血细胞分类（共10篇）
血细胞分类 篇1
全自动血细胞计数仪目前已被广泛应用, 在进行白细胞分类时, 它都具有分析准确、检测速度快、重复性好、省时省工、减少人为操作误差等特点, 被广泛应用于各级医院的常规检验工作中, 使检验工作者从繁琐的手工操作中解放出来。但当全自动计数仪对一些特殊患者的标本进行分类时, 血细胞计数仪会不分类或者显示部分分类, 结果不够完整, 必须借助显微镜才能完成整个分类过程。本文应用日本希森美康 (Sysmex) 公司生产的sysmex XS-800i全自动血细胞计数仪[1], 用它得出的白细胞分类结果与显微镜白细胞分类结果进行比对, 发现:大多数结果是一致的, 但也存在一些差异, 先介绍如下:
1材料与方法
仪器:日本希森美康 (Sysmex) 公司生产的sysmex XS-800i全自动血细胞计数仪。仪器使用一个半导体激光器+核酸荧光染色+光检测器模块应用流式细胞计数法执行白细胞计数和五分类分析, 得出中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的百分比。
1.1 检测对象
2010年8月以来, 我院门诊和住院患者, 年龄5～61岁, 共156例
1.2 方法
取静脉血2 ml 注入含15%EDTA-2K抗凝剂的抗凝管中, 上下颠倒4～5次, 充分混匀, 用自动分析仪进行血常规检验和白细胞分类测定;同时, 用该血液推血膜片二张, 经瑞氏染色后进行显微镜白细胞分类计数, 共计数200个白细胞, 得出各类白细胞所占百分比, 与全自动血细胞之分类结果进行对比。
2结果
应用日本希森美康 (Sysmex) 公司生产的sysmex XS-800i全自动血细胞计数仪得出的分类结果与显微镜白细胞分类结果进行对比实验[2], 在156例对比结果中有151例除单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞有差异 (P<0.01) 外, 中性粒细胞和淋巴细胞两法的检测结果基本一致 (P>0.05) , 见表1, 有5例患者仪器出现不分类或有部分分类结果, 并出现异常图谱和报警提示, 报警提示内容有:出现大量幼稚细胞;出现有核红细胞;核左移;核聚集;血小板聚集;异常淋巴细胞等。
有5例仪器不分类或有部分分类结果, 并出现异常图谱, 在5例仪器不分类或有部分分类结果, 并出现异常图谱和报警提示, 报警提示内容有:出现大量幼稚细胞;出现有核红细胞;核左移;核聚集;血小板聚集;异常淋巴细胞等。5例患者经显微镜分类, 其中4例血涂片中有杆状核以前的幼稚细胞出现, 1例出现异常淋巴细胞。提示以后工作中, 当仪器出现异常图谱或提示有异常结果时, 一定要进行显微镜分类检验。5例仪器不分类或有部分分类结果, 并出现异常图谱和报警提示情况的见表2。
3讨论
全自动血细胞计数仪正以省时、省工、省力为特点被检验工作者全面采用, 分类结果绝大多数与显微镜分类方法的结果是相符合的。本文的156例对比分析的结果中有151例除单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞有差异 (P<0.01) 外, 中性粒细胞和淋巴细胞两法的检测结果基本一致 (P>0.05) 。在15例中, 单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞显微镜分类结果均比自动化仪器结果低, 而且差异显著 (P<0.01) , 原因可能因为显微镜检查是手工涂片, 细胞在血涂片中分布不均匀, 加之显微镜观察血涂片有一定的局限性、或区域性、或分类计数数量较少所致, 虽有一定的差异, 但对临床诊断影响意义不大。但也有少数结果仪器无法分类或部分分类, 虽有异常的图谱提示, 但不能满足临床要求。本文156例中有5例出现此种现象, 主要是血液中存在大量幼稚细胞和异常淋巴细胞, 仪器虽有提示但却无法识别造成的, 出现此类情况, 应该用显微镜分类加以结果, 在5例不分类的患者结果中4例显微镜分类均发现有白血病细胞, 经临床与骨髓检验诊断为白血病患者。提示在以后的工作中应引起重视, 如出现WBC总数明显增高或伴有Hb不同程度的减低时, 一定要认真分析并结合手工法进行显微镜分类, 才能保证检验结果的准确性和可靠性。
摘要：目的 对比血细胞计数仪和手工显微镜进行白细胞分类计数差异。方法 对156例血标本同时进行全自动血细胞计数仪五分类分析和经瑞氏染色后进行显微镜白细胞分类计数分析对比。结果 大多数结果 是一致的, 但也存在一些差异。结论 自动计数仪省时、省力, 存在盲区, 手工费时、繁琐, 结果 可靠, 两者相结合, 给临床诊断提供更大的帮助。
关键词：全自动血细胞计数仪,显微镜白细胞分类
参考文献
[1]全国临床检验操作规程.第三版:132-136.
[2]Clincal blood test and progress;Australia Medical Journey, 2002, 3 (10) :213-280.
血细胞分类 篇2
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就是白细胞分类只分成三类的，就是中性粒细胞，淋巴细胞和中值细胞。五分类血球仪把白细胞分成中性粒细胞，淋巴细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞和单核细胞。
不知道，反正行业内有人说，库贝尔董事会有人来自于贝克曼库尔特，但听卫生局人说库贝尔质量很好的。
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血细胞分类 篇3
摘 要：针对深度卷积神经网络能够提取图像的高层特征并对图像进行有效表达。采用基于深度卷积神经网络的改进算法，设计了ZCNN网络结构对乳腺病理细胞图像进行分类研究。首先，对病理图像进行预处理，利用ZCA白化降低数据特征间的相关性，从而降低数据间的冗余。其次，在网络卷积层采用线性校正单元（ReLUs）作为网络的激活函数，加速计算网络输出。最后，在网络精调时，利用dropout方法随机断开池化层的网络节点，可以有效抑制算法的过拟合，提高算法的泛化能力。采用本文方法对benign和actionable两类病理细胞图像的分类，精度达到94.65%。性能上超过了Softmax，PCA以及传统的卷积神经网络。
关键词：深度卷积神经网络；ZCA白化；线性校正单元；dropout方法
中图分类号： F721.1 文献标识码： A 文章编号： 1673-1069（2016）18-144-3
1 概述
2006年，加拿大科学家Hinton和他的团队在science上发表一篇关于深度信念网络（DBN）[1]的文章，便引起了学术界的广泛关注，随后更多更一般的深度神经网络方法随之兴起，例如：Denoising Autoencoder（DAE）、Sparse Autoencoder（SAE）、Convolutional Neural Network（CNN）[2]等算法。深度卷积神经网络可以灵活的调节特征提取的空间尺度大小，因此，对图像中目标区域的特征提取会更加灵活。利用深度卷积神经网络对手写字体MNIST数据集进行识别，性能已经接近人类的识别率，在交通标记识别上已经超过了人类的识别能力[3]。文献[4]采用CNN结合图像的空间信息对图像中像素点进行分类研究，结果优于已有的SVM和k-NN分类方法。文献[5]将多示例学习（Multiple Instance Learning）方法与深度卷积神经网络结合应用于高分辨率图像的分类，并且首次对神经胶质瘤（LGG）进行分类精度达到97%，效果接近病理学家的分类结果。
随着计算机辅助诊断技术（Computer-assisted diagnosis， CAD）的不断进步，未来会大大降低病理学家繁重的工作强度。
本文主要是基于深度卷积神经网络的改进算法，设计了ZCNN网络结构对乳腺病理细胞图像进行分类研究。面对复杂的图片信息（光照、染色不均等），在特征提取前，采用ZCA白化对数据进行预处理，降低数据维度间的相关性，然后，利用深度卷积神经网络，逐层提取数据的高维特征。网络构建中，利用线性修正单元（ReLUs）作为各卷积层的网络输出函数，可以加快网络的计算速度。在池化层采用dropout方法随机断开网络节点，防止算法的过拟合，文献[2]采取的方法是在网络输出前的全连接层采用dropout方法，本文是二分类问题，在网络的全连接层并没有采用dropout方法，而是在池化层上使用dropout方法，随机阻止部分网络权值的更新。在网络精调时，采用随机梯度降法逐层计算深度卷积神经网络的参数。
為了提高算法的精度，采用BP（back propagation）算法对网络参数进行优化。
2 ZCA数据预处理
自然图像中相邻像素间存在很强的相关性。在学习统计模型时，通常采用预处理算法降低数据的这种冗余性。将数据的协方差矩阵转变成单位矩阵的过程称为白化（whitening）或球化（sphering）。白化的目的就是降低输入数据的冗余，使白化后的数据更接近原始数据。在数值上，主要是使数据具有统一的协方差，且每个特征都有相同的方差。通过ZCA（Zero Components Analysis）白化使得数据从x空间映射到XZCAwhite空间，降低了数据间的相关性，特征向量各维度方差相等，数据的重要程度得到统一。
3 深度卷积神经网络（CNN）
传统的图像特征提取方法没有固定的提取原则，依赖于手工设计特征提取方法。基于深度卷积神经网络是建立在人工神经网络基础上的自动特征提取方法，通过对输入数据进行多层线性或非线性变换，将数据映射到新的空间里表达，可以稳定有效地提取图像的固有特征。在视觉领域，通过学习整张数字图像能够提取图像局部的高层特征。通常深度卷积网络的底层可以学习边缘、形状等物理特征，随着网络隐含层层数增多可以学习到更多复杂、抽象的视觉特征。但是如果采用全连接方式，隐含层节点数量就会十分庞大，严重降低了算法的计算效率。因此，在学习图像特征时，通常将网络设计成局部连接的神经网络。特征平面上的所有神经元共享一个连接权值，也就是每个特征平面上每个神经元的权重都一样。因此，网络参数大大减少，复杂度也变低。
一个深度卷积神经网络主要由三部分组成：卷积层、池化层、全连接层。卷积层是对上层输入进行卷积滤波，池化层是对上层输入进行下采样。卷积层的每个神经元连接上层输入的小片相邻区域（即感受野区域），表达图像的局部特征。池化层用来提取图像的统计特征，使得网络结构对微小的平移和形变不敏感。卷积层与池化层交替连接且都是由多个2-D的特征平面构成，每个特征平面均代表一种特征映射，全连接层是1-D向量构成的网络层，是对输入数据的特征表达。如图1是本文中设计的ZCNN网络结构，共有11个隐含层，其中卷积层与池化层交替连接共有10层，最后一个隐含层为全连接层。网络的具体参数设置如表1所示。
4 训练阶段
当训练集比较小时，深度神经网络训练时会出现过拟合问题，为了消除过拟合对网络模型的不利影响，Hitton 等人设计了dropout方法，该方法是指在模型训练时，以某一概率随机阻断某些隐含层特征检测器的共同作用，即随机让网络的某些隐含层权重不更新，因此，在样本输入时会有部分隐含层网络节点的权重不更新。在测试阶段，所有的隐含层节点都有输出值，只是输出值降低为原来输出的1/2。
训练采用dropout方法的深度卷积神经网络与传统的神经网络训练类似，利用随机梯度下降法求解网络参数。卷积网络通过前向传播计算网络的实际输出值，然后用实际输出值与理想输出值作差，构造误差损失函数：
En=（t-y） （1）
其中，M表示样本类别数，n表示样本序号，t表示第n个样本的第s维对应的目标值（分类标签），y表示第n个样本对应的第s维输出。最后利用反向传播策略，通过梯度下降法更新网络的权值。
5 实验和结果
5.1实验数据和网络结构
实验数据集由北卡罗来纳大学夏洛特分校的张少霆教授提供，共计190张乳腺病理学图像，其中有100张为benign类，90张为actionable类。分别从benign和actionable类中的每张图像上采集5张互不相交的感兴趣区域作为子图，大小均为256*256*3。随机从benign类和actionable类中分别选取360张和340张子图訓练集，将剩下的子图作为测试集。
训练集数据是3维的RGB图像，我们提取R通道的灰度强度图像，对其进行归一化操作，然后再对图像进行ZCA白化处理去除图像的相关性。将预处理后的数据送入我们设计的深度卷积神经网络中，在所有池化层中采用dropout方法计算特征平面，全连接层将最后一个池化层的24个4*4的特征平面构成一个特征向量，作为图像的特征表达，大小为384*1，用于Softmax分类模型的训练。本文设计的网络结构（ZCNN）如表1所示：
算法通过MATLAB R2013a仿真研究，实验平台是基于Windows 7操作系统的工作站（Intel（R） Xeon（R） E5-2650 v2 CPU and 32 GB 内存），为了更好的说明本算法在benign和actionable两类病理细胞图像的分类效果，我们做了多组对照实验，计算各种分类方法的评价指标Precision，Recall和Accuracy，公式分别如下：
其中，TP表示benign类被正确分为benign类的样本个数，TN表示actionable类被正确分为actionable类的样本个数，FP表示benign类被分为actionable类的样本个数，FN表示actionable类被分为benign类的样本个数。
5.2 结果分析
分别对各种算法计算10组数据求取其平均值，结果如表2所示，利用我们的算法求取的精度明显优于其他几种方法。由结果可以看出Softmax分类器是单层分类器网络，没有充分提取图像的特征信息，其准确率为79.2%。PCA主要是通过数据降维的方法将高维数据映射到低维空间，在本文中，我们保留了95%的特征信息作为分类依据，准确率达到84.00%。利用文献[2]中的CNN方法，对图像数据进行特征提取后分类的精度已经比上述4中算法有了较大的提高，这主要得益于网络特征提取网络层数的增加。然而，在分类精度和特征提取的时间上不及本文算法效果好。深度网络的特征提取所需的时间远远大于传统方法。由此可见，对benign和actionable两类图像分类时，采用卷积神经网络提取图像的高层特征可以实现更好的分类效果，归根结底在于图像特征的有效提取。
6 结论
基于深度学习的特征提取方法在目标识别、图像分类等领域都远远超过了传统的手工特征提取方法，在本文中，我们基于深度卷积神经网络结构进行了改进。首先，利用ZCA白化对数据进行预处理降低特征间的相关性，然后，在训练深度卷积神经网络时，采用ReLUs作为非线性输出函数，可以提高网络计算速度。在网络优化阶段，采用BP算法更新网络权值，利用Dropout方法随机断开网络节点，实现网络结构进行优化。将提取病理细胞图像的高层特征作为Softmax分类器的输入，可以更精确有效的实现benign和actionable病理图像的分类。实验中，采用我们设计深度卷积神经网络结构的性能超过了传统方法，并且也优于不采用预处理和Dropout方法的卷积神经网络。
参 考 文 献
[1] G.Hinton and R.Salakhutdinov，Reducing the dimensio-
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[2] A.Krizhevsky， I. Sutskever and G. Hinton， ImageNet classification with deep convolutional neural networks， Advances in neural information processing systems， 1097（2008）.
[3] C. Dan， M. Ueli and S. Jurgen， Multi-column deep neural networks for image classification， 2012 IEEE Conference on Computer Vision and Pattern Recognition（CVPR） 6， 3642（2012）.
[4] H.Nuh and B.Gokhan， Classification of histopathological images using convolutional neural network， International Conference on Image Processing Theory， Tools and Applications 4， （2014）， pp. 1-6.
血细胞五分类技术及其应用进展 篇4
1 血细胞五分类技术的原理
1.1 流式细胞术
流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一种综合应用光学、机械学、流体力学、电子计算机、细胞生物学、分子免疫学等学科技术,使被测溶液流经测量区域,并逐一检测其中每一个细胞的物理和化学特性,从而对高速流动的细胞或亚细胞进行快速定量测定和分析的方法。
首先,待测细胞经处理或染色后被压入流动室,与此同时,不含细胞的缓冲液在高压下从鞘液管喷出,鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度,这样鞘液就能被包绕着样品高速流动,组成一个圆形的流束,待测细胞在包绕下单行排列,依次通过检测区域,在激光束的照射下产生散射光和激发荧光,这两个光源信号分别反映了细胞体积的大小和内部的信息,经光电倍增管接收后可转换为电信号,再通过模数转换器,将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号,经计算机处理,可将分析结果显示在屏幕上。
为了保证细胞单个排列地逐一通过检测区域,鞘流技术在流式细胞术中被广泛应用。根据层流理论,由于两种液体的流速和压力不同,在一定条件下样品溶液与包裹它的鞘液在流动中可以保持相互分离并且同轴。同时鞘液流可以加速样品溶液中颗粒的流动并迫使他们的流动轨迹保持在液流的中轴线上,使细胞单排列地逐一通过检测区域,这便是所谓的液流聚焦原理。
1.2 阻抗法
根据库尔特原理,将不良导体血液按一定比例稀释于等渗的电解液中,在小孔电极的两侧加一恒流源,在负压作用下,使稀释的血细胞通过小孔。当细胞通过截面时会由于电阻增大产生相应的脉冲,其脉冲的幅度与细胞的体积成正比,脉冲的频度与细胞的数量成正比。这便是著名的库尔特原理或称变阻脉冲原理。利用库尔特原理可以有效地区分淋巴及单核细胞。
1.3 激光散射法/多角度偏振光散射技术
根据光散射理论,当激光照射到流动室内流过的每一个细胞时,由于细胞的物理特性,部分光线从细胞上经不同的角度散射。其中,前向小角度散射光的光强可以反应细胞体积;大角度散射光的光强可以反应细胞核/浆复杂度和细胞颗粒的信息;而侧向散射光的光强可以反应细胞膜、核膜、细胞质的变化。因此,可以依据细胞表明光散射的特点对细胞进行分类。用激光光源产生的单色光束直接进入计数池的敏感区,在不同角度(10°~70°)对每个细胞进行扫描分析,测定其散射光强度,从而提供细胞结构、形态的光散射信息。由于粗颗粒细胞的散射强度比细颗粒细胞更强,故光散射对细胞颗粒的构型和颗粒质量具有很好的区别能力。
多角度偏振散射技术用偏振激光束射照单个排列细胞,并进一步分辨细胞。该技术采用了10°窄角和偏振加消偏振检测法,分辨能力有所提高。它首先测试中性/单核细胞,用0°~90°的散射数据,再测得90°D的衍射差,将嗜酸性和中性细胞分开,而嗜碱性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞则按其大小和内部结构不同的复杂性,所产生的散射光也各异,用可调较的门限加以区分。其采用特定程序自动储存分析数据,并经计算机软件处理,在屏幕上显示6个散点图和2个直方图。
1.4 各种细胞化学特性应用技术
利用五种白细胞自身不同的化学性质,应用相应的化学试剂加以区分。
由于嗜酸性(或嗜碱性)粒细胞均有较强的碱性(或酸性),因此在特殊的溶血剂作用下,经过特定时间及温度的孵育,可使除嗜酸性(嗜碱性)粒细胞之外的所有细胞溶解或萎缩,经处理之后的细胞根据阻抗脉冲计数法,可得相应嗜酸性(嗜碱性)细胞有效数值。
利用五种白细胞过氧化物酶活性的差异对白细胞进行染色,测定其酶反应强度,对白细胞进行分析。血液中五种白细胞的过氧化物酶活性排列顺序为:嗜酸性粒细胞>中性粒细胞>单核细胞。淋巴细胞和嗜碱性粒细胞均无过氧化物酶。将待测血液加入清洗剂和甲醛的等渗液体内经孵育,再加入过氧化氢(H2O2)和四氯-萘酚,细胞内过氧化酶分解产生(O)-,使四氯-萘酚显色并沉淀,并定位于酶反应部位。根据酶反应强度的不同,利用光电检测技术测定相应吸光度值的方法,用以区分嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、单核细胞。
1.5 电导/射频法
与早期的三分类血液分析仪利用库尔特原理不同的是,它在内外电极上加了一个RF射频发生器。RF是射频电流的简称,它是一种高频交流变化电磁波。按照工作频率的不同,RF可以分为低频(LF)、高频(HF)、超高频(UHF)和微波等不同种类,不同频段的RF工作原理不同,LF和HF频段一般采用电磁耦合原理,而UHF及微波频段的RF一般采用电磁反射原理。在血液分析仪中多采用高频电磁波,其原理是交变电流通过导体时,会在导体周围形成交变电磁场,形成电磁波。因导体的密度及导电性质等差异,其周围所形成的电磁场也不相同。因此当射频电流穿透细胞膜透入胞内时,由于核的大小、化学组分、颗粒多少以及浆核比例的不同,使RF信号发生不同的变化。借此可以将体积大小相同但内部结构不同的细胞区分开来,如淋巴细胞与嗜碱性细胞。
1.6 荧光法
利用不同细胞的细胞膜、胞内因子以及胞内DNA、RNA、胞内离子钙等不同染色特性,选用具有特异性抗原或抗体的荧光染料载体,使待分离的细胞分别标记相应的荧光物质,经过特定波长的激光照射激发出不同波长的荧光,利用各种PMT管检测荧光信号的个数,可以完成待检细胞的计数。如进一步分析计数淋巴细胞或网织红细胞等。
2 血细胞五分类技术的应用及展望
2.1 五分类血液分析仪的现状
全自动五分类血细胞分析仪是多学科相互交叉、渗透、综合的产物,涉及技术领域包括电子技术、计算机技术、传感器技术、信号处理技术、生物化学、临床医学、精密机械、光学、自动控制、流体力学等领域。绝大多数“五分类”分析仪采用了流式细胞分析方法,而联合检测法则代表了五分类血细胞分析仪的最新发展趋势。
BECKMAN COULTER GENS全自动五分类血球分析仪[4]采用其独特的VCS技术,其中V(体积法)用于分析细胞体积;C(电导法)用于分析细胞核型;S(散射法)则用于分析细胞的颗粒特性。测试时,患者标本经过分血片等样本分配系统进入搅拌杯中,再加入溶血剂搅拌,溶血,完全破坏红细胞,剩下的白细胞在样本压力作用下进入流式通道。运用VCS联合检测方法,在流式通道的某一位点,对通过的单列白细胞,进行逐个的、同时的、三重的检测以及三维分析,以确定其亚群性质。
雅培公司新推出的CELL-DYN Ruby全自动血液分析仪运用合并流式细胞术及多角度偏振散射分离技术检测白细胞。其采用多角度偏振散射技术对白细胞进行区分和按序分离,通过四个角度的光学检测进行白细胞分析。其中,0°用于区分细胞体积大小;10°用于区分细胞的复杂性;90°用于区分细胞核的分叶性;90°D用于区分细胞的颗粒性。通过90°偏振和90°去偏振区分嗜酸性粒细胞和嗜中性粒细胞,同时通过多个散点图分析来鉴别和分类未成熟细胞和干扰物质。
拜尔公司的ADV IA120利用化学特性中过氧化物酶活性与激光散射技术结合原理进行白细胞五分类测定。该仪器有4个测量通道:血红蛋白测量通道、红细胞/血小板测量通道、嗜碱性粒细胞测量通道、过氧化物酶测量(白细胞分类)通道。其利用五种白细胞过氧化物酶活性的差异对白细胞进行染色,测定其酶反应强度,对白细胞进行分析。在测试过程中,每个细胞产生2个信号:组化染色结果与光散射结果。以X轴代表吸光率(组化染色酶反应强度),Y轴代表光散射(细胞大小),一起定位于细胞图上(cytogram)。计算机系统对存储资料进行分析处理,并结合嗜碱性或分叶细胞通道结果计算出白细胞总数及分类。值得一提的是,该设备对RBC及PLT的测定也摒弃了传统的阻抗法,而是采用激光法对其进行测定的。
希森美康(SYSMEX)公司五分类血液分析仪的检测原理按生产时间的先后可分为三大类:多通道阻抗与射频联合检测技术,代表机型有SE-9000;激光流式细胞检测结合细胞组化染色技术,代表机型有SF-3000;激光流式细胞检测结合核酸荧光染色技术,代表机型有SF-2100。
SYSMEX XE-2100[5,6,8]全自动血细胞分析仪是综合了前向散光、侧向散光和侧向荧光三种光学检查技术,结合电阻抗技术来进行白细胞分类的。直流电阻抗法(DC)用于测量细胞体积大小。激光散射产生的前向散射光、侧向散射光可用于探测白细胞体积大小、细胞内含物的情况(细胞核以及颗粒情况),侧向荧光则可以反映细胞内脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的含量。综合各个测量方法,得到白细胞五分类的图形和数据。SYSMEX XT-2000i全自动血液分析仪运用核酸荧光染色技术,配合激光流式分析系统,保证了精确的WBC五项分类结果。
HORIBA ABX公司生产的Pentra系列五分类血液分析仪采用独有的双鞘流通道,结合阻抗法、化学染色技术及吸光度法对白细胞进行精确的分析。流式通道内有两个检测装置,60μm的鞘流微孔用于阻抗法体积检测,42μm的光窗用于吸光度测定分析细胞内容物。实现对大量细胞进行的顺序、快速、准确地分析与测定。
以上所介绍的几种血液分析仪是目前我国医疗机构常见的具有代表性的几种测定白细胞五分类的机型。另外,日本光电公司生产的MEK-8222K在中国的拥有量也较大,因其工作原理与雅培公司的CELL-DYN Ruby相似,也是采用半导体激光法和多角度激光散射技术,只是试剂的配方有所区别,因此不再赘述。
国内迈瑞公司生产的BC-5500的白细胞分类[7]结合了液流聚焦技术、激光散射技术和化学染色技术。其光源采用半导体激光系统,通过多角度的激光散射,提供细胞的大小、细胞核、细胞颗粒大小及复杂性的信息,并结合试剂对嗜酸性细胞和嗜碱性细胞的特异处理,将嗜酸性细胞和嗜碱性细胞区分开来,同时筛选出各类异常细胞,实现精确的五分类检测结果。
由于不同仪器的检测原理及相关试剂的差异,各类设备均有其相应的特点。总体来讲,光学检测法结合特种化学试剂如染色物质等,由于其针对某一被检物质的特异性,因此其测定及分析结果较电阻法精确度要高,但相应的试剂成本加大,同时对操作人员及环境的要求也会有所提高。
2.2 五分类血液分析仪的展望
从五分类血液分析仪的发展进程可以看出,临床对血细胞的分析已不满足于简单的对WBC、RBC、PLT的计数,而是更倾向对于其各类细胞及其亚群的进一步分析,包括从细胞内部的DNA,RNA及免疫等方面进行分析。因此,血细胞分析仪已从对细胞的简单的物理性能的研究转向对细胞内部化学性质及免疫性质的研究方向发展,即从细胞学向分子生物学,从分子生物学向免疫学方向发展。同时,随着工业科技的进步,仪器的精度、速度、集成化、一体化的程度会更高,相信在不久的将来会有更先进的血液分析系统面世。
参考文献
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全自动五分类血液细胞分析仪 篇5
1.仪器类型：全自动五分类血细胞计数仪
2.检测原理：WBC五分类双通道检测，采用半导体激光散射，流式细胞术，细胞化学染色，实现白细胞的准确五分类。3.检测参数：测试参数不少于23项。
4.DIFF激光通道：对嗜酸性粒细胞进行特异性染色，使淋巴细胞，单核细胞，嗜酸性粒细胞和中性粒细胞完全区分开来。5.WBC/BASO通道:保存完整的嗜碱性粒细胞，实现嗜碱性粒细胞和WBC总数的精确检测。
6.利用特异性的细胞差别溶解修饰技术，可有效排除难溶性红细胞，巨大血小板，血小板聚集等因素对嗜碱细胞等计数结果的影响。7.检测速度：≥40样本/小时。
8.激光装置：信号稳定，使用寿命长的半导体激光器。9.检测模式：静脉全血模式，微量全血模式，预稀释模式 10.分析模式：大于等于四种，预稀释末梢血CBC, 预稀释末梢血CBC+5DIFF，全血CBC，全血CBC+5DIFF。
11.报告图形显示：3个直方图，3个散点图（含研究界面2个散点图）
12.异常信息报警功能：具备未成熟细胞和异常淋巴细胞等报警功能。13.末梢血分析：静脉全血测定≤15μL，血液预稀释测定≤20μL。15μL末梢血即可得到准确的白细胞五分类和全血细胞计数，满足门急诊病人、儿童患者、血液病人等特殊患者采血的需要。14.预稀释重测功能：具备预稀释重测功能，避免二次采血。15.试剂恒温系统：采用螺旋式恒温技术，完全避免环境温度变化对检测结果的影响，提供照片或者验机。
16.RBC/PLT通道：采用双向立体后漩流液路结构，完全避免细胞残留，重叠现象对细胞检测的影响。17.抗干扰技术：采用独特的电气隔离技术。18.HGB检测采用无氰试剂检测，避免环境污染。19.排堵方式：高压灼烧、正反冲清洗。
20.稀释器：仪器内置稀释器，采样针自动分注稀释液，无需手工加注稀释液。
21.采样针功能：采样针侧面开口，防止采样针与样本容器底部抵死后造成吸样不足，提供照片或者验机。
22.样本存储：存储不少于20000份样本的全部信息。23.样本回顾：可组合查询，方便快捷。
24.报告格式：中文报告，用户可自定义报告格式。
25.数据传输：具备网络接口和联网功能，可接入实验室信息管理系统（LIS）和医院信息管理系统（HIS）。26.条码扫描：可选配手持条码扫描仪。
27.控制部分:外接电脑控制血球分析仪，全中文操作系统，方便维护数据，方便输入信息。标配中文数据处理软件。28.质量控制：L-J和X-B质控方法，并提供质控图形。
29.校准方式：有全血、预稀释两套独立的校准系数，不仅具备手动校准和校准物校准功能，还有新鲜血校准功能。30.备件、技术及维修服务，培训要求及其它 1）、主机保修贰年，软件部分终身免费升级。
★2）、本地化服务：制造商具有在甘肃省内工商行政部门注册的分公司或办事机构并设有维修中心及配件库（提供营业执照副本、组织机构代码证副本、税务登记证副本复印件）
★3）、技术及维修服务：甘肃省内生产厂家专职服务工程师≥6人，须提供工程师工作证件及联系方式、提供工程师本地缴纳社保证明 4）、客户服务2小时内响应，24小时内到位；可以随时提供开箱验货、安装、调试或维修等服务
★5）、同类产品在甘肃省三级甲等医院装机客户≥6家（提供客户名单及联系方式，以备现场查验）
6）、技术培训要求：在用户当地或省会中心城市，卖方应配置专业技术人员提供现场技术培训，保证使用人员正常操作设备的各种功能 7）、安全和认证：经CE、FDA及SFDA认证或其他优质证书（提供加盖公章证书复印件）
8)、制造商具备创新型产品设计和生产能力（提供国资委总工会颁发的“国家级创新型优秀企业”证书）
9)、投标产品为国际国内知名品牌（提供国家工商行政管理局总局颁发的“驰名商标”证书）。
10)、制造商具备雄厚的自主研发能力
血细胞分类 篇6
1 故障一
1.1 故障现象
检测中，持续的白细胞和血红蛋白结果进行性偏低，有液体从主机溢出。仪器无报警。
1.2 故障处理
测量质控品，显示白细胞和血红蛋白偏低。开机状态下，打开仪器前面板及检测部前盖，发现白细胞检测部室内液体积满，液体由白细胞检测部杯口溢出。试测空白观察检测过程，发现测量完毕后检测部液体排除困难。因检测部室内积液增加了血液的稀释倍数[1]，引起白细胞降低。本机血红蛋白分析样品取自白细胞检测部，因而血红蛋白也降低。检查排除管道，未见破损、漏气。将检测部室内液体用一次性吸管吸除，执行“清洗检测部”程序，清洗完毕空白检测通过，试测质控品在控，再测又出现相同故障。进一步怀疑排液电磁阀的管路有堵塞、弯折或漏气，白细胞检测部排液电磁阀为14-2号阀，从电磁阀前端拔下连接管，检查整个管路无异常，将电磁阀拆下，擦去灰尘并吹干净电磁阀，重新安装和连接，试测质控品3次均在控制范围，打开面板观察检测过程，白细胞检测室液体能有效排空，故障排除。
2 故障二
2.1 故障现象
部分标本白细胞不分类，仪器报“白细胞分布异常”。
2.2 故障处理
对不分类的标本，用手工分类复查白细胞无异常。打开面板和检测部前盖，发现白细胞检测部室内电极接地部分有结晶等杂质覆盖，怀疑是接地不良，影响测定系统的电导率[2].从而导致灵敏度降低，导致白细胞不分类。用湿棉签擦去结晶，再用95%酒精擦拭接地处，重新固定接地螺丝，盖好面板，测试质控和标本，分类正确。
3 故障三
3.1 故障现象
仪器报“排出异常”，见仪器的废液排出管内充满废液，废液缓慢向下流动。
3.2 故障处理
首先检查排除废液管，管口无堵塞，管内无污垢、积结和堵塞，此管亦无弯折扭曲。打开面板和仪器盖，见废液排除器内积满废液，按开始键运行仪器，观察排除情况，见排液器瓶内废液不能有效排出，怀疑排液电磁阀坏或接管中有堵塞。检查控制废液排出[2]的电磁阀1-1能动作，拔出连接管，让管内气流空吹，以排除管内可能有的积垢，并让气流的冲力吹去电磁阀的积尘，重新连接后运行仪器，排出功能正常。
4 故障四
4.1 故障现象
检测中血红蛋白检不出，该项显示“****”无数据，报“HGB错误”。
4.2 故障处理
检查抽吸样品管，其仍在白细胞检测器合理位置，执行自动清洗、检测部清洗和旋转阀清洗都不能排除。怀疑血红蛋白比色池脏或损坏。本机血红蛋白检测亦采用流动比色池(白细胞检测部上方的黑色圆柱体)，在关机状态下，把黑色胶管与白色胶管接口拔脱，用1个5mL的注射器吸取专用清洗液，注入比色池内冲洗，并来回抽注数次，保持注射器连通比色池处于灌注状态15min，然后抽出池内洗液，再用注射器注入蒸馏水冲洗数次，安装复位，开机检测，自检通过后测量质控品，血红蛋白检出且在控，故障修复。
5 故障五
5.1 故障现象
在测试过程中，出现“更换稀释液”故障，提示更换稀释液。
5.2 故障处理
经检查稀释液试剂正常，检查负压正常，浮动开关良好，电磁阀正常，各连接管路也无破损漏气现象[2]。经仔细观察，发现主阀气缸漏气(在旋转阀后)，耳靠近有“咝咝”的气流声。分析原因是由于KX-21血球分析仪的控制阀是电控制气阀。气阀控制液阀，使得液体流动，当气缸漏气造成负压瞬间变低，阀开闭不全，稀释液吸入速度慢，稀释液瓶浮子抬不起来。从而出现报警故障报“更换稀释液”。打开主阀气缸后，发现“O”型密封圈磨损，更换“O”型密封圈后，恢复正常。
6 故障六
6.1 故障现象
仪器频繁出现血小板“****”无数据，且红细胞数和红细胞压积均低。
6.2 故障处理
血小板检测与红细胞共用一个检测部，先进行自动清洗和检测部清洗，空白过后，继续做几个标本又出现同样情况。用“刷子清洗”程序进行清洗无好转。检查该检测部和各连接管线[3]，发现接地导线松动，怀疑接触不良，紧固接地螺丝后复原，继续测试标本，血小板正常检出，用质控品测均在控，故障解决。另外，此故障出现时也应考虑内电极导线接触不良、接地线脏或潮湿、导线各触点有锈蚀、检测部松动[4]等可能性。
摘要：通过对KX-21血细胞分析仪的使用和故障处理的积累,本文主要阐述KX-21血细胞分析仪出现白细胞及血红蛋白检测结果低、白细胞检测部漏液、白细胞不分类、血红蛋白测不出等几例故障的维修过程。
关键词：血细胞分析仪,白细胞分类,医疗设备维修
参考文献
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血细胞分类 篇7
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
(1)待评价仪器:XS-800i自动白细胞五分类血细胞分析仪、配套试剂、全血质控物及校准物由日本Sysmex公司提供。该仪器利用电阻抗原理检测红细胞和血小板、用十二磺基硫酸钠法测量血红蛋白浓度、半导体激光流式细胞原理结合细胞化学荧光染色技术进行白细胞计数和分类,并提供相应的IP信息报警。
(2)对照仪器:XE-2100全自动白细胞五分类血细胞分析仪、配套试剂、全血质控物及校准物由日本Sysmex公司提供。
1.2 血标本
血标本来自我院住院患者,受检者早晨空腹,用真空抗凝管(BD公司生产,含EDTA-2K 3.6 mg)从肘静脉采血2 ml。混匀后室温(18~22℃)放置,于采血后1~4 h(总重复性5h内)完成检测。
1.3 检测方法
XS-800i每天开机后预热至少30 min,全血质控物测试合格后检测待测标本。将标本轻轻颠倒混匀8~10次,以手动开盖后放在XS-800i吸样针下,按“START”键吸入标本进行测试,显示并打印结果。
1.4 统计学分析
所有数据用Microsoft Excel软件进行统计学分析,计量资料用表示,比较两种方法的相关性采用线性回归分析。
1.5 质量控制
XS-800i血细胞分析仪安装、调试完毕后,按照仪器操作程序,用配套的全血校准物将全血细胞参数校准。以后每次实验前均先测试全血质控物,结果均在其靶值允许的范围内。对照仪器XE-2100(实验前已校准)每天测量全血质控物,结果均在质控物靶值允许的范围内。
2 评价指标与结果
2.1 总重复性
随机取临床新鲜抗凝静脉血20份(正常、异常标本各10份),随机排列,在XS-800i上测定1次,该批样本室温放置2h及4 h后,再各重复测定1次。检测数据根据下列计算公式计算得出各评价参数的总CV%:
其中,SSQ(组内离均差平方和)=∑(各测定值)2-∑(各样本小计)2/n。n:重复测定次数,u:样本数。
结果:WBC、RBC、HGB、HCT、RDW、PLT和MPV的总重复性测试结果分别为1.79%、1.62%、1.34%、0.57%、1.75%、3.89%和1.56%。
2.2 精密度
包括批内精密度和批间精密度。
随机选取10份(正常、异常标本各5份)临床新鲜抗凝静脉血分别在XS-800i上测定,每份标本连续测定3次;该批样本室温放置2 h后再重复以上操作。批内、批间精密性(CV%)结果见表1。
2.3 携带污染率
先取1份高值血细胞样本连续测定3次,随后立即取一份低值血细胞样本连续测定3次,用下列公式:携带污染率CV%=[(l1-l3)/(h3-l3)]×100%计算。WBC、RBC、HGB和PLT参数的携带污染率分别为0.20%、0.56%、0、0.45%和0.86%,均小于1%,符合要求。
2.4 稀释效应
取一份高值血细胞抗凝血样本离心除去部分血浆,WBC、RBC、HGB、HCT和PLT值分别为79.8×109/L、7.54×1012/L、248g/L、64.8%和685×109/L,以此样本为100%。再用稀释液将该血样本按80%、60%、40%、20%、10%和0%进行稀释,然后从低到高测定不同稀释度的血样本,每份重复测定2次取均值作为实测值,并与经计算所得各稀释度的期望值相比较。所测CBC参数各稀释度的实测值与期望值之间密切相关(r>0.998),见表2。
2.5 可比性
随机抽取106例临床新鲜抗凝静脉血,每份样本分别在XS-800i上连续检测2次,然后立即在XE-2100上以自动进样模式也连续检测2次,各取平均值进行统计。XS-800i与XE-2100结果的可比性见表3。
2.6 白细胞分类
2.6.1 精密度
取1份抗凝血(其中Neut 61.8%、Lym 25.4%、Mon 6.4%、Eos 4.8%和Baso 1.2%)在XS-800i仪器上重复测定11次,取第2~11次的白细胞分类结果计算CV值。五类白细胞(Neut、Lym、Mon、Eos和Baso)重复测定的CV值分别为1.14%、0.97%、5.65%、4.27%和16.20%。
2.6.2 可靠性
取227例临床新鲜抗凝静脉血(其中内科和外科标本120例、血液系统疾病38例、肿瘤放化疗39例、妇产科和小儿科标本30例)在XS-800i仪器上测定,每份样本重复测2次取均值。同时每份血推3张符合质控要求的血片,瑞氏染色后其中2张血片(另1张备用)由2位有经验的技师在体尾交界处按《白细胞分类计数参考方法》[3]进行白细胞分类,将白细胞分为Neut、Lym、Mon、Eos、Baso及各类异常细胞,每张血片油镜分类计数200个白细胞,共计400个白细胞取均值,再与XS-800i仪器的白细胞分类值进行比较。227例标本中,171例人工镜检白细胞形态正常的样本,XS-800i仪器与人工镜检白细胞分类的结果比较见表4。
2.6.3 异常细胞测定(异常细胞的识别能力)
(1)XS-800i仪器白细胞分类报警系统的设置:将原始细胞、幼稚粒细胞、核左移、异型淋巴细胞、有核红细胞和异常淋巴细胞报警的临界值均设在100。若任何一个报警指标的临界值低于100则定义为仪器阴性,若在100~300(最大值)之间则定义为仪器阳性,数值的大小反映了报警指标的可信度。
(2)涂片镜检阳性判断标准:(1)原幼细胞≥1%;(2)早幼/中幼粒>≥1%;(3)晚幼粒≥2%;(4)杆状核粒细胞>5%;(5)NRBC≥1%;(6)异常淋巴(包括异型淋巴)>2%。
(3)评估方法:以镜检分类结果为金标准(2个镜检人员中只要有1人发现阳性结果,即为镜检阳性),对227例标本仪器的检测数据进行分析,评估仪器白细胞分类报警的真阳性、假阳性、真阴性和假阴性。真阳性定义为仪器白细胞分类报警且镜检结果为阳性,假阳性定义为仪器白细胞分类报警但镜检结果为阴性;真阴性定义为仪器白细胞分类不报警且镜检结果为阴性,假阴性定义为仪器白细胞分类不报警但镜检结果为阳性。
(4)评估结果:该仪器白细胞分类报警的假阳性为35.5%、假阴性为8.20%、一致率为71.8%;假阳性标本主要是出现“幼稚粒细胞、原始细胞、异常淋巴细胞和核左移”报警;假阴性标本分别是晚幼粒细胞(2%~4%)3例、原幼淋巴细胞(2%)1例和有核红细胞(2∶100)1例,这5例标本由于异常细胞的比例较低,不仅白细胞散点图变化不太明显,而且也无相应的报警。但这几个病例有的血小板数值减低或直方图异常报警、有的血红蛋白值明显减低,结合临床资料和笔者日常工作中使用的“自动血细胞分析复检筛选规则”,都需要进行血涂片染色人工镜检复核,不会漏掉异常细胞。
3 讨论
本次实验所得到的数据显示,XS-800i血细胞分析仪测定白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板等参数的批内和批间精密度良好,CV值均<2%。总重复性CV值在要求范围内,除血小板为3.89%,其他CBC参数均<2%。携带污染率低,CBC参数均<1%,符合要求。在常见的正常及病理范围稀释效应良好,所测CBC参数各稀释度的实测值与预示值之间密切相关(r>0.998)。与XE-2100检测的血细胞结果对比分析,两者具有高度相关性,CBC各参数r值均>0.99,显示该仪器细胞计数性能良好。
白细胞分类:Neut、Lym、Mon、Eos和Baso重复测定的CV值分别为1.14%、0.97%、5.65%、4.27%和16.20%。171例人工镜检白细胞形态正常的样本,XS-800i仪器与人工镜检白细胞分类的结果比较(r值),两者对Neut、Lym和Eos分类结果的一致性良好(r值分别为0.981 6、0.979 5、0.962 9),对Mon次之(r值为0.824),对Baso的分类结果相关性欠佳(r值为0.587)。出现上述现象的主要原因可能与外周血中Baso数量少、也与其在血片中分布不均有关[4,5]。对血液病样本出现幼稚细胞,严重感染、肿瘤放化疗或外科手术后等情况出现中或晚幼粒细胞、较多的杆状核粒细胞和异型淋巴细胞,XS-800仪器上白细胞散点图可有较明显变化或报警提示。对血标本中杆状核粒细胞比例较少或中性粒细胞出现中毒颗粒、空泡变性或Dohle小体等中毒性改变时,该仪器可出现“幼稚粒细胞、原始细胞、异常淋巴细胞和核左移”等假阳性报警。如标本中异常细胞的比例较低,该仪器白细胞散点图变化不太明显或无白细胞分类报警,可出现假阴性,详细原因有待今后进一步探讨。
尽管血细胞分析仪白细胞分类的检测已由过去单纯的电阻抗原理发展到光散射、细胞化学染色、荧光染色、高频传导和鞘流技术等联合应用,有些仪器还能够对分析标本中的原始细胞、未成熟粒细胞、核左移和异型淋巴细胞等进行报警提示,大大提高了工作效率。但迄今为止,血细胞分析仪在形态学检查仍只能作为一种过筛手段,当遇到可疑情况,尤其是在病理条件下,需要人工以显微镜复查,这已是不争的事实[6,7]。因此,这类血细胞分析仪的白细胞分类也只能起“过筛”作用。不仅当白细胞总数过高或过低、白细胞散点图或直方图异常、有异常细胞报警提示、分类结果明显异常或不分类及某些特殊标本,而且当红细胞和血小板的直方图异常、或有异常报警提示等情况时,都应该结合临床诊断,进行血涂片染色人工镜检复核,以保证获得准确的检测结果[8]。因此,各实验室应根据所用的血细胞分析仪的性能特点和各自医院患者组成情况,制定适用的“自动血细胞分析复检筛选规则”,对异常标本进行血涂片染色人工镜检复核,防止漏掉异常细胞。
总之,通过对XS-800i自动白细胞五分类血细胞分析仪的系统评价,表明其分析速度较快,提供的参数较多,与已知性能的其他血细胞分析仪的检测结果可比性强、相关性好,是一种性能较好的血细胞分析仪。该仪器用血量较少,既可采用抗凝静脉血又可采用抗凝末梢血检测,而且操作简便,并有较高的数据处理和储存能力,机内可存储1万份标本的数据及图形资料,方便查询;而且具有接入院内局域网、输出检测数据等功能。因此,该仪器不仅适用中小医院的检验部门,也能满足较大医院的急诊检验室的需要,是一款较理想的白细胞五分类血细胞分析仪。
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血细胞分类 篇8
1 材料与方法
1.1 一般材料
选择我院2008年5月～2008年9月收治的住院时间较长且住院期间多次（4次以上）进行血液一般检查的患者25例，每位患者分别在不同期采集静脉血与末梢血进行检测，对25例患者静脉血血细胞计数、白细胞五分类结果与末梢血血细胞计数、白细胞五分类结果进行比较分析，确保患者的疾病状况不影响两次的血液检测结果，使所得结果具有可比性。
1.2 仪器
我院采用日本光电MEK-7222K五分类全自动血细胞分析仪。
1.3 观察指标
收集白细胞 (WBC) 、血红蛋白 (Hb) 、红细胞比积 (HCT) 、红细胞 (RBC) 、血小板 (PLT) 及中性粒细胞（NE）、淋巴细胞（LY）、嗜酸性粒细胞（MO）、嗜碱性粒细胞（EO）、单核细胞（BA）的检测数值。
1.4 统计学方法
数据均以均数±标准差表示，采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
本组采用日本光电MEK-7222K五分类全自动血细胞分析仪检测同组患者的静脉血与末梢血均获得全面结果。
2.1 同组静脉血与末梢血血细胞计数比较
采用五分类全自动血细胞分析仪检测同组患者的静脉血与末梢血，所得血细胞计数结果比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。
2.2 同组静脉血与末梢血白细胞五分类结果比较
采用五分类全自动血细胞分析仪检测同组患者的静脉血与末梢血，所得白细胞五分类结果比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表2。
3 讨论
近年来，随着医疗市场的变革，临床和患者对检验科提出了更高的要求，需要更多的诊断指标、更快的检测速度、更低的检测费用，在门诊运用更快速、更准确、重复性更好、高科技含量更高且成本合理的血细胞分析仪是大势所趋[1,2]。血细胞自动分析技术具有多参数、操作简单、高度自动化、精密度高、速度快、注重环保、较强的质控功能、智能化、有效的筛查正常人群的功能等特点。我院采用的日本光电全自动五分类血液分析仪MEK-7222K使用先进可靠的多角度激光散射技术对白细胞进行分类，用血量少、成本低。
曾有文献报道[3]，MEK-7222K五分类全自动血细胞分析仪是一台能对大批量20μl末梢血、静脉血进行血细胞计数、白细胞五分类，进行快速有效筛检，投入较少，性价比较高，适合大中型医疗机构的现代化仪器。本组结果显示，采用日本光电MEK-7222K五分类全自动血细胞分析仪检测同组患者的静脉血与末梢血均获得全面结果，且检测同组患者的静脉血与末梢血血细胞计数与白细胞五分类所得结果比较，差异均无统计学意义（P>0.05），可见使用五分类全自动血细胞分析仪检测静脉血或末梢血，均能获得全面五分类结果，便于医务人员根据实际情况选择合适的取血途径进行检测，可广泛应用于常规检验工作中。
摘要：目的:分析比较五分类全自动血细胞分析仪检测静脉血与末梢血的结果。方法:对我院25例患者应用五分类全自动血细胞分析仪检测静脉血与末梢血所得结果进行比较分析。结果:同组患者应用五分类全自动血细胞分析仪检测静脉血与末梢血所得血细胞计数与白细胞五分类结果比较, 差异均无统计学意义 (P>0.05) 。结论:使用五分类全自动血细胞分析仪检测静脉血或末梢血, 均能获得全面五分类结果, 可广泛应用于常规检验工作中。
关键词：五分类全自动血细胞分析仪,静脉血,末梢血
参考文献
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血细胞分类 篇9
例1.日常生活中人们常用酵母菌发面蒸馒头, 某同学想探究酵母菌的细胞呼吸方式, 设计了下列实验, 请你帮助他完成有关内容。
(1) 实验目的:探究酵母菌的细胞呼吸方式。
(2) 实验原理:细胞的不同呼吸方式释放的能量多少不同, 有氧条件下释放的能量比无氧条件释放的多。每种方式所释放的能量中都有一部分以____形式散失, 从而导致细胞周围的环境温度____。
(3) 材料用具:酵母菌培养液、质量浓度为0.1g/mL的葡萄糖溶液、液体石蜡油、蒸馏水、保温瓶、温度计、棉花等。
(4) 实验步骤:
①将质量浓度为0.1g/mL的葡萄糖溶液加热煮沸后冷却备用;
②取3只保温瓶, 编号为A、B、C, 并将C瓶设计为对照组;
③在3只保温瓶中分别加入等量的葡萄糖溶液;
④____________________ ;
⑤3只保温瓶中均放入温度计, 用棉花轻轻塞上瓶口, 并保证保温瓶通气;
⑥24小时观察并记录3只保温瓶中温度的变化。
(5) 预测实验现象和实验结果:
若A瓶温度>C瓶温度, B瓶温度=C瓶温度, 则 ____________________;
若B瓶温度>C瓶温度, A瓶温度=C瓶温度, 则________________ ;
若________________, 则 ________________。
(6) 某同学也想以酵母菌为实验材料探究相关问题, 请你帮他设计探究性实验课题名称:____________ 。
解析:首先根据细胞呼吸的基本知识完成实验原理。然后根据实验目的、实验步骤, 确定自变量是有无氧气, 因变量是温度变化。为了校正因物理因素 (或非生物因素) 引起的温度变化, 必须设置空白对照, 题中交代C瓶是对照, 所以A瓶中加入适量的酵母菌培养液和液体石蜡油, B瓶中加入与A瓶等量的酵母菌培养液 (或者A瓶与B瓶对调) 。最后判断细胞呼吸方式, 若A瓶或B瓶温度等于C瓶温度, 说明只进行无氧呼吸或有氧呼吸。以酵母菌为实验材料的实验很多, 从细胞呼吸角度, 可以探究酵母菌无氧呼吸的最终产物、探究酵母菌在不同温度下的有氧呼吸强度等。
答案: (2) 热能 升高 (4) ④A瓶中加入适量的酵母菌培养液和液体石蜡油, B瓶中加入与A瓶等量的酵母菌培养液, C瓶中加入与A瓶等量的蒸馏水 (A瓶和B瓶可互换) (5) 酵母菌只进行无氧呼吸 酵母菌只进行有氧呼吸 (注意和步骤④对应) B瓶温度>C瓶温度, A瓶温度>C瓶温度 酵母菌既进行有氧呼吸又进行无氧呼吸 (6) 探究酵母菌无氧呼吸的最终产物 (合理即可)
例2.某同学在研究马铃薯块茎细胞呼吸方式时, 设计了如下实验:
实验一 取新鲜马铃薯块茎, 洗净、切成碎屑。向锥形瓶中分别加入适量的马铃薯块茎碎屑, 安装成下图甲。每隔一段时间, 从分液漏斗向锥形瓶A中注入适量过氧化氢溶液, 观察装置中溴麝香草酚蓝水溶液的颜色变化。
实验二 取新鲜马铃薯块茎, 洗净、切成碎屑。向锥形瓶C中加入适量的马铃薯块茎碎屑, 并向C瓶充入N2, 替代瓶中空气, 安装成下图乙。一段时间后, 观察装置中溴麝香草酚蓝水溶液的颜色变化。
请回答下列问题:
(1) 实验一的原理是________________ 。当实验一中溴麝香草酚蓝水溶液的颜色由绿变黄时, 是否可以说明马铃薯的呼吸作用在逐渐增强?________;为什么? ________________。
(2) 已知植物细胞无氧呼吸有两种类型:一种是能够产生酒精的无氧呼吸, 另一种是能够产生乳酸的无氧呼吸, 并且马铃薯块茎在只有N2的条件下可以进行无氧呼吸。则实验二的目的是________________;若实验二中溴麝香草酚蓝水溶液____________, 则说明马铃薯块茎细胞进行的是产生乳酸的无氧呼吸, 其反应式为________________ 。
(3) 实验一和实验二在设计上均有不够严谨之处, 可能会干扰对马铃薯块茎细胞呼吸类型的判断, 请给予修正:________________。修正的理由是____________。
解析: (1) 本题考查教材中的基本知识。如过氧化氢酶可以催化过氧化氢分解产生氧气;溴麝香草酚蓝水溶液可以检测CO2。溴麝香草酚蓝水溶液的颜色由绿变黄时, 只能说明CO2较多, 但不能确定马铃薯的呼吸作用在逐渐增强。因为也可能是实验时间较长, 导致产生的CO2总量较多。 (2) 根据文字“马铃薯块茎在只有N2的条件下可以进行无氧呼吸”和图乙C瓶中通入N2, 可以确定实验二的目的是探究马铃薯无氧呼吸的类型。因为产生乳酸的无氧呼吸反应式是:
答案: (1) 马铃薯块茎细胞中含有过氧化氢酶, 可催化过氧化氢分解产生氧气;在有氧条件下, 马铃薯块茎细胞可以进行有氧呼吸, 产生的CO2可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄 不能 溶液的颜色由绿变黄可能是实验时间较长, 马铃薯产生的CO2总量较多引起的 (或其他合理答案) (2) 探究马铃薯无氧呼吸的类型 不变色
二、探究细胞呼吸的场所
例3.为了确定细胞有氧呼吸第二阶段发生的场所, 某校的学生进行了如下探究:
作出假设:有氧呼吸第二阶段只发生在线粒体中, 不能在细胞质基质中完成。
实验过程:
实验结果:1号和2号试管中均检测到CO2。 (与预测结果不相符)
请回答:
(1) 分析实验结果与预期不相符合的原因及提出改进措施。
原因:________________ 。
改进措施:____________________
(2) 实验步骤①将肝脏组织分散成肝细胞通常用______酶。
(3) 实验步骤③必须获得线粒体而不进一步离心获取线粒体基质的原因是:他们认为线粒体必须保持_____________________才能完成相应的功能。
(4) 实验步骤⑥依据的实验原理是 _____________________。
(5) 经同学们的分析及对实验个别步骤作出的恰当修改, 重新实验大家都获得了与预期相符合的实验结果。最后, 老师又提出一个新问题:假如该实验时间过长, 空气中CO2溶入样本中的量足以被检测剂检测出来, 为了排除其带来的实验误差, 还应该对实验设计做如下改进:
①分别为1号和2号试管设置对照组1′号和2′号试管;
②1′号和2′号试管应依次加入_____________________, 但均不能加入_____________________。
解析:本实验的自变量是有氧呼吸第二阶段发生的场所。要确定有氧呼吸第二阶段发生的场所, 就要看丙酮酸是在哪里分解的, CO2是丙酮酸分解的产物, 因此通过检测CO2就可以确定有氧呼吸第二阶段发生的场所。由于肝细胞暂时保存时利用保存液中的葡萄糖进行有氧呼吸会产生CO2, CO2可以从线粒体扩散进入细胞质基质中, 导致实验结果与预期不相符合。只要用不含葡萄糖的保存液保存肝细胞就可以避免。将动物组织分散成单个细胞常用胰蛋白酶处理。细胞器只有保持结构的完整性才能执行相应的功能。为了确认CO2的来源是丙酮酸的分解还是空气中, 设置的对照组不加丙酮酸, 用等量的生理盐水代替就可以了。
答案: (1) 原因:肝细胞暂时保存时利用保存液中的葡萄糖进行了有氧呼吸, 线粒体产生的CO2扩散进入细胞质基质中 改进措施:用不含葡萄糖的保存液 (2) 胰蛋白 (3) 结构的完整性 (4) 丙酮酸进一步分解的产物有CO2, 检验是否有CO2产生可判断丙酮酸是否被分解 (5) 等量的细胞质基质保存液、线粒体保存液 丙酮酸
三、测定细胞呼吸的强度
例4.将刚萌发的且用消毒剂清洗过 (不影响种子的生命活力) 的小麦种子 (以淀粉为主) 放入下列装置, 在环境温度不变、压力为一个标准大气压的情况下测定萌发种子的呼吸强度。请据图回答下列问题:
(1) 该实验应该存在一个对照, 具体设置为_____________________ , 其目的是_____________________ 。
(2) 若图中实验所用小麦种子不经消毒处理, 则测得的数据与种子实际呼吸强度相比是偏大还是偏小?_____________________;简述原因:_____________________ 。
(3) 如果将小麦种子换成等质量的油菜种子, 其他条件不变, 重复上图所示实验, 预期有色液滴移动的距离______________ (填“大于”、“小于”或“等于”) 图示实验结果。
解析: (1) 由于萌发种子呼吸作用产生的热量会引起锥形瓶内气体的物理性膨胀, 从而造成结果偏差, 所以要设置死种子的对照, 其他条件相同。 (2) 如果小麦种子不经消毒处理, 那么种子表面的微生物呼吸作用也会消耗一定量的氧气, 所以测得的数据偏大。 (3) 由于油菜种子比小麦种子含脂肪多一些, 所以分解时消耗氧气多一些。
答案: (1) 用消毒剂清洗过的等量的死萌发小麦种子和等量CO2吸收剂 校正因萌发种子呼吸作用产生的热量引起锥形瓶内气体的物理性膨胀所造成的误差 (2) 偏大 种子表面的微生物呼吸作用也会消耗一定量的氧气 (3) 大于
四、探究影响细胞呼吸的因素
例5.酵母菌在氧气充足条件下不能进行无氧呼吸, 有同学认为是氧气抑制了酵母菌无氧呼吸, 也有同学认为是有氧呼吸产生的ATP抑制了酵母菌无氧呼吸。请设计实验探究酵母菌在氧气充足条件下不能进行无氧呼吸的原因。
供选的实验试剂和用品:锥形瓶、酵母菌细胞 (试剂1) 、质量分数为5%的葡萄糖溶液、酵母菌破碎后经离心处理得到的只含有酵母菌细胞质基质的上清液 (试剂2) 和只含有酵母菌细胞器的沉淀物 (试剂3) 、ATP溶液、蒸馏水、橡皮管夹若干、其他常用器材和试剂。
完成下列实验步骤:
(1) 取锥形瓶等连接成如上图装置3套, 依次编号为A、B、C。1号锥形瓶中都加入质量分数为10%的NaOH溶液, 3号锥形瓶中都加入澄清的石灰水。
(2) A装置的2号锥形瓶中加入______________;B装置的2号锥形瓶中加入______________;C装置的2号锥形瓶中加入______________。
(3) A、B、C3套装置均先持续通入氮气5min, 去除锥形瓶中的氧气, 再将A、B、C3套装置分别作如下处理:A套______________, B套______________, C套______________。
(4) 将3套装置放在温度适宜 (25～35℃) 的相同条件下培养相同时间 (8～10h) 。
(5) 观察______________, 判断是否进行无氧呼吸。
预期实验结果并得出相应结论:
①若A套变浑浊, B套不变浑浊, C套变浑浊, 则______________ ;
② ______________;
③ _____________________;
④______________, 则酵母菌无氧呼吸不受ATP抑制, 也不受氧气抑制。
解析:仔细阅读题干, 可以确定本实验的自变量是氧气、ATP的有无, 因变量是酵母菌的无氧呼吸。根据实验步骤提示, 可以确定3套装置分别对应3种条件:氧气、ATP都不存在;只存在ATP;只存在氧气。为了防止在通入氧气条件下, 酵母菌进行有氧呼吸产生ATP干扰实验结果, 必须选择试剂2, 因为细胞质基质只是酵母菌进行无氧呼吸的场所。3套装置处理可以表示如下:
注:“+”表示添加, “-”表示没有添加。根据每套装置的3号锥形瓶中都加入了澄清的石灰水, 确定实验是通过观察澄清石灰水是否变浑浊来判断是否进行无氧呼吸。A套装置是对照, 肯定会进行无氧呼吸, 需要讨论的只是B套、C套。根据提示, 共有4种情况, 注意结果和结论相对应就可以了。
答案: (2) 10mL的试剂2、10mL质量分数5%的葡萄糖溶液、2mL蒸馏水 10mL的试剂2、10mL质量分数5%的葡萄糖溶液、2mLATP溶液 10mL的试剂2、10mL质量分数5%的葡萄糖溶液、2mL蒸馏水 (3) 持续通入N2 持续通入N2 持续通入空气 (5) 澄清石灰水是否变浑浊 预期实验结果并得出相应结论:①酵母菌无氧呼吸受ATP抑制, 不受氧气抑制 ②若A套变浑浊, B套变浑浊, C套不变浑浊, 则酵母菌无氧呼吸不受ATP抑制, 受氧气抑制 ③若A套变浑浊, B套不变浑浊, C套不变浑浊, 则酵母菌无氧呼吸既受ATP抑制, 也受氧气抑制 ④若A套变浑浊, B套变浑浊, C套变浑浊
血细胞分类 篇10
关键词：血细胞分析仪,五分类,临床应用
目前, 全自动五分类血细胞分析仪在我科已开始应用, 为了更准确地了解、认识和使用全自动五分类血细胞分析仪, 我们对BECKMAN COULTER HMX全自动五分类血细胞分析仪进行了主要性能评价, 现将结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
(1) 对象:100例住院患者, 均为我院2009年7～9月份住院患者, 其中男性56例, 女性44例, 年龄8～72岁。 (2) 仪器与试剂:BECKMAN COULTER HMX全自动五分类血细胞分析仪、溶血素、分类包、清洗液、稀释液等试剂均由贝克曼库尔特实验系统有限公司提供。SYSMEX KX-21三分类血细胞分析仪、稀释液、溶血素均由日本稀森美康公司提供。
1.2 方法
(1) 仪器的校准和质控:首先用配套试剂校准品按校准程序进行校准。SYSMEX KX-21每年两次校准, 每日做室内质控, 每年参加四次室间质评均合格。 (2) 精密度:采用高、中、低值3个水平的新鲜血标本进行11次测定, 连续测定20d, 分别计算各数据的变异系数 (CV) , 标准差 (SD) 。 (3) 交叉污染率:参昭贝克曼库尔特实验系统有限公司提供的方法对WBC、RBC、HB、HCT、PLT的交叉污染率进行评价。 (4) 线性和准确性:采用100例住院患者静脉采血标本每位在BECKMAN COULTER HMX全自动五分类血细胞分析仪上检测后, 2h内在SYSMEX KX-21血细胞分析仪上再次检测, 比较两者偏差值做相关性分析。
2 结果
2.1 精密度
所测结果精密度均在允许范围内, BECKMAN COULTER HMX全自动五分类血细胞分析仪检测结果见表1。
2.2 交叉污染率测定
WBC、RBC、HB、HCT、PLT交叉污染率的LIMIT%分别为2.0、1.0、2.0、1.0、2.0。
2.3 线性
主要检测参数的线性范围取其均值与靶值做相关性分析WBC、RBC、HB、HCT和PLT相关系数 (R) 值分别为0.9999、0.9997、0.9993、0.9998和0.9998。
2.4 准确性评价
见表2。
由表2可见两台仪器检测参数显示良好的相关性WBC、RBC、HB、HCT和PLT的R值分别为0.991、0.997、0.999、0.999、0.987。
3 讨论
随着医疗市场的变革, 临床和患者对检验科提出了更高的要求, 需要更多的诊断指标, 更快的检测速度, 更低的检测费用, 在门诊运用更快速、更准确、重复性更好、高科技含量更高且成本合理的血细胞分析仪是大势所趋.BECKMAN COULTER HMX全自动五分类血细胞分析仪是采用VCS原理: (1) 应用电阻抗原理测量细胞体积 (V) 。 (2) 应用电导性 (C) 技术, 根据细胞壁能产生高频电流的性能采用高频电磁探针测量细胞的内部结构, 即以细胞核和细胞质的比例, 细胞内颗粒的大小和密度来辨别体积相同但性质不同的两个细胞群体。但当高频电流检测时, 可根据两种细胞的核桨比例不同而呈现不同检测信号进行区分。 (3) 应用光散射 (S) 技术, 来自激光源的单色光直接扫描进入计数敏感区的每一个细胞, 根据细胞产生的不同角度的散射光, 可提供细胞形态、核结构等光散射信息, 并能鉴别细胞颗粒的构型和质量, 提高细胞分析的准确度和灵敏度[1]。我们对BECKMAN COULTER HMX全自动五分类血细胞分析仪的精密度测定结果均小于仪器的设计指标。精密度检测中WBC最大标准差为0.07, 变异系数 (CV%) 为1.63, RBC为0.03和0.66, HCT为0.48和1.35, PLT为12和3.48, HB为2和0.71, 表明核仪器具有良好的重复性, 性能指标高于仪器所规定之要求, 线性测定较广, 其包含了临床出现的病例的血液细胞变化。与SYSMEX KX-21相比WBC、RBC、HCT、PLT、HB的相关系数分别为0.991、0.997、0.999、0.999、0.998正明相关性良好, 交叉污染率的LIMIT%均在规定范围内, 表明其交叉污染率低。通过以上对BECKMAN COULTER HMX全自动五分类血细胞分析仪的评价我们认为它性能良好, 测试速度快, 是一台较为理想的血细胞分析仪, 能良好的满足临床需要。
参考文献