宫颈癌和子宫内膜癌（共10篇）
宫颈癌和子宫内膜癌 篇1
子宫内膜癌已成为欧美等发达国家威胁女性生殖健康的首位恶性肿瘤[1],且发病率和死亡率呈逐年上升的趋势。能降低子宫内膜癌的发病率和死亡率的有效方法是 对子宫内 膜癌进行 早期筛查 和诊断。 国内外多个研究证实子宫内膜细胞学检查(ECT)可能成为高危因素人群子宫内膜癌早期筛查和诊断的可行方法[2]。ECT检查获取子宫内膜细胞标本制备成细胞涂片,镜下观察细胞形态学的特点进行分级评价。一直以来,细胞涂片阅片困难是制约ECT检查临床广泛应用的主要原因之一[2]。细胞块技术作为细胞学的重要辅助方法,常用于细针穿刺细胞学、胸腹水细胞学及宫颈液基细胞学的辅助诊断,收集液基细胞学剩余标本制备成细胞块能提供更多的诊断信息,提高液基细胞学诊断准确性[3,4]。随着ECT检查的临床推广,收集液基细胞学剩余标本制备成高质量的细胞块,对提高子宫内膜癌的早期筛查和诊断具有重要意义。现就子宫内膜细胞块制备、细胞块优缺点和诊断局限性、液基细胞学和细胞块联合用于子宫内膜癌筛查和早期诊断中的作用进行讨论。
1子宫内膜细胞块制备
制备高质量蜡 块是进行 准确诊断 的基本前 提。 由于细胞学获取的标本量较少且多为脱落细胞,细胞块制备的主要过程是充分离心标本使其聚集,固定后常规脱水,透明,浸蜡,包埋后切 片行HE染色后观 察。传统细胞块制备主要有直接离心法,试管包埋法以及细胞骨架介质包埋法等。细胞骨架介质有琼脂、 凝血酶、蛋清、细胞胶等[5,6]。
子宫内膜上皮由腺体和间质组成,腺体形态和腺体与间质之间的比例是组织病理学中子宫内膜病变的重要诊断 依据,因此制备 高质量的 子宫内膜 细胞块,关键在于保证离心过程中的速度和离心力不能破坏子宫内膜腺 体形态,还要使破 碎的组织 聚集在一 起,便于阅片观察。通过比较直接离心法、琼脂细胞块和凝血酶细 胞块法,以预凝固 蛋清制备 细胞块最 优。预凝固蛋清沉淀法改进了传统的蛋清细胞块制备法,主要体现在两点:蛋清经0.9%氯化钠液稀释, 预先用70%~80%乙醇凝固,蛋清浓度适宜,乙醇、二甲苯等物质容易穿透;两步离心使子宫内膜标本与蛋清分层,立埋后切片有助于阅片,特别是分层沉淀减少蛋清造成的免疫组织化学背景中非特异性染色。
2子宫内膜细胞块的优点和局限性
2.1子宫内膜细胞块的优点子宫内膜细胞块最显著的优点在于提高液基细胞学的诊断准确性[7]。杨曦等[8]报道,联合3家医院单独使用ECT评估子宫内膜癌及癌前病变的准确性为88.2%,敏感度(Se)为87.3%,特异度(Sp)为88.3%,阳性预测值(PPV)为41.9%,阴性预测值 (NPV)为98.6%。Manini等[9]结合了子宫内膜液基细胞学涂片形态学和剩余标本细胞块中的微组织结构进行评价,其结果与组织病理学相比诊断符合率为93%,诊断不典型增生和子宫内膜癌Se和Sp分别为87%和96%,PPV和NPV分别为92%和90%。Kyroudi等[10]将液基细胞学剩余标本经反向滤过沉淀后制备成细胞块,将良性或萎缩性子宫内膜和 子宫内膜 癌的诊断 准确性分 别提高到96.3%和100%,子宫内膜增生不伴不典型增生和子宫内膜不典型增生的准确性分别提高到96%和95.3%。
无论是子宫内膜还是其他标本细胞免疫组化并未广泛开展,是因为液 基细胞学 提供的涂 片比较有 限,涂片不易长期保存,细胞组化技术不稳定、标本易脱片、不易判读等不利因素难以解决。细胞块经石蜡包埋后类似组织块,可以连续切片永久性保存标本, 为后续的分子 生物学检 查如免疫 组化染色、提取DNA测序、激光捕获 显微切割 等提供足 量的标本。 Di Lorito等[11]研究提取了细胞学与剩余细胞块标本中的DNA进行测序,证实细胞学标本与剩余细胞块中PI3K突变是一致的。
2.2子宫内膜细胞块的局限性子宫内膜细胞块依然还存在一些局限性,首先其收集的是液基细胞学剩余标本,因此标本量少,特别是绝经后女性体内雌激素下降使子宫内膜变薄,获取的标本往往仅能满足液基细胞学制片。由于卵巢去势,子宫内膜失去激素作用,细胞萎缩变小、间质纤维化,液基细胞学涂片中观察的子宫内膜细胞形态单一,如果发生异型性其形态学表现明显,此时即使细胞块制备不成功,液基细胞学涂片即可满足诊断需要;其次相较于液基细胞学制片,子宫内膜细胞 块的制备 过程繁琐,经历脱水、透明、浸蜡等步骤容易造成细胞的丢失。目前,自动化的细胞块制备设备已用于宫颈细胞学,因此,在不久的将来,繁琐的制备过程也可能得到解决。
3液基细胞学和细胞块联合用于子宫内膜癌筛查和早期诊断中的作用
3.1子宫内膜细胞块标本评估与诊断分级在对子宫内膜状态进行正确诊断之前,首先要对细胞块标本中的标本量进行评估。充足的标本量是获得正确诊断的必要前提。细胞块中的标本量与门诊子宫内膜活检术获取的标本量一样比较少,甚至没有子宫内膜组织。研究证实通过对绝经后女性活检标本的评估发现,B超检查提示子宫内膜无局限性病变时,标本中细胞量少是正常的,且漏诊子宫内膜相关病变的机会也很低,这样的观点同样也适用于对细胞块标本量的评估中[12]。
由于子宫内膜细胞块中标本量的局限性,对子宫内膜病变的诊断应更谨慎,采用的术语依然仅分为四级:正常子宫内膜、子宫内膜良性增生、子宫内膜不典型增生和可疑癌,采用的诊断标准参考子宫内膜组织病理学。正常子宫内膜中包括增殖期、分泌期、萎缩状态和月经期,如果细胞块标本量充分,可以根据各期的腺体中上皮细胞形态和间质细胞特点,进行准确地分期。细胞块比液基细胞学可以更容易诊断子宫内膜良性增生中不规则增生、单纯性和复杂性增生, 主要根据细胞块中腺体的形态和腺体与间质比例来诊断。细胞块结合液基细胞学诊断子宫内膜不典型增生和子宫内膜癌可以有效地互补,液基细胞学可以更清楚地显示细胞异型性,细胞块可以提供腺体异型性的表现。
3.2子宫内膜细胞块诊断子宫内膜癌的优越性子宫内膜细胞块可以明显提高液基细胞学中子宫内膜不典型增生和子宫内膜癌的诊断准确度和敏感度,主要表现在两点,其一,细胞块可以用于鉴别液基细胞学中子宫内膜嗜酸性化生和乳头状化生与子宫内膜不典型增生和子宫内膜癌中异型细胞群落;其二,细胞块可以用于鉴别液基细胞学中子宫内膜良性增生和高分化子宫内膜癌。
3.2.1鉴别化生与异型细胞群落一直以来,子宫内膜生理多态性是导致ECT判读困难的主要原因。 子宫内膜化生特征性改变是细胞排列异常和细胞浆改变,细胞不出现异型性,化生可出现在子宫内膜良性增生、功能失调性出血、子宫内膜不典型增生和子宫内膜癌等病变中。液基细胞学涂片中,子宫内膜化生和子宫内膜癌均表现为细胞失去规则的排列,细胞重叠使染色加深,难以观察到细胞形态从而不易判断细胞异型性(见图1A、1B)。制备成细胞块后,子宫内膜化生特别是乳头状化生和嗜酸性化生的形态显而易见(见图1C),与异型细胞鉴别,有助于子宫内膜良性增生与不典型增生和癌的诊断。
3.2.2鉴别良性增生与高分化子宫内膜癌将子宫内膜组织病理学诊断标准应用于细胞块时,细胞块比液基细胞学在鉴别子宫内膜良性增生与不典型增生和Ⅰ型高分化子宫内膜癌的诊断中显示出更明显的优越性。在子宫内膜细胞学中,细胞群落被认为间接反映了腺体的结构,Norimatsu等[13]提出将细胞群落形态特点纳入子宫内膜细胞学诊断标准中,结合细胞异型性可以提高诊断准确性。子宫内膜不典型增生标本中细胞群 落改变和 细胞异型 性不明显 时 (见图2A、2B)难以与子宫内膜良性增生鉴别。因为细胞群落可以是整个腺体,也可能来自腺体的一部分。细胞块保存了腺体的完整形态,能清晰地见到腺体之间及与间质细胞关系和比例,通过对比腺体间的上皮细胞异型性(见图2C)来综合判断。
液基细胞学早期筛查出子宫内膜癌时,除了观察细胞块中腺体和细胞异型性给出更准确的诊断。细胞块行免疫组化染色有助于肿瘤的分类,早期子宫内膜癌的组织学分型,预测恶性肿瘤的预后,为临床早期制定综合的治疗方案提供可靠依据。在子宫内膜癌病例细胞块标本中行P53、PTEN和Ki-67免疫组化染色均取得了良好效果。
综上所述,细胞块在子宫内膜癌筛查和早期诊断中的作用是在液基细胞学与组织病理学之间架起一座桥梁。液基细胞学制备效率高,阴性预测值较好, 液基细胞学涂片用于大规模高危人群的初筛后,收集阳性病例的标本制备成细胞块,可以提高高危因素人群子宫内膜癌的早期诊断和筛查效率。细胞块行免疫组化染色有助于子宫内膜癌的早期诊断和预后判断,为子宫内膜癌患者制定合理的治疗方案提供早期依据。
宫颈癌和子宫内膜癌 篇2
时间：2013、12、6、15：30 地点：示教室 主持人：护理部主任 主查人：高素丽
参加人员：妇科全体护理人员
高素丽：子宫内膜癌是女性生殖器三大恶性肿瘤之一，约占女性癌症总数的7%，近年来其发病率有上升趋势，与宫颈癌相比已趋于接近甚至超过。为全面掌握子宫内膜癌相关知识，更好地做好预防及护理工作，今天我们针对9床病人于春梅进行子宫内膜癌护理查房，希望大家积极发言。首先由责任护士汇报病例。
刘殷华：病情介绍
患者于春梅、女、41岁，因经量增多伴渐进性痛经2年，于10月31来我院就诊，11月2日于门诊行诊断性刮宫，病理结果示高分化子宫内膜样腺癌，门诊以子宫内膜癌于2013年11月4日08：00收入院。入院后给二级护理，普通饮食，完善查体，口服消炎药物。11月5日，预约盆腔MRI。11月6日，做盆腔MRI。
11月7日，盆腔磁共振示：符合子宫内膜占位表现，盆腔积液。各项检查未见明显手术禁忌症，具有手术指征，拟明日手术。做好术前准备，详细交代注意事项。11月8日08:00 患者在全麻下行经腹子宫全切术+双侧附件切除术+盆腔淋巴结清扫术，于12:40返回病房，术后给一级护理，禁饮食，消炎补液治疗。护理措施：平卧位，持续吸氧6小时，流量3L/min通畅；持续血氧脉搏心电监护6小时，生命体征平稳；持续导尿接无菌引流袋通畅，持续经阴腹腔引流管接无菌引流袋通畅，妥善固定；腹部加压砂袋；指导家属协助患者床上活动双下肢。
11月9日 改流质饮食，14：00停导尿患者自行排尿顺畅。
11月10日 患者停输液治疗，给予口服消炎补血药物。
11月11日 改二级护理，患者肛门已排气，改半流质。11月16日 患者已排便，改普通饮食。
11月21日 患者述无不适，刀口甲级愈合，给予拆线，通知出院。
高素丽：我们已经详细了解了病人的诊疗经过，下面再来复习一下子宫内膜癌的相关理论知识。首先，由迟艳斐来告诉大家什么是子宫内膜癌？
迟艳斐：定义
子宫内膜癌是指原发于子宫内膜的癌，以腺癌为主，又称子宫体癌。多见于老年妇女，是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一。
高素丽：由邢莉敏讲一下子宫内膜癌的病因：
1．长期持续的雌激素刺激
内源性雌激素 ： 多囊卵巢综合征
卵巢女性化肿瘤
无排卵性功血等
外源性雌激素 ： 围绝经期或绝经期激素治疗 2.体质因素：内膜癌易发生在未婚、未育、少育、肥胖、绝经延迟、高血压、糖尿病、及其他心血管病的患者。3.遗传因素：约20%内膜癌有家族史。高素丽：我们来看一下该病的病理类型。
病变多发生于子宫底部的内膜，以及双侧子宫角附近多见，其次为子宫后壁。
就病变的形态和范围分以下2种：
1.局限型 癌灶局限于宫腔的某部分，多见于宫底或宫角部，呈息肉或小菜花状，为坚实灰白色，易侵犯肌层。早期病变较小，诊断性刮宫可将癌灶刮干净，晚期扩散于整个宫腔。
2.弥漫型 子宫内膜大部或全部为癌组织侵犯，病灶呈不规则菜花样物突出宫腔，为灰白 色或淡黄色，表面有出血、坏死，有时形成溃疡。较少侵及肌层。晚期可肌壁全层，并扩展至宫颈管，一旦癌灶阻塞宫颈管导致宫腔积脓。显微镜检（1）内膜样腺癌
约占80%--90%，内膜腺体高度异常增生，上皮层，细胞核异型明显，核大、深染，有核分裂相。
根据腺癌细胞分化程度分为三级
Ⅰ级——高分化腺癌
Ⅱ级——中度分化腺癌 Ⅲ级——低分化腺癌（2）浆液性腺癌
（3）透明细胞癌
（4）粘液性腺癌
高素丽：那么该病是经过哪些途径转移的呢？谁来讲一下？ 邢丽敏：转移途径它包括---直接蔓延，淋巴转移，血行转移 高素丽：由于这个病人的病情发现的比较及时，所以还没有发生转移，我们来看看子宫内膜癌的临床表现。
隋晓琳：我来说一下，该病的临床表现包括以下几点。
1．症状
（1）阴道流血：不规则阴道流血为最常见症状。绝经后阴道持续或间歇性流血；未绝经者，月经增多，经期延长或经间期出血。（2）阴道排液：早期多为浆液性或浆液血性排液，晚期合并
感染，则有脓性或脓血性排液，有恶臭。
（3）疼痛：晚期癌瘤浸润周围组织，或压迫神经时，可引起
下腹及腰骶部疼痛。并向下肢及足部放射
（4）全身症状：晚期可出现全身衰竭、贫血等
2.体征
早期无明显异常。晚期子宫增大、质软；晚期偶见癌组织自宫口脱出，质脆，触之易出血；合并宫腔积脓，子宫明显增大，极软。癌灶向周围浸润，子宫固定，在宫旁或盆腔内可扪及不规则结节样物。
高素丽：这个病人的临床表现是，月经量增多伴渐进性痛经2年。体征是子宫增大如孕2月大小，质稍软，活动好，无压痛。
高素丽：该病的辅助检查，我们简单来了解一下。
1.分段诊断性刮宫：是主要的确诊方法。
2.宫腔镜检查:诊刮阳性而病史有癌症可疑时，可行宫腔镜检查。
3.B超检查：见于子宫内膜癌的筛查。
高素丽：经过对疾病相关知识的学习，我们现在对该病有了一定的了解，那么它的处理原则有哪些？张晓鹏给大家介绍 一下。
张晓鹏：疾病处理原则。1.手术治疗
为首选方案，尤其是早期病例，可以治愈。这个病人就是手术治疗，恢复顺利。2.手术加放射治疗
适用于已有转移或可疑淋巴结转移者，可于术前或术后加用放射治疗，提高疗效。3.放射治疗 4.药物治疗
高素丽：我们再来了解一下该病的相关护理措施。冷虹虹：我来说一下。
术前准备
给予心理疏导，保证充足睡眠。
饮食指导：术前8小时禁食，术前4小时禁饮。
肠道准备：术前3天进无渣流质饮食，并遵医嘱
给予肠道制菌药，术前清洁灌肠。
阴道准备：术前一天行阴道冲洗，术日晨对 阴道，宫
颈，后穹隆消毒并做好标识。
皮肤准备：术前半小时备皮，范围—上至剑突下，下至
两侧大腿上1/3，包括外阴部，两侧至腋中
线。
其他护理：取下活动假牙，戴腕带，更衣，术前针，准 备麻醉床，备好吸氧装置和心电监护仪。术后护理
病房环境：病房舒适安静，为病人提供一个良好的休
息环境。
卧位指导:根据麻醉方式采取适宜的体位，持续氧气吸 入。
病情观察：持续心电监护，严密监测生命体征。
饮食指导：术后当日禁食，术后一日进流质饮食，肛门
排气后进半流质饮食，排便后进普通饮食。
刀口护理：注意敷料有无渗血渗液，报告手术医生。管路护理：尿管，腹腔引流管保持引流通畅，妥善固定，防滑脱。记录引流液量。术后病人每小时尿
量至少50ml以上。如有异常，及时通知医生处理。
功能锻炼：术后床上活动双下肢，预防静脉血栓形成。
鼓励患者早期下床活动，促进肠蠕动，避免 腹胀，促进肠功能早日恢复。
疼痛护理：做好心理护理，遵医嘱给药，控制疼痛，增进舒适。
高素丽：我们已全面了解了子宫内膜癌的相关知识，现在针对这个病人具体情况，提出相关的护理问题，并制定相应的的护理措施。
张晓鹏：我来说一下她首先需要解决的护理问题。焦虑、恐惧：与住院环境陌生及接受的诊治手段、担心手术效果、术后早衰影响夫妻关系有关。护理措施：
1.热情地向病人做好入院宣教，消除对环境的陌生感。2.提供一个安静舒适的环境，保证充足睡眠。
3.做好心理护理：用肯定的语气说明面临手术有紧张心
理是正常的，解释手术治疗的必要性。4.介绍手术医生的技术及以往手术的成功率。
5.讲解麻醉的效果，术中不会有明显的疼痛；说明术后疼痛的程度、持续时间及应对措施；
6.耐心解答病人各种疑问，关心、鼓励、支持病人，为其提供术后有关性生活的资料。
经以上护理后，病人增强信心，勇敢地接受手术治疗。
修文文：病人现存的护理问题还有：
知识缺乏：与缺乏关于子宫内膜癌术前准备、术后功能锻炼等知识有关。护理措施：
1.通过各种渠道向病人介绍疾病的相关知识及预后。2.详细介绍术前准备目的，及其重要性。
3.详细介绍术后应注意和配合的事项如：术后需做深呼吸、咳嗽、翻身和床上活动双下肢，预防下肢静脉血栓、促进肠蠕动，增进食欲、预防坠积性肺炎等。4.讲解术后恶心呕吐，与麻醉有关。
5.讲解各种引流管留置的目的及注意事项，保持引流通畅。
经以上指导术前病人能示范术后功能锻炼、呼吸控制等活动技巧。术后病人能做好相关功能锻炼。刘殷华：活动无耐力: 与手术创伤、术后进食少有关
护理措施
1.与病人共同评估进食、入厕等基本活动的耐力，并具体制定相关措施。
2.根据肠功能恢复情况，制定饮食计划，逐渐增加营养的摄入。如：手术当日禁饮食，术后一日进流质饮食，肛门排气后进半流质饮食，排便后进普通饮食。遵循少食多餐，由少到多，由稀到厚的原则，逐渐增加营养摄入。达到机体需要量。3.宣教适量活动的好处。
4.根据其耐受力与病人共同制订渐进式活动计划；
5.视需要提供有关协助。
措施落实后，病人明白了活动的好处并能积极按计划进行，4d后生活基本能自理，并无明显的头晕、乏力症状。邢莉敏：病人现存的护理问题还有：
疼痛：与出血的瘀积，刺激子宫不规则收缩而引起阵发
性疼痛有关。与术后刀口疼痛有关。
护理措施
1.做好心理护理：耐心倾听病人的诉说，并对其疼痛不适表示理解，每日评估其情绪状态和疼痛的程度，作出处理。
2.与病人共同探讨疼痛发作的诱因及规律性，说明疼痛与 情绪状态有关，保持稳定情绪。
3.列举以往治疗成功的类似病例，以增加其治疗信心，勇
敢面对，积极配合。
4.术后留置镇痛泵，会缓解疼痛。术后24小时疼痛会逐
渐缓解。必要时遵医嘱应用镇痛药物，缓解疼痛。患者能积极应对疼痛、增进舒适。
冷虹虹 腹胀：与术中肠管受到激惹使肠蠕动减弱有关。
护理措施
1.术前三天予无渣半流质饮食，术前晚和术日晨行清洁灌肠，使肠道处于空虚状态。
2.术后六小时床上翻身活动，24小时下床活动，促进肠蠕动恢复。
3.肛门排气前，禁食牛奶、豆浆、糖等产气食物。
4.如果术后48小时肠蠕动仍未恢复，可热敷下腹部，或针刺足三里，或遵医嘱皮下注射新斯的明、肛管排气等。系缺钾引起者积极补钾。经积极采取预防措施，病人无明显腹胀。
高素丽：以上都是病人现存的护理问题，她还有哪些潜存的护理问题呢？
修文文：有感染的危险:与长期阴道流血、留置引流管、尿管有关。护理措施：
1.保持会阴部清洁干燥，勤换内裤。2.术前做好会阴冲洗，预防阴道残端感染。3.每日会阴擦洗两次，预防上行感染。
4.术后做好引流管护理，妥善固定经阴腹腔引流管及导尿管，保持通畅，引流袋低于引流口平面，鼓励患者多饮水，防止逆行感染。5.遵医嘱适当应用抗菌素。病人无感染发生。
修文文：病人还有一个潜在的护理问题是：伤口血肿、感染、裂开
护理措施
1.加强观察，保持刀口敷料清洁干燥，如有渗血渗液及时更换。
2.重视病人的主诉，发现刀口异常及时通知医师处理。病人刀口恢复良好，如期拆线。
高素丽：患者康复出院，需要做哪些出院指导，隋晓琳说一下。隋晓琳：1.注意休息，加强营养，预防感染。禁性生活3个月。
2.出院1月后门诊复查。3.不适随诊,做好随访。
4.随访时间: 术后 3年内，每3个月 1次
术后3~5年，每6个月 1次
术后5年后，每年1次 5.随访内容: 妇科三合诊检查
阴道细胞学涂片检查
胸片（6个月至1年）
晚期者，可进行CA
5检查，也可行CT、MRI等。
子宫内膜癌重在预防 篇3
子宫内膜癌的病因尚不明确，其发病的高危因素主要有：
一是与雌激素的长期刺激有关，如不孕、多囊卵巢综合征、卵巢肿瘤等，因体内雌激素水平高，容易患此病。二是与患代谢紊乱性疾病有关，如过度肥胖、高血压病、糖尿病患者子宫内膜癌明显高发。三是与遗传因素有关，约20％子宫内膜癌患者，其近亲有家族肿瘤史。
子宫内膜癌常见的症状是不规则阴道流血或少量阴道分泌物，可伴有疼痛和一种收缩的感觉，最常见的是围绝经期的不规则阴道流血和绝经后的阴道流血；晚期可因癌浸润而引起腹部、腰骶部甚至下肢疼痛；合并感染时可出现阴道排出脓性分泌物，也可伴有贫血、恶病质等全身症状。因此，当出现阴道不规则出血和分泌物时，尤其是绝经后的出血，应提高警惕。
子宫内膜癌的防治关键在于早期发现、早期治疗。对于老年妇女不规则阴道出血或绝经后阴道出血，需到医院做必要的检查，可早期发现子宫内膜癌或癌前病变。一旦发现应及时治疗，治愈率高。
及早预防子宫内膜癌要注意以下几点：
（1） 切莫滥用雌激素，否则不仅不能治病，反而埋下了病因；
（2） 要保持良好的生活习惯，饮食要注意低胆固醇，要保持正常体重；
（3） 重视围绝经期的月经改变，绝经后阴道出血、排液，立刻就医莫迟疑；
宫颈癌和子宫内膜癌 篇4
1 资料和方法
1.1 一般对象
标本来源选取佳木斯大学附属第一医院2007～2008年保存的完整石蜡标本96例, 其中正常子宫内膜25例, 子宫内膜不典型增生15例和子宫内膜癌56例, 年龄27～89岁, 平均57岁。56例子宫内膜癌高分化腺癌39例、中分化腺癌11例、低分化腺癌6例;按FIGO (1988年) 标准进行临床分期, 其中Ⅰ期40例, Ⅱ期13例, Ⅲ期3例。病人术前均未行放疗或化疗。由病理科医生切片, 行HE染色及免疫组化染色进行对照。
1.2 方法
本组采用S-P免疫组织化学方法, 检测试剂盒由福州迈新生物技术司产品提供, 标本用10%甲醛固定, 常规石蜡包埋, 4μm连续切片, 检测Bcl-2和Cox-2在子宫内膜癌、正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生中的表达, 用已知阳性切片做阳性对照。用PBS代替一抗作阴性对照, DAB显色, 苏木素复染。
1.3 免疫组织化学染色的结果判定
Cox-2及Bcl-2蛋白阳性表达为棕黄色颗粒, 主要存在于细胞浆。参照免疫组织化学免疫反应评分 (mmunoreactive scroe, IRS) 推荐标准, 结合染色强度进行评分评定:基本不着色为0分, 浅黄色为1分, 棕黄色为2分, 棕褐色为3分;着色细胞占计数细胞百分率:≤5%为0分, 6%～25%为1分, 26%～50%为2分, 50%～75%为3分, >75%为4分。将每张切片染色以两者乘积为最后得分:0分为阴性 (一) , 1～3分为弱阳性 (十) , 4～6分为阳性 (++) , 7～9分为强阳性 (+++) 。
1.4 统计学分析
应用SPSS统计软件进行数据处理, 采用卡方检验。
2 结果
2.1 Cox-2、Bcl-2在不同类型子宫内膜组织中的表达
Cox-2的阳性表达率在正常子宫内膜中为12%, 不典型增生中为40%内膜癌中为69.64%, 三组间有统计学差异 (P<0.05) 。组间比较, Cox-2在正常内膜组和内膜癌组间的表达差异具有统计学意义 (P<0.05) 。
Bcl-2的阳性表达率在正常子宫内膜中为96%, 不典型增生中为73.33%, 内膜癌中为44.64%, 三组间的差异具有统计学意义 (P<0.05) 。组间比较, 与Cox-2相似, 在正常内膜组和内膜癌组间的表达差异具有统计学意义 (P<0.05) 。
2.2 Cox-2、Bcl-2蛋白在不同子宫内膜癌组织中的表达
Cox-2在高中分化内膜癌组中表达强度明显低于低分化组 (P<0.05) 。在临床分期中, Cox-2在G1 (61.54%) 、G2～G3 (88.24%) 期中的表达强度差异有显著性 (P<0.05) ;在肌层浸润程度中, 无或≤1/2阳性率42.85%, >1/2阳性率71.42%, Cox-2表达差异有显著性 (P<0.05) 。随组织学分级的增加、肌层浸润程度的加深, Cox-2阳性率呈上升趋势。Bcl-2子宫内膜癌组阳性率 (44.64%) 均明显低于非典型增生子宫内膜组 (73.33%) 和正常子宫内膜组 (96%) (P<0.05) 。Bcl-2在高中分化内膜癌组 (53.84%) 中表达强度明显高于低分化组 (23.52%) (P<0.05) 。在淋巴结转移 (阴性52.27%, 阳性16.67%) (P<0.05) , 肌层浸润程度中, 无或≤1/2阳性率62.86%, >1/2阳性率%33.33% Bcl-2表达有显著性差异 (P<0.05) 。Bcl-2随组织学分级的增加、肌层浸润程度的加深及淋巴结转移, 强阳性率则逐渐降低, 经检验差异具有显著性 (P<0.05) 。子宫内膜癌中Bcl-2与Cox-2表达有相关性 (P<0.05) 。
3 讨论
环氧化酶 (Cyclooxygenase, Cox) 是前列腺素合成过程中的重要限速酶, 催化花生四烯酸合成PGH。哺乳动物至少有两种同工酶:Cox-1和Cox-2;在人两者大约有60%同源, 有催化活性的氨基酸位点高度保守[1]。Cox-1是结构型表达蛋白, 维持正常的生理功能;而Cox-2是可诱导型蛋白, 定位于核膜与内质网, 且在核膜的表达强于内质网, 尚见于核内[2], 在多种癌前病变及恶性肿瘤组织中高表达[3]。本研究用发现正常增生内膜、不典型增生内膜和内膜癌中Cox-2阳性率分别为12%, 40%及69.64%, 差异高度显著 (P<0.05) , Cox-2的表达与肌层浸润深度有关, 与子宫内膜癌的分化程度关系密切 (P<0.05, P<0.05) 。本研究初步表明Cox-2在内膜腺癌发生的早期开始表达, 在进展期持续存在, Cox-2高表达提示肿瘤恶性程度高, 预后差, 同时Cox-2有可能成为一个新的肿瘤治疗的靶点。 Bcl-2首先在B细胞相关的恶性肿瘤中发现[4]。Bcl-2基因及其产物不仅存在于B细胞及T细胞中, 也出现在一些正常上皮细胞中[5,6]。本研究结果显示:随着组织学分级的增加, Bcl-2的阳性表达显著下降, 且统计学上有意义 (P<0.05) , 与淋巴结转移有相关性 (P<0.05) ;随着肌层浸润深度增加, Bcl-2的阳性表达显著下降, 且统计学上有意义 (P<0.05) , 与他们结果不一样。因此认为Bcl-2蛋白表达与子宫内膜癌的某些病理学特征及生物学行为有关。
研究表明Cox-2诱导Bcl-2表达增高, Bcl-2介导通路可能是Cox-2防止凋亡中下游信号通路之一。本实验结果, CO-2蛋白表达与Bcl-2正相关。Cox-2的表达增高可能诱导Bcl-2表达, 二者协同作用共同促进子宫内膜癌的增殖并抑制凋亡, 从而促进子宫内膜癌的发生。
参考文献
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患了子宫内膜癌能保留子宫吗 篇5
我今年28岁,1个月前被确诊患了子宫内膜癌,医生建议我进行全子宫切除手术。我还没有生育,非常想保留子宫。请问,像我这样的情况还能保留子宫吗?
山西 刘湘
刘湘读者:
子宫内膜癌又叫子宫体癌,是发生于子宫内膜的恶性肿瘤。随着病情的进展,这种肿瘤会逐渐侵袭子宫的肌层。一般来讲,子宫内膜癌绝大多数为腺癌,这种类型的癌症对放射治疗不敏感。所以,大多数此病患者均应进行全子宫切除手术,同时进行放疗、化疗及服药等治疗。子宫内膜癌患者若想保留子宫,必须具备一些特殊条件,这些条件包括:①经做病理检查,其子宫内膜癌为高分化癌。②肿瘤细胞尚未浸润子宫肌层。③患者年龄较轻、未生育过,且愿意配合医生进行长期随访。
对于想保留子宫的此病患者,临床上通常采取以下方法进行治疗:
1.应用大剂量的孕激素进行治疗。治疗此病应用孕激素的剂量相当于避孕所用孕激素剂量的100倍以上。此病患者在治疗三个月后应进行子宫内膜活检。如果检查结果显示病情有所好转,应继续使用上述方法治疗三个月。随后,此病患者可采用助孕措施(如试管婴儿等)进行生育。
2.如果此病患者应用大剂量的孕激素治疗三个月后,其子宫内膜活检的结果显示病情没有变化,则需继续使用上述方法治疗三个月,然后进行第二次子宫内膜活检。若第二次子宫内膜活检的结果显示病情有所好转,则可以继续应用大剂量的孕激素治疗三个月,随后进行第三次子宫内膜活检。此时,若检查结果显示子宫内膜仍没有转化成正常的状态,则应该立即放弃保留子宫的想法,进行全子宫切除手术。若检查结果显示其子宫内膜已经转化为正常,则可采取助孕措施。
3.此病患者在应用孕激素治疗三个月后,若病情继续恶化,应立即放弃保留子宫的想法,实行全子宫切除手术。
宫颈癌和子宫内膜癌 篇6
HCG是一种糖蛋白,由胎盘滋养层细胞分泌,由α和β二聚体糖蛋白组成,合体滋养细胞合成,分子量为36 700的糖蛋白激素。β-亚单位是HCG所特异的;α-亚单位为垂体前叶激素所共有。完整的HCG全部由胎盘绒毛膜合体滋养层产生,主要功能为刺激黄体,有利于黄体酮和雌激素的持续分泌,促进子宫蜕膜形成,促使胎盘生长成熟。内分泌疾病中,如脑垂体病变、甲状腺功能亢进、卵巢囊肿、子宫癌等HCG也有增高;近年来发现畸胎瘤、胰腺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、肺癌等患者HCG也有升高。因此可以将HCG看作是肿瘤标志物之一。
CA125是由Bast等1983年从上皮性卵巢癌抗原检测出的一种糖蛋白,可以被单克隆抗体OC125结合,来源于胚胎发育期体腔上皮,在正常上皮组织中不存在,因此最常见于上皮性肿瘤(浆液性肿瘤)患者的血清中,其敏感性较高,特异性差,黏液性肿瘤中不存在。是一种高分子糖蛋白,相对分子量20万~100万,外形呈环形结构,24%为糖类,是一种类黏蛋白的糖蛋白复合物,属IgG。健康成人CA125的浓度<35U/ml。
本研究经对>55岁的老年子宫内膜癌妇女血清HCG和CA125进行联合检测,以探讨其对子宫内膜癌早期诊断的意义,为子宫内膜癌的早期发现、早期诊断提供参考。
1 资料和方法
1.1 一般资料选取我院就诊的55~85岁中老年子宫内膜癌患者187例作为试验组,中位年龄63岁,均为临床疑诊为子宫内膜癌病变,要求检测妇科肿瘤标志物患者。
对照组另选取我院门诊健康体检者86例作为对照组,年龄20~40岁,无心、肝、肾、肺等其它系统病病。
1.2 研究方法
1.2.1 采集标本:
待检者于清晨、空腹状态,从肘静脉抽取静脉血4ml,置干燥真空管中,自然常温下放置20~30min,待血清自然析出,然后放于离心机,以4 000转/min分离血清。取分离出的血清上机行测试。
1.2.2 血清HCG和CA125测定:
βHCG、CA125试剂及标准品(荧光磁微粒酶免法)均由TOSOH公司生产,按说明书手册操作,于TOSOH公司AIA-2000仪器上进行测定。
1.3 统计学方法使用SPSS 19.0统计软件。计量资料以±s表示,组间比较采用t检验;计数资料以率(%)表示,组间比较采用χ2检验。以P<0.05为有差异有统计学意义。
2 结果
与对照组比较,试验组血清HCG和CA125含量明显增高(P<0.05)。见表1。
注:与对照组比较,P<0.05
3 讨论
子宫内膜癌为一种常见的妇科肿瘤,发病率仅次于卵巢癌和宫颈癌。子宫内膜癌主要以子宫内膜腺体腺癌为主,腺体大量增生,并形成筛状结构,分化较差的腺癌腺体结构消失,最终发展为实质性肿瘤,预后较差。子宫内膜癌早期症状不明显,多伴有持续性或间断性阴道出血,阴道排出血性液体或者浆液性分泌物,患者晚期其肿瘤细胞发生浸润致压迫神经引起疼痛等症状。子宫内膜癌患者转移途径多见淋巴转移和直接蔓延,晚期则以血液转移为主。原发癌细胞可以直接扩散到临近器官与组织;淋巴结转移途径主要有以下几种:(1)宫底肿瘤可通过输卵管淋巴结转移到腹主动脉淋巴结;(2)子宫下段癌细胞经宫旁淋巴结扩散至髂前淋巴结;(3)宫角处癌细胞转移至腹股沟深、浅淋巴结;(4)子宫后下方的肿瘤由骶骨韧带旁淋巴结、直肠旁淋巴结扩散到骶前淋巴结。
HCG由237个氨基酸组成,结构中包括α和β两个非共价键结合的亚基,血中半衰期为12~36h。HCG参与胚胎生长发育的过程,使细胞生长、促进血管生成利于着床,而且许多恶性肿瘤亦有着HCG的异位自分泌,导致血中HCG升高。故血清HCG对诊断滋养层细胞肿瘤、疗效观察和预后判断有着重要意义;诊断异位HCG肿瘤也具有重要的意义。
CA125为一种表面抗原,来源于体腔上皮细胞,是高分子糖蛋白,可存在苗勒氏管上皮、间皮系统、女性生殖系统黏膜(输卵管内膜、子宫内膜、宫颈内膜)等,含量甚微,当这些部位受到炎性刺激或发生癌变时,其血清含量明显增高[4,5,6,7]。临床诊断子宫内膜癌常使用CA125进行辅助检测,对于分期较差的子宫内膜癌患者CA125检出率高达60%,具有良好的诊断价值。糖脂类或糖蛋白是细胞膜重要组成成分,在细胞信息传递、代谢和分化中起重大作用。当细胞癌变时,正常的糖基转化酶失活,而在胚胎期活跃、成熟期趋于静止的转化酶被激活,引起细胞表面的糖类结构发生变化,形成糖类抗原。这种由正常细胞表面糖脂类或糖蛋白异生而来,表示恶性肿瘤存在。在子宫内膜癌患者血清CA125含量可见明显增高[18,19,20]。研究对2组女性爱检者进行血清HCG和CA125联合检测,发现55~85岁中老年女性血清HCG和CA125略增高明显高于20~40岁青壮年女性。
综上所述,HCG的检测可提前发现子宫内膜的异常情况,而CA125检测则可提示子宫恶性肿瘤的存在,二者联合检测可以预防及提早发现子宫内膜病变及肿瘤,重视高危因素、重视高危患者,为提高子宫内膜癌确诊率与五年生存率提供一定的根据。
摘要：目的 探讨联合血清HCG和CA125检测对子宫内膜癌早期诊断的意义。方法 选取来院就诊的55~85岁中老年妇女187例,临床上疑诊断子宫内膜癌病变,要求检测妇科肿瘤标志物患者;以及86例20~40岁门诊健康体检者,采取血清进行HCG和CA125检测。结果 发现55~85岁的中老年女性HCG和CA125略增高明显高于20~40岁青壮年女性。结论 HCG和CA125联合检测能预防及早期发现子宫内膜癌,重视高危因素,重视高危患者,一定程度地提高子宫内膜癌的确诊率。
宫颈癌和子宫内膜癌 篇7
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取甘肃省人民医院2009年1月至2011年11月手术切除并经病理证实的子宫内膜癌的标本105例 (子宫内膜癌标本组) , 每例取癌旁正常组织作为对照组 (距离相应病灶区边缘0.5~5 cm, HE证实为正常子宫内膜组织) 。年龄30~82岁, 中位年龄62岁。患者术前未经任何化疗、放疗。对子宫内膜癌的组织学分类、病理分级以及TNM (tumor node metastasis) 分期均采用WHO 2002版。子宫内膜癌的组织学分类为子宫内膜腺癌、浆液性腺癌、黏液腺癌和透明细胞腺癌;病理分级分为高、中、低分化三级;TNM分期为0~Ⅳ期。手术切除标本立即转移至-80℃的液氮中保存待用。收集使用组织样本得到患者知情并同意, 并通过甘肃省人民医院伦理委员会的批准。
1.2 方法
1.2.1 分子生物学方法
1.2.1. 1 组织中总RNA的提取
取50~100 mg组织 (-80℃液氮中保存的组织) 置1.5 ml离心管中, 加入1 ml Trizol充分匀浆, 样本总体积不能超过使用Trizol体积的10%, 室温静置5分钟。操作步骤和结果分析参照试剂盒说明书进行。
逆转录-聚合酶链式反应 (RT-PCR) : (1) 将1μg总RNA加入离心管中温育10分钟, 短暂离心后置于冰上; (2) 建立20μl的反应体系 (反应体系根据试剂盒标准配置) ; (3) 将反应体系于42℃温育15分钟; (4) 将样品于95℃加热5分钟, 然后于0℃放置5分钟。 (5) 准备主混合物50μl (配制标准参照试剂盒) ; (6) 混合并离心PCR混合物; (7) 根据下列条件进行PCR反应:94℃变性样品5分钟, 循环30次 (94℃变性45秒、53℃退火1分钟、72℃延伸7分钟) , 72℃延伸7分钟。 (8) 扩增样品于4℃保存待用。
1.2.1. 2 Western blot
(1) 进行SDS-PAGE电泳。待指示剂刚好走出分离胶停止电泳; (2) 转模 (湿法) ; (3) 封闭:将滤膜放入3%BSA的PBST封闭液中, 4℃过夜; (4) 与一抗反应; (5) 洗涤; (6) 与二抗反应; (7) 洗涤; (8) 显色拍照。
1.2.2 免疫组织化学检测
所有标本经10%甲醛固定, 石蜡包埋, 石蜡标本集中连续切片, 片厚4μm, 采用SP免疫组化染色。一抗为鼠抗人PBRM1、P53多克隆抗体, 试剂盒均购自上海逸峰生物技术开发公司。试验步骤严格按照说明书进行。以PBS置换一抗作空白对照。
1.3 判断标准
1.3.1 RT-PCR
与阴性对照条带作比较, 只有当阴性对照中无表达才进行下一步分析。目的条带与Marker条带比较, 确定扩增条带大小, 初步判断目的扩增条带。通过相关软件分析扩增条带的限制性酶切位点, 选定相应的限制性内切酶。回收PCR产物, 进行酶切反应, 判定目的条带。
1.3.2 Western blot
根据Marker条带的大小分析显色条带是否与预计目的条带大小一致, 阴性对照无表达。并且膜的背景低、反差明显、条带清晰可见。
1.3.3 免疫组化
PBRM1蛋白阳性染色位于胞核[3], P53蛋白阳性染色定位于胞核/浆[4], 阳性细胞核均染成棕黄色。高倍镜 (×400) 下选10个有代表性的视野, 每个视野计数100个肿瘤细胞, 计算阳性细胞百分比。根据着色所占比例, 肿瘤细胞相应部位不着色为阴性 (0) ;PBRM1阳性细胞数<10% (+) 、10%~30%为 (++) 、>30%为 (+++) ;P53阳性细胞数<25%为 (+) 、25%~50%为 (++) 、50%以上为 (+++) 。
1.4 统计学处理
应用SPSS 11.5软件对数据进行统计学分析。采用χ2检验及秩相关法检测, P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 RT-PCR检测
对105例子宫内膜癌标本组进行RNA提取, 然后进行RT-PCR扩增, 其中PBRM1mRNA表达阳性75例、P53 mRNA表达阳性86例, 阳性率分别为71.43%、81.90%。对照组PBRM1 mR-NA表达阳性30例、P53 mRNA表达阳性19例, 阳性率分别为28.57%、18.10%。子宫内膜癌标本组RBRM1 mRNA、P53 mRNA阳性率均高于对照组, 差异均有统计学意义 (P<0.01) 。见图1、图2。
1:阳性对照条带;2:阴性对照条带:3~13样本 (PBRM1扩增条带)
1:阳性对照条带;2~11样本 (P53扩增条带)
2.2 Western blot检测
对PBRM1、P53蛋白进行Western blot检测, 子宫内膜癌标本组PBRM1相对表达量 (2.330±0.050) 与对照组 (1.078±0.144) 比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) ;子宫内膜癌标本组P53蛋白相对表达量 (3.090±0.660) 与对照组 (0.950±0.030) 比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。
2.3 免疫组化检测
2.3.1 PBRM1和P53蛋白表达
PBRM1蛋白阳性染色位于胞核, 呈棕色或棕褐色 (图3、图4) 。105例子宫内膜癌组织PBRM1蛋白表达阳性66例 (62.86%) , 对照组PBRM1蛋白表达阳性47例 (44.76%) , 两者间差异有统计学意义 (P<0.05) 。P53阳性染色定位于胞核/浆, 呈棕色或棕褐色 (图5、图6) 。105例子宫内膜癌中P53蛋白表达阳性49例 (46.67%) , 对照组P53蛋白阳性表达8例 (7.62%) , 两者间差异有统计学意义 (P<0.05) 。
2.3.2 子宫内膜癌不同组织类型PBRM1和P53蛋白表达
PBRM1蛋白在子宫内膜癌不同组织学类型中阳性表达率依次为:子宫内膜样腺癌81.40% (35/43) , 浆液性腺癌60.00% (18/30) , 黏液性腺癌52.63% (10/19) , 透明细胞腺癌23.08% (3/13) , 不同组织类型间表达差异有统计学意义 (P<0.01) 。P53蛋白阳性表达率依次为:子宫内膜腺癌25.58% (11/43) , 浆液性腺癌76.67% (23/30) , 黏液性腺癌52.63% (10/19) , 透明细胞腺癌38.46% (5/13) , 不同组织类型间表达差异有统计学意义 (P<0.05) 。PBRM1和P53蛋白表达与组织学类型有关。
2.3.3 子宫内膜癌组织PBRM1和P53蛋白表达与临床病理特征的关系
子宫内膜癌PBRM1和P53蛋白的表达与患者年龄无关 (P>0.05) ;与病理分级、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期相关 (P<0.05) 。见表1。
2.4 子宫内膜癌组织PBRM1和P53蛋白表达的相关性
105例子宫内膜癌组织标本中PBRM1和P53蛋白表达均阳性者36例, 二者表达均阴性者26例。PBRM1和P53蛋白表达呈正相关 (r=0.205, P<0.05) 。见表2。
3 讨论
近期文献报道, SWI/SNF染色质重构复合物基因———PBRM1基因与肾癌的发生和发展密切相关。[5]在人体中, PBRM1具有广泛的生物学作用, 参与DNA的修复、细胞增殖、细胞黏附等多种过程[6]。基因PBRM1在肿瘤的发生中扮演抑癌基因的角色[7]。在肿瘤细胞中PBRM1通过调节bcl-2家族及caspase家族基因表达水平调控凋亡。沉默PBRM1后细胞凋亡较少。对某些人而言, 该基因会在生命中某个阶段受到损害而失活, 最终导致癌的发生发展[8]。然而, 该基因损坏或关闭的确切原因尚不清楚。研究人员希望通过对PBRM1基因的鉴定和深入研究, 寻找到可有效治疗肿瘤的药物以及能在肿瘤早期识别突变基因的诊断方法。本研究发现, 在子宫内膜癌中PBRM1 mRNA表达阳性率达到71.43%。提示在子宫内膜癌PBRM1的表达较高, PBRM1 mRNA的高表达对子宫内膜癌的发生发展有一定的作用, 其作用机制有待进一步验证。在本实验中通过免疫组化检测其PBRM1蛋白表达在子宫内膜癌组织中显著高于癌旁组织, 并且PBRM1蛋白表达阳性率随肿瘤分化程度降低而逐渐增高。提示PBRM1蛋白表达增高可能与子宫内膜癌发生发展有关。因此认为, PBRM1可作为评估子宫内膜癌自然病程、恶性程度的一个指标。但由于本实验使用多克隆抗体, 特异性欠佳, 结果有待进一步验证。
抑癌基因P53定位于17号染色体短臂上, 编码P53蛋白, 由393个氨基酸组成, 野生型P53蛋白半衰期短, 一般组化法难以测得[9]。在DNA损伤时, P53蛋白增多, 诱导P21WAF1/CIP1的转录, 使细胞停滞在G1期, 阻止DNA合成, 同时诱导DNA修复基因GADD45的转录, 以便DNA的损伤得到修复[10]。P53基因突变后具有癌基因功能, 突变型P53蛋白半衰期延长。一般认为它可间接反映P53基因突变[11]。本研究发现P53在子宫内膜癌中高表达。另外通过免疫组织化学方法检测发现P53蛋白阳性表达与子宫内膜癌病理分级、临床分期有关。说明P53基因突变可能与子宫内膜癌发生发展关系密切。表明子宫内膜癌的发生可能为抑癌基因P53突变, 导致细胞增殖失控, 凋亡减少有关。
另外, 本研究发现, 子宫内膜癌组织中PBRM1和P53蛋白表达存在正相关, 提示PBRM1和P53在子宫内膜癌中具有协同作用, 两者表达对判断子宫内膜癌的发生及其临床参数可能具有重要价值。通过研究蛋白表达结合表型以及它们与临床参数之间的关系, 发现利用基因表型来预测子宫内膜癌的恶性性状和转移可能较单一指标更好。
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宫颈癌和子宫内膜癌 篇8
1 资料与方法
1.1 研究对象
选2009年6月～2010年8月于我院不孕症门诊就诊的排卵障碍的不孕症患者80例。年龄22～41岁,平均年龄(29.79±5.09)岁,不孕年限1～10年,平均不孕年限(3.94±2.34)年。月经周期25～34d,基础内分泌卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、泌乳素(PRL)及睪酮(T)均在正常范围,黄体中期血孕酮明显升高≥10 ng/ml,输卵管造影显示至少一侧输卵管通畅,B超及盆腔检查无异常发现。
1.2 方法
1.2.1 分组及治疗
将80例病例随机分为2组。对照组30例,月经第3天开始口服CC100mg/d,连续5日。实验组50例:月经第3天开始口服CC100mg/d,连续5日,月经第6天起每天口服PGV(补佳乐)lmg,其中23例子宫内膜发育良好,27例子宫内膜厚度未见明显增长,对这27例加大PGV剂量,最大可达4mg,至HCG日停药。2组患者均于月经第9天开始用B超连续监测卵泡发育子宫内膜厚度及形态,至少一个成熟卵泡直径≥18mm时为HCG日,同时尿LH试纸测LH峰。
1.2.2 B超监测
使用ALOKA ProSound SSD-3500彩色Doppler超声诊断仪及5.0MHZ的阴道探头,测定≥16mm的卵泡个数、内膜厚度、内膜类型。内膜厚度测定:沿中间矢状面显示子宫剖面,测量垂直于中线反射波的子宫前后肌层与内膜交界面的最大距离。内膜类型:阴道超声子宫内膜形态学分为A型、B型、C型[3]
1.2.3 宫颈黏液涂片
于月经周期10～16日取实验组和对照组两组病人的宫颈黏液,观察其黏稠程度和拉丝度并进行涂片,待黏液干燥后在显微镜下观察结晶状态。正常排卵期黏液量最大,含水量最高,延展性最大,故宫颈黏液稀薄、透明,拉丝度可达l0cm以上。常见的宫颈黏液结晶有4型:①Ⅰ型:典型羊齿植物叶状结晶,主梗直而粗,分支密而长;②Ⅱ型:较典型结晶,但主梗弯曲较软,分支少而短,犹如树枝着雪后的形态;③Ⅲ型:为不典型结晶,树枝形象模糊,分支少而疏,呈离散状;④Ⅳ型:主要为椭圆体或梭形物体。
1.3 统计学处理
本实验数据采用SPSS13.0 For Window软件进行统计学分析。以HCG日时子宫内膜厚度≥8mm,内膜形态A型为有效,对实验组和对照组的有效率进行双比例检验,对实验组子宫内膜厚度与PGV剂量进行相关性分析,以统计量P<0.05有统计学意义。
2 结果
2.1 子宫内膜发育情况
实验组子宫内膜厚度明显厚于对照组。对照组9例子宫内膜厚度≥8mm,有效率为30%,而实验组47例子宫内膜厚度≥8mm,有效率为94%。对两组的有效率进行双比例检验,统计量Z=7.10,P=0.00,P<0.05,差异有统计学意义。其中A型内膜比率在对照组、实验组分别为10%、56,P<0.05,差异有统计学意义。对照组A型内膜所占比例低,见表1。
2.2 子宫内膜厚度与PGV剂量的相关性分析
对实验组的子宫内膜厚度与口服PGV剂量进行相关性分析,Pearson相关系数=0.286,P值=0.044,P<0.05,可以认为子宫内膜厚度与PGV水平有相关关系。
2.3 宫颈黏液状态和结晶类型
连续观察宫颈黏液状态和结晶类型,对照组黏液拉丝度≥10cm的病人所占比例少于实验组,P=0.001<0.05,差异有统计学意义,对照组黏液黏稠度较高;I型结晶在两组所占比例有明显区别,P=0.002<0.05,差异有统计学意义。HCG日宫颈黏液状态和结晶类型,见表2。
3 讨论
CC是一种非类固醇的雌激素类似物/拮抗剂,与下丘脑的雌激素受体结合从而使下丘脑受体被占据,不能识别内生的雌激素,下丘脑继而发信号给垂体使其刺激卵巢卵泡发育。CC的高排卵率低妊娠率可能是由于CC的抗雌激素效应作用于子宫内膜使子宫容受性降低,另外CC对宫颈黏液的影响[4]和对子宫动脉血流影响也是妊娠率低的重要原因[5]。子宫内膜的厚度及回声类型可反映内膜的功能状态,对评估子宫内膜容受性有较大意义。HCG日内膜≥8 mm和A型子宫内膜有较高的妊娠率[6]。许多研究表明,CC诱导排卵后子宫内膜厚度明显变薄,且影响子宫内膜的类型。
造成CC低妊娠率的主要原因是其抗雌激素的作用,故本实验提前CC的服用日期从月经第3天开始服用,另外考虑补充外源性雌激素。PGV是天然雌二醇,对胚胎发育无不良影响。本实验实验组HCG日内膜厚度显著厚于对照组,且实验组A型内膜比例较对照组增多。虽然本实验得出子宫内膜厚度与PGV水平有相关关系,但是多数人认为补充外源性雌激素能改善内膜发育,并不是因为其提高了血循环中E2的浓度,而认为PGV可能是通过上调内膜ER表达,使内膜对循环中高雌激素水平反应,从而达到改善内膜发育的作用[7]。CC诱导排卵后低妊娠率的另一个原因被认为与CC影响宫颈黏液状态有关。本研究亦观察到对照组宫颈黏液拉丝度低,黏稠度高,此种黏液状态不利于精子的进入,而实验组黏液拉丝度较好,透明度高,I型结晶所占比例大,故认为PGV有改善子宫颈黏液质量的作用。
摘要：目的:探讨外源性雌激素戊酸雌二醇(PGV)对克罗米芬(CC)诱导排卵后所致的子宫内膜发育不良的影响。方法:将80例不明原因不孕妇女随机分为观察组50例和对照组30例,2组均于月经第3天开始,阴道B超监测卵泡发育至卵泡达16mm以上后,并测量子宫内膜厚度与子宫内膜类型,直至排卵日,并将子宫内膜的厚度及形态做以比较。同时于月经第10天开始至排卵前观察宫颈黏液状态和结晶类型。结果观察组内膜厚度、形态及宫颈黏液拉丝度、Ⅰ型结晶所占比例明显优于对照组(P＜0.05)。结论外源性雌激素能改善CC诱导排卵时的子宫内膜发育不良,并能改善宫颈黏液的质量,提高妊娠率。
关键词：戊酸雌二醇,克罗米芬,子宫内膜,宫颈黏液
参考文献
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宫颈癌和子宫内膜癌 篇9
1 材料与方法
1.1 细胞培养
Ishikawa和HEC-1A细胞(American Type Culture Collection,ATCC)用含10%胎牛血清、100 U/m L青霉素以及100μg/m L链霉素的DMEM培养基置于37℃、5%CO2细胞培养箱中培养。
1.2 MTT法检测细胞增殖率
细胞以6×104个/孔接种置96孔板,应用不同浓度的PNS(50、100、150、200μg/m L)(西安飞达生物公司)分别作用于Ishikawa和HEC-1A细胞24、48、72 h。弃去原培养液,每孔加入MTT(5 g/L)20μL,37℃培养4 h。弃上清,每孔加入150μL二甲基亚砜,振荡10 min使结晶充分溶解,于酶标仪上检测各组细胞吸光度值(A490),细胞增殖率=处理组A490/对照组A490×100%。
1.3 Transwell法检测细胞侵袭
以正常培养的子宫内膜癌细胞为对照,以200μg/m L的PNS处理的细胞为实验组。在Transwell上室聚碳酸酯膜上涂70μL 1 mg/m L的matrigel胶,在37℃下静置60 min使其在微孔滤膜上重组为基底膜。胰酶消化待测细胞,收集细胞悬液后在离心半径为10 cm的离心机中1000 r/min离心5 min。重悬细胞后接种于Transwell上室内,并于下室中加入含20%胎牛血清的DMEM培养液500μL,孵育24 h。随后将滤膜上层的细胞用棉签抹去,用甲醇固定滤膜,Giemsa染色15 min。于200倍光镜下计算迁移到下层的细胞数量。
1.4 流式细胞仪检测细胞凋亡
将待测细胞以2×105/孔的密度接种置6孔板,消化细胞,离心后弃去上清液收集细胞。PBS洗涤后离心弃上清液收集细胞,每孔加入100μL结合缓冲液缓慢吹打,在悬浮细胞中分别加入5μL Annexin V-FITC和5μL PI进行染色,摇匀后置于闭光孵育15 min。每管再加入400μL结合缓冲液,于1 h内用流式细胞仪检测。
1.5 RT-PCR检测m RNA表达
Trizol法提取待测细胞的总RNA,紫外分光光度计测定RNA的纯度及浓度,逆转录成c DNA后PCR扩增。取5μL扩增产物行琼脂糖凝胶电泳,自动凝胶成像分析仪分析。实验结果以目的基因灰度值/内参灰度值表示。
1.6 Western blot检测蛋白的表达
细胞用0.05%胰蛋白酶消化后,PBS洗涤3次。加入65μL RIPA细胞蛋白裂解液裂解细胞,随后进行SDS-PAGE蛋白电泳分离蛋白。电转膜后用5%脱脂奶粉在室温下封闭1 h,加入相应蛋白鼠抗一抗(Pierce,Rockford,USA),4℃轻摇过夜。随后加入HRP标记的羊抗鼠二抗,室温孵育1 h。最后用X线胶片曝光分析,结果用Image-Pro Plus处理。蛋白的相对表达量以目的蛋白与内参β-actin的灰度值比值表示。
1.7 统计学方法
采用Graph Pad Prism 5.0进行统计分析,正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示,多组间均数比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用Bonferroni检验。以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 PNS抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa和HEC-1A的生长
PNS能显著抑制Ishikawa和HEC-1A细胞的增殖,同一浓度下,随着PNS作用时间的延长细胞的增殖抑制率亦明显升高(P<0.05);并且随着PNS浓度增加,增殖抑制率明显升高(P<0.05)。后续实验采用200μg/m L PNS处理进行。见图1。
A:MTT检测Ishikawa细胞增殖率;B:MTT检测HEC-1A细胞增殖率
2.2 PNS抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa和HEC-1A的侵袭
经200μg/m L PNS处理48 h后,Ishikawa和HEC-1A细胞的侵袭显著降低(P<0.05)。见图2。
与control比较,*P<0.05
2.3 PNS诱导子宫内膜癌细胞Ishikawa和HEC-1A的凋亡
PNS处理48 h后,Ishikawa细胞的凋亡率升高至21.0%,HEC-1A的凋亡率升高至20.2%,与control比较,细胞凋亡率均显著升高(P<0.05)。见图3。
2.4 PNS抑制VEGF的m RNA和蛋白表达
分别检测Ishikawa和HEC-1A细胞中VEGF的m RNA和蛋白。与control比较,PNS组的VEGF m R-NA和蛋白表达均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。见图4。
与control比较,*P<0.05
2.5 PNS抑制PI3K/AKT信号通路蛋白表达
与control比较,p-AKT的m RNA、蛋白表达水平在PNS组中显著降低(P<0.05),AKT的m RNA、蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。如图5所示,3讨论
现今全球每年新发子宫内膜癌约14万例,死亡人数约4万人/年[11]。中药因其较高的安全性在癌症的治疗中起重要作用[12]。PNS影响女性生殖恶性肿瘤细胞的增殖及凋亡[7,13,14]。但目前关于PNS对子宫内膜癌的作用还未见报道。本研究发现,PNS能显著抑制体外培养的子宫内膜癌Ishikawa和HEC-1A细胞的增殖和侵袭,促进其凋亡,提示PNS对子宫内膜癌可能具有一定治疗作用。
目前中药抗子宫内膜癌的研究主要从抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤侵袭等方面展开。Wang等[7]研究证明PNS对乳腺癌细胞的侵袭和转移能力有抑制作用。Wang等[15]研究表明,PNS可以通过降低结直肠细胞的增殖,诱导细胞凋亡。本研究结果表明,PNS能显著抑制Ishikawa和HEC-1A细胞的增殖,并且其抑制作用具有浓度、时间的依赖性,随着PNS浓度的增加和作用时间的延长,细胞的增殖抑制也明显增高。并且PNS可以有效抑制Ishikawa和HEC-1A细胞的侵袭能力,对细胞的凋亡也有一定促进作用。以上结果表明,PNS能够抑制子宫内膜癌细胞的生长和侵袭,并诱导细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用。
A:RT-PCR检测VEGF的m RNA表达;B、C:Western blot检测VEGF的蛋白表达;与control比较,*P<0.05
A:RT-PCR检测PI3K、AKT的m RNA表达;B、C:Western blot检测PI3K和AKT的蛋白表达;与control比较,*P<0.05
近年来大量研究表明,VEGF是作用最强、特异性最高的调控因子,在肿瘤血管生成的各个环节中起到重要作用[16,17]。抑制VEGF可以达到抑制肿瘤血管新生并阻止肿瘤生长转移的目的[18]。已有研究表明PNS可以通过降低VEGF的表达降低动脉粥样硬化的血管新生[16]。本研究结果表明在PNS处理Ishikawa和HEC-1A细胞中,VEGF的表达显著下降,提示PNS可能通过抑制VEGF影响子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和凋亡。
PI3K/AKT信号通路是细胞内重要的信号转到通路之一,其异常激活与妇科肿瘤的发生、发展和转移等密切相关[19]。研究表明VEGF可以通过激活PI3K/AKT信号通路促进子宫内膜癌细胞的增生及转移[20]。本研究结果发现PNS处理抑制PI3K/AKT信号通路在的Ishikawa和HEC-1A中的表达,与VEGF的表达趋势一致,说明PNS可能通过抑制子宫内膜癌细胞VEGF的表达,遏制PI3K/AKT信号通路激活。
宫颈癌和子宫内膜癌 篇10
1 资料和方法
1.1 研究对象
标本选自2011-03~2012-03在佳木斯大学附属第一医院妇科收治并经病理确诊的30例子宫内膜癌的患者, 年龄38~65岁, 平均 (51.30±3.2) 岁, 功血患者30例, 年龄39~52岁, 平均 (46.75±9.2) 岁, 选择30例健康年检妇女为对照组, 年龄41~58岁, 平均 (47.78±6.95) 岁, 所有妇女均未接受过手术、化疗、放疗或激素治疗, 排除诊断时有第二原发癌, 排除其他疾病。
1.2 标本收集
分别采集子宫内膜癌组患者术前2~3d, 功血组患者治疗前, 健康对照组体检的空腹肘静脉血4m L放置于未加抗凝剂的真空玻璃试管中, 采集后在常温下静置2h后, 离心机离心 (3000r/min, 10~15min) 分装于2个EP管中, 放于-80℃冰箱待检。实验前剔除溶血标本。
应用ELISA检测血清HE4的水平, 应用放射免疫法测定CA125在三组中的水平。判断标准:CA125>35u/m L为阳性, HE4>150pmol/L为阳性。
1.3 统计学处理
采用SPSS18.0统计软件处理, 血清HE4与CA125含量在三组间比较采用秩和检验, 率的比较采用χ2检验[2]。
2 结果
2.1 三组血清中HE4的水平和阳性率的比较
三组血清HE4含量差异具有显著性 (P<0.01) 。两两之间比较发现, 子宫内膜癌组的患者血清HE4的表达水平显著高于功血组患者和健康对照组 (P<0.01) , 而功血组患者和健康对照组之间血清表达水平比较差异无统计学意义 (P>0.05) 。子宫内膜癌组患者血清HE4的阳性率 (36.67%) , 显著高于功血组患者的阳性率 (10.00%) 和健康对照组阳性率 (3.33%) (P<0.05) , 而功血组患者和健康对照组之间阳性率比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) 。见表1。
2.2 三组血清中CA125水平和阳性率的比较
三组血清CA125含量差异具有显著性 (P<0.01) 。两两之间比较发现, 子宫内膜癌组的患者血清CA125的表达水平显著高于功血组患者和健康对照组 (P<0.01) , 而功血组和健康对照组之间血清表达水平比较差异无统计学意义 (P>0.05) 。宫内膜癌患者血清CA125的阳性率 (30.00%) , 显著高于功血组阳性率 (3.33%) 和健康对照组阳性率 (3.33%) (P<0.01) 。见表2。
2.3 三组HE4、CA125和两者联合的阳性率比较
子宫内膜癌术前组, HE4、CA125单项检测和HE4+CA125联合检测阳性率比较差异具有统计学意义 (P<0.05) , 两两比较发现, HE4、CA125单项检测无统计学意义 (P>0.05) , HE4+CA125联合检测的阳性率高于HE4、CA125单独检测, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。功血组患者及健康对照组HE4、CA125和两者联合, 三种检测方法的阳性率比较差异均无统计学意义 (P>0.05) , 见表3。
*采用χ2校正公式
2.4 子宫内膜癌患者的血清HE4、CA125诊断的敏感性、特异性、阴性预测值、阳性预测值及正确诊断率间的比较
HE4+CA125两者联合检测子宫内膜癌, 其敏感度为63.33%, 特异度为93.33%, 较CA125、HE4单项检测敏感度增高 (P<0.05) 。HE4+CA125联合检测特异度较HE4、CA125单项检测略低。在特异度、阴性预测值、阳性预测值及准确度方面, 差异无统计学意义 (P>0.05) 。见表4。
*采用χ2校正公式
3 讨论
人附睾蛋白4 (HE4) 是一种小分子的分泌型蛋白, 是近几年发现的一种肿瘤标志物。近年来, 国外研究表明HE4对子宫内膜癌早期治疗诊断检测具有重要价值, Galgano[3]应用mRNA杂交及免疫组织化学检测发现HE4在子宫内膜癌中的阳性率为90%, Huhtinen[4]等检测发现HE4在子宫内膜癌中的表达率明显高于健康对照组, 本研究显示, HE4在子宫内膜癌组中的阳性率明显高于健康对照组、功血组, 与国外报道结论相符, 这一发现提示HE4将来可能作为诊断子宫内膜癌的一种标志物。CA125是体腔上皮细胞分泌的一种糖蛋白, 主要用于卵巢癌的诊断, 近年有相关报道证实CA125对子宫内膜癌的诊断有一定的价值[5], 本研究显示CA125在子宫内膜癌的表达水平及阳性率明显高于健康对照组、功血组, 但CA125对子宫内膜癌诊断的敏感度仅为30%, HE4对子宫内膜癌的敏感度为36.67%, 明显高于CA125, 与Moore[6]等检测的结果相符。两者联合检测子宫内膜癌的敏感度63.33%, 明显优于两者单独检测。本研究提示CA125和HE4联合检测对子宫内膜癌的诊断有重要应用临床价值, 有望进一步提高子宫内膜癌的早期诊断水平。
参考文献
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