大黄颗粒（精选4篇）
大黄颗粒 篇1
大黄通便颗粒主要是由大黄等中药组成, 具有清热通便的功效, 临床常用于治疗实热食滞、便秘以及湿热型食欲不振等。大黄为其方中主药, 芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚为其所含的主要有效成分, 故本研究参考中国药典2010年版一部大黄药材[1]及文献报道的含量测定方法, 建立高效液相色谱法测定芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量, 并对方法学进行了考察, 该方法简便, 可行, 重复性好。
1 仪器和试药
1.1 仪器
Agilent 1200液相色谱仪;超纯水器 (MILLI-Q) ;KQ-500VDB型三频数控超声波清洗器 (奥特宝恩斯仪器有限公司) 。
1.2 试药
对照品:芦荟大黄素对照品 (含量以98.0%计, 购自中国药品生物制品检定所, 批号:110795-201007) ;大黄酸对照品 (供含量测定用, 购自中国药品生物制品检定所, 批号:0757-200206) ;大黄素对照品 (供含量测定用, 购自中国药品生物制品检定所, 批号:110756-200110) ;大黄酚对照品 (供含量测定用, 购自中国药品生物制品检定所, 批号:110796-200514) ;大黄素甲醚对照品 (含量以99.8%计, 购自中国药品生物制品检定所, 批号:110758-201013) 。样品:大黄通便颗粒 (江苏辰牌药业有限公司, 批号:110118、110307、110316) 以及阴性样品。试剂:甲醇为色谱纯, 磷酸为分析纯, 提取用的甲醇、二氯甲烷为分析纯, 水为超纯水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:XB-C18 (5μm, 4.6mm×250mm) ;流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液 (85:15) ;检测波长为254nm;理论塔板数按大黄素峰计算应不低于3 000。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备
精密称取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品和大黄素甲醚对照品适量, 加10%二氯甲烷的甲醇溶液溶解, 分别制成每1mL含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各100μg, 大黄素甲醚50μg的溶液;分别精密量取上述对照品溶液各1mL, 置同一25mL量瓶中, 加10%二氯甲烷的甲醇溶液定溶至刻度, 摇匀, 即得。
2.2.2 供试品溶液制备
取本品粉末 (过四号筛) 约2g, 精密称定, 置具塞锥形瓶中, 精密加入甲醇25mL, 密塞, 称定重量, 加热回流45min, 放冷, 密塞, 再称定重量, 用甲醇补足减失的重量, 摇匀, 滤过, 精密量取续滤液10mL, 置烧瓶中, 挥去溶剂, 加8%盐酸溶液10mL, 超声处理 (功率250W, 频率40kHz) 2min, 再加二氯甲烷10mL, 加热回流1h, 冷却, 移至分液漏斗中, 用少量二氯甲烷洗涤容器, 并入分液漏斗中, 分取二氯甲烷液, 酸液用二氯甲烷振摇提取2次, 每次15mL, 合并二氯甲烷液, 减压回收溶剂至干, 残渣加10%二氯甲烷甲醇溶液使溶解, 转移至25mL量瓶中, 加10%二氯甲烷甲醇溶液至刻度, 摇匀, 滤过, 取续滤液, 即得。
2.2.3 阴性样品溶液的制备
取缺大黄阴性样品, 按供试品溶液制备方法制备阴性样品溶液。
2.2.4 测定法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μL, 注入液相色谱仪, 测定, 即得。
2.3 空白试验
分别吸取“2.2”项下的混合对照品溶液、供试品溶液及阴性样品溶液, 注入高效液相色谱仪进行测定, 实验结果表明阴性样品溶液在与对照品相应的保留时间处无色谱峰出现。方中各味药对芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚色谱峰无干扰。结果见图1。
2.4 线性试验
精密称取在105℃干燥12h的芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品和大黄素甲醚对照品适量, 加10%二氯甲烷的甲醇溶液溶解分别制成每1mL含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各100μg, 大黄素甲醚50μg的溶液。分别精密吸取上述5种溶液各1、2、3、4、5、6、16mL分别置100mL容量瓶中, 加10%二氯甲烷的甲醇溶液稀释定容至刻度, 摇匀, 即得, 精密吸取20μL, 分别注入高效液相色谱仪中, 按上述色谱条件进行测定。以进样量 (X) 对峰面积 (Y) 进行线性回归, 得回归方程为:芦荟大黄素Y=5 545.9X-31.839, r=0.999 8;大黄酸Y=4 695.2X-20.192, r=0.999 7;大黄素Y=4 000.5X-14.995, r=0.999 7;大黄酚Y=5 814.8X-28.445, r=0.999 6;大黄素甲醚Y=3 088.1X-7.916 2, r=0.999 6。试验结果表明, 芦荟大黄素在0.024 36～0.389 8μg/mL范围内呈良好线性关系;大黄酸在0.018 1～0.289 6μg/mL范围内呈良好线性关系;大黄素在0.018 56～0.297 0μg/mL范围内呈良好线性关系;大黄酚在0.018 66～0.298 6μg/mL范围内呈良好线性关系;大黄素甲醚在0.01～0.16μg/mL范围内呈良好线性关系。
2.5 重复性试验
取同一批号 (批号:110118) 样品, 按“2.2”项下供试品的方法, 平行制备6份供试品溶液, 进样测定, 计算芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量, RSD分别为1.01%、2.62%、1.18%、2.54%、2.99%, 表明该方法重复性良好。
2.6 稳定性试验
取同一批号 (批号:110118) 样品溶液, 分别于0、2、4、6、8、10、12h后按上述色谱条件测定芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量, 含量基本不变, RSD分别为2.79%、1.48%、0.50%、0.82%、0.57%, 表明供试品液在12h内稳定性良好。
2.7 精密度试验
在上述色谱条件下, 取按“2.2”项下配置的芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚对照品溶液分别连续进样6次, RSD分别为1.01%、0.45%、0.68%、0.73%、0.79%。
2.8 回收率试验
精密称取已知含量的大黄通便颗粒 (江苏辰牌药业有限公司, 批号:110118) 样品, 分别精密加入一定量的芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚对照品, 按“2.2”项下操作制备供试品溶液并测定, 计算回收率, 取得了较满意的回收率, 表明该方法可行。结果见表1、2、3、4、5。
2.9 样品测定
取3批样品, 按“2.2”项下供试品溶液制备方法制备, 按上述色谱条件测定, 计算, 结果见表6。
3 讨论
我们曾比较氯仿与二氯甲烷作为提取溶剂进行提取, 结果表明二者提取的含量相当, 而氯仿毒性较大, 故采用二氯甲烷作为本方法的提取溶剂。本实验所采用测定方法测定芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚, 重现性良好, 回收率高, 且在该色谱条件下, 芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚进样精密度良好, 故该方法结论可靠, 可作为大黄通便颗粒的质量控制标准。
参考文献
[1]国家药典委员会编.中国药典2010年版[S].一部.北京:中国医药科技出版社, 2010:22-23.
大黄有效成分颗粒治疗糖尿病便秘 篇2
1 资料与方法
1.1 一般资料
对我院2006年8月～2011年10月的252名糖尿病门诊病人进行统计分析发现:存在消化道症状的有130人, 占51.6%;从附表可见, 其中便秘又是最主要的症状, 约有46.8%的糖尿病人在患病过程中出现过便秘。118例糖尿病便秘患者均来自我院门诊病人, 按1999年WHO糖尿病 (包括1型、2型及其它特殊类型, 不包括妊娠糖尿病。) 诊断标准, 并均具有慢性便秘者, 按2006年功能性慢性便秘罗马Ⅲ诊断标准[2], 可同时和/或伴有腹胀、腹痛、纳呆等。我们将这118例患者随机分为大黄有效成分提取颗粒组 (治疗组) 及果导片组 (对照组) 。两组患者在性别、平均年龄、糖尿病及便秘病程等均无显著性差异 (P>0.05) , 具有可比性, 见附表。
1.2 治疗方法
治疗组选用大黄有效成分提取颗粒 (广东一方制药有限公司, 主要成份为大黄) 1包/次, tid, 冲服, 待大便通后减为1包/次, qd, 连续服1～2w;对照组选用果导片2片次, tid, 待大便通后立即停药, 一般用1～3d。
2 结果
两组病人均100%治愈, 但治疗组大便通后保持大便1～2次/d, 成形, 且100%无复发 (住院期间) ;而对照组服药后有26例 (约50%) 大便为4～6次/d, 质稀, 病人难以耐受, 停药后有39例 (约80%) 复发 (住院期间) 。两组通便效果均为100%, 无差异, 但其复发率有显著差异 (P<0.05) , 病人耐受能力亦有显著差异 (P<0.05) 。
3 讨论
糖尿病胃肠功能紊乱所致的消化道症状在临床上较为多见, 特别是便秘更为常见, 临床医生一般予以果导片等对症治疗, 虽然有暂时的效果, 但往往导致病人大便次数明显增多, 伴有腹痛等症状, 给病人带来一定的痛苦, 并且容易复发。我们在临床中选用了中药制剂大黄有效成分提取物治疗糖尿病便秘获得了较为理想的效果。
大黄出自《神农本草经》, 祖国医学认为大黄性苦、寒, 归属胃、脾、大肠、肝、心包经, 具有泻热通便、止血解毒、活血化瘀等作用;现代药理研究证实, 大黄主要化学成分为蒽醌及其衍生物, 如大黄素、大黄酸、芦荟大黄素等;大黄多糖, 大黄鞣质。大黄具有泻下作用主要因为含有蒽醌类化合物, 其中以番泻苷的致泻作用最强, 而游离型蒽醌泻下作用相对较弱[3]。也曾有报道, 大黄还具有保肝利胆、促进胰腺分泌, 具有降血压、血糖、血脂及消炎杀菌的功效, 对慢性肾功能不全患者可以帮助治疗氮质血症, 同时还有明显提高机体免疫力、抗衰老、延年益寿的功效[4]。所以我们选择大黄有效成分提取颗粒来治疗糖尿病的便秘, 不但其泻下力并不峻猛, 病人用药后, 大便一般保持成形, 质稍软, 1～2次/d, 无明显痛苦, 而且对糖尿病人有一定的降血糖等作用, 并对肾功能有一定的保护作用, 适合临床推广。
参考文献
[1]谢桂华, 孙风欣, 田微.糖尿病性便秘患者的饮食护理[J].中华临床医学研究杂志, 2007, 13 (7) :917-918.
[2]Longstreth GF.Thompson WG.Chey WD, Funetional Bowel Disorders.In:Drossman DA eds, RomeⅢ:the functional gastrointestinal disor-ders[J].Melean:Degnon Associstes, 2006.487-555.
[3]庄江能.大黄的主要成分及其临床药理研究进展[J].西南军医, 2009, 11 (5) :931-933.
大黄颗粒 篇3
关键词：重症急性胰腺炎,大黄颗粒,保留灌肠,辅助治疗,护理
重症急性胰腺炎 (severe acute pancreatitis, SAP) 是指急性胰腺炎 (acute pancreatitis, AP) 伴有脏器功能障碍, 或出现坏死、脓肿或假性囊肿等局部并发症者, 或两者兼有, 其病情凶险, 病程进展快, 病死率达20%~30%[1]。因此, SAP的治疗方案一直是内外科领域研究的热点。研究表明, 中药大黄对SAP有一定疗效[2]。2012年5月—2013年10月我科采用保留灌肠的方式用大黄颗粒辅助治疗SAP, 并给予相应的护理措施, 取得了较好的临床疗效。现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2012年5月—2013年10月在我科治疗的40例SAP病人为研究对象。入选标准: (1) 符合2003年拟订的《中国急性胰腺炎诊治指南 (草案) 》关于SAP的诊断标准[3]; (2) 年龄20岁~65岁; (3) 发病24h内就诊。排除标准: (1) 孕妇; (2) 淀粉酶不升高的SAP病人; (3) 年龄大于65岁的病人; (4) 伴有明显的高血压病、心脏病的病人; (5) 不配合治疗者。
将符合标准的40例病人随机分为观察组和对照组。观察组20例, 男13例, 女7例, 年龄36.50岁±12.71岁, 急性生理功能和慢性健康状况评分系统Ⅱ (APACHEⅡ) 评分10.95分±2.03分;对照组20例, 男14例, 女6例, 年龄35.40岁±11.70岁, APACHEⅡ评分11.00分±1.97分。两组病人入院时年龄、性别、APACHEⅡ评分比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) 。研究期间病人依从性良好, 无脱落病例。
1.2 方法
1.2.1 治疗方法
两组病人均按SAP常规处理原则, 给予病情监护、禁食、胃肠减压;纠正水电解质酸碱平衡紊乱;应用胰腺外分泌和胰酶抑制剂;静脉应用抗生素预防感染;营养及对症支持等治疗。观察组在此基础上配合应用农本方大黄颗粒所制药液保留灌肠。具体方法:取农本方大黄颗粒6g (等同于生大黄30g) 加温开水 (39℃~41℃) 200mL, 充分溶解搅匀, 然后取50 mL注射器抽吸药液接一次性吸痰管 (代替肛管) , 用液状石蜡润滑前端, 病人取合适体位, 抬高臀部10cm, 轻轻插入肛门, 深度15cm~20cm, 之后缓慢注入药液。注完药液后拔出管道, 嘱病人保留1h以上, 每天2次, 连续5d~7d。
1.2.2 护理
1.2.2. 1 一般护理
指导病人绝对卧床休息, 协助病人取舒适体位, 告知病人禁食、胃肠减压的重要性及意义, 做好胃肠减压护理、口腔护理及其他基础护理, 保持相关管道固定和通畅。密切观察病人生命体征、腹痛、电解质、胰淀粉酶的变化。严密观察病人的生命体征, 当体温>37.5℃, 脉搏≥100/min, 呼吸≥30/min, 收缩压≤80mmHg (1mmHg=0.133kPa) , 脉压≤20mmHg, 应及时报告医生, 防止休克、急性呼吸窘迫综合征的发生。通过听取病人的主诉了解腹部疼痛部位、性质、时间、程度等情况, 必要时给予解痉止痛, 使病人处于安静、舒适的状态。密切观察血钾、血钙浓度, 当血钾≤2.5mmol/L、血钙≤1.4mmol/L时可引起手足抽搐, 常是病人预后不良的征兆。严密观察胰淀粉酶的变化情况, 及时向医生汇报。密切观察24h出入量, 关注大便的次数和性状。
1.2.2. 2 心理护理
因本病起病急, 起病后腹痛、腹胀、呕吐症状明显, 病情进展快、易反复, 病程长, 治疗时每天需静脉输液较多及胃肠减压, 所以大部分病人常常伴有紧张、焦虑的情况, 在一定程度上影响了疾病治疗的效果。为此, 因人而异给予病人相应的心理疏导, 耐心解答相关问题, 并向病人讲解有关治疗和康复知识, 可以减轻病人对相关治疗的顾虑, 减轻其心理压力, 树立其战胜疾病的信心, 使其积极配合治疗。
1.2.2. 3 中药保留灌肠的护理
灌肠前做好病人的思想工作, 向其介绍本病特点及中药保留灌肠的目的、效果及过程, 让其积极努力配合。灌肠时注意遮挡保护病人, 并做好保暖措施。灌肠液温度要适当, 以39.0℃~41.0℃为宜。适当的温度可促进改善肠道血液循环, 促进炎症消散和局限, 降低痛觉神经的兴奋性。灌肠操作中动作要轻柔, 插管要慢, 以免肛门括约肌痉挛造成插管困难影响保留效果, 如遇阻力, 可退出少许, 旋转后再插, 并注意插管不能过浅, 因为插入过浅可引起灌肠液外溢, 使药物难于保留。在灌肠过程中注意观察病人反应。如病人有便意, 嘱其做深呼吸, 尽量使药液保留在肠腔内;如病人便意明显且不能忍受, 可提前拔出代肛管;如病人生命体征发生变化, 应立即拔出代肛管, 停止灌肠。拔管前给予适当的肛门按摩, 待病人适应后再拔管。拔管动作应缓慢轻柔, 避免肛门括约肌痉挛导致排便反应, 影响药液保留的时间。灌肠后药物发挥作用时部分病人可能会出现腹痛并有不同程度加重和肠鸣音亢进的情况, 注意密切观察, 并做好解释工作, 告知其不必紧张, 此属药效发挥作用的表现。
1.2.2. 4 健康教育
出院前对病人及家属进行有目的、有计划的教育活动, 提高病人自我保健和自我护理能力。向病人和家属介绍本病的诱因, 强调预防复发的重要性, 积极治疗胆道疾病, 养成良好的饮食习惯和规律饮食。严格禁烟酒, 忌暴饮暴食, 从而减少对胰腺的刺激, 避免急性胰腺炎的再次发作。告知病人胰腺炎渗出物往往需要3个月~6个月才能完全被吸收, 在此期间可能会出现胰腺囊肿、胰漏等并发症, 如发现腹部肿物不断增大, 并出现腹痛、腹胀、呕血、呕吐等症状, 及时就医。
1.2.3 评价指标
观察两组病人腹痛缓解时间、腹胀缓解时间、腹部压痛消失时间、自主通便时间、C反应蛋白 (CRP) 恢复正常时间、住院时间、中转手术的比例。
1.2.4 统计学方法
采用SPSS13.0统计软件进行分析。描述性统计分析, 计数资料以百分率描述, 计量资料以均数±标准差 (±s) 表示。两组间对比分析, 计数资料采用χ2检验, 计量资料符合正态分布用两个独立样本t检验, 非正态分布采用两个独立样本非参数检验, 以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
3 讨论
SAP病人都有胰腺坏死, 可引起腹腔大量体液渗出以及休克, 从而导致肠道蠕动功能消失, 出现肠黏膜屏障功能障碍 (IBFD) 。而IBFD可导致肠道细菌及内毒素自肠道易位进入血液循环, 刺激已活化的单核和巨噬细胞, 释放过量的细胞因子和炎性介质, 引发全身炎症反应综合征 (SIRS) , 造成多脏器损伤, 最后发展至多器官功能障碍综合征 (MODS) [4]。因此尽早恢复肠道功能是临床救治SAP的重要措施。大量研究证实部分中药在改善SAP病人肠道功能方面有不可替代的作用。中药大黄具有泻下攻积、清热泻火、解毒、活血祛瘀等功效, 其在治疗SAP的历史悠久, 作用多靶点, 疗效已得到肯定[5]。药理实验表明, 大黄具有促进大肠蠕动;维护肠道屏障功能, 防止细菌异位;利胆、松弛Oddi括约肌;抑制胰酶分泌;改善微循环, 防止微血栓等药理作用[6,7,8]。近年研究表明, 大黄可通过降低血液、腹水中的炎性细胞因子白细胞介素-1 (IL-1) 、白细胞介素-6 (IL-6) 、白细胞介素-8 (IL-8) 的水平而减轻胰腺病理损伤[9,10]。因此, 应用大黄已经成为临床治疗SAP的重要手段。因SAP病人存在不同程度的肠道功能障碍, 临床多采用大黄药液灌肠, 利用肠道黏膜直接吸收药物达到治疗SAP的目的。由于生大黄易为高温破坏影响药效, 不宜先煎、久煎, 故本研究采用温开水冲泡等效大黄颗粒来制取大黄药液, 然后进行保留灌肠治疗SAP。研究证实, 应用农本方大黄颗粒保留灌肠辅助治疗SAP, 并给予相应的护理措施, 可以有效缓解SAP病人的症状、体征, 促进肠道功能恢复, 保护肠黏膜屏障功能, 减少肠源性毒素血症的发生。其疗效确切、价格低廉、操作简便、副反应少, 并能保证病人入院后1h内落实大黄液保留灌肠。
参考文献
[1]Gerlach H.Risk management in patients with severe acute pencreatitis[J].Crit Care, 2004, 8 (6) :430-432.
[2]中华医学会外科分会胰腺外科学组.重症急性胰腺炎诊治原则草案[J].中华外科杂志, 2001, 39 (12) :963-964.
[3]中华医学会消化病学分会胰腺疾病学组.中国急性胰腺炎诊治指南 (草案) [J].中华内科杂志, 2004, 43 (3) :236-238.
[4]王兴鹏, 龚自华.急性胰腺炎的发病机制新概念[M]//王兴鹏.现代胃肠病学:高级进修教程.上海:上海科学技术文献出版社, 2001:90-108.
[5]赵雩卿, 刘晓红.大黄对急性胰腺炎多靶点的治疗作用[J].胃肠病学, 2003, 8 (5) :316-317.
[6]郭文霞, 李美霞, 杨延艳.大黄低压保留灌肠治疗急性胰腺炎的疗效观察[J].护理研究.2012, 26 (5C) :1397-1398.
[7]赵金锋, 刘世宾, 罗静, 等.大黄及丹参注射液对实验性急性胰腺炎小鼠小肠隐凹素-4基因表达影响的研究[J].中国中医药科技, 2010 (1) :34-35.
[8]姜良富.大黄对重症急性胰腺炎的影响及细菌移位研究[J].中国医药导报, 2010, 7 (3) :24-25.
[9]Chen WC, Nie JS.Genetic polymorphism of MCP-1-2518, IL-8-251and susceptibility to acute pancreatitis:A pilot study in population of Suzhou, China[J].World J Gastroenterol, 2008, 14 (37) :5744-5748.
大黄颗粒 篇4
关键词：大黄总蒽醌,含量测定,分光光度法,骨伤康复外洗颗粒
骨伤康复外洗颗粒主要有大黄、黄柏、泽兰、侧柏叶、制马钱子等药材组成, 临床主要用于伤筋伤骨, 关节脱位中后期, 筋骨不利, 关节活动功能障碍等疾病, 疗效显著。目前该制剂质量标准已建立薄层色谱法鉴别, 为更有效地控制该制剂的质量, 保证临床用药效果, 对其进行含量测定研究。利用大黄蒽醌类化合物能与醋酸镁反应显色的原理, 以显色剂为空白, 采用紫外分光光度法, 不水解、不分离、直接测定制剂中大黄总蒽醌的含量[1], 结果令人满意, 现报道如下:
1 仪器与试药
1.1 仪器
UV-3010紫外分光光度计 (日立公司) ;FA1104N型电子分析天平 (上海民桥精密科学仪器有限公司) ;TDL-50B型台式离心机 (上海安亭科学仪器厂) 。
1.2 试药
大黄素对照品 (中国药品生物制品检定所, 批号:710756-200110) ;骨伤康复外洗颗粒 (本院) ;阴性对照物 (自备) ;乙醇, 醋酸镁等均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备
取大黄素3.6 mg, 精密称定, 置25 ml量瓶中, 加乙醇溶解并定容至刻度, 摇匀, 即得对照品溶液。2.1.2供试品溶液的制备取骨伤康复外洗颗粒适量, 研细, 称取1 g, 精密称定, 置具塞锥形瓶中, 加乙醇20 ml, 超声处理20 min, 放置1 min, 将上清液移至50 ml量瓶中, 再反复提取3次, 每次用乙醇约10 ml, 将残渣用乙醇洗涤至乙醇溶液为无色, 洗液与提取液合并置量瓶中, 加乙醇至刻度, 摇匀, 滤过 (或离心) , 取续滤液 (或上清液) 作为供试品溶液。
2.1.3 阴性对照溶液的制备
按全方比例称取除大黄以外其他药材, 按处方制备工艺制得阴性样品, 按“2.1.2”项下方法制得缺大黄阴性溶液。
2.2 测定波长的选择
精密吸取大黄素对照品溶液3 ml, 置25 ml量瓶中, 加乙醇2 ml, 加1%醋酸镁乙醇溶液, 稀释至刻度, 摇匀, 放置, 显色3 min, 以相应的试液为空白, 在400~700 nm范围内扫描测定吸收光谱, 结果大黄素对照品溶液显色后在509 nm波长处有最大吸收。笔者选择509 nm为检测波长。
2.3 标准曲线的绘制
精密吸取对照品溶液 (0.144 mg/ml) 0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml, 分别置25 ml量瓶中, 加乙醇2 ml, 加1%醋酸镁乙醇溶液稀释至刻度, 摇匀, 放置, 显色30 min, 分别于509 nm处测定吸光度, 记录数据。结果以大黄素对照品浓度 (μg/ml) 为横坐标, 吸光度为纵坐标, 绘制标准曲线, 并进行线性回归, 得到回归方程:C=0.034 6A+0.050 4 (r=0.999 3) , 结果表明, 大黄素在2.88~28.80μg/ml范围内与吸光度呈良好的线性关系。
2.4 阴性干扰试验
分别精密吸取大黄素对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液, 各3 ml, 依照上述条件方法进行测定。结果大黄素对照品溶液在509 nm波长处有最大吸收, 供试品溶液在相同的波长处有较大吸收, 阴性对照品溶液在相同波长处无干扰峰。见图1。
2.5 精密度试验
精密吸取对照品溶液 (0.144 mg/ml) 3 ml, 依法操作, 连续测定6次, 记录其吸光度, 计算RSD值, 结果对照品的吸光度RSD<3.0%, 表明该法精密度良好。
2.6 稳定性试验
取同一份供试品溶液 (批号:20090922) 分别置0、1、2、3、4、6 h后, 精密吸取供试品溶液3 ml, 依法测定其吸光度, 计算含量, 并计算RSD值, 结果大黄总蒽醌含量的RSD值为1.81%, 表明样品溶液在6 h内基本稳定。
2.7 重现性试验
取同一批 (批号:20090922) 骨伤康复外洗颗粒样品5份, 每份约1 g, 精密称定, 依“2.1.2”项下方法制成供试品溶液, 分别吸取3 ml, 依法操作, 测定其吸光度, 计算含量及其RSD值, 结果大黄总蒽醌平均含量为5.249 6 mg/g, RSD值为0.62%, 表明该法重现性良好。
2.8 回收率试验
取同一批 (批号:20090922) 已知含量的骨伤康复外洗颗粒样品5份, 每份约0.5 g, 精密称定, 分别精密加入质量浓度为2.64 mg/ml的对照品溶液1 ml, 按“2.1.2”项下方法配制溶液, 依法测定其吸光度, 计算含量及大黄总蒽醌的回收率, 统计出平均值及RSD值。结果大黄总蒽醌的平均回收率为99.30%, RSD值为1.91%, 表明该方法准确度良好。结果见表1。
2.9 样品含量测定
取3份骨伤康复外洗样品, 依照“2.1.2”项下方法制成供试品溶液, 在509 nm波长处测定其吸光度, 代入回归方程, 计算含量, 结果见表2。
3 讨论
大黄所含蒽醌类成分一直被认为是其活性成分, 并用于其质量控制及制剂工艺考察。据报道, 大黄中蒽醌类成分含量测定的分析方法有高效液相色谱法、紫外分光光度法、薄层色谱法、毛细管电泳法、胶束荧光法、重量法等。许舜军等[2]采用反相高效液相色谱法测定大黄药材中5种蒽醌类成分的含量;苏彦斌等[3]采用高效液相色谱法测定大败毒胶囊中大黄酸、大黄素和大黄酚的含量;李敏等[4]建立大黄配方颗粒中大黄酸、大黄素、大黄酚的含量测定方法, 其方法简单快捷, 能有效地控制大黄配方颗粒的质量。
本研究利用大黄蒽醌类化合物能与醋酸镁反应生成络合物的原理, 以显色灵敏而稳定的特点, 采用紫外分光光度法, 不水解, 不分离, 直接测定该制剂中大黄总蒽醌的含量。
由于大黄游离蒽醌与结合蒽醌都能溶于乙醇, 样品超声提取3次后, 再用乙醇洗涤锥形瓶和残渣使洗涤液为无色, 可以认为大黄总蒽醌基本提取完全[5]。参考文献[6-8]对制剂大黄配方颗粒总蒽醌含量测定进行方法学研究, 并采用紫外分光光度法测定大黄总蒽醌含量。
本含量测定方法对供试品溶液的制备进行了索氏提取法, 加热回流法和超声处理三种方法的对比, 结果证实超声处理方法可行、安全、节约, 3批样品含量测定结果及平均回收率表明本研究方法测定含量准确, 重现性好, 快速方便, 初步制订本品中每克含大黄以大黄总蒽醌计不得少于5.0 mg作为骨伤康复外洗颗粒的含量测定标准。
参考文献
[1]刘腊娥, 陈铖, 陈立新.紫外分光光度法测定肛疾舒洗剂中大黄总蒽醌的含量[J].中国药业, 2005, 14 (3) :39-40.
[2]许舜军, 李鸿燕.反相高效液相色谱法测定大黄药材中五种蒽醌类成分的含量[J].时珍国医国药, 2006, 17 (7) :1201-1202.
[3]苏彦斌, 张凤荣.高效液相色谱法测定大败毒胶囊中大黄酸、大黄素和大黄酚的含量[J].中华临床医药杂志, 2004, 5 (18) :17-18.
[4]李敏, 刘渝.HPLC法测定大黄配方颗粒中大黄酸、大黄素、大黄酚的含量[J].现代中药研究与实践, 2005, 19 (5) :32-34.
[5]刘翠哲, 王汝兴, 等.测定大黄中总蒽醌含量的分光光度法改进[J].天津中医药, 2004, 21 (4) :335-336.
[6]李敏, 刘渝.大黄配方颗粒总蒽醌含量测定的方法学研究[J].成都中医药大学学报, 2006, 29 (1) :47-50.
[7]刘丽, 赵玉江, 柳森国.HPLC法测定刺五加注射液中总异嗪皮啶的含量[J].中国现代医生, 2007, 45 (9) :52-53.