乳酸脱氢酶同工酶（通用7篇）
乳酸脱氢酶同工酶 篇1
从20世纪90年代至今,大量的实验结果证明过量氟可致机体各器官功能异常。长期高氟对牙齿、骨骼等系统的影响已有较多报道,在过量氟对心血管系统的作用方面的研究相对较少。乳酸脱氢酶是能催化乳酸脱氢生成丙酮酸的酶,广泛存在于机体各组织中。血清α-羟丁酸脱氢酶在心肌组织中含量最多,α-羟丁酸脱氢酶与乳酸脱氢酶在临床上被作为诊断心肌损伤的一个重要指标。我们的实验以Wistar大鼠为实验动物,旨在观察氟对大鼠心肌的损伤。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
氟化钠(NaF,分析纯,天津化工厂);东芝全自动生化分析仪。
1.2 动物分组与实验处理
健康雄性Wistar大鼠32只,体重(90±20) g,购自内蒙古大学动物实验中心,随机分为4组,每组8只,均饲正常饲料。饮用水中分别含氟化钠0、125、250、500 mg/L,自由饮用。
1.3 标本留取方法
大鼠饲喂两个月后眶静脉取血,4 000 rpm离心,取血清。
1.4 酶的测定方法
利用全自动生化分析仪测定LDH、HBDH,以U/L为单位。相对酶活力=实验组酶活/对照组酶活×100 %。
1.5 统计分析
采用SPSS 12.0统计软件进行数据分析。
2 结果
与对照组相比,染氟组大鼠血清中LDH含量增加。其中,饮水中含250、500 mg/L NaF使LDH活力显著增加,达对照组的193 %和203 %。见表1。
染氟组大鼠血清中HBDH含量增加。饮水中含250、500 mg/L NaF使HBDH活力增加为对照组的199 %和216 %,与对照组相比差异显著。见表2。
与对照组相比,在染氟2个月后,血清中HBDH/LDH也显著增加,达对照组的168 %和176 %。见表3。
*与对照组比较P<0.05
*与对照组比较P<0.05
*与对照组比较P<0.05
3 讨论
氟参与人体正常代谢活动,但当摄入过多,超过生理需要量时又对机体有强烈毒性作用,不仅影响骨骼和牙齿,而且还引起包括心血管、中枢神经、消化、内分泌、视器官、免疫、皮肤等多系统的疾病[1]。近年来,氟中毒引起的非骨相损害越来越引起国内外学者的关注,但氟中毒对循环系统的损伤研究较少。
LDH是糖无氧酵解和糖异生的重要酶之一,广泛存在于人体的各个组织,当细胞坏死时,该酶的活力出现明显变化。本研究中,染氟组大鼠血清中LDH的活力升高,且呈剂量依赖性,这可能是由于氟中毒引起机体损伤。LDH有5种同工酶,其中LDH1和LDH2主要分布于心、脑、肾。含H亚基的LDH可催化HBDH,HBDH活力基本上可以代表LDH1和LDH2的活力。HBDH在心肌组织中含量最高,在发生心肌疾病时活力明显上升。本实验结果中, HBDH活力在染氟组明显升高。这就说明氟可能引起大鼠心肌的损伤。有研究表明LDH/HBDH更能代表心肌是否损伤[2,3]。本研究结果发现,LDH/HBDH在染氟组明显高于对照组,表明氟可能引起心肌损伤,结果导致LDH和HBDH活力增加。总之,研究氟对心脏损伤并阐明其损伤机制,将有助于进一步确定氟对非骨相损伤在氟中毒发病机制中的作用,在此方面还需做大量的工作。
摘要：目的:探讨不同剂量氟对大鼠血清乳酸脱氢酶和α-羟丁酸脱氢酶的影响。方法:给4组Wistar大鼠饲喂正常饲料,分别饮用含0、1 2 5、2 5 0、5 0 0 mg/L氟化钠去离子水溶液,复制慢性氟中毒大鼠模型。饲喂2个月时取血,测定血清中乳酸脱氢酶(LDH)和α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)活力的变化。结果:染氟组血清中乳酸脱氢酶和α-羟丁酸脱氢酶活力明显增加,并且随氟浓度的增加呈上升趋势,LDH/HBDH显著增加。结论:氟能引起血清乳酸脱氢酶和α-羟丁酸脱氢酶活力升高以及LDH/HBDH显著增加,可能引起心肌损伤。
关键词：氟,大鼠,α-羟丁酸脱氢酶,乳酸脱氢酶
参考文献
[1]王家伦.氟化钠致氟中毒大鼠骨、软骨及脏器的组织学超微结构观察[J].中国地方病防治杂志,1987,2(2):79-81.
[2]陈振胜,金宏伟,黄回滨,等.α-羟丁酸脱氢酶与乳酸脱氢酶比值的临床意义[J].齐齐哈尔医学院学报,2005,26(7):751-752.
[3]王丽娜,宋艳容,石峻.羟丁酸脱氢酶/乳酸脱氢酶在心肌损伤与肝脏损伤中的鉴别诊断价值[J].中国综合临床,2006,22(2):128-129.
关于乳酸脱氢酶的学习和总结 篇2
1 LDH与理论学习
1.1 LDH
按照酶促反应的性质, 酶可分为六大类, LDH属于第一大类即氧化还原类酶。LDH是推荐命名而非系统命名。LDH是结合类酶, 其辅酶为尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NADH+H+) 。
1.2 同工酶
LDH是同工酶 (isoenzyme) , 即是来源于同一个体或组织, 能催化同一反应, 而蛋白结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶, 因此可用电泳或其他方法将它们分离开。LDH的活性结构为四聚体, 它由2种亚基 (M、H) 组成, 所以组合出5种同工酶, 分别为LDH1 (HHHH) 、LDH2 (HHHM) 、LDH3 (HH-MM) 、LDH4 (HMMM) 、LDH5 (MMMM) 。经电泳分离后, 就有5个同工酶区带。
1.3 糖代谢
LDH是生物体细胞内糖代谢过程的重要酶, 其酶促反应为可逆反应:丙酮酸+NADH+H+!乳酸+NAD+, 其中丙酮酸生成乳酸是糖酵解过程, 即NADH+H+的还原当量未与O2结合不能生成H2O而生成了乳酸;乳酸生成丙酮酸是糖异生过程, 机体根据自身状况或生成葡萄糖, 或经有氧氧化过程产生ATP。
1.4 组织分布
LDH由2种亚基 (M、H) 组成, 其中H是英文单词heart (心脏) 的代号, M是muscle (肌肉) 的代号, 之所以取该符号是其组织分布有差异, 其中心脏组织中以LDH1为主;肌肉和肝脏组织中则以LDH5为主。正常人细胞的新陈代谢使血浆中含有一定量的LDH, 但是处于一个正常值范围, 一旦组织细胞非正常大量损伤, 血浆中将含有大量的LDH分子, 故检测血清中LDH的含量对疾病的诊断及定位有帮助。
2 LDH与实验学习
血清中的LDH含量随着身体状况的不同有较大的变化, 因此, 在临床上经常将血清LDH同工酶的含量作为一个重要的临床参考指标。正因为如此, LDH同工酶的实验测定操作及理论学习在我们的基础课学习中显得尤其重要。
2.1 LDH的酶活性及活性单位
酶活性 (Enzyme Activity) 是指酶催化化学反应的能力, 也即酶催化某一化学反应的速度。酶的含量及存在不能直接用重量或体积来表示, 通常用它催化某一特定反应的速度来表示, 即用酶的活性来表示。由于酶活性受温度、p H值等环境因素的影响很大, 在进行酶活性测定时, 必须使这些因素保持恒定。
1976年, 国际酶学生化学会委员会规定:在特定条件下, 每分钟内能将1μmol底物转化为产物所需的酶量为一个国际单位 (IU) 。在实际应用中, 酶的活性单位常用习惯表示法, 如血清LDH活性单位按显色法定义为:每100 ml血清在37℃与底物作用15 min, 生成1μg丙酮酸为1个单位。
2.2 LDH测定的实验方法
2.2.1 分光光度法
以乳酸和NAD+为底物, 将其与血清 (尿、脑脊液) 作用15 min, 用显色剂2, 4-二硝基苯肼反应后, 在440nm处读取吸光度值, 计算活性单位, 正常值为:血清109~245IU/L;尿560~2 050 IU/L;脑脊液含量为血清的1/10。该实验与谷丙转氨酶 (ALT, GPT) 活性测定原理和方法类似, 可做比较。
2.2.2 电泳法
0.8%琼脂糖凝胶加样孔中加入10~20μl的血清, 点样端连接于阴极, 电压为100 V, 时间为90 min。将显色液滴加于凝胶板上, 37℃反应40 min后同工酶区带即呈蓝紫色。电泳迁移率由快至慢依次为LDH1到LDH5, 说明H亚基分子量小于M亚基。500 nm扫描定量可得到百分比图谱, 与正常人图谱比较有助于对疾病的诊断, 如心肌梗死图谱、肝病图谱。
2.3 影响LDH电泳的因素
2.3.1 血清标本质量
血清标本放置时间与扫描电泳图谱图形基线抬高相关;标本溶血者LDH远高于正常测定时的值。扫描所得图形基线抬高, 并且图形分区不理想, 不能将5个区带完全分离, 未能达到分离目的。
2.3.2 电泳条件
电泳时电压的不同也会对实验结果造成影响。在不改变其他条件的情况下, 将电泳电压从100 V增加至110 V和120 V进行电泳, 当电压为110 V时, 同工酶条带之间距离清晰, 条带较直, 易于进行结果的扫描分析;当电压为120V时, 发现琼脂糖凝胶介质的正负极两端因电压较高、产热较快而出现部分凝胶溶解现象, 同工酶条带不规则。故在日常工作中推广应用110 V进行电泳。
作为生物专业的学生, 一切与生命相关的基础知识都是我们应该掌握的, 那么在当今知识爆炸的时代, 学习方法的探讨和掌握对于学习的效率和效果显得尤为重要, 我们应以点带面, 举一反三, 将零散的知识珍珠连成一串有功能的知识项链。只有这样, 才能真正掌握并消化所学的知识, 这样不仅有利于我们现在的基础知识学习, 对今后各课程的学习与实践也是非常有必要的。
参考文献
[1]唐筑灵, 胡雷.某些实验因素对LDH同工酶电泳的影响[J].检验医学与临床, 2005, 2 (4) :178～179.
[2]李艳敏, 孙建华, 杨鸣.使用不同电压对LDH同工酶琼脂糖电泳的比较[J].江西医学检验, 2005, 23 (5) :432.
乳酸脱氢酶同工酶 篇3
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2009年7月~2010年10月在我院住院治疗的呼吸道感染患儿94例为研究对象,均符合《诸福棠实用儿科学》诊断标准[2]。排除患有心肌炎、急慢性心肌病、血液系统疾病、风湿性疾病及脑损伤患儿。94例患儿根据呼吸道感染的严重程度分为上呼吸道感染组、肺炎组、肺炎心衰组。上呼吸道感染组32例,其中男21例,女11例;年龄5个月~11岁,平均(4.41±2.93)岁;肺炎组34例,其中男22例,女12例;年龄3个月~13岁,平均(4.89±3.01)岁;肺炎心衰组28例,其中男19例,女9例;年龄5个月~10岁,平均(3.79±2.69)岁。另选择同期门诊查体的正常健康小儿100例为正常对照组,男63例,女37例;年龄12个月~13岁,平均(4.01±3.19)岁。各组在性别和年龄构成方面差异无统计学意义(P>0.05),具可比性。
1.2 方法
取感染患儿入院后和正常健康小儿查体日清晨空腹静脉血3 ml,取血后立即4℃3000 r/min离心10 min,分取血清,置-80℃冰箱保存待测。CK-MB采用选择抑制法,HBDH采用DGKC法,测定在日立7 180全自动生化分析仪上进行。试剂盒均由四川迈克公司提供,严格按试剂盒说明操作。心肌酶谱的正常参考值:CK-MB 0~25 IU/L、HBDH 95~250 U/L[3]。
1.3 统计学方法
所有计量资料采用均数±标准差表示,数据分析采用SPSS 13.0统计分析软件,两组计量比较采用t检验,利用Pearson作相关性分析,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 呼吸道感染组和正常对照组血清CK-MB和HBDH水平的比较
呼吸道感染组患儿血清CK-MB和HBDH水平与正常对照组比较明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),结果见表1。
与对照组比较,*P<0.05Compared with control group,*P<0.05
2.2 不同程度呼吸道感染患儿血清CK-MB和HBDH水平的比较
不同程度呼吸道感染患儿血清CK-MB和HBDH水平为:肺炎心衰组水平最高,其次为肺炎组,上呼吸道感染组最低,各组相比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结果见表2。
与上呼吸道感染组比较,*P<0.05;与肺炎组比较,▲P<0.05Compared with upper respiratory infections group,*P<0.05;compared to pneumonia group,▲P<0.05
2.3 不同病情程度的呼吸道感染患儿血清CK-MB和HBDH水平的相关性分析
对血清CK-MB、HBDH水平与不同病情程度之间进行Pearson相关分析结果表明,病情程度与CK-MB、HBDH水平呈正相关(r=0.518,0.527,P<0.01)。
3 讨论
呼吸道感染是我国临床常见的儿童感染性疾病,也是我国婴幼儿死亡的主要原因之一。特别是患儿呼吸道并发循环系统衰竭时,患儿预后极差[4,5]。因此,探讨正确评价不同程度呼吸道感染患儿心肌酶相关指标的变化,指导临床早期诊断呼吸道感染合并的心肌损伤,减少心脏并发症和临床不良事件地发生显得尤为重要。本研究通过临床观察研究呼吸道感染患儿和正常小儿的心肌酶谱,了解不同程度呼吸道感染患儿的心肌酶各项指标的变化规律,指导临床上早期、准确发现呼吸道感染合并的心肌损伤,以便于早期治疗。
心肌酶是广泛存在于人体的心肌、肝脏、骨骼肌、肺脏等组织细胞中的胞浆酶,当机体组织受损时它们释放入血,从而引起心肌酶活性升高[6]。因此,血清心肌酶活性动态变化可作为诊断心肌损伤特别是心肌梗死的“金标准”而广泛应用[7]。由于CK-MB存在于心肌细胞的外浆层,几乎为心肌所特有,是临床上诊断心肌损害的特异性的心肌酶[8]。通过检测CK-MB的活性可以反映心肌纤维损害的程度和心脏的功能状况。同时要注意的是,当机体同时存在脑损伤时,单纯检测CK-MB水平容易产生误差[9]。本研究排除了合并脑损伤的病例。HBDH是含有H亚基的LDH同工酶LDH1和LDH2的共同底物,HBDH活力实际上反映了LDH1和LDH2的活力之和,可以较敏感地反映心肌受损程度。HBDH是反映心肌损伤灵敏性较高的指标,它仅仅当心脏疾病时才会出现明显升高的趋势。因此对心衰的诊断有较高的特异性和灵敏性[10]。
本研究通过呼吸道感染患儿和正常小儿心肌酶谱水平的比较,结果显示,呼吸道感染组患儿血清CK-MB和HBDH水平与正常对照组比较明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。表明呼吸道感染患儿存在心肌损伤。进一步对不同程度呼吸道感染患儿血清CK-MB和HBDH水平进行比较,结果显示肺炎心衰组水平最高,其次为肺炎组,上呼吸道感染组最低,各组相比较差异均有统计学意义(P<0.05)。并且随着感染程度的加重,患儿血清CK-MB和HBDH水平呈上升趋势,而且CK-MB和HBDH水平与感染程度呈正相关。表明CK-MB和HBDH水平反映了呼吸道感染患儿心肌受损和感染的严重程度。
因此,呼吸道感染患儿血清CK-MB和HBDH水平的升高对心肌受损具有重要的诊断价值,联合监测呼吸道感染患儿血清CK-MB和HBDH水平有助于判断感染的严重程度。
摘要：目的:探讨呼吸道感染患儿血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和羟丁酸脱氢酶(HBDH)的改变及临床价值。方法:采用免疫抑制法分别测定94例呼吸道感染患儿和100例健康儿血清CK-MB和HBDH水平。结果:呼吸道感染组患儿血清CK-MB和HBDH水平与正常对照组比较明显升高,相比较差异有统计学意义(P<0.05);血清CK-MB和HBDH水平随着感染程度加重而升高,CK-MB、HBDH与感染程度呈正相关(r=0.518,0.527,P<0.01)。结论:联合监测CK-MB和HBDH有助于判断呼吸道感染患儿的病情严重程度。
关键词：肌酸激酶同工酶,羟丁酸脱氢酶,呼吸道感染,小儿
参考文献
[1]刘淑会,张霞,王平.68例小儿急性呼吸道感染患儿心肌酶谱的变化分析[J].检验医学与临床,2009,6(20):1744-1745.
[2]胡亚美,江载芳.诸福棠实用儿科学[M].7版.北京:人民卫生出版社,2002:1205-1207.
[3]李璐.68例小儿肺炎心肌酶检测的临床意义[J].中国临床医生,2006,34(11):45-46.
[4]梁宏,石秀兰.婴幼儿重症肺炎合并心力衰竭时心肌肌钙蛋白I的临床意义[J].中原医刊,2006,33(4):462-471.
[5]周海鹰,刘希玲,钟桂珍.感染性疾病患儿几种心肌酶的变化及临床意义[J].中国实用儿科杂志,2006,21(4):319-320.
[6]谢雪兰,许月红.儿童病毒性脑炎血清心肌酶谱测定的临床意义[J].河北职工医学院学报,2008,25(2):22-24.
[7]王秀华,陆希明.心肌肌钙蛋白的测定及临床应用进展[J].哈尔滨医药,2004,24(6):62-64.
[8]方文,刘仁贵.溶血对血浆酶活性测定的影响[J].贵阳医学院学报,2005,30(5):431-432.
[9]李俭庆,朱凤莲,付桂玲,等.病毒性脑炎患儿血清心肌酶谱变化及临床意义[J].实用儿科临床杂志,2000,15(5):279-281.
乳酸脱氢酶同工酶 篇4
东北林蛙隶属无尾目蛙科蛙属, 分布于我国东北三省和内蒙古东北部地区, 是一种集药用、食用、美容为一体的珍贵经济物种[5]。东北林蛙曾被认为是中国林蛙的东北种群, 近年来认为东北林蛙是一个独立的种[5,6]。目前, 有关东北林蛙的研究主要集中在人工养殖[5]、营养价值[7]、疾病[8]、遗传多样性[9]、皮肤活性肽[10]、蛙油药理[11]等方面, 关于LDH及代谢规律的研究甚少。因此, 对低温胁迫下东北林蛙不同组织器官LDH的分析, 为探讨其在冬眠状态下的代谢规律和LDH酶谱特点等方面提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验样品
8只体重均匀、健康的雄性个体, 于2011年10月份购自黑龙江省牡丹江市东安市场 (来源于黑龙江省铁力市) , 其中4只于18℃室温条件下饲养1周, 另外4只于4℃冰箱内低温处理1周, 最后毁髓解剖, 取出肝脏、肾脏、心脏和肌肉, 放入超低温冰箱内冷冻保存, 备用。
1.2 LDH同工酶的酶谱分析
取各组织器官称重, 加30倍的0.01 mol/L磷酸缓冲液 (p H值为6.5) , 匀浆后置于4℃冰箱内消化5 h。3 500 r/min离心5 min, 取上清液0.2 m L进行连续系统的垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳[12]。电泳后使用LDH特异染色液染色, 加脱色液终止酶反应, 照相[12]。采用Gel-Pro analyzer 4软件分析同工酶的相对含量。
1.3 LDH总酶活力测定
在比色皿中加入0.1 mol/L磷酸盐缓冲液 (p H值为7.5) 3 m L, 置于紫外分光光度计中, 340 nm处调0;取另一个比色皿依次加入丙酮酸溶液2.9 m L, NADH溶液0.1 m L, 加盖摇匀后测定OD340 nm值;加入酶液10μL, 立即计时, 每隔0.5 min记录1次OD340 nm值, 连续测定3 min。以OD340 nm值对时间作图, 取最初线性部分, 计算ΔOD340 nm/min×100值并作为LDH总酶活力。
2 结果与分析
通过电泳图谱共发现4种LDH同工酶, 由电泳条带位置和距离判断阳极至阴极依次为LDH1、LDH3、LDH4和LDH5, 肝脏、肾脏、心脏和肌肉均缺失LDH2 (见图1) 。肝脏和肌肉中LDH5同工酶相对含量高于LDH4, LDH1和LDH3缺失;肾脏中LDH5>LDH1>LDH4, LDH3缺失;心脏中LDH1>LDH3≈LDH4>LDH5。4℃组和18℃组特点相同, 其同工酶的分布和相对含量存在明显的组织特异性, 见图1、194页彩图2。
1~8.18℃组;9~16.4℃组。1, 5, 9, 13.肝脏;2, 6, 10, 14.肾脏;3, 7, 11, 15.心脏;4, 8, 12, 16.肌肉。
通过紫外光吸收法得到4种组织器官LDH总酶活力, 18℃组东北林蛙的肝脏、肾脏、心脏和肌肉总酶活力分别为8.2, 5.2, 16.3, 28.6, 4℃组分别为7.2, 3.3, 11.0, 24.3, 肌肉总酶活力最高, 心脏次之, 肝脏和肾脏较低, 见图3。与18℃组相比, 4℃低温状态下东北林蛙各组织器官处于较低的糖代谢水平, 肝脏、肾脏、心脏和肌肉LDH总酶活力分别降低了12.2%、36.5%、32.5%、15.0%。除肌肉LDH4外, 各同工酶相对含量均有不同程度降低, 见194页彩图2。
3 讨论
采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法对东北林蛙肝脏、肾脏、心脏和肌肉LDH同工酶进行分析, 结果表明, 4种组织器官的同工酶分布存在明显的组织特异性。检测出肝脏和肌肉均存在LDH4、LDH52条电泳条带, 肾脏为LDH1、LDH4、LDH5, 心脏为LDH1、LDH3、LDH4、LDH5。4种组织器官均缺失LDH2, 这与曾科文等[13]研究结果一致, 并认为东北林蛙、黑龙江林蛙和其他几种林蛙体内均可能缺失装配LDH2同工酶的机构。与参考文献[13]研究结果相比, 肌肉和肾脏中出现同工酶的种类相同, 但本研究中肝脏缺少LDH1和LDH3, 心脏大多出现LDH5。由图1可知, 在心脏LDH1、LDH3、LDH4条带下共出现5条较暗的亚带, 说明东北林蛙心脏中除了LDH-A和LDH-B基因, 还可能存在LDH-C基因参与LDH的表达, 这与刘学龙等[14]认为LDH-C基因在东北林蛙所有组织器官中表达不符, 而曾科文等[13]研究结果并未出现亚带情况。也有研究认为, 多亚带现象是LDH基因产物转录或翻译后进行修饰所致[15]。因此, 有必要增加取样范围和取样量, 对东北林蛙LDH同工酶酶谱特点进行深入研究。
LDH同工酶是由A (M) 和B (H) 亚基按不同比例聚合成的5种四聚体:LDH1 (B4) 、LDH2 (B3A1) 、LDH3 (B2A2) 、LDH4 (B1A3) 、LDH5 (A4) [16]。以A亚基为主的LDH同工酶主要催化丙酮酸生成乳酸, 进行糖酵解获得能量[17]。肝脏和肌肉中仅存在LDH4、LDH5, 并且LDH5含量远大于LDH4, 见图1、194页彩2。肌肉和肝脏中A亚基含量特别丰富, 说明东北林蛙肌肉和肝脏中厌氧代谢非常活跃, 与这2种器官氧张力较低有关[16,17]。以B亚基为主的LDH同工酶主要催化乳酸生成丙酮酸, 丙酮酸在线粒体中有氧分解释放能量。肾脏中LDH5>LDH1>LDH4, 心脏中LDH1>LDH3≈LDH4>LDH5, 见图1、194页彩图2。肾脏和心脏B亚基含量与肌肉和肝脏相比有所提高, 说明肾脏和心脏组织的有氧代谢显著, 与这2种器官氧张力较高相吻合[16,17]。上述各组织器官同工酶相对含量特点与李蔚等[17]研究结果一致。
乳酸脱氢酶同工酶 篇5
1 资料与方法
1.1 临床资料
选取2001年8月—2010年3月我院收治的65例急性白血病患者, 所有这些患者都是经过诊断后确诊为急性白血病的患者, 其中有29例男性患者, 36例女性患者, 患者年龄15～72岁, 平均年龄为40岁。有25例患者是急性淋巴细胞性白血病患者, 40例为急性非淋巴细胞性白血病患者。根据急性白血病的治疗过程可以分为化疗前组, 有65例患者;化疗后完全缓解组, 有40例患者, 化疗后复发组, 有30例;正常的对照组也是65例, 其中有31例男性, 34例女性, 年龄18～70岁, 平均年龄43岁, 对照组人员都经过门诊的体检后确定没有恶性肿瘤。
1.2 方法
所有患者和对照组成员都需要空腹时采集静脉血, 分离血清后用奥林巴斯自动生化分析仪测定。计量资料采用SPSS 11.5单因素方差分析, 组间两两比较后采用q检验, P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
急性白血病患者的化疗前组, 化疗后完全缓解组、化疗后复发组和对照组的血清乳酸脱氢酶的值进行比较后, 化疗之前以及复发者的血清乳酸脱氢酶的水平明显比化疗后完全缓解的患者高, 但是化疗后完全缓解的患者与对照组的乳酸脱氢酶的水平没有很明显的差异。
3 讨论
白血病是一种常见的恶性肿瘤, 我国已将其列入重点防治的十大恶性肿瘤之一。白血病占恶性肿瘤总发病数的5%左右, 发病以儿童和青年居多, 在我国各年龄组恶性肿瘤的死亡率中占第六位 (男性) 和第八位 (女性) , 在儿童及35岁以下的人群中则占第一位。观察白血病年龄与发病率曲线, 发现在5岁以下及15～20岁有两个小高峰, 在40岁以后随年龄增长发病率逐渐升高, 高峰年龄在60岁以后。但各型白血病发病年龄不尽相同。根据调查发现白血病的发病率大城市高于农村, 油田和污染地区的发病率明显增高, 男性略高于女性。就各型白血病来看急性多于慢性。
乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶, 它广泛存在于人体的各个组织当中, 血清乳酸脱氢酶的活性水平在某种程度上可以反映含有乳酸脱氢酶细胞的增值以及代谢等生物学的性状。如果体内出现了肿瘤或者是在细胞坏死的时候, 乳酸脱氢酶的含量就会升高, 测定它的值对临床很多肿瘤性疾病的诊断以及预后的判断都有很重要的意义。急性白血病患者体内的白血病细胞有肿瘤细胞的特性, 都有乳酸脱氢酶的表达。Ferrara F等曾经报道白血病患者的乳酸脱氢酶的水平比正常人要高, 乳酸脱氢酶活性的高低与骨髓内以及外周血白血病细胞的含量呈正相关。本组的资料研究显示, 急性白血病患者无论是初发或者是在缓解后复发的, 他们的乳酸脱氢酶的水平都会明显升高, 然而化疗后完全缓解的患者的乳酸脱氢酶的水平会明显下降, 与治疗之前有明显的差异, 与对照组比较则没有显著的差异, 这些都与文献所报道的结果相符。增高的乳酸脱氢酶的主要来源就是白血病细胞, 所以乳酸脱氢酶可以比较可靠地反映白血病细胞的数量, 与肿瘤的负荷有很大的关系, 我们可以看出动态检测血清乳酸脱氢酶的水平变化对观察急性白血病的疗效以及判断预后有很大的帮助, 而且乳酸脱氢酶检测更加快捷、方便, 患者的依从性也很好, 这是临床判断患者病情的一项很重要的参考指标。
摘要：目的:探讨急性白血病患者乳酸脱氢酶水平的变化规律。方法:检测对照组和急性白血病患者在化疗之前和化疗以后完全缓解以及复发者的血清乳酸脱氢酶的水平, 并且做比较。结果:化疗之前以及复发者的血清乳酸脱氢酶的水平明显比化疗后完全缓解的患者高, 但是化疗后完全缓解的患者与对照组的乳酸脱氢酶的水平没有很明显的差异。结论:动态检测血清乳酸脱氢酶水平的变化对了解急性白血病的疗效有很大的帮助。
关键词：急性白血病,血清乳酸脱氢酶水平,动态检测
参考文献
[1]张之南.血液病诊断及疗效标准[M].第2版.北京:科学出版社, 1998.
[2]巩国亭, 管洪在, 郭小芳, 等.急性淋巴细胞性白血病患者血清IL-12、IFN-γ及LDH测定的临床意义[J].山东医药, 2007, 47 (4) :5-6.
[3]DUMONTET C, BIENVENT J, BERARD EN, et al.Profilesand prognostic values of LDH isoenzymes in patients withnon-Hodgkin's lymphoma[J].Leukemia, 1999, 13 (5) :811-817.
乳酸脱氢酶同工酶 篇6
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择我院2012年4月—2013年6月收治的30例妊高症孕产妇为观察组, 将同期住院的孕周和年龄具有可比性的32例正常孕产妇为对照组。所有孕产妇均无糖尿病、肝肾疾病、免疫性疾病、高血压和精神类疾病, 无意识不清者。在观察组中, 将妊高症患者又分为重度患者 (重症组) 和轻度患者 (轻症组) , 其中重症组14例, 轻症组16例。两组孕产妇一般资料见表1。两组孕产妇在年龄、孕周等一般资料方面比较无明显差异, 具有可比性 (P>0.05) 。
1.2 方法
1.2.1 血清乳酸及LDH测定:
所有孕产妇在入院24 h后空腹静脉采血4 ml, 注入未加入抗凝剂的洁净试管中, 然后以3 000 r/min转速离心, 分离血清待测。使用全自动生化分析仪 (迈瑞BS400, LDH) 严格按照说明书操作步骤进行操作, 采用速率法测定。在试管中加入乳酸标准液、蒸馏水和底物 (甲基葡糖胺、乳酸锂) 充分混匀后, 于37℃水浴中保温约5 min。最后加入盐酸, 终止此反应。样品经处理后, 采用紫外分光光度计在530 nm和340 nm波长处, 用蒸馏水调零, 分别读取测定管、对照管和空白管数据。然后将由甲基葡糖胺和乳酸锂组成底物溶液溶于蒸馏水中, 用浓度为2 mol/L的盐酸溶液将p H调至9.4后将液体转移入100 ml的容量瓶中, 加水稀释至100 ml, 在2~8℃下可稳定保存1个月。
1.2.2 血尿酸 (UA) 的测定:
所有孕产妇在早晨空腹12 h后采集静脉血, 分离血清后待测。使用日本7020原装生化分析仪, 3 V公司生产的试剂盒, ROCHE公司提供的标准品及自控品。采用尿酸酶法进行UA检测。
1.2.3 尿微量蛋白 (m Alb) 的测定:
采集孕产妇晨起第2次尿液, 使用全自动特种蛋白分析仪 (BN—Pro Spec, 美国) , 采用免疫散射比浊法检测m Alb。
1.3 评价指标
比较两组孕产妇血乳酸、LDH、UA及m Alb含量, 并比较轻症组、重症组及对照组三组孕产妇检测的含量, 参照《妇产科学》诊断标准[3]判定结果。
1.4 统计学处理
采用SPSS 17.0统计软件处理数据, 计数资料以标准差±均值表示, 采用t检验, P<0.05为差异有统计学意义。多组均数之间比较采用方差分析, 采用Logistic回归进行相关性分析。
2 结果
2.1 观察组与对照组乳酸及LDH含量比较
观察组孕产妇乳酸及LDH含量较对照组明显偏高, 且在观察组中的重症组患者乳酸及LDH水平显著高于轻症组, 随着病情加重, 乳酸及LDH含量呈明显的上升趋势, 差异具有统计学意义 (P<0.05) , 见表2。
2.2 观察组与对照组UA、m AIb水平比较
观察组孕产妇UA、m AIb水平明显高于对照组, 差异具有统计学意义 (P<0.05) 。且随着病情加重, UA、m AIb水平呈升高趋势, 表明UA、尿m AIb水平与患病程度呈正相关, 见表3。
3 讨论
妊高症是孕孕妇特有的病症, 通常也可称为妊娠中毒症、先兆子痫等, 大部分发生在妊娠20周, 约占所有孕产妇的5%。部分孕产妇伴有水肿或蛋白尿现象, 称之为妊娠高血压综合症。病情严重的孕产妇会出现上腹痛、视力模糊和意识不清等症状。若治疗不及时, 则可能导致全身性痉挛, 严重者甚至昏迷[3]。本病可累及多个器官, 严重时可导致心、肝、肾及脑等主要器官缺氧、坏死, 甚至功能衰竭, 遗留慢性高血压、肾病等后遗症。临床上一般根据患者的血压、临床表现及血、尿及眼底检查即可确诊。通常妊高症可以分为三度[3]: (1) 轻度妊高症:血压轻度升高, 可能伴有轻度水肿和微量蛋白尿; (2) 中度妊高症:血压升高, 但<160/110 mm Hg (1 mm Hg=0.133 k Pa) , 尿蛋白增多, 伴有水肿、头晕等临床症状; (3) 重度妊高症:包括先兆子痫或子痫, 血压>160/110 mm Hg, 尿蛋白++以上, 出现不同程度的水肿, 患者出现头晕、眼花等症状, 严重者可出现抽搐、昏迷。
妊高症时, 由于患者血压升高, 全身小动脉痉挛收缩, 导致重要的脏器如心、脑及肝脏, 尤其是肾脏缺血、缺氧, 进而引起器官的功能受到损害, 使肾脏血管内皮细胞功能紊乱, 血流量和肾小球滤过率均明显降低, UA排出减少, 致使血清中的UA含量异常升高[4]。LDH是一种糖酵解酶, 存在于机体所有组织细胞的胞质内, 其中以肾脏细胞的含量较高。当体内细胞由于缺血、缺氧而受到损害时, 无氧糖酵解明显增多, 此时机体合成和分泌LDH均明显加快[5,6,7]。因此, 检测孕产妇血清乳酸、LDH对于诊断妊高症及判断预后具有十分重要的临床意义。有研究者[8,9]对妊高症患者的LDH水平进行检测发现, LDH能够监测妊高征的病情进展, 预测母婴预后。
本研究发现, 观察组孕产妇乳酸及LDH含量较对照组明显偏高, 且在观察组中的重症组患者乳酸及LDH水平显著高于轻症组, 且随着病情加重, 乳酸及LDH含量呈明显的上升趋势, 与上述研究者的结果一致。由于妊高症患者存在不同程度的肾脏功能损坏, 因此, 该类患者的UA、尿m Alb水平也能够反映患者肾脏功能的损坏程度。本研究结果还显示, 观察组孕产妇UA、尿m Alb水平明显高于对照组, 差异具有统计学意义 (P<0.05) 。且随着病情加重, UA、尿m Alb水平呈升高趋势, 表明UA、尿m Alb水平与患者患病程度呈正相关, 提示在妊高症患者体内的其他生化指标如UA、尿m Alb水平都显著偏高, 可以联合LDH水平共同作为临床诊断的依据。因此, 将乳酸及LDH含量检测纳入妊高症诊断中有望提高诊断正确率, 同时应该注意检测过程中含量测定的准确性和可信性。
总而言之, 妊娠期妇女要定期进行常规检查, 及时了解身体状况, 避免由于时间延误而带来的不良后果。同时, 一旦发现有临床症状后, 要积极采取治疗措施, 配合医生的指导, 主动地应对, 以确保母婴健康。同时, 可以进行孕期健康教育宣传和普及, 做好孕期保健, 疏通心理;注意营养搭配, 保证睡眠充足。这些都可以有效地防止和治疗妊娠高血压疾病。
关键词：妊高症,乳酸,乳酸脱氢酶,诊断
参考文献
[1]黄翠琼.妊娠高血压综合征的护理进展[J].全科护理, 2012, 10 (5) :463-465.
[2]蒋龙元, 周天恩, 张萌, 等.乳酸清除率和乳酸脱氢酶对急性肺损伤预后的评估[J].中华危重症医学杂志 (电子版) , 2010, 3 (2) :90-94.
[3]乐杰.妇产科学[M].7版.北京:人民卫生出版社, 2008:92.
[4]苏良香, 宋建华, 张建平, 等.妊高症孕妇乳酸及乳酸脱氢酶含量的变化[J].现代检验医学杂志, 2011, 26 (5) :142-144.
[5]赵彩妮, 李翠萍, 李平原.妊娠高血压孕妇血清尿酸水平的观察分析[J].青岛医药卫生, 2010, 42 (2) :94-95.
[6]陈英.妊高征患者血浆血管内皮活性因子及相关白细胞介素水平的变化[J].放射免疫学杂志, 2010 (7) :56-58.
[7]张春利, 李东红.妊娠高血压综合征发病机制研究进展[J].国外医学:妇幼保健分册, 2004, 5 (2) :89-91.
[8]朱姣.乳酸脱氢酶在妊高症者孕产预后中的作用[J].中国实用医药, 2012, 7 (23) :124-125.
乳酸脱氢酶同工酶 篇7
关键词：贫血,乳酸脱氢酶
贫血是指外周血中单位容积内的红细胞数、血红蛋白量或红细胞压积低于正常。婴儿和儿童的红细胞数和血红蛋白量随年龄不同而有差异,根据世界卫生组织的资料,血红蛋白的低限值在6个月~6岁者为110 g/L,6~14岁为120 g/L,海拔每升高1000米,血红蛋白上升4%;低于此值者为贫血。6个月以下的婴儿由于生理性贫血等因素,血红蛋白值变化较大,目前尚无统一标准。我国小儿血液学组(1989年)暂定:血红蛋白在新生儿期<145 g/L,1~4个月时<90 g/L,4~6个月时<100 g/L者为贫血。根据造成贫血的原因将其分为红细胞或血红蛋白生成不足、溶血性和失血性三类。因红细胞的主要功能是携带氧气,故贫血严重时可导致心脏扩大,心衰等。血液检查是贫血的诊断和鉴别诊断不可缺少的措施,临床上应由简而繁进行。一般根据病史、体征和初步的实验室检查资料,通过综合分析,对大多数贫血可做出初步诊断或确定诊断;对一些病情复杂暂时不能明确诊断者,亦可根据初步线索进一步选择必要的检查。诊断常依赖的各种实验室检查包括外周血象、骨髓检查、血红蛋白分析检查、红细胞脆性试验、特殊检查等。而笔者在临床中发现在各种贫血患儿中,乳酸脱氢酶存在显著的变化,本研究对常见的几种有贫血表现的血液系统疾病的患儿血清中LDH水平进行检测,发现LDH在贫血的辅助诊断中有较高的价值,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
收集2010-2012年共96例在笔者所在科住院的各类贫血患儿,均经临床及骨髓细胞形态学确诊,其中AL组20例(在此指初诊病例,不包括化疗后病例),年龄1~12岁,平均年龄5.9岁,MA组16例(年龄8个月~12岁,平均年龄5.1岁),HA组17例(年龄4个月~13岁,平均年龄4.4岁),IDA组23例(年龄5个月~14岁,平均年龄2.3岁),AA组20例(年龄4个月~13岁,平均年龄7.6岁),健康对照组80例(年龄4个月~14岁,平均年龄5.2岁)。
1.2 方法
清晨空腹抽取受检患儿不抗凝静脉血2 ml采用国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐的酶法测定患儿及正常对照组儿童血清LDH水平。正常对照值为120~240 U/L,各组以超过240 U/L为阳性。
1.3 统计学处理
应用SPSS 17.0软件分析,计量资料以表示,采用t检验,计数资料采取字2检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组患儿LDH水平比较见表1。
2.2 统计学结果分析
贫血患者LDH活性升高在AL、HA、MA组中阳性率显著高于IDA、AA组及正常对照组。在AL中表现尤其突出,20例AL患者(初诊病例)中100%患者LDH均显著高于正常值,最高的甚至可达6840 U/L;在16例MA中,有13例LDH升高,最高可达3935 U/L;23例HA中,有16例LDH升高,最高达1347 U/L,这三组与健康对照组比较差异有统计学意义。而IDA组次之,AA组最低,IDA组、AA组与健康对照组比较,LDH水平比较差异无统计学意义。
3 讨论
贫血是小儿血液系统疾病中常见的一组症候群,病因及发病机制多样,必须查明病因,才能做出正确的诊断及治疗。乳酸脱氢酶LDH是临床酶学检测常用指标,属氢转移酶,能催化乳酸氧化成丙酮酸,是糖酵解及糖异生途径中的一种重要的酶,它广泛存在于人体组织内,以肝、心肌、肾脏、肌肉、红细胞中含量较多,在肿瘤组织及白血病细胞中也能检测到[1],其血清学水平升高与细胞增殖而破坏后释放增多有关,正常人体内血清含少量LDH,当组织破坏时可将该酶释放入血,使其血液中活性增高[2]。故血清LDH活性水平很大程度可以反映富含LDH细胞的增殖、代谢等生物学性状[3]。HA、MA患者因骨髓中红系增生旺盛,并同时伴有骨髓幼红细胞原位溶血和红细胞寿命缩短,使得红细胞中LDH大量释放入血所致。MA由于缺乏维生素B12及叶酸,导致红细胞DNA合成障碍,DNA复制减慢,其核内DNA虽多于正常细胞,但不能达到倍增程度,使细胞不能迟迟分裂[4],由于幼红细胞发育和成熟障碍使之寿命缩短,破坏增加,又继发网状内皮系统亢进,各阶段细胞被吞噬消化造成骨髓及骨髓外溶血,因此致使血清乳酸脱氢酶浓度升高。急性白血病(AL)是临床较常见的恶性肿瘤,不仅表现外周血和骨髓的异常,而且存在酶学的异常表达[5],LDH是反映AL肿瘤细胞增殖活性及细胞负荷的指标[6]。AL时肿瘤细胞中基因控制失调致LDH合成增加,并通过细胞损伤及能量代谢等机制致肿瘤细胞中LDH释放增加,导致血清中LDH相应增多[7]。本组资料统计显示:白血病(初诊病例)、溶血性贫血及巨幼细胞贫血的LDH水平均明显增高,与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),而缺铁性贫血、再生障碍性贫血的LDH水平增高不明显,与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。因此,在临床上,LDH可为AL、HA、MA、IDA、AA等贫血的诊断与鉴别提供帮助。
参考文献
[1]周守琴,刘敏.急性白血病患者血清乳酸脱氢酶与α-羟丁酸脱氢酶变化的临床意义[J].疑难病杂志,2007,6(7):406-407.
[2]李小胡,蔡萍金.三种血液病乳酸脱氢酶的变化[J].中国病理生理杂志,1999,15(4):11-12.
[3]巩国亭,管洪在.急性淋巴细胞白血病患者血清IL-12、IFN-γ及LDH测定的临床意义[J].山东医药,2007,47(4):5-6.
[4]王来远.营养性巨幼细胞贫血骨髓红系超微结构[J].中华内科杂志,1983,22(2):74-76.
[5]张熔,季丽娟,李戈.儿童急性白血病血清乳酸脱氢酶测定的临床意义[J].实用医院临床杂志,2007,4(6):52-53.
[6]汪宝贞,余永卫,周少雄,等.急性白血病患者血脂及乳酸脱氢酶变化的临床研究[J].白血病淋巴瘤,2005,14(4):228-229.