生儿时期的TSH水平均有所提高(P<0.05),血清FT3,FT4水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组婴幼儿在12月、24个月及36个月时的TSH,血清FT3,FT4水平比较,差异无统计学意义(P>0.01)。两组婴幼儿新生儿期、12月、24个月及36个月的体质量、身长、发育商等各项情况比较差异均有统计学意义(P<0.05)。
综上所述,新生儿的智力发育,甲状腺功能及身体发育情况会受妇女在妊娠期间促甲状腺激素异常影响,对此,有必要加强对患有甲状腺疾病产妇的早期筛查和治疗,对优生优育有积极的促进作用。
参考文献
[1]陈敏,陈捷.血清雌二醇、甘胆酸、促甲状腺激素和甲状腺过氧化物酶抗体测定在妊娠期肝内胆汁淤积症中的临床意义及优生意义[J].中国优生与遗传杂志,2013(2):61-62.
[2]刘小莲,邱文,梁秋波,等.妊娠早中期妇女亚临床甲状腺功能异常对后代甲状腺功能和智力及身体发育的影响[J].中国全科医学,2012,15(15):1698-1700.
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促生长激素神经肽 篇8
关键词：GnRH-α,子宫内膜异位症,疗效对比
子宫内膜异位症是生育期女性常见的妇科疾病, 在育龄期的发病率为5%~15%, 来源至今尚未阐明, 可以侵犯全身任何部位, 严重影响患者的身体健康和生活质量。有时手术很难彻底清除病灶, 术后复发率较高, 常需综合治疗。我院自2009年1月至2011年12月间使用Gn RH-α治疗腹腔镜术后的子宫内膜异位症, 取得了较好的疗效, 现将其临床资料进行分析和讨论, 报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
全组68例均为在我院行腹腔镜下行病灶剔除, 术后病理均为良性改变的卵巢子宫内膜异位症患者;且无严重心血管和肿瘤病史, 无使用Gn RH-α和孕三烯酮的禁忌症, 肝肾功能正常, 近期无服用类固醇激素史。治疗前知情选择随机分为亮丙瑞林组和孕三烯酮组, 每组各34例;将两组的年龄、病程、临床分期等一般资料进行比较, P>0.05, 无明显差异, 具有可比性。
1.2 治疗方法
(1) 亮丙瑞林组:自月经第1天开始下腹部皮下注射长效Gn RH-α (亮丙瑞林, 上海丽珠制药) 3.75mg, 每4周一次, 共3~6次;其中Ⅰ期患者3次, 其余6次。 (2) 孕三烯酮组:月经第1天开始服用孕三烯酮2.5mg, 每周2次。 (3) 连续用药6个月为一个疗程;治疗前后及用药期间观察两组的症状、体征、肝肾功能、血清E2及CA-125变化, 药物不良反应等情况;用药期间每月复诊一次, 半年后每2个月复诊一次, 停药1年判断疗效。
1.3 疗效判定
从临床症状、体征、盆腔B超检查结果等指标进行比较: (1) 完全改善:症状体征消失, 辅助检查正常, 即临床治愈; (2) 改善:症状体征较前好转, 辅助检查基本正常; (3) 无效:症状体征无好转, 甚至再次出现周期性、渐进性下腹痛, 盆腔包块或结节出现或增大等复发症状。总有效率=完全改善率+改善率。
1.4 统计方法
文中计量数据以表示, 计数资料用χ2检验, 组间用t检验, 应用SPSS13.0统计软件进行处理, 当P<0.05时为差异显著, 具有统计学意义。
2 结果
两组均有少数头痛、乏力、多毛、痤疮等药物不良反应, 孕三烯酮1例因药物性肝脏损害停药。将两组治疗和随诊情况进行比较, P<0.05, 存在显著差异, 亮丙瑞林组优于孕三烯酮组 (表1) 。
3 讨论
3.1 疾病特点
子宫内膜异位症是指具有活性的子宫内膜组织出现在子宫内膜以外部位, 绝大多数在盆腔内, 以卵巢和阔韧带最常见;育龄期为高发年龄, 典型症状是继发性的渐进性痛经、腹部包块、月经紊乱, 甚至不孕症;治疗强调个体化, 腹腔镜手术是首选的治疗方法, 以腹腔镜确诊, 手术+药物治疗为金标准[1]。由于生活节奏、工作压力和价值观的改变, 该病的发病率近年来有明显上升的趋势, 严重影响患者的身体健康和生活质量。但是手术治疗只能切除肉眼能辨的病灶, 对于一些非典型的微小的和早期侵袭性病灶难以完全根除, 术后临床症状体征改善不明显, 甚至可以复发。但雌激素与该病的关系密切, 妊娠或使用性激素抑制剂抑制卵巢功能可暂时阻止此病的发展。
3.2 药理基础
(1) Gn RH-α是人工合成的十肽化合物, 作用与天然的Gn RH相同, 但活性比其高一百倍, 能促进垂体LH和FSH释放;抑制垂体分泌促性腺激素, 导致卵巢激素水平明显下降, 3~6周内卵巢功能显著下降至近似于绝经期或手术走势水平, 出现暂时性闭经, 从而使残留的内膜异位病灶萎缩退化, 还有促进内膜细胞凋亡和抑制其增值分泌的作用;经研究可有效抑制残存病灶的发展, 预防和减少复发[2]。本文中亮丙瑞林组在治愈率、总有效率、症状消除时间、不良反应率、复发率等方面都明显优于孕三烯酮组, 体现出很大的优势。
3.3 临床体会
Gn RH-α主要不良反应为低雌激素引起的围绝经期综合征, 如潮热、出汗、骨量减少甚至骨质疏松等, 使用超过3个月时应及时给予反添加治疗[3]。因此Gn RH使用过程中要监测血清E2。根据血清E2水平确定给药的时间和剂量, 适时予以反添加治疗, 添加过程中要监测血清E2, 使血清E2维持在治疗窗内。建议每次注射之前检查E2, 当血清E2<110pmol/L时给予戊酸雌二醇0.5~2mg/d, 药物添加剂量控制血清E2在110~140pmol/L之间为宜。
综上所述, Gn RH-α治疗腹腔镜病灶剔除术后的子宫内膜异位症, 具有疗效佳、起效快、不良反应少、复发率低, 患者治疗依从性高等优点, 值得临床推广和使用。
注:P<0.05
参考文献
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