抗体水平对比(通用8篇)
抗体水平对比 篇1
近些年来, 华亭县对猪口蹄疫实施高密度的免疫接种, 通过疫苗免疫使猪群得到有效的保护, 对控制疫情起了显著作用。自2011年以来, 我县对猪口蹄疫采用猪普通口蹄疫疫苗和MYA98苗免疫注射, 普通口蹄疫主要用于散养户的免疫注射, MYA98苗主要用于规模化的养猪场。2011年我县共用两种疫苗免疫猪5.0万头;2012年春季我县共用两种疫苗免疫猪5.5万头。为了全面掌握猪普通口蹄疫苗和MYA98苗免疫注射效果, 根据上级业务安排, 我县在全面调查的基础上, 对两种疫苗的免疫抗体水平做了对比试验, 现将试验结果报告如下:
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验猪
在我县选择20户散养户, 每户选择1头猪作为实验猪, 共选择15头;在1户规模养殖场所饲养的60头猪中选15头作为实验猪。
1.1.2 试验用疫苗
猪普通O型口蹄疫苗;MYA98灭活疫苗。
1.1.3 检验用试剂
口蹄疫正向血凝抗原, 稀释液, 阳性血清, 阴性血清。
1.2 方法
1.2.1 实验设计方案
在我县20户散养户所饲养的20头猪中随机选取15头约50kg重的猪进行实验, 用中牧实业股份有限公司兰州生物药厂生产的猪普通O型口蹄疫苗进行免疫, 免疫剂量为2m L。
在1个规模养猪场60头猪中随机选取10头约50kg重的猪进行实验, 用中农威特生物科技股份有限公司生产的MYA98苗进行免疫, 免疫剂量为2m L。
对免疫后猪进行采血, 监测抗体, 通过对两种疫苗产生的免疫抗体水平进行分析, 对比普通苗和MYA98的免疫效果。
1.2.2 采样方法
免疫30d后对20户散养户所饲养的15头猪和1户养猪场的15头猪进行耳静脉采血。对所采血液编号并及时分离血清后再编号, 用于实验备用。
1.2.3 检验方法
猪O型口蹄疫正向间接血凝试验。
2 试验结果
用中牧实业股份有限公司兰州生物药厂生产的猪O型普通口蹄疫灭活苗对我县20户散养的15头猪免疫;用中农威特生物科技股份有限公司生产的MYA98灭活疫苗对1户养猪场的15头猪免疫后, 抗体水平监测结果如下表:
3 试验结论
3.1 根据正向间接血凝试验判定标准, 抗体效价≥25为免疫合格。
3.2 判定结果如下:注射猪O型普通口蹄疫苗的效价测定15份, 合格份数为12份, 合格率为80%。注射猪MYA98苗效价测定15份, 合格份数为13份, 合格率为86.7%。
3.3 以上免疫抗体水平监测对比显示:用MYA98疫苗免疫猪后, 平均抗体滴度大。
4 结果
我县通过对猪O型普通口蹄疫苗和MYA98苗大面积免疫注射, 没有发现其疫苗的不良反应。根据这次对比实验MYA98苗的效价优于普通苗。
抗体水平对比 篇2
【关键词】 麻疹;脊灰;乙脑;抗体水平;分析
doi:10.3969/j.issn.1004-7484(s).2013.11.688 文章编号:1004-7484(2013)-11-6696-01
为全面贯彻落实扩大国家免疫规划,保证疫苗的有效接种,巩固无脊灰成果、消除麻疹、降低儿童流行性乙型脑炎发病,及时掌握我区儿童预防接种免疫效果,为制定免疫规划工作方案提供科学依据。渭城区疾控中心组织专业人员于2013年7月1日至12日对我辖区0-6周岁儿童开展麻疹、脊灰、乙脑疫苗抗体水平监测。
1 资料与方法
1.1 监测对象 0-6周岁儿童。
1.2 标本的采集和运送 遵循知情、自愿、自费的原则对每名儿童采末梢血20微升,加到预先盛有180微升样品稀释液的离心管中,在2个工作日内将样品冷藏运送到区疾控中心。
1.3 实验材料 麻疹、脊灰、乙脑疫苗IgG抗体酶联免疫检测试剂由江苏冠华生物技术股份有限公司提供,麻疹试剂批号:20130601、效期:20140617;脊灰试剂批号:20130401、效期:20140418;乙脑试剂批号:20130601、效期:20140612。
1.4 试验方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,根据反应色别判断阴、阳性结果。
2 结 果
本次共检测400名儿童,采集合格血清标本400份,其中麻疹抗体阳性人数380人,阴性20人;脊髓灰质炎抗体阳性人数381人,阴性19人;乙脑抗体阳性人数377人,阴性23人,麻疹、脊灰、乙脑抗体阳性率分别为95%、95.25%、94.25%,各项监测指标均达到了国家免疫规划疫苗的抗体保护水平。
3 讨论与建议
3.1 麻疹、脊灰、乙脑疫苗抗体水平是评价健康人群免疫屏障的客观指标,麻疹、脊灰、乙脑减毒活疫苗都有很好的免疫原性,接种后免疫成功率高。本次监测结果表明,我区麻疹、脊灰、乙脑抗体阳性率较高,分析主要原因有:
3.1.1 我区建立了较为完善的免疫规划服务体系和疫苗供应冷链管理体系,通过持续儿童计划免疫工作的开展,使计划免疫相关疾病的发病率明显下降,有效地保护了广大儿童的身体健康。
3.1.2 近几年由于不断地开展麻疹、脊灰疫苗的強化免疫和常规免疫查漏补种等工作,儿童体内产生免疫记忆反应使抗体水平升高的结果。
3.2 检测中发现有20、19及23名儿童分别对麻疹、脊灰、乙脑疫苗均未产生保护性抗体,分析主要原因有:
3.2.1 有些儿童免疫功能不健全,存在个体差异,导致未产生保护性抗体。
3.2.2 有些儿童在检测前刚刚接种了麻疹、脊灰、乙脑疫苗,机体还未到产生保护性抗体的时间。
3.2.3 也可能与疫苗的特异性等因素有关。
因此开展麻疹、脊灰、乙脑疫苗抗体水平检测有助于发现免疫薄弱区和免疫不成功的儿童,为消除免疫空白人群,制定免疫规划策略提供科学依据。
3.3 通过开展麻疹、脊灰、乙脑疫苗抗体水平检测,对未产生保护性抗体的儿童进行免费补种,巩固和提高接种率和接种质量,使健康人群形成稳固的免疫保障。
3.4 加强疫苗储运和冷链监测,确保疫苗的接种效价。
3.5 加强免疫规划知识的培训,提高预防接种人员的业务水平、操作技能,严格按照预防接种工作规范的要求,将常规免疫与查漏补种工作相结合,使我区疫苗的接种工作得到日趋规范和完善,保证接种率达到了较高的水平,使疫苗相关疾病得到了有效控制。
梅毒抗体检测方法的对比分析 篇3
1 资料与方法
1.1 一般资料
选自2009年2月~2010年2月我院住院和门诊诊断和治疗的梅毒患者129例,其中男性99例,女30例,年龄18~75岁,平均35.9岁。本组病例中早期潜伏期梅毒21例,一期梅毒39例,二期梅毒58例,不明期梅毒11例。
1.2 方法
1.2.1 标本采集
对129例梅毒患者,采取肘部无菌静脉血5 ml,3 000 r/min离心5 min,提取血清。
1.2.2 仪器及试剂
XK95I型多用振荡器由江苏江堰市新康仪器厂生产。START IVD ELISA全自动酶免仪;LD5-2A离心机,北京医用离心机厂。TRUST试剂由上海荣盛生物公司提供,TP-ELISA检测试剂为上海科华公司产品,TPPA试剂由日本富士瑞必欧株式社提供。
1.3 实验方法与原理
所有检测操作程序和结果判断均严格按照试剂盒说明书进行,并在试剂盒有效期内使用。TRUST法:采用活化心磷脂卵磷脂胆固醇配制VDRL抗原重悬于甲苯胺红特制溶液中与梅毒患者血清中的反应素发生粉红色凝集。分别取50μl的待测血清和TRUST试剂置于纸卡中,混匀8 min后肉眼观察凝集情况,使阳性结果出现红色絮状凝集现象。TP-ELISA法:包被精制基因工程表达的梅毒螺旋体特异性抗原,与梅毒血清抗体发生特异结合,产生显色反应。TPPA法:用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒与血清中的梅毒螺旋体抗体结合,产生可见的凝集反应,明胶颗粒为玫瑰红色。
2 结果
129例梅毒患者进行3种方法的检测,TRUST法检测阳性92例,阳性率为71.37%;TP-ELISA法检测阳性112例,阳性率为86.82%;TPPA法检测阳性129例,阳性率为100%;
3 种方法检测阳性率经统计学分析比较,P<0.05有显著性差异。同时对3 种检测方法的敏感度、特异性进行比较,具体见表1。
经统计学分析,TP-ELISA、TPPA两种检测方法比较,P>0.05无显著性差异;TRUST检测方法与TP-ELISA、TPPA两种检测方法比较,P<0.05有显著性差异。
3 讨论
梅毒是由苍白螺旋体引起的一种经典的性传播慢性感染性疾病,它可以引起全身性的感染及病变。其传播方式有经性接触传播、血液传播和母婴垂直传播3种[1]。近年来梅毒的发病率呈明显上升趋势,2008年国家卫生部公布27种法定报告的甲、乙类传染病中,梅毒发病由原来的第7位上升至第5位。梅毒的诊断依赖病史、症状、体征,暗视野显微镜检查和血清学检查。梅毒感染者血清中可产生非特异性反应素抗体和梅毒螺旋体的特异性抗体,血清学检测是实验室诊断梅毒的重要依据之一,它在梅毒的诊断、治疗及研究方面均有重要意义。
TRUST是采用活化心磷脂卵磷脂胆固醇配制VDRL抗原重悬于含甲苯胺红特制溶液中与梅毒患者血清中的反应素发生粉红色凝集,因而检测出梅毒。TRUST由于其廉价、快速、方便以及其所用的抗原是从牛心提取的心磷脂和从鸡蛋黄提取的卵磷脂及胆固醇,其测定效价比RPR、USR高一个滴度等特点,所以广泛用于临床住院和门诊患者的梅毒筛查;其敏感性及特异性较差,对早期梅毒、晚期梅毒及治疗后梅毒检测的敏感性低以及对神经梅毒的不敏感性,常出现假阴性而漏检,其可作为梅毒疗效观察或随访有否复发或再感染的指标[2]。
TP-ELISA是随着近年梅毒螺旋体基因工程的研制成功而发展起来的一种血清学检测方法,是利用重组梅毒螺旋体的特异性抗原包被酶标板孔,并采用双抗原夹心法检测血清标本中的梅毒特异性IgM和Ig G抗体,极大地提高了试验的敏感性和特异性[3],对早期和晚期梅毒都有较高的检出率。用ELISA法检测的TP抗体稳定,即使经抗梅毒治疗后,抗体仍继续存在,甚至终生存在,用仪器判读试验结果[4]。本实验中TP-ELISA的敏感性、特异性均很好,与TPPA的符合率高,无显著性差异(P>0.05),该方法重复性好,结果稳定可靠。
梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验(TPPA)是使用螺旋体毒株制成抗原,是全螺旋体纯化抗原,在抗原组成上比较全面,不易产生假阳性,特异性较高,灵敏度高。梅毒螺旋体感染后,此抗体在体内持续存在,可终身保留,检测结果不随病情发展和治疗而变化,故TPPA作为梅毒的确诊试验,对各期梅毒的检测结果都有较好的稳定性,不易出现假阳性反应。是目前公认的较好的梅毒确认方法,具有很高的敏感性和特异性[5],但是试剂较贵,以肉眼判断结果,不宜大批量检测,一般作为TRUST和TP-ELISA等初筛阳性以及潜伏期梅毒和一些非螺旋体试验阴性又高度怀疑为梅毒患者的确认试验,也可用于排除用非特异性抗体检测所致的假阳性[4]。
由结果可知,临床上进行大量人员的高危人群梅毒筛查时宜采用TP-ELISA检测方法,由于其敏感性和特异性较高而且检测方法简便,假阳性率和假阴性率较低等特点易采用TP-ELISA检测方法[6]。对TRUST和TP-ELISA等初筛阳性以及潜伏期梅毒和一些非螺旋体试验阴性又高度怀疑为梅毒患者的确认试验采用TRUST检测方法[5]。在临床应用过程中积极掌握梅毒血清学检测方法的特点对梅毒的诊治可提供重要的参考依据,减少假阳性率和减少假阴性率,为梅毒及早发现、及早诊断提供明确诊断的依据。
摘要:目的:探讨梅毒抗体检测方法并进行对比分析。方法:选自2009年2月~2010年2月我院住院和门诊诊断和治疗的梅毒患者129例,采用TRUST、TP-ELISA、TPPA,3种梅毒血清学检测方法结果进行观察。结果:在3种方法检测的129例梅毒患者中,TRUST法检测阳性92例,阳性率为71.37%;TP-ELISA法检测阳性112例,阳性率为86.82%;TPPA法检测阳性129例,阳性率为100%。3种方法检测阳性率经统计学分析比较,P<0.05有显著性差异。结论:进行大量人员的高危人群梅毒筛查时宜采用TP-ELISA检测方法;对TRUST和TP-ELISA等初筛阳性以及潜伏期梅毒和一些非螺旋体试验阴性又高度怀疑为梅毒患者的确认试验采用TRUST检测方法。
关键词:梅毒抗体,检测,甲苯胺红不加热血清试验,酶联免疫吸附法,明胶颗粒凝集法,对比分析
参考文献
[1]孙芸,黎保仝.11799例普通住院患者梅毒血清学试验结果分析[J].临床检验杂志,2005,23(3):171.
[2]程艳杰,王广杰,刘明,等.梅毒螺旋体特异性抗体检测方法的实验室评价[J].中华检验医学杂志,2006,29(3):272.
[3]邓晓琴,杨茂,向艳玲,等.ELISA法梅毒检测的钩状效应及其分析[J].中国输血杂志,2006,19(3):220.
[4]邹黎.梅毒血清学试验几种检测方法比较[J].实用医技杂志,2006,13(21):3788.
[5]李群,王福华.三种梅毒检测方法的比较[J].中华医学实践杂志,2006,5(3):78.
亭湖地区猪瘟抗体免疫水平分析 篇4
多年来, 面对猪瘟我国一直采取的是以防为主的防制方针[3], 免疫接种是预防工作的主要方式。但是由于种种原因, 经过免疫的群体, 仍然存在免疫抗体水平不高, 甚至是有的猪场在接种猪瘟疫苗后仍然会有猪瘟发生。在目前普遍采用疫苗免疫的情况下, 仍有部分地区猪瘟流行严重, 且表现出新的流行病学特点。因此本地区对猪瘟抗体免疫水平一直有监测。本试验旨在采用ELISE试验方法, 检测亭湖区部分规模场猪群的猪瘟抗体免疫水平, 结合临床流行病学特点, 对该地区猪瘟的流行趋势进行估测并分析免疫失败原因。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 血清样品
2016年7月在江苏省盐城市亭湖区5个乡镇及3个区的部分规模养猪场按比例随机采取猪血样, 各乡镇 (区) 均采样240份, 共计1920份猪血样, 按照常规方法分离血清并置-20℃冰箱保存, 待测。
1.1.2 试剂与仪器
猪瘟抗体检测试剂盒购自北京爱德士元亨生物科技有限公司, 批号G241;精确的单道微量移液器和多道微量移液器;一次性移液器吸头;96孔酶标仪;洗板设备;离心机等。
1.2 操作步骤与判断标准
按照猪瘟ELISE抗体检测试剂盒说明书进行抗体检测及结果判定。阴性对照的平均OD450>0.5, 阳性对照的阻断率≥50%, 检测结果判定为有效;通过计算每个样品的阻断率判定CSFV抗体水平, 猪瘟抗体阻断率%≥40%时, 检测结果为阳性, 即合格;猪瘟抗体阻断率%≤30%时, 检测结果为阴性, 即不合格;当猪瘟抗体30%<阻断率%<40%时, 判为可疑。
2 结果与分析
各乡镇 (区) 所检测猪瘟样品合格率分布情况见表1。除新兴、黄尖、新洋经济区, 其他各镇 (区) 均存在不合格样品, 其中盐东和环保科技园不合格率最高, 分别达到37.5%和40.00%。亭湖新区中等水平的样品最多。新兴、新洋经济区满意合格率达到100%。
亭湖区各乡镇 (区) 采集的样品数量、猪瘟抗体检测结果均值见表2、附图。从表2中可以看出, 8个乡镇 (区) 的规模化养猪场的猪瘟合格率均达到60%, 平均合格率达到84.06%。其中新兴镇及新洋经济区猪瘟抗体合格率最高, 达到100%, 其抗体阻断率均值也分别达到84.36%和83.04%, 呈较高水平分布;环保科技园合格率最低, 只有60%, 其抗体阻断率也仅达到56.71%;便仓镇和盐东镇的猪瘟抗体检测合格率均低于80%, 其阻断率均值分别为70.31%和49.16%。结果显示, 不同乡镇 (区) 养猪规模场之间猪瘟抗体的抗体阻断率均值呈不同水平分布, 其整齐度也存在较大差异。从图1中可以看出, 新兴镇的猪瘟抗体阻断率均值最高, 其标准差也最小, 说明其整体水平稳定, 数据整齐度较好;盐东镇的抗体阻断率均值最低, 并且其标准差较高, 说明其整体抗体水平较为不稳定, 数据整齐度也较差。
3 讨论
亭湖区已形成蔬菜业、林果花卉业、畜牧业三大特色支柱产业, 其中畜禽养殖规模不断扩大, 各乡镇 (区) 畜牧产业也不断发展。而无疑猪瘟的有效防治对整个畜牧业的健康发展是有很大作用的。根据结果, 可以看出全区猪瘟的整体免疫密度较高, 免疫效果良好, 近期内对于预防猪瘟是有帮助的。但在本区仍有部分免疫抗体水平不高, 甚至在部分区域出现不合格样品。如表1所示, 同一地区不同乡镇的免疫效果存在明显差异, 说明本区防疫工作仍有问题, 有待进一步提升。 (1) 新兴镇、新洋经济区的抗体阻断率≥60%的百分比达到100%, 说明该地区对猪瘟的免疫工作实施较为良好;其群体标准差值也较小说明群体总体抗体水平整齐度较好, 抗体产生较为稳定, 该地区对猪瘟的发生有一定的防治作用, 对该病做到了以“防”为主。 (2) 盐东镇和环保科技园的抗体阻断率<30%所在范围内的所占比例相对较高, 说明该地区的猪瘟防疫工作仍需要提升, 究其原因, 有可能是其饲养条件不利于猪体内抗体的高效产生;也有可能在是疫苗选择上存在差异所致, 所选疫苗产生抗体量相对较低, 或是由于该地区猪品种自身因素, 对抗体应答水平不够。针对以上所存在的问题, 应先尽可能排除抑制抗体产生的人为因素和疫苗因素, 确保抗体的有效产生, 可尽可能淘汰猪瘟抗体不合格品种和个体, 确保整个猪群的健康循环发展。 (3) 亭湖新区合格率虽然达到83.33%, 但其中等水平的样品最多, 其抗体阻断率均值仅达到55.10%, 相对于其他乡镇的均值水平较低, 并且标准差值也较小, 说明其抗体整齐度较好, 但普遍抗体水平不高, 可以考虑是否该地区所用疫苗的抗体应答水平不高, 或是所选用的猪种自身因素, 对抗体应答不敏感, 若存在此问题, 需要及时淘汰该疫苗和猪种。
4 结论
控制猪瘟的重点应以防为主[4]。根据本次试验结果和经验, 对全区养猪业的健康发展而言, 重视饲养管理和免疫预防工作的各个环节无疑是保证猪个体健康发展的重要策略和措施, 从而达到对猪瘟病毒的抵抗力和防御能力的有效增强。本次试验结果说明, 不同区域或同一地区的免疫抗体水平因各种不同原因存在较大差异, 所以为保证有效防治该地区猪瘟的发生, 则有必要定期对猪群做免疫抗体检测。
摘要:本试验则旨在采用ELISE试验方法, 检测亭湖区部分区域猪群的猪瘟抗体免疫水平, 结合临床流行病学特点, 对该地区的猪瘟流行趋势进行估测以及对不同区域免疫失败原因进行分析, 结果表明, 不同区域或同一地区因各种不同原因存在较大差异。为了解亭湖地区猪瘟的整体免疫状态及预防控制中存在的主要问题提供科学依据, 为猪瘟的防治工作做好铺垫。
关键词:猪瘟,抗体,检测
参考文献
[1]王美君, 侯艳红, 倪娇等.猪瘟免疫失败的原因及其防制对策[J].中国畜牧兽医, 2011 (2) :217-219.
[2]修金生, 吴顺意, 周伦江等.不同规模猪场种猪猪瘟抗体检测与猪瘟净化[J].福建农业学报, 2010 (2) :235-238.
[3]郑教雀.两种猪瘟抗体检测方法的应用比较[J].养猪, 2014 (2) :94-95.
抗体水平对比 篇5
1 材料与方法
1.1 材料
ELISA体外诊断试剂盒(麻疹IgG,流脑IgG),深圳市安群生物工程有限公司生产。
1.2 对象
2~15岁儿童。
1.3 方法
用一次性采血针采集末梢血(手指血或耳垂血),用一次性定量采血管取20μL,加到预先盛有180μL生理盐水的0.5 mL带盖离心管中,待血球全部自然沉降到管底后,取上清液检测。标本、试剂于2~8℃贮存。
1.4 检验结果的判定
目测:在白色背景下观察各孔显色情况,与对照孔相比较,有明显蓝色者为阳性,无色或蓝色不明显者为阴性。
2 结果
2.1 不同年龄组人群麻疹、流脑抗体阳性率情况
检验7899名儿童麻疹IgG,阳性7567人,阳性率95.80%,不同年龄组抗体阳性率分别为96.07%、95.32%、95.71%,不同年龄组儿童麻疹抗体阳性率之间差异无统计学意义(χ2=2.27, P>0.05);7899名儿童中,流脑IgG阳性7530人,阳性率为95.33%,不同年龄组抗体阳性率分别为96.18%、94.24%、93.87%,不同年龄组儿童流脑抗体阳性率之间统计学有差异(χ2=17.99, P<0.05), 2~6岁组抗体水平较高。见表1。
2.2 不同性别麻疹、流脑抗体阳性率情况
7899名儿童麻疹IgG阳性7567人,其中男性抗体阳性4365人,阳转率为96.10%,女性抗体阳性,3202人,阳转率为95.38%,男女之间差异无统计学意义(χ2=2.49, P>0.05);7899名儿童流脑IgG阳性7530人,其中男性抗体阳性4334人,阳转率为95.42%,女性抗体阳性3196人,阳转率为95.20%,男女之间差异无统计学意义(χ2=0.20, P>0.05)。见表2。
3 讨论
免疫成功率监测是考核和评价疫苗接种质量和效果的常用指标。本次检测结果表明,我区麻疹IgG和流脑IgG具有较高的免疫水平,已形成对麻疹、流行性脑脊髓膜炎有效的免疫屏障。
麻疹是好发于儿童的呼吸道传染病,具有较高的发病率。按照国家扩大免疫规划规定的程序免疫,全程接种率达到85%以上的人群基本具有麻疹免疫力。但由于流动人口的流入和流出及儿童基础免疫中因疫苗运输、冷藏、技术及儿童个体差异等造成的少数免疫失败等因素,打破了原有免疫屏障。近年来,我区把麻疹疫苗查漏补种纳入到常规免疫工作当中,并通过加强接种人员技术培训,加强麻疹免疫的质量控制,进一步提高麻疹疫苗接种率。检测结果显示,2012年我区不同年龄组儿童抗体水平已达到95%以上,实现了国家消除麻疹的阳性率指标。
2008年河南省扩大免疫规划方案出台后,我区迅速把流脑疫苗纳入免疫规划,按照规定的免疫程序实施接种,6岁以前要完成4针次免疫接种。所以2~6岁儿童流脑抗体水平较高,随着年龄的增长,抗体水平逐渐有所下降。建议抗体阴性者,及时进行补种。今后要把流脑疫苗查漏补种纳入到常规免疫工作当中,消除免疫空白人群,建立牢固的免疫屏障,有效控制传染病的发生和流行[1,2,3,4]。
参考文献
[1]卫生部.预防接种工作规范[Z].2005
[2]毛乃雨, 蒋小泓, 吴立萍, 等.定量酶联免疫吸附试验在检测麻疹IgG抗体中的应用与比较[J]].中国计划免疫, 2005, 11 (3) :187-189.
[3]郭雷, 魏健军, 郭淑惠, 等.检测A群流脑抗体方法的探讨与应用[J].中国卫生检验杂志, 1997, 7 (1) :29-32.
抗体水平对比 篇6
1 对象与方法
1.1 对象
采用分层多级抽样的方法抽取3491名荆州区1~15岁儿童分为4个年龄组, 其中<1~1.5岁儿童197例 (男101、女96) 、1.5~4岁1050例 (男510、女540) 、4~7岁1178例 (男581、597) 、7~15岁1066例 (男601、女465) 。
1.2 方法
1.2.1 调查方法
对每个抽中对象认真进行疫苗接种率调查, 疫苗接种史判定以接种证为准, 无证以接种卡为准, 无证无卡视为无免疫史;通过查看预防接种证首页查看性别、出生体质量、出生医院、户籍、所属乡镇。
1.2.2 免疫程序完成判定
我国儿童免疫程序规定8龄初免, 18~24月龄复种, 可用单价疫苗, 复种可用MMR或含麻疹抗原的MM或MR[1]。凡未完成适龄程序中剂次的视为未完成接种。
1.2.3 检验方法
所有检测对象均采集末梢血20μL, 分离血清置于-20e条件下保存待查。用武汉生命科技股份有限公司生产的免疫检测试剂盒检测麻疹IgG抗体, 严格按照说明书操作。血清1∶100稀释后与之反应, 单孔定量, 单位为IU/L。判断标准为≥200IU/L为阳性, <200IU/L为阴性。试验同时设空白、阴性和阳性对照。
1.3 统计方法
应用Excel建立数据库, 采用SPSS 12.0软件进行统计学分析。
2 结果
2.1 不同年龄段儿童麻疹疫苗接种情况
本次共调查1~15岁儿童3491人, 无免疫空白, 麻疹疫苗接种率达98.91%。各年龄组接种率依次为99.49%、96.19%、97.45;99.53%, 各年龄组间接种率差异有显著性 (χ2=31.08, P<0.001) 。见表1。
注:不同年龄麻疹疫苗接种情况比较 (χ2=31.08, P<0.001)
2.2 不同年龄儿童麻疹抗体水平
在采集的3491份标本中, 麻疹Ig G抗体阳性3121人份, 阳性率89.401%, 不同年龄段儿童麻疹抗体阳性率之间有显著性差异 (χ2=30.54, P<0.001) , 不同年龄组之间抗体阳性率分别为90.36%、93.43%、88.54%、86.21%;其中>7岁儿童麻疹抗体阳性率最低。见表2。
注:不同年龄组儿童麻疹抗体阳性率比较 (χ2=30.54, P<0.001)
2.3 不同性别、出生时体质量、出生医院儿童麻疹抗体水平
抗体情况按性别比、按出生时体质量及出生医院比差异均无显著性 (P>0.05) 。
3 讨论
本次研究表明, 荆州区麻疹免疫力89.40%达到免疫成功的指标[2];未达到世界卫生组织西太平洋区消除麻疹队列人群免疫力>95%的指标[3], 且几个年龄组均未达到。小年龄组抗体水平不高可能与初免有关, 但4~7岁儿童阳性率仅为88.54, >7岁的麻疹抗体阳性率更低86.21%, 呈现出随年龄增长而下降的趋势[3], 且与接种率并不相符, 根据接种次数与免疫力正相关的理论, 这可能是与接种质量有关, 而影响接种质量因素包括冷链系统、疫苗本身质量、麻疹多人份疫苗剂量不准、接种技术 (如酒精消毒未干及接种过深) 等。为按期实现国家控制和消除麻疹的目标, 须认真落实麻疹疫苗的常规免疫, 适时开展麻疹强化免疫, 且避免用多人份疫苗, 同时加强疫苗冷链系统及疫苗接种质量的监督与管理。
摘要:目的 了解2012年荆州区麻疹疫苗免疫状况, 为制定免疫措施提供依据。方法 采用分层多级抽样的方法, 调查荆州区城区和所属8个乡镇1~1.5、1.5~4、4~7、7~15岁儿童共3491人, 用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 测定血清麻疹IgG抗体。结果 在采集的3491份血样中阳性例数3121例, 阳性率89.40%, 不同年龄组抗体阳性率分别为90.36%、93.43%、88.54%、86.21%, 各年龄组间阳转率差异显著 (P<0.001) 。不同性别、出生体质量、出生医院、户籍、乡镇间抗体水平差异无显著的统计学意义。结论 荆州区1~15岁儿童麻疹IgG抗体阳性率89.40%, 未达到世界卫生组织西太平洋区消除麻疹队列人群免疫力>95%的指标, 且接种率与抗体阳性率不相符, 说明存在接种质量问题。为按期实现国家控制和消除麻疹的目标, 须认真落实麻疹疫苗的常规免疫接种, 适时开展麻疹强化免疫, 且避免用多人份疫苗, 同时加强疫苗冷链系统及疫苗接种质量的监督与管理。
关键词:麻疹,抗体,分析
参考文献
[1]迮文远, 陈海平, 宋继萍, 等.感染性疾病的免疫预防[M].北京:人民卫生出版社, 2010:91-100.
[2]夏宪照, 罗会明.实用预防接种服务手册[M].北京:人民卫生出版社, 2010:201.
[3]世界卫生组织西太平洋区办事处.消除麻疹现场指南[S].2004.
抗体水平对比 篇7
关键词:阻断ELISA,母源抗体,超前免疫,阻断率,猪瘟抗体水平,免疫记忆
猪瘟 (Hog Cholera, HC或Classical Swine Fever, CSF) [1,2]是由猪瘟病毒 (HCV或CSFV) 引起的一种急性、热性、高度接触性传染病, 遍布于全世界, 世界动物卫生组织 (OIE) 将此病列为A类传染病之一。一直以来, 猪瘟免疫问题是困扰国内集约化养猪的难题。众所周知, 仔猪可通过吮吸免疫母猪的初乳获得被动性免疫, 或通过吃初乳前的1.5~2 h提前注射猪瘟疫苗 (即“猪瘟超前免疫”, 亦称“零时免疫”或“乳前免疫”) 获得主动性免疫, 这两种方式均可以使仔猪在疫苗首免之前免受猪瘟病毒感染。然而确定仔猪猪瘟疫苗首免日龄, 消除母源抗体干扰, 以提高疫苗的免疫保护是仔猪获得后期坚强抗体保护的关键问题。据报道[3], 母源抗体的半衰期为14天左右, 以往猪场常凭借经验将首免日龄确定在20日龄左右, 然而这种免疫方法却通常无法切实有效地消除母源抗体的干扰, 使猪群的猪瘟抗体保持在高水平, 尤其是育肥猪群。对规模化猪场而言, 只有通过ELISA方法监测初生仔猪猪瘟母源抗体水平消长规律来确定疫苗首免日龄。本试验通过筛选我公司省内某规模化猪场同期分娩的6头母猪及其所产的60头健壮仔, 分组处理并跟踪监测0~60d仔猪体内猪瘟抗体水平的消长, 不仅探明了不同猪瘟抗体水平对仔猪的保护情况;而且还探讨了超前免疫对仔猪猪瘟抗体水平的影响, 为规模化猪场猪瘟的有效免疫提供了切实依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验猪
随机筛选我公司省内某规模化猪场同期分娩的6头母猪及其所产的60头健壮仔猪。
1.1.2 检测试剂
猪瘟抗体检测试剂盒采用IDEXX公司ELISA试剂盒, 在使用前, 试剂盒恢复到室温 (18~25℃) , 试剂混合均匀。
1.1.3 试验仪器
微量移液器、96孔酶标仪、离心机、恒温箱、离心管等。
1.1.4 试验用疫苗
猪瘟兔化弱毒疫苗 (ST传代细胞源) 购自广东永顺公司。
1.2 试验方法
1.2.1 试验分组与设计
1.2.1.1母源抗体对仔猪猪瘟抗体水平的影响:运用ELISA抗体检测方法从12头同期分娩的母猪群中随机筛选出猪瘟抗体阻断率≥80%的临产母猪3头及其所产30头仔猪, 作猪瘟母源抗体对仔猪猪瘟抗体水平影响的跟踪调查, 简称母源抗体组。1.2.1.2超前免疫对仔猪猪瘟抗体水平的影响:运用ELISA抗体检测方法从12头同期分娩的母猪群中随机筛选出猪瘟抗体阻断率<70%的临产母猪3头及其所产30头仔猪。每窝先出生的4头仔猪不作超前免疫, 其余的均进行超免 (即肌注猪瘟弱毒苗0.5头份/头) , 1.5~2小时后统一吮吸初乳, 以跟踪调查超前免疫对仔猪猪瘟抗体水平的影响, 简称超前免疫组。
1.2.2 饲养管理与免疫
6头分娩母猪与其所产仔猪的饲养管理均按本场程序进行, 母源抗体组受试仔猪在试验期间不进行猪瘟免疫, 超前免疫组受试仔猪猪瘟免疫按“0日龄超免-20日龄首免-60日龄二免”模式执行, 所有受试仔猪其它疫苗免疫照旧。仔猪试验期间如有明显疾病发生 (如严重腹泻、肢蹄伤残、气喘等) , 予以淘汰。
1.2.3 采血与检测
母源抗体组在仔猪7d、18d、28d、35d、42d和60d, 超前免疫组在仔猪7d、14d、21d、28d、35d和60d分别对母猪及其仔猪通过耳静脉和前腔静脉采血3~5mL (母猪在前四次进行了采血追踪, 后两次由于刚配上种, 不利于生产, 无法持续跟踪) , 3000 r/min离心10 mins, 分离血清;所有血清通过猪瘟抗体ELISA检测试剂盒进行抗体检测。
1.2.4 试剂盒判断标准
猪瘟抗体ELISA试验成立条件:阴性对照的平均OD450>0.50, 阳性对照的阻断率>50% (即阴性对照平均OD450-阳性对照平均OD450/阴性对照平均OD450×100%>50%) 。判断标准:阴性值为阻断率<30%;可疑值为30%≤阻断率≤40%;阳性值为阻断率>40%。
1.2.5 仔猪生长发育的临床观察
每天观察试验猪的精神状态、饮食欲、皮肤及被毛色泽、粪便性状。
2 结果与分析
2.1 母源抗体对仔猪猪瘟抗体水平的影响
母源抗体对仔猪猪瘟抗体水平的影响见表1, 图1~3。
由表1和图1~3可知, A37组仔猪母源抗体到第4周龄仍能维持在较高的保护水平 (阳性率100%, 平均阻断率在60%左右, 且抗体水平均匀整齐) , 到第5周龄下降至临界值;312组仔猪均匀整齐的高母源抗体保护水平一直能持续到第5周龄, 到第6周龄下降至临界值;Y59组仔猪高母源抗体保护水平则仅能持续到第3周龄, 第4周龄下降至临界水平, 且组间差异大, 抗体水平不整齐 (离散度34%) 。3个组母猪自身的猪瘟抗体水平在跟踪调查前后始终保持比较平稳, 变化不大。由此可见, 在母猪猪瘟抗体水平相当的情况下, 其母源抗体对仔猪的保时间况应与母猪奶水有关, Y59母猪由于存在奶水不足和仔猪抢奶现象 (仔猪吮吸初乳量不均匀, 获得的母源抗体不整齐, 离散度偏高) , 保护持续时间相对较短 (28天左右) 。
2.2 超前免疫对仔猪猪瘟抗体水平的影响
母源抗体对仔猪猪瘟抗体水平的影响见表2, 图4~6。
由表2和图4~6可知, A186、B107和A182三个试验组的受试仔猪在0~20日龄左右, 非超免组猪瘟抗体水平略高于超免组;而在20~60日龄之间, 超免组经20日龄猪瘟首免后抗体水平上升较快, 抗体转阳率高, 而非超免组首免应答不明显。由此推测, 超前免疫应具有免疫记忆功能, 有助于猪瘟首免应答, 提高免疫效果;能有效填补仔猪因母源抗体不足或猪瘟首免时间不及时而造成的空白保护期, 降低野毒感染风险。
2.3 仔猪生长发育的临床观察
受试仔猪在试验期间亦有个别出现腹泻、脱水、死亡, 均已及时退出试验群组。其它受试仔猪精神状态良好, 饮食欲正常, 未见不良反应。
3 小结与讨论
3.1 母源抗体对仔猪猪瘟抗体水平的影响
猪瘟母源抗体是指仔猪通过摄入分娩母猪初乳而获得大量而丰富的具有猪瘟先天性保护的特异性免疫球蛋白。在分娩母猪猪瘟抗体水平相当 (阻断率在80%以上) 的情况下, 由于母猪自身存在不同因素的影响 (营养水平、泌乳性能及免疫细胞活性等) 及仔猪吃初乳的时间和初乳吮吸量等问题, 不同窝的仔猪体内猪瘟母源抗体水平与消长规律不完全相同;总的来说, 随着仔猪日龄的增长, 母源抗体滴度缓慢下降, 同时对猪瘟的先天性保护也随之降低[3,4]。母源抗体对仔猪的保护周期, 即从高母源抗体水平下降至临界保护水平[5] (抗体阳性率50%, 平均阻断率40%, 平均抗体效价1∶16) 的时间大致为28~42d, 这与张新成 (2008) [6]所报道的基本一致。
3.2 超前免疫对仔猪猪瘟抗体水平的影响
猪瘟超前免疫是指在仔猪吃初乳前的1.5~2 h提前注射猪瘟疫苗, 亦称“零时免疫”或“乳前免疫”) , 目的是为了克服母源抗体不足, 预防仔猪早期感染猪瘟, 特别是在猪瘟流行猪场。本试验随机筛选猪瘟抗体处于中下水平 (阻断率在70%以下) 的3头临产母猪及其所产30头仔猪, 每窝仔猪通过超免与不超免对比追踪监测发现, 受试仔猪在0~20日龄左右, 非超免组猪瘟抗体水平略高于超免组;而在20~60日龄之间, 超免组的猪瘟抗体水平上升较快, 明显高于非超免组。这与马强 (2010) [7]报道的超免组与不超免组仔猪猪瘟抗体水平之间的差异基本一致;郑厚旌则认为, 猪场免疫监测得好, 母猪群猪瘟抗体水平高, 母源效价在1∶128以上 (阻断率约70%以上) 的猪群, 仔猪不宜采用超前免疫, 进一步验证了本文中的结论;而高云航在2007年[8]通过对超前免疫 (0-60日龄模式) 与普通免疫 (20-60日龄模式) 在体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫等三种免疫途径方面的检测对比发现, 在0~25日龄超免组的粘膜抗体水平高于普免组, 在0~20日龄超免组的细胞免疫应答水平高于普免组, 在20~35日龄超免组的体液免疫抗体水平高于普免组, 以上说明猪瘟超前免疫能有效填补仔猪因母源抗体不足或猪瘟首免时间不及时而造成的空白保护期, 降低野毒感染风险。
3.3
此外, 本试验中超前免疫组受试仔猪在20~60日龄之间, 超免组经20日龄猪瘟首免后抗体水平上升较快, 抗体转阳率高, 而非超免组首免应答不明显。由此推测, 超前免疫具有免疫记忆功能, 有助于猪瘟首免应答, 提高免疫效果。此现象的具体免疫应答机制尚不清楚, 还有待进一步研究。
参考文献
[1][美]Babara E.Straw等主编, 赵德明等主译.猪病学 (第九版) [M].北京:中国农业大学出版社, 2008:325~327.
[2]A.D E Schweinitz.The war with the microbose[J].Science, 1897, 5:561~570.
[3]Terpstra C.The immunity against challenge with swine fever virus of piglets from sows vaccinated with C-strajn vaccine[J].Tijdschrift Voor Diergeneeskunde (Amsterdam) , 1977, 102:1293~1298.
[4]Launais, M, Aynaud J M, Corthier G.Hog cholera virus:active immunization of piglets with the Thiverval strain in the presence and absence of colostral passive inmmunity[J].Veterinary of Microbiology, 1978, (3) :31~43.
[5]刘莉, 金璐娟, 杨旭, 等.规模化猪场仔猪猪瘟母源抗体消退规律[J].黑龙江畜牧兽医, 2004, (10) :46~47.
[6]张新成, 李官兵, 史子学.猪瘟母源抗体在仔猪体内持续时间的研究[J].养猪, 2008, (1) :46~48.
[7]马强, 仍巧玲, 王治方, 等.超前免疫对仔猪猪瘟抗体水平的影响[J].中国畜牧兽医, 2010, 37 (5) :188~189.
抗体水平对比 篇8
1影响动物免疫抗体水平的原因
1.1疫苗因素
包括疫苗的类型、质量、疫苗的保存和运输条件等。1.1.1疫苗的类型疫苗一般分为常规疫苗和新型疫苗,常规疫苗分为活疫苗、灭活疫苗和类毒素,新型疫苗包括基因工程亚单位疫苗、重组疫苗、合成肽疫苗、基因工程载体疫苗、核酸疫苗和抗独特型抗体疫苗。疫苗的类型不同,其免疫功能不同,免疫效果也不同,免疫抗体水平自然也不同,因此应根据免疫的目的选择合适的疫苗。
1.1.2疫苗的质量高质量的疫苗是保证免疫抗体水平达标的基础,是保证畜禽免疫效果的关键。(1)疫苗的质量高低取决于生产采用的菌(毒)株和血清型。生产采用标准的菌(毒)株,则抗原含量高,抗原性好。由于许多病原微生物有多个血清型,易发生抗原变异或出现超强毒力变异株,因此在生产过程中选择血清型时,应为当前流行的主导型,才能更好的产生免疫效果,达到理想的免疫抗体水平。(2)疫苗的质量与生产工艺有关。活疫苗的质量与疫苗保护剂、SPF动物的洁净度有关,若洁净度不高,存在外源病毒,不但影响疫苗质量而且会影响疫苗的安全性。油乳剂灭活疫苗的质量受油佐剂、乳化剂、稳定剂质量和乳化工艺的影响,若油佐剂、乳化剂、稳定剂质量不好,油乳剂灭活疫苗就不稳定,易分层,影响疫苗质量。目前,疫苗种类繁多,由于各厂家生产工艺的差异,生产疫苗的质量存在一定的差异,在免疫过程应根据免疫需要选择使用,才能保证免疫抗体水平。(3)非正规疫苗厂家或非国家指定疫苗生产厂家生产的疫苗采用的菌(毒)种不是标准菌(毒)株,且疫苗本身的抗原量不够,单位包装内所含抗原量不足,接种动物后,往往达不到合格的抗体水平。因此,免疫接种前,一定要选用正规生物制品企业的优质疫苗,才能保证疫苗效果,确保免疫抗体水平。
1.1.3疫苗的保存和运输条件疫苗是由病原微生物、寄生虫及其组分或代谢产物制成的,一般均怕热、怕光,需要冷藏或冷冻保存。疫苗按剂型可分为冻干苗和液体苗,冻干苗随温度的升高其保存时间也相应缩短,一般需按照生产厂家的要求保存在合适的温度下;液体苗又分为油佐剂疫苗和水疫苗,油佐剂疫苗应置于2~8℃冷藏,严禁冷冻,水疫苗则需根据厂家要求妥善保存和运输。为了保证疫苗的质量,从生产到使用前的整个过程均在适当的温度下进行,多环节链式保存和运输设备称为冷链,疫苗在整个冷链中,温度波动越小越好。冷链设备达不到标准,在高温季节运输中反复冻融或保存温度条件相差太大等,都会使疫苗的效价降低,对疫苗的质量产生严重的影响。
1.2动物因素
动物接种疫苗后,产生免疫抗体水平的高低与动物机体免疫应答能力有直接关系,而影响动物机体免疫应答能力的因素很多,主要包括动物品种、日龄、营养状况、健康状况、母源抗体干扰等。
1.2.1动物品种动物机体产生免疫应答在一定程度上受遗传因素的影响,不同动物品种对同一种疫苗的免疫应答能力有所差异,即使同一品种不同个体之间,对同一种疫苗的免疫应答也存在差异。如牛羊口蹄疫灭活疫苗的免疫接种,牛比羊对口蹄疫抗原敏感性高,所以牛的免疫抗体水平相对比羊的要高。因此,要么在生产过程中加大抗原含量,要么在临床过程中加大免疫剂量。
1.2.2动物日龄从解剖结构和生理功能方面考虑,动物处于不同阶段对免疫抗原的敏感性不同,初生动物的免疫器官尚未发育成熟,免疫应答能力也不完全,而且存在母源抗体的干扰,因此,过早免疫,不仅动物不能承受疫苗接种的应激,而且免疫效果不好,免疫抗体水平也不高,需根据合理科学的免疫程序,按照免疫日龄进行免疫接种。
1.2.3动物营养状况营养物质不仅是动物维持正常生长发育所必须的,而且是维持动物机体免疫系统功能,并使免疫活性得到充分表达的重要因素。包括蛋白质、氨基酸、脂类、维生素、微量元素等。任何营养物质的缺乏都会对免疫系统功能带来危害,增加机体对疫病的易感性,并直接影响机体免疫应答能力,从而影响免疫抗体水平。如蛋白质缺乏对免疫系统的各个环节都有影响,以细胞的免疫功能受损为主要特征,可使机体淋巴组织广泛性萎缩,导致营养获得性免疫缺陷,影响免疫球蛋白的合成;维生素C参与免疫球蛋白的合成,促进淋巴母细胞生成和免疫因子产生,可以增加机体的抗应激能力,减轻免疫应激的负面影响;微量元素锌的缺乏会出现生长发育迟缓,贫血,导致动物体内器官、组织、细胞免疫及体液免疫功能均发生显著变化,对疫病的易感性增加,过量补锌对机体免疫功能也有不利影响。
1.2.4动物健康状况健康的动物接种疫苗后才能产生合格的免疫抗体水平,动物越健康,免疫效果越好,免疫抗体水平越高,瘦弱、生病和怀孕后期的动物,接种疫苗不但不能产生合格的免疫抗体水平,反而会出现严重的免疫应激反应甚至死亡。疫病对免疫接种效果及免疫抗体水平的影响是不可忽视的,潜伏期感染、免疫抑制性疾病、中毒病或其他疫病的存在都会使机体的免疫力下降或导致发病。如存在免疫抑制性疾病,则动物机体内淋巴细胞减少,接种疫苗后,免疫应答受到抑制,就很难达到合格的免疫抗体水平,而且在免疫抑制状态下,常会发生后续感染和多病原混合感染的综合症;在接种疫苗时,若动物已处于潜伏感染,或由免疫接种人员及工具带入病原微生物,则动物会在产生免疫力前迅速发病,从而间接影响免疫效果和免疫抗体水平。
1.2.5母源抗体干扰动物机体内存在的抗体可分为先天所得的抗体和后天免疫所产生的抗体。先天所得的抗体即为母源抗体,新生动物可从母体、初乳或卵黄中获得以一定量的母源抗体,这是动物出生后抵抗疫病的重要力量。出生后24~35h母源抗体达到最高峰值,随后逐渐开始降解,虽然母源抗体对新生动物起到一定的保护作用,但会很大程度地干扰弱毒疫苗的免疫抗体水平。若动物免疫接种过早,体内母源抗体水平较高,则接种疫苗产生的抗体就会与母源抗体之间发生中和反应,既消耗了母源抗体,又降低了疫苗利用率,最重要的是无法刺激机体产生应有的免疫抗体,而达不到合格的免疫抗体水平,甚至导致免疫失败;若动物免疫接种过晚,体内母源抗体已下降至零,而未能及时接种疫苗,则动物会出现免疫保护空白期,就很有发生疫病的可能。
1.3人为因素
在实际免疫、采样和监测过程中,免疫抗体水平能否达到理想效果与操作人员是否熟练、是否正确、是否规范及免疫程序是否合理等因素息息相关,这将直接影响动物的免疫抗体水平,主要包括免疫操作不规范、免疫接种途径错误、免疫程序不合理、错用抗菌药物、样品采集保存不当、实验室操作不规范等。
1.3.1免疫操作不规范免疫接种人员若未经专业的免疫技术技能培训,往往在实际操作过程,会出现诸多的不规范行为,会忽略许多关键细节,而造成免疫效果不好,免疫抗体水平达不到合格标准。如在稀释疫苗时,未使用专业的稀释液或不按规定的稀释倍数和稀释方法操作,会使疫苗滴度明显下降,影响免疫抗体水平,另外在进行饮水免疫时,使用的往往是深井水,而一般深井水受污染严重,会直接影响疫苗的免疫效果,而达不到理想的免疫抗体水平;有些畜禽养殖场为了提高免疫效果,盲目加大免疫剂量,而殊不知盲目加大剂量会引起动物免疫麻痹或耐受,适得其反,还更容易出现副作用;另外在动物保定不充分的情况下实施免疫接种或打“飞针”、针尖过短过粗,造成疫苗注射液外流,则免疫剂量不足,自然达不到合格的免疫抗体水平。
1.3.2免疫接种途径错误不同的疫苗类型,接种的途径和方法就不同,若不按使用说明的要求进行操作的话就直接影响免疫抗体水平。如小反刍兽疫活疫苗要求进行皮下注射,有的疏于阅读使用说明书,而进行肌肉注射;鸡新城疫I系疫苗要求进行肌肉注射,有的为图省事,改为饮水免疫;羊痘活疫苗要求进行皮内注射,大多数因操作不到位,都是皮下注射;选择的针尖长短不对或注射角度不准,该深部肌肉注射的就变为皮下脂肪注射,这些操作上的失误,均会造成疫苗不能充分被吸收,达不到应有的免疫抗体水平。
1.3.3免疫程序不合理不同的畜禽养殖场应制定不同的免疫程序,畜禽养殖场应根据当地动物传染病的流行特点及实际生产情况,制定科学合理的免疫程序。有的畜禽养殖场照搬照抄其他畜禽养殖场的免疫程序;有的畜禽养殖场仍然使用建场时的免疫程序;有的本身在制定免疫程序时就存在错误或漏洞;有的免疫接种人员不按制定的免疫程序实施免疫,如提早或推迟免疫时间、私自增加免疫次数、缩短免疫间隔时间,这些都将导致免疫达不到理想效果,免疫抗体水平始终处于较低水平。
1.3.4错用抗菌药物免疫接种前后一周内使用一些免疫抑制性药物、抗菌药物或消毒药,这就会直接破坏疫苗的有效成分,导致免疫失败。如在进行猪链球菌疫苗免疫前后,使用青霉素、磺胺类药物,就会大大影响免疫效果;若在免疫前后使用肾上腺皮质酮类药物,将导致机体的免疫应答能力下降,而影响动物免疫抗体水平。
1.3.5疫苗的联用干扰在基层或部分畜禽养殖场,为了提高工作效率,往往采用疫苗联用,同一时间接种两种或两种以上的疫苗,这种方法确实能大大提高工作效率,减少免疫工作量,降低养殖成本,但要是疫苗联用不当,动物免疫抗体水平往往不会太高。特别是弱毒疫苗,在接种疫苗后,病毒在机体内会进行一定程度的繁殖而相互干扰,使动物抗体水平达不到应有水平。如一些蛋鸡养殖场将鸡新城疫活疫苗和传染性支气管炎活疫苗混合使用,造成两类疫苗的毒株比例配合不当,在繁殖过程中相互干扰,因此,在实际生产中,要么使用正规厂家生产的新支二联活疫苗,要么间隔2周分别使用两种单联疫苗进行免疫。
1.3.6样品采集保存不当为保证样品质量,一般情况下,应在动物空腹时采集全血,并根据室温情况经一定时间静置后及时分离血清,若不能及时进行监测的,应将血清保存于-5~-20℃,同时下次需监测时血清从冷冻环境中取出后,先置于2~8℃冰箱内使之融解,然后再到室温下使之全部融解,在融解过程中,必须规则地摇晃均匀。切勿将血清在37℃以上环境中放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响抗体监测。
1.3.7实验室操作误差兽医实验室操作人员在样品抗体监测过程中,操作步骤错乱、样品交叉接触、移液器操作不熟练、抗原稀释比例不合理、公式计算错误等等操作不规范现象均将影响样品免疫抗体水平。当然,同一份样品经同样的监测方法、同样的监测步骤,而导致不同的监测结果也是常有的现象。总之,严格步骤,规范操作,精确计算是保证实验室监测结果准确的基本条件。
1.4环境因素
动物的免疫应答能力与环境条件的好坏有着密切关系,当环境条件发生突然改变,动物机体会第一时间产生应激反应,同时出现生理上的改变,引起动物神经系统、内分泌系统、免疫系统等一系列应答反应,造成动物的免疫力和抵抗力下降,对疫苗的吸收能力及免疫应答能力均随之下降,而影响免疫抗体水平。主要包括:气候条件、饲养管理、隔离消毒措施等。
1.4.1气候条件夏季高温季节,饲养密度大,动物处于热应激中;寒冷季节,畜禽舍通风不充分,灰尘颗粒、氨气积聚,损害动物上呼吸道黏膜;湿度过高或不够,处于潮湿或干燥的环境中,正常的生长发育都得不到保障,又怎么能保证动物对疫苗的免疫应答能力呢?更别说产生合格的免疫抗体水平了。
1.4.2饲养管理动物在免疫接种前后遇不良应激因素,如转群、换料、阉割、噪音、惊吓、暴力保定等,都会扰乱正常的机体代谢,机体无法对疫苗产生正常的免疫应答,而影响免疫抗体水平。因此,在动物免疫接种前后,应加强饲养管理,饲料中适当补充维生素等抗应激药物,才能保证免疫后达到预期的免疫抗体水平。
1.4.3隔离消毒措施动物免疫后需经1~2周的时间,才能获得后天的免疫抗体,若饲养条件恶劣,养殖环境中存在大量的病原微生物,就会早于产生抗体前发生感染,造成免疫失败。因此,在免疫接种后,应加强养殖环境的消毒措施,阻断外界病毒入侵的可能途径,减少与外界接触的频率,保证动物在相对隔离、相对纯净的养殖环境中接种疫苗,才能产生良好的免疫应答,达到理想的免疫抗体水平。
2改进动物免疫抗体水平的措施
2.1加强免疫接种人员技术培训
免疫接种人员技术素质的高低直接影响着动物免疫的质量和实际效果,因此加强对免疫接种人员免疫技术的培训就显得尤为重要。
2.1.1正确选择疫苗(1)要根据传染病的种类、血清型,选择合适的疫苗进行免疫接种。(2)要根据传染病的流行情况,选择合适毒力的活疫苗或灭活疫苗进行免疫接种。(3)要在有资质部门或兽药门市购买,选择有信誉厂家生产的、有批准文号的正规疫苗。不使用非法生产、非法经营的疫苗。(4)在使用前应仔细检查疫苗外观质量,凡是过期、变色、受污染、发霉、有凝块或异物、无标签或标签不清、疫苗瓶有裂纹、瓶盖松动、冻结的液体苗、无真空等不合格的疫苗均不得使用。
2.1.2规范免疫操作(1)在使用前必须详细阅读疫苗使用说明书,了解其用途、用法、用量及注意事项。(2)免疫接种前应询问接种动物的近期健康状况,必要时可测量体温和进行临床检查。(3)严格按照疫苗说明书所需要求进行保存和运输。(4)免疫操作过程中,应注意无菌操作。(5)动物免疫接种前后不得滥用抗菌药物、不得进行畜禽舍内的消毒。(6)尽量选用单联疫苗进行免疫,且两次免疫间隔合理时间。(7)规范采集和保存样品,并严格按操作步骤进行监测。
2.2加强畜禽群饲养管理
改善动物养殖环境,保持畜禽舍干燥、清洁、卫生;做好畜禽舍的通风换气,降低氨气浓度,保证畜禽舍的空气质量;按动物日龄的增加,确定合适的饲养密度;夏季防暑降温,冬季防寒保暖;保持畜禽舍内安静,避免外来人员进入畜禽舍;动物在转群或出栏时采取全进全出;免疫接种前后在饲料中添加抗应激药物等等,减少一切不必要的应激反应。
2.3制定科学合理的免疫程序
在制定免疫程序时,应尽可能避开或消除一切不利因素的影响,以国家和地区规定的强制免疫病种为依据,以当地和畜禽养殖场发生或流行情况为参考,结合畜禽养殖场的管理水平和畜禽群的免疫状态综合考虑,充分发挥疫苗的效力,保证畜禽群的免疫抗体水平,并根据免疫监测效果及疫病防控实际效果作相应的调整。
2.4定期进行免疫抗体监测