放射免疫分析方法

放射免疫分析方法（共4篇）

放射免疫分析方法 篇1

目前在对血清FT3、FT4以及TSH进行检测时，仍有部分医院会采用放射免疫的方式。这一方式，虽然能够获得比较准确的结果，但是，由于其具有放射污染，所以，或多或少会对相关人员造成伤害，也是因为这一点，所以，这种方式在临床上受到了制约。而磁酶免疫的方式，是一种成本低且无污染的方式，以其较高的灵敏度、较为宽泛的测量范围以及较好的特异性，而成为目前临床应用比较广泛的方式。针对此，本文使用磁酶免疫和放射免疫方式检测血清FT3、FT4以及TSH的结果，进行对比分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取了2010年1月-2014年6月来我院就诊的患者246例，将其作为试验组。同时，选取200名正常者作为对照组。在试验组的所有患者中，有138例为初诊甲亢患者，另外的108例为初诊甲减患者。246例患者的年龄范围16～66岁；患者的性别男96例，女150例。对照组中，其年龄分布在18～62岁之间，其中，男78例，女122例。让对照组和试验组的所有人在空腹的情况下，实行静脉抽血，并将血清分离，放置于-20℃的冰箱中进行保存，所有检测均在一星期之内完成。

1.2 检测设备及检测试剂

在本研究中，磁酶免疫检测采用的是智能测定仪，型号为Magimuzyme—III。采用的检测试剂是由新产业生物医学工程有限公司提供的。放射免疫采用的一起是SN-695B型号的放射免疫测量仪。采用的试剂是由云克药业有限公司提供的。值得注意的是，在对患者血清TSH进行检测的时候，采用的具有很高灵敏度的放射免疫药盒。

1.3 检测方法及结果判定

不管是磁酶免疫方法还是放射免疫方法，都严格按照说明书上的操作步骤来进行，从而得到吸光度结果。最后对两种方式所得到的结果做出比较。在对两种方式正常值范围进行比较的时候，需要参考相关的标准来进行。首先，对于磁酶免疫方法来讲，FT3正常值的范围应该在1.21～4.17之间；FT4正常值的范围应该在7.2～17.2之间；TSH正常值的范围应该在0.6～4.5之间。对于放射免疫方法来讲，FT3正常值的范围应该在3.1～9.3之间；FT4正常值的范围应该在8.35～24.8之间；TSH正常值的范围应该在0.3～5之间。从两种方式的测量范围来看，磁酶免疫法，FT3测量范围应该在1.37～25之间；FT4测量范围应该在4～120之间；TSH测量范围应该在0.15～50之间。放射免疫法，FT3测量范围应该在1～27之间；FT4测量范围应该在2～55之间；TSH测量范围应该在0.15～100之间。

2 结果

经过血清FT3、FT4以及TSH的检测结果见表1。分别实行t检验，P>0.05，所以，我们可以得出这样的结论:磁酶免疫方法和放射免疫方法所得结果并无明显的差异。

另外，我们采用线性回归的方式，对这两种方式的相关关系进行研究，从而得到了线性回归的方程式。其中X是

放射免疫方法，Y是磁酶免疫方法。具体的方程式如下。

从上述线性回归结果，我们可以清晰的看出，这两种结果是存在着较高的相关性的。也就是说，这两种方式得到的结果是近乎相同的。再从两种方式的批内变异率以及批间变异率的结果来看，在对其进行测定的时候，我们选择了与之相配套的试剂质控物，来实行重复的测定，从而在血清FT3、FT4以及TSH 3项指标上得到了表2所示的结果。

3 讨论

采用磁酶免疫方法进行血清FT3、FT4以及TSH的检测，其结果也表明这种方式的诊断有着极高的灵敏性和特异性，而所得到的结果，和放射免疫所得到的结果也是呈现出极高的相关性的。但是，对于放射免疫而言，由于其具有放射污染，所以，在临床受到限制。此时，有着相同相关结果磁酶免疫就显得更具优势，不仅操作简单，流程也比较简短，同时还没有污染[1,2,3]。

而从表1所得到的结果来看，对照之前的正常值范围，我们也可以得到这样的结论:磁酶免疫法在这3项指标检测上的结果和放射免疫法相当，并且检测范围相比较于放射免疫法要来的更加宽泛，加上灵敏度比较高，抗干扰能力比较强等优势。所以，磁酶免疫法是一种值得推广的方式。

摘要：目的 对使用磁酶免疫和放射免疫方式检测血清FT3、FT4以及TSH的结果做出对比分析。方法 选取2010年1月-2014年6月来我院就诊的患者246例,将其作为试验组。其中,有138例患者为初诊甲亢患者;另外的108例患者为初诊甲减患者。同时,选取200名正常者作为对照组。采用磁酶免疫和放射免疫的方式,分别对试验组和对照组的患者进行血清FT3、FT4以及TSH者3项指标的检测,并作出对比分析。结果 这两种方式在血清FT3、FT4以及TSH的测定中,并没有明显的差别,结果呈现出线性相关。结论 磁酶免疫方式和放射免疫方式有着同样的效果,所以,磁酶免疫方式是一种值得推广的方式。

关键词：磁酶免疫,放射免疫,FT3,FT4,临床应用

参考文献

[1]李兴矗.磁分离酶联免疫技术测定FT_3、FT_4、TSH[J].实用临床医学,2009,5:43.

[2]谢国强.磁性均相酶免疫技术测定血清TSH、FT₃、FT₄的临床应用[J].国外医学,临床生物化学与检验学分册,2009,6:565-566.

[3]吴思源,何静.磁酶免疫和放射免疫方法检测血清TSH、FT3、FT4的方法学探讨及临床应用[J].内蒙古中医药,2008,9.

放射免疫分析方法 篇2

1 故障现象

早上开机后, 进行每日常规本底计数测量, 测量时间为1 min, 先测量10次, 每个通道每次本底数值均小于80cpm (见表1) , 符合质控要求。

cpm

继续测量发现, 第一通道本底开始升高, 而且逐步呈上升趋势, 超出质控要求范围, 其他通道均在正常范围内 (见表2) 。

2 故障分析

(1) 首先, 考虑故障通道的探头是否被污染。由于该仪器测量时采用5个机械手抓取试管后放入测量孔进行测量, 故考虑测量孔内是否存在污染。将测量孔内的套管移出后进行位置更换, 再进行本底测量。经测量, 发现第一通道仍出现超高的本底, 而其他被更换套管的通道均在测量时未超出正常范围, 故排除此原因。

cpm

(2) 检查本底测量时所使用的管架是否存在污染。更换新的管架进行测量, 测量结果第一通道还是超出质控范围。

(3) 考虑是否由于第一通道电压与其他通道的电压出现较大偏差而造成本底偏高。使用仪器自带自动调节程序进行调节, 调节完成后从调节系数看基本在正常范围内, 再次进行本底测量, 故障依旧。

(4) 考虑可能是碘化钠晶体老化[2], 导致第一通道故障。使用仪器自带的机器测谱程序对第一到第五通道进行测测量发现, 第一通道的能峰相对于其他4个通道而言, 明显出现漂移, 故基本可断定是碘化钠晶体的老化导致光电转换效率的降低而出现本底升高。

3 故障排除

对第一测量通道的碘化钠晶体进行更换, 更换完毕后进行自动调节等一系列的仪器校正, 调试完毕后进行多次长时间的本地测量, 结果显示各通道本底均在质控范围内, 故障排除。

4 小结

从上述故障的出现到解决, 我们可以发现, 对于此类仪器必须严格按照质控要求每日对其进行至少一次本底测量。如果条件允许, 可进行多次不同时段的测量, 每次只是简单地开机测量本底可能会忽略一些问题。当出现问题时, 要逐步排查, 不能忽略小的细节, 力争在最有效的时间内解决问题。如果自己无法解决一定要及时通知厂方工程师, 不要盲目私自进行维修。对于此类设备需要注意的是:严格按照操作程序进行操作;多利用仪器自带的程序进行调节或测量参数观察仪器的状态;注意操作间的温度和湿度, 保持仪器的干净与整洁, 避免污染;尽量减少人为因素造成的仪器故障。

参考文献

[1]潘中允.临床核医学[M].北京:原子能出版社, 1994:417-420.

放射免疫分析方法 篇3

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2009年1月至2010年3月入湘潭县人民医院糖尿病专科治疗的50例2型糖尿病患者组成病例组, 其中男性患者31例, 女性患者19例, 年龄39～72岁, 平均年龄 (52.5±4.9) 岁, 空腹血糖在10～16mmol/L;选取2010年1月至2010年3月入湘潭县人民医院体检的健康人30例组成对照组, 男性患者18例, 女性患者12例, 年龄33～68岁, 平均年龄 (51.2±5.4) 岁, 本组30例均为无肝、肾疾病、糖尿病病史的体检健康者。

1.2 方法

测定方法:全部受检者都未进行胰岛素治疗, 在进行放射免疫分析检测前1d的晚上禁食, 检测当天清晨空腹采取静脉血, 并于当天停止服用所有药物。然后, 食用1个重量为100g的馒头 (与75g葡萄糖相当) , 分别在餐后1h、2h、3h抽血一次, 运用放射免疫分析检测胰岛素及C-肽含量。此外, 试验仪器选择情况为:选用中国科技大中佳公司生产的全自动GC1200型为γ放射免疫计数器, 选用北京北方生物制品研究所提供的放射免疫分析测定试剂盒, 全部操作均严格依照仪器使用说明书规定进行。

统计学方法:以 (χ—±s) 表示实验统计数据, 统计分析采用SPSS14.0软件进行处理, 以χ2检验进行两组数据的对比研究, 以P<0.05表示有统计学差异。

2 结果

相对于对照组, 病例组患者空腹胰岛素及C-肽较高 (P<0.05) 。对照组患者在餐后1h后出现峰值, 2型糖尿病患者餐后2h后出现峰值, 持续到餐后3h后仍不能达到正常水平。试验过程中, 关于胰岛素释放情况的具体数据如表1所示, 关于C-肽释放情况的具体数据如表2所示。

3 讨论

3.1 胰岛素放射免疫分析概述

Yalow于1960年最早将放射免疫分析用于测定患者血浆中的胰岛素含量。1963年, 我国开始将放射免疫分析应用于患者胰岛素含量的测定[2]。近年来, 伴随放射免疫分析测定患者胰岛素含量的普及运用, 其在糖尿病患者的诊断、分型、指导选择合适治疗方式等方面发挥了重要作用。胰岛素放射免疫分析的基本原理是利用顺序饱和分析法, 使得胰岛素抗体与未标记的胰岛素进行充分性反应, 产生抗原抗体复合物 (Ag-Ab) 。对于剩下的没有结合的胰岛素抗体, 进一步与标记的胰岛素进行充分性结合, 产生抗原抗体复合物。最后, 以第二抗体组织分离结合与游离的标记胰岛素, 对沉淀部分的CPM数加以测定, 进而计算得出血浆中胰岛素的实际含量。

3.2 C-肽放射免疫分析概述

胰岛素原 (Proinsulin) 是单链多肽的, 并且其中存在一条由31个氨基酸残基构成的联接肽, 联接胰岛素的A、B链, 这就是我们所研究的C-肽 (C-Peptide, C-P) 。胰岛素原在羧肽酶、蛋白酶的作用下能生成一个分子的C-肽和一个分子的胰岛素, 所以可以将胰岛素原看作胰岛素、C-肽的前身物质。当前, 临床上还没证实C-肽具有生物活性, 但是已证实胰岛素、C-肽是按照等克分子比例关系由胰岛β细胞释放至外周的血液循环[3]。胰岛素抗体和C-肽之间不存在交叉免疫反应, 临床上应用治疗的胰岛素药物同样不含C-肽, 但鉴于C-肽具有抗原性, 所以其能够用免疫学方法来检测。C-肽放射免疫检测在国外建立于20世纪60年代末, 国内近些年来也正在广泛应用于临床。运用放射免疫分析方法测定血浆中的C-肽含量具有重要的临床价值, 不仅能够真实反映那些接受外源性胰岛素治疗的糖尿病患者胰岛β细胞的分泌功能实际情况, 而且能够为糖尿病患者临床分型、选择治疗方案提供了重要依据。

3.3 放射免疫分析测定胰岛素及C-肽的临床价值

测定胰岛素和C-肽含量是糖尿病患者在检查过程需要了解的主要指标, 通过分析该指标的测定结果能够判断患者胰岛素合成及分泌功能[4]。本研究对病例组50例2型糖尿病患者组织了餐后试验, 并在试验过程中运用放射性免疫分析的方法对胰岛素和C-肽进行测定, 统计结果显示病例组患者的空腹胰岛素、C-肽水平相当于对照组稍高, 而餐后血糖则明显高于对照组, 证明患者空腹情况下的胰岛素分泌基本正常, 但是体内胰岛素对抗激素或者胰岛素抵抗会增加。已有文献报道证实, 2型糖尿病患者在空腹时皮质醇和血清生长激素会增加, 致使患者空腹时血糖上升。虽然患者餐后胰岛素含量较餐前会增加, 但是相当于健康人还是较低。因此, 建议临床医生在葡萄糖耐量试验中, 联合胰岛素和C-肽放射免疫分析结果, 能够确定地实现糖尿病分型的目的, 对2型糖尿病患者的进一步治疗及预后提供可靠依据。

综上所述, 放射免疫分析测定胰岛素及C-肽具有较高的2型糖尿病临床诊断价值, 可以为糖尿病的准确分型、进一步治疗及改善预后情况提供客观依据。

参考文献

[1]谢玮, 赵枰, 陶国华.化学发光免疫分析测定胰岛素及C-肽在2型糖尿病诊断的临床应用[J].标记免疫分析与临床, 2009, 16 (5) :283-284.

[2]黄沛隆.血清C-肽和胰岛素测定对2型糖尿病的诊断价值[J].中国基层医药, 2006, 13 (4) :667-667.

[3]邢淑清, 刘红, 李瑞新.血清C-肽测定在2型糖尿病诊断中的临床意义[J].中国临床实用医学, 2009, 3 (12) :73-74.

放射免疫分析方法 篇4

材料和方法

1.仪器与分析软件。GC-300放射免疫计数器, 科大创新股份有限公司中佳分公司;联想扬天T2000型计算机;GC-300分析软件V3.2版。

2.试剂。三碘甲腺原氨酸放射免疫分析药盒, 浓度分别为B0 (0ng/ml) , B1 (0.5ng/ml) , B2 (1.0ng/ml) B3 (2.0ng/ml) , B4 (4.0ng/ml) , B5 (8.0ng/ml) :北京北方生物技术研究所

3.方法。实验过程:试验按三碘甲腺原氨酸放射免疫分析药盒上标注的试验方法进行加样;分别设置低、高2个质控浓度点;测定时间60秒;离心温度4摄氏度;离心转速3800r/min;离心时间15分钟;测定次数20次。采用的四种拟合方式如下:Log_Logit拟合法、四参数拟合法、LOG三次多项式拟合法、3/2方程拟合法。

结果

笔者经过对20次测量数据的整理取得各数据点均值cpm, 并求出各数据点结合率 (见表一) , 分别建立其4种拟合方法曲线。表一:数据结果

不同拟合法所获数据如下:表二:不同数学模型处理RIA曲线的反求浓度表

讨论

在放射免疫分析法检验中, 待测样品浓度值是根据标准曲线计算而得。因此, 保证分析曲线的正确与直观是保证测量结果准确的一个重要前提。常用的评价指标包括相关系数 (R) 和拟合百分比偏差 (DEV%) , 通常情况下, 相关系数R等于或者接近于1说明曲线拟合度越好。标准百分比偏差的计算公式为:DEV (%) = (实测各管标准品浓度值各标准品浓度) /各标准品靶值x100%, 一般要求各标准点的DEV%<10%[1]。通过以上四种模型曲线的建立, 我们得出各曲线的相关系数和拟合百分比偏差。我们看到对于三碘甲腺原氨酸测量各个曲线的R均比较接近于1, DEV%均在10%范围以内, 四种曲线没有显著性差异。对于反求浓度和质控样品的浓度获取, 四种拟合曲线仍旧有略微的差值。综合对比四条拟合曲线的数据来看, 我们可以看到, 四参数拟合曲线获得的数据最为准确, 并且, WHO推荐使用四参数拟合法作为测量T3的拟合法为最佳方法[2]。

以上探讨了放射免疫分析法中测量T3的四种拟合方法, 并对结果做了初步的评价。在实际测量过程中, 需要综合考虑试验药盒的质量以及试验操作人员的技术水平, 才能最好的取得准确的试验结果。

参考文献

[1]李少林.全国高等医药院校《核医学》教材.人民卫生出版社, 2002年新世纪课程教材第五版.