吸入麻醉临床操作规范

吸入麻醉临床操作规范（通用5篇）

吸入麻醉临床操作规范 篇1

麻醉科常用麻醉技术操作规范

一、临床麻醉工作程序

科学化、制度化、规范化的工作程序是提高麻醉医疗质量，确保病人安全的重要保证。麻醉医生必须一丝不苟、精益求精地执行工作程序，与手术医师既有明确的职责分工，又有密切的互相配合，遇有病情变化或意外情况时要全力以赴，共同协作，使手术病人顺利度过手术关。

1、麻醉科接到手术通知单后，由麻醉医师根据手术种类、病人情况和麻醉医师技术水平、业务素质妥善安排手术病人的麻醉；必要时向科主任报告麻醉安排情况。

2、麻醉前准备是直接关系到病人手术麻醉的安全，其准备工作包括麻醉前访视、麻醉前谈话和签字及麻醉前病人的准备

①麻醉前访视：掌握病情和体检，审查化验等检查结果，进行 ASA 分级，对病情进行评 估，预测麻醉和手术的危险程度。麻醉医师手术前一日访视病人，阅读病历，检查病人，拟 定麻醉前用药，麻醉选择。手术前讨论决定麻醉方案，麻醉方案包括麻醉方法，用药途径、监测项目、管理措施以及对麻醉中可能发生的问题及其处理作出估计。

②麻醉前谈话和签字: 为完善管理措施，必须实行麻醉前谈话，将麻醉全过程及其可能发 生的意外和并发症向病人或家属交代清楚，并办理麻醉协议书签字手续，谈话由责任麻醉医 师施行，也一并签字，作为病案必备项目。

③麻醉前病人的准备：术前禁食 6 小时，婴幼儿禁食 4 小时，入手术室前先行排尿，并给术前用药，胃肠道手术放置胃管等。麻醉前用药：苯巴比妥钠 2mg/kg、东莨菪硷 0.006mg/kg 或阿托品 0.01mg/kg，剧痛病人术 前可给哌替啶 1mg/kg,心血管手术病人术前给吗啡 0.2mg/kg，均在术前 30min 肌注。

麻醉前用药应根据病人具体情况作适当增减：①病情差、年老、体弱、休克、甲状腺功能低下、恶 液质者应减量；②年轻、体壮、激动、甲亢病人，应酌情增加剂量；③呼吸功能欠佳，颅内 压增高等禁用麻醉性镇痛药：④小儿全麻前，抗胆碱药剂量应稍大；⑤心动过速、甲亢、高 热、暑天，不用阿托品，以用东莨菪碱为宜。

麻醉用具和药品的准备：麻醉机、插管用具、吸引器、麻醉药和抢救用药等。

3、麻醉医师于麻醉开始前再一次检查麻醉器械、药品，充分估计术中可能发生的麻醉意外，并做好预防和抢救准备工作，严格按麻醉原则选择麻醉方法，并按计划方案施行麻醉，严格 无菌操作，避免损伤。麻醉期间坚守岗位，严密观察病情变化，监测各项生理指标，详细填 写麻醉记录，负责输血、补液和有关药物应用。遇有意外情况及时处理，并请示上级医师。术毕病人完全苏醒和生命体征稳定后护送病人回病房或麻醉恢复室，护送途中要确保生命体 征平稳，与值班医师或病房护士做好交接班，并予以记录。①大手术、危重疑难病人或特殊麻醉应配备主、副两位医师，并携带必要的抢救设备和药品。②主麻醉医师职责： 负责麻醉实施，应直接对病人负责。对病情全面了解并制订麻醉方案，选择何种麻醉方法、药品、器械，在麻醉过程中全面了解手术进程并积极配合。密切观察病 人术中变化并对可能发生的情况在应急措施上和预防上提出主导意见，与副麻醉医师互相协 作进行处理。全麻醉过程中不得换班，做到自始至终。

③副麻醉医师职责：当好主麻醉医师助手。在主麻醉医师指导下做好配合工作，按照主麻 醉医师意见主动协助麻醉的实施。担任一部分病情观察与监测工作，必要时与巡回护士配合 进行治疗急救工作。负责麻醉记录。协助进行麻醉前准备和麻醉用具消毒清理工作。

4、术后随访病人 72 小时，检查有无并发症、后遗症，如有应作相应处理，以免造成不良后 果，其随访情况记录在麻醉记录单上。

5、麻醉小结应在术后 24 小时内完成。其规范要求应包括：(1)麻醉前用药效果；(2)麻醉诱 导及麻醉操作过程情况；(3)麻醉维持和手术经过，如止痛效果、肌松情况、麻醉深浅表现，呼吸循环反应和失血输血等；(4)麻醉结束时情况，如苏醒程度、呼吸道通畅否、循环功能、神经反射、神经阻滞平面和足趾活动等；(5)麻醉和手术时出何种意外，包括原因、处理措 施和效果，有何经验教训；(6)术后随访结果的记录。

二、麻醉方法与选择

原则上应根据医师的技术水平（包括麻醉医师和外科医师）、病人的病理及生理状态和医院 的手术条件来选择，务必注意安全、舒适、平衡地选择药物和方案，但也应注意麻醉质量和学科发展趋势。

（一）全麻分类和全麻药物

1、全身麻醉按麻醉药作用方式，可分为吸入麻醉、静脉麻醉、肌肉注射全麻等。临床上全 身麻醉多是几种药物的复合应用，取长补短、协同作用，以减少药物用量，减轻副反应，使 麻醉更加安全、平稳。按复合方式的不同分为：静脉复合麻醉、静吸复合麻醉。近年又发展 了不同麻醉方法的复合，如复合后以全麻为主，也可归于全身麻醉的范畴，如全麻复合硬膜 外阻滞。

2、全身麻醉的实施原则 [1] 除门诊短小手术等实施单纯静脉麻醉外，全身麻醉均需在气管插管，辅助或控制呼吸 下实施。[2] 复合麻醉时，要注意药物的协同作用，根据药物间相互作用的特点，病情和手术要求，合理选择麻醉药物。[3] 准确判断麻醉深度 根据所用药物性质、作用时间、剂量，综合循环系统（血压、脉 搏）的变化和病人对手术的反应综合判定麻醉深度。[4] 在满足全麻的基本要求前提下，优化复合用药，原则上应尽量减少用药种类。[5] 保持气道通畅和氧供，维持正常的氧合和通气。[6] 必须具备性能良好的麻醉机(按照检查程序认真进行性能检查)，全套插管用具和吸痰 吸引设备。有条件医院应配置有可靠的呼吸机和呼吸参数监测的麻醉机。还应配置可靠的吸 入麻醉药挥发罐和供氧报警装置。[7] 全麻监测 a、基本监测项目：无创血压、心率、心电图、脉搏氧饱和度等。b、特殊 病人，应具备直接动脉压、中心静脉压、血糖和血气分析血生化。c、全麻监测还应包括： 尿量、呼吸、体温、呼吸末 CO2 监测。[8] 特殊病人的全麻用药选择：a、肝肾功能受损病人的麻醉 宜选择依赖肝肾代谢少，不 影响肝肾功能的短效麻醉药如异丙酚、咪唑安定、阿曲库铵、维库溴铵、异氟醚、地氟醚等。b、颅脑外科手术麻醉 选择对颅内压影响小的静脉麻醉药如硫喷妥钠、异丙酚等，吸入麻 醉药宜选择异氟醚。后颅凹、脑干手术，宜用异丙酚维持麻醉并保留呼吸。

3、基础麻醉：利用某些药物使病人进入一类似睡眠（但非麻醉）的状态，称为基础麻醉。主要用于不合作小儿，为全麻、局麻或神经阻滞麻醉建立良好的基础。一般常用氯|胺酮、安定、羟丁酸钠，近年来也将咪唑安定、异丙酚用于基础麻醉。注意：术前已有呼吸道部分 梗阻或抑制，饱胃、肠梗阻患儿，基础麻醉可不用，一般情况差者减量。②基础麻醉：主 要用于不合作的小儿，常用氯胺酮 4～6mg／kg 肌注，如果在基础麻醉加局麻下完成短小手 术，可与小剂量镇静剂如异丙嗪 1mg／kg 或氟哌啶 0.05～0.1mg／kg 复合肌注，也可复合 安定 0.2mg／kg 肌注。如已开放静脉者，应以静脉用药为首选。

常用药：1.氯胺酮 4～6mg/kg 肌注，2～8min 入睡，维持 20～30min，主要用于不合作小儿，进入手术室，为开放静脉和其它麻醉建立基础。可与小剂量镇静剂如异丙嗪 1mg/kg 或氟哌 利多 0.05～0.1mg/kg 复合肌注。2.如果静脉开放后，为辅助局麻和阻滞麻醉，可用羟丁酸钠 50mg/kg，或氯胺酮 1～2mg/kg 静注，或异丙酚 2～4mg/kg/h 持续静注，但要注意给氧，监 测呼吸和 SpO2 的变化。

4、静脉麻醉：本文特指不作气管插管而进行的静脉麻醉或静脉复合麻醉。对于一些非俯卧 位小浅表手术、灼伤换药、诊断性检查等可在不进行气管插管的静脉麻醉下进行。

常用的静脉麻醉有： ①氯胺酮静脉麻醉：氯胺酮 2mg/kg 静注，维持 10～15min，也可配制成 0.1%溶液静滴维 持。必要时辅用安定、羟丁酸钠等，可减少氯胺酮用量。②羟丁酸钠静脉麻醉：羟丁酸钠 50～80mg/kg 静注，复合氯胺酮 1～2mg/kg 间断静注。需注意对呼吸的抑制作用，应常规给氧。③异丙酚静脉麻醉：氯胺酮 1～2mg/kg 静注后，以 0.1%异丙酚+0.05～0.1%氯胺酮溶液持 续静滴,可减少氯胺酮的副作用。需常规给氧，监测 SpO2。注意：实施静脉麻醉期间，必备氧气、吸引器、麻醉机和气管插管抢救设备。

5、气管内全麻（吸入麻醉）：是全身麻醉的主要方法之一，便于控制呼吸道，利于呼吸管理 及肌松药应用，尤其对胸心手术、头颈、口腔手术、腹部大手术、危重病儿手术，侧卧位、俯卧位、坐位手术等。[1].常用药物：①吸入全麻药：常用的吸入麻醉药有笑气（N2O）、安氟醚、异氟醚、七氟 醚、地氟醚。安氟醚应用最广，异氟醚不引起痉挛性脑电图变化，也不增加颅内压，是颅脑 手术较好的麻醉药之一。七氟醚、地氟醚价格较高，特别像地氟醚挥发罐价格昂贵，尚未广 泛应用。N2O 由于气源问题，也未能普及。②静脉全麻药：氯胺酮 2mg/kg、羟丁酸钠 50～80mg/kg、咪唑安定 0.1～0.2mg/kg、异丙 酚 1.5～2mg/kg,单独应用剂量宜偏大,两药合用时应减量。③肌松药：琥珀胆碱 0.6～ 1mg/kg(气管插管)，维库溴铵或潘库溴铵 0.08～0.1mg/kg,作用维持 40min 左右,追加量为初 量的 1/3～1/2。[2].麻醉诱导：诱导方法的选择取决于病情和预期的气道管理问题(如误吸危险、插管困难 或气道不畅)。对气道处理困难者常在表麻下插管最安全，以能尽早控制气道，一般常采用 静脉全麻药一麻醉镇痛药一肌松药复合诱导。A 静脉全麻药：硫喷妥钠 3～5mg／kg，异丙 酚 1.0～2mg／kg，氯胺酮 2mg／kg、咪唑安定 0.1～0.2mg／kg,依托咪酯 0.2～0.3mg／kg, 羟丁酸钠 50～80mg／kg 等。单独应用时剂量稍偏大，两药合用时，均应减量。B 肌松剂： 维库溴铵 0.1mg／kg，阿曲库铵 0.5mg／kg，哌库溴胺 0.1mg／kg，潘库溴铵 0.1mg／kg，琥珀胆碱 1.5～2mg／kg。C 麻醉性镇痛药： 芬太尼 2～4ug／kg，(心血管手术麻醉时 8～10ug ／kg)①氯胺酮 2mg/kg+羟丁酸钠 50～100mg/kg。②咪唑安定 0.2mg/kg 或异丙酚 2mg/kg+芬太 尼 2～4μ g/kg+肌松药。③安定+氯胺酮+肌松药 注意：2 岁以下小儿慎用芬太尼。[3].麻醉维持：当病人处于足够的麻醉深度时就进入维持期，重点是维持病人内环境稳定 和调控麻醉深度。采取三类药物复合应用，如：①异丙酚 2～6mg／(kg*h)，芬太尼 2ug／（kg*h），维库溴铵(潘库溴铵或哌库溴铵)0.05～0.1mg／（kg*h）；②咪唑安定 0.1～0.2mg ／（kg*h）。③方案中芬太尼和肌松剂用量同方案①； ③氟哌啶 0.05～0.1mg／（kg*h）;[4].麻醉机和气管插管： ①全麻器械： 麻醉环路： a、体重＜10kg 儿童，选用半紧闭麻醉机或 T 型管系统（见附注）； 体重＞10kg 儿童可应用循环紧闭麻醉机，但须改用小儿贮气囊和小儿呼吸回路。b、贮气囊容量：1 岁以内用 500ml，1 岁以上用 1000ml 贮气囊。c、面罩：选择有最小无效腔的面罩，最好用透明的塑料或硅胶面罩。d、口腔通气道 e、喉镜：一般选用小号镜片，新生儿可选 用直镜片。f、气管导管选择。（附注：T 型管系统（Ayre’s 低体重幼儿装置）：优点是结构简单，呼吸阻力小，无效腔 小。缺点是气道干燥，不易加深麻醉。只适用于新生儿、婴儿中。5 岁以下无合适小儿麻醉 机的情况。新鲜气流量=2～2.5×分钟通气量时可基本消除重复吸入,改良 Ayre’s 法可用于 婴儿开胸手术。）

②气管插管注意事项：a、选择合适的气管导管 b、婴幼儿呼吸道最狭窄处在环状软骨水平，喉腔呈现漏斗型，插管如遇阻力，应选择小一号导管。c、插管后检查两肺呼吸音是否 均等，当给予 15～20cmH2O 正压通气时，无套囊导管周围允许有轻度气体漏出。d、导管 应牢固固定，体位变动后，应再作两肺听诊，以防导管滑出、扭曲或误入一侧支气管。

③呼吸管理（控制呼吸及机械通气）a、： 呼吸频率： 婴儿及新生儿 36 次/分； 1～5 岁： 25～ 30 次/分；6～9 岁：20～25 次/分；10～12 岁：18～20 次/分。b、潮气量：新生儿 6ml/kg，婴儿 8～10ml/kg，小儿 10ml/kg。c、吸/呼比：1∶1.5 或 1∶2。d、吸气压：7～15cmH2O。e、长时间机械通气需监测动 脉血气，根据结果调整呼吸参数。④麻醉苏醒期处理： a、拔管指征：肌力基本恢复：自主呼吸正常，呼吸交换量满意，潮 气量＞8ml/kg，吸入空气时 SaO2＞90%，PaO2＞80mmHg，PaCO2＜45mmHg。

下列情况必须完全清醒后拔管；①插管困难病儿；②急症手术病例避免呕吐返流；③新生儿。b、拔管时须充分清理口咽分泌物。拔管后体位取侧俯卧位或肩下垫薄枕、头偏向一侧，以防误吸。舌后坠者，置口咽通气道，保持呼吸道通畅。

6、静吸复合麻醉 ①麻醉诱导同静脉复合麻醉。②麻醉维持： i、静脉-吸入复合麻醉：以静脉复合麻醉为主，补充吸入 N2O、安氟醚、异氟醚、七氟醚或地氟醚维持麻醉，是目前国内常用的方法之一。ii、吸入麻醉：静脉诱 导后以 N20(60～70%)-O2(30～40%)和一种挥发性吸入麻醉药如异氟醚或安氟醚维持麻醉，并在此基础以上给予肌松药。iii、吸入-静脉复合麻醉;在吸入麻醉的基础上辅以静脉麻醉药 或麻醉镇痛药，此法以吸入麻醉为主。

7、全身麻醉复合硬膜外麻醉： 胸内手术，如食道、肺、纵膈;胸壁手术;上腹部如贲门、胃、复杂胆道、肝脏、胰腺，十二指肠、脾脏等手术应用全身麻醉复合硬膜外麻醉。全身麻醉有 利于维护呼吸道通畅，保证氧供及控制呼吸，硬膜外麻醉保证确切的镇痛及肌松，还能行术 后镇痛（PCEA），两种方法的联合应用可以优势互补，近几年来，临床已广泛应用。

（1）操作常规 ①根据手术切口中点选择硬膜外阻滞穿刺点。②局部麻醉药一般可选 1%利多卡因和/或 0.25%布比卡因混合液，内加 1∶20 万肾上腺素。试验量 3ml，诱导剂量共为 5～8ml，确定阻滞平面后即可行全麻诱导插管，术中可根据麻 醉深浅追加局麻药。（Guedel 在仔细观察了乙醚诱导的病人反应后拟定麻醉的 “分期” “分 或 级”，现代麻醉药的诱导非常迅速，以至于所描述的各个阶级(期)通常不可截然分开的。但 是对于这些期的划分可以提供一些有用的术语来描述从清醒到麻醉的整个过程，并为临床麻 醉提供安全和警觉的信号。）③静脉全麻诱导，依次给予镇静剂、镇痛剂、肌松剂完成气管插管，接麻醉机控制呼吸，机械通气或手控。术中可间断追加镇静、镇痛、肌松剂或连续给药维持麻醉。④术后镇痛。手术结束在硬膜外导管拔除之前注入吗啡 2mg(稀释 2～4ml)或保留硬膜外导 管接镇痛泵。

(2)注意事项 ①麻醉前准备与麻醉前用药参照全身麻醉。有硬膜外麻醉禁忌症者不适合选用。②全麻诱导时剂量酌减，否则易导致严重的低血压，甚至休克。

（二）部位麻醉： 在合理应用基础麻醉或辅助药的情况下，小儿也可以部位麻醉下进行手术。但麻醉管理不能忽视，应备麻醉机及急救用品。

1.蛛网膜下腔阻滞：局麻药液注入蛛网膜下腔，产生相应脊神经根阻滞，其支配区域感觉运 动功能暂时消失，又称脊椎麻醉，简称腰麻。

[1]、适应证与禁忌证 ①适应证：下腹部、盆腔、肛门会阴部及下肢手术。②禁忌证：休 克、血容量不足、严重水电解质酸碱平衡失调、恶液质、严重高血压、高颅压、脑膜炎、脊 柱畸型、穿刺部位感染、凝血机制障碍和不合作者应视为绝对禁忌症。老年及高龄、高血压、心脏病应视为相对禁忌症。

[2]、麻醉前准备 ①术前禁食、禁水 6 小时。②人室前肌注苯巴比妥钠 0.1 克或安定 10 毫克。③准备好急救器具及药品。

[3]、操作方法 ①体位：取侧卧位，头前屈垫枕、背部贴近手术台边缘并与手术台平面垂直，双手抱膝，膝部贴腹和胸壁。若患肢不能屈曲，可取被动体位，健肢屈曲。肛门会阴部手术亦可取坐位，如“鞍麻”。②穿刺点：一般选择腰 3～4 或腰 2～3，最高不得超过腰 2～3，以免损伤脊髓。两侧髂嵴 最高点的连线与脊柱相交处相当于腰 3～4 棘突间隙或腰 4 棘突。③穿刺方法：先行皮肤消毒，范围上至肩胛下角，下至尾椎，两侧至腋后线，然后检查腰 穿针与针芯是否匹配。在所选择的穿刺点棘突间隙中点做局麻，左手拇指或拇、食指固定皮 肤，右手持腰穿针垂直皮肤进针，依次经皮肤、皮下组织、棘上和棘间韧带。待穿刺针固定，改双手进针，第一次阻力消失表示针入硬脊膜外腔，第二次阻力消失表示针入蛛网膜下腔，抽去针芯见清澈脑脊液流出，此为直入穿刺法。也可使用侧入穿刺法，在棘突间隙中点旁开 1.5cm 处穿刺，穿刺针向中线倾斜，与皮肤成 75 度角对准棘突间孔方向进针，经黄韧带、硬脊膜及蛛网膜进入蛛网膜下腔。此法适用于韧带钙化的老年人，棘突间隙不清的肥胖者或 直入法穿刺失败的病人。然后将配制好的局麻药液缓慢注入，一般 10～30 秒注完后退针，用创可贴或敷料复盖穿刺点，患者缓慢的改平卧位。④调节平面:影响麻醉平面的因素很多,如体位、用药剂量、浓度、容积、比重、注药速度、局麻药性能、穿刺针粗细、斜面方向、脊柱弯曲以及病人的病理生理如腹内压增高等。其方 法是根据体位调节，针刺皮肤试痛后和观察运动神经麻痹情况来进行。用重比重溶液时，病 人头端越低，麻醉平面越高。一般头低位不超过 15 度，麻醉平面上升至所需高度时，即将 头端放平，注药后 15 分钟阻滞平面固定。⑤常用局部麻醉药浓度及剂量 A、普鲁卡因重比重液 普鲁卡因粉剂 150mg，用脑脊液稀释后加入 0.1％肾上腺素 0.2ml 共计 3ml(脑脊液比重为 1.006)B、地卡因重比重液 1％地卡因、10％葡萄糖液和 3％麻黄碱各 1ml，配制成 1∶1∶1 溶 液 C、布比卡因重比重液 0.5％或 0.75％布比卡因 2ml(分别为 10mg 或 15mg)加入 10％葡萄 糖液 0.8ml、0.1％肾上腺素 0.2ml 共计 3m1。

[4]、意外与并发症的预防及处理 ①低血压： 主要由于相应区域交感神经阻滞、麻醉平面过高和病人心血管代偿功能较差所致。处理方法：加快输液速度，吸氧，麻黄素 10mg iv，合并心率减慢阿托品 0.3mg、0.5mg iv。②呼吸抑制：麻醉平面超过 T4 甚至更高，导致肋间肌麻痹，胸式呼吸受限。平面超过 C4 则可致膈肌麻痹，腹式呼吸限制。处理：面罩供氧，辅助呼吸，全脊麻应立即气管插管人工 呼吸，同时支持循环。③恶心呕吐：因循环、呼吸抑制引起脑缺血缺氧或手术牵拉内脏迷走神经功能亢进所致。处理：吸氧、纠正低血压。内脏牵拉反应应予哌替啶 25mg、50mg iv；或胃复安 10mg／氟 哌利多 2.5mg IV，④头痛：分低颅压性、高颅压性头痛。前者因脑脊液外漏所致，后者系化学药物刺激或感 染所致。处理：低颅压性头痛，绝对卧床，静脉补液，早期进食和饮水。必要时给予镇静、镇痛药辅以针炙、中药治疗等。高颅压性头痛给予对症处理，合并白细胞增高、体温增高，颈项强直等脑膜刺激症状者应加大抗生素剂量。⑤尿贮留：由于支配膀胱的神经恢复较晚或术后疼痛所致。处理：给予针炙、引导排尿，必要时导尿。

[5]、监测：麻醉期间应加强对患者意识、循环及呼吸的观察，监测无创血压、心率、心电 图、脉搏氧饱和度等。手术结束后，麻醉平面退至 T6 以下才能送回病房。

2.骶管麻醉(骶管腔阻滞)：将局麻药液注入骶管腔内以阻滞骶神经，其支配区域感觉与运动 功能暂时消失，称骶管阻滞。由于骶管腔容量大，容易发生毒性反应及阻滞不全，在成年人 多由低位硬膜外阻滞取代，在小儿腹部、肛门、会阴、下肢手术仍有应用价值。

[1] 适应证与禁忌证：肛门和会阴部手术、膀胱镜检查、宫腔镜手术等为适应症。骶裂孔畸 形、、血液凝固异常、脊膜膨出、血容量显著减少和穿刺部位感染等应视为禁忌。[2] 麻醉前准备：同硬膜外麻醉。

[3] 操作 ①体位：患者侧卧位或俯卧位。②定位：在尾椎骨上方 3～4cm 处，两骶骨角之间有一三角形凹陷，即为骶裂孔。骶裂孔 中心与两髂后上棘相互连线，呈等边三角形，可作为定位的参考。③穿刺方法：在骶裂孔中央局部浸润麻醉。用 16G 或 18G 粗短针穿过皮肤、皮下组织，穿刺针与皮肤呈 45 度方向进针，穿破骶尾韧带有类似黄韧带落空感。注入盐水无阻力，快 速注气无皮下气肿，进针深度成年人 3～4cm，小儿约 1.5～2cm，回吸无血液及脑脊液即可 注入试验量 4～5ml。5 分钟后观察无脊麻症状，再将余量一次注人。亦可置管，连续用药。④常用药物及浓度： 1.6％利多卡因加 0.2％地卡因混合液(内加 1︰20 万肾上腺素)总量 3ml 或 0.5％布比卡因溶液。

[4] 注意事项 ①穿刺针不得超过骶 2 水平(平髂后上棘连线)，以免刺破脊膜，导致大量局麻药液进入蛛 网膜下腔，出现平面意外升高。②单次给药时要注意局麻药中毒反应。③骶管腔血管丰富，如回抽有血应放弃，改腰段硬膜外阻滞。

3.硬膜外麻醉： 适应证：上腹部至下肢手术；一般情况良好，可不受年龄限制。穿刺部位：儿童较成年人低 1～2 个间隙，进针深度 1～2.5cm。用药配方：利多卡因 8mg/kg，浓度：＞10 岁-1.2～1.5%;5～10 岁-0.8～1%;3～5 岁-0.75%;＜3 岁-0.5%布比卡因 1～2mg/kg,浓度:＞10 岁-0.25%;5～10 岁-0.2～0.25%;3～5 岁-0.2%。4.腰麻联合硬膜外麻醉

[1] 适应证：下腹部、盆腔，肛门会阴部及下肢手术。腰麻可保证良好的镇痛、肌松作用，且起效快。连续硬膜外麻醉可提供长时间手术麻醉，且便于术后镇痛。可以在一穿刺点完成 两种方法麻醉。

[2] 操作 ①麻醉前准备及体位同硬膜外麻醉。②穿刺点一般选 L2～3 或 L3～4 间隙。③穿刺选正中入路，先完成硬膜外腔穿刺(市售腰麻联合硬膜外麻醉包一般配有特制的带 有腰麻穿刺针的硬膜外穿刺针具)。取下硬膜外针芯，插入腰麻穿刺针继续进针，当蛛网膜 穿过时有明显落空感，针内有清澈脑脊液流出。将配好的腰麻药液缓慢注人，取下腰麻针，向头端置入硬膜外导管，留置 3～4cm。退针，固定导管，缓慢改平卧位，调节腰麻平面达 预定区域。④选用腰麻药物不同，维持麻醉时间不等。当需要延长麻醉时间或因向上平面不足时，可 经硬膜外导管给药，首次 5～10ml 即可，以后可分次追加 4～6ml。术毕拔导管前，可注入 吗啡等药术后镇痛。

[3] 主要意外与并发症同硬膜外麻醉与腰麻 5.臂丛麻醉(臂丛神经阻滞麻醉)⑴适应证与禁忌证：上肢、肩关节手术可应用腋路及肌间沟阻滞法。对精神高度紧张，不 合作者不宜选用，小儿可在基础麻醉下进行，年龄过大者，因颈部组织过分疏松，应慎用臂 丛神经阻滞肌间沟法。

⑵操作常规：①麻醉前用药：苯巴比妥钠 0.1g 或安定 10mg 肌注。②备齐麻醉机、氧气、气管插管用具及急救药品。③测定基础 BP、HR、SpO2，开放静脉通道。④肌间沟法：肩 部和上臂手术的首选麻醉方法。患者去枕平卧，头偏向对侧，患侧肩下垫薄枕，上肢紧贴身 旁。在锁骨上方胸锁乳突肌后缘触及前、中斜角肌与肩胛舌骨肌共同形成的一个三角形间隙，三角形底边处可触及锁骨下动脉搏动，穿刺点即相当于环状软骨边缘第六颈椎水平。常规消 毒皮肤、铺无菌巾。左手食指固定皮肤，右手持 7G 注射针头，垂直皮肤刺入此沟，略向下 向后方(约 C5 横突)推进，穿过浅筋膜后有脱空感。若同时患者有异感则为较可靠的标志，若无异感，亦可缓慢进针，直达 C6 横突，稍稍退针，接局麻药液注射器，回抽无血液，无 脑脊液，无大量气体，即可注人局麻药 15～25ml（成年人）。不宜同时进行两侧阻滞。⑤腋 路法：适用于上臂下 1／3 以下部位手术或骨折手术复位，以手、腕和前臂尺侧部手术为首 选。患者平卧去枕，患肢外展 90 度，屈肢 90 度，手背贴床且靠近头部行军礼状，完全显露 腋窝，在腋窝处摸到腋动脉搏动，取动脉搏动最高点为穿刺点。常规消毒，铺无菌巾：左手 固定腋动脉，右手持 7G 注射针头，垂直刺入皮肤，斜向腋窝方向，针与动脉夹角 20 度，缓慢进针，直到有筋膜落空感，针头随动脉搏动摆动或出现异感，左手固定针头，右手接预 先备好的局麻药液注射器，回抽无血，注入局麻药 20～40ml。注射完毕腋部可出现一梭状 包块，证明局麻药注入腋鞘内，按摩局部，帮助药物扩散。⑥常用局麻药：

1、1％利多卡因。2、2％利多卡因+0.75％布比卡因混合液。或 1%利多卡因、0.25%布比卡因混合液。3、2％ 普鲁卡因。4、0.5%罗哌卡因（注：两种药物混合应该用原有药物的最大浓度，因为混合 原两种药物被相互稀释，否则不应用“+”号）以上药液内含 1︰20 万肾上腺素。注意事。项同颈丛神经阻滞。⑶主要意外与并发症：①局麻药中毒反应：腋路阻滞时，左手固定针头不稳，导致穿刺针 误入腋动脉内是常见原因，肌间沟法有误人椎动脉的可能,预防与处理同颈丛阻滞。②肌间 沟法可出现霍纳氏综合征、喉返神经和膈神经阻滞等意外与并发症，预防及处理同颈丛阻滞。③气胸：肌间沟法锁骨上、下法阻滞后患者出现胸闷，有发生气胸可能。阻滞前、后应进行 两肺听诊对比，患侧呼吸音明显减弱，伴呼吸困难即可确定气胸成立，X 线检查可确诊。气 胸肺压缩＜20％可进一步观察，吸 O2，待其自然恢复。若气胸肺压缩＞20％并有明显症状应使用闭式引流术。④肌间沟法有误入蛛网膜下腔和硬膜外间隙的可能性，应加强对意识、呼吸及循环的观察和监测。⑤避免同时做双侧肌间沟法，以防膈神经和喉返神经阻滞造成呼 吸抑制，需做双侧臂丛阻滞麻醉，应一侧肌间沟法另一侧为腋路法或锁骨下法，严格控制单 位时间用药剂量，二者用药时间需间隔 10～40min 以防局麻药中毒，或一例用 1%利多卡因 另一侧用 2%普鲁卡因。6.颈丛神经阻滞麻醉

[1] 适应证与禁忌证： 于颈部手术如甲状腺腺瘤、甲状舌骨囊肿等颈部浅表手术，适用于锁骨内侧段骨折内固定术。原发性甲亢、颈部巨大肿块且有气管压迫、气管移位者、呼吸道难以保持通畅或颈椎病伴呼 吸功能不全者视为禁忌。精神极度紧张不合作者、小儿及年龄过大者（﹥75 岁）也不宜选 用。

[2] 操作常规 ①麻醉前用药：苯巴比妥钠 0.1g 或安定 10mg 肌注。②备齐麻醉机、氧气、气管插管用具及急救药品。③测定基础血压、心率、血氧饱和度、心电图，开放静脉通道。④确定穿刺点：患者去枕平卧，头偏向对侧，双上肢自然平放于身体两侧。麻醉医师站在 患侧，嘱患者作抬头运动，显露胸锁乳突肌，定其后缘中点或后缘与颈外静脉交叉点为 C4 穿刺点；乳突尖下方 1.5cm，胸锁乳突肌后缘定为 C2 穿刺点;C2 与 C4 连线中点即为 C3 穿 刺点。每点注药 3～4ml。⑤颈浅丛阻滞：左手食指或拇、食指固定皮肤，右手持 7G 针头在 C4 点垂直皮肤进针，遇有轻度筋膜落空感即达胸锁乳突肌的肌膜下，注药 8～10ml。⑥改良一点法颈深丛阻滞：即在 C4 穿刺，有骨质感停进针，即为 C4 横突，回抽无血或 液体注药 6～8ml，达到同样效果。⑦常用局麻药： 1)1.33％利多卡因或 1%利多卡因、0.1％地卡因混合液； 2)2％利多卡因+0.75 布比卡因或 1%利多卡因、0.25％布比卡因混合液； 3)0.5%罗哌卡因。局麻药内加入 1∶20 万肾上腺素，可延长麻醉药效，减低毒性，减少出血和预防血压下降，罗哌卡因可不加肾上腺素。

[3] 意外与并发症的预防与处理 ①局麻药中毒反应：多因误入血管所致，严格掌握浓度、容量、注药速度，因颈部血管丰 富，药物吸收迅速。注药前、中、后应回抽。一旦出现症状，立即停止注药，吸 02，必要 时面罩下加压供氧，危重病人行气管插管人工呼吸。烦燥者安定 10mg iv。抽搐者 2.5％硫 喷妥钠 100mg～200mg 缓慢 iv 或抽搐停止即停，必要时用肌松药，直至惊厥、抽搐停止;支持循环，加快输液，合并低血压给予血管收缩药。②全脊麻与高位硬膜外腔阻滞： 可因局麻药液误入蛛网膜下腔或硬脊膜外腔所致。深丛阻 滞时，若针深已超过 3～3.5cm 仍未触及横突，不应冒然继续进针，应重新判定穿刺点的位 置，进针方向角度是否有误或体位变动。一旦发生全脊麻或高位硬膜外阻滞症状立即支持呼 吸与循环，面罩下加压供氧，呼吸停止者立即气管插管，人工呼吸；合并低血压则加快输液 及应用血管收缩药。③霍纳氏综合征：因颈交感神经阻滞所致，无需特殊处理。④喉返神经阻滞、膈神经麻痹：前者出现声音嘶哑或失音，轻度呼吸困难，短时间可自行 恢复。后者系膈神经累及出现胸闷呼吸困难，吸氧可缓解，行双侧深、浅丛阻滞，容易出现 以上并发症，因此，原则上应避免同时行双侧深、浅丛阻滞，尤其是三点法(C2、C3、C4阻滞)。⑤器质性心脏病、高血压、冠状动脉病变、糖尿病、甲状腺功能亢进患者局麻药内禁止或 慎用肾上腺素。⑥椎动脉损伤引起血肿。

三、麻醉期间监测目的指南

（一）麻醉期间应配备的基本监测项目

1、局麻和区域麻醉：无创性血压、心电图、脉搏氧饱和度、呼吸频率。

2、全身麻醉：无创性血压、心电图、脉搏氧饱和度、呼气末二氧化碳分压以及吸入气氧浓 度。

（二）依据病人情况和手术类型选择监测项目

1、健康病人行常规外科手术时只需作非创伤性监测：①无创性血压；②心电图；③脉搏氧 饱和度。

2、健康病人进行大手术或手术期间需采用控制性降压，以及心脏病人进行非心脏手术，必 须选择：①心电图；②直接动脉内测压；③中心静脉压；④脉搏氧饱和度；⑤食管、直肠连 续测温；⑥尿量监测；⑦呼气末二氧化碳分压。

3、重危病人和进行心脏外科手术的病人必须选择：①心电图；②直接动脉测压；③中心静 脉压、肺动脉压和肺毛细血管楔压及心排血量；④食管、直肠或（和）鼻咽部测温；⑤脉搏 氧饱和度；⑥尿量监测；⑦呼气末二氧化碳分压。

4、脊髓、脑干及涉及脑功能区域的颅脑手术和大血管手术应选择诱发电位等脑-神经生理监 温测项目。

（三）麻醉深度的监测：新近已在临床应用的有脑电双频谱指数，心率变异性等。以上是麻醉期间监测的目标指南，由于技术原因和经济原因，有些监测项目至今尚未达到 临床要求，如肺动脉压和肺毛细血管楔压及心排血量等。希望二级医院以上的单位麻醉科，努力学习业务技术，提高医院领导的认识，逐步达到目标指南新规定的监测项目，确保病人 麻醉安全。

四、麻醉科常备药品(国家基本医疗保险药品目录)

吸人麻醉药：安氟醚、异氟醚、七氟醚、地氟醚、氧化亚氮。静脉麻醉药：异丙酚、氯|胺酮、依托咪酯、硫喷妥钠、羟丁酸钠。局部麻醉药：利多卡因、普鲁卡因、布比卡因、罗哌卡因、地卡因。肌肉松弛药及桔抗药：松弛药：维库溴铵、潘库溴按、哌库溴铵、阿曲库铵、琥珀胆碱。拮 抗药：新斯的明、吡啶斯的明、依酚氯胺、加兰他明。镇痛药及拮抗药：镇痛药：吗啡、哌替啶、芬太尼、舒芬太尼、阿芬太尼、曲马多。拮抗药： 纳洛酮。血管扩张药：硝普钠、硝酸甘油、乌拉地尔、三磷酸腺苷等。镇静催眠药：苯巴比妥钠。神经安定药：安定、咪唑安定、氟哌利多、异丙嗪。拮抗药：氟吗泽尼。抗胆碱药：东莨菪碱、阿托品。强心药：毛花苷丙 K(西地兰)、毒毛花苷 K、安利农、地高辛。拟肾上腺素能药：肾上腺素、去甲肾上腺素、苯肾上腺素、麻黄素、异丙肾上腺素、间羟胺、多巴胺、多巴酚丁胺。抗肾上腺素能药：艾司洛尔、酚妥拉明、拉贝洛尔 中枢兴奋药：尼可刹米、洛贝林、回苏灵。

抗心律失常药：利多卡因、苯妥英钠、普萘洛尔(心得安)、溴苄胺等。钙通道阻滞药：维拉帕米(异搏定)、尼莫地平、心痛定。止血药：对羧基苄胺、氨基已酸、立止血、凝血酶、鱼精蛋白、维生素 K。水、电解质及酸碱平衡用药：氯化钠溶液，葡萄糖氯化钠溶液，葡萄糖溶液、氯化钾、葡萄 糖酸钙、乳酸钠、碳酸氢钠、乳酸钠林格氏液、氯化钙。血浆代用品：血定安、贺斯、水合葡萄糖、右旋糖酐 40、706 羟乙基淀粉。脱水药：甘露醇。利尿药：速尿、利尿酶。抗凝血药：肝素。激素类药：地塞米松、氢化考的松。其它常备药品：地氟醚、罗比卡因、舒芬太尼、丙烯吗啡、拉贝洛尔(柳胺苄心定)、氟吗泽 尼、阿托品、甲氧胺、苯福林、咖啡因、利他林、美解眠、多抄普仑、奎尼丁、止血敏、维 生素 K1、血定安、枸椽酸钠、可乐定、抑肽酶、胰岛素、垂体后叶素等。

五、基本麻醉设备

[一]麻醉设备：

1、麻醉机：包括普通麻醉机和多功能麻醉机，其数量与手术台比例为 1∶1。

2、气管内插管全套器具：咽喉镜、气管导管、管芯、面罩、牙垫等。

3、一次性硬膜外穿刺针包和硬膜外、腰麻醉联合穿刺包，其包内应含有抽药和注药过滤器。

4、氧治疗设施。

5、附件：开口器、拉舌钳、通气道、人工呼吸器等。

6、微量输液泵：每个手术台应配 1 台，微量注射泵：每个手术台应配 1-2 台。

7、输血、输液及病人体表的降、复温装置。

8、麻醉记录台、听诊器等。

[二]监护仪器：

1、心电监护仪(示波、记录装置)、脉搏血氧饱和度仪，每个手术台配备 1 台。

2、心电除颤监护仪(胸外、胸内除颤电极)，每个手术单元必须配备 1 台，10 个手术台以上 者应本配备 2 台。

3、二级以上医院必须配备有创性血流动力学监护仪，在 3 个监护仪中必须具有 1 台该功能 的监护。

4、开展全身麻醉的医院必须具有周围神经刺激仪肌肉松弛监测仪。

5、应用麻醉机进行全身麻醉在监护仪中需含有呼气末二氧化碳监测或单独的呼气末二氧化 碳监测仪。[三]其它：

1、二级医院或每日用血量大于 800ml 以上的医院，必须配备自体血液回收装置。

2、二级以上医院必须配有纤维束咽喉镜或纤维光气管镜。

3、麻醉科必须配有电子计算机，用于贮存资料、统计分析、科学研究及麻醉管理。

吸入麻醉临床操作规范 篇2

由呼吸进入人体并产生麻醉作用的药物称之为吸入麻醉药。吸入麻醉药为气体或挥发性液体。吸入麻醉药经肺泡动脉入血, 直达脑组织, 使突触传递功能受阻, 从而全身麻醉。最早的吸入麻醉药乙醚在1846年用于临床, 距今已有两百多年。

通常认为吸入性麻醉药的工作机制是:药物溶入细胞膜的脂质层, 扰乱脂质分子的排列, 钾、钠通道及膜蛋白质发生改变, 抑制神经细胞除极, 从而阻碍神经冲动的传递, 于是产生了全身麻醉。

下面介绍几种临床常见的吸入麻醉药:

1 安氟醚

安氟醚又称恩氟烷、氟醚麻醉剂、安氟液, 是一种不燃不爆, 有果香且无色液体强效吸入麻醉药。安氟醚的诱导和苏醒都明显快于乙醚。

安氟醚可产生下行性抑制中枢神经系统, 升高颅内压, 降低脑氧耗量及增加脑血流量。有阻断神经肌肉的作用, 强度介于氟烷与乙醚之间。有抑制循环系统的作用, 轻于氟烷。麻醉时降低心排血量、心脏每搏排血量、周围血管阻力和平均动脉压。抑制心肌收缩, 浅麻醉时增快心率略, 深麻醉时减慢。明显抑制呼吸系统, 明显降低通气量和潮气量, 延长呼吸周期, 扩张支气管, 缺氧和二氧化碳的呼吸反应受到抑制, 轻微降低顺应性[1]。

2 异氟醚

异氟醚又称异氟烷, 是一种能腐蚀对塑料、橡胶和金属, 有乙醚气味的澄明无色液体, 用于各种手术全身、半身麻醉。

异氟醚与恩氟烷是异构体, 有较小血/气分配系数, 肺泡内药物浓度上升迅速并与吸入气浓度接近, 药物浓度在吸入后能迅速平衡分布到血, 所以诱导和苏醒的速度很快。进行性下行性抑制中枢神经系统, 降低脑耗氧量, 颅内压上升及脑血流量增多。神经肌肉接头受到抑制, 肌松良好。循环系统及呼吸系统的抑制作用比恩氟烷低。呼吸道粘膜刺激性低, 对支气管有扩张收缩的作用。眼内压降低, 血糖不升高。抑制胃肠道张力和蠕动, 但术后很少见到呕吐、恶心得症状[2]。

异氟醚适用于各种临床手术的麻醉, 尤其是嗜铬细胞瘤、颅高压、重症肌无力、癫痫、支气管哮喘及糖尿病患者。其镇痛作用较差是主要缺点。异氟醚和恩氟烷是国内外常用吸入全麻药。

3 七氟醚

七氟醚是一种新型芳香、无色透明且无刺激液体全身麻醉剂, 广泛应用于儿童全麻, 被誉为吸入麻醉药领域的里程碑。

七氟醚的化学性质不稳定, 在低浓度下患者很快丧失意识, 适合面罩下快速诱导, 深度麻醉诱发全身痉挛;其有较低的血气分配系数, 轻微刺激气道、对气道平滑肌有松弛作用;不显著影响心率;相对于恩氟醚、异氟醚, 其对肌松药有更强的强化作用[3]。

七氟醚有与异氟醚相近的呼吸系统、中枢神经系统和心血管系统抑制作用。其少有不良反应, 诱导速度快, 有好的心血管稳定性。与阿片类药物和镇静药合用使诱导更平稳, 血流动力学变化更小。拥有近似于异丙酚等静脉麻醉药的心血管稳定性, 诱导时间和不良反应, 其吸入诱导的心血管不良反应少于氟烷相。

七氟醚需要克服诱导期和恢复期的躁动。术后躁动的重要原因是觉醒后感觉到的不适, 可以采用延迟患者苏醒的小量芬太尼和唑咪, 提高苏醒质量。

4 氧化亚氮

氧化亚氮即一氧化二氮俗称笑气, 化学式N2O, 是一种无色有甜味气体的氧化剂, 特定情况下能支持燃烧, 麻醉作用轻微, 可令人发笑。英国化学家汉弗莱戴维于1799年发现其麻醉作。

氧化亚氮早期作为于牙科手术的麻醉剂。因全麻作用差, 如今通常与静脉全麻药或乙醚、甲氧氟烷、氟烷等合用。氧化亚氮作为临床麻醉药, 不刺激呼吸道, 几乎无损害心、肺、肝、肾等脏器功能。吸入人体后无蓄积作用, 不经任何降解或生物转化, 绝大部分随呼气排出, 小量部分由皮肤蒸发[4]。

吸入氧化亚氮需约半分钟后镇痛作用就产生了, 麻醉作用弱而镇痛作用强, 患者状态清醒, 无全身麻醉并发症。

摘要：本文主要介绍了当代麻醉药吸入的发展情况、及药物工作机制, 为临床麻醉工作者提供一些理论支持。

关键词：麻醉药,临床

参考文献

[1]王焕亮, 类维富, 吴琦.脑电双频指数反馈调控安氟醚麻醉用于子宫切除术病人的可行性[J].中华麻醉学杂志, 2005, 24 (9) :710-711.

[2]王翠萍, 范立霞, 类维富.异氟醚与七氟醚用于腹部手术闭环靶控吸入麻醉的对照研究[J].中国现代普通外科进展, 2007, 10 (4) :328-330.

内科临床急诊急救的规范操作 篇3

【关键词】内科临床；急诊急救；标准化；医疗体系

【中图分类号】R459.7 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）03-0372-01

随着科学的进步、社会的发展，急诊急救医学越来越显示出其重要性，尤其是在人们日常生活中更加发挥其不可替代的重要性。探讨急诊急救护理质量控制，对提高急诊急救病人的抢救、诊断、治疗和护理水平，具有重要的意义。但由于急诊急救在我国起步晚，标准化体系不完善，现有的标准不能正确指导急诊急救工作走入正轨，为了实现突发公共卫生事件医疗救治体系建设规划，加快医疗救治队伍能力的建设，我们必须完善标准化体系，使我们的急诊急救工作有标准可依。

1急诊急救工作的概述

急诊急救医学是一门综合性的多边学科，急诊昏迷作为急诊科较为常见的急危重症，其发病原因复杂多样，常涉及心脑血管意外、外伤、内分泌障碍、中毒等领域，且其死亡率可高达 20%，国内外发展程度有所不同。国内的急救医学与发达国家相比起步晚还有一定差距，而且发展极不平衡，技术力量和设备还较落后。国外在急救医学领域发展较快，急诊急救技术较为普及和系统。目前我国地市级以上城市的院前急救队伍的组成取决于其城市急救中心建设模式，虽然急救模式有多种，但院前急救队伍组成基本只有2种，独立的、专职的院前急救队伍，和由急诊医护人员兼职的院前急救队伍。前者，应急反应迅速，现场常规急救配合较好后者应急反应慢，现场常规急救技术不规范，配合欠佳。

2加强内科急救技术规范操作的思考

2.1培养一支有一定医德和医术的年轻骨干队伍

随着人类社会的不断向前进步，信息产业的高速发展，人们对知识的热切追求和法律意识的增强，这对急诊急救工作人员的医德医疗水平提出了更高的要求，特别是在对待病人的态度和对病人高度负责的精神。必须对急症急救工作人员进行良好的医德教育，切实使急救工作人员急病人所急，一切以病人为中心，培养高度对病人负责的优秀品质。能否在较短时间内提供最有效的救治，服务于每一位需要救治的病人，同时也代表了一所医院的综合实际医疗水平。快速高效地提高急诊急救水平，满足社会需求，无疑是当务之急。每个人在每个岗位上，不只是一个螺丝钉，而是一个学习型智慧型组织中，不再是一部机器上的机械小部件，而是整个机器或整个过程的一个智慧部件。急诊科是一个独立的抢救实体，只依

靠某个人的能力是不行的。此外，协作精神必不可少。协作精神的好坏是检验一个急诊科综合实力的标志、管理水平的标志、抢救能力的标志。要满足现代急诊急救要求，护士长必须善谋划，包括人员的合理安排。思想上能跟上时代的发展，操作上能掌握现代仪器设备的使用，管理上更多的是智能管理，质量上更多地体现知识、技能的科学管理，学术水平上能体现现代国内外护理学发展的最新思想。

2.2急诊急救工作标准化体系必须与国际接轨

大部分医院仍存在人力财力不足，设备落后，编制不合理，急诊工作者待遇地位低下，急诊专业人员力量薄弱，没有适应急救标准化体系等，使急诊科建设的根本矛盾未解决。借鉴国外的经验，建立一套完整的符合我国国情的急诊救治标准化体系，这也是规范操做的当务之急。利用现有的急救设备，采取积极稳妥的政策导向，提高急诊工作者的生活保障待遇，向信息化、网络化、制度化、体系化的现代急诊急救体制迈进。

2.3改善内科急诊急救医疗设备，加大投入

目前我国有的医院急诊科建设还设有完全纳入编制，遇到危重病人只能送到临床科室，严重影响了对病人的抢救。由于地方政府财力不足或对急救的重视程度不够，多数急救指挥型急救模式存在一级医院救護车装备简陋，二级以上医院救护车装备不规范，重大伤害事故现场急救装备和救援备灾物资不足，通过通讯联络落后，急救器材陈旧、管理体制不规范等现实情况在大部分医院都有不同程度存在。这些现象远不能适应新形势的需要，不能适应现代化社会急诊医学的需求，不能适应急救工作担负的特殊责任，很大程度上影响了急诊急救的整体发展。抓好组织措施的落实，设备和效益的最佳结合以及制定合理的标准化制度。

2.4规范内科急诊急救的重点

院前急救队伍由各级急救网络医院的急诊科医护人员和驾驶员构成，急救队伍庞大，急救医生流动性较大，院前急救行为非标准化。急救医院的急诊急救人员虽有一定的急救医学理论知识和院内急救技术，但缺乏专业系统的院前急救技能培训。建设医疗紧急救援专业队伍，提高应急反应的能力。加大投人，加快院前急救和紧急救援装备现代化建设步伐。

2.5急诊急救工作中的三个救治阶段和完善是标准化的必然

由于各种自然灾害，交通事故所致的创伤，各种原因的中毒，意外事件中的致伤以及疾病的突发和各种危及生命的重危病症都被列为急诊急救医学范畴，主要表现在急、危、重三个方面。因此我们把救治工作分为院前救治，院内救治，后期治疗三个阶段。院内后期治疗主要是通过救治病人脱离危险，生命体征平稳后的一般综合康复治疗，帮助和促进病人早日康复。为了更好地进行急诊急救工作，我们必须明确分工，制定严格的规章制度，使急诊急救工作顺利、快速、健康地向前发展。

3结语

总而言之，内科的急诊急救不仅对于人民的生命安全有着重要的影响，它对于医疗企业的发展更是至关重要。相关医疗部门应该根据时代发展需求，加大对内科急诊医疗设备的投入，规范急诊急救操作，保证对病人能够进行有效的救治，相关部门工作人员应该克服困难，创造条件，加强急诊专业人才队伍的建设力度，切实建立好的、适应的标准化体系，为我国的急诊医疗事业贡献才智和力量。

参考文献

[1]任真年1临床科护士长怎样抓护理质量管理.中国卫生质量管理，2002，22（3）：36

吸入麻醉临床操作规范 篇4

第1章 总 则

一、为提高病理学诊断质量，促进临床工作，依据《中华人民共和国执 业医师法》精神，结合医院病理科工作的特点，制定本规范。

二、医院病理科和承担医院病理科任务的医学院校病理教研室的主要临 床任务是通过活体组织病理学检查（简称活检）、细胞病理学检查（简 称细胞学检查）和尸体剖检（简称尸检）等作出疾病的病理学诊断（或 称病理诊断）。具有一定规模的病理科，应积极开展教学、培训病理医 师和科学研究等项工作。

三、病理学诊断是病理医师应用病理学知识、有关技术和个人专业实践 经验，对送检的患者标本（或称检材，包括活体组织、细胞和尸体等）进行病理学检查，结合有关临床资料，通过分析、综合后，作出的关于 该标本病理变化性质的判断和具体疾病的诊断。病理学诊断为临床医师 确定疾病诊断、制定治疗方案、评估疾病预后和总结诊治疾病经验等提 供重要的、有时是决定性的依据，并在疾病预防，特别是传染病预防中 发挥重要作用。

四、病理学诊断报告书（或称病理诊断报告）是关于疾病诊断的重要医 学文书。当涉及医、患间医疗争议时，相关的病理学诊断报告书具有法 律意义。病理学诊断报告书应由具有执业资格的注册主治医师以上（含 主治医师）的病理医师签发。各医院可酌情准予条件适宜的高年资病理 科住院医师试行签署病理学诊断报告书。低年资病理科住院医师、病理 科进修医师和非病理学专业的医师不得签署病理学诊断报告书。

五、病理学检查是临床医师与病理医师为确立疾病诊断而进行的合作行 为，是有关临床科室与病理科之间特殊形式的会诊。临床医师和病理医 师双方皆应认真履行各自的义务和承担相应的责任。

六、病理学检查申请单是临床医师向病理医师发出的会诊邀请单。病理 学检查申请单的作用是：临床医师向病理医师传递关于患者的主要临床 信息（包括症状、体征、各种辅助检查结果和手术所见等）、诊断意向 和就具体病例对病理学检查提出的某些特殊要求，为进行病理学检查和 病理学诊断提供重要的参考资料或依据。病理学检查申请单是疾病诊治 过程中的有效医学文书，各项信息必须真实，应由主管患者的临床医师 亲自（或指导有关医师）逐项认真填写并签名。

七、临床医师应保证送检标本与相应的病理学检查申请单内容的真实性 和一致性，所送检材应具有病变代表性和可检查性，并应是标本的全 部。

八、患者或患者的授权人应向医师提供有关患者的真实信息（包括姓 名、性别、年龄、病史和可能涉及诊断需要的隐私信息）。病理医师应 尊重和保护患者的隐私。患者或患者的授权人应保证其自送检材的真实 性、完整性和可检查性。

九、病理科应努力为临床、为患者提供优质服务，遵照本规范的要求加 强科室建设，制订完善的科室管理制度，并实施有效的质量监控。

十、病理科工作人员应恪尽职守，做好本职工作。病理医师应及时对标 本进行检查和发出病理学诊断报告书，认真对待临床医师就病理学诊断 提出的咨询，必要时应复查有关的标本和切片，并予以答复。病理科技 术人员应严格执行本规范的技术操作规程，提供合格的病理学常规染色 片、特殊染色片和可靠的其他相关检测结果，并确保经过技术流程处理 的检材真实无误。

第2章 病理学检查常规

第一节 普通活体组织病理学检查常规

一、申请单和标本的验收

(一)病理科应有专人验收普通活体组织病理学检查(常规活检)申 请单和送检的标本。

(二)病理科验收人员必须：

1． 同时接受同一患者的申请单和标本。

2． 认真核对每例申请单与送检标本及其标志（联号条或其他写明患者 姓名、送检单位和送检日期等的标记）是否一致；对于送检的微小标 本，必须认真核对送检容器内或滤纸上是否确有组织及其数量。发现疑 问时，应立即向送检方提出并在申请单上注明情况。

3．认真检查标本的标志是否牢附于放置标本的容器上。

4．认真查阅申请单的各项目是否填写清楚，包括：①患者基本情况［姓 名、性别、年龄，送检单位（医院、科室）、床位、门诊号/住院号、送 检日期、取材部位、标本数量等］，②患者临床情况［病史（症状和体 征）、化验/影象学检查结果、手术（包括内镜检查）所见、既往病理学 检查情况（包括原病理号和诊断）和临床诊断等］。5．在申请单上详细记录患者或患方有关人员的明确地址、邮编及电话号 码，以便必要时进行联络，并有助于随访患者。

(三)验收标本人员不得对申请单中由临床医师填写的各项内容进行改动。

(四)下列情况的申请单和标本不予接收：

1．申请单与相关标本未同时送达病理科；

2．申请单中填写的内容与送检标本不符合；

3．标本上无有关患者姓名、科室等标志；

4．申请单内填写的字迹潦草不清；

5．申请单中漏填重要项目；

6．标本严重自溶、腐败、干涸等；

7．标本过小，不能或难以制做切片；

8．其他可能影响病理检查可行性和诊断准确性的情况。

病理科不能接收的申请单和标本一律当即退回，不予存放。

(五)临床医师采取的标本应尽快置放于盛有固定液（4%中性甲醛，即1 0%中性福尔马林）的容器内，固定液至少为标本体积的5倍。对于需作 特殊项目检查（如微生物、电镜、免疫组织化学、分子生物学等）的标 本，应按相关的技术要求进行固定或预处理。

(六)病理医师只对病理科实际验收标本的病理诊断负责。

(七)病理科应建立与送检方交接申请单和标本的手续制度。具体交接方 法由各医院病理科自行制订。

二、申请单和标本的编号、登记

(一)病理科验收人员应在已验收的申请单上注明验收日期并及时、准确 编号（病理号），并逐项录入活检标本登记簿或计算机内。严防病理号 的错编、错登。

(二)标本的病理号可按年编序，或连续性（不分）编序。(三)同一病例同一次的申请单、活检标本登记簿（包括计算机录入）、放置标本的容器、组织的石蜡包埋块（简称蜡块）及其切片等的病理号 必须完全一致。

(四)病理科应建立验收人员与组织取材人员之间申请单和标本的交接制度。具体交接方法由各医院病理科自行制订。

(五)在病理科内移送标本时，必须确保安全，严防放置标本的容器倾 覆、破损和标本的散乱、缺失等。

三、标本的预处理

标本验收人员对已验收的标本酌情更换适宜的容器，补充足量的固定 液；对于体积大的标本，值班取材的病理医师在不影响主要病灶定位的 情况下，及时、规范地予以剖开，以便充分固定。

四、标本的巨检、组织学取材和记录

对于核验无误的标本，应按照下列程序进行操作：①肉眼检查标本（巨 检）；②切取组织块（简称取材）；③将巨检和取材情况记录于活检记 录单上（活检记录单印于活检申请单的背面）。巨检和取材的技术操作 参见第3章第四节。

巨检和取材时的注意事项：

(一)巨检和取材必须由病理医师进行，应配备人员负责记录。

(二)巨检和取材过程中，应严防污染工作人员和周围环境。

(三)标本一般应经适当固定后再行取材。已知具有传染性（例如结核 病、病毒性肝炎等）的标本，应在不污染环境和／或不扩散传染的原则 下，经必要的初步巨检或切开后，立即置于盛有足量固定液的专用容器 内，充分固定后再行常规巨检和取材。

(四)病理医师在对每例标本进行巨检和取材前，应与记录人员认真核对 该例标本及其标志与申请单的相关内容是否一致。若对申请单填写的内 容或／和标本有疑问（例如患者姓名有误，标本内容、数量、病变特征 与申请单填写的情况不符等），应暂行搁置，尽快与送检方联系，查明 原因，确保无误后，再行巨检和取材。必要时，可邀请有关临床医师共 同检查标本和取材。对于有疑问的标本，在消除疑问前不得进行巨检和 取材，应将有关标本连同其申请单一并暂时妥存。

(五)病理医师进行巨检和取材时，记录人员应根据病理申请单内容，向 巨检医师报告患者的基本临床情况、手术所见、标本情况（采取部位、数量等）和送检医师的特殊要求等，并如实、清楚地将病理医师的口头 描述记录于活检记录单上。必要时，应在活检记录单上（或另附纸）绘 简图显示巨检所见和标示取材部位。取材者应核对记录内容。

(六)具有医学学术价值的标本可摄影存档，并酌情妥为保存。

(七)病理科宜积极推行巨检和取材的录音记录。每次巨检和取材结束 后，应由专人立即对录音内容进行文字整理，记录于活检记录单上（手 录或用计算机录入、打印）。有关的录音资料应保存至病理诊断报告书 发出后两周。

(八)细小标本取材时，可用伊红点染并用软薄纸妥善包裹。

(九)每例标本取材前、后，应用流水彻底清洗取材台面和所有相关器 物，严防检材被无关组织或其他异物污染，严防细小检材被流水冲失。

(十)巨检和取材必须按照本规范的要求进行操作（参见第3章第四 节）。对于由不同部位或不同病变区域切取的组织块，应在其病理号之 后再加编次级号（例如：－1，－2，－3，„„；A,，B，C，„„等）。

(十一)巨检／取材者和记录人员应相互配合、核查，确保所取组织块及 其编号标签准确地置于用于脱水的容器（脱水盒等）内。

(十二)标本巨检和取材后剩余的组织／器官应置入适当容器内，添加适 量4%中性甲醛并附有相关病理号和患者姓名等标志，然后按取材日期有 序地妥为保存。取材剩余的标本一般保存至病理诊断报告书发出后两 周。

(十三)病理医师在每批标本巨检和取材后，应与记录人员共同核对取材 内容，并在活检记录单／取材工作单上签名和签署日期。

(十四)取材后剩余的病理标本属于污染源，应遵照有关规定处理。

(十五)巨检／取材医师或记录人员与制片的技术人员认真办理交接手 续。具体交接方法由各医院病理科自行制订。

五、组织切片制备的基本要求

(一)组织制片过程中，应确保切片号与蜡块号一致。

(二)制片工作一般应在取材后2个工作日内完成（不含需要脱钙、脱脂 等特殊处理的标本）。

(三)制片完成后，技术人员应检查制片质量，并加贴标有本病理科病理 号的标签。常规石蜡-HE染色片的优良率应≥95%，优秀率不<35％。不合格切片应立即重做。切片质量的基本标准参见第3章第一节的附 表。

(四)制片过程发生意外情况时，有关技术人员和技术室负责人应及时向 科主任报告，并积极设法予以补救。

(五)制片完成后，技术人员应将所制切片与其相应的活检记录单／取材 工作单等进行认真核对，确认无误后，将切片连同相关的活检申请单／ 活检记录单／取材工作单等一并移交给病理医师。双方经核对无误后，办理移交签字手续。具体交接方法由各医院病理科自行制订。

(六)常规活检组织切片制备技术的基本要求参见第3章第一节。

六、组织切片的光学显微镜检查和病理诊断

(一)病理医师进行病理诊断时：

1．应认真阅读申请单提供的各项资料，必要时（尤其是疑难病例），应 向有关临床医师了解更多的临床信息。

2．应认真阅读活检记录单中关于标本巨检的描述；负责复检的病理医师 必要时亲自观察标本，补充或订正病变描述，指导或亲自补取组织块。

3．应了解患者既往病理学检查情况（包括切片的病理诊断和有关文字记 录）：①由本病理科既往受理者，必须及时调阅相关切片等病理学检查 资料；②非本病理科既往受理者，应积极协助患者从有关病理科商借相 关切片等病理学检查资料参阅。

4．应在活检记录单上签署“医嘱”，告知技术人员进行必要的深切片、连切片、特殊染色和其他相关技术检测。

5．应全面、细致地阅片，注意各种有意义的病变。

(二)进行初检的病理医师，应提出初诊意见，送交主检病理医师复查。

(三)主检病理医师对难以明确诊断的病例,可以：

1．提请科内上级医师会诊或进行科内读片讨论（会诊）；

2．与有关临床医师进行临床－病理会诊；

3．必要时约见患者（尤其门诊患者）或患者亲属（或其他患方相关人 员），了解病情，说明病理诊断的疑难情况和延期签发病理学诊断报告 书的原因等；

4．于签发病理学诊断报告书前进行科外病理会诊(“诊断报告前病理会 诊”)，应将各方面会诊意见的原件（或复印件）作为档案资料贴附于有 关患者的活检记录单中备查；

5．必要时，建议临床医师重复活检，或密切随查。

(四)主检病理医师根据常规切片的镜下观察，结合标本巨检、相关技术 检查结果、有关临床资料和参考病理会诊意见等，作出病理诊断或提出 病理诊断意见（意向），清楚地书写于活检记录单的有关栏目中、并亲 笔签名。各方会诊意见不

一、难以明确诊断时，主检医师可参考会诊意 见酌情诊断，或在病理学诊断报告书中将各方会诊意见列出，供临床医 师参考。

(五)对打印的病理学诊断报告书，主检病理医师应与活检记录单上的病 理诊断文字进行核对，并亲笔签名。［参见本节下文：“

八、常规活检 病理学诊断报告书及其签发”］

七、相关诊断技术的选用

病理医师可借助于组织化学染色（包括特殊染色）、免疫组织化学染 色、电子显微镜技术、分子生物学技术、流式细胞技术等相关诊断技术 检查提供的佐证，对某些病例（尤其是疑难病例）进行病理诊断。（参 见第4章）

八、病理学诊断报告书及其签发

(一)病理诊断表述的基本类型

Ⅰ类：检材部位／疾病名称／病变性质明确和基本明确的病理诊断。

Ⅱ类：不能完全肯定疾病名称/病变性质，或是对于拟诊的疾病名称／病 变性质有所保留的病理诊断意向，可在拟诊疾病／病变名称之前冠以诸 如病变可“符合为”、“考虑为”、“倾向为”、“提示为”、“可能 为”、“疑为”、“不能排除（除外）”之类的词语。

Ⅲ类：检材切片所显示的病变不足以诊断为某种疾病（即不能做出Ⅰ类 或

Ⅱ类病理诊断），只能进行病变的形态描述。

Ⅳ类：送检标本因过于细小、破碎、固定不当、自溶、严重受挤压（变 形）、被烧灼、干涸等，无法做出病理诊断。

(二)病理学诊断报告书的基本内容

1．患者的基本情况，包括病理号，姓名，性别，年龄，送检医院／科室（住院／门诊），住院号／门诊号，送检／收验日期等。

2．巨检病变和镜下病变要点描述（一般性病变和细小标本可酌情简述或 省略）。

3．与病理诊断相关技术的检查结果。

4．病理诊断的表述（参见上文“病理诊断表述的基本类型”）。

5．对于疑难病例或作出Ⅱ、Ⅲ类病理诊断的病例，可酌情就病理诊断及 其相关问题附加：①建议（例如进行其他有关检查、再做活检、科外病 理学会诊、密切随诊／随访等）；②注释／讨论。

6．经过本病理科或／和科外病理会诊的病例，可将各方病理会诊 意见列于该例患者的病理学诊断报告书中。

(三)病理学诊断报告书的书写要求

1．病理学诊断报告书的文字表述力求严谨、恰当、精练、条理和层 次清楚。

2．病理学诊断报告书应为一式二份，一份交予送检方，另一份随同患者 的病理学检查申请单／病理学检查记录单一并存档。主检病理医师必须 在每一份病理学诊断报告书上签名，不能以个人印章代替签名，不能由 他人代为签名；主检病理医师签名的字迹应能辨认。

3．手书的病理学诊断报告书必须二联复写，必须文字规范、字迹清楚，不得潦草、涂改。

4．手书和计算机打印的病理学诊断报告书中的关键性文字，例如

“癌”、“瘤”、“阳性”、“阴性”和数字等，要认真核对，不得有 误。

5．计算机打印的图文病理学诊断报告书提供的病变图象要准确，具有典 型（代表）性，放大倍数适当。

6．患者的基本情况项目必须严格按照送检临床医师填写的文字抄写或用 计算机输录于病理学诊断报告书中，并认真核查无误，签发报告书的病 理医师和病理科的其他人员都不得改动。7．病理医师不得签发虚假的病理学诊断报告书，不得向临床医师和患方 人员提供有病理医师签名的空白病理学诊断报告书。

(四)病理学诊断报告书的发送

1．病理科自接受送检标本至签发该例病理学诊断报告书的时间，一般情 况下为5个工作日以内；

2．由于某些原因（包括深切片、补取材制片、特殊染色、免疫组 织化学染色、脱钙、疑难病例会诊或传染性标本延长固定时间等）延迟 取材、制片，或是进行其他相关技术检测，不能如期签发病理学诊断报 告书时，应以口头或书面告知有关临床医师或患方，说明迟发病理学诊 断报告书的原因。

3．病理科应有专人发送病理学诊断报告书。住院患者的病理学诊断报告 书应发送至有关临床科室。病理科所在医院门诊患者和外院患者病理学 诊断报告书的发送方法，由各医院病理科自行制订。

4．病理学诊断报告书的经收人员（包括患方人员）必须履行签收手续。

5．病理科已发出的病理学诊断报告书被遗失时，一般不予补发；必要 时，经病理科主任同意可以抄件形式补发。

九、资料管理

普通活体组织病理学检查的资料必须妥善管理，有关规定参见本章第五 节。

十、会 诊

病理学会诊是普通活体组织病理学诊断过程的重要环节，有关规定参见本章第 六节。

第二节 手术中快速活体组织病理学检查常规

一、概 述

(一)手术中快速活体组织病理学检查（快速活检）是临床医师在实施手术 过程中，就与手术方案有关的疾病诊断问题请求病理医师快速进行的急会诊，尤其需要临床医师与病理医师间的密切合作。

(二)快速活检要求病理医师在很短时间内，根据对切除标本的巨检和组织块快 速冷冻切片（或快速石蜡切片）的观察，向手术医师提供的参考性病理诊断意 见。与常规石蜡切片的病理诊断相比，快速活检会诊具有更多的局限性和误诊 的可能性。有的病例难以快速诊断，需要等待常规石蜡切片进一步明确诊断。因此，应向临床医师说明快速活检的：①局限性、②适用范围、③慎用范围和 ④不宜应用范围。

(三)有关临床医师应于手术前向患者和／或患者授权人说明快速活检的意义和 局限性等，取得患者和／或患方的知情和理解。患者和／或患者授权人应在由 医院制定的《手术中快速活检患方知情同意书》签署意见和签名。

(四)主持手术的临床医师应在手术前一天向病理科递交快速活检申请单，填写 患者的病史，重要的影象学、实验室检查结果和提请病理医师特别关注的问题 等。尽可能不在手术进行过程中临时申请快速活检。

(五)手术中快速活检应由经过该项工作训练的主治医师以上的病理医师主持。尚不具备相应条件的病理科不应勉强开展手术中快速活检。

(六)负责快速活检的主检病理医师应了解患者的①临床情况，②手术所见，③ 既往有关的病理学检查情况。

二、适用范围

(一)需要确定病变性质（如肿瘤或非肿瘤／良性肿瘤或恶性肿瘤等），以

决定手术方案的标本。

(二)了解恶性肿瘤的扩散情况，包括肿瘤是否浸润相邻组织、有无区域淋 巴结转移等。

(三)确定肿瘤部位的手术切缘有无肿瘤组织残留。

(四)确认切除的组织，例如甲状旁腺、输卵管、输精管及异位组织等。

三、慎用范围

涉及截肢和其他会严重致残的根治性手术切除的标本。需要此类手术治疗的患者，其病变性质宜于手术前通过常规活检确定。

四、不宜应用范围

(一)疑为恶性淋巴瘤。

(二)过小的标本（检材长径≤0.2cm者）。(三)术前易于进行常规活检者。

(四)脂肪组织、骨组织和钙化组织。

(五)需要依据核分裂象计数判断良、恶性的软组织肿瘤。(六)主要根据肿瘤生物学行为特征而不能依据组织形态判断良、恶性的肿瘤。(七)已知具有传染性的标本（例如结核病、病毒性肝炎、艾滋病等）。

五、申请单和标本的验收、编号和登记

手术中快速活体组织病理学检查申请单和标本的验收、编号和登记参照本章第一节中“一”至“三”项的有关规定。

六、标本的巨检、取材和记录

(一)病理科验收快速活检申请单和标本后，应参照本章第一节中“四”项的有关规定，立即进行标本的巨检、取材和记录。

(二)主持快速活检的病理医师应亲自参与标本的巨检和取材（或指导取 材）。

(三)通常选取具有代表性的病变组织1～2块，需要时，增加取材块数。

七、组织切片的制备(一)冷冻切片

1．完成冷冻HE染色切片制备的时间通常应为20～25分钟。

2．恒冷箱切片机制片：至少应于切片前1小时开机预冷，冷室温度一般为-15～-20℃。常规开展冷冻切片快速病理学诊断的病理科，恒冷箱切片机宜处于24小时恒温待机状态。

3．其他方法的冷冻切片制备参见第3章第一节。(二)快速石蜡切片

1．完成快速石蜡－HE染色切片的时间通常为30分钟。2．快速石蜡切片的制备方法参见第3章第一节。

(三)制备好的冷冻／快速石蜡-HE染色切片，加贴标有本病理科病理号的 标签后，立即交由主检病理医师进行诊断。

八、手术中快速活检会诊意见及其签发

(一)有条件的病理科宜由两位中／高级称职的病理医师共同签署快速活检的病理诊断意见。对于病变疑难、手术切除范围广泛和会严重致残的手术中快速活检，应由两位高级称职的病理医师共同签署会诊意见。主检病理医师签名的字迹应能辨认。

(二)快速活检诊断意见一般在收到送检标本后40分钟内发出；同一时间段内相继收到的多例患者标本或是同一例患者的多次标本，其发出报告的时间依次类推。对于疑难病变，可酌情延时报告。

(三)对于难以即时快速诊断的病变（例如病变不典型、交界性肿瘤病变或送检组织不足以明确诊断等），主检病理医师应向手术医师说明情况，恰如其分地签发病理诊断意见或告知需要等待常规石蜡切片进一步明确病理诊断。

(四)主检病理医师签署的快速活检病理诊断意见，宜以文字形式报告（具体发出方式由各医院自行决定）。快速活检病理诊断意见报告书发出前应认真核对无误。

九、冷冻切片后剩余组织的处理

(一)冷冻切片后剩余的冷冻组织（简称 “冻对”）和冷冻切片取材后剩余、未曾冷冻的组织（简称“冻剩”），均应保存，用以制备常规石蜡切片，以便与冷冻切片进行对照观察。

（二）“冻对”／“冻剩”组织的蜡块和切片需与同一病例手术后送检的切除标本编为同一病理号，并作出综合性诊断。

(三)当冷冻切片病理诊断意见与其“冻对”组织的常规石蜡-HE片的 病理诊断不一致时，该例的病理诊断一般应以石蜡-HE片诊断为准。

十、资料管理

手术中快速活体组织病理学检查的资料必须妥善管理，有关规定参见本章第五节。

第三节 细胞病理学检查常规

一、申请单和标本的验收、编号和登记

(一)病理科应参照本章第一节（常规活体组织病理学检查常规）中“一” 和“二”项的规定，进行细胞病理学检查(细胞学检查)申请单和标本的验收、编号和登记。

(二)用于细胞学检查的标本必须新鲜，取材后应尽快送至病理科(或细胞病理学室,下同)；病理科核验检材无误后，应尽快进行涂片和染色。

(三)病理科验收标本人员不得对申请单中由临床医师填写的各项内容进行改动。

二、细胞涂片、组织印片和压片的基本要求

(一)细胞涂片、组织印片和压片（参见第3章第二节）。(二)肿物细针穿刺物涂片

1.应由掌握细针穿刺技术的注册医师或注册助理医师，按照细针穿刺技术操作常规，亲自对确有适应症且无禁忌症的患者采取穿刺物。2.适应症：通常为：

(1)浅表肿物：乳腺、甲状腺、涎腺、淋巴结、前列腺、皮下软组织和骨等。(2)胸腔肿物：肺、胸膜和纵隔等。

(3)腹腔肿物：肝、胰、肾、肾上腺、腹腔内、腹膜后和盆腔内等。(4)颅内肿物。

3．禁忌症：患者有难以控制的咳嗽、肺动脉高压症、进行性肺气肿、出血 性体质及“晕针史”等。

（三）对于核验无误的送检标本，应立即依序进行：①涂片、印片或 压片，②固定和③染色。

三、细胞病理学诊断报告书及其签发

(一)细胞病理学诊断可为临床医师诊断疾病（尤其是肿瘤）提供重要参考 依据。

(二)细胞病理学诊断报告书必须由具有主检资格的注册病理医师签署后发出。主检病理医师签名的字迹应能辨认。(三)细胞病理学诊断表述的基本类型

1.直接表述性诊断：适用于穿刺标本的细胞病理学诊断报告。根据形态学观察的实际情况，对于某种疾病／病变做出肯定性（Ⅰ类）、不同程度意向性（Ⅱ类）细胞学诊断，或是提供形态描述性（Ⅲ类）细胞学诊断，或是告知无法做出（Ⅳ类）细胞学诊断。[参考本章第一节的八(一)项：“病理学诊断表述的基本类型”]

2.间接分级性诊断：用于查找恶性肿瘤细胞的诊断。Ⅰ级：未见恶性细胞 Ⅱ级：查见核异质细胞 Ⅱa：轻度核异质细胞 Ⅱb：重度核异质细胞 Ⅲ级：查见可疑恶性细胞 Ⅳ级：查见高度可疑恶性细胞 Ⅴ级：查见恶性细胞

(四)细胞病理学诊断的局限性（假阴性或假阳性诊断）

1.假阴性：是指在恶性肿瘤患者的有关标本中未能查见恶性细胞。假阴性

率一般为10%左右。因此，细胞病理学检查的阴性结果并不能否定临床医师的恶性肿瘤诊断。

2.假阳性：是指在非恶性肿瘤患者的有关标本中查见了“恶性细胞”。假阳 性率通常≤1%。因此，细胞病理学诊断应密切结合患者的临床资料，对于临床上未考虑为恶性肿瘤患者的阳性细胞学诊断应持慎重态度。(五)细胞病理学诊断报告书的基本内容

1．患者的基本情况项目，包括病理号、姓名、性别、年龄、送检医院／科室（住院／门诊）、住院号／门诊号、送检／收验日期等。

2.细胞病理学诊断的表述（参见上项“细胞病理学诊断报告表述的基本类型”）。

3.必要时或条件允许时，可酌情就细胞病理学诊断及其相关问题附加：①

某些建议（例如进行其他有关检查、再做活检、病理科外病理学会诊、密切随查/随访等）；②注释／讨论。

4.经过本病理科或/和科外病理会诊的病例，可将各方的细胞病理学诊断意见附于该例的细胞病理学诊断报告书中。(六)细胞病理学诊断报告书的书写要求

1.参照本章第一节（“常规活体组织病理学检查常规”）中“八

（二）”项的有关规定。

2.计算机图文打印的细胞病理学诊断报告书提供的细胞学图象应具有典型（代表）性，放大倍数适当。

(七)细胞病理学诊断报告书的发送

1.病理科自接受送检标本至签发细胞病理学诊断报告书的时间，一般情况 下为1～2个工作日。

2.因某些原因（包括特殊染色、免疫组化染色、疑难会诊等）不能如期签发细胞病理学诊断报告书时，应以口头或书面告知有关临床医师或患方，说明迟发报告书的原因。

3．病理科应有专人发送细胞病理学诊断报告书。住院患者的细胞病理学诊 断报告书应发送至有关临床科室；本院门诊患者和外院患者的细胞病理学诊断报告书的发送方法由各医院病理科自行制定。

4．细胞病理学诊断报告书的经收人员（包括患方人员）必须履行病理科规 定的签收手续。

5．已由病理科发出的细胞病理学诊断报告书被遗失时，一般不予补发；必 要时，经病理科主任同意可以抄件形式补发。

四、资料管理

细胞病理学检查的资料必须妥善管理，有关规定参见本章第五节。

五、会 诊

细胞病理学会诊是细胞病理学诊断过程的重要环节，有关规定参见本章第六节。

第四节 尸体剖检（尸检）的诊断常规

一、尸检的受理

(一)必须遵照国家有关规定受理尸检。

(二)受理尸检范围：①普通病理尸检；②涉及医、患争议的尸检（由卫生 行政主管部门指定的尸检机构实施）。

(三)受理尸检部门：具备独立尸检能力的①医院病理科，②医学院校的病理学教研室，③经医政部门注册的病理诊断中心。

(四)主持尸检（主检）人员：应是接受过尸检训练、具有中级以上专业职称的病理学医师或病理学教师。必要时，邀请法医参与尸检。

(五)申请或委托尸检方：①有关医院，②卫生行政部门，③司法机关，④死者的亲属或代理人，或⑤被受理尸检方认可的其他申请或委托方。

(六)申请或委托尸检方必须向受理尸检方递交：①死者的死亡证明，②有申请或委托方当事人签名、负责人签名和加盖委托单位公章的尸检申请书或委托书，③逐项认真填写的尸检申请书（包括死者的临床资料要点和其他需要说明的情况）。

(七)死者亲属或代理人签署说明尸检有关事项的《死者亲属或代理人委托 尸检知情同意书》（由受理尸检方制定），确认以下事项： 1．同意有关受理尸检机构对于死者进行尸检。

2．授权主持尸检人员根据实际需要确定尸检的术式、范围、脏器或组织的取留及其处理方式。

3．主持尸检人员负责遗体尸检后的体表切口缝合，不参与尸检后遗体的其 他安置事项。

4．明确新生儿和围生期胎儿尸检后的尸体处理方式。

5．同意对尸检过程进行必要的摄影、录像，并确认是否同意教学示教。6．尸检病理学诊断报告书可提供死者所患的主要疾病和死因；难以作出明 确结论时，可仅提交病变描述性尸检报告。7．尸检病理学诊断报告书发送给委托尸检方。(八)下列情况的尸检可不受理：

1．委托尸检手续不完备者（包括未按规定交纳尸检费用者）；

2．拒签《死者亲属或代理人委托尸检知情同意书》者（包括对于尸检的术 式、范围、脏器或组织的取留及其处理方式等持有异义从而影响尸检实施和尸检结论形成者）；

3．委托尸检方与受理尸检方就涉及尸检的某些重要问题未能达成协议者； 4.死者死亡超过48小时未经冷冻、或冷冻超过7日者；

5．疑因或确因烈性传染病死亡的病例，尸检方不具备相应尸检设施条件者； 6．因其他情况不能受理者。

二、尸检前的准备工作(一)尸检室环境的准备。

(二)尸检基本器材和工作服的准备。

(三)安排实施尸检的专业人员和技术人员。(四)将拟行剖验的尸体移送至尸检室。

(五)主持尸检人员确认尸检手续完备（死亡证明、尸检申请书或委托书、死者的临床资料要点等），并请死者亲属或委托代理人确认尸体。

(六)主持尸检人员认真阅读、熟悉有关死者的临床资料要点（必要时阅读死者的生前病历），了解申请或委托方对于尸检的要求和尸检时需要注意的问题。(七)进行尸检编号并登录于尸检登记薄上。

(八)尸检过程现场文字（或语音）记录、摄影或录象工作的准备。

三、尸检的卫生管理

(一)制订尸检室卫生管理制度并认真实施。

(二)尸检人员和尸检室内其他人员必须认真做好个人和工作环境的卫生防护。(三)疑为或确诊为烈性传染病死者的尸检，必须遵照传染病尸检的有关规 定进行操作。

(四)尸检结束后卫生处置

1．认真清洗尸检台和尸检室，并进行环境消毒。2．认真清洗尸检工作服和器械等，并进行消毒。3．按照有关规定认真处理尸检污物。4．尸检人员在专用卫生间内淋浴。

5．进行上述各项卫生处置过程中必须严防污染有关人员和尸检室内、外环境。

四、尸检的技术操作

尸检的技术操作规范参见第3章的第三节。

五、尸检组织的切片制备

尸检组织切片制备的技术操作规范参见第3章第一节。

六、尸检组织的病理学相关技术检查

尸检组织病理学相关技术检查的规范参见第4章。

七、尸检组织切片的光学显微镜检查和病理学诊断

(一)光镜检查切片，客观地描述和记录各系统、器官的病变要点；

(二)在综合镜检和巨检（肉眼检查）所见的基础上，结合死者生前的临床资料等形成尸检的病理诊断。

(三)有关镜检诊断的其他事项参见本章第一节的一

（六）项（“组织切片的光学显微镜检查和病理学诊断”）。

八、尸检档案资料(一)基本内容

1.一般资料：包括死者的尸检号、姓名、性别、年龄、籍贯、民族、出

生地、住址、死亡时间、尸检时间和地点、相关医院（临床科室、住院号／门诊号／急症号）、委托或申请尸检单位及主持尸检人员和助手等。2.尸检申请书或委托书。3.有关的临床资料。

4.由死者亲属或代理人签署的《死者亲属或代理人委托尸检知情同意书》。5.尸检所见（附有必要的图像资料）。包括：(1)对有关尸体及其死亡征象的确认。(2)体表检查所见。

(3)体腔（胸腔、心包腔、腹腔）检查所见。

(4)脏器检查所见：依序逐个描述各脏器的肉眼检查和光学显微镜检查所见。(5)特殊检查结果。例如毒物、病原生物学等检查（附有关检查报告）。

6.病理学诊断和尸检病理学诊断报告书副本（参见下项“尸检病理学诊断报告书及其签发”）。7.死亡原因。8.小结。

9．讨论。包括：

(1)主要疾病及其诊断依据、发生和发展特点。

(2)主要疾病／病变之间、主要疾病与继发／伴发疾病之间的相互关系。(3)从临床与病理相结合的角度，参考有关文献，进行讨论。

10.其他资料。包括照片及其底片、幻灯片、图表、临床病理讨论记录、参考文献和电子信息资料等。

(二)受理尸检单位，应积极实施尸检档案资料的计算机管理。

九、尸检病理学诊断报告书及其签发

(一)尸检病理学诊断报告书(简称尸检报告书或尸检报告)是关于尸检的正式病理学报告。

(二)尸检病理学诊断报告书的基本内容：①主要疾病（与死亡直接相关的疾病）；②继发疾病（与主要疾病密切相关的疾病）；③伴发疾病（与主要疾病无密切关系的疾病）。可酌情进行死因分析、小结和讨论。疾病诊断力求使用国际医学规范术语，并按各疾病的致死重要性和因果关系排序。

(三)尸检病理学诊断报告书必须由主检人员签名后发出。主检人员签名的字迹应能辨认。

(四)尸检病理学诊断报告书应一式两份（正本和副本），两份报告书具有

同等效力。报告书的正本随同其他尸检资料一并归档，报告书的副本发给委托尸检方。手书的尸检病理学诊断报告书应二联复写，必须文字规范、字迹清楚，不得涂改。

(五)尸检病理学诊断报告书通常在尸检后45个工作日内发出。由于病变复 杂或其他原因不能按时发出尸检病理学诊断报告书时，可酌情延迟发出并应向委托尸检方说明迟发原因。

十、尸检资料的管理

尸检资料必须妥善管理，有关规定参见本章第五节。

第五节 病理学检查资料的管理

一、概 述

(一)常规活检、手术中快速活检、细胞病理学检查和尸检等的文字资料（含电子信息资料）、非文字资料（组织的石蜡包埋块、切片等）以及其他相关资料均为有价值的医学资料，皆由受理病理学检查的病理科按照本规范规定的期限妥为保存。病理科必须设立病理档案资料室和制订病理档案资料管理制度（包括病理检查资料的归档、借用和归还手续等），并有专人管理。应积极实行病理学检查资料的计算机管理。

(二)各种病理学检查的文字资料应装订成册保存。

(三)据以做出常规活检、快速活检、尸检病理学诊断的原始组织学切片和

查见肿瘤细胞或可疑肿瘤细胞的玻片必须妥善保存。未查见恶性肿瘤细胞的玻片，于诊断报告书发出后保存2周。

二、患者查询病理学检查资料的期限(一)门诊患者为送检后15年。(二)住院患者为送检后30年。

三、活检、尸检大体标本的保存期限(一)活检：自签发病理学诊断报告书之日起保存2～4周，具体保存期限由 各医院自行规定。(二)尸检

1.普通病理尸检：自签发病理学诊断报告书之日起保存3个月。2.涉及医、患争议的尸检：按照尸检前有关各方签署的协议办理。

四、病理学检查资料的借用

(一)医院必须制订关于借用病理学检查资料的办法并严格实施。(二)关于患方借用病理组织学切片，应注意：

1．患方人员申请借用有关患者的活检切片、尸检切片时，应按照医院制定 的有关规定办理手续。

2．申请借用切片的患方人员必须：①出示本人身份证等有效证件并保留其复印件；②填写借片申请单并签名；③支付规定的借片押金（待归还切片时退还）。

3． 病理科据以作出诊断的原始切片一般不外借，通常借出（或售出）相关 病例的复制切片。复制切片借出（或售出）前，应确认该切片的病变与原切片相同或基本相同。

4． 患方借出的切片应妥善保存，必须在规定的期限内归还。患方借出的切 片若有破损、丢失等，应按规定支付赔偿金，并承担相应责任。

5．病理科因故不能向患方出借或出售有关切片时，由双方协商解决病理学会诊问题。病理科可酌情允许患方邀请外院的病理医师前来病理科阅片；有条件的单位可酌情进行远程病理会诊。

(三)关于患方借用细胞病理学玻片

1．一个病例的同一次检查有多张查见恶性肿瘤细胞的“阳性片”或“可疑 阳性片”时，可允许患方借用其中的一张。借用手续参见上项(二)。

2．一个病例仅有一张为查见恶性肿瘤细胞的“阳性片”或“可疑阳性片”时，该阳性片或可疑阳性片原则上不予外借。其会诊问题由双方协商解决。病理科可酌情允许患方邀请外院的病理医师前来病理科阅片。(四)关于借用检材组织的石蜡包埋块

1.活检和尸检检材组织的石蜡包埋块（简称蜡块）是无法复制的病理学检 查资料，属于诊断病理学的重要基础档案，原则上不外借。必要时，可由病理科向患方提供未经染色的切片（通称白片）。

3． 患方外借病理切片会诊时，受理会诊的病理科若确实需要有关病例病理 检材的蜡块，可由有关病理科双方协商解决。

第六节 病理学会诊

一、具有一定规模的病理科应定期举行科内病理会诊或读片讨论会。

二、积极推动建立地域性病理会诊中心。

三、加强临床－病理会诊。

四、应由具有高级职称的病理医师接受病理科内、外的病理学会诊。

五、接受外院的病理会诊时，由会诊的病理医师签发《病理学会诊咨询意见书》，并在该《意见书》上写明：“病理医师个人会诊咨询意见，仅供原病理诊断的病理医师参考”。由作出原病理诊断的病理医师自行决定是否采纳病理会诊咨询意见和采纳的程度。做出原诊断的病理科应将《病理会诊咨询意见书》的原件或其复印件贴附于有关患者的病理检查记录单上，一并归档。

六、加做相关技术检测方能作出诊断的会诊病例，会诊医师应在《意见书》中予以说明，并向患方进行适当解释。

七、对病理诊断时间较为长久病例的会诊，应考虑到做出原诊断时期的诊断病理学理论、技术水平、相应病变／疾病的定性诊断标准和原诊断病理科当时的客观条件。

八、有条件的病理科可开展远程病理会诊。

第七节 病理科的基本设施

一、病理科基本设施的指导原则

(一)保证病理科完成基本工作任务。(二)保护病理工作人员免受污染。(三)保护环境免受污染。

二、病理科的基本工作空间

(一)病理科的常规工作需要在下列的各自独立的房间内进行：

1．收发室（检材的接收、登记，病理诊断报告书的发放，病理资料查询等）2．巨检和取材室（检材的肉眼检查和切取组织块，贮存取材后的剩余检材）3．常规切片前的预处理室（组织块的脱水、透明和浸蜡）4．制片室（石蜡切片／冷冻切片／细胞学涂片的制做和染色）5．病理组织学诊断室

6．细胞病理学诊断（酌情附设组织穿刺室）7．病理会诊室 8．病理档案资料室

9．大体标本制作室和陈列室

10．尸检室及其配套空间（三级医院建立，包括准备室、尸检室、肉眼检查和取材室、更衣／淋浴室、标本储藏室等）11．储藏室 12．淋浴室 13．办公室

(二)较高技术层次的病理科还应设置： 1．特殊染色和免疫组织化学染色实验室 2．细胞遗传和分子病理学实验室

3．其他特殊检测实验室（例如超薄切片制备、电镜检测、细胞培养、流式细胞术和其他新技术实验室）

4．图书／电子信息／学术活动室 5．进修病理医师教室。

三、病理科常规活检和快速活检工作的基本设施(一)收发室 1． 办公设施

2． 紫外线消毒柜（用于活检申请单等消毒）3． 合于个人和环境防污染要求的上、下水系统 4． 其他相关设备

(二)病理标本巨检和取材室

1．便于清洗、消毒的屋顶、室壁和地面装修 2．室内紫外线消毒设备 3．室内高效通风设施

4．封闭式高效能通风柜厨(用于巨检和取材，应便于清洗、消毒，并安装足够照明和紫外线消毒设备)5．合于个人和环境防污染要求的上、下水系统（包括独立的污水排泄系统和污水处理池）

6．流水冲洗装置

7．冷水和热水供给系统

8．自动录音设备（酌情安装，用于记录医师巨检标本时的语言描述）9．标本储存柜（安装排风设备）10．隔离服装（消毒后使用）11．其他相关设备。

(三)常规切片的预处理室和常规/快速制片室

1．排放有毒物质的室内高效通风设施（用于组织块和石蜡切片的 人工脱水流程）

2．符合个人和环境防污染要求的上、下水系统（包括独立的污水排泄系统和污水处理池）

3．室内紫外线消毒设备

4．封闭式高效能通风柜厨（用于人工脱水流程）5．实验台

6．脱水设备：①人工脱水器具或/和②半自动或全封闭自动脱水机 7．组织块石蜡包埋机 8．石蜡切片机

*9．恒温冷冻切片机

*10．石蜡快速切片机 ［* 9和10：两项皆配备或配备一项］ #11．一次性切片刀及其配套部件

#12．切片刀和磨刀机 ［# 11和12：两项皆配备或配备一项］ 13．冰箱 14．恒温箱 15．烤箱

16．有关试剂和试剂柜 17．天平

18．染色用器具

19．普通光学显微镜（用于染色质量控制）20．其他相关设备

(四)特殊染色和免疫组织化学染色实验室

1．用于染色的实验室环境设施和染色的常规设备［参见上文：(三)常规切片的预处理室和制片室］

2．微波炉或其他抗原修复设备 3．有关试剂和试剂柜

4．自动免疫组化染色仪（具有一定规模的病理科，酌情）5．其他相关设备

(五)病理组织学诊断室和病理会诊室

1．双筒显微镜（每名病理医师配备一台）

*2．双头和／或多头显微镜（用于共览会诊和培训示教）

*3．计算机和打印机（酌情连接局域网，用于病理学检查资料的储存和调阅）*4．显微摄影设备，计算机图像分析、电子图像存储和放映设备 [* 2～4：具有一定规模的病理科配置] 5．远程会诊系统（酌情）6．其他相关设备(六)病理档案资料室

1．用于储存切片、蜡块和文字资料的柜具

2．计算机和打印机（酌情连接局域网，用于病理学检查资料的储存和调阅）3．秘书办公设施（具有一定规模的病理科）4．其他相关设备

(七)必要的专业参考书和基本的专业期刊（具有一定规模的病理科应设立 图书资料室）

(八)病理大体标本制作室和陈列室 1．制作病理大体标本的工具

2．用于陈列病理大体标本的展览柜（配备照明装置）3．其他相关设备

(九)办公室：必要的办公设备(十)储藏室：必要设施(十一)淋浴室：必备设施

四、细胞病理学检查工作的基本设施(一)肿物穿刺取材室：

1．便于清洗、消毒的屋顶、室壁和地面装修 2．室内紫外线消毒设备

3．用于实施穿刺术的检查床、椅 4．穿刺用器械和器械柜

5．穿刺用、急救用药物和药品柜 6．其他相关设备

(二)细胞学涂片制片室：

1．用于染色的实验室环境设施和常规设备［参见本节的三(三)项：“常规切片的预处理室和常规／快速制片室”］)2．可调速离心机

3．自动细胞病理学检查系统（具有一定规模的病理科，酌情）4．其他相关设备

(三)细胞病理学诊断室：参见本节的三(五)项（病理组织学诊断室和病理会诊室）。

(四)独立设置（不隶属于病理科）的细胞病理学科室：需要其他必要空间的基本设备（参见本节的 “

三、病理科常规和快速活检工作的基本设备”）。

五、尸检工作的基本设施(一)尸检准备室

1． 尸检专用器械和柜具 2． 参与尸检人员用隔离用衣物和消毒器物 3． 办公设施 4． 消毒设施

5． 其他相关设备(二)普通尸检室

1．便于清洗、消毒的屋顶、室壁和地面装修 2．室内紫外线消毒设备 3．室内高效通风设施

4．设计合理、适用的尸检台［具有合于个人和环境防污染要求的上、下水系统（包括独立的污水排泄系统和污水处理池），便于清洗、消毒。］ 5．适宜的照明装置 6．冷水和热水供给系统

7．阶梯式看台（示教用）8．其他相关设备

(三)传染病用尸检室：严格按照关于传染病管理法规的要求建设。(四)更衣／淋浴室：必备设施

(五)病理标本巨检和取材室［参见本节的三(二)项：“病理标本巨检和取材室”］

(六)常规切片室：隶属于病理科的尸检室可不另设（参见本节的三(三)项：“常规切片的预处理室和常规／快速制片室”）(七)标本储藏室：必要设施

六、病理学相关技术实验室的基本设施

应用特殊染色和组织化学、免疫组织化学、塑料包埋组织切片制备、电子显微镜超微病理诊断检材制备、图像分析、流式细胞分析（FCM）、聚合酶链反应（PCR）、细胞和分子细胞遗传学、病理学摄影技术和其他新开发、引进的病理学相关技术的病理科，应个根据有关技术要求，建立具有必备基本设施的实验室。

《临床技术操作规范•病理学分册》/ 第三章 病理学基本技术规范

第一节 病理组织学诊断检材的制备技术

一、组织的固定

㈠凡需要进行病理组织学检查的标本（器官或组织），于离体（活体或尸体）后，应尽快置放（浸泡）于装有足够量固定液的容器中固定。固定液量应为被固定标本体积的5~10倍。置放标本的容器大小视标本和固定液的体积而定，应适当大一些。临床科室切取的标本置放于容器中固定后，应尽快送交病理科继续固定。未能及时、充分固定的干涸或腐败标本不能再进行固定和用于制做切片。

㈡常规固定液为4%中性甲醛（10%中性福尔马林），应预先多量配制贮存，以备随时使用。小标本的固定时间为4~6小时，大标本为18~24小时或更久。㈢根据病理学特殊检查（特殊染色和组织化学染色、免疫组织化学染色和原位核酸分子杂交染色、电镜观察等）的需要，应选用其他适宜的固定液进行固定［参见后述的“㈦固定液的常用种类和制备”］。㈣器官、组织固定的基本方法 ［另参见本章第四节（病理标本的肉眼检查和组织学切片取材技术）］

1．食管、胃、肠、胆囊、膀胱等空腔器官：依规范方法剪开后，按其自然状态平铺于硬纸板上（重点暴露黏膜面或内表面的病变处），并用大头针将标本边缘处固定于纸板上，然后放入4%中性甲醛中固定（黏膜面或内表面朝向容器的液面，并覆盖薄层脱脂棉）。

2．肝、脾：由器官背面，沿其长轴每间隔1.5~2.0cm纵向平行剖开，切成数片。将每片肝或脾轻轻地平放于装有4%中性甲醛的容器中，容器底面衬以脱脂棉。应避免标本弯曲和相互间的叠压。

3．肺叶：放入固定液中的肺叶漂浮于液面，需在肺表面覆盖薄层脱脂棉。必要时从支气管注入适量4%中性甲醛。

4．肾：沿肾外缘中线朝肾门方向作一水平切面（深达于肾盏），再行固定。5．淋巴结：先用4%中性甲醛固定1小时后，再沿其长轴切成数片（厚2 ~3mm），继续固定。

6．骨组织：先锯成小片（若是长骨应作横向锯片），在4%中性甲醛中固定24小时后，再进行脱钙。

7．微小组织或液体沉淀物：先用拭纸或滤纸妥为包裹（需用大头针扎牢），然后放入专用小盒内进行中性4%甲醛固定，以防检材遗失。

8．凡进入固定程序的标本必须连带其正确无误的病理检验号（病理号）。㈤多数固定液对人体有害，需要防护，必须在封闭的通风条件下进行操作。㈥组织块的切取和固定：①由较大标本切取用于制作切片的组织块（取材）时，应与标本的断面平行，组织块厚度一般为0.3 cm(不应>0.5cm)，面积一般在1~1.5×1~1.5以内。②切取组织块的形状，在充分包括肉眼病变的前提下尽量规则些（例如方形、矩形、三角形等）；由一个标本切取的多块组织的形状有所不同，便于蜡块与其相应切片的核对。③固定组织块的固定液量，一般应为组织块总体积的5~10倍以上。④室内常温（25℃左右）下的固定时间为3~24小时；低温（4℃）下的固定时间应延长。⑤固定组织块的容器要大一些。⑥组织块固定期间需要间断地轻摇或搅动固定液以利于固定液的渗入。㈦常用固定液

1．4%中性甲醛（10%中性福尔马林）固定液

甲醛（40%）100 ml 无水磷酸氢二钠 6.5g 磷酸二氢钠 4.0g 蒸馏水 900ml 2．乙醇－甲醛（酒精－福尔马林，AF）固定液 甲醛（40%）100ml 95%乙醇 900ml ［说明］一般组织块经乙醇－甲醛固定1～2小时后，即可移入95%乙醇内脱水。

3．Carnoy固定液 无水乙醇 60ml 氯仿 30ml 冰醋酸 10ml ［说明］组织化学染色的常用固定液，组织经Carnoy液固定1～2小时后，即可移入无水乙醇中脱水。4．Zenker固定液 升汞 5.0g 重铬酸钾 2.5g 硫酸钠 1.0g 蒸馏水（加至）100ml ［说明］配制本液时，先将升汞溶于蒸馏水中、加温至40～50℃溶解后，再加入重铬酸钾，最后加入硫酸钠，贮存待用。使用前加入5ml冰醋酸，混合。组织块需固定12~24小时。切片染色前，需进行脱汞沉淀处理。5．Bouin固定液

饱和苦味酸水溶液（约1.22%）75ml 甲醛（40%）25ml 冰醋酸 5ml ［说明］本液临用时配制。组织块置于Bouin液固定12～24小时即可（小块组织只需固定数小时）。经Bouin液固定的组织被苦味酸染成黄色，可用水洗涤12小时后进入乙醇脱水（兼脱色）。不必将组织中的黄色除净（残存于组织中的苦味酸无碍染色）

6．过碘酸－赖氨酸－多聚甲醛固定液（PLP）A液：赖氨酸 1.827g 蒸馏水 50ml 0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)50ml B液：8%多聚甲醛水溶液 100ml ［说明］本液临用时配制：取A液3份、B液1份，混合后，加入过碘酸钠，使液体终浓度为2%。组织块在4℃下固定36~54小时。本液对细胞结构和抗原性保存较好。

7．B5（醋酸钠－升汞－甲醛）固定液 无水醋酸钠 1.25g 升汞 6.0g 蒸馏水 90ml ［说明］将以上物质混合、溶解，使用前加入甲醛10ml。本液多用于固定淋巴组织。染色前应进行脱汞沉淀处理。如不加甲醛称为B4固定液（蒸馏水为100 ml）。

8．丙酮固定液

冷丙酮（4℃）固定液用于酶组织化学染色。细胞标本的免疫组化染色也常用冷丙酮固定10分钟。

二、常规石蜡包埋组织切片（常规切片）的制备

㈠组织块依序进行：①水洗，②脱水，③透明，④浸蜡，⑤包埋和⑥切片。㈡组织切片制备及其HE染色过程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蜡等为 易燃、有毒物，必须专人管理，2m以内不得有明火，局部环境应有良好的通风和消防设施。

㈢常规切片的手工操作（步骤次序和各步骤的持续时间）1．水洗：用流水冲洗已经固定的组织块30min。2．脱水（常温下）

（1）乙醇－甲醛（AF）液固定 60~120min（2）80%乙醇 60~120min（3）95%乙醇Ⅰ 60~120min（4）95%乙醇Ⅱ 60~120min（5）无水乙醇Ⅰ 60~120min（6）无水乙醇Ⅱ 60~120min（7）无水乙醇Ⅲ 60min ［注意事项］①未经充分固定的组织不得进入脱水程序。②用于脱水的试剂容积应为组织块总体积的5～10倍以上。③自低浓度乙醇向高浓度乙醇逐级移进脱水。④脱水试剂应及时过滤、更换（500ml乙醇可用于500个组织块脱水；加入硫酸铜的无水乙醇变蓝时，提示需要更换）。⑤较大组织块的脱水时间长于较小者，应将两者分开进行脱水。⑥组织置于无水乙醇内的时间不宜过长（以免硬化）。⑦丙酮脱水性能强，会使组织块过缩、硬脆，不宜用以替代无水乙醇。3．透明

（1）二甲苯Ⅰ 20min（2）二甲苯Ⅱ 20min（3）二甲苯Ⅲ 20min ［注意事项］①二甲苯的容积应为组织块总体积的5～10倍以上。②组织块在二甲苯中透明的时间不宜过长（以防组织硬、脆），并依不同种类组织及其大小而异；组织呈现棕黄或暗红色透明即可。③二甲苯应及时过滤、更换。④组织经二甲苯适度处理后不显透明时，常提示该组织的固定或脱水不充分，应查找原因并妥善处理。4．浸蜡

（1）石蜡Ⅰ（45~50℃）60min（2）石蜡Ⅱ（56~58℃）60min（3）石蜡Ⅲ（56~58℃）60min ［注意事项］①熔化石蜡必须有专人负责，必须在熔蜡箱内或水浴中（70 ℃）进行，不得用明火加温。②熔蜡的容积应为组织块总体积的5～10倍以上。③组织块经二甲苯适度透明后方可转入浸蜡过程，应尽可能减少将透明后组织块表面的二甲苯带入熔蜡中。④浸蜡时间适宜，过短时浸蜡不充分（组织过软），过长时组织硬脆。⑤熔蜡应及时过滤、更换。5．包埋

（1）先将熔化的石蜡倾入包埋模具中，再用加热的弯曲钝头镊子轻轻夹取已经过浸蜡的组织块，使组织块的最大面或被特别指定处的组织面向下埋入熔蜡中；应将组织块平正地置放于包埋模具底面的中央处；包埋于同一蜡块内的多块细小组织应彼此靠近并位于同一平面上；腔壁、皮肤和黏膜组织必须垂直包埋（立埋）。

（2）将与组织块相关的病理号小条置入包埋模具内熔蜡的一侧。

（3）待包埋模具内的熔蜡表面凝固后，即将模具移入冷水中加速凝固。

（4）从包埋模具中取出凝固的包埋蜡块（简称蜡快），用刀片去除组织块周围的过多石蜡（组织块周围保留1~2mm石蜡为宜）。将包埋蜡块修整成为规则的正方形或长方形。

（5）将病理号小条牢固地烙贴在蜡块一侧（编号应清晰可见）。（6）把修整好的蜡块烙贴在支持器上，以备切片。（7）使用包埋机的方法按有关厂商的说明书操作。（8）注意事项

①应将组织块严格分件包埋。包埋时一定要首先认真核对组织块的病理号（包括亚号）、块数和取材医师对包埋面的要求，准确地包入相应的病理号小条。发生包埋差错时，必须立即与取材医师和病理科当班负责人取得联系，及时处置。

②必须严防各种异物污染，勿将无关组织（包括缝线、纸屑或其他异物（尤其是硬质异物）埋入蜡块内。

③包埋过程要操作迅速，以免组织块尚未埋妥前熔蜡凝固。

④包埋用的熔蜡应纯净，熔点适宜。浸蜡Ⅰ用软蜡（熔点为45~50℃），浸蜡Ⅱ、Ⅲ和包埋用蜡均用硬蜡（熔点为56~58℃）。⑤包埋用熔蜡使用前应将先静置沉淀、过滤。

⑥熔蜡时不得使用明火，以防燃烧。包埋用熔蜡的温度应<65℃；包埋用的镊子不可加温过高，以免烫伤组织。6．切片

（1）切片刀或一次性切片刀片必须锋利。使用切片刀时，必须精心磨备（在低倍显微镜下确认刀刃无缺口）；使用一次性切片刀片时，应及时更新。（2）载玻片必须洁净、光亮。

（3）将切片刀或刀片安装在持刀座上（以15°为宜）。

（4）将蜡块固定于持支持器上，并调整蜡块和刀刃至适当位置（刀刃与蜡块表面呈5°夹角）。

（5）细心移动刀座或蜡块支持器，使蜡块与刀刃接触，旋紧刀座和蜡块支持器。

（6）修块（粗切）：用右手匀速旋转切片机轮，修切蜡块表面至包埋其中的组织块完整地全部切到。修块粗切片的厚度为15～20μm。［注意：对于医嘱再次深切片（特别是在原切片中发现了有意义病变而进行的深切片），应尽量少修块，以尽量好地获得有关病变的连续性。］

（7）调节切片厚度调节器（一般为4~6μm），进行切片，切出的蜡片应连续成带，完整无缺，厚度适宜（3～5μm）、均匀，无刀痕、颤痕、皱折、开裂、缺损、松解等。

（8）以专用小镊子轻轻夹取完整、无刀痕、厚薄均匀的蜡片，放入伸展器的温水中（45℃左右），使切片全面展开。［注意：必须水温适宜、洁净（尤其是水面）；每切完一个蜡块后，必须认真清理水面，不得遗留其它病例的组织碎片，以免污染。］

（9）将蜡片附贴于涂有蛋白甘油或经3－氨丙基－三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxy silane，APES)处理过的载玻片上（HE染色时酌情使用，可省略，必要时）。蜡片应置放在载玻片右（或左）2/3处的中央，留出载玻片左（或右）1/3的位置用于贴附标签。蜡片与载玻片之间无气泡。

（10）必须立即在置放了蜡片的载玻片一端（待贴标签的一端），用优质记号笔或刻号笔准确、清楚标记其相应的病理号（包括亚号）。［注意：必须确保载玻片上的病理号与相关组织石蜡包埋块的病理号完全一致，不得错写或漏写病理号。］

（11）将置放了蜡片的载玻片呈45℃角斜置片刻；待载玻片上的水分流下 后，将其置于烤箱中烘烤（60～62℃，30～60min），然后即可进行染色。（12）注意事项 ①组织块固定、脱水、透明和浸蜡的质量直接影响切片制备。切片过程中遇到的困难首先应注意从切片前的上述各环节中寻找原因。

②切片机的质量是制备优质切片的重要前提。要使用质量好的切片机，规范地切片，精心维护切片机。

③经由内窥镜、穿刺等获取的细小组织，应间断性连续切片多面（一般至少制备6张蜡片，必要时制备更多张）。需作特殊染色、免疫组化染色等的病例，可预制蜡片备用。

④切片人员应细心操作，防范被切片刀具割伤。

㈣常规切片的自动组织处理机操作（步骤次序和各步骤的持续时间，总计需要14小时）

1．乙醇－甲醛（AF）固定液 2×60min 2．95%乙醇Ⅰ 2×60min 3．95%乙醇Ⅱ 2×60min 4．无水乙醇Ⅰ 60min 5．无水乙醇Ⅱ 60min 6．二甲苯Ⅰ 30min 7．二甲苯Ⅱ 30min 8．石蜡Ⅰ 30min 9．石蜡Ⅱ 60min 10．石蜡Ⅲ 90min 11．包埋

（1）手工常规包埋：参见上述的“㈠手工操作”项。（2）用组织包埋机时，按有关厂商说明书的规定操作。13．切片：参见上述的“㈠手工操作”项。14．注意事项

（1）必须按有关说明书的规定，使用和维护自动组织处理机、包埋机、磨刀机、封盖玻片机等仪器等。

（2）要严防因停电、机械故障等造成的组织块损坏。一旦发生此类事故，必须及时向科主任报告，尽快采取应急措施妥善处置。

（3）使用自动组织处理机时：①合理设定的运行时间（充分利用夜间）。②固定、脱水的环境温度不得>30℃。③乙醇、二甲苯和熔蜡的容积，要大于组织块总体积的5～10倍以上，并应经常过滤，保持清洁；应经常检查试剂的浓度，及时更新。④对于多量组织块，可按其大小分批进行处理；小块组织可适当缩短处理时间。

三、快速石蜡包埋组织切片的制备 ㈠煮沸固定切片法

1．固定：切取大小适宜（厚度<2mm）的组织块，尽快置入装有5~8ml 10%中性4％甲醛的试管中煮沸1min，然后已入冷水中。2．脱水

（1）将已经煮沸固定的组织块取出，用刀片将其厚度修切至<1.5mm，随 即置入盛有5~8 ml丙酮的试管中，煮沸2 min，然后将丙酮倾弃。

（2）再向该试管中重新加入5~8 ml丙酮并煮沸2min。如此重复3~4次。3．浸蜡：将已经丙酮脱水的组织块由试管中取出，用吸水纸去除其表面液体，随即置入75~80℃熔化的石蜡中，待组织块下沉、不再出现气泡时（约需30s），即可包埋。4．包埋、切片和染色。

（1）用热镊子将预制的蜡块表面熔化，埋入已经浸蜡的组织块。

（2）待埋入组织块的蜡块表面凝固后，即用载玻片轻压蜡块表面片刻，使 蜡块表面平整。

（3）将蜡块置入冰水中，使其变硬。

（4）迅速切片，裱片后用吸水纸去除载玻片上的水分。（5）将载玻片用火焰烘干（勿距火焰太近）。（6）迅速进行HE染色。5．注意事项

（1）为了尽量缩短制片时间，必须预先作好有关准备工作，备齐取材用具、试管、固定液、丙酮、酒精灯、火柴（或其他引火器）、包埋用蜡块、载玻片和染色试剂等，放在固定部位待用。

（2）全部制片过程一般在20~25min内完成。

（3）制片后剩余组织块应作常规石蜡包埋切片染色，进一步诊断。（4）含脂肪较多的组织，须经多次丙酮处理。

（5）用于组织固定、脱水、透明的试剂和浸蜡用的石蜡应及时过滤、更换。（6）丙酮、乙醇、二甲苯等为易燃物，进行上述各项流程时，2m距离内不得存在明火。加温脱水和浸蜡过程必须应用隔水温箱，不得使用干烤箱操作。㈡超声波快速处理仪石蜡切片法（参照有关厂商的说明书操作）。

四、冷冻组织切片的制备

㈠应用恒冷箱切片机制备切片：是目前最适用方法。恒冷箱切片机种类较多，应严格按有关厂商的说明书操作。用于切片的标本必须未曾固定。㈡应用开放式冷冻切片机制备切片 1．二氧化碳制冷切片

（1）将组织块放在冷冻台上，滴加OCT或羟甲基纤维素液于组织块周围（将组织块包埋），使固定在切片机上的切片刀接近组织块表面。

（2）间断开放液态二氧化碳桶的开关，喷冻组织块和切片刀，使组织块冻结和切片刀制冷。

（3）迅速移动切片刀进行切片：先将组织块修平，然后调节厚度至8~12μm处进行切片。

（4）用毛笔将切片展开，贴附于载玻片上，稍干后，置于冷冻切片固定液中固定1min，随即进行HE染色。也可用毛笔将切片托入水中，再用玻璃弯针将切片移至染色皿中进行染色。

（5）组织块也可先在4%中性甲醛中煮沸固定1min，水洗后再行冷冻切片。2．半导体致冷切片

（1）切片刀与持刀器之间要间隔一层云母片或硬纸片。将冷刀致冷器粘在刀面上。

（2）将组织冷冻台安装在半导体切片机上。

（3）将冷冻台和切片刀致冷器上的导线连接在控制台直流电源上（注意：正负电极不可接反）。

（4）连接致冷器的冷却水管并开始放水，然后开启电源；冷却水管中的水流量不宜过大，在使用过程不得断水。

（5）调整冷冻温度调节器，至切片刀和冷冻台呈现霜冻。（6）将新鲜组织块或已固定的组织放在冷冻台中央，滴加水或OCT，或用水调成糊状的甲基纤维素于组织块周围（将组织块包埋）。（7）待组织块冷冻适当后，进行切片。

（8）对于未经固定的新鲜组织，用毛笔将制作满意的切片展平，立即裱贴于盖玻片或载玻片上，待冷冻的切片刚要融化时，立即将其置于冷冻切片固定液中固定1min。对于已经固定的组织块，可用毛笔将制作满意的切片托入水中，再用玻璃弯针将切片移至染色皿中进行染色。

（9）切片完毕后，先关闭电源，再关闭冷却水，待冰霜融化后擦干机器，加罩。

3．甲醇致冷切片（按有关厂商的仪器说明书操作）。4．氯乙烷致冷切片

（1）将新鲜的或已经固定的组织块置于支持器中央，加少许水或OCT。

（2）连续喷射氯乙烷于组织块上，待组织块冻结后，改为间歇喷射，使冻结适度，立即切片。使用氯乙烷时应注意防火、防爆。

（3）进行组织切片的裱贴、固定和染色（与上述方法相同）。㈢注意事项

1．制作冷冻切片所需的试剂和设备等应处于随时可供使用状态。

2．切取的组织块大小适宜（厚度<2mm），并尽快置于冷冻组织切片机上制备切片。

3．调节冷冻程度，试切合适时便迅速切片。冷冻不足无法切片，冷冻过度 切片易碎。

4．冷冻切片固定液（1）乙醚-乙醇液

无水乙醚 1份 95%乙醇 1份

（2）乙醇-冰醋酸液

95%乙醇 100ml 冰醋酸 3～5滴

五、脱钙方法

骨和其他钙化组织，通常需要脱去钙盐后进行切片。骨组织脱钙前需先行固定。

㈠常规脱钙法：

1． 将骨组织锯成薄片（约1×1×0.3cm）。2． 在AF中或4％中性甲醛中固定6～12h。

3． 将骨片置于5%硝酸（急需时可置于37℃温箱）中脱钙，至用针轻刺可 入时为止，约需12~24h（小块骨组织脱钙仅需2~3h），其间可更新脱钙液2～3次。

4． 流水冲洗1~2h。

5． 移入5%甲明矾液，2~4h。6． 流水冲洗2~3h。7． 按常规脱水。8．石蜡包埋。㈡电解脱钙法：

将骨片置于装有8%硝酸和10%甲酸混合液的电泳槽（有盖的方形玻璃标本 缸或烧杯）内的阳极处，6V直流电源下持续电解30min~3h，至用针轻刺可入时为止。

㈢骨髓组织脱钙：可浸泡于苦味酸乙醇饱和液（占85%）、甲醛（占10%）和冰醋酸（占5%）的混合液中（同时进行固定和脱钙）。㈣注意事项

1．骨片等脱钙组织的厚度适宜。

2．脱钙组织与脱钙液的体积比>1:30。

3．脱钙过程中应不时摇动，多次更换脱钙液。4．脱钙时间不可过长。

5．微波处理可加速脱钙过程。

6．脱钙后的组织必须用流水充分冲洗。

7．用于包埋的石蜡硬度适中（不要过软或过硬）。

六、苏木素－伊红（HE）染色

HE染色是应用最广泛的组织病理学常规染色技术。㈠染色程序

1．石蜡切片HE染色（常规HE染色）

（1）二甲苯Ⅰ 5～10min（2）二甲苯Ⅱ 5～10min（3）无水乙醇Ⅰ 1～3min（4）无水乙醇Ⅱ 1～3min（5）95%乙醇Ⅰ 1～3min（6）95%乙醇Ⅱ 1～3min（7）80%乙醇 1min（8）蒸馏水 1min（9）苏木素液染色 5～10min（10）流水洗去苏木素液 1min（11）1%盐酸-乙醇 1～3s（12）稍水洗 1～2s（13）返蓝（用温水或1%氨水等）5～10s（14）流水冲洗 1～2min（15）蒸馏水洗 1～2min（16）0.5%伊红液染色 1～3min（17）蒸馏水稍洗 1～2s（18）80%乙醇 1～2s（19）95%乙醇Ⅰ 2～3min（20）95%乙醇Ⅱ 2～3min（21）无水乙醇Ⅰ 3～5min（22）无水乙醇Ⅱ 3～5min（23）石炭酸-二甲苯 3～5min（24）二甲苯Ⅰ 3～5min（25）二甲苯Ⅱ 3～5min（26）二甲苯Ⅲ 3～5min（27）中性树胶封固

注：①（12）和（13）项可省去，但（14）的冲水时间需延长至10～15min（细胞核显示更清晰）。

②（23）项可用无水乙醇代替；北方地区可省略。2．冰冻切片HE染色

（1）冰冻切片固定 10～30s（2）稍水洗 1～2s（3）苏木素液染色（60℃）30～60s（4）流水洗去苏木素液 5～10s（5）1%盐酸-乙醇 1～3s（6）稍水洗 1～2min（7）返蓝（用温水或1%氨水等）5～10s（8）流水冲洗 15～30s（9）0.5%伊红液染色 1～2min（10）蒸馏水稍洗 1～2min（11）80%乙醇 1～2min（12）95%乙醇 1～2min（13）无水乙醇Ⅰ 1～2min（14）无水乙醇Ⅱ 1～2min（15）石炭酸-二甲苯 2～3min（16）二甲苯Ⅰ 2～3min（17）二甲苯Ⅱ 2～3min（18）中性树胶封固

注：①（7）和（8）项可省去，但（9）的冲水时间需延长至10～15min（细胞核显示更清晰）。

②（15）项可用无水乙醇代替；北方地区可省略。

㈡染色结果：细胞核呈蓝色，细胞浆、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈不同程度的红色。钙盐和细菌可呈蓝色或紫蓝色。㈢染色注意事项

1．切片染色前，应彻底脱蜡。

2．用含有升汞液体固定的组织，其切片染色前应先脱去汞盐：（1）石蜡切片脱蜡至水洗

（2）Lugol液 20min（3）流水冲洗 5min（4）95%乙醇 10min（5）水洗 1min（6）5%次亚硫酸钠水溶液 5min（7）流水冲洗 5min（8）显微镜观察除汞满意后，转入HE染色 3．脱除福尔马林色素（必要时）：（1）石蜡切片脱蜡至水洗

（2）1%NaOH(1ml)与80%乙醇（99ml）混合液 10min（3）流水冲洗 5min（4）转入HE染色

4．严格执行HE染色流程，用显微镜控制细胞核的苏木素染色质量。HE染片应着色鲜艳，红、蓝分明，对比清晰。5．载玻片自二甲苯中取出后，应立即用洁净、光亮的盖玻片和稠度适宜的中性树胶湿封载玻片。封盖处内无气泡，外无溢胶。封片时必须进行操作人员和局部环境的二甲苯污染防护。不应将组织切片烤干或风干后再行封片。

6．必须在载玻片的一端牢贴标签。标签上应印有病理科所在的医院名称。标签上应清楚显示有关的病理号及其亚号；标签上的病理号应准确无误，无涂改。7．制片完成后，技术人员应对切片与其相应的病理学检查记录单或取材工作记录单认真进行核对；确认无误后，将制备好的切片连同相关的活检申请单/活检记录单以及取材工作单等一并移交给有关的病理医师；交接双方经核对无误后，办理移交签字手续。

8．石蜡切片-HE染色的优良率（甲、乙级切片所占的比率）应≥85%。石蜡切片-HE染色质量的基本标准列于附表。

9．制片工作一般应在取材后2个工作日内完成（不含进行脱钙、脱脂等需要特殊处理的标本）。

10．制片过程出现意外情况时，技术室人员应及时向病理医师和科主任报告，设法予以补救。

附表 常规石蜡包埋-HE染色切片质量的基本标准

优 质 标 准

满 分 质 量 缺 陷 减 分

⒈组织切面完整，①组织稍不完整：减1～3分 ②不完整：减4～10分

内镜咬检、穿刺标本切面数 10 ③未达到规定面数：减5分

⒉切片薄(3～5μm)，厚薄均匀 10 ①切片厚(细胞重叠)，影响诊断：减6～10分

②厚薄不均匀：减3～5分

⒊切片无刀痕、裂隙、颤痕 10 ①有刀痕、裂隙、颤痕，尚不影响诊断：减2分

②有刀痕、裂隙、颤痕，影响诊断：减5分

⒋切片平坦，无皱褶、折叠 10 ①有皱褶或折叠，尚不影响诊断：各减2分

②有皱褶折或折叠，影响诊断：各减5分

⒌切片无污染 10 有污染：减10分

⒍无气泡（切片与载玻片间/ 10 ①有气泡：减3分 盖片与切片、载玻片间），②胶液外溢：减3分

盖片周围无胶液外溢

⒎透明度好 10 ①透明度差：减1～3分

②组织结构模糊：减5～7分

⒏细胞核与细胞浆染色对比清晰 10 ①细胞核着色灰淡或过蓝：减5分

②红(细胞浆)与蓝(细胞核)对比不清晰：减5分

⒐切片无松散，裱贴位置适当 10 ①切片松散：减5分

②切片裱贴位置不当：减5分

⒑切片整洁，①切片不整洁：减3分

标签端正粘牢，编号清晰 10 ②标签粘贴不牢：减3分

③编号不清晰：减4分

合 计 100

切片质量分级标准： ①甲级片： ≥90分（优）

②乙级片：75～89分（良）

③丙级片：60～74分（基本合格）

④丁级片： ≤59分（不合格）

㈣HE染色试剂的配制 1．苏木素染液

（1）Harri苏木素染液

苏木素 1g 无水乙醇 10ml 硫酸铝钾 20g 蒸馏水 200ml 氧化汞 0.5g 冰醋酸 8ml 先用无水乙醇溶解苏木素，用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾；然后将该两液合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌溶液至深紫色，随即用冰水冷却，恢复至室温后过滤备用。使用前加入冰醋酸并混匀、过滤。

（2）Gill改良苏木素液

苏木素 2g 无水乙醇 250ml 硫酸铝钾 17g 蒸馏水 750ml 碘酸钠 0.2g 冰醋酸 20ml 先用无水乙醇溶解苏木素，用蒸馏水溶解硫酸铝钾；然后将该两液混合，再依次加入碘酸钠和冰醋酸。使用前过滤。

（3）Mayer改良苏木素液

A液：苏木素 2g 无水乙醇 40ml B液：硫酸铝钾 100g 蒸馏水 600ml 将苏木素溶于无水乙醇中（A液）；稍加热，使硫酸铝钾溶于蒸馏水中（B液）。将A液与B液混合后煮沸2min，再用蒸馏水补足至600 ml，加入400mg碘化钠充分混匀。染液呈紫红色。2.盐酸－乙醇分化液

浓盐酸 1 ml 70%乙醇 99 ml 3．伊红液

（1）0.25～0.5%伊红Y水溶液

伊红Y 0.25～0.5 g 蒸馏水 100 ml 冰醋酸 1滴

（2）0.5%伊红Y-氯化钙水溶液

伊红Y 0.5 g 蒸馏水 100 ml 无水氯化钙 0.5 g（3）0.25～0.5%伊红Y-乙醇溶液。

伊红Y 0.25~0.5 g 80%乙醇 100 ml 4．石炭酸-二甲苯混合液

石炭酸 1份 二甲苯 3份 第二节 细胞学诊断检材的制备技术

一、细胞涂片、组织印片和压片的制备

（一）涂片质量的基本要求

1．将检材涂布于载玻片的右（或左）2/3处，另1/3部位粘贴标签。2．单向涂布检材，避免细胞变形。3．均匀涂布检材，涂片厚薄适当。

4．红细胞过多的涂片，可酌情进行溶解红细胞处理。

（二）涂片方法

1．涂抹法：用棉签或针头将标本单向、均匀地涂抹于载玻片上。2．拉片法：将一滴检材置于一张载玻片上，再用另一张载玻片叠加其 上并予轻压，再将该两张载玻片朝反向拉动，从而获得两张涂片。3．推片法：将一滴检液置于载玻片的右端，再用另一张窄边光滑的载

玻片作为推片，并以与滴液载玻片成40°夹角、自右向左匀力推动检液，形成涂片。

（三）痰涂片的制作

1．送检的痰液应是由肺内咳出，最好是清晨空腹时自肺内深咳出的痰液。2．核查无误的收验痰液，应立即制作涂片（通常为2～3张）。3．用细签或无钩镊子挑取痰液置于载玻片上，并左右往复薄涂，随即投入固定液中。

4．痰液中呈现下列性状的成分可能含有癌细胞，应注意挑取制作涂片：①血丝；②灰白色痰丝（形如白色细线，微细螺旋状，牵引时可伸长）；③透明痰液（可拉成较长细丝）。［及时在细胞学检查申请单上记录痰液性状］ 5．检查痰液中的肿瘤细胞，一般应连续送检3次。

（四）黏膜、皮肤表面刮取（刷取、拉取）物和分泌物的涂片的制作

1．阴道排出物、子宫颈刮取物涂片：通常由妇产科医师将已制作、固定后的涂片送交病理科检查。［注意由子宫颈外口上皮移行带刮取细胞涂片］

2．支气管镜、胃镜等内腔镜的黏膜刷取物涂片（黏膜刷片）：刷片通常由内腔镜医师制作、固定后送交病理科检查。

3．食管、胃拉网涂片：由食管拉出的套网气囊适量放气后，将气囊套网在载玻片滚动涂片，尤应将套囊上血丝、灰白色物制作涂片；涂片通常由有关临床医师将已制作、固定后的刷片送交病理科检查。套网中的小块组织可用来制作石蜡包埋切片。

4．眼、耳、鼻、咽、口腔、皮肤等处病变（溃疡性病变等）的分泌物涂片。

（五）液体涂片的制作

液体标本（检材）包括乳头溢液、胸水、腹水、尿液、胃液、脑脊液、穿

刺液、冲洗液、灌注液等。除乳头溢液外，其他液体检材一般均应先行离心（2000r/min，10～20min）后，取其沉淀物制作涂片；液体检材也可用细胞涂片离心机（cytospin）直接制作细胞涂片。制作好的涂片应立即固定和染色。［及时在细胞学检查申请单上记录液体标本的性状和数量］

液体标本的离心沉淀物较多时，将制作涂片后剩余的沉淀物固定于4％中性甲醛中1h，然后用檫镜纸或绸布将其包裹，制作石蜡包埋切片。1．乳头溢液：直接滴于载玻片上制作涂片。

（1）患者乳腺触及肿物时：用手指自肿物远方沿乳腺导管引流方向轻力按 模挤压，获取溢液，宜取中段溢液和血性溢液涂片。

（2）患者乳腺未触及肿物时：可自乳晕周围向乳腺外周轻力按模挤压，获取溢液。

2．胸水和腹水

（1）由患者体内抽取的胸水或腹水应尽快送交病理科验收，检液量以200～500ml为宜。因故（例如远途）延时送达时，需在标本中加入40%的甲醛（加入量为送检胸水、腹水量的1/5），或加入等量的50％乙醇－生理盐水。

（2）胸水、腹水的离心：采取容器底部的液体10ml（包括可能存在的沉淀物），移入离心管内进行离心。

（3）离心后，倾去全部上清液，将离心管底部含有沉淀物的液体摇匀并用吸管吸出适量，滴注于载玻片上，制作涂片。3．尿液

（1）制作方法同胸、腹水。

（2）尿液含有胶状物时，应先将其除去。清除方法：用0.5ml/L氢氧化钠调节尿液Ph至6.0；离心后，倾去上清液，再向沉淀物中加入95%乙醇5～10ml／L（固定细胞），静置5min后加入蒸馏水并轻摇（溶去胶状物）；再次离心后，取沉淀物制作涂片。检查尿液中的肿瘤细胞，一般应连续送检3次。4．胃液、胃冲洗液：制作方法同胸、腹水。5．脑脊液

（1）制作方法同胸、腹水。

（2）脑脊液内细胞一般较少，可用微孔滤膜过滤法、沉淀法或纤维捕捉法收集细胞，制作涂片。

6．冲洗液、灌洗液、穿刺液涂片的制作：参见上述的胸水、腹水项。

二、肿物细针穿刺物涂片的制备

（一）实施细针穿刺术前的准备工作

1．实施细针穿刺术的病理医师应先了解患者临床情况，向患者和/或患者授权人说明实施穿刺术的意义、局限性和其他相关问题等，取得患者和/或患方的知情和理解，并签署由各医院制订的《申请实施细针穿刺术细胞病理学诊断患方知情同意书》。

2．合格的手术操作环境。

3．必备的适用手术器械和其他相关设施。

（二）肿物穿刺术的操作要点：

1．确认肿物部位并估计其大小、与皮表距离和质地（实／囊性、硬度等），以指导穿刺的方向、深度和用力程度。2．必须严格实行无菌操作。

3．根据肿物大小及其血供情况选择适用型号的穿刺用针头。穿刺用针头的外径为0.6～0.9mm，安置在2ml或10ml的一次性空注射器上。4．针吸法穿刺术操作要点

（1）进行穿刺前，先将安装了穿刺用针头的空注射器管芯外拉2cm；然后，用手固定肿物，将安装在空注射器上的穿刺用针头刺入肿物（注射器内无空气）。

（2）迅速上下提插注射器管芯10～20次（其间变换针头方向3～4次），遂使肿物不同部位的多较内容吸进入针头和注射器内。

（3）将注射器与针头分离（管内负压因而解除）；随后，再将该注射器与仍插于肿物内的针头相接，拔出针头，穿刺结束。

（4）迅速推动注射器的管芯，尽快地将位于穿刺针头内的少量吸出物排射在2～3张清洁的载玻片上，进行涂片。

5．涂片方法：用针头将载玻片上的吸出物轻轻均匀拨开，或用推片法朝一个方向展开（不可双向往返推移）。

6．吸出物过少时，可用向离心管内冲洗穿刺针头；再将冲洗液离心，然后取其沉淀物涂片［参见上述一

（五）项“液体涂片的制作”］。

7．吸出物较多时，可适量50％乙醇－生理盐水液将涂片后注射器和针头内剩余的吸出物冲洗至离心管中，离心后，取其沉淀物制作常规石蜡包埋切片。8．吸出物中含有细小组织块时，应将其制作常规石蜡包埋切片。

9．内脏肿物穿刺时，必须在影象学检查的引导下用较长细针进行穿刺。10．穿刺操作完成后，即在细胞病理学检查单上书写穿刺记录。

三、组织印片、压片的制备

（一）组织印片：

1．用锋利刀片剖开刚切取的新鲜肿瘤组织或淋巴结等，然后用清洁载玻片轻压于组织剖面处，将组织表面的细胞成分印在玻片上。用稍微加温的载玻片制备印片时，可印得较多细胞。

2．制作淋巴结印片前，应先用滤纸吸去淋巴结切面上的血液、组织液。

（二）压片：

1．选取微小薄片组织平铺于一张载玻片上，再用另一张载玻片叠加其上并予轻压。

2．脑组织质软，易于制作压片；稍硬的组织需切成细碎薄片制作压片。

四、涂片的固定

（一）用于HE染色和巴氏染色的涂片必须湿固定，即涂片后立即进行固定。乳头溢液涂片和液体标本离心沉淀物涂片，应待涂膜潮干（即周膜稍干而其中央区域未干）时进行固定。用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆萨染色和免疫细胞化学染色的涂片，必须干固定，即待涂片稍干后再进行固定。

（二）固定液

1．乙醇－冰醋酸液：95%乙醇∶冰醋酸＝99∶1。常用。

2．乙醇－乙醚液：95%乙醇49.5ml, 乙醚49.5ml, 冰醋酸1ml。较常用。3．甲醇：滴加在干燥涂片上，用于瑞氏染色、May-Grünwald姬姆萨染色 和免疫细胞化学染色。

4．丙酮：适用于酶类染色。

5．Carnoy液：由无水乙醇、氯仿、冰醋酸按6:3:1比例混成，适用于显

示核酸、糖原、黏液染色。涂片在Carnoy液固定3～5min后，应移入95%乙醇中继续固定。

6．对于液体标本的离心沉淀物、食管拉网获取的小块组织或吸出物中的细小组织块等，固定于4%中性甲醛液中1h，然后制作常规石蜡包埋切片。

（三）固定方法 1．浸入法：

（1）将稍为干燥（不能完全干燥）的涂片直接浸泡于固定液内至少15 ～ 30min。

（2）因细胞容易脱落，宜以一个盛有固定液的容器只固定一例标本的涂片；一个容器固定多例涂片时，有可能造成的肿瘤细胞交叉污染。（3）必要时可将标本涂在硅化载玻片上，以防脱落。（4）固定液重复使用时，应先用滤纸过滤。

（5）95%乙醇固定液多次重复使用时，需测定其浓度比重，乙醇浓度低于90%时应予弃用。

2．滴加法：将固定液滴加于平放的干燥涂片上，应避免因固定液挥发造成沉淀。

（四）固定后未染色涂片的保存或邮寄：涂片固定15min后取出，立即滴加数滴甘油于涂膜上。对该涂片进行染色前，应先将其置于95%乙醇中溶去甘油。

五、涂片的染色

最常用于细胞病理学涂片检查的是苏木素－伊红（HE）染色和巴氏染色。一些特殊染色、组织化学染色和免疫组织化学染色也用于细胞病理学的涂片检查（参见第4章第一、二节）。

（一）苏木素－伊红（HE）染色（参见本章第一节的“六”项）。

（二）巴氏（Papanicolaou）染色

巴氏染色时，细胞透明度好，细胞结构清晰，色彩丰富而鲜艳，主要用于妇科细胞学涂片、痰涂片和富含鳞状上皮细胞的涂片检查。1．试剂配制

（1）Harri苏木素液（参见本章第一节的“六”项）（2）盐酸－乙醇液

浓盐酸 1ml 70%乙醇 99ml（3）橙黄G6液

橙黄G6 0.5g 蒸馏水 5ml 无水乙醇 95ml 磷钨酸 0.015g 先将橙黄G溶于蒸馏水中，再加入无水乙醇，然后加入磷钨酸。

（4）EA36染液

①EA36储备液

A液：亮绿0.5g，溶于5ml蒸馏水中，溶解后加入无水乙醇至100ml。B液：伊红0.5g，溶于5ml蒸馏水中，溶解后加入无水乙醇至100ml。C液：俾士麦棕0.5g，溶于5ml蒸馏水中，溶解后加入无水乙醇至100ml。

②EA36工作液

EA36储备液的A液 45 ml EA36储备液的B液 45 ml EA36储备液的C 液 10 ml 磷钨酸 0.2 g 碳酸锂饱和水溶液 1 滴 2．染色程序

（1）将已经固定的涂片置于80%乙醇中2 min。

（2）蒸馏水洗2 min。

（3）苏木素液染核10～12 min，自来水洗。

（4）盐酸-乙醇液分化约20～30s，至涂片呈淡橙红色。

（5）流水冲洗10～15min，蒸馏水洗。

（6）依次用80%、95%乙醇脱水，各2min。

（7）橙黄G6液染色3～5min。

（8）95%乙醇洗2～3次，洗去多余染液。

（9）EA36工作液染色3～5 min。

（10）95%乙醇洗2～3次，洗去多余染液。

（11）无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

3．染色结果：细胞核呈深蓝色，核仁呈红色；不同分化类型的鳞状上皮细胞，其胞浆颜色各异：角化细胞呈粉红色，不全角化细胞呈橙黄色，角化前细胞呈淡蓝或淡绿色；红细胞呈橙红或鲜红色，白细胞的胞浆呈淡蓝绿色；粘液呈淡蓝或粉红色。

（三）瑞氏（Wright）染色

瑞氏染色一般用于血液涂片，也可用于检查肿瘤细胞。1．试剂配制

（1）瑞氏染液

瑞氏染料 1g 甲醇 600ml 将瑞氏染料放入研钵内，加入适量甲醇与之混合研磨，使染料逐渐溶解。将溶解的染液倾入另一玻璃瓶内，然后再加入适量甲醇继续研磨；未溶解的染料如此反复多次，直至染料完全溶解、甲醇用完为止。染液避光保存备用。

（2）磷酸盐缓冲液

无水磷酸氢二钠 6.5g 磷酸二氢钠 4g 蒸馏水 1 000ml pH：6.5～7.0 2.染色程序

（1）涂片自然干燥。

（2）滴加瑞氏液染色1min。

（2）滴加等量的磷酸缓冲液，轻轻摇荡玻片或用洗耳胶球在玻片上轻轻吹 气，使两液体混合均匀，持续10～15min。（4）流水洗去染液。

（5）涂片风干后，二甲苯透明，中性树胶封片。

3.染色结果：胞核呈紫红色，胞浆呈紫蓝色，粘液呈粉红色或淡蓝色。

（四）May-Grünwald-姬姆萨（Giemsa）染色

May-Grünwald-姬姆萨染色适用于造血系统的细胞涂片和鉴别恶型淋巴瘤的类型。May-Grünwald原液和姬姆萨原液配制繁琐，可直接购买。1．试剂配制

（1）May-Grünwald工作液

May-Grünwald原液 1份

蒸馏水 6～10份

使用前配制。

（2）姬姆萨工作液

姬姆萨原液 1份 蒸馏水 6～10份

使用前配制。2．染色程序

（1）涂片自然干燥，蒸馏水洗1～2min。（2）May-Grünwald工作液染15～30min。

（3）自来水冲洗，洗去载玻片上的染液，蒸馏水稍洗。

（4）姬姆萨工作液染15～30min。

（5）自来水冲洗，洗去载玻片上的染液。

（6）涂片风干后，二甲苯透明，中性树胶封片。3．染色结果：胞核呈紫红色，胞浆和核仁呈蓝紫色。

（五）Rakoff染色

Rakoff染色用于阴道细胞学涂片快速测定雌激素水平。1． 试剂配制

（1）5%淡绿水溶液 83ml（2）1%伊红水溶液 17ml 将两液混合后使用。2．染色程序

（1）用细胞刷沿阴道侧壁刷取黏膜鳞状上皮细胞，放入装有1~2ml生理盐水的试管内。（2）在试管内滴入3滴Rakoff染液，用细胞刷在染液中轻摇混合。

（3）将1~2滴混合液滴于载玻片上，制成涂片。（4）待涂片干燥后，用中性树胶封片。

染色结果：鳞状上皮细胞的嗜酸性和嗜碱性胞浆区分明显。角化前细胞的核呈网状，角化细胞的固缩核呈基本不着色的空泡状。

（六）猩红－固绿染色

猩红－固绿染色用于显示性染色体。1．试剂配制（1）猩红染液

水溶性比布里西猩红 1.0g 磷钨酸 0.3g 冰醋酸 5.0ml 50%酒精 100ml（2）固绿染液: 固绿 0.5g 磷钼酸 0.3g 磷钨酸 0.3g 冰醋酸 5.0ml 50%乙醇 100ml 2． 染色步骤

（1）涂片经95%乙醇固定后，置于70%乙醇中2min。

（2）猩红染液中5min。（3）50%乙醇中漂清多余染液。

（4）固绿染液中分化2~5h。每小时在显微镜下观察胞浆和网状核膜是否呈现绿色；如果绿色满意，立即取出涂片（一般约需4h）。固缩核呈鲜红色。

（5）50%乙醇中5min。

（6）依次置于70%、95%和无水乙醇中各2min。

（7）置于二甲苯溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中透明，各2min。

（8）中性树胶封片。

染色结果：胞核呈淡绿色；性染色质呈粉红色、V字形或贴着于细胞膜呈三角形。在性染色质周围可见空泡。

（七）Fouchet染色

Fouchet染色用于显示胆色素。1．染液配制 Fouchet染液

A液：25%三氯醋酸水溶液 B液：10%三氯化铁水溶液

A、B液皆小量新鲜配制为宜。使用时，取A、B液各30ml混匀（当天使用）。

2．染色步骤

（1）涂片经95%酒精固定后，置于蒸镏水中漂洗。

（2）Fouchet液中染5min。

（3）蒸镏水Ⅰ、Ⅱ中各1min。

（4）苦味品红溶液中染5min。（5）95%乙醇Ⅰ、Ⅱ中漂洗。

（6）无水乙醇Ⅰ、Ⅱ中脱水。

（7）二甲苯Ⅰ、Ⅱ中透明，中性树胶封片。

3．染色结果：胆色素呈橄榄绿色，胶原纤维呈红色，涂片背景呈黄色。

（八）硫酸亚铁染色

硫酸亚铁染色用于显示黑色素。1．试剂配制

（1）2.5%硫酸亚铁水溶液（2）铁氰化钾醋酸液 铁氰化钾 1g 蒸馏水 99ml 冰醋酸 1ml（3）1%冰醋酸水溶液

（4）核固红液[参见第4章第一节的八

（三）项（爱先蓝法）] 2．染色程序

（1）涂片经95%酒精固定后，置于蒸镏水中漂洗1~2min。（2）2.5%硫酸亚铁溶液中1h。

（3）蒸镏水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中漂洗，各1min。（4）铁氰化钾醋酸液中30min。（5）1%冰醋酸液中1min。（6）蒸镏水漂洗。

（7）核固红液中染1~2min。（8）蒸镏水漂洗。

（9）依次95%乙醇、无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。3．染色结果：黑色素呈深绿或深蓝色，涂片背景呈红色或粉红色。

（九）快速硝酸银染色

快速硝酸银染色用于显示卡氏肺囊虫和真菌。1．试剂配制

（1）硝酸银乌洛托品

常备液：3%乌洛托品溶液100ml与5%的硝酸银溶液5ml充分混合。

工作液：常备液25ml、蒸镏水25ml与5%硼酸钠2ml充分混合。（2）固绿

常备液：固绿0.2g充分溶解于0.2%冰醋酸液100ml中。

工作液：常备液10ml与蒸镏水40ml混合（3）5%铬酸溶液

1%亚硫酸氢钠溶液 0.2%氯化金溶液 2%硫代硫酸钠溶液 2．染色步骤

（1）涂片经95%乙醇固定后，置于蒸镏水中漂洗1min。（2）5%铬酸溶液（43℃水浴）中2min。（3）5%铬酸溶液（58℃水浴）中15min。（4）自来水漂洗。

（5）1%亚硫酸氢钠溶液中30s。（6）自来水冲洗15s。

（7）蒸镏水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ漂洗各1min。（8）硝酸银工作液（43℃水浴）中2min。（9）硝酸银工作液（58℃水浴）中23min。（10）蒸镏水Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ漂洗。（11）0.2%氯化金溶液中30s。（12）蒸镏水Ⅰ、Ⅱ漂洗。

（13）2%硫代硫酸钠溶液中1min。（14）自来水冲洗15s。（15）固绿工作液中染30s。（16）自来水冲洗15s。（17）蒸镏水Ⅰ、Ⅱ漂洗。

（18）95%酒精、无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

3．染色结果：卡氏肺囊虫和真菌皆呈黑色，形状清晰；糖原和黏蛋白呈玫瑰色或灰色；涂片背景呈淡绿色。

（十）高碘酸-无色品红（PAS）染色

PAS染色用于显示多糖（糖原及黏蛋白等）。［参见第4章第一节的八

（一）项（高碘酸－无色品红法）］

［《临床技术操作规范•病理学分册》／第四章 病理学相关技术规范］ 第九节 病理学摄影技术

一、概 述

（一）病理医师根据病理学诊断、教学和研究的需要确定病理学摄影的内容，进行客观、准确的图像记录。

（二）病理学摄影的客体包括：①患者体表病征，②大体标本（手术切除和尸检标本的肉眼病变），③组织学切片（光学显微镜下病变），④超薄切片（透射电子显微镜下超微病变），⑤冷冻蚀刻标本（扫描电子显微镜下超微病变），⑥细胞培养标本，⑦细胞和分子细胞遗传学检测结果，⑧尸检过程，⑨动物实验标本和⑩文字、图像资料翻拍等。

二、普通摄影

（一）普通摄影是应用普通照相机拍摄客体的图像，包括患者体表病征，大体标本的肉眼病变，尸检过程，动物实验标本和文字、图像资料等。摄影时应注意病征或病变显示、光照、角度等，适度调节距离、光圈、速度。

（二）患者体表病征摄影

1．需征得患者或患方有关人员同意。2．应遮盖患者的面容和隐私部位。

（三）大体标本摄影

1．于标本下面铺垫色泽反差鲜明、协调的平整背景（纸或布），并需置放标尺和相关标本的病理号，必要时添加箭头等符号标志指示重点部位。2．因照相机固定于翻拍机上，宜选用较慢的快门速度，以增加景深。

（四）尸检过程摄影

1．宜用28～135mm变焦镜头的135相机进行摄影。

2．重要病变的原位摄影：应包括局部肉眼病变特征（“近拍”）及其与毗邻结构的解剖关系（“全景”），突出重要病变，兼顾显示全貌。3．离体标本摄影［参见上文：“

（二）大体标本摄影”］

（五）文字、图像资料翻拍 1．应用翻拍机进行摄影。

2．在翻拍相机的两侧一般至少安装2～4盏100W灯光，与照明直线呈45º角，以使光线均匀。摄影条件可用测光表确定。

（六）底片的选择

1．黑白摄影：扩印照片者，可用ASA100速度底片；制作幻灯片者可用ASA25～50速度底片。2．彩色摄影：

（1）用日光型彩色底片摄影时，需用雷登80系列平衡滤色片把色温调到5600ºK状态；用灯光照射者，无需平衡滤色片。

（2）用灯光型彩色底片在日光下摄影时，需用平衡滤色片把色温调到3200ºK状态。

三、光学显微镜（光镜）摄影

（一）光镜显微摄影是应用显微照相机拍摄通过光学显微镜放大40～1000倍的客体图像。

（二）摄影用显微镜性能要求 1．具有摄影目镜筒。

2．能通过目镜筒对图像进行对焦。3．具有光镜选择移动杆。

4．物镜具有分辨率良好平视场象。

5．聚光镜具有孔径光阑和调节光轴中心的机构。6．具有视场光阑。

7．光源亮度足够，电压可以调节。8．具有插入滤色镜的槽口。

（三）显微摄影的基本装置

1．具有自动输片机构的35mm照相机背。

2．具有对不同光照条件进行光路调节的调节杆。3．具有能对不同标本面积进行自动测光的装置。

4．具有与显微镜相连接的接圈、平场消色差物镜(Splan，Dplan)和聚光镜。5．具有显微摄影控制台。目前较常用的有日产Olympus PM-10及PM-20等显微摄影装置。常用参数项目包括：①快门按钮(EXPOSE)，②底片类型选择键(FORMAT)，③感光度旋钮(ASA/ISO)，④倒易律失效的补偿旋钮(RECIPROCITY)，⑤曝光增减旋钮(EXPOSURE ADJ)，⑥快门速度调节旋钮(MODE/EXPOSURE TIME)，⑦卷片按钮(OFF/MINDING)，⑧停片进片按钮(NO WINDING)，⑨自动曝光锁按钮(AEOCK)，⑩时间回忆按钮(TIME RECALL)。

（四）显微摄影要点

1．显微照相机必须安放稳定，具有一定防震性，室内光线应暗些以避免散射光进入目镜。

2．选择适当的彩色或黑白底片装入照相机身（暗盒）。拍摄常规HE染色、特殊染色、免疫组化染色切片的病变，宜用感光度ASA为100的彩色或黑白底片；拍摄培养细胞和免疫荧光染色标本，宜用感光度ASA为400的彩色或黑白底片。

3．调节照明和光照

（1）打开电源，调节电压（约在9伏）。（2）视场光阑收缩到取景框边缘外。

（3）孔径光阑调到物镜孔径数值的60％～80％，例如孔径为0.25的10×物镜，聚光镜上光阑应调到：0.25×60％～80％＝0.15～0.2。（4）光通路调节

①常规摄影：先将视野与照明合轴、再将聚光镜调中，使光线同时调到①观察目镜和②取景目镜的视野之中，以便于边观察边曝光摄影。如图像分布均匀，将曝光增减旋钮（EXPOSURE ADJ）调至“1”处。

②暗视野、荧光和偏振光摄影：将光线100％调到取景目镜的视野之中，用调焦镜观察视野中的标本图像，进行摄影。如图像分布不均匀，应将曝光增减旋钮调于0.25～4之间。

4．调节和校准取景目镜于标准状态：旋转调焦镜镜筒上的圆环，使取景框中央的双十字线达到最清晰。

5．将切片等标本放置在载物台上，先用观察目镜选定摄影图像，再用取景目镜调整摄影图像，并转动微调旋钮，同时使图像与取景框中的双十字线像达到最清晰。

6．用彩色底片摄影时，必须用色温计调节色温：①将光通路100％到达色温计上（由调焦镜中看不到光线）；②观察色温指示表，用平衡滤色镜（使用日光型底片时用雷登80系列）和灯光亮度将色温调至最佳色温点（日光型底片的色温点为5600K左右，灯光型底片的色温点定为3200K左右）

7．用黑白底片摄影时，必须按下列对应关系选择滤色片以提高图像反差和清晰度：

标本颜色 红 橙 黄 绿 深蓝 滤 色 镜 蓝、绿 蓝、绿 蓝 红、蓝 深绿、橙

8．检查光线可达到底片的位置，确定正确的曝光时间和进行曝光；或用自动摄影控制台上的按键曝光。

9．记录图像的摄影日期、摄影编号、样品编号、放大倍数、内容、摄影条件和备注等。

10．将已全部摄影过的底片退回底片暗盒内，取出底片并进行暗室冲洗等后期处理。

四、电子显微镜(电镜)摄影

（一）透射电镜摄影

1．检查电镜工作状态，确认样本无漂移现象，选择好曝光条件。2．调节好灯丝像，消正像散。3．选择视野，确定放大倍数。

4．调整物镜光阑：样品反差较强时，使用较大的物镜光阑孔，直至反差适中为止；反差小时，宜用较小的光阑孔。

5．样本聚焦在低倍电镜（＜1500倍）图像时，可采用摇摆聚焦法用肉眼定位；样品聚焦在高倍电镜（＞1500倍）图像时，除用肉眼观察定位外，还需采用系列拍照法：于确定焦点后，用细调钮聚焦，增加物镜电流，每调动一级最小钮拍摄一张底片，总计拍摄4～5张，从中选择最佳底片。6．放平荧光屏，传送底片使之进入摄影位置。

7．调定曝光亮度和速度，然后启动快门进行曝光；曝光结束后，将底片送入储存盒内。将底片全部摄影的储存盒取出，进行暗室冲洗等后期处理。

8．用于透射电镜摄影的底片一般为色盲片（对红光不感光），曝光时间为2～4s，ASA［中文？］为8～25s。

（二）扫描电镜摄影 1．检查电镜工作状态

（1）加速电压强度的选择：取决于样品的性质、图像反差和放大倍率。高倍观察时一般需要较高的加速电压，低倍观察时需要较低的加速电压。

（2）聚光镜电流的选择：在保证图像亮度和反差要求前提下，尽可能加大聚光镜电流，以提高照片分辨力，加大景深。

（3）物镜光阑孔的选择：对于表面结构高低差异大的样本可用较小的光阑孔，以获较大景深；低倍镜下观察时，可选用较大光阑孔，以增加视野内的信号强度。

（4）选择摄影扫描速度。

（5）视野选择：与透射电镜相同。

2．确定曝光时间。在扫描电镜照相机处于光关？F8或F11情况下，照片的曝光时间在50～100s之间。

3．样品的聚焦程度主要依靠操作人员的肉眼观察。拍摄较低放大倍数（＜1000倍）的图像，以调节粗聚焦钮为主；拍摄较高放大倍数（＞1000倍）图像，应先调节粗聚焦钮，再调节细聚焦钮。

4．图像消像散：①先调节X方向旋钮，消除X方向的像散；②再调节Y方向旋钮，消除Y方向的像散；③最后再调节细聚焦钮，直到图像最清晰为止。

5．调节高度和反差：扫描电镜一般装有亮度和反差自动调节按钮，按动该钮即可得到反差适当的图像。

6．拍摄：将照相机中的底片调至摄影位置，按动面板上的摄影快门钮，荧光屏上便由上而下自动扫描图像；扫描结束后，即完成一幅照片拍摄。

7．底片选择：扫描电镜装有120或135照相机，故一般选择感光速度为ASA100的120或135胶卷，；装有Polaroid后背相机的扫描电镜，可进行一次成像。

8．记录图像的摄影日期、摄影编号、样本编号、放大倍数、内容、摄影条件和备注等。

五、暗室技术

（一）暗室技术用于：①普通摄影、显微镜摄影和电镜摄影底片的冲洗，及其照片的洗印和放大；②幻灯片的制作等。

（二）摄影底片的冲洗操作程序

①于完全黑暗中取出全色底片（色盲片或电镜底片可在红灯下取出）→ ②将底片卷入螺旋形的槽内或显影架上 → ③清水湿润2min → ④显影3～12min（20℃）→ ⑤定影10～20min（20℃）→ ⑥水洗30min → ⑦凉干底片 → ⑧分类装入底片袋内，并做好记录。

（三）试剂配制

1.显影液：有多种配方，组成成分大同小异。下列的D‐11配方兼用于冲洗底片和照片的洗印和放大显影： 水（50℃）500ml 米吐尔 1.0g 无水亚硫酸钠 75 g 对苯二酚 9.0g 无水碳酸钠 25 g 溴化钾 5 g 加水至1 000ml 冲洗电镜底片、色盲片和制做幻灯片、显影照片等，需要极强反差，可用以上配方的原液显影。普通摄影用的全色底片对反差要求不很高，可将原液用清水稀释成1:2～1:4的工作液。2．停影液

水 750ml 28％醋酸 48ml 加水至1000ml 3.定影液：较常用下列的F‐5酸性坚膜定影液 水（50℃）600ml 硫代硫酸钠 240g 无水亚硫酸钠 15g 28％醋酸 48ml 硼砂（结晶）7.5g 硫酸铝钾 15 g 加水至1000ml

（四）照片的洗印和放大

洗印和放大照片一般使用黑白放大相纸。这类相纸根据反差分为特软性、软性、中性、硬性和特硬性等5种，即0、1、2、3、4号相纸。较常用者为3号相纸。

1.洗印：在印相箱中操作（一般装有自动定时曝光控制器），主要用于制做透射电镜摄影的照片。已经曝光的像纸进入冲洗操作程序（同底片的冲洗程序）。

2.放大：在放大机上操作，主要用于制做显微镜摄影的照片。（1）操作程序

①放大镜头焦距的选择参见下表：

底片规格 135 120 120 120 120（16张）（12张）（10张）（8张）负 片 负 片 负 片 底片尺寸

(mm×mm)24×36 45×60 60×50 60×70 60×90 80×105 90×120 108×125 镜头焦距

(mm)50 75 75～80 80～90 90～105 135 150 175

②装入底片：将底片的乳剂面向下，目测聚焦，使放大的图像结构清晰。③选择相纸：常用3号放大纸。

④确定镜头光圈和曝光时间：对于正常反差的底片，将镜头光圈缩小到f/5.6至f/8之间，曝光时间控制在8～20s为宜。⑤将曝光后放大纸进入显影、定影程序中。

六、数码摄影技术

数码摄影通常包括：①拍摄、②下载（将所拍摄的照片由数码相机下载到电脑中）、③修饰（加工处理等后期制作）和④分享（将经过修饰的照片输出，例如打印等）4个步骤。

（一）选择适当的照片质量要求

数码相机的照片质量（解像度）分为①精细、②正常、③经济等档次。图像质量越好，每张照片占用的存储空间越大，在相同内存的情况下，解存储的照片数量越小。因此，在拍摄之前，应先根据需要，设定对于照片的质量要求，即设定压缩比。

设定压缩比的原则是：①对照片质量要求越低，压缩比可越高；②只在监视器或电视机上观察图像而不打印时，压缩比可高些，可选择“正常”甚至“经济”档拍摄储存量小的图像。③需要打印照片（尤其欲获大幅彩色照片）时，压缩比越低越好，应选择“精细”档，最好选择不压缩的拍摄存储方式。

（二）力求曝光准确

1．数码相机的感光度最低为ISO60，最高为ISO6400，多在ISO100左右。ISO额定值较低时，解像度高、色调范围宽和反差低；ISO额定值较高时，解像度低、色调范围宽和反差高。2．选择感光度的原则：（1）检查光线是否足够。

（2）尽量用较低的感光度拍摄。

（3）曝光时间不要过长。照度低时，应尽量利用闪光拍摄。避免进行高感光度的长时间曝光。

（4）曝光准确与否决定于对照片质量的要求。

（三）注意对焦条件。

（四）注意用光。

（五）准确使用快门和光圈：宜用自动模式（Auto）拍摄。使用手动相机或将自动相机设置于手动模式时，需要随时进行调整。

（六）正确设定白平衡：拍摄前设定自动白平衡，或是将白平衡调整设定在与拍摄光照条件一致的档上。

（七）正确使用存储媒介：向数码相机内插入移动式存储卡时，一定要到位；从相机中取出存储卡时，要防止滑落到坚硬的物面上，以免不能读取照片的某些数据，甚至损坏存储卡。

吸入麻醉临床操作规范 篇5

关键词：七氟醚,吸入麻醉,异丙酚,静脉麻醉

吸入七氟醚麻醉是近几年来临床新采用的麻醉方法, 其具有麻醉诱导快、麻醉深度易控制、术后苏醒快、具有一定的循环抑制作用等特点[1]。为研究其麻醉效果, 选择我院收治的需行全麻腹部外科手术病例100例, 对照组采静脉注射异丙酚麻醉, 研究组采用吸入七氟醚麻醉, 进行对比分析, 现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2011年7月至2012年7月我院收治的需行全麻腹部外科手术病例100例, ASA分级为Ⅰ～Ⅱ级, 其中男57例, 女43例, 年龄23～68岁, 平均年龄 (38.1±10.2) 岁, 体质量45～89kg, 平均体质量 (55.2±7.4) kg, 所有病例均未患有严重脑、心、肝、肾以及血管等系统疾病。将所有病例随机分为研究组和对照组, 每组各50例, 两组在性别、年龄、体质量等方面对比, 差异不具有统计学意义 (P>0.05) , 说明两组可进行对比分析。

1.2 麻醉方法

手术前禁食禁饮8h, 入室后常规监测患者的心电图、血压以及血氧饱和度, 同时建立静脉通道。进行麻醉诱导前, 先给予患者纯氧, 使患者氧饱和度达到99%左右, 充分去氮, 研究组采用循环回路进行麻醉诱导, 先使用7%七氟醚通入回路3～5min, 排空呼吸囊内的空气, 将麻醉气体充满呼吸回路通道。然后给予患者静脉注射舒芬太尼0.3μg/kg, 2min后将呼吸回路的面罩罩在患者面前, 保持好面罩的密闭性, 使患者进行深呼吸, 给予吸入7%七氟醚, 氧流量为每分钟8L。对照组先给予静脉注射舒芬太尼0.3μg/kg, 2min后快速给予静脉注射异丙酚2mg/kg, 待患者的意识消失后给予快速静脉注射罗库溴铵0.6mg/kg, 待患者肌松后进行气管内插管, 控制患者呼吸。两组患者术后均不给予催醒以及肌松拮抗, 待患者苏醒后再行拔管。

1.3 观察项目

记录患者从诱导开始到意识消失所需时间 (T11) 以及停用麻醉药物到苏醒拔管所需的时间 (T12) , 观察两组病例入室时以及拔管时的收缩压 (SBP) 、舒张压 (DBP) 以及心率 (HR) , 同时观察患者术后发生恶心、呕吐以及躁动的情况。

1.4 统计学处理

数据处理采用SPSS14.0统计软件, 用表示计数资料, 采用方差分析检验, 计量资料采用χ2检验, P<0.05说明差异具有统计学意义。

2 结果

研究组从诱导开始到意识消失所需时间 (T11) 要稍长与对照组, 而两组停用麻醉药物到苏醒拔管所需的时间基本一致, 对比差异均无统计学意义 (P>0.05) , 见表1。两组入室时以及拔管时的收缩压 (SBP) 、舒张压 (DBP) 以及心率 (HR) 对比, 无明显差异, 不具有统计学意义 (P>0.05) , 见表2。两组术后恶心、呕吐以及躁动不良发生情况对比, 差异同样不具有统计学意义 (P>0.05) , 见表3。

3 讨论

异丙酚属于快速短效型静脉全麻剂, 其具有起效迅速、麻醉疗效平稳、持续时间短、苏醒快速且平稳以及术后不良反应少等特点, 但其可有效降低交感神经活性, 对循环具有较强的抑制作用, 循环抑制作用的强弱与注射麻药的速度和剂量相关性较强[2]。而采用异丙酚与舒芬太尼联合应用可有效减轻插管期间出现的心血管应激反应, 减轻循环抑制, 可以有效减少异丙酚诱导所用剂量, 从而获得令人比较满意的麻醉效果[3]。

以往采用乙醚进行麻醉时, 由于其具有难闻的刺激性气味, 很容易使患者发生头晕、头痛以及恶心、呕吐等不良反应。而七氟醚是一种无色透明带有一些甘蔗香味, 且无刺激性麻醉剂, 具有较低的血气分配系数, 仅为0.6左右, 其具有麻醉诱导深度易调控, 诱导过程和苏醒期平稳, 苏醒过程迅速, 对患者呼吸道刺激较少, 且可预测麻醉苏醒时间[4]。研究表明采用舒芬太尼复合七氟醚诱导麻醉, 可有效减轻七氟醚诱导时的气管插管反应, 可加快患者痛觉意识的消失, 并显著降低患者无意识肢动的发生率, 两者联合应用具有较好的协同效应。另外由于七氟醚吸入麻醉, 可以比较容易控制麻醉药物的剂量, 具有较好的可控性, 尤其适用于建立静脉通道困难, 不能配合注射等的患儿[5,6]。

通过对本组资料研究显示, 采用七氟醚吸入麻醉从诱导开始到意识消失所需时间 (T11) 要稍长与采用异丙酚静脉麻醉的对照组, 但两组停用麻醉药物到苏醒拔管所需的时间基本一致, 且两组入室时以及拔管时的收缩压 (SBP) 、舒张压 (DBP) 以及心率 (HR) 以及术后恶心、呕吐以及躁动不良发生情况对比, 差异均不具有统计学意义 (P>0.05) 。说明两组麻醉效果相似, 而采用七氟醚吸入麻醉具有麻醉诱导迅速、麻醉维持平稳、血流动力学稳定以及苏醒快速完全等优点, 不会由于建立静脉通道对患者造成创伤, 尤其适用于小儿病例, 值得进行临床推广应用。

参考文献

[1]王琦, 文建忠, 耪小敏, 等.七氟醚吸入麻醉与异丙酚静脉麻醉的临床比较[J].江西医药, 2008, 43 (12) :1377.

[2]李子刚, 陈虹.七氟醚吸入麻醉诱导与异丙酚静脉麻醉诱导的临床比较[J].浙江预防医学, 2005, 17 (11) :75-76.

[3]覃文明, 焦艳玲.七氟醚吸入麻醉与异丙酚静脉麻醉在妇科日间手术中的临床应用比较[J].中国现代医药杂志, 2011, 13 (8) :45-47.

[4]王维林.七氟醚吸入与丙泊酚静脉复合麻醉在鼻内窥镜手术中的效果比较[J].江苏医药, 2010, 36 (24) :2976-2979.

[5]谢观土.七氟醚吸入复合氯胺酮静脉麻醉在小儿介入手术中的应用[J].实用医学杂志, 2009, 25 (6) :959.