复方铁皮石斛

复方铁皮石斛（精选8篇）

复方铁皮石斛 篇1

铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo) 为兰科(Orchidaceae)石斛属多年生附生草本植物,《本草纲目》记载其具有“强阴益精,厚肠胃,补内绝不足,平胃气,长肌肉,益智除惊,轻身延年”等功效,与灵芝、人参、 冬虫夏草等被列为上品中药,并被道家养生经典道藏誉为 “中华九大仙草之首”。现代药理研究表明,石斛多糖具有抗炎、抗衰老、抗肿瘤、增强机体免疫力、降低血糖等作用[3]。黄芪(Astragalus membranaceus (Fisch.) Bunge.) 为豆科(Leguminosae sp.)植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的根, 《神农本草经》记载其具有“益气补中、补气、固表、利尿排毒、敛疮生肌”等功效[4]。现代研究表明其具有抗疲劳作用,能够增加小鼠游泳后肝糖元的含量,降低血清乳酸的含量[5]。

近年来,运动医学界开始重视借助中药来消除体力性疲劳与提高机体运动能力的研究,并已取得显著成果。本实验通过研究铁皮石斛与黄芪的联合应用对运动小鼠的物质代谢以及抗疲劳和耐缺氧能力的影响,旨在为其抗运动疲劳和耐缺氧功效的应用提供理论依据。

2实验材料和方法

2.1实验材料

2.1.1实验动物

KM种小鼠,体重18-22g,雌雄各半,由广西中医药大学实验动物中心提供。许可证号:SYXK桂2010-0001。小鼠适应性喂养3d后进行实验。

2.1.2实验药材及配制

铁皮石斛由广西南宁元敬本草堂生物科技有限公司提供,黄芪,红参均购于广西南宁市国医药店。3种药材均打成微粉,复方铁皮石斛由铁皮石斛和黄芪按一定比例混匀。 给药前用生理盐水配成一定浓度的均匀混悬液备用。

2.1.3试剂

试剂:乳酸测试盒、尿素氮试剂盒、NO一步法试剂盒、 丙二醛(MDA)测试盒、SOD试剂盒,均购自南京建成生物工程研究所。

2.2方法

2.2.1动物分组及给药

将KM小鼠随机分成6组,即空白对照组(生理盐水)、 阳性对照组(红参,2g微粉/kg)、铁皮石斛组(2g微粉/kg)、 黄芪组(2g微粉/kg)、复方铁皮石斛高、低剂量组(铁皮石斛微粉+黄芪微粉,1+1g微粉/kg,0.5+0.5g微粉/kg), 每组10只,雌雄各半。各组小鼠灌胃给予相应药物混悬液, 给药容量为20ml/kg,空白对照组给予同等容量的生理盐水。连续给药11d,2次/d。

2.2.2负重游泳实验[4]

末次给药1h后,在小鼠尾部加10%体重的负荷,放置于水温(25±2)℃,水深为20cm的水槽内,观察小鼠游泳时间,以小鼠沉到水底6s内不再游出水面为止。从中取出小鼠,随后取血,分离血清,于-80℃冰箱保存备测乳酸、 尿素、SOD、MDA、NO含量或活性等相关生化指标。

2.2.3耐缺氧实验[5]

末次给药1h后,用剪刀沿小鼠贴耳根处快速断头,立即观察并记录小鼠张口次数及喘息时间,同时收集血液,分离血清,于-80℃冰箱保存备测乳酸、尿素、SOD、MDA、NO含量或活性等相关生化指标。

2.2.4血清中乳酸、尿素、SOD、MDA、NO含量或活性测定

按试剂盒说明书操作步骤进行各指标含量或活性测定。

2.2.5统计学处理

应用EXCEL软件对实验数据进行t检验,实验数据以均数±标准差(±s)表示, P<0.05为差异有统计学意义。

3实验结果与讨论

3.1实验结果

3.1.1对小鼠负重游泳时间的影响

与空白组比较,各用药组的小鼠负重游泳时间均明显延长(P<0.05-0.01)。复方高剂量组与单用组相比有显著性差异(P<0.05),结果见表1。

3.1.2对耐缺氧能力的影响

与空白组比较,各用药组的小鼠断头张口次数明显增多和喘息时间明显延长(P<0.05-0.01)。复方高剂量组小鼠张口次数明显多于单用组(P<0.05),但喘息时间无显著性差异(P>0.05),结果见表2。

注:与空白组相比,*P<0.05 ,**P<0.01;与铁皮石斛组比,#P<0.05;与黄芪组比较,∆P<0.05。(下同)

3.1.3对负重游泳小鼠血中乳酸、尿素、SOD、MDA、NO含量或活性的影响

与空白组比较,用药组血中乳酸、尿素氮和MDA水平均明显降低,SOD和NO水平明显升高(P<0.05)。与单用组比较,复方高剂量组血中乳酸、尿素氮和MDA水平均明显降低,SOD和NO水平明显升高(P<0.05)。结果见表3。

3.1.4对断头小鼠血中乳酸、尿素、SOD、MDA、NO含量或活性的影响

与空白组相比,各用药组血中尿素氮、MDA水平明显降低,SOD、NO水平明显升高(P<0.05),对乳酸无明显影响 (P>0.05);复方组与单用组比较,各指标无显著差异 (P>0.05)。结果见表4。

3.2讨论

疲劳是机体在一定环境条件下,因长时间从事过于繁重、紧张的劳动(包括脑力和体力)而引起的工作效率暂时性明显降低的一种生理现象[6]。疲劳的产生是多方面的,如代谢物质的积累、能源物质的消耗等。抗疲劳作用的检测主要针对机体运动能力的提高、代谢物质的消除等[7]。

小鼠力竭性游泳时间是评定机体运动能力、抗疲劳能力及恢复能力的重要指标之一[8]。小鼠断头脑组织血液供应中断,造成脑缺氧,通过断头的张口次数和喘息时间来评定小鼠的耐缺氧能力。乳酸是糖无氧酵解的产物,作为肌肉活动的主要代谢产物,是评价机体疲劳的重要标志物[9]。其在体内的积累可影响肌肉的收缩功能和运动能力,会刺激神经末梢,从而引起肌肉的痉挛、疼痛和局部水肿等一系列延迟性肌肉酸痛的表现。血中尿素是体内蛋白质和氨基酸分解代谢的最终产物,是评价运动时机体内蛋白质和氨基酸分解代谢的指标[10]。NO在生物体内作为一种反应性极强的自由基,兼有第二信使和神经递质作用,同时又是一种效应分子,在体内具有广泛的生理作用。SOD对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用,此酶能清除超氧阴离子自由基,保护细胞免受损伤。MDA为氧自由基攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸引发脂质过氧化而形成的脂质过氧化物。因氧自由基和脂质过氧化参与了疲劳的发生发展过程,所以MDA的测定常与SOD的测定相互配合。SOD活力高低间接反映了机体清除氧自由基的能力,而MDA的高低又间接反映了机体细胞受自由基攻击的严重程度,从而反映出机体的抗疲劳能力。

本实验结果显示,复方铁皮石斛能明显延长小鼠负重游泳时间,增多断头小鼠张口次数和延长喘息时间,且效果比单用铁皮石斛或单用黄芪要好。这些作用可能与其降低血中乳酸、尿素氮和MDA水平,升高SOD和NO水平有关。说明合理使用复方铁皮石斛可用于抗疲劳,提高运动耐力。

铁皮石斛有“钱”图 篇2

铁皮石斛生长在高海拔地区，对温湿度和光照要求比较苛刻，过去，许多药农都在高海拔采用贴树、贴石等原始方法栽培，产量极低。近年，我国在浙江、安徽、云南等地运用集约化、智能化技术已栽培成功铁皮石斛，生长时间比贴树法、贴石法缩短1/3以上，株产量高达30克，每平方米种50株，产量1公斤。新的栽培技术使铁皮石斛常年生长不停，因而缩短栽培时间，达到高产量，每平方米产值200 ~ 600元。其投资比现行大棚低，产值高，详见下表：

经济效益如下：

预计15个月为一生产周期，按每平方米栽培面积最低产0.5公斤鲜品、收购价400元/公斤计：

经济效益=总收入-总投资=利润（元） 每平方米投资（元）每平方米利润（元）

栽培240平方米效益=48000-24478=23522 101.99 98.008

栽培500平方米效益=10000-41513=58487 83.026 116.97

栽培1000平方米效益=200000-80071=119929 80.071 119.929

复方铁皮石斛 篇3

1 化学成分

1.1 铁皮石斛的化学组成

铁皮石斛的化学组成主要有石斛多糖、生物碱、氨基酸、菲类化合物以及金属元素等。石斛多糖为铁皮石斛的最主要成分, 是其发挥药理作用的重要物质基础。吴刚等[5]通过对19种石斛的多糖及生物碱含量进行测定发现, 铁皮石斛的多糖含量为19.26%, 总生物碱含量为0.359%。蒋秀梅等[6]检测出铁皮石斛鲜品含有6种人体必需氨基酸, 1种半必需氨基酸, 其中谷氨酸和天门冬氨酸的含量最高。黎万奎等[7]通过实验比较了人工栽培铁皮石斛与其他来源铁皮石斛中氨基酸含量得出人工栽培铁皮石斛与其他不同来源铁皮石斛材料中各种氨基酸组成及含量一致, 以天冬氨酸含量最高, 其次为谷氨酸、亮氨酸、精氨酸、丙氨酸等。李榕生等[8]运用各种柱色谱方法进行化学成分分离提纯, 从而得到六种化合物, 分别鉴定为2, 3, 4, 7-四甲氧基菲、1, 5-二羧基-1, 2, 3, 4-四甲氧基菲、2, 5-二羟基-3, 4-二甲氧基菲、2, 7-二羧基-3, 4, 8-三甲氧基菲、2, 5-二羧基-3, 4-二甲氧基菲、3, 5-二羧基-2, 4-二甲氧基菲。其中化合物1, 5-二羧基-1, 2, 3, 4-四甲氧基菲、2, 5-二羟基-3, 4-二甲氧基菲、3, 5-二羧基-2, 4-二甲氧基菲为首次从石斛属植物中分离得到。诸燕等[9]采用电感耦合等离子质谱法、原子吸收光谱法对11个种质32个样品的铁皮石斛的金属元素进行检测, 结果发现铁皮石斛中钾、钙、镁、锰、锌、铬、铜平均质量分数分别为1205.23, 766.82, 158.25, 31.06, 4.28, 8.28, 0.97mg/kg, 砷、汞、铅、镉4种重金属元素含量除1个样品镉元素超过限量指标0·07mg/kg外, 均在规定限度范围内, 种质与生理年龄对金属元素的积累影响显著。

1.2 铁皮石斛原球茎的化学成分

铁皮石斛原球茎是由铁皮石斛组织分化形成, 具有与铁皮石斛药材相似的化学组成, 但在各成分的含量以及单一成分的组成上仍有一定差别, 而铁皮石斛原球茎可通过改变不同培养条件使其中有效成分含量得以提高。在这一问题上陈晓梅等人进行了较为深入的研究, 其运用高效液相-质谱分析法对真菌诱导子处理的铁皮石斛原球茎和对照原球茎以及铁皮石斛的指纹图谱进行研究分析得出经诱导子处理的铁皮石斛原球茎没有改变原球茎的化学背景, 和铁皮石斛的化学成分相似, 而真菌诱导子能促进原球茎中生物碱类成分的产生和特异性积累, 石斛多糖是铁皮石斛及其原球茎的共有成分, 但在单糖的组成上有所差异[10]。在培养原球茎过程中加入MF24液体发酵菌丝制备的诱导子可提高原球茎的多糖含量[2]。其用相同的提取方法对铁皮石斛药材及其原球茎的多糖成分进行提取, 石斛粗多糖主要由Man和Glu组成, 而原球茎粗多糖主要由Gal、Ara和Glu组成[11]。何铁光等[12]通过实验分析得出铁皮石斛野生品及其悬浮培养的原球茎都含有17种氨基酸, 前者以谷氨酸、天冬氨酸、缬氨酸和亮氨酸为主要氨基酸, 后者以悬浮培养的谷氨酸、天冬氨酸和精氨酸为主要氨基酸, 在人体必需氨基酸中, 两者都含有除色氨酸以外的全部人体必需氨基酸, 其中, 亮氨酸比例最高。孟志霞等[3]从铁皮石斛原球茎中得到8个化合物, 分别1-O-p-阿魏酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷 (Ⅰ) , arillatose B (Ⅱ) , 4- (β-D-吡喃葡萄糖基) 苄醇 (Ⅲ) , 4-羟甲基-2, 6-二甲氧基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷 (Ⅳ) , 三十六烷酸 (Ⅴ) , 二十七烷醇 (Ⅵ) , β-谷甾醇 (Ⅶ) , 3β, 25-二羟基-23-烯-环菠萝蜜烷 (Ⅷ) , 其中化合物1、2、3、4、8为首次从石斛属中分得。

2 药理作用

2.1 铁皮石斛的药理作用

铁皮石斛中含有的多糖、生物碱、氨基酸等化学成分是其药理作用发挥的重要物质基础, 铁皮石斛具有提高人体免疫力、抗氧化以及抗肿瘤等方面的作用, 随着研究的不断深入, 一些新的药理作用也逐渐被发现。赵水灵等[13]对石斛多糖进行研究发现其能使小鼠的胸腺、脾等部位的重量增加、抗体细胞数明显增多, 从而使免疫作用得以增强。鲍素华等[14]通过对铁皮石斛多糖体外抗氧化活性研究, 发现铁皮石斛多糖随着浓度的增大其抗氧化的活性也逐渐增强。鲍丽娟[15]对四种石斛的抑瘤作用进行了研究, 其中铁皮石斛提取物中的乙酸乙酯部位对人宫颈癌HelaS3的抑制作用相对于石油醚部位、正丁醇部位以及水提物的效果要好, 而石油醚部位对于肝癌HepG2的抑制较好, 但四个部位的抑瘤作用差别不大。

2.2 铁皮石斛原球茎的药理作用

相似的化学组成, 致使铁皮石斛原球茎与铁皮石斛有着相似的药理作用。何铁光等[16]铁皮石斛原球茎进行研究表明其多糖含量与野生铁皮石斛的相当, 且能通过提高机体免疫功能和抗氧化能力抑制肿瘤的生长。高建平等[17]比较了铁皮石斛原球茎与原药材的免疫调节作用发现, 原球茎能提高机体非特异性免疫功能和细胞免疫功能, 并与原药材相比作用强度相似。何铁光等[18]对铁皮石斛原球茎中多糖DCPP1a-1抗肿瘤活性进行研究, 发现三个不同剂量的多糖DCPP1a-1对小鼠肝癌H22有不同的抑制效果, 其中低剂量组 (50mg/k) 相对于中剂量组 (150mg/kg) 及高剂量组 (250mg/kg) 的抑制作用更为显著, 与肿瘤对照相比, 多糖低剂量组小鼠的胸腺和脾指数显著增加了, 增强了小鼠的机体免疫力。此研究组还对铁皮石斛原球茎多糖DCPP1a-1对氧自由基和脂质过氧化的影响进行了研究, 实验结果表明铁皮石斛原球茎多糖DCPP1a-1具有较强的抗氧化活性。林宏等[19]利用细胞溶血法测定铁皮石斛原球茎中均一多糖D-02C的CH50值, 并与肝素钠的CH50值进行对比研究对比表明D-02C具有较弱的补体活性。

3 石斛多糖的提取及含量测定

3.1 铁皮石斛及铁皮石斛原球茎中多糖成分的提取

石斛多糖是铁皮石斛发挥其药效的重要物质基础, 也是其含量较多的一类成分, 那么如何高效提取石斛多糖, 成为众多学者的课题, 铁皮石斛药材中多糖成分的提取方法经历了由传统的水提醇沉法到超声提取、酶提取的发展, 使得石斛多糖的提取效率得到大大地提高。钱叶等[20]对粉碎度、提取次数、加水量及提取时间等因素对石斛多糖提取的影响大小进行了正交试验, 结果表明影响石斛提取含量的因素依次为粉碎度>提取次数>加水量>提取时间。在水提法的基础上加入超声提取法, 可以使石斛多糖的提取率得到提高, 即在将石斛粉过筛后对其进行超声水浴提取, 通过对比得出当超声功率为300W时, 超声频率为45kHz时多糖得率最高[21]。魏明等[22]发现, 当超声波功率达到300W时多糖提取量为最大值。当超声波功率过大时, 可能因为超声波的剧烈振动使多糖降解, 从而使得多糖提取量出现了下降的趋势[23]。尚喜雨[24]对铁皮石斛多糖用水提法、酶法进行了研究, 其中水提法的最佳提取条件为:固液比1∶80, 水温100℃, 浸提时间2h, 提取次数2次;联合酶法的最佳提取条件为:酶量 (木瓜蛋白酶和纤维素蛋白酶等量混合) 4%, 水温为40℃, pH值为6, 酶解3h。结果水提法的多糖平均提取率为12.07%, 酶法的多糖平均提取率为20.84%, 说明联合酶法提取铁皮石斛多糖优于单纯水提法。

铁皮石斛药材中石斛多糖的提取方法已经研究得较为透彻, 从目前的研究状况观察可知, 用于铁皮石斛原球茎多糖的提取方法为水提法, 其提取过程与铁皮石斛药材中多糖的水提法过程相似, 也有研究者对此方法的影响因素进行了比较优选。何铁光[18]选用热水浸提, 并对浸提时间、浸提次数、温度及加水量等4个因素进行正交试验, 实验结果表明各因素作用大小关系依次为提取次数>加水量>提取温度>浸提时间, 且最佳条件为提取2h, 提取次数为3次, 温度为80℃, 加水量20倍, 刘静平等[25]运用正交试验优选铁皮石斛类原球茎多糖的提取纯化工艺相似结论。岑忠等[26]对用热水浸提铁皮石斛原球茎多糖的条件进行了优选, 实验结果表明影响最大的因素是浸提次数, 其次是浸提时间, 料水质量比和浸提温度。且最佳实验条件为浸提次数为4次, 浸提3h, 料水质量比为1∶60, 近体温度为80℃, 多糖得率达到9.17%。

4 铁皮石斛药材及其原球茎石斛多糖的含量测定

多糖成分对铁皮石斛的重要性决定了对其进行含量测定并作为铁皮石斛的质量评价标准有着重要的意义, 石斛多糖含量测定的方法主要有蒽酮-硫酸法、苯酚-硫酸法、DNS (3, 5-二硝基水杨酸比色法) , 有观点认为DNS较优于前两种方法。林雅等[27]采用蒽酮-硫酸法测定石斛中的多糖含量, 其依据多糖在硫酸的作用下先水解成单糖分子, 并迅速脱水生成糖醛衍生物, 然后利用与蒽酮的显色反应生成橙黄色化合物, 最后以比色法测定其吸光值, 进而计算出多糖含量。刘宏源等[28]首次采用DNS (3, 5-二硝基水杨酸比色法) 法测定铁皮石斛中水溶性多糖的含量, 并认为该方法具有重复性好、杂质干扰少、快速、准确灵敏等优点。因DNS在偏碱性条件下与多糖水解产物还原糖共热后被还原生成棕红色的氨基化合物 (3-氨基-5-硝基水杨酸) 。该化合物在一定的浓度范围内, 还原糖的量和反应液的颜色呈比例关系, 利用比色法可测定样品中的含糖量。林燕飞等[29]利用3, 5-二硝基水杨酸比色法, 以葡萄糖为对照测定, 研究铁皮石斛不同采收期和不同生长期水溶性多糖的含量变化规律, 研究者认为DNS (3, 5-二硝基水杨酸) 相比较苯酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法具有明显的优点, 因铁皮石斛中的主要药效成分是水溶性多糖而非单糖, 苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法二个方法仅能测定总水溶性糖, 而DNS法可以通过测定还原糖 (或单糖) 和总糖, 从而计算得到总水溶性多糖。目前, 原球茎多糖含量的测定方法则多采用苯酚-硫酸法[30,31]。

5 结语

通过对铁皮石斛及其原球茎进行质量对比研究发现, 两者的化学组成、药理作用都较为相似, 均具有提高免疫力、抗氧化、抗肿瘤活性, 两者发挥药理作用的重要物质基础均为石斛多糖, 但在多糖的含量以及组成上两者有着一定的差别, 铁皮石斛胚性组织原球茎有作为铁皮石斛新药材资源的可能性, 因此, 铁皮石斛原球茎多糖成分在其生长过程中有着怎样的变化积累过程, 以及怎样通过改变培养条件来增加其多糖成分, 值得深入研究。其次, 铁皮石斛和铁皮石斛原球茎在多糖的提取及测定方法上较为相似, 但相对于铁皮石斛多糖较为丰富的提取及测定方法而言, 运用于提取及测定铁皮石斛原球茎中石斛多糖的方法却十分单一, 那么, 原球茎多糖在提取及含量测定方法上能否运用原药材的优选条件仍有探讨价值。

摘要：铁皮石斛是一种名贵中药材, 其药理作用广泛, 得到了广泛应用, 但其自然繁殖率低, 资源形势较为严峻。近年来, 研究者们多集中于对铁皮石斛的胚性组织原球茎进行研究, 本文通过对比研究铁皮石斛与铁皮石斛原球茎在化学成分、药理作用、石斛多糖成分的提取及测定方法上的差别, 以探讨铁皮石斛原球茎成为铁皮石斛新药材资源的可能性。

黄金种植——铁皮石斛 篇4

铁皮石斛是一种名贵中药材, 被列为“中华九大仙草”之首, 被国际药用植物界称为“药界大熊猫”。它具有抗癌、降血糖和免疫调节等功效, 因此被人工大量采挖, 导致铁皮石斛濒临灭绝, 北京中农环宇生物技术研究所为满足市场需求, 经多年苦心钻研, 突破了铁皮石斛种植难, 生长周期长等技术难关。该所研发的铁皮石斛药用价值高, 适应全国南北方室内外种植, 具有耐旱涝、耐酸碱, 不受季节、环境和土壤限制等特点, 从种到收只需90 d, 北京中农环宇生物技术研究所可上门收购。种植100 m2, 可产13～17 kg铁皮石斛, 收购价1 200元·kg-1, 详情请致电或短信至13717770566 (注明详细通信地址、姓名及邮编) 免费索取种植指南 (附寄合同样本) 以便合作。

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铁皮石斛人工授粉试验 篇5

1 材料与方法

1.1 试验区概况

试验设在江苏省吴江市八坼社区西郊。基地位于北纬30°4′, 属于北亚热带湿润季风气候, 夏季气温较高, 潮湿多雨, 冬季干燥寒冷, 季风明显, 四季分明。降水相对集中在梅雨季节 (6—7月) , 常年平均降水量为1 093.5 mm。年平均气温15.8℃, 极端最高气温28.0℃, 极端最低气温-3.3℃, 无霜期200~240 d[1]。

1.2 试验材料

试验材料为江苏吴江苗圃生产的二年生铁皮石斛盆栽苗, 为浙江野生种源实生组培苗, 在以松鳞为主的基质中培育2年。

1.3 试验设计

根据铁皮石斛授粉的时间不同, 共设6个处理, 分别在开花第1、2、3、4、5天进行人工授粉, 以自然授粉作为对照 (CK1) , 每个处理24朵花, 3次重复。根据授粉的部位即母本花朵位置的不同设3个处理:即茎稍部授粉、茎中部授粉、茎基部授粉, 以自然授粉作为对照 (CK2) 。每个处理25朵花, 4次重复。

1.4 试验方法

具体授粉方法如下:授粉前疏除弱小、有虫害的花朵, 以减少授粉植株的营养消耗和便于试验操作[4], 选择茎杆粗壮、分节明显、无病虫害的植株上的花作为父本, 选择与父本植株不同但种源相同且同样健壮植株的茎基部的花朵作为母本, 用镊子夹掉父本的唇瓣, 去除药帽后可以看到4个黄色花粉团, 用镊子摄取花粉团, 将从父本中取得的花粉团送入母本柱头内, 并用镊子除去母本唇瓣及药帽内的花粉团授粉。

1.5 调查内容与方法

以上2种方式授粉后及时挂标签, 做标记。放置温室进行管理, 每周施肥1~2次, 授粉10、30 d后统计坐果率。

2 结果与分析

2.1 不同授粉时间对坐果率的影响

试验在花开第1、2、3、4、5天分别选取72朵花作为母本对其进行授粉。授粉1周后花柄处开始膨大, 颜色呈浅绿色的表明授粉成功, 授粉失败的花柄处呈黄色最后脱落[4]。经过10 d观察, 花苞展开第1、2、3、4、5天授粉所得坐果率分别为55.5%、81.9%、87.5%、43.0%、9.7%, 花苞展开前2、3 d授粉所得坐果率高于第1、4、5天。授粉后15 d果柄开始由白转绿, 花瓣失水萎缩开始脱离母体, 子房开始膨大, 部分可以看到棱状结构[5]。30 d后, 部分蒴果脱落, 但是, 开花第2、3天的坐果率依旧高于第1、4、5天 (表1) 。

2.2 不同授粉部位对坐果率影响

授粉30 d后, 茎稍部、茎中部、茎基部授粉所得蒴果数量分别为58、52、56个, 3组数据差异不显著。但蒴果的重量分别为0.520 053、0.604 271、0.706 846 g, 蒴果直径分别为7.637 181、8.297 292、8.941 692 mm。由此可见, 虽然茎基部、中部、稍部坐果率差异不明显, 但就蒴果重量和大小来看, 茎基部授粉所得蒴果质量较高 (表2) 。

3 结论与讨论

试验结果表明, 铁皮石斛同一种源人工授粉以开花第2、3天授粉坐果率较高, 此时花粉成熟, 柱头粘液量较大, 授粉效果好, 坐果率高[3]。此结论与李守龄等[4]试验中第5天左右授粉坐果率较高的结论不同。这可能是江苏省苏州市与云南省德宏州地理位置不同, 光照、温度及水分的管理不同体现出的差异。本文的试验结果可作为江苏地区铁皮石斛的育种的参考。在花后的第1天或花苞未完全展开时授粉, 此时花粉成熟度不够, 授粉的坐果率不高, 即使坐果也易落果。茎的稍部、中部、基部花作为母本所得蒴果中, 以基部蒴果质量最优, 这可能是养分自根部向上输送, 有利于茎基部营养成分积累, 使得蒴果饱满。铁皮石斛为异花授粉植物, 自花授粉虽然可以结果, 但是种子饱满度明显不如异丛异花授粉的种子, 而且有严重的落果现象[4]。试验中, 对照自然授粉坐果率都为0。这表明铁皮石斛自然授粉率极低, 只能通过人工授粉改变此现状。试验还观察到, 花期如遇低温、多雨和干燥天气, 对授粉和坐果均有不利影响。因此, 人工授粉时间应选择在晴天进行, 以提高坐果率和果实质量[5,6]

摘要：铁皮石斛人工授粉试验结果表明, 铁皮石斛同源异株异花在花蕾展开第2、3天的坐果率高于第1、4、5天;茎基部的蒴果重量和直径大于茎稍部、中部。综合来看铁皮石斛人工授粉, 应在开花第2、3天, 优选在茎基部进行授粉。

关键词：铁皮石斛,人工授粉,坐果率

参考文献

[1]史骥清, 吴雅.不同地域铁皮石斛抗寒性研究[J].现代农业科技, 2009 (20) :118-119.

[2]洪香娇, 喻晚之, 熊正葵.铁皮石斛的组织培养与快速繁殖[J].现代园艺, 2008 (7) :9, 13.

[3]林丛发, 钟爱清, 林云斌, 等.铁皮石斛类原球茎增殖和分化的研究[J].江西农业学报, 2007, 19 (1) :84-86.

[4]李守龄, 白燕冰, 高燕, 等.齿瓣石斛人工授粉试验[J].热带农业科技, 2009, 32 (2) :35-36.

[5]耿秀英, 白燕冰, 周候光, 等.球花石斛人工授粉试验[J].热带农业科技, 2012, 35 (2) :37-38.

林下铁皮石斛种植技术 篇6

1 林下种植的优势及前景

林下种植解决了因退耕还林所导致的农林空间利益冲突问题,将双赢的理念运用到林业资源的优化配置上,以科学实用技术为支撑,将林业资源优势共享,针对林业的长、中、短期效益进行有效设计,既满足当前农林经济发展需要,长远上又形成和谐生态环境的良性局面,实现了林业的可持续发展[2,3]。

林下中草药种植近几年呈上升趋势,加之人们对健康保健认识的不断加深,国内外对铁皮石斛的需求指数不断攀高,这为林下铁皮石斛的规模化生产提供了极大的动力。

2 林下铁皮石斛种植技术

2.1 林地选择和处理

铁皮石斛为附生植物,附主对其生长有较大影响。林地应选择四季常绿、密度合理、通风条件好,有良好的水源条件,环境相对湿度维持在60%~80%,交通相对便利的乔木林。选择树体水分较多、树干直径适中、树皮较厚且不会自然脱落、有较多纵裂沟纹、易于管理的树种作为铁皮石斛的附主。在移植铁皮石斛前,应清除灌木和杂草,减少蜗牛、蛞蝓等害虫滋生;清理枯枝、细枝,适当修枝。

2.2 铺设供水系统

在种植林地的上方建贮水池,通过落差供水,节省能源,降低养护成本。采用滴灌方式补水,在距种植最上层20 cm的地方安装滴灌喷头,喷头数与树体一圈的种植丛数相同。

2.3 移植时间和方法

一般每年的3—5月及9—10月是铁皮石斛移植的最佳时期。将经过驯化0.5 a以上,生长健壮,无病虫害,茎长在8 cm以上,单丛有效茎数不少于5条的铁皮石斛苗,用麻网带或稻草绑在树干上,位置应靠近茎基根部,露出茎基部以利于发芽,松紧度以苗不滑落为宜。

2.4 肥水管理

铁皮石斛在刚种植的小苗期必须进行适当补水,保持树皮湿润,以满足其生长需求。夏秋季是铁皮石斛旺长期,晴天应通过滴灌补水;冬季处于休眠期,不需要太多水分,一般不补水,如遇晴天时间长,看情况适当补水。由于种植条件的限制,林下种植铁皮石斛一般不需要施肥。

2.5 病虫害防治

林下附生种植,由于通风条件好,铁皮石斛病害较少,可能轻微发生黑斑病,对铁皮石斛的生长没有影响,不需要使用药物防治。危害最大的害虫是蜗牛和蛞蝓,除了采取清除灌木和杂草,定期在种植树体的树头撒生石灰的措施防止为害外,还可在林下养殖家禽如鸡、鸭等,利用家禽的活动和取食,达到防治虫害的目的。

3 结语

加快林下种植铁皮石斛的发展,既可以实现林产品的丰产优产,又可以实现解决中草药市场供不应求的现状,还能创造更多的经济效益和生态、社会效益。因此,应通过不断提高林下种植的技能来增加铁皮石斛种植的地区适应性,逐步完善各方协调机制,保证林下种植铁皮石斛的可持续平稳发展,实现富民增收和地方经济建设的稳健增长。

参考文献

[1]李荣和,于景华.林下经济作物种植新模式究[M].北京:科学技术文献出版社,2013.

[2]热哈马.林下种植贝母技术[J].农村科技,2011(7):56.

铁皮石斛林下培育技术研究 篇7

铁皮石斛 (Dendrobium officinale Kimura et Migo) 又名:黑节草、云南铁皮, 属微子目, 兰科多年生附生草本植物, 茎直立, 圆柱形, 长9~35cm, 粗2~4mm, 萼片和花瓣黄绿色, 近相似, 长圆状披针形, 长约1.8cm, 宽4~35mm, 花期3~6月, 主要分布于中国安徽、浙江、福建等地。铁皮石斛是传统的名贵中草药, 药用价格高, 具有滋阴清热、生津益胃、止咳润肺益肾、明目强腰等功效。目前, 对铁皮石斛的培育技术研究与利用取得较大发展, 需求量大。本文针对铁皮石斛林下培育技术研究进行了总结, 为今后推广发展铁皮石斛提供参考。

2 试验材料与方法

铁皮石斛苗木在进行试验时, 为了对苗木栽培生长状况进行对比, 一共设置了3组处理, 同时, 每组处理还设置了3次重复进行对比分析。

2.1 试验地慨况

试验区位于福建省安溪县福田乡福田村, 北纬25°12′00″, 东经117°25′12″。气候属南亚热带季风气候, 境内四面群山怀抱, 森林茂布, 生态良好, 无环境污染。四季气候暖和, 雨水充足, 干湿分明。年平均气温17.0℃, 降雨量1800mm, 空气相对湿度81%左右, 1月份平均气温15℃, 极低温-1℃, 7月份平均气温30℃, 极高温36℃, 全年≥10℃, 活动积温7000℃, 年日照2069h, 无霜期349d。试验地的海拔高度300m, 适宜铁皮石斛生长。

2.2 茎条选择

在培育铁皮石斛时, 对嫩枝进行选择, 主要选择了1年生、2年生、3年生的嫩枝茎条作繁殖培育苗木对比分析试验。

2.3 插条处理

在选择嫩枝插条处理时, 初定为两种, 分别选为不同时间控温处理和植物激素处理, 下面就两种不同方式进行处理试验。

2.3.1 温度处理

不同时间控温处理:首先, 要确定一个参照对象, 选择为不做任何处理的插条。然后将4~12个月生的嫩枝茎条切成长度6~8cm小段, 然后放入到恒温箱中进行保存, 再对恒温箱的温度和湿度进行有效的控制, 温度控制一般在20~32℃的范围之内, 而湿度则控制在90%左右, 每次的光照时间确定为12h, 经过5个月的处理后, 可将穗条移植到苗床扦插。

2.3.2 激素处理

植物激素处理, 同样以不做任何处理的插条作为参照, 选择不同类型的溶液对插穗进行处理, 所选用的溶液主要为5%的NAA溶液、5%的IAA溶液、5%的IBA溶液以及5%的6-BA溶液, 由此来进行植物激素的选择试验。

2.3.3 苗木扦插

在对苗木扦插基质进行选择时, 同样需要选择参照, 经过分析, 选择河沙。然后再分别选用珍珠岩、山基土、碎木屑、碎碳为扦插基质, 由此来进行扦插基质选择试验。

2.4 培育管理

2.4.1 分株养殖

春季结合换盆进行。将生长密集的母株, 从盆内托出分株养殖, 在处理时应注意避免损伤根叶, 把苗轻轻掰开, 选用3~4株栽植放在15cm大的盆子里, 然后浇水湿透, 这样有利于苗木繁殖培育成型, 又能促进苗木开花。

2.4.2 扦插养殖

选择未开花而生长充实的假鳞茎, 从根际剪下, 再切成一小段, 每一小段2~3节, 长度6~8cm, 然后将鳞茎直接插入泥炭苔藓中或用水苔包扎插条基部, 保持湿润, 在室温18~22℃, 一般情况之下, 在扦插之后30~40d即可生根, 开始萌芽, 当苗木抽稍长到3~5cm时便可进行盆栽。

2.4.3 组培养殖

在进行组培养殖的过程之中, 一般都是以茎尖和叶尖作为外植体, 选择好外植体之后, 将之附加在苄氨基腺嘌呤0.5mg/L的MS培养基上, 这样一来, 其分化率大致能够达到1∶10左右。再将分化之后的幼苗转到含有一定活性炭与椰乳的MS培养基之中, 就能够正常生长了。等到幼苗在培养基中逐渐形成了无根幼苗, 然后将幼苗再次转换培养基, 将其放置到含有吲哚丁酸0.2~0.4mg/L的MS培养基中, 这一培养基能够诱导幼苗进行生根, 并由此形成了具有根、茎、叶的完整植株。

2.4.4 栽培管理

盆栽铁皮石斛需用泥炭苔藓、蕨根、树皮块和木炭等作为轻型基质培育, 试验结果表明:排水好的基质有透气高的生长较好, 若在盆底下垫上一些瓦片或者碎砖屑, 可增加底下通气度, 促进根系生长, 对根系的发育能起到了一定的促进作用, 有利于幼苗的生长。尤其在春季与夏季, 气温较高时, 苗木要经常适当给予浇水, 保证基质具有一定的水分, 其苗木生长较快, 生长效果较好。到9月以后, 由于气候变化, 天气不热, 气温降低, 水分蒸腾较少, 可逐渐减少浇水, 这样才能使假球茎逐趋成熟, 促进开花。在生长期每旬施肥1次, 但秋季施肥量可减少, 到假球茎成熟期和冬季休眠期时, 则可停止施肥。

3 试验结果与分析

3.1 穗条选择分析

通过对不同龄插穗的出圃率进行比较, 得出结论:铁皮石斛扦插可选用1年生和2年生茎节做插条为适宜, 而3年生茎节并不适合作为插条, 其繁殖较慢, 生长不良 (表1) 。

3.2 插条处理分析

不同时间控温处理实验的结果显示见图1。

从图1可以发现, 经过3种温度处理之后, 插穗抽芽的出圃率之间并不存在着较大的差距, 都是在40%~70%的范围之内。根据这一试验, 可以看出结果, 抑制花芽分化的关键因素主要是温度的处理时间。在一般情况下, 对于铁皮石斛而言, 抽芽期主要是在12月到第二年3月, 开花期都是在2月到4月。而在开花期前两个月, 花芽已经基本形成。因此, 需要在花芽形成之前对茎节进行一定程度的处理, 这样一来, 就能够对花芽分化起到一定的抑制作用, 使铁皮石斛插条时才能抽出更多的芽。

3.3 植物激素处理分析

根据表2、表3的试验结果, 显示的结论:植物激素能促进铁皮石斛的生长, 在一般条件下, 铁皮石斛扦插之后, 经过的管理, 只要是生根的插穗均能萌芽、抽稍。而4种方式不同的处理扦插方法, 铁皮石斛的萌芽、抽穗具有着十分明显的不同效果, 其显示结果不同。

3.4 扦插基质的分析

扦插试验结果显可见图2。

根据图2可以得出结论, 以河沙为扦插基质, 铁皮石斛生长效果较为理想, 其效果较好, 其它扦插基质的出圃率均为3.67%。

4 结语

随着社会经济的迅速发展, 科学培育技术水平的不断提高, 铁皮石斛植物种植技术的栽培取得了较大进展, 用植物激素处理, 能够促进幼苗生根, 苗木萌芽、抽稍, 促进苗木的生长, 提高苗木生长量, 尤其是对花芽能起到分化作用, 可萌较多的芽, 生长更多的抽稍。从试验显示, 选用1年生和2年生的穗条做扦插试验, 苗木生长较快, 繁殖容易, 试验结果良好。而3年茎节穗条扦插, 生长根系很慢, 难予萌芽, 抽梢较少。为此, 铁皮石斛植3年茎节做穗条扦插, 生长不宜作插条。总之, 铁皮石斛在河沙里扦插, 基质能够达到最为理想的效果, 其苗木生长生长快, 效果良好。试验证明:铁皮石斛林下培育技术值得推广。

参考文献

[1]梁淑颖, 曾令杰.组培条件下铁皮石斛幼芽分蘖和生根的影响因素研究[J].北方园艺, 2013 (14) :112~114.

[2]潘超美, 童家赟, 刘丹霞, 等.铁皮石斛离体培养体细胞胚发生的组织细胞学研究[J].广州中医药大学学报, 2008, 25 (1) :74~76.

[3]潘梅, 吕德任, 姜殿强, 等.铁皮石斛袋式组培快繁技术研究[J].江苏农业科学, 2013, 41 (10) :37~40.

[4]杨旺利.生态林内人工栽培铁皮石斛试验研究[J].福建林业科技, 2012, 39 (1) :48~52.

[5]刘穗金, 许健红, 刘宏源, 等.生长素在铁皮石斛育苗中的应用效果研究[J].现代农业科技, 2013 (8) :143.

铁皮石斛组织培养研究进展 篇8

1 外植体的选择

外植体作为植物组织培养中离体培养材料的来源, 原则上可采用植物任何部位, 但植物的不同部位对诱导反应条件不同。在铁皮石斛组织培养过程中, 研究人员试验过不同种类的外植体。现在已可以以种子[2]、茎段[3]、腋芽[4]以及根尖[5]作为外植体, 建立铁皮石斛快繁体系, 获得优良种苗。由此看来, 铁皮石斛组织培养外植体来源丰富, 可结合实际情况作出选择。

2 培养基的选择

2.1 基本培养基

对铁皮石斛组织培养所选择的基本培养基包括MS、B5、N6、RM和Fonnesbech[6,7]。但对于不同的外植体, 最适合的基本培养基却不一样。徐雪荣等[6]认为, MS基本培养基为原球茎增殖的最佳培养基;邓珂[7]比较了MS、B5、N6、RM这4种基本培养基对铁皮石斛愈伤组织诱导效果的影响, 认为N6基本培养基对愈伤组织诱导效果最好。

2.2 激素的选择和配比

铁皮石斛组织培养中, 在激素种类的选择上, 以6-BA和NAA最为常见, 2, 4-D、KT和TDZ等也是不错的选择。针对不同的培养目的及培养阶段, 研究者以正交试验的方法来探寻各种激素比例的配比, 并探讨最佳配比。徐雪荣等[6]研究表明, MS+6-BA0.75mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+4%白糖为原球茎最佳增殖培养基;MS+6-BA0.3mg·L-1+3%白糖为最佳分化培养基;MS+活性炭0.05%+3%白糖为最佳生根培养基。洪森荣等[8]指出, 以MS为基本培养基, 添加KT2mg·L-1和NAA 0.5mg·L-1, 对铁皮石斛带芽茎段芽和叶的分化均有促进作用。岑秀芬等[9]在铁皮石斛离体开花诱导中, 以MS+PP3330.3mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+TDZ0.06mg·L-1作为培养基, 有利于花芽的形成。

2.3 添加剂

添加剂的使用为铁皮石斛组织培养快繁体系的建立提供了更多的可能。香蕉汁、椰子汁和马铃薯泥是铁皮石斛组织培养中常用的添加剂。张书萍[10]发现20%香蕉汁促进苗的生长加快, 对苗的生根起主要作用;廖俊杰等[11]以香蕉汁和椰子汁促进芽的分化, 并促进丛芽和原球茎的增殖;赵银河[12]以马铃薯泥作为添加剂诱导愈伤组织;何涛[4]认为添加香蕉汁或马铃薯泥均有利于壮苗生根。

除了传统的添加剂, 近年来稀土元素、纳米材料以及真菌也被用于铁皮石斛的组织培养中。周伟等[13]研究表明, 镧 (La) 元素对提高试管苗质量、叶绿素b、总叶绿素和石斛多糖的量都有显著影响;李进进等[14]以AgNO3作为铁皮石斛的抗衰老剂, 明显促进种苗生长, 提高移栽成活率;黄松等[15]研究表明, 纳米材料TiO2和SiO2对铁皮石斛侧芽及丛芽的诱导有明显的促进作用;郭顺星等[16]以真菌伴种子播种方法, 提高铁皮石斛种子萌发率。

3 培养条件

培养条件的优化, 成为铁皮石斛组培快繁研究的一个重要组成部分。在对培养条件的研究中, 光照条件是研究最多的因素。鲍顺淑[17]在人工光型密闭式植物工厂内培育铁皮石斛组培苗, 结果表明光照周期12 h·d-1, 光照强度68μmol·m-2·s-1为最佳培养条件。姚睿等[18]以工作体积为2L的气升式球形生物反应器内接入10g·L-1原球茎外植体, 光照强度1 600lx, 通气量0.2, 有利于原球茎生长和多糖及石斛碱的生产, 成为大量快速繁殖, 生产多糖和石斛碱的有效途径。

4 品质

组织培养方法生产的铁皮石斛品质已成为人们关注的焦点。黎万奎等[19]比较人工栽培铁皮石斛与其它来源铁皮石斛中氨基酸与多糖及微量元素可知, 铁皮石斛组培物在总氨基酸含量以及微量元素均高于其它种类, 但多糖含量较低。范俊安等[20]对比铁皮石斛组培品和野生品, 二者在植物形态上十分相似, 组织结构基本相同, 主要成分无显著差异。组培品和野生品药材品质相近, 这为组培生产铁皮石斛切实可行提供了有力的证据。

5 展望

据报道, 全国铁皮石斛种植面积已突破667hm2, 浙江、云南和广西等多地建立了铁皮石斛种植基地。因此, 应加强铁皮石斛优良品种的选育, 加强种质资源的保存, 防止种苗退化, 以期实现铁皮石斛利用与保护的可持续发展。

摘要：为建立铁皮石斛的快速繁殖体系, 实现其利用与保护的可持续发展, 从外植体、培养基、培养条件和品质鉴定等方面综述了近年来铁皮石斛组织培养的研究概况, 并对铁皮石斛组织培养发展进行了展望。