免疫抗体（共11篇）
免疫抗体 篇1
1 材料与方法
1.1 血清样品
从遂宁市安居区5个乡镇的生猪散养户中随机抽取176份猪血清，用于检测猪蓝耳病免疫抗体水平。
1.2 诊断试剂
猪蓝耳病抗体检测ELISA试剂：购自深圳市某生物技术有限公司，诊断试剂在有效期内使用。试验严格按照试剂说明书的要求操作。
1.3 试验原理
利用猪蓝耳病病毒基因重组抗原包被ELISA板，然后加入适当稀释的待检猪血清与之反应结合成“包被抗原+PRRSV-IgG”，再通过酶标抗猪IgG二抗来检测与包被抗原结合的猪蓝耳病特异性抗体，形成“包被抗原+PRRSV-IgG+酶标抗猪IgG二抗”复合物，最后加入显色剂，通过酶催化反应显色，显色的深浅与所检血清样品中的PRRSV-IgG含量成正比。通过酶标仪对待检血清的OD450值进行测定，当显色超过设定的临界值时，结果判为阳性，反之则为阴性。
1.4 判定标准
本试剂盒的临界值为0.33，在酶标仪上测各孔的OD值。试验成立的条件是阳性对照孔的平均OD值≥0.70，阴性对照孔的平均OD值必须<0.10。当样品OD值≥0.33时，判为阳性;样品OD值<0.30时判为阴性;0.30
2 结果与分析
5个乡镇农村散养生猪的蓝耳病抗体效价分布情况详见表1。从表中可见，被检测的176份血清中，OD值高于或等于0.33的有124份，比例为70.45%;OD值介于0.30到0.33之间的有8份，比例为4.55%;OD值小于0.30的有44份，比例为25.00%。
3 讨论
3.1 免疫现状及原因分析
3.1.1 现状
按照要求，遂宁市安居区的猪蓝耳病免疫密度常年维持在90%以上，其中应免生猪的免疫密度要达100%。从本次检测结果看，在抽取的176份猪血清样品中，猪蓝耳病免疫抗体的合格率为70.45%，达到了农业部的基本要求(70%以上)，但是聚贤乡、马家乡的抗体合格率低于农业部要求。
3.1.2 原因分析
影响该区猪蓝耳病免疫效果的主要原因到底有哪些?安居区动物预防控制中心通过调查、了解，归纳了以下几个方面：
(1)疫苗保存不当。调查发现，一个村级动物防疫员将猪蓝耳病灭活疫苗置于温度为-20℃的冰箱中冷冻保存，而未按说明书规定将疫苗存放在温度为4℃的冰箱中，导致疫苗免疫效果变差。
(2)据对2个散养户的了解，畜主担心接种蓝耳病疫苗后反而刺激猪机体产生免疫抑制，因而未作猪蓝耳病疫苗免疫。
(3)仔猪母源抗体的存在可能中和了疫苗的免疫效果。经调查发现，有3个散养户在仔猪断奶前注射了猪蓝耳病灭活疫苗，此时接种，疫苗抗原可能会中和掉母源抗体，不仅不能产生保护力，而且大大削弱了原有保护力。
(4)根据检测结果我们发现，玉丰镇及马家乡各有1户偏远农户的猪蓝耳病免疫抗体为阴性，主要是因为村级防疫员的责任心不强，未对猪只进行免疫。
(5)饲养管理跟不上和饲料质量差。农村散养户的猪舍通风不良，卫生条件差，猪群长期处于应激状态，导致猪体免疫力下降。饲料发霉变质，产生了黄曲霉、褐曲霉等毒素，抑制了免疫应答;饲料中营养物质缺乏，也会影响免疫抗体产生的速度和数量。
3.2 应对措施
3.2.1 加强领导，健全制度。
提高猪蓝耳病的免疫密度和免疫效价是一项长期系统的工作，各级、各有关部门务必加强领导，提高认识，建立健全各项规章制度，加强村级动物防疫员队伍建设，不断提高专业人员的业务技能和工作责任心。
3.2.2 制定科学合理的免疫程序，有效提高猪只的免疫率。
对于育肥猪，要坚持行之有效的首免、春秋普防、常年补针;对于种猪，每年春秋季应各做一次预防接种。
3.2.3 严格遵守预防注射操作规程。
做好器械的消毒灭菌工作，严防带菌(毒)感染;在预防工作中要做到每一头猪换一个针头，避免交叉感染。
3.2.4 按剂量免疫，做好加强免疫工作。
预防接种过程中应严格按照产品说明书规定的剂量进行免疫，并推行第二次加强免疫的措施，确保达到有效免疫率。
3.2.5 积极开展猪只抗体监测工作。
充分发挥区(县)级兽医实验室的作用，逐步加大抗体监测力度，为猪蓝耳病的综合防制提供科学依据。在春秋季两次集中防疫高峰后的1个月内，随机采取猪血清作抗体检测，计算总保护率。根据抗体的分布情况、免疫保护率高低等，具体分析防疫工作是否到位，免疫效果是否确实。
参考文献
[1]Hopper S A,White M E C,Twiddy W.An outbreak of blueeared pig disease(porcine reproductive and respiratory syndrome)in four pig-herds in Great Britain[J].Veterinary Record,1992,(13):140-144.
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[4]刘平黄,杨汉春,高云,等.重组N蛋白间接ELISA检测猪繁殖呼吸综合征病毒抗体[J].中国兽医杂志,2003,39(4):10-13.
[5]仇华吉,童光志.抗体依赖增强作用的免疫生物学特点及意义[J].中国兽医科技,1999,29(7):19-20.
[6]吴志明,刘莲芝,李桂喜.动物疫病防控知识宝典[M].北京:中国农业出版社,2006:114-118.
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[8]王隆柏,魏宏,陈少莺,等.猪繁殖与呼吸综合征病毒灭活疫苗安全性和免疫性测定[J].福建农业学报,2007,22(2):185-187.
免疫抗体 篇2
病原学监测工作的通知
各乡（镇）畜牧兽医站：
根据2014年“全国春季重大动物疫病防控工作视频会议”和“甘肃省春季重大动物疫病防控工作视频会议”精神，为了彻底搞好我县主要动物疫病免疫抗体监测和病原学监测工作，全面完成陇南市畜牧兽医局下达我县的各项样品采集任务，先将有关事宜通知如下：
一、正确认识当前形势，提高觉悟，增强搞好主要动物疫病集中监测的责任感
当前国内外动物疫情形势仍然十分严峻，主要动物疫病免疫抗体监测和病原学监测工作，已经成为重大动物疫病防控工作的重要环节，各乡（镇）畜牧兽医站一定要认识到动物疫病免疫抗体监测和病原学监测工作的重要性，增强责任感，以饱满的热情投入到防疫过程疫病监测工作中去。
二、加强组织领导，认真安排部署，严格采样操作，按时完成任务
主要动物疫病免疫抗体监测和病原学监测工作，采样种类多，操作要求严，工作任务大。血清样品：每份禽血清应在0.5毫升以上，需采全血3毫升以上；每份畜血清应在1毫升以上，需采全血5毫升以上。病原学监测：高致病性蓝
耳病、猪瘟样品应采集流产死胎及以高热为特征的死亡病例组织病料（淋巴结、扁桃体、肾、脾）；所采病料应严防污染、单独保存。各乡（镇）畜牧兽医站一定要加强组织领导，认真安排部署，严格采样操作，按时完成各项采样任务，并与4月25日前将样品送到县动物疫病预防控制中心。
三、建立健全长效机制，切实保障防疫质量
主要动物疫病免疫抗体监测和病原学监测工作，作为动物防疫工作的重要环节已纳入各乡（镇）兽医站年终工作考核指标之列，并建立长效机制。各乡（镇）兽医站一定要认真对待、扎实工作，切实保障我县防疫质量更上一层新台阶。
附：成县2014年春季动物疫病抗体监测任务分配表
免疫抗体 篇3
【关键词】酶联免疫吸附试验；ELISA;梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验；TPPA;梅毒抗体
【中图分类号】R377+1【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)10-0077-01
梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的性传播疾病.目前梅毒检测常用方法[1]主要有:快速血浆反应素试验(RPR)、甲苯胺红快速反应素试验(TRUST)、梅毒螺旋体EUSA试验(ElSA)、梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)和梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)等，有时也用到免疫印迹法和PCR方法。高敏感性和特异性的检验方法对于该病的确诊和治疗具有重要意义。我们采用梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验(TPPA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对2000份血清标本进行了检测比较，现报道如下。
1材料与方法
1.1标本来源选取我市2006年10月～2008年10月献血者和梅毒临床患者共2000份血清标本，男1236例、女764例，其中包括1700份健康献血者血清、300份梅毒患者血清。
1.2试剂TP-ELISA试剂盒购自北京万泰生物药业有限公司，IPPA试剂盒购自日本富士瑞必欧株式会社，均批检合格，在有效期内使用。
1.3方法所有标本均采用ELISA和TPPA进行血清梅毒螺旋体抗体平行检测，具体操作和结果判定均按试剂盒说明书进行。
1.4统计学处理采用统计学软件SPSS13.0对所得数据进行统计学分析，率的检验采用卡方检验，P<0.05，差异有统计学意义。
2结果
2.1酶联免疫吸附试验(ELISA)和梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验(TPPA)两种方法检测对300份梅毒患者血清检测结果比较，见表1。
2.2两种方法对1700份献血者血清检测结果见表2。
3讨论
梅毒是一种由苍白密螺旋俸所致的密螺旋体病，主要通过性接触、血液、母要垂直传播。20世纪60年代初得到较彻底的控制。1973年梅毒死灰复燃，卷土重来，20世纪80年代后期，国内各地先后均有早期梅毒的病例报道，以后呈直线上升，成为仅次于艾滋病的对人体危害最大的性传播疾病．无偿献血者血液初筛检测中，梅毒抗体阳性率也高达2.0%．其中工人、农民、流动人口的检测阳性率为3．58％[2]。而且，早期梅毒患者作为供血者，可以通过输血传染梅毒[3]。因此，必须选用高质量的梅毒检测试剂，加强对献血者梅毒的检测，以控制其经输血传播。
人体感染梅毒螺旋体后，可以产生特异性梅毒螺旋体抗体和非特异性抗体即反应素，前者比后者出现得早，即使通过抗梅毒治疗后，梅毒螺旋体抗体仍可终生存在[4]。TPPA试验方法是将特异性TP抗原包被在明胶颗粒上，省略了吸收剂，不受生物因素影响，与血清中特异性TP 抗体结合后出现肉眼可见的凝集反应的检测方法。TP以是目前公认较好的梅毒抗体确认方法，敏感性高，特异性强。ELISA法是利用基因重组工程合成抗原，检测血清中梅毒特异性抗体，在梅毒各期均有较高敏感性，TP-ELISA是利用重组梅毒螺旋体的特异性抗原包被酶标板孔，并采用双抗原夹心法检测血清标本中的梅毒特异性IgM和IsG抗体，对早期和晚期梅毒都有较高的检出率[5]，但ELISA法也存在着假阳性问题[6]。
本文结果表明，TP-ELISA法的假阳性率为0.35％。通过本文实验，我们发现ELISA和TPPA都具有较高的敏感性和特异性，两法的检测结果无显著性差异(P>0.05)。因TPPA用肉眼判断结果，使结果可靠性下降，并且试剂昂贵，整个检验过程几乎全部依赖于手工，操作繁琐，存在操作出错的风险，检测时需将样本作系列稀释，不利于大批量样本筛查，也不便用于疗效判断。而ELISA现已利用全自动加样器和全自动酶免分析仪，实现了从标本加样、温育、洗板、加试剂到结果判断等整个检验过程的完全自动化，可同时检测大批量标本，操作简便，极大地减少了人为因素的影响;可实现室内质量控制的标准化;结果判断客观、准确;利用微机保存并管理原始检验结果，便于查询;适合血站大规模的血液筛检[7]。因此，综合考虑方法学和实际操作等因素，ELlSA目前最适合血站大规模的血液筛检。
参考文献
[1]王培华.输血技术学[M]，第2版.北京:人民卫生出版社，2002:113-116.
[2]利忠，黄宏科，何伟胜．崇左市无偿献血者梅毒感染情况的初步调查[J]．广西医学，2005，27：141
[3]周林，武峰．输血医疗纠纷与事故的防范[M]．北京：中国科技出版社。2006:204
[4]王培华．输血技术学[M]．2版．北京：人民卫生出版社，2002：113-116
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[7]刘明，张小华．ELISA法与TRUST法检测梅毒结果的分析[J]．中国输血杂志，2002，15(2)：122-123
(收稿日期：2009.02.14)
免疫抗体 篇4
关键词：猪瘟,免疫抗体,ELISA
猪瘟是危害养猪业的主要疫病之一, 1985年以前, 该病在青海省流行比较严重, 曾造成很大的经济损失[1]。从1987年起青海省采取每年春秋两季全面预防注射, 在6月份和12月份进行补针;或春秋两季全面预防注射, 并进行随时补针的免疫措施, 西宁、互助等市县猪瘟的致死率由1987年的9.14%[1], 下降到现在的0.2%以下[2], 基本上控制了猪瘟的发生和流行。但是, 断乳仔猪以及由外地调进仔猪的猪瘟病例时有发生。目前采取的免疫程序不能排除其他人为因素、母源抗体等原因对仔猪免疫的干扰和猪瘟野毒 (自然强毒) 的感染。为了掌握猪瘟免疫状况, 笔者于2008年应用ELISA方法在省内6个市县进行了免疫血清抗体检测。
1 材料
1.1 诊断试剂
猪瘟强毒、弱毒单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验抗原、阳性血清、阴性血清、酶标二抗 (兔抗猪IgG酶结合物) 、酶联反应板等均购自中国兽药监察所。抗原包被液、血清稀释液、邻苯二胺底物溶液、终止液均由本室配制。
1.2 被检血清
采自西宁、湟中、平安、互助、乐都、大通等市县接种猪三联苗后30~40日的农户散养生猪。共检测接种猪瘟疫苗后猪血清697份, 检测自然强毒抗体血清851份。
2 方法
2.1 ELISA程序参照中国兽药监察所猪瘟单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验抗原使用说明书进行。
2.2 结果判定
用酶联检测仪测定反应后各孔OD490值。以阴性血清对照孔作空白调零。
(1) 猪瘟弱毒抗体:
在猪瘟弱毒酶联板上OD值<0.2判为阴性 (-D) , OD值≥0.2为弱毒抗体阳性 (+D) , 阳性中OD值≥0.3者经猪瘟病毒攻毒后能得到100%保护 (+P) ;OD值≥0.2、<0.3者攻毒保护率在75%左右;阴性者绝大多数不能抵御猪瘟病毒感染[2]。
群体免疫保护率的计算[3]:
保护力85%以上者为免疫良好猪群, 小于50%者为免疫无效或猪瘟不稳定群体, 需重新加强免疫, 以清除不稳定因素。
(2) 群体均分值的计算[4]:
阳性率记分:根据阳性率可从免疫猪群猪瘟抗体水平评估法阳性率记分表中查得相应的阳性率记分。保护率记分:根据保护率可从免疫猪群猪瘟抗体水平评估法的保护率记分表中查得相应的保护率
(3) 猪瘟强毒抗体:
在猪瘟强毒酶联板上OD490值≥0.5为猪瘟强毒抗体阳性, OD490值<0.5为猪瘟强毒抗体阴性。
3 结果
3.1 标准对照血清的检测
本次试验共做标准阳性和阴性血清各19份次, 反应后测定OD490值, 阳性血清平均值为0.692, 阴性血清平均值为0.07。对照系统正常, 试验成立。
3.2 猪瘟疫苗接种血清抗体的检测
共计检测血清697份, 检出血清抗体阳性率为91.39% (637/697) , 见表1。
3.3 猪瘟强毒抗体与疫苗免疫抗体检测比较
共检测6个市县猪血样851份, 检出猪瘟自然强毒抗体阳性76份, 阳性率为8.93%。同一份血清检测到猪瘟自然强毒抗体阳性和疫苗免疫 (弱毒) 抗体的比率为97.44%, 见表2。
4 分析
(1) 群体免疫均分等级及其免疫状况分析。均分等级划分为5级, 从Ⅰ~Ⅴ免疫效果依次递减, 根据表3可对猪群抗体水平进行分析[5]。
(2) 本次检测血清采自接种疫苗免疫后30~40d的猪只, 在被检测的697份血清中检出疫苗接种抗体阳性637份, 阳性率为91.39%。从检测结果可以看出接受了疫苗免疫的猪只在此期间免疫抗体阳转率较高, 群体均分值为100, 表明群体免疫水平很高。
(3) 从猪瘟疫苗预防接种后免疫抗体与自然强毒感染抗体检测结果的比较, 两种抗体同时存在的猪占97.44%, 而猪群中没有发现典型的猪瘟病例和猪瘟疫情, 可认为是温和性 (猪瘟亚临床性感染) 猪瘟。郑世军等报道的无论猪瘟疫苗免疫猪还是自然猪瘟弱毒感染的猪都有再次感染猪瘟强毒的可能性[5];血清强毒抗体阳性的亚临床感染的怀孕母猪外观正常[6]。幼仔猪免疫状况不清, 在同一时间内进行猪瘟疫苗接种对免疫力的产生有很大的影响或其他因素造成的免疫的失败都可能会造成猪瘟强毒感染。
参考文献
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免疫抗体 篇5
1.影响动物免疫后抗体保护率低的因素
1.1病原因素
病原体主要通过损伤免疫器官，影响动物体内的血液中免疫细胞活性、损伤抗原递呈细胞或干扰抗原递呈，从而抵制或阻断免疫抗体的形成，从而造成机体免疫力下降或机体免疫应答不完全。
1.2营养因素
动物营养不良，或不能给动物提供全价营养的饲料，饲料中维生素和微量元素的缺失或过度，都可能影响机体免疫系统的发育，造成其功能降低。
1.3药物因素
抗生素使用不当有可能导致免疫力下降，影响机体免疫应答。如果在免疫后服用或注射一些抗生素类的药物，就有可能影响到免疫的效果，尤其是处于幼龄的动物受其影响会更大。
1.4免疫的程序因素
免疫程序如果不合理，如当母源抗体的滴度高时，实施免疫接种另外如果使用疫苗的免疫剂量过大、或者重复免疫，都会使机体免疫应答受到抵制，从而影响免疫效果。对免疫程序和期限不重视也会导致达不到相应的免疫效果而引起动物发病。
1.5疫苗的质量因素和操作使用因素
要想保证动物免疫后的抗体产生良好的保护效果、保障正常的免疫应答反应，就得科学地使用疫苗，选择质量过硬并与动物本身情况相适应的疫苗品种和使用正确合理的剂量来保证防疫的效果。
1.5.1疫苗的质量问题
疫苗质量不符合规程、不合格，效力就会达不到免疫要求。
1.5.2疫苗的使用问题
进行动物免疫理当科学的使用相应剂量来确保免疫效果，否则会引起肌体免疫反应缓慢或迟钝从而影响了淋巴细胞和致敏淋巴因子的产生和作用。主要有以下几个方面：
（1）动物个体之间的差异及人为的因素。
由于动物个体之间存在着差异和疫苗本身所具有的副作用，会引起个别年老体衰或机体不良的动物在进行免疫后引起过敏反应，从而导致流产、破行或者食欲不振甚至死亡。这样的现象会使某些防疫人员畏惧小心，人为的减少使用剂量从而导致整体防疫后抗体保护率低下。
（2）使用时未保疫苗浓度均匀或稀释剂不当。
在使用疫苗前必需将疫苗充分摇匀，如果忽略了这一点，就会使疫苗浓度不匀，引起动物之间个体的防疫效果差别很大从而降低了抗体的保护率。
（3）其他情况。
疫苗在运输途中未能有效冷藏、使用时一针多用、或者过期使用都会导致防疫后的抗体保护率低下。
另外免疫人员素质的参差不齐和专业技能的差异也是影响防疫效果的原因之一。
2.对策和措施
2.1积极争取支持，保障免疫工作有序开展
一是积极与各级政府沟通，让他们充分认识到免疫工作的重要性，争取财政性投入，保证本地区的免疫工作正常开展以及防范控制重大疫情的发生。二是可以通过“横向”和“纵向”联合的形式，进一步提高免疫质量和水平。三是积极与养殖户做好沟通，促进免疫工作有序开展。
2.2强化技术学习，提高人员素质
要搞好免疫工作，就要先培养一批具有专业技能的人员队伍。通过定期开展集中培训，实际演练，定期考核，不断提高人员的业务水平。
2.3提高重视，规范防疫程序，严格控制防疫时间和步骤
首先要引起重视，按科学的程序和期限，结合动物的实际情况和所使用的疫苗特性来制定相应科学严格的免疫程序。
2.4确定适宜的免疫次数
在对动物进行免疫接种后，根据动物的免疫抗体消长规律，进行加强免疫。初次免疫，机体产生免疫应答，激活机体的免疫细胞，产生免疫记忆，使免疫抗体达到高潮后开始下降。加强免疫要掌握好加强时间来进行。务必防止同一种疫苗做为药物来频繁使用，否则，就会使机体产生免疫麻痹，造成疫病难以防控。
2.5确保疫苗的质量与正确使用
2.5.1要根据疫病的流行特点，动物的免疫状态等实际情况，制定出正确、合理的免疫程序，有计划有目的的定期进行防疫工作，降低疫病的发生机率
2.5.2要掌握好疫苗的接种时间
挑选母源抗体较低不易受抗体干扰时进行以免防疫效果不良。
2.5.3确保疫苗的质量
采购疫苗应到正规动物防疫机构选择有正规包装、商标、生产单位、批准文号、生产批号、有效期限、产品合格的疫苗，并要做好采购记录。
2.5.4正确存放疫苗
要按照疫苗保存的条件以合理有效的运输方式来运输和储藏，以此来减少疫苗效价的降低。
2.5.5保证免疫接种有效
按操作规定进行免疫，接种前要检查疫苗的包装、有效期和真空度，在实施免疫接种时要严格按使用说明来操作，正确选择免疫途径、控制接种剂量，勤换针头、防止交叉感染。
2.5.6禁止滥用抗生素
禁止使用影响所接种疫苗效果的药物和含有这些物质的饲料，以免影响免疫效果，从而导致抗体保护率降低。
2.5.7避免几种疫苗同时使用
几种疫苗同时使用或在相同时间同时接种，疫苗效力之间就会产生免疫干扰现象，影响机体相应的抗体产生，不能保证动物的免疫合格率，反而会降低抗体保护率。
2.5.8避免加大疫苗剂量造成免疫麻痹
猪瘟免疫抗体检测及效果分析 篇6
关键词：猪瘟,免疫抗体检测,效果分析
猪瘟是由黄病毒科猪瘟病毒属的猪瘟病毒引起的一种急性、发热、接触性传染传染病。具有高度传染性和致死性。被世界动物卫生组织 (OIE) 列为必须报告的传染病, 对养猪业危害极大。近几年来潼南县通过加大免疫力度防控猪瘟的发生, 为了检测猪瘟免疫效果, 制定合理的免疫程序, 潼南县动物疫病控制部门和养猪场业主制定猪瘟免疫计划提供依据, 于2011年10月在潼南县22个镇 (街) 的规模化猪场和和散养户采血进行猪瘟免疫抗体进行了检测, 现将检测结果分析报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试剂:
间接血凝抗原、猪瘟标准阴性、阳性血清购自中国农业科学院兰州兽医研究所, 诊断试剂在有效期内使用。
1.1.2 器械:
移液器 (50μL、20μL) 、取液塑料嘴、V型110°96孔血凝板和微量振荡器。
1.1.3 被检血清:
在潼南县22个镇 (街) 的规模化猪场和和散养户中采集猪瘟免疫接种21 d后的猪血清826份, 根据养殖规模和免疫情况分为3个组, 其中第一组:种猪场血清132份, 供采集血清的猪免疫接种2次猪瘟兔化弱毒脾淋苗, 剂量分别为3头份、2头份;第二组:4个规模化商品猪场血清258份, 供采集血清的猪免疫接种2次猪瘟兔化弱毒细胞苗, 剂量为每次3头份;第三组:22个镇 (街) 的散养户130个散养猪场血清436份, 供采集血清的猪免疫接种1次猪瘟兔化弱毒细胞苗, 剂量为2头份。
1.2 检测方法
应用猪瘟正向间接血凝试验 (IHA) , 严格按照诊断试剂说明书的要求进行操作。
1.3 判定标准
在阴性、阳性血清稀释液对照孔合格的前提下, 再观察待检血清各孔, 以呈现“++”凝集的最大稀释倍数为该份血清的抗体效价, 受检血清抗体效价≥1∶32判为合格, 存栏猪免疫抗体合格率≥70%判为合格。。
2 结果
从表1可以看出, 22镇 (街) 的规模化猪场和散养猪场共检测血清样品826份, 抗体效价≥1∶32为826份, 免疫抗体合格率为80.99%, 其中种猪场免疫合格率为94.70%, 规模商品猪场免疫合格率为85.66%, 散养猪场免疫合格率为74.08%。
3 讨论
3.1 检测结果表明, 潼南县种猪场猪瘟免疫效果较好, 但部分规模化商品猪场免疫抗体水平不容乐观, 散养户猪的免疫抗体合格率虽然达到农业部规定的≥70%标准, 但存在感染猪瘟疫情的隐患。免疫抗体合格率不高的原因主要有以下几方面。
3.1.1 疫苗的保存和运输存在问题:有的畜牧兽医站、业主在疫苗运输过程中无冷藏设备, 部分养殖户将疫苗领回去后没有条件达不到将稀释的猪瘟冻干苗存放过久, 造成疫苗效价降低或失效。
3.1.2 免疫注射存在问题:疫苗剂量不足;免疫密度偏低;过早注射, 对刚生下几天的仔猪注射猪瘟疫苗, 母源抗体干扰, 影响免疫效果;注射技术不规范, 不消毒, 不换针头。
3.1.3 没有按科学合理的免疫程序进行免疫, 没有及时采取补免工作一些散养户和专业养殖户动物防疫意识比较淡薄, 1年仅免疫1次, 甚至在猪出现疫病迹象时, 才开展免疫工作, 造成猪群免疫合格率达不到要求。
3.1.4 疾病的影响部分猪场存在普通猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS) 等疫病, 使猪体免疫力下降, 对猪瘟疫苗的免疫应答下降, 造成免疫失败;有的猪场存在温和性猪瘟, 由猪瘟病毒的持续感染造成免疫耐受。
3.1.5 饲养管理水平较低的影响部分散养户利用剩饭泔水、霉变饲料, 引起肝细胞的变性坏死、淋巴出血水肿, 严重破坏机体免疫器官, 造成机体的免疫抑制。
3.2 针对潼南县猪瘟免疫现状, 各猪场免疫状态不尽一致, 仔猪的母源抗体消长规律也不相同, 各猪场要建立免疫抗体检测制度, 掌握母源抗体消长规律, 制定适合本猪场的免疫程序, 选定首免日龄, 做好补免工作
3.3 从潼南县部分猪场使用猪瘟兔化弱毒脾淋苗反应效果不错, 而且这次免疫抗体检测, 抗体效价较高, 建议使用猪瘟兔化弱毒脾淋苗, 据研究表明, 猪瘟兔化弱毒脾淋苗的主要优点有:产生免疫快且坚强 (4 d可产生坚强免疫力) ;可抵抗亚临床感染;无外源病毒之忧。
3.4 加强猪场疫病综合防控能力, 淘汰PRRSV、CSFV阳性猪, 减少混合感染机会, 提高猪群整体健康水平。
3.5 对猪瘟的防控不能单靠免疫接种, 还要实行严格卫生消毒制度、科学饲喂、坚持自繁自养、全进全出的饲养方式等综合防控措施。
参考文献
[1]蔡宝祥.当前我国猪瘟防制中存在的问题和对策.现代化养猪企业经营管理研讨会论文集[C];2004年.
[2]邓心武.在猪体内猪瘟兔化弱毒和猪瘟强毒之间的干扰作用.中国兽医科技;1980年03期.
[3]李海明.猪瘟免疫程序的研究.福建农林大学;2003年.
免疫抗体 篇7
猪瘟是由猪瘟病毒( CSFV) 引起的一种猪的急性、 烈性传染病,被国际兽疫局( OIE) 列为A类传染病[1]。 我国每年因猪瘟死亡的猪占病死猪的1 /3以上,直接经济损失有数十亿元[2]。目前,治疗该病尚无特效药物,疫苗免疫仍是预防猪瘟的主要手段[3,4]。
四川黑猪是四川省畜牧科学研究院经过多年育种培育而成的猪种,现已通过国家畜禽品种审定委员会现场审查。该品种由国内外优良生猪品种资源选育而成,具有抗病能力强、适应性广、肉质鲜嫩、风味美等特点。本试验通过对四川黑猪仔猪母源抗体和初免抗体进行跟踪监测,系统地反映猪瘟母源抗体及免疫后抗体的消长规律和免疫效果,旨在为进一步掌握四川黑猪猪瘟疫苗的免疫效力及免疫期、制订合理的免疫程序及扑灭和净化猪瘟提供科学依据。
1材料
1.1主要试剂
猪瘟病毒抗体检测试剂盒( 生产批号为04 43220 - 01) ,购自美国IDEXX公司。
1.2疫苗
猪瘟兔化弱毒疫苗( 批号为2011100903) ,由中牧集团生产。
1.3试验动物
年龄、胎次、饲养状况、环境条件相近的5头健康经产母猪,由四川省畜牧科学研究院养猪所提供。将5头母猪所产的50头仔猪分为A组和B组,A组编入母源抗体检测组,B组编入疫苗免疫抗体组。仔猪20日龄时断乳,试验期间及时淘汰弱仔猪、死猪。
2方法
2.1免疫接种
将分好组的试验用母猪于配种前2周用猪瘟兔化弱毒疫苗肌肉注射免疫[5],每头母猪免疫4头份, 疫苗免疫抗体组仔猪于35日龄首免2头份,60日龄二免2头份。
2.2采血及血清制备
从分娩当天( 第0天) 开始,母猪和母源抗体检测组仔猪分别于第0,1,4,7,10,20,25,30,35日龄同步采血,母猪于耳缘静脉采血,仔猪于前腔静脉采血, 2 ~ 3 m L / 头,置已编号的无菌试管内,37 ℃ 作用1 h; 然后于4 ℃ 过夜冷凝析出血清; 取血清注入离心管内,3 000 r/min离心5 min; 取上清液,- 20 ℃ 冷冻, 待检。
根据母源抗体检测组仔猪的检测结果,疫苗免疫抗体组仔猪于35日龄免疫,并在第35,45,55,65, 80,90,120日龄采血,2 ~ 3 m L / 头,置已编号的无菌试管内,37 ℃作用1 h; 然后于4 ℃ 过夜冷凝析出血清; 取血清注入离心管内,3 000 r/min离心5 min; 取上清液,- 20 ℃冷冻,待检。
2.3抗体检测
按照猪瘟病毒抗体检测试剂盒说明检测抗体。
2.4猪瘟抗体效价的换算(见表1)
注: 抗体阻断率大于 81% 时按照 81% 计。
3结果
3.1母猪猪瘟抗体效价的测定(结果见表2)
lb
由表2可知,试验期间,母猪的抗体效价没有明显波动,较为平稳,且维持在很高的抗体水平。仔猪断奶后第30日龄,母猪的抗体效价出现下降,但仍维持在较高的抗体水平。
3. 2仔猪猪瘟抗体检测
猪瘟抗体检测结果见表3和表4。
lb
由表3可知,无论母猪抗体水平高低,所产仔猪在吃初乳前抗体水平均为0,仔猪采食初乳后母源抗体水平迅速提高。仔猪在1日龄时抗体效价即达到很高的水平,20日龄后抗体水平出现明显下降,此时平均抗体水平为8. 4 lb,35日龄平均抗体效价为4. 2 lb,达到了保护力临界值( 临界值4. 0 lb) 。
lb
由表4可知,35日龄首免猪瘟兔化弱毒疫苗后仔猪猪瘟抗体效价呈上升趋势,60日龄左右略有下降,二免后抗体效价再次上升,至120日龄时仍具有较高的抗体效价,能够提供坚强的保护力。
3.3仔猪猪瘟母源抗体消长规律(结果见图1)
由图1可知,母猪猪瘟抗体一直维持在较高水平,且较平稳,25日龄后母猪猪瘟抗体水平下降,至35日龄为9. 2 lb,但仍具有很高的保护力。仔猪1 ~ 7日龄抗体效价均维持在很高水平,与母猪猪瘟抗体水平呈正相关,母猪猪瘟抗体水平越高,仔猪的抗体水平也越高,10 ~ 20日龄仔猪猪瘟母源抗体水平下降,但下降不明显且抗体水平仍较高,而母猪猪瘟抗体水平依然较高且高过仔猪猪瘟母源抗体水平,说明仔猪从母乳中吸收母源抗体进入血液的量在减少或已经不能从母乳中吸收母源抗体进入血液。20日龄断乳后抗体水平开始出现明显下降。
3.4仔猪猪瘟免疫抗体消长规律(结果见图2)
由图2可知,35日龄首免,60日龄二免后仔猪猪瘟抗体效价较高,在60日龄左右免疫抗体效价略有下降,经过二次免疫后猪瘟抗体明显上升且保护时间长,至120日龄时仍具有较高的抗体效价。目前, 许多规模猪场控制猪瘟疾病多采用20日龄首免的方法,免疫效果不理想,猪瘟抗体效价参差不齐,易受猪瘟野毒感染,分析原因可能是20日龄时仔猪的母源抗体还处在较高水平,过早免疫被母源抗体中和部分抗原,从而影响 仔猪抗体 产生,易造成免 疫效果低下[6]。
4讨论
目前,采用猪瘟疫苗免疫预防和控制猪瘟是降低猪瘟感染率和发病率的重要方法。对仔猪猪瘟的防制关键是排除母源抗体干扰,确定合适的首免日龄[7]。针对四川黑猪母源抗体的研究可以初步确定四川黑猪仔猪确切的首免日龄,对排除母源抗体干扰造成的免疫失败具有现实意义[8]。本试验针对仔猪出生后0 ~ 35日龄母源抗体进行了系统监测,结果显示,吃初乳前 仔猪母源 抗体效价 为0,吃初乳后 第1天仔猪猪瘟母源抗体效价迅速上升,表明仔猪从母猪体内获得了大量母源抗体。仔猪出生后的1 ~7 d内猪瘟母源抗体效价维持在较高水平,效价达到210及以上。陈祝三等[9]研究证实,仔猪的母源抗体在15日龄时达到峰值; 蔡葵蒸等[10]研究证实,20日龄达到峰值; 李明义等[11]研究证实,仔猪母源抗体在7日龄时达到高峰,7日龄后虽然仔猪仍然吸食初乳, 但已不能满足自身生长的需要,推测可能与仔猪自身生长迅速有关。本研究还发现,四川黑猪仔猪虽然7日龄后猪瘟母源抗体水平下降,但下降速度缓慢, 至25日龄时仔猪 猪瘟母源抗体 水平仍高达27. 5, 35日龄下降到24. 2。
本试验结果表明,35日龄时猪瘟母源抗体水平为24. 2,已接近保护力抗体水平的临界值,此时免疫受母源抗体干扰作用将会非常小,疫苗免疫能够产生较高的抗体水平。因此,四川黑猪断奶仔猪的首免日龄在35日龄。35日龄首免、60日龄二免能够刺激黑猪机体产生较高的保护性抗体,且维持时间长,消退慢。
参考文献
[1]殷震,刘景华.动物病毒学[M].2版.北京:科学出版社,1997.
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[4]李明义,宫晓,白志娟,等.猪瘟兔化组织灭活疫苗的研制[J].上海畜牧兽医通讯,2004(3):24-25.
[5]邱成勋,刘葆清,冯丽芳,等.猪瘟兔化弱毒疫苗不同免疫方法的免疫效果试验[J].中国兽医科技,1999,29(12):28-29.
[6]朱善德,余晓华,卢黎明,等两种不同猪瘟疫苗免疫抗体消长规律研究试验[J].上海畜牧兽医通讯,2008(1):50-51.
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[9]陈祝三,何存利,谢琴,等.仔猪猪瘟免疫程序的研究[J].中国畜禽传染病,1998,20(4):206-208.
[10]蔡葵蒸,张明林,柴君秀,等.猪瘟疫苗免疫母猪所产仔猪的母源抗体检测[J].中国兽医科技,2002,32(2):27-28.
免疫抗体 篇8
1 动物免疫抗体监测的主要作用
动物免疫抗体监测, 是通过血清学试验的方法, 即用已知抗原来检测被检血清中有无相应的特异性抗体和滴定该特异抗体水平。在养殖生产实践中, 对检验免疫效果、掌握疫情动态和进行疫病诊断, 为动物免疫工作提供科学依据具有十分重要的作用。
1.1 抗体监测是制定动物免疫程序的主要依据
在生产实践中, 没有一个免疫程序是通用的, 生搬硬套他人现成的程序并非能获得最佳的免疫效果。唯一有效的办法是在免疫学基本理论的指导下, 根据当地实际情况, 参考成功经验, 来制定动物免疫程序。通过抗体监测, 来确定适当的免疫时间和免疫剂量, 这样不仅有助于减少疫苗间相互干扰产生的不利影响, 避开母源抗体的干扰, 避免盲目免疫, 保证动物长期有较高的免疫抗体水平和整齐度。免疫抗体监测也能检验现有免疫程序是否合理, 不合理的免疫程序可以通过抗体检测来进行调整。
1.2 抗体监测是揭示动物疫病的重要参考依据
通过抗体监测, 若抗体水平一直较高且整齐度好, 说明动物机体健康, 抵抗力强, 存在疫病的可能性很小;若抗体水平一直较低或整齐度差, 且再次通过补免仍然抗体水平上不去, 这就说明动物很有可能存在免疫抑制性疾病, 或者预示可能发生疾病, 我们就要立即查明原因, 采取相应的预防措施补救, 确保动物健康生长。当动物出现异常情况时, 也可以通过抗体监测进行间接诊断。
1.3 抗体监测是保证动物防疫质量的重要手段
通过抗体监测, 可以了解某个乡镇或者某个规模养殖场的动物防疫质量如何。若发现免疫抗体水平较高, 则在具体工作中必须过一段时间等抗体水平降到一定程度才能再次实施免疫接种;若检测发现动物免疫抗体水平较低, 可以督促动物防疫员对责任片内的动物实施补免或加免, 或要求养殖场主及时做好免疫接种工作, 从而保证动物有较高的抗体水平, 确保动物防疫质量。
1.4 抗体监测是检验动物防疫员工作的重要手段
在没有实施动物免疫抗体检测以前, 许多动物防疫员为了图方便、省事、怕麻烦, 在进行动物免疫时, 根本就没有对动物接种疫苗, 仅仅是挂了免疫标识, 填写了免疫证, 作了免疫台帐, 造成实施了动物免疫接种的假象;还有的动物防疫员因怕引起动物免疫副反应, 发生免疫副反应会给自己带来不必要的麻烦和经济损失, 在对动物实施免疫接种时, 故意减少免疫剂量, 这样不仅达不到应有的免疫效果, 甚至有可能导致动物疫病的暴发流行, 给养殖户造成巨大的经济损失。通过免疫抗体监测, 就势必使动物防疫员按照动物免疫操作规程实施动物免疫接种, 接种时注射足额剂量, 不弄虚作假, 确保动物免疫效果。
2 实施动物免疫抗体监测中存在的问题
2.1 抗体检测技术人员太少
新宁县动物防疫监督站实验室虽然购置了大量的仪器设备, 完全能够满足开展动物免疫抗体监测工作的需要, 但没有配备足够的检测技术人员, 现仅有两名兼职动物免疫抗体检测人员, 而全县实施免疫抗体检测工作量十分巨大, 仅仅凭两名兼职检测人员根本无法按要求完成免疫抗体检测任务。
2.2 抗体监测认识不足
一是部分乡镇干部及村干部对动物抗体监测认识不足, 认为对动物免疫实施抗体检测是业务部门故弄玄虚, 好引起政府对动物防疫工作的重视, 因此, 在血清样本采集中, 对群众的拒绝、阻挠行为不进行劝阻和解释;二是部分基层动物防疫员对抗体监测认识不足, 认为实施抗体检测没有实际指导意义, 又费人力又麻烦, 只要按上级的要求将防疫针打好就行了, 何必搞得这么复杂, 因此, 工作中不加强学习, 采血技术也不多看多练, 因而大多数动物防疫员实践操作技能低, 无法进行血清样本采集;三是养殖户对抗体监测认识不足, 认为已按照动物防疫站的要求将动物免疫接种到位, 没有进行抗体监测的必要, 况且检测采取血清样本时多少会对动物生长造成一定的影响, 甚至有可能造成应激, 因而有大部分养殖户不愿对动物实施抗体检测。
2.3 检测经费投入不足
现在本县动物防疫监督站对养殖户的动物实施免疫抗体检测是不收费的, 但在具体工作中需要大量的人力、物力、财力, 需要大量的检测试剂和其它耗材, 特别是检测试剂价格昂贵。县财政对动物免疫抗体检测专项经费非常有限, 造成检测经费的不足, 导致动物免疫抗体监测工作不能正常开展或检测数量大打折扣, 最终导致检测结果不能完全体现当时的动物免疫抗体水平和防疫质量状况。
2.4 检测样品采集难
动物免疫抗体检测首先要采取血清样品, 对动物采血必须进行适当的保定措施, 采样人员要有熟练的采血技术, 同时还要得到养殖户的配合和支持。但在实际工作中, 一是对大动物的保定难, 稍不小心有可能造成人员受伤;二是新宁县采血技术非常熟练的动物防疫员还不多;三是大多数养殖户对抗体监测不理解、不支持、不配合, 认为对动物采血后对生长影响很大, 有的甚至有认为动物采血后抵抗力会下降, 动物就会生病的想法。这样, 血清样品往往不能够按要求采集, 抗体检测出来的结果也就没有代表性。
3 加强抗体监测, 确保防疫质量的几点建议
3.1 加大动物免疫抗体监测宣传力度
各级政府及业务部门必须加大免疫抗体检测宣传力度, 使各级各部门及养殖户认识到实施抗体检测的重要意义和在养殖生产中的重要作用, 使免疫抗监测工作深入人心、家喻户晓, 使抗体监测工作得到全社会的支持和配合, 保证抗体检测血清样品按要求采集, 这样检测的结果才真正具有代表性, 才能真实反映某个地方或养殖场的动物防疫质量。
3.2 加快对监测技术人员的培训力度
一是要加强基层动物防疫员采样技术培训, 使他们熟练掌握动物保定技术和血清样本采集技术, 通过一时间的努力, 使乡镇动物防疫人员人人能够动手并熟练地采血;二是加强抗体检测专业技术人员的培训, 只少要培养5名以上的专职检测员, 使他们能够熟练掌握检测操作规程, 能够在实践操作中快速、准确地实施检测, 确保检测结果的准确性。
3.3 加大动物免疫抗体监测经费投入
各级政府及业务主管部门一是要加大对动物抗体监测经费的投入, 包括检测人员的工资及培训费用、检测仪器设备、检测试纸及检测用耗材费用;二是要按照上级的要求成立动物疫病预防控制中心, 修建动物疫病预防控制中心大楼, 搞好抗体监测实验室, 确保全县动物免疫抗体监测工作的顺利开展。
3.4 建立动物免疫副反应补偿机制
各级政府及业务部门应建立动物免疫副反应补偿机制, 设立动物免疫副反应死亡补偿基金, 给予畜主因动物免疫副反应死亡合理的补偿, 减少动物防疫员的压力, 大大提高其工作积极性, 要求动物防疫员严格按照疫苗剂量来注射, 使疫苗发挥出应有的保护效果。
综上所述, 动物免疫抗体监测是一项具有科学性, 适用性的专业技术。在动物防疫工作中, 通过免疫抗体监测, 确保免疫程序的合理性, 促使动物防疫人员和养殖户将动物防疫工作落到实处, 确保较高的动物防疫质量, 减少动物重大疫病的发生与流行, 从而促进畜牧业健康稳步发展。
因许多牧民一年中大部分时间处于走圈放牧中, 所以他们在秋季或夏季草场上给羊群进行灌药或者注射疫苗时, 由于没有圈舍而常常大费周折, 耗费了大量的人力, 但仍然出现疫苗漏注或驱虫药漏灌现象, 很伤脑筋。虽然近两年配置的钢管焊制的羊用保定栏给广大动物防疫员和牧民群众带来了前所为有的方便与好处, 但这种铁制的保定栏比较笨重, 只能安装在冬季草场有羊圈的某一个地方, 而不能随时携带到牧民走圈放牧的夏秋草场。因此, 在无圈舍的其它草场进行疫病防治时仍然会有较大的困难。本人在第一线的长期工作生产实践中, 探索出一种便携式的羊用防疫保定栏, 其制作成本还不到钢制保定栏的十分之一。并在使用中发现无论是给羊灌药还是注射疫苗或分群, 都非常方便有效, 并且不用耗费太多的劳动力, 携带时也非常方便, 一头牛或者一辆摩托车就能携带着到任何地方。有效的解决了因交通不便车辆无法通行, 或体积庞大无法携带而造成的困难。希望能进一步推广和利用, 以方便更多的牧民群众。
1主要制作材料
长15~20m, 宽1.2m~1.4m的帆布。厚度约1.5mm~2mm, 做工上好的任意帆布, 帆布颜色可不限。帆布中间和两头可多安装几个用以固定钢管的装置, 如铁环、绳索等。另外还需4到7根直径20mm、长1.6m的钢管。钢管的一头要制成尖嘴状, 以便能轻松地钉入草皮或土地上。
2安装方法
首先将钢管按自己所需圈舍的形状 (可随地形任意改变安装形状) 垂直钉在地上, 再将帆布固定在钢管上即可投入使用。使用完以后拆卸及运输也极其方便。
3便携式保定圈舍的用途
用途很广, 如进行疫苗注射、灌药、给羊分群、在野外放牧时还可以充当临时圈舍, 既安全又挡风沙。如果羊群很多, 一套保定栏不够用, 还可以多带几套。
便携式多用保定栏制作图如下:
羊用便携式多用保定圈舍的探索和创造
亭湖地区猪瘟抗体免疫水平分析 篇9
多年来, 面对猪瘟我国一直采取的是以防为主的防制方针[3], 免疫接种是预防工作的主要方式。但是由于种种原因, 经过免疫的群体, 仍然存在免疫抗体水平不高, 甚至是有的猪场在接种猪瘟疫苗后仍然会有猪瘟发生。在目前普遍采用疫苗免疫的情况下, 仍有部分地区猪瘟流行严重, 且表现出新的流行病学特点。因此本地区对猪瘟抗体免疫水平一直有监测。本试验旨在采用ELISE试验方法, 检测亭湖区部分规模场猪群的猪瘟抗体免疫水平, 结合临床流行病学特点, 对该地区猪瘟的流行趋势进行估测并分析免疫失败原因。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 血清样品
2016年7月在江苏省盐城市亭湖区5个乡镇及3个区的部分规模养猪场按比例随机采取猪血样, 各乡镇 (区) 均采样240份, 共计1920份猪血样, 按照常规方法分离血清并置-20℃冰箱保存, 待测。
1.1.2 试剂与仪器
猪瘟抗体检测试剂盒购自北京爱德士元亨生物科技有限公司, 批号G241;精确的单道微量移液器和多道微量移液器;一次性移液器吸头;96孔酶标仪;洗板设备;离心机等。
1.2 操作步骤与判断标准
按照猪瘟ELISE抗体检测试剂盒说明书进行抗体检测及结果判定。阴性对照的平均OD450>0.5, 阳性对照的阻断率≥50%, 检测结果判定为有效;通过计算每个样品的阻断率判定CSFV抗体水平, 猪瘟抗体阻断率%≥40%时, 检测结果为阳性, 即合格;猪瘟抗体阻断率%≤30%时, 检测结果为阴性, 即不合格;当猪瘟抗体30%<阻断率%<40%时, 判为可疑。
2 结果与分析
各乡镇 (区) 所检测猪瘟样品合格率分布情况见表1。除新兴、黄尖、新洋经济区, 其他各镇 (区) 均存在不合格样品, 其中盐东和环保科技园不合格率最高, 分别达到37.5%和40.00%。亭湖新区中等水平的样品最多。新兴、新洋经济区满意合格率达到100%。
亭湖区各乡镇 (区) 采集的样品数量、猪瘟抗体检测结果均值见表2、附图。从表2中可以看出, 8个乡镇 (区) 的规模化养猪场的猪瘟合格率均达到60%, 平均合格率达到84.06%。其中新兴镇及新洋经济区猪瘟抗体合格率最高, 达到100%, 其抗体阻断率均值也分别达到84.36%和83.04%, 呈较高水平分布;环保科技园合格率最低, 只有60%, 其抗体阻断率也仅达到56.71%;便仓镇和盐东镇的猪瘟抗体检测合格率均低于80%, 其阻断率均值分别为70.31%和49.16%。结果显示, 不同乡镇 (区) 养猪规模场之间猪瘟抗体的抗体阻断率均值呈不同水平分布, 其整齐度也存在较大差异。从图1中可以看出, 新兴镇的猪瘟抗体阻断率均值最高, 其标准差也最小, 说明其整体水平稳定, 数据整齐度较好;盐东镇的抗体阻断率均值最低, 并且其标准差较高, 说明其整体抗体水平较为不稳定, 数据整齐度也较差。
3 讨论
亭湖区已形成蔬菜业、林果花卉业、畜牧业三大特色支柱产业, 其中畜禽养殖规模不断扩大, 各乡镇 (区) 畜牧产业也不断发展。而无疑猪瘟的有效防治对整个畜牧业的健康发展是有很大作用的。根据结果, 可以看出全区猪瘟的整体免疫密度较高, 免疫效果良好, 近期内对于预防猪瘟是有帮助的。但在本区仍有部分免疫抗体水平不高, 甚至在部分区域出现不合格样品。如表1所示, 同一地区不同乡镇的免疫效果存在明显差异, 说明本区防疫工作仍有问题, 有待进一步提升。 (1) 新兴镇、新洋经济区的抗体阻断率≥60%的百分比达到100%, 说明该地区对猪瘟的免疫工作实施较为良好;其群体标准差值也较小说明群体总体抗体水平整齐度较好, 抗体产生较为稳定, 该地区对猪瘟的发生有一定的防治作用, 对该病做到了以“防”为主。 (2) 盐东镇和环保科技园的抗体阻断率<30%所在范围内的所占比例相对较高, 说明该地区的猪瘟防疫工作仍需要提升, 究其原因, 有可能是其饲养条件不利于猪体内抗体的高效产生;也有可能在是疫苗选择上存在差异所致, 所选疫苗产生抗体量相对较低, 或是由于该地区猪品种自身因素, 对抗体应答水平不够。针对以上所存在的问题, 应先尽可能排除抑制抗体产生的人为因素和疫苗因素, 确保抗体的有效产生, 可尽可能淘汰猪瘟抗体不合格品种和个体, 确保整个猪群的健康循环发展。 (3) 亭湖新区合格率虽然达到83.33%, 但其中等水平的样品最多, 其抗体阻断率均值仅达到55.10%, 相对于其他乡镇的均值水平较低, 并且标准差值也较小, 说明其抗体整齐度较好, 但普遍抗体水平不高, 可以考虑是否该地区所用疫苗的抗体应答水平不高, 或是所选用的猪种自身因素, 对抗体应答不敏感, 若存在此问题, 需要及时淘汰该疫苗和猪种。
4 结论
控制猪瘟的重点应以防为主[4]。根据本次试验结果和经验, 对全区养猪业的健康发展而言, 重视饲养管理和免疫预防工作的各个环节无疑是保证猪个体健康发展的重要策略和措施, 从而达到对猪瘟病毒的抵抗力和防御能力的有效增强。本次试验结果说明, 不同区域或同一地区的免疫抗体水平因各种不同原因存在较大差异, 所以为保证有效防治该地区猪瘟的发生, 则有必要定期对猪群做免疫抗体检测。
摘要：本试验则旨在采用ELISE试验方法, 检测亭湖区部分区域猪群的猪瘟抗体免疫水平, 结合临床流行病学特点, 对该地区的猪瘟流行趋势进行估测以及对不同区域免疫失败原因进行分析, 结果表明, 不同区域或同一地区因各种不同原因存在较大差异。为了解亭湖地区猪瘟的整体免疫状态及预防控制中存在的主要问题提供科学依据, 为猪瘟的防治工作做好铺垫。
关键词：猪瘟,抗体,检测
参考文献
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免疫抗体 篇10
(辽宁省鞍山市铁西区卫生防疫站辽宁鞍山114012)【摘要】艾滋病是当前严重威胁人类健康和生命的一种传染病,由早期的静脉吸毒者共用注射器传播,发展到当今性传播和母婴垂直传播,即向普通人群的传播, 艾滋病的流行给人类的健康、生命安全以及经济社会发展带来了严重影响。最常用的艾滋病诊断方式是进行抗体检测，要了解和掌握HIV的感染情况，关键就是实验室的检测技术，下文就关于在HIV抗体检测中酶联免疫吸附法和快速法的比较分析及其注意事项的总结。【关键词】酶联免疫吸附法;胶体金快速法;HIV抗体;检测【中图分类号】R446.6【文献标识码】B【文章编号】1004-5511（2012）04-0594-01 一、引言进入20世纪90年代，HIV在我国迅速传播，感染人数成倍增长，艾滋病的防治已经成为全世界面临的重要课题。HIV感染的诊断以HIV抗体的检测为金标准，为了达到早诊断、早治疗、早管理的目的，全国先后建立了大量的HIV抗体初筛实验室，对HIV抗体检测的准确性要求也越来越高。现简述关于我站用酶联免疫吸附法及胶体金快速法检测HIV抗体的思考。二、酶联免疫吸附法对HIV抗体的检测HIV抗体检测是发现HIV感染的有效途径，酶联免疫吸附法（ELISA）是一种敏感性高、特异性强、重复性好的试验诊断方法，由于其试剂具有稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素，以及既适用于 规模筛查试验，又可以使用于少量标本的检测等优点，一直以来，成为艾滋病初筛试验室检测HIV抗体普遍使用的方法之一 1、试剂的选择:试剂盒的质量直接影响到结果的准确性，因此，要选择灵敏度和准确度较高，而且特异性较强的试剂盒。选择试剂盒的原则是，必须是经国家食品药品监督管理局注册批准，批检合格，临床评估质量优良，在有效期内的试剂，并经常了解同行对试剂盒使用的反馈情况一级卫生部临床检验中心对参加室间质评实验室试剂盒的综合评价。本站检测HIV抗体主要采用北京万泰生物药业有限公司试剂盒。另外，也应该注意试剂的保存，试剂从冰箱中取出后，应先平衡到室温后再使用，用多少取多少，防治反复冻融。2、仪器设备的校准与检定: 对实验结果起关键作者用的仪器，水浴箱、洗板机和酶标仪等均需按周期进行计量检定，并在检定周期内进行期间核查，同时，建立仪器设备的维护及操作规程，进行日常维护，保持仪器设备的最佳状态。3、样品样品的采集与保存: 样品采集时候应该尽量避免溶血和细菌污染、霉变，否则会导致假阳性。尽量不用抗凝血，保存时间不宜太长，一般2°C-8°C冰箱中保存一周内完成检验，长期保存最好在零下20oC度低温冰箱存放，并避免反复冻融，浑浊或有沉淀的样品要离心。作HIV抗体检测的血样不宜用塑料试管，应用玻璃试管装。4、检测中关键点的控制：（1）加样：微孔板条从冰箱中取出后应平衡至潮气干尽方可使用，用微量加样器按规定量加入孔底，避免加在孔壁上部，尽量慢慢快放，以免溅出或产生气泡，同时不要使吸头碰到酶标板孔上的包被抗原。（2）温育：调节水溶箱至合适的温度，不能过高也不能过低，放在水溶箱的隔板上或放在温箱的温盒里均可。（3）洗涤： 一定要用洗板机，防治污染。注意洗板机上的每一个放液和吸液纤孔都一致的插入孔底，将孔内液体吸干，严格按照要求设置一定的浸泡时间和洗涤次数，不要将各种试剂盒的洗涤液混用。（4）.显色： 严格按照说明书规定的时间温度恒定反应后终止，不可以随意更改。在加液和混均过程中避免产生气泡，洗涤后反应板用纸吸干后再置酶标液中比色。5、实验室内质量控制： 室内质控一般使用质控品和质控图。联合应用即刻法质控图法进行室内质控也是一种很使用的方法，可以借鉴。并积极参加室间质控活动，了解本实验室的实验误差情况。三、胶体金快速法对HIV抗体的检测与ELISA法相比，胶体金快速法具有快速，安全，操作简单等有点，但是在实际应用中要注意假阳性和假阴性结果。本站主要采用上海科华的胶体金快速检测法检测HIV抗体，其原理是采用HIV特異性抗原gp160和gp36等包被微孔反应板，用gp36、gp41标记辣根过氧化物酶。当待测标本中存在HIV抗体时，该抗体与固相化的抗原结合于反应板上，并进一步与酶结合物相结合，在TMB底物参与反应的情况。对于弱阳性样本的处理要慎重，不能轻易舍去，宜用正常血清稀释后与原液对照一起测定，往往可以收到很好的效果。四、结论ELISA法是实验室检测HIV抗体普遍使用的方法，但影响ELISA法测定结果的因素很多。与ELISA法相比，胶体金快速法具有快速，安全，操作简单等优点，但是在实际应用中要注意假阳性和假阴性结果。将胶体金快速法和ELISA法联合使用，并力求控制各个影响因素，可以大大降低假阳性和假阴性结果，提高检测的准备性，为艾滋病的防治工作提供更有效的依据。参考文献［1］中国疾病预防控制中心.全国艾滋病检测技术规范（2009年版）.北京：中国疾病预防控制中心，2009：6.［2］李秀华，宋爱京，王佑春.HIV抗体快速诊断试剂与酶联免疫诊断试剂灵敏度比较.中国生物制品学杂志，2004；17（3）：175-176.［3］胡静云，陈善昌.胶体金快速检测法与ELISA法检测HIV抗体效果观察.华夏医学，2009；22（3）：488.
动物免疫抗体监测存在问题及对策 篇11
关键词：动物免疫,抗体监测,问题,对策
在当前的实际工作中, 经过实际研究发现, 免疫抗体水平监测工作在动物疫病的防预和控制中发挥着重要的作用, 是处于基础地位的, 在动物疫病强制免疫防控中是比较有效果的手段和方式, 对于研究疫苗具有重要的显示作用, 因为其是把握疫情动态及保证疫苗质量最为直接和有效的手段。这项工作不仅能够为重要的动物疫病防预和监控提供比较权威及科学的参考数据, 还可以在现实的工作中, 对免疫抗体工作的展开和实施具有重要的促进作用。但是, 在动物免疫抗体监测方面还存在着许多的问题和困难, 急需研究人员探究出有效的措施来解决和应对。
1 动物免疫抗体监测存在问题
1.1 缺乏对动物疫病免疫抗体监测的重视
在实际的研究工作中, 一些动物疫病免疫抗体监测技术人员对自己的本职工作的态度不端正, 监视力度不足, 给予的重视程度不够, 由于一些错误观念的诱导, 使得他们认为只要免疫工作做好, 免疫密度就会是百分百, 对于免疫的最终效果究竟做的好不好, 其给予的关心是极少的。但是实际情况却是, 免疫密度和免疫效果之间的差距很大, 百分百的免疫密度不代表免疫效果就是百分百, 两者之间的差距是很大的。一般如果工作中的免疫保护达到70%以上, 就是符合预定的保护率要求的, 在免疫方面达到了基本合格的要求。此外, 由于一些养殖户在监测工作开展方面缺乏必要的知识, 对其认识不够, 有时会出现一些不好的现象, 如在样本的采集中不配合或者阻止采集, 或者是勉强配合采样工作, 这就会造成在具体开展监测工作时所需样品数量不足, 导致结果不正确或者不普遍, 具有不可靠的随机性等问题。
1.2 散养户和小规模场在抗体水平方面不稳定, 免疫效果较差
最近几年研究发现, 在抗体水平方面, 大中型规模养殖场的效果是比较不错的。但是, 一些散养户和小规模场的免疫工作做得就不好, 甚至一些小的散养户和小型的养殖场相关专业的兽医技术人员较为缺乏, 导致许多免疫操作不当的情况出现。在实际的研究和调查中还发现, 有些个体养殖户都是在个人经验的基础上来进行动物免疫操作的, 如针头型号选择不当、三针同免、新进栏不免等情况的出现, 这样免疫效果有很大的随机性和不确定性, 容易产生免疫抑制和免疫无效的情况。同时, 免疫的时间都是安排在口蹄疫常发的春秋季, 没有在其他季节进行免疫再加强, 更易出现免疫刺激不够, 抗体水平达不到规范要求。因为是个体养殖, 所以害怕额外损失过多, 利润少, 这就使得抗体效果在合格率方面出现不稳定的现象, 为疫病的爆发埋下重大的隐患。
1.3 动物免疫抗体监测方面的投入经费不足
动物免疫工作是个需要大量经费投入的事情, 在动物疫病免疫抗体水平监测方面的经费投入需要很多。但实际工作中资金投入与需求相比是完全不够的, 由于缺乏充足的经费, 使得动物疫病免疫抗体水平监测工作没有顺利展开, 造成在动物疫病免疫抗体水平监测中出现了许多的问题, 如因为经费的不足使得工作人员只是为了应付上级下达的监测任务而进行一定的小范围的没有概率学意义的检测, 没有依据实际情况来进行监测研究, 只是把监测的范围及频次控制在一个小的范围内, 更有甚者只是填报一些数字上去, 连工作都不开展。
2 对动物免疫抗体监测工作的对策建议
2.1 加大监测力度与范围, 合理制定免疫程序
各级相关动物疫控部门不应仅仅只是应付春秋两季的集中监测任务, 应该化被动监测为主动监测, 制定监测计划, 加大监测力度, 扩大监测范围, 扎实做好动物免疫抗体水平监测工作, 并对相关检测得到的数据进行深入系统的分析, 客观真实地评估免疫效果以及评价疫苗质量, 在此基础上指导养殖户制定切实有效的免疫程序。作为疫源疫病监控人员, 对本地区的动物疫病免疫的实际情况要有整体的把握和全面的了解, 对于动物疫情的隐患要及时发现与解决, 进而提升当地对动物疫情的预警和防预能力[1]。
2.2 保证动物免疫抗体监测工作有充足的资金支持
为了使得监测工作正常有序展开, 充足的资金支持是必不可少的。因此, 农牧部门要大力争取本级政府对于动物疫病免疫抗体监测工作的经费投入, 对免疫工作量大、监测范围广、频率高的要有明确的资金保障[2]。此外, 防疫工作人员及一些个体养殖户也要有一定的免疫资金补助。
2.3 大力宣传动物疫病免疫抗体监测的重要性
对动物疫病免疫抗体监测工作要进行大力有效的宣传, 这样许多养殖户对免疫抗体监测的重要性就会有比较明确的认识, 免疫抗体监测工作就会更加方便地开展, 同时也会得到来自社会方面的配合、支持及援助, 许多个体养殖户会加深在动物防疫方面的法律和法规以及基本的疫病免疫监测知识, 从而提升整体的动物疫病免疫水平[3]。
2.4 落实养殖惠民政策, 设立相应的补偿机制
对于国家的各种养殖利民政策要积极进行落实和实施, 这对带动养殖户的积极性有着很大的作用。另外, 要和相关其他监测机构合作, 提高当地的监测水平, 让数据更加有说服力。政府要积极设立一个给予被监测单位和个人的资金补偿机制, 这样就会大大减轻养殖户的不良情绪, 还可以减轻基层防控防疫员的工作压力, 大大提升其工作的主动性及积极性, 把动物免疫工作做到更好, 取得更好的免疫效果。
3 结语
动物免疫抗体监测在动物疫病防控工作中占据着基础性的地位, 对于动物疫病强制免疫和防控具有特殊的作用和效果, 在评估疫苗质量和把握疫情动态方面是最为有效的措施。因此, 各级单位和工作人员必须对其给予足够的重视, 对存在的问题要及时用有效的和实用的方式来解决, 从而提高动物免疫水平, 减少相关疫病的暴发和流行, 确保不发生重大动物疫情, 减少养殖户的损失, 保障人民群众的生命健康和财产安全。
参考文献
[1]王辉, 刘炜, 贾松涛, 等.对动物免疫抗体监测工作的几点建议[J].中国动物检疫, 2010 (2) :111-116.
[2]于桂芳, 王国良, 温富勇, 等.偶蹄动物免疫口蹄疫O型亚洲Ⅰ型二价疫苗后O型和亚洲Ⅰ型免疫抗体监测结果差异的原因分析[J].当代畜牧, 2014 (6) :34-36.