人工分类白细胞（精选7篇）
人工分类白细胞 篇1
传统白细胞分类采用人工分类法, 不仅耗时, 而且分析结果不准确[1]。随着医学技术的发展, 医疗中的全自动血液分析仪在临床血液分析中得到全面应用和推广, 它有利于提高血液分析效率, 增强血液分析精确性, 为临床治疗提供良好依据[2]。因此, 本研究分别应用人工分类白细胞以及BC-5500和Sysmex Xs-500 i全自动血液分析仪进行白细胞检测, 对比其结果, 现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2010年10月-2012年10月期间我院收治120体检者的临床资料, 并收集其白细胞。白细胞总数为: (2.0~35.2) ×109/L, 其中男67例, 女53例, 患者年龄12~75岁, 患者平均年龄 (43.1±3.6) 岁。排除患有血液系统疾病的患者。
1.2 方法[3]
仪器试剂:日本生产Sysmex Xs-500 i全自动血液分析仪 (东亚公司) , 深圳迈瑞公司生产的BC-5500全自动血液分析仪。所有实际均为血液分析仪配套实际, 包括瑞氏一姬姆萨染液以及各种不同等级的质控品。人工分类采用Olympus显微镜。分析方法:在进行分析之前, Sysmex Xs-500 i以及BC-5500血细胞分析仪都经过原厂家的精确校准, 对其分别进行质控, 然后根据其各自的仪器操作规范对临床120例血液标本进行分析。根据《全国临床检验操作规程》[4]中的规定, 每一份标本都制作两张血液涂片, 以便于人工应用显微镜进行白细胞分类, 采用瑞氏一姬姆萨染液对血涂片进行染色, 随机选取其中的一份标本, 在100倍油镜下对120个白细胞进行分类计数, 并将其平均值计算出来, 作为不同白细胞相对应的靶值。
1.3 统计学方法
本次所有研究资料均采用SPSS 18.0统计学软件处理, 所有资料都采用秩相关分析方法。
2 结果
单核细胞相关系数为0.594, 淋巴细胞相关系数为0.92, 中性粒细胞相关系数为0.91, 嗜酸性粒细胞相关系数为0.712。
Sysmex Xs-500 i及BC-5500所得到的白细胞分类结果在相关性上表现为:单核细胞相关系数为0.652, 淋巴细胞相关系数为0.912, 中性粒细胞相关系数为0.913, 嗜酸性粒细胞相关系数为0.842。Sysmex Xs-500 i对超过1/10单核细胞标本的假阳性率为11%, 而BC-5500则为12%。
3 讨论
Sysmex Xs-500 i全自动血细胞分析作为Sysmex最新开发的紧凑型五分类血液分析仪之一, 其工作原理是:依据细胞产生的3种不同信号, 应用半导体激光对细胞标本进行照射, 产生区分, 分别出现侧向荧光、前向散射光及侧向散射光。出现侧向荧光, 则代表DNA和RNA的含量;出现前向散射光, 则代表细胞体积;出现侧向散射光, 则代表颗粒等。只要患者白细胞内部结构及表面改变不大, 则一般可得到正确分类结果。
BC-500血细胞分析仪, 具有检测标本快, 使用标本量少, 试剂消耗少, 操作方法方便等优点, 国内应用较广。其检测白细胞的过程是仪器利用激光流式细胞技术检测到全血细胞后再利用阻抗法原理进行白细胞检测, 该分析仪利用库尔特原理对白细胞、嗜碱性粒细胞进行计数, 检测标本经过二次稀释后进入白细胞检测单元, 分析仪通过对Diff通道散点图及其中Lym区域、Neu区域、Mon区域和Eos区域的分析, 再结合电阻抗法获得的白细胞数目进行计算得到相应的细胞数。
本研究通过对比人工白细胞分类法和全自动血液分析仪分类方法, 表明BC-5500及Sysmex Xs-500 i这两种全自动血液分析仪对白细胞具有快速高效的筛检功能, 具备较高统一性, 值得在白细胞分类中推广应用。
参考文献
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人工分类白细胞 篇2
1材料与方法
仪器:日本希森美康 (Sysmex) 公司生产的sysmex XS-800i全自动血细胞计数仪。仪器使用一个半导体激光器+核酸荧光染色+光检测器模块应用流式细胞计数法执行白细胞计数和五分类分析, 得出中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的百分比。
1.1 检测对象
2010年8月以来, 我院门诊和住院患者, 年龄5～61岁, 共156例
1.2 方法
取静脉血2 ml 注入含15%EDTA-2K抗凝剂的抗凝管中, 上下颠倒4～5次, 充分混匀, 用自动分析仪进行血常规检验和白细胞分类测定;同时, 用该血液推血膜片二张, 经瑞氏染色后进行显微镜白细胞分类计数, 共计数200个白细胞, 得出各类白细胞所占百分比, 与全自动血细胞之分类结果进行对比。
2结果
应用日本希森美康 (Sysmex) 公司生产的sysmex XS-800i全自动血细胞计数仪得出的分类结果与显微镜白细胞分类结果进行对比实验[2], 在156例对比结果中有151例除单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞有差异 (P<0.01) 外, 中性粒细胞和淋巴细胞两法的检测结果基本一致 (P>0.05) , 见表1, 有5例患者仪器出现不分类或有部分分类结果, 并出现异常图谱和报警提示, 报警提示内容有:出现大量幼稚细胞;出现有核红细胞;核左移;核聚集;血小板聚集;异常淋巴细胞等。
有5例仪器不分类或有部分分类结果, 并出现异常图谱, 在5例仪器不分类或有部分分类结果, 并出现异常图谱和报警提示, 报警提示内容有:出现大量幼稚细胞;出现有核红细胞;核左移;核聚集;血小板聚集;异常淋巴细胞等。5例患者经显微镜分类, 其中4例血涂片中有杆状核以前的幼稚细胞出现, 1例出现异常淋巴细胞。提示以后工作中, 当仪器出现异常图谱或提示有异常结果时, 一定要进行显微镜分类检验。5例仪器不分类或有部分分类结果, 并出现异常图谱和报警提示情况的见表2。
3讨论
全自动血细胞计数仪正以省时、省工、省力为特点被检验工作者全面采用, 分类结果绝大多数与显微镜分类方法的结果是相符合的。本文的156例对比分析的结果中有151例除单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞有差异 (P<0.01) 外, 中性粒细胞和淋巴细胞两法的检测结果基本一致 (P>0.05) 。在15例中, 单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞显微镜分类结果均比自动化仪器结果低, 而且差异显著 (P<0.01) , 原因可能因为显微镜检查是手工涂片, 细胞在血涂片中分布不均匀, 加之显微镜观察血涂片有一定的局限性、或区域性、或分类计数数量较少所致, 虽有一定的差异, 但对临床诊断影响意义不大。但也有少数结果仪器无法分类或部分分类, 虽有异常的图谱提示, 但不能满足临床要求。本文156例中有5例出现此种现象, 主要是血液中存在大量幼稚细胞和异常淋巴细胞, 仪器虽有提示但却无法识别造成的, 出现此类情况, 应该用显微镜分类加以结果, 在5例不分类的患者结果中4例显微镜分类均发现有白血病细胞, 经临床与骨髓检验诊断为白血病患者。提示在以后的工作中应引起重视, 如出现WBC总数明显增高或伴有Hb不同程度的减低时, 一定要认真分析并结合手工法进行显微镜分类, 才能保证检验结果的准确性和可靠性。
摘要：目的 对比血细胞计数仪和手工显微镜进行白细胞分类计数差异。方法 对156例血标本同时进行全自动血细胞计数仪五分类分析和经瑞氏染色后进行显微镜白细胞分类计数分析对比。结果 大多数结果 是一致的, 但也存在一些差异。结论 自动计数仪省时、省力, 存在盲区, 手工费时、繁琐, 结果 可靠, 两者相结合, 给临床诊断提供更大的帮助。
关键词：全自动血细胞计数仪,显微镜白细胞分类
参考文献
[1]全国临床检验操作规程.第三版:132-136.
人工分类白细胞 篇3
由于血细胞分析仪操作简便、快速、结果准确和精密度高,少量血液即可为临床提供多项、及时、可靠和有效的分析参数,极大地提高了血液检验结果的效率和质量。它正取代传统的显微镜检查法(形态学检查除外)而被广泛应用,但如果不经过严格的性能评价,对仪器的性能不了解就盲目使用,其检验误差将大大超过手工操作的误差。此外,新的血细胞分析仪在安装后或维修后均应按照国际血液学标准化委员会的规定对仪器的性能进行测试、评价,合格后方能使用。为了解迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪白细胞分类的性能,我们对该仪器进行了评价试验,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪及原装配套试剂、质控物。Olympus光学显微镜由奥林巴斯光学株式会社提供;EDTA-K2真空采血管由湖南省浏阳市医用仪具厂提供,批号:080318;瑞特-吉姆萨(Wright-Giemsa)染液,由科室自制。
1.2 标本采集
本院门诊及临床住院患者,清晨空腹采集肘静脉血2mL(EDTA-K2抗凝)。
1.3 仪器准备
对BC-5500全自动血细胞分析仪进行日常清洗维护,进行本底检查,满足要求后(WBC≤0.3×109/L、RBC≤0.03×1012/L、HGB≤1g/L、HCT≤0.005、PLT≤10×109/L)做质控。按国际血液学标准化委员会(ICSH)的有关规定对白细胞分类进行测试[1]。所有检测均在采血后4h内完成[2]。
1.4 评价方法
应用迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪进行全血通道测定,每份标本连续测定3次,取后两次结果的平均值作为白细胞分类的测定值;同时,按白细胞测定结果将所有标本分为白细胞降低组(WBC<4×109/L)、白细胞正常组(4×109/L≤WBC≤10×109/L)及白细胞增高组(WBC>10×109/L)。每份标本均制作3张血片(其中2张染色,另1张存放备用),分别由2名经验丰富且长期从事血液形态学检验的工作人员采用双盲法,各由镜分类200个白细胞,共计分类400个白细胞,计算白细胞分类的结果,并与仪器法分类结果进行相关性比较。
1.5 统计学分析
应用SPSS 10.0软件对所有数据进行统计学处理及相关性分析。
2 结果
⑴白细胞降低组、白细胞正常组及白细胞增高组白细胞分类结果中,中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞仪器法与手工镜检法相关性较好,而单核细胞和嗜碱性粒细胞两种方法相关性较差。白细胞具体分类结果分别见表1、表2、表3。
⑵所有检测标本中,共12份标本仪器未分类,其中急性淋巴细胞白血病2例,慢性粒细胞性白血病3例,急性粒细胞性白血病5例,传染性单核细胞增多症1例,再生障碍性白血病1例。
3 讨论
血细胞分析仪是医院临床检验应用最为广泛的仪器之一,随着检测技术、检测方法的不断发展及计算机技术在医学领域的广泛应用,血细胞分析技术也从二维空间转向到三维结构,从白细胞三分群转向到五分类。目前,国内外主流五分类血细胞分析仪检测方法一般为:电阻抗、高频电导及激光散射联合检测法;光散射和细胞化学染色联合检测法;电阻抗和射频电导联合检测法及多角度激光偏振光散射检测法[3,4,5]。本试验仪器,迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪采用半导体激光系统,通过多角度的激光散射,可以提供细胞的大小、细胞核、细胞颗粒大小等复杂的信息,并结合细胞化学染色技术,准确地把嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞区分开来,同时可以筛选各类异常、幼稚细胞,从而实现更精确的五分类检测结果[6]。为临床医生提供更准确、更全面的血细胞分析结果,方便其为患者开展更准确的血液疾病检查,达到早发现、早治疗的目的。
从试验结果可看出,中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞仪器法与手工镜检法相关性较好,其仪器测定结果可信度较高;而单核细胞和嗜碱性粒细胞仪器法与手工镜检法相关性较差,可能与单核细胞体积较大,一般分布在血片边缘和末端,导致手工镜检时易产生误差。嗜碱性粒细胞两种方法相关系数均不到0.4,大概与其在正常血液中数量极少有关[7,8,9,10]。此外,对于某些白血病患者,该仪器无法对白细胞进行分类,提示异常细胞及幼稚细胞的存在,应用手工镜检进行白细胞分类[11,12]。
综上所述,通过对迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪白细胞分类的评价,该仪器能准确分类计数中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞,而对单核细胞和嗜碱性粒细胞其分类结果可信度较低,且对有异常细胞及幼稚细胞的血液标本可能存在无法分类现象。该仪器作为血液筛查可基本满足临床需要,但对于异常标本,手工镜检则是一个很好的补充。
摘要：目的对迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪白细胞分类进行评价。方法应用BC-5500全自动血细胞分析仪对白细胞降低组、白细胞正常组及白细胞增高组各标本进行全血通道检测,并同时进行手工镜检。结果白细胞降低组、白细胞正常组及白细胞增高组白细胞分类结果中,中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞仪器法与手工镜检法相关性较好,而单核细胞和嗜碱性粒细胞两种方法相关性较差。对某些白血病标本,仪器存在不分类现象。结论迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪能准确分类计数中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞,而对单核细胞和嗜碱性粒细胞其分类结果可信度较低。该仪器作为血液筛查可基本满足临床需要,但对于异常标本,手工镜检则是一个很好的补充。
关键词：血细胞分析仪,白细胞,手工镜检法,血液筛查
参考文献
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人工分类白细胞 篇4
1 资料与方法
1.1 临床资料
选取我院2008年7月至2009年1月检验科检测尿液标本200例作为观察对象, 其中男性标本112例, 女性标本88例, 年龄10～71岁, 平均年龄 (42.5±12.5) 岁, 患者原发病:恶性肿瘤5例, 泌尿系感染95例, 糖尿病40例, 泌尿系结石60例。
1.2 仪器与方法
1.2.1 仪器
日本希森美康UF-500i全自动尿有形成份分析仪。
1.2.2 方法
通过一次性无菌塑料杯收集晨起新鲜中段尿液16 ml左右。人工镜检:吸取混匀尿标本8 ml, 1500r/min, 离心5 min, 弃上清液, 对余下尿沉渣标本进行镜检。尿沉渣分析仪检测, 操作步骤严格遵守仪器说明书, 每次检测前开机预热1 h, 同时通过指控液对结果进行监控。
1.3 观察指标
1.3.1
观察两种检测方法尿液红细胞、白细胞计数情况的比较。
1.3.2
观察两种检测方法尿液红细胞、白细胞计数精密性的比较 从200例尿液标本中随机抽取1例标本, 分别采取两种方法重复检测10次, 比较两种方法的精密性。
1.4 统计学方法
采用统计学软件SPSS 12.0建立数据库, 通过t检验分析两种方法检测尿液中红细胞、白细胞计数情况, P<0.05, 差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两种方法检测尿液中红细胞、白细胞计数情况的比较 (如表1) 。
2.2 观察两种检测方法尿液红细胞、白细胞计数稳定性的比较 (如表2) 。
3 讨论
尿液中红细胞和白细胞的检查对于临床诊断相关肾脏、泌尿系等脏器或脏器疾病具有重要的意义[2]。随着临床检测技术的不断更新, 检测尿液中红细胞和白细胞不再仅仅局限于手工镜检方法, 尿液仪器检测已经有较广泛的普及[3]。人工镜检红细胞、白细胞的优点是通过资深检验技术人员可以很好的鉴别红、白细胞, 并可以准确计数红、白细胞数。但是其也受到pH值、渗透压的影响, 使得细胞计数偏低。仪器法检测红细胞计数是通过血红蛋白的过氧化物酶作用氧化还原试纸受体使其显色, 但是其容易因易热酶的干扰出现假阳性。仪器法检测白细胞的原理是通过中性粒细胞胞浆内的白细胞酯酶催化吲哚酚酯分解成吲哚, 再与重氮炎反应呈现紫色化合物, 依据颜色变化与中性粒细胞多少呈正比。本研究通过对我院200例尿液标本分别采取人工镜检和尿分析仪检测, 两种检测方法尿液中红细胞、白细胞计数结果经比较均无显著性差异, P>0.05.另外本研究还对1例尿液标本用两种方法分别重复检测10次, 观察两种检测方法稳定性进行比较, 两种检测方法的结果比较均无显著性差异, P>0.05, 提示两种检测方法的稳定性无显著性差别。仪器法与人工镜检检测尿液中红细胞、白细胞结果准确、可靠, 但同时两种方法也有各自缺点, 笔者通过多年临床检验经验, 尿液标本检测时可采取仪器法先行检测, 同时人工镜检进行复检, 以此来排除混杂因素的干扰, 保证检测结果的准确性。
摘要：目的 探讨尿液中红细胞、白细胞仪器检测与人工镜检结果 的比较情况。方法 采用回顾性分析的方法 , 分析我院200例尿液标本, 通过两种方法 检测结果 。结果 两种方法 检测200例尿液标本红细胞、白细胞计数无显著性差异。结论 仪器法与人工镜检检测尿液中红细胞、白细胞结果 准确、可靠, 但同时两种方法 也有各自缺点, 笔者通过多年临床检验经验, 尿液标本检测时可采取仪器法先行检测, 同时人工镜检进行复检, 以此来排除混杂因素的干扰, 保证检测结果 的准确性。
关键词：尿液,红细胞,白细胞,仪器,人工镜检
参考文献
[1]何伟业, 蓝红云, 唐琼华.尿液中红细胞、白细胞的UF-100尿沉渣分析仪和显微镜检测结果比较.现代中西医结合杂志, 2009, 18 (1) :73-74.
[2]赵红霞.尿常规检查中镜检法与仪器法的比较.医学理论与实践, 2003, 16 (10) :1188-1189.
干细胞培养的人工肺 篇5
美国哈佛医学院公布了一项最新研究成果, 用干细胞人工培养出的肺脏, 植入实验鼠体内使其存活了6个小时。
研究者首先剔除实验鼠肺脏上的细胞, 只留下细胞外间质作为新肺生长的“撑架”。然后, 在“撑架”中植入可定向生长为肺细胞的人类脐带细胞和鼠的胚胎细胞, 并将其放入模拟生物体内环境的培养器中进行培养。随着时间的推延人工肺在培养器中不断生长, 大约在1周后微型人工肺开始具有氧气交换能力, 就如正常肺一样能够“呼吸”。将其植入实验鼠体内后, 人工肺仍能继续工作, 成功使实验鼠存活了6小时。
用这种方法培养出可用的人类肺脏为肺脏移植的病人解决肺源不足的问题, 但还需进行大量的研究。
人工分类白细胞 篇6
1 资料与方法
1.1 一般资料
本组研究80例白血病初诊患者均具备完整的血常规检查资料, 同时均与白血病相关诊断标准相符合。其中, 男48例, 女32例;最小年龄13岁, 最大年龄49岁, 中位年龄 (26.8±2.1) 岁。
1.2 所选仪器及试剂
选用日本光电MEK8222K作为五分类血球仪;同时, 所用试剂为此公司配套的试剂;另外, 选用0lympus-CX21显微镜[2]。
1.3 方法
对所有患者采集肘静脉血, 血量为2 ml, 进一步完成检验工序;推成舌形血片, 为255 mm×45 mm, 血片厚薄一致, 平坦均匀, 中间位置不存在空洞及溶血, 并且头、体及尾层次分明。在染色方面采取wright法, 进一步基于血液分析仪上完成检测[3]。最终, 将白细胞数与白细胞散点图获取, 然后对两方面进行判断, 看有没有异常细胞存在。
1.3 判定标准
对于染色合格的血片, 采取图型Ⅲ基于体尾交界位置, 利用油镜进行分类, 以分别的方式, 对500个白细胞进行计数, 对当中N、E、B各个细胞所占的比重 (%) 进行检测。异常细胞标准为: (1) 白细胞数计数增加1/2 (50%) ; (2) 淋巴细胞所占比重在很大程度上增加。另外, 对于异型淋巴细胞来说, 其所占比重不低于60%;而原始细胞及核红细胞则不低于10%, 且幼稚细胞同样不低于10%[4]。
2 结果
在80例白血病初诊患者中, 36例为急性白血病, 其中12例为急性髓细胞性白血病, 24例为急性淋巴细胞性白血病;44例为慢性白血病, 其中31例为慢性粒细胞白血病, 13例为慢性淋巴细胞性白血病。80例白血病患者的白细胞直方图当中, 32例为异常, 异常率为88.89%;23例为警示者, 占63.89%;9例为无警示者, 占25.00%。白细胞、血红蛋白及血小板诊断结果, 见表1。
3 讨论
白血病属于血液系统中一种较为常见的恶性病灶, 临床主要体现在两方面, 其一为血细胞数量产生很大程度的改变, 其二为血细胞成分产生很大程度的改变[5]。另外, 通过血常规检查, 其指标通常会产生诸多异常情况。在血常规检查方面, 通常会借助血液分析仪, 通过该仪器能够将各类细胞的体积准确地测量出来。同时, 还能够为白细胞的分类提供保障依据。倘若存在异常细胞被检出, 此检测仪器警示信息便开始进行提示。
对白血病患者进行血常规分析, 发现血细胞所呈现出来的多态性及复杂性尤为显著[6]。同时分类图型存在很大程度的误差, 这主要是由于仪器与血液标本等方面所导致的, 比如在仪器方面, 其系统属于固定状态, 不具灵活性, 没有随机应变的能力。又如在血液标本方面, 因受到各患者体征不同的影响, 导致血液样本的采集、储藏及染色等均会出现不同程度的问题。进一步在产生分类图型误差的情况下, 便会使结果分析产生误差[7]。大致上而言, 便是对于同一个患者, 在不同的时间当中, 或者给予不同的采血策略及仪器, 那么所得出的结果分析也是有所不同的。
对于白血病患者, 在确定血常规及白细胞分析对其初诊的价值作用的基础上, 采取有针对性的治疗措施便显得极为重要。给予中医辨证分型中, 白血病可分为淤血咳嗽、气血两虚及热度入血等型[8]。因此, 可采取活血化瘀及清热解毒等中医疗法, 并辅于西医治疗。在患者化疗阶段, 可使用一些具备抑制药毒副作用的中药, 以此为患者早日康复提供保障依据。
总之, 结合本组研究结果, 可以发现:对于白血病初诊患者, 在血常规白细胞数处于正常的状态或者下降的状况下, 同时直方图属正常, 且没有警示信息出现, 便需要对散点图及血涂片采取尽早的严密观察, 以此使白血病患者的漏诊及误诊现象得到有效避免。
摘要：目的:分析血常规指标及白细胞分析在白血病患者初诊中的价值作用。方法:抽取2014年1-12月在笔者所在医院就诊的80例白血病初诊患者作为研究对象, 对所有患者的血常规各项指标基于急慢性白细胞患者中的不同之处进行总结, 并对细胞分类对白血病患者初诊的影响进行分析。结果:在80例白血病初诊患者中, 36例为急性白血病, 其中12例为急性髓细胞性白血病, 24例为急性淋巴细胞性白血病;44例为慢性白血病, 其中31例为慢性粒细胞白血病, 13例为慢性淋巴细胞性白血病。80例白血病患者的白细胞直方图当中, 32例为异常, 异常率为88.89%;23例为警示者, 占63.89%;9例为无警示者, 占25.00%。结论:对于白血病初诊患者, 在血常规白细胞数处于正常的状态或者下降的状况下, 同时直方图属正常, 且没有警示信息出现, 便需要对散点图及血涂片采取尽早的严密观察, 以此使白血病患者的漏诊及误诊现象得到有效避免。
关键词：白血病,血常规指标,白细胞分类
参考文献
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人工分类白细胞 篇7
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
(1)待评价仪器:XS-800i自动白细胞五分类血细胞分析仪、配套试剂、全血质控物及校准物由日本Sysmex公司提供。该仪器利用电阻抗原理检测红细胞和血小板、用十二磺基硫酸钠法测量血红蛋白浓度、半导体激光流式细胞原理结合细胞化学荧光染色技术进行白细胞计数和分类,并提供相应的IP信息报警。
(2)对照仪器:XE-2100全自动白细胞五分类血细胞分析仪、配套试剂、全血质控物及校准物由日本Sysmex公司提供。
1.2 血标本
血标本来自我院住院患者,受检者早晨空腹,用真空抗凝管(BD公司生产,含EDTA-2K 3.6 mg)从肘静脉采血2 ml。混匀后室温(18~22℃)放置,于采血后1~4 h(总重复性5h内)完成检测。
1.3 检测方法
XS-800i每天开机后预热至少30 min,全血质控物测试合格后检测待测标本。将标本轻轻颠倒混匀8~10次,以手动开盖后放在XS-800i吸样针下,按“START”键吸入标本进行测试,显示并打印结果。
1.4 统计学分析
所有数据用Microsoft Excel软件进行统计学分析,计量资料用表示,比较两种方法的相关性采用线性回归分析。
1.5 质量控制
XS-800i血细胞分析仪安装、调试完毕后,按照仪器操作程序,用配套的全血校准物将全血细胞参数校准。以后每次实验前均先测试全血质控物,结果均在其靶值允许的范围内。对照仪器XE-2100(实验前已校准)每天测量全血质控物,结果均在质控物靶值允许的范围内。
2 评价指标与结果
2.1 总重复性
随机取临床新鲜抗凝静脉血20份(正常、异常标本各10份),随机排列,在XS-800i上测定1次,该批样本室温放置2h及4 h后,再各重复测定1次。检测数据根据下列计算公式计算得出各评价参数的总CV%:
其中,SSQ(组内离均差平方和)=∑(各测定值)2-∑(各样本小计)2/n。n:重复测定次数,u:样本数。
结果:WBC、RBC、HGB、HCT、RDW、PLT和MPV的总重复性测试结果分别为1.79%、1.62%、1.34%、0.57%、1.75%、3.89%和1.56%。
2.2 精密度
包括批内精密度和批间精密度。
随机选取10份(正常、异常标本各5份)临床新鲜抗凝静脉血分别在XS-800i上测定,每份标本连续测定3次;该批样本室温放置2 h后再重复以上操作。批内、批间精密性(CV%)结果见表1。
2.3 携带污染率
先取1份高值血细胞样本连续测定3次,随后立即取一份低值血细胞样本连续测定3次,用下列公式:携带污染率CV%=[(l1-l3)/(h3-l3)]×100%计算。WBC、RBC、HGB和PLT参数的携带污染率分别为0.20%、0.56%、0、0.45%和0.86%,均小于1%,符合要求。
2.4 稀释效应
取一份高值血细胞抗凝血样本离心除去部分血浆,WBC、RBC、HGB、HCT和PLT值分别为79.8×109/L、7.54×1012/L、248g/L、64.8%和685×109/L,以此样本为100%。再用稀释液将该血样本按80%、60%、40%、20%、10%和0%进行稀释,然后从低到高测定不同稀释度的血样本,每份重复测定2次取均值作为实测值,并与经计算所得各稀释度的期望值相比较。所测CBC参数各稀释度的实测值与期望值之间密切相关(r>0.998),见表2。
2.5 可比性
随机抽取106例临床新鲜抗凝静脉血,每份样本分别在XS-800i上连续检测2次,然后立即在XE-2100上以自动进样模式也连续检测2次,各取平均值进行统计。XS-800i与XE-2100结果的可比性见表3。
2.6 白细胞分类
2.6.1 精密度
取1份抗凝血(其中Neut 61.8%、Lym 25.4%、Mon 6.4%、Eos 4.8%和Baso 1.2%)在XS-800i仪器上重复测定11次,取第2~11次的白细胞分类结果计算CV值。五类白细胞(Neut、Lym、Mon、Eos和Baso)重复测定的CV值分别为1.14%、0.97%、5.65%、4.27%和16.20%。
2.6.2 可靠性
取227例临床新鲜抗凝静脉血(其中内科和外科标本120例、血液系统疾病38例、肿瘤放化疗39例、妇产科和小儿科标本30例)在XS-800i仪器上测定,每份样本重复测2次取均值。同时每份血推3张符合质控要求的血片,瑞氏染色后其中2张血片(另1张备用)由2位有经验的技师在体尾交界处按《白细胞分类计数参考方法》[3]进行白细胞分类,将白细胞分为Neut、Lym、Mon、Eos、Baso及各类异常细胞,每张血片油镜分类计数200个白细胞,共计400个白细胞取均值,再与XS-800i仪器的白细胞分类值进行比较。227例标本中,171例人工镜检白细胞形态正常的样本,XS-800i仪器与人工镜检白细胞分类的结果比较见表4。
2.6.3 异常细胞测定(异常细胞的识别能力)
(1)XS-800i仪器白细胞分类报警系统的设置:将原始细胞、幼稚粒细胞、核左移、异型淋巴细胞、有核红细胞和异常淋巴细胞报警的临界值均设在100。若任何一个报警指标的临界值低于100则定义为仪器阴性,若在100~300(最大值)之间则定义为仪器阳性,数值的大小反映了报警指标的可信度。
(2)涂片镜检阳性判断标准:(1)原幼细胞≥1%;(2)早幼/中幼粒>≥1%;(3)晚幼粒≥2%;(4)杆状核粒细胞>5%;(5)NRBC≥1%;(6)异常淋巴(包括异型淋巴)>2%。
(3)评估方法:以镜检分类结果为金标准(2个镜检人员中只要有1人发现阳性结果,即为镜检阳性),对227例标本仪器的检测数据进行分析,评估仪器白细胞分类报警的真阳性、假阳性、真阴性和假阴性。真阳性定义为仪器白细胞分类报警且镜检结果为阳性,假阳性定义为仪器白细胞分类报警但镜检结果为阴性;真阴性定义为仪器白细胞分类不报警且镜检结果为阴性,假阴性定义为仪器白细胞分类不报警但镜检结果为阳性。
(4)评估结果:该仪器白细胞分类报警的假阳性为35.5%、假阴性为8.20%、一致率为71.8%;假阳性标本主要是出现“幼稚粒细胞、原始细胞、异常淋巴细胞和核左移”报警;假阴性标本分别是晚幼粒细胞(2%~4%)3例、原幼淋巴细胞(2%)1例和有核红细胞(2∶100)1例,这5例标本由于异常细胞的比例较低,不仅白细胞散点图变化不太明显,而且也无相应的报警。但这几个病例有的血小板数值减低或直方图异常报警、有的血红蛋白值明显减低,结合临床资料和笔者日常工作中使用的“自动血细胞分析复检筛选规则”,都需要进行血涂片染色人工镜检复核,不会漏掉异常细胞。
3 讨论
本次实验所得到的数据显示,XS-800i血细胞分析仪测定白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板等参数的批内和批间精密度良好,CV值均<2%。总重复性CV值在要求范围内,除血小板为3.89%,其他CBC参数均<2%。携带污染率低,CBC参数均<1%,符合要求。在常见的正常及病理范围稀释效应良好,所测CBC参数各稀释度的实测值与预示值之间密切相关(r>0.998)。与XE-2100检测的血细胞结果对比分析,两者具有高度相关性,CBC各参数r值均>0.99,显示该仪器细胞计数性能良好。
白细胞分类:Neut、Lym、Mon、Eos和Baso重复测定的CV值分别为1.14%、0.97%、5.65%、4.27%和16.20%。171例人工镜检白细胞形态正常的样本,XS-800i仪器与人工镜检白细胞分类的结果比较(r值),两者对Neut、Lym和Eos分类结果的一致性良好(r值分别为0.981 6、0.979 5、0.962 9),对Mon次之(r值为0.824),对Baso的分类结果相关性欠佳(r值为0.587)。出现上述现象的主要原因可能与外周血中Baso数量少、也与其在血片中分布不均有关[4,5]。对血液病样本出现幼稚细胞,严重感染、肿瘤放化疗或外科手术后等情况出现中或晚幼粒细胞、较多的杆状核粒细胞和异型淋巴细胞,XS-800仪器上白细胞散点图可有较明显变化或报警提示。对血标本中杆状核粒细胞比例较少或中性粒细胞出现中毒颗粒、空泡变性或Dohle小体等中毒性改变时,该仪器可出现“幼稚粒细胞、原始细胞、异常淋巴细胞和核左移”等假阳性报警。如标本中异常细胞的比例较低,该仪器白细胞散点图变化不太明显或无白细胞分类报警,可出现假阴性,详细原因有待今后进一步探讨。
尽管血细胞分析仪白细胞分类的检测已由过去单纯的电阻抗原理发展到光散射、细胞化学染色、荧光染色、高频传导和鞘流技术等联合应用,有些仪器还能够对分析标本中的原始细胞、未成熟粒细胞、核左移和异型淋巴细胞等进行报警提示,大大提高了工作效率。但迄今为止,血细胞分析仪在形态学检查仍只能作为一种过筛手段,当遇到可疑情况,尤其是在病理条件下,需要人工以显微镜复查,这已是不争的事实[6,7]。因此,这类血细胞分析仪的白细胞分类也只能起“过筛”作用。不仅当白细胞总数过高或过低、白细胞散点图或直方图异常、有异常细胞报警提示、分类结果明显异常或不分类及某些特殊标本,而且当红细胞和血小板的直方图异常、或有异常报警提示等情况时,都应该结合临床诊断,进行血涂片染色人工镜检复核,以保证获得准确的检测结果[8]。因此,各实验室应根据所用的血细胞分析仪的性能特点和各自医院患者组成情况,制定适用的“自动血细胞分析复检筛选规则”,对异常标本进行血涂片染色人工镜检复核,防止漏掉异常细胞。
总之,通过对XS-800i自动白细胞五分类血细胞分析仪的系统评价,表明其分析速度较快,提供的参数较多,与已知性能的其他血细胞分析仪的检测结果可比性强、相关性好,是一种性能较好的血细胞分析仪。该仪器用血量较少,既可采用抗凝静脉血又可采用抗凝末梢血检测,而且操作简便,并有较高的数据处理和储存能力,机内可存储1万份标本的数据及图形资料,方便查询;而且具有接入院内局域网、输出检测数据等功能。因此,该仪器不仅适用中小医院的检验部门,也能满足较大医院的急诊检验室的需要,是一款较理想的白细胞五分类血细胞分析仪。
参考文献
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