CTGF水平（精选6篇）
CTGF水平 篇1
脑血管病 (cerebral vascular disease, CVD) 是指脑血管破裂出血或血栓形成, 引起的以脑部出血性或缺血性损伤症状为主要临床表现的一组疾病, 又称脑血管意外或脑卒中。据统计, 脑血管疾病中60%~80%为缺血性脑血管病 (ischemic cerebral vascular disease, ICVD) , 而脑梗死 (cerebral infarction, CI) 是缺血性脑血管病中发病率、死亡率、致残率最高的疾病。研究发现, 颈动脉粥样硬化 (carotid atherosclerosis, CAS) 造成颈总动脉、颈内动脉狭窄者, 发生短暂性脑缺血发作及脑梗死的危险性显著增高, 是导致ICVD的主要原因。因此, CAS常被用来反映全身动脉粥样硬化病变的情况, 并且被认为是预测卒中发生的主要危险因素[1]。
目前临床上对于脑梗死的早期诊断尚有困难, 许多新发脑梗死患者的CT一般要在24 h之后才出现低密度表现, 而且不能监测病情变化和判断预后。近年来, 随着分子生物学技术的进步, 研究人员认为对血浆中部分生化指标的检测可能成为评估动脉粥样硬化性脑梗死的无创性诊断方法, 在诊断、治疗、判断预后等方面起到一定作用。
结缔组织生长因子 (connective tissue growth factor, CTGF) 是一种多功能的生长因子, 可表现出促有丝分裂、调节细胞外基质的产生和血管内膜增厚、调节血管生成并参与机体组织的创伤修复等作用[2]。CTGF表达增加后, 可分泌到细胞外间隙, 进入体循环。CTGF过度表达在某些增生性或纤维化性疾病, 如动脉粥样硬化[3]、肾纤维化[4]、肝纤维化[5]、硬皮病[6]等的发生发展有十分重要的作用。已有研究报道, CTGF能够直接诱导结缔组织细胞增殖和细胞外基质合成, 促进动脉粥样硬化的发展[7]。CTGF与动脉粥样硬化有着密切的关系, 而动脉粥样硬化又是脑梗死发生发展的重要危险因素。目前国内外有关CTGF与动脉粥样硬化性脑梗死的关系研究尚未见报道。本研究测定了受检者血浆CTGF水平, 探讨CTGF与动脉粥样斑块形成及其与急性动脉粥样硬化性脑梗死的相关性, 为急性动脉粥样硬化性脑梗死的诊断和治疗寻找新的特异性生物学标记物提供依据。
1 对象与方法
1.1 研究对象
选取我院2011年5月至2012年2月急性动脉粥样硬化脑梗死患者30例为病例组, 其中男18例、女12例, 年龄 (61.87±8.38) 岁, 符合1996年第4次全国脑血管病会议急性脑梗死的临床诊断标准, 并经头颅CT或头MRI等影像学检查证实, 且颈动脉超声检查回报均有颈动脉粥样硬化。选取同期健康体检者30例为对照组, 其中男16例、女14例, 年龄 (59.44±10.59) 岁。两组年龄、性别、体重指数等比较差异无统计学意义 (P>0.05) 。
1.2 研究方法
1.2.1 颈动脉彩超检查
测量受检者颈动脉内-中膜厚度 (intima-media thickness, IMT) 。正常颈动脉IMT<1.0 mm, 当IMT≥1.0 mm时表示内膜增厚, IMT≥1.5 mm为动脉粥样硬化斑块形成。
1.2.2 血浆CTGF水平检测
采集受检者静脉血4 m L, 离心分离血浆, -20℃保存备用。采用酶联免疫吸附法 (enzyme linked immunosorbent assay, ELISA) , 按照试剂盒提供的操作步骤测定样品中CTGF的水平。
1.3 统计学方法
使用SPSS 13.0统计软件分析所有数据, 计量资料用±s表示, 两组间比较采用t检验;计数资料组间比较采用χ2检验;采用Pearson法进行相关分析。以α=0.05为检验水准, P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 血浆CTGF水平检测结果
病例组和对照组血浆CTGF水平分别为 (1.47±0.21) μg/L和 (0.73±0.25) μg/L, 与对照组相比, 病例组血浆CTGF水平明显升高 (t=12.506, P<0.01) 。
2.2 颈动脉彩超检查
颈动脉彩超结果表明, 病例组患者颈动脉IMT与对照组相比明显增高 (P<0.01) 。病例组中斑块检出例数为19例, 占30例患者的63.3%;对照组中斑块检出例数为7例, 占30例受检者的23.3%。经比较, 两组间斑块检出率差异有统计学意义 (P<0.01) , 见表1。
2.3 血浆CTGF水平与颈动脉粥样硬化斑块形成的相关性
将所有受检者分为有斑块组和无斑块组, 比较两组间血浆CTGF水平, 有斑块组受检者血浆CTGF水平 (1.40±0.31) μg/L, 明显高于无斑块组 (0.87±0.39) μg/L (t=5.584, P<0.01) 。
2.4 血浆CTGF水平与动脉粥样硬化程度相关性
两组受检者血浆CTGF水平与IMT成直线正相关 (r=0.692, P<0.01) 。
3 讨论
CTGF是一种富含半胱氨酸的分泌性多肽类多功能生长因子, 广泛表达于人类心脏、胎盘、肺、肝及肾等多种组织器官中[8]。在动脉粥样硬化中, CTGF可发挥以下作用: (1) CTGF可产生有丝分裂原效应, 促进血管平滑肌细胞的增殖; (2) 使细胞外基质 (extracellular matrix, ECM) 合成增多, 降解减少, 导致血管内膜增厚; (3) CTGF还可促进细胞黏附分子的表达, 使细胞易于黏附并与基质蛋白相结合[3]。研究证实, 在发生动脉粥样硬化的血管中, CTGF的表达量比正常血管中高50~100倍, 大多是在细胞外基质和纤维化区域, 尤其是纤维帽的肩部。此外, 动脉粥样斑块形成过程中, 血管平滑肌细胞会从动脉中膜向内膜迁移;利用CTGF-SiRNA转染细胞, CTGF表达减少后, 此过程会受到抑制[9], 这从另外一个角度说明CTGF与动脉粥样硬化斑块形成有关。有研究报道, CTGF蛋白在血小板内保留, 随着凝血系统的激活释放出来。因此, 损伤部位的血小板解聚是局部CTGF浓度升高的主要机制之一, 这与组织纤维化以及动脉粥样硬化导致血管闭塞有关。CTGF表达增加后可分泌到细胞外, 进入血液循环。血浆CTGF可否作为评价动脉粥样硬化性疾病发生及发展程度的生物学标志物以及治疗的靶点, 是目前研究的热点之一[10]。
本研究结果显示, 病例组患者血浆CTGF表达水平明显高于对照组, 说明CTGF与动脉粥样硬化性脑梗死有关。进一步将血浆CTGF在有斑块组和无斑块组组间比较, 结果证明有斑块组血浆CTGF水平明显升高, 提示CTGF与动脉粥样斑块的形成有关。同时通过血浆CTGF水平与颈动脉IMT相关性分析表明, CTGF与动脉内膜的增厚和粥样斑块的形成密切相关。CTGF作为一种细胞因子, 它的表达调控主要受到细胞内信号转导系统的精细调节, 例如有研究表明, 转化生长因子-β (transforming growth factor-β, TGF-β) 是CTGF的上游信号分子[6], 在动脉粥样硬化发生过程中起作用, 它可以调控CTGF的表达。因此, 作为生物学标志物, 在动脉粥样硬化性脑梗死的诊断、判断预后等应用中, CTGF受感染、饮食、代谢等因素的影响相对较小, 灵敏性和特异性更好。
总之, CTGF在动脉粥样硬化及急性动脉粥样硬化性脑梗死的发生、发展中发挥重要作用, 这为临床上急性动脉粥样硬化性脑梗死的预防、诊断和治疗提供了新的思路。
摘要：目的:探讨血浆结缔组织生长因子 (connective tissue growth factor, CTGF) 水平与急性动脉粥样硬化性脑梗死的相关性。方法:选取急性动脉粥样硬化性脑梗死患者和健康体检者各30例, 分别作为病例组与对照组。对研究对象进行颈动脉彩超检查, 测定颈动脉内-中膜 (intima-media thickness, IMT) 厚度。采用酶联免疫吸附法 (enzyme linked immunosorbent assay, ELISA) 检测研究对象血浆CTGF水平。结果:病例组患者血浆CTGF水平 (1.47±0.21) μg/L高于对照组 (0.73±0.25) μg/L (P<0.01) ;颈动脉彩超显示, 病例组患者颈动脉IMT (1.20±0.21) mm高于对照组 (0.91±0.25) mm (P<0.01) ;有斑块组血浆CTGF水平 (1.40±0.31) μg/L高于无斑块组 (0.87±0.39) μg/L (P<0.01) 。结论:血浆CTGF水平增高与颈动脉内膜增厚、斑块形成密切相关, 在动脉粥样硬化性脑梗死的发生发展中发挥重要作用。
关键词：结缔组织生长因子,急性脑梗死,动脉粥样硬化
参考文献
[1]Labreuche J, Deplanque D, Touboul PJ, et al.Association between change in plasma triglyceride levels and risk of stroke and carotid atherosclerosis:systematic review and meta-regression analysis[J].Atherosclerosis, 2010, 212 (1) :9-15.
[2]薛苗, 毛小荣, 陈红.CTGF-肝纤维化治疗的新亮点[J].国际消化病杂志, 2010, 30 (4) :220-22.
[3]Ponticos Markella.Connective tissue growth factor (CCN2) in blood vessels[J].Vascul Pharmacol, 2013, 58:189-193.
[4]Mason RM.Fell-Muir lecture:connective tissue growth factor (CCN2) -a pernicious and pleiotropic player in the development of kidney fibrosis[J].Int J Exp Pathol, 2013, 94 (1) :1-16.
[5]Li GS, Jiang WL, Tian JW, et al.In vitro and in vivo antifibrotic effects of rosmarinic acid on experimental liver fibrosis[J].Phytomedicine, 2010, 17 (3-4) :282-288.
[6]Gressner OA, Gressner AM.Connective tissue growth factor:a fibrogenic master switch in fibrotic liver diseases[J].Liver Int, 2008, 28 (8) :1065-1079.
[7]Hopkins PN.Molecular biology of atherosclerosis[J].Physiol Rev, 2013, 93 (3) :1317-1542.
[8]Chaqour B, Goppelt-Struebe M.Mechanical regulation of the Cyr61/CCN1 and CTGF/CCN2 proteins implications in mechanical stress-associated pathologies[J].FEBS J, 2006, (273) :3639-3649.
[9]顾立学, 罗俊生, 关宁, 等.结缔组织生长因子siRNA对大鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响[J].解剖科学进展, 2009, 15 (3) :279-282.
[10]Ha YM, Lee DH, Kim M, et al.High glucose induces connective tissue growth factor expression and extracellular matrix accumulation in rat aorta vascular smooth muscle cells via extracellular signal-regulated kinase 1/2[J].Korean J Physiol Pharmacol, 2013, 17 (8) :307-314.
CTGF水平 篇2
1 资料与方法
1.1 一般资料
将我院2009年2月至2011年9月收治的165例慢性乙型肝炎患者根据其纤维化程度进行分组, 并将同期在我院进行健康体检的健康者50例作为对照组。
慢性乙型肝炎患者中, 男性100例, 女性65例, 患者年龄在25～78岁, 平均 (48.27±10.83) 岁。所有患者均经过肝穿刺活组织检查, 根据中华医学会病毒性肝炎防治标准对患者肝硬化程度进行分期, 包括S0期31例, S1期35例, S2期32例, S3期43例, S4期24例。各期患者之间性别、年龄等无明显差异, P>0.05, 具有可比性。
健康组50例, 其中男性31例, 女性19例, 年龄在26～79岁之间, 平均 (47.27±11.27) 岁。所有健康者均经过血常规、生化、B超等检查证实无肝脏疾病。
乙型肝炎组与健康组比较, 性别、年龄等一般情况无明显差异, P>0.05, 具有可比性。
1.2 方法
对所有患者均进行肝组织穿刺活检, 肝细胞的标本长度选择为1.0～1.5cm[2], 将石蜡切片进行常规的脱蜡至水后, 在每片滴入胃蛋白酶50μL, 在孵育20min后, 再滴入50μL的50g/LBSA封闭液在温箱内孵育20min, 随后给予稀释的一抗 (兔Ig G) , 孵育1h, 滴入二抗, 再次孵育20min。使用苏木精衬染[3]。
阳性呈棕色, 阴性呈蓝色。在40倍物镜下进行分析。
1.3 数据处理
将本次试验所得数据录入SPSS17.0软件包进行统计学分析, 计量资料采用 (均数±标准差) 表示, 即 (χ—±s) , 组间对比采用t检验。取95%可信区间, 当P<0.05时, 为差异有统计学意义。
2 结果
经检测结果发现, 肝硬化程度越高的患者, 其血清CTGF水平越高, 其中S0与S1组与健康组比较, 无明显差异, P>0.05;S3以上组患者CTGF均高于健康组, P<0.05, 差异有统计学意义, 详见表1。
3 讨论
CTGF, 即结缔组织生长因子, 为富含半胱氨酸肝素结合蛋白的分泌性多肽, 在心脏、胎盘、肺部、肝脏等均有表达。首次于1991年在人体的脐静脉内皮细胞条件培养基中被发现, 属于即刻早期基因CCN的一种[4]。病理条件下, CTGF的过度表达, 与各种增生性或纤维化疾病有十分密切的关系。
CTGF能够促进细胞的增殖, 作TGF-β的下游因子, 其能够通过升高细胞周期, 使细胞从G1进入S期, 进而促进细胞的有丝分裂。而表皮生长因子与肝素均能够增强CTGF的促有丝分裂作用。其还能够对细胞外基质的调节, 促进细胞的粘附和细胞表型的转化, 提升促纤维化效果。而肝纤维化是由于细胞外基质的合成增多, 降解减少, 过多沉积在肝脏内。
我院的本次实验也证实, CTGF与肝脏的纤维化程度有密切的关系, 患者的纤维化程度越高, 其发生CTGF越高, 反之亦然, 组间比较, 差异十分明显, P<0.05。进一步说明了, 血清CTGF水平变化对慢性乙型肝炎肝脏纤维化程度可起到较好的判断作用, 可辅助医师诊断。
摘要：目的 探讨血清CTGF水平变化对慢性乙型肝炎肝脏纤维化程度的判断价值, 以供临床参考。方法 将我院2009年2月至2011年9月收治的165例慢性乙型肝炎患者根据其纤维化程度进行分组, 并将同期在我院进行健康体检的健康者50例作为对照组, 分别测定两组被检者的血清CTGF水平变化。结果 经检测结果发现, 肝硬化程度越高的患者, 其血清CTGF水平越高, 其中S0与S1组与健康组比较, 无明显差异, P>0.05;S3以上组患者CTGF均高于健康组, P<0.05。结论 血清CTGF水平变化对慢性乙型肝炎肝脏纤维化程度可起到较好的判断作用, 可辅助医师诊断。
关键词：血清CTGF,慢性乙型肝炎,肝脏纤维化,纤维化
参考文献
[1]康海燕, 董江龙, 李兵顺, 等.乙型肝炎患者肝脏结缔组织生长因子及碱性成纤维细胞生长因子与肝纤维化的关系[J].中国综合临床, 2009, 25 (2) :208-209.
[2]许文进, 康海燕, 董江龙, 等.慢性乙型肝炎肝组织TGF-β1及CTGF与肝纤维化的相关性研究[J].现代中西医结合杂志, 2011, 20 (9) :1044-1045.
[3]陈勇良, 李振燕, 姚春甫, 等.TGF-β1、PDGF-BB、CTGF与慢性乙型肝炎肝纤维化相关性研究[J].疑难病杂志, 2010, 9 (1) :19-21.
CTGF水平 篇3
1 材料与方法
1.1 主要试剂
纯度95%EGCG(美国Sigma公司)为粉末状,临用前溶于生理盐水中,过滤除菌。CTGF ELISA试剂盒(晶美生物公司);Trizol试剂(美国Gibco BRL公司);逆转录试剂盒(美国Promega公司)。
1.2 细胞培养与分组
人近端肾小管上皮细胞株(HK-2)购自美国ATCC细胞库,5%CO2,37℃,按1∶2～1∶3传代,细胞生长成片时用于实验。分为EGCG组和对照组。EGCG组分别加入25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L的EGCG作用48h。对照组不予处理。
1.3 ELISA检测CTGF的蛋白含量
取细胞培养上清液,并立即置于液氮中保存,细胞计数,严格按照试剂盒说明书操作,检测上清液中CTGF的蛋白含量。
1.4 半定量RT-PCR检测CTGF mRNA的表达
按Trizol试剂说明书提取各组细胞总RNA,按照Takara反转录试剂盒操作流程获得总CDNA,再以此CDNA为模板进行PCR反应,引物序列为上游5'-CAT CTT CGG TGG TAC GGT GT-3';下游5'-AGG AGG CGT TGT CAT TGG TA-3'。反应条件为:预变性95℃5min,变性5℃30s,退火56℃30s,延伸72℃50s,循环23次,结束循环后再延伸72℃10min,4℃终止。每组样本实验重复3次。
2 结果
2.1 各组HK-2细胞中CTGF mRNA及其蛋白表达比较
从表1中可以看出EGCG组HK-2细胞中CTGF mR-NA及其蛋白表达均较对照组显著降低(P均<0.01),且呈浓度依赖性(P均<0.01)。
3 讨论
CTGF是1991年由Braham等在人脐静脉内皮细胞的条件培养中分离纯化得到的一种细胞因子。CTGF具有多种功能,目前大量研究显示,CTGF是TGF-β1的下游因子,主要参与组织纤维化的形成。有学者认为CTGF可能是调节肾小管上皮细胞转分化的重要因子。YoKoi等[4]用CT-GF反义寡聚核苷酸转染鼠肾间质成纤维细胞,TGF-β1刺激引起的FN,collmRNA和蛋白上调被明显减弱。由于CTGF主要介导TGF-β1的负面效应,却不介导其正面效应,故直接抑制CTGF的表达也许可以避免在上游阻断TGF-β1带来的副作用。因此CTGF可以作为抗肾间质纤维化的新靶点。
本研究发现EGCG抑制HK-2细胞表达CTGF,且呈浓度依赖关系,现具体机制不明确。以往研究表明,EGCG有抗肝、肺纤维化的作用,机制为抗氧化及影响TGF-β1/smad通路有关。故推测EGCG抗肾间质纤维化也可能与上述两因素有关。针对TGF-β和Smads的治疗只能阻断纤维化的起始和进程,并不能逆转纤维化,而CTGF作为TGF-β的下游介质,是一个更具有特导性靶位,所以针对CTGF,开发能抑制CTGF产生和激活的药物将会开创治疗纤维化疾病的新里程。本研究发现,EGCG能抑制HK-2细胞表达CTGF,为肾间质纤维化的防治提供了一种可能的有效途径。
摘要：目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人肾小管上皮细胞(HK-2)结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达的影响并探讨其可能的机制。方法:体外培养HK-2细胞,EGCG分别以25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L作用于体外培养的HK-2细胞48h。用ELISA法和RT-PCR检测HK-2细胞CTGF蛋白含量及mRNA表达水平。结果:与对照组比较,EGCG组HK-2细胞CTGF表达显著下降(P<0.01),且呈浓度依赖关系。结论:EGCG能抑制HK-2细胞CTGF的表达。
关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯,肾小管上皮细胞,结缔组织生长因子
参考文献
[1]ZHANG J L,UANG X P.Study process on biology activity oftea polyphenols[J].Prev Med Trib,2007,13(12):1113-1116.
[2]SRINIVASAN,KALAYRASRN,GANAPASAM.Sudhandiranenhancement of antioxidant defense system by epigallo catechin-3-gallate during bleomycin induced experimental pulmonary fibrosis[J].Biol pharm Bull,2008,31(7):1306-1311.
[3]CHEN JH,TIPOE GL,LIONG EC,et al.Green tea polyphe-nols prevent toxin-induced hepatotoxicity in mice by down-regulating inducible nitric oxidederived Pro oxidants[J].Am JClin Nutr,2004,80:742-751.
CTGF水平 篇4
环孢素A(Cs A)是器官移植后抗排异反应的主要治疗药物,同时也是治疗肾小球疾病的常用药物,但长期使用Cs A常并发肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)[1],然而目前对Cs A影响RIF的作用机制尚未完全明确。肾小管上皮细胞间充质转分化(epithelial-mensenchymal transition,EMT)是RIF发生发展的关键步骤,并受多种细胞因子、生长因子等的调控,其中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)能平行于TGF-β1或作为TGF-β1的下游效应分子介导EMT的产生[2]。因此,本实验观察Cs A对体外培养的HK-2细胞转分化及CTGF m RNA、蛋白表达的影响,进而探讨Cs A导致RIF的作用机制。
1 材料与方法
1.1 主要试剂
HK-2细胞、(EpiCM)上皮细胞培养基(含5%FBS)(ScienCell Research Laboratories),环孢素A(福建微生物研究所),胰蛋白酶、Trizol Reagent(美国Invitrogen),逆转录试剂盒(Fermentas),随机引物(上海生工),小鼠抗人α-SMA单克隆抗体(美国Sigma),CTGF多克隆抗体(英国Abcam),Cy3-羊抗小鼠IgG抗体(碧云天),Braford蛋白定量试剂盒,HRP标记的二抗(北京天根)。
1.2 HK-2细胞的培养
HK-2细胞为人近端肾小管上皮细胞株,用含5%(FBS)的EpiCM于37℃、5%二氧化碳培养箱中孵育培养,待细胞生长至融合状态,铺满瓶壁的2/3以上,用0.25%胰蛋白酶消化细胞按1∶2、3比例传代。
1.3 倒置相差显微镜下观察细胞形态的改变
将HK-2细胞以1×105/m L的密度接种于6孔细胞培养板,待细胞长至70%～80%融合时,饥饿细胞24 h,使细胞生长同步化,弃上清液,分别更换为含0、0.5、5和25 mg/L不同浓度Cs A的无血清培养基培养48 h。倒置相差显微镜下观察细胞形态改变。
1.4 免疫荧光检测HK-2细胞α-SMA的表达
将细胞接种于六孔板内,待细胞生长至60%～70%融合时,更换为含5 mg/L Cs A的无血清培养基,分别培养24、48、72 h。干预因素作用后终止实验,吸尽培养液,经PBS冲洗、2%多聚甲醛-Triton-X-100固定、封闭液封闭后,先后滴加小鼠抗人α-SMA单克隆抗体(1∶200)、Cy3标记的二抗(浓度1∶500)孵育,置荧光显微镜下观察、拍照。
1.5 RT-PCR检测α-SMA、CTGF mRNA的表达
将HK-2细胞接种于25 cm2的培养瓶中,待细胞长至80%～90%融合时,饥饿细胞24 h,更换为含5 mg/L Cs A的无血清培养基,分别培养24、48和72 h。收获细胞,Trizol法抽提总RNA,紫外分光光度计测定总RNA的浓度及纯度。按照M-MLV Reverse Transcriptase试剂盒说明书进行逆转录合成c DNA,在PCR仪上扩增。从NCBI的Nucleotide中查得目的基因和内参照基因,采用Primer 3软件设计,由上海生物工程公司合成。α-SMA引物序列为:上游:5'-CGGGACATCAAGGAGAAACT-3';下游:5'-GCCCATCAGGCAACTCGTAA-3';扩增产物长度109 bp;PCR反应条件:94℃预变性3 min;94℃变性30 s,56.7℃退火30 s,72℃延伸60 s,共30个循环;72℃终末延伸10min。CTGF引物序列为:上游:5'-ACGGCGAGGTCATGAAGAAGAACA-3';下游:5'-TGGGGCTACAGGCAGGTCAGTG-3';扩增产物长度521 bp;PCR反应条件:94℃变性30s,60℃退火30 s,72℃延伸60 s,共32个循环。β-actin引物序列为:上游:5'-CTCCATCCTGGC CTCGCTGT-3';下游:5'-GCTGTCACCTTCACCGTT CC-3';产物长度268 bp;PCR反应条件:94℃变性30 s,57℃退火30 s,72℃延伸60 s,共28个循环。PCR产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳,Bio-Rad 2000凝胶成像系统成像,Gene Tools软件进行灰度分析,以β-actin光密度值进行校正,比值表示其m RNA相对含量。
1.6 Western blot检测CTGF蛋白的表达
细胞准备与实验分组同步骤5,干预因素终止后,提取各组总蛋白。蛋白样本在100℃下变性10min,用7.5%聚丙烯酰胺凝胶电泳,半干电转移至硝酸纤维素膜上,含5%脱脂奶粉的TBS液封闭1 h后加入一抗,α-SMA单克隆抗体(1∶1 000)、CT-GF多克隆抗体(1∶1 000)、β-actin多克隆抗体(1∶800),4℃过夜。洗膜后加入HRP标记二抗(1∶2 500)37℃杂交1 h。用ECL化学发光试剂在X线胶片上曝光、显影、定影。以β-actin作为内参,自动成像系统成像并分析。
1.7 统计学分析
以上实验均重复3次,所有数据均以表示,数据分析采用SPSS 12.0软件,各组间计量资料比较运用单因素方差分析,P<0.05表明差异有统计学意义。
2 结果
2.1 CsA对HK-2细胞形态的影响
随Cs A浓度的增加,HK-2细胞形态逐渐发生改变;5 mg/L Cs A刺激48 h后可见大部分细胞拉长增大,由立方形铺路石样转变为梭形长条样;当Cs A浓度达25 mg/L时,细胞形态几乎均成长条样的成纤维细胞形态,见图1。
2.2 免疫荧光分析CsA对HK-2细胞α-SMA蛋白的影响
免疫荧光检测显示,正常HK-2细胞胞浆中无α-SMA表达;随着5 mg/L Cs A刺激时间的延长,细胞胞浆中α-SMA表达逐渐增强,24 h即可见到α-SMA的表达,72 h时α-SMA表达较对照组明显增多。
2.3 CsA对HK-2细胞α-SMA、CTGF mRNA表达的影响
RT-PCR结果显示,正常HK-2细胞不表达α-SMA m RNA,少量表达CTGF m RNA;Cs A干预HK-2细胞24～72 h后,各不同时间点α-SMA、CTGF m RNA的表达均明显高于对照组[α-SMA/β-actin:(0.336±0.015)、(1.017±0.048)、(1.509±0.073)vs(0.124±0.011);CT GF/β-actin:(0.892±0.041)、(1.615±0.07)、(1.748±0.069)vs(0.312±0.015),均P<0.01];α-SMA、CTGF m RNA的表达随着CSA作用时间的延长而逐渐增加,呈时间依赖效应,见图2。
2.4 Western blot检测CsA对HK-2细胞CTGF蛋白表达的影响
Western blot显示,与m RNA检测结果一致,对照组HK-2细胞不表达α-SMA、但有基础水平CTGF蛋白表达,Cs A干预HK-2细胞24-72h后,各时间点α-SMA和CTGF蛋白表达均明显高于对照组[α-SMA/β-actin:(0.539±0.031)、(0.824±0.057)、(1.107±0.068)vs(0.116±0.012);CT-GF/β-actin:(0.673±0.029)、(1.207±0.058)、(1.412±0.064)vs(0.254±0.013),均P<0.01],呈时间依赖增加趋势,且α-SMA和CTGF蛋白表达的时间效应一致,见图3。
3 讨论
肾小管间质纤维化(RIF)是限制Cs A临床应用的常见并发症,Cs A所致的肾纤维化一直是人们期待解决的问题。因此,探讨Cs A引起RIF的作用机制,将有助于寻找出预防Cs A肾毒性的新方法。EMT是RIF形成的关键事件,α-SMA表达阳性的肌成纤维细胞(也称间充质细胞)的出现是EMT产生的标志[3]。肾小管上皮细胞受到尿蛋白、葡萄糖、肾毒性物质、炎症因子、多肽类生长因子等刺激因素的作用下,可产生一系列细胞因子如TGF-β1、CT-GF等,进一步转分化为肌成纤维细胞,促进ECM的积聚,参与RIF的发生发展[4]。既往研究认为Cs A肾毒性的发生主要与其引起肾小球血流微循环障碍有关,近年一些研究发现Cs A能通过对肾小管上皮细胞的直接损伤,引起肾小管上皮细胞凋亡、转分化等进而导致RIF的产生[5]。本研究发现,随着Cs A刺激浓度的增加,HK-2细胞逐渐由立方形铺路石样逐渐转变为梭形长条样;正常肾小管上皮细胞不表达α-SMA,Cs A刺激24 h后,免疫荧光显示细胞胞浆中出现α-SMA的表达,提示细胞发生了转分化,且随着Cs A刺激时间的延长而增强;RT-RCR和Western印迹结果也显示,随着Cs A刺激时间的延长,HK-2细胞α-SMA m RNA和蛋白表达也逐渐增加;结果提示Cs A能直接损伤肾小管上皮细胞,诱导肾小管上皮细胞重新表达肌成纤维细胞表型标记物α-SMA,即诱导(EMT)产生。肌成纤维细胞是肾脏分泌合成ECM的主要细胞,其出现启动了RIF的进程。因此,Cs A诱导的EMT在其致肾间质纤维化过程中起着重要的作用。
CTGF属即刻早期基因CCN家族成员之一,具有促有丝分裂、趋化、诱导黏附、促进细胞增殖、分化和合成ECM等作用[6]。目前已证实CTGF不仅是TGF-β1发挥生物学效应的重要下游效应分子,介导TGF-β1对组织的致纤维化作用;CTGF还能通过单独诱导EMT、促进ECM合成等促使RIF的形成[7]。MCMORROW等研究表明,Cs A诱导HK-2细胞产生EMT与CTGF m RNA表达上调相关,CTGF可能是Cs A诱导EMT过程的中介因子[8]。本研究结果表明,在常规培养下,HK-2细胞有基础量的CT-GF合成分泌,提示其可能对维持细胞的基本生理功能有一定作用。但在Cs A刺激下,HK-2细胞CTGF m RNA及蛋白表达在24 h时较对照组开始明显增加,72 h时表达显著增加,呈时间依赖关系;CTGF蛋白的持续高表达对肾脏纤维化的发生可产生持久的影响。既往文献表明,在有肾小管间质纤维化及慢性损伤的病例中,CTGF的表达明显增强,并且和α-SMA的分布位置一致。本研究也发现,在Cs A干预下,CTGF蛋白的表达与α-SMA蛋白的表达时效基本一致,24 h时表达开始明显增加,随作用时间的延长增加更为显著,即Cs A诱导的转分化时间效应与CTGF表达的时效一致。以上结果提示,Cs A的持续刺激可使肾小管上皮细胞产生大量CTGF,CT-GF进一步诱导肾小管上皮细胞向肌成纤维细胞转分化,从而加速了RIF的进程。
综上结果表明,Cs A能通过刺激肾小管上皮细胞分泌CTGF、进而诱导EMT,这可能是Cs A致肾间质纤维化的重要作用机制之一。
参考文献
[1]LI C,SUN BK,LIM SW,et al.Combined effects of losartan and pravastatin on interstitial inflammation and fibrosis in chronic cyclosporine-induced nephropathy[J].Transplantation,2005,79(11):1522-1527.
[2]张景,卓文磊,王彦,等.结缔组织生长因子反义寡核苷抑制TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞转分化[J].中国现代医学杂志,2005,15(9):1316-1320.[2]ZHANG J,ZHUO WL,WANG Y,et al.connective tissue growth factor antisense oligonucleotide inhibit human renal tubular ep-ithelial-myofibroblast transdiferentiation induced by TGF-β1[J].China Journal of Modern Medicine,2005,15(9):1316-1320.Chinese
[3]WENDY C,STEPHEN,JOSEPHINE M,et al.Connective tissue growth factor plays an important role in advanced glycation and product-induced tubular epithelial-to-mesenchymal transition:im-plication for diabetic renal disease[J].J Am Soc Nephrol,2006,17:2484-2494.
[4]卓文磊,王彦,张景.针对CTGF的shRNA抑制TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞合成胶原[J].中国现代医学杂志,2006,16(7):981-984.[4]ZHUO WL,WANG Y,ZHANG J.Inhibitory effects of shRNA targeting CTGF in transforming growth factorβ1-induced colla-gen synthesis in human renal tubular epithelial cells[J].China Journal of Modern Medicine,2006,16(7):981-984.Chinese
[5]SLATTERY C,CAMPBELL E,MCMORROW T,et al.Cy-closporine A-induced renal fibrosis a role for epithelial-mes-enchymal transition[J].Am J Patho,2005,167(2):395-407.
[6]郭云珊,袁伟杰,叶菡洋,等.甲状旁腺激素对人近曲小管上皮细胞转分化及分泌结缔组织生长因子的影响[J].中华肾脏病杂志,2008,24(5):332-336.[6]GUO YS,YUAN WJ,YE HY.Impact of parathyroid hormone on transition and connective tissue growth factor expression of hu-man renal tubular epithelial cells[J].Chin J Nephrol,2008,24(5):332-336.Chinese
[7]LIU Y.Epithelial to mesenchymal transition in renal fibrogenesis:pathologic significance,molecular mechanism,and therapeutic in-tervention[J].J Am Soc Nephrol,2004,16(1):1-12.
CTGF水平 篇5
1 资料与方法
1.1 研究对象:正常对照组:SPF级C57BL/6雌性小鼠;LN模型组:SPF级MRL/1pr雌性小鼠, 各6只。
1.2 试剂及仪器:Trizol Reagent (Invitrogen公司) , Prime Script RT PCR试剂盒 (宝生物工程有限公司) , 2×Easy Taq PCRSuper Mix试剂盒 (全式金生物技术有限公司) , PCR引物合成 (瑞真生物技术有限公司) , T Gradient PCR仪 (Biometra公司) , 胎牛血清 (GIBCO) , CTGF酶联免疫吸附法试剂盒 (瑞齐生物公司) , 还原型谷胱甘肽 (重庆药友制药有限责任公司) 。
1.3 取16周龄SPF级MRL/1pr雌性小鼠及C57BL/6雌性小鼠各6只, 断颈法处死。分别于无菌环境下分离肾小管节段, 采用胰蛋白酶消化各于六孔板细胞培养板传代培养肾小管上皮细胞, 稳定培养至第3代, 分3个实验为组, 每组6个样本处理如下: (1) 正常对照组肾小管上皮细胞 (NS 0.9%干预) (2) 狼疮小鼠肾小管上皮细胞 (NS 0.9%干预) (3) 狼疮小鼠肾小管上皮细胞 (GSH 0.5mg/ml干预组) 。
1.4 细胞培养至第5天, 用TrizolReagent分别提取细胞总R N A, 反转录成c D N A用荧光定量P C R方法检测C T G F的m R N A水平 (各步骤均按照试剂盒说明操作) 。3-磷酸甘油醛脱氢酶 (GAPDH) 为内参照;上海英骏生物技术有限公司合成引物:G A P D H (1 5 0 b p) 上游:TGTGTCCGTCGTGGATCTGA, 下游:TTGCTG T T G A A G T C G C A G G A G;CTG F (11 2 b p) 上游:G T G T G T G A C G A G C C C A A G G A, 下游:AGTTGGGTCTGGGCCAAATGT, 反应条件95℃5min→94℃10s→59℃, 45个循环。重复3次独立的RT-PCR全过程。以倍比稀释的c DNA为模板制作标准曲线, R2>0.98。经细胞裂解液裂解细胞, 酶联免疫吸附法检测CTGF蛋白浓度。
2 实验结果
2.1 统计学处理
用SPSS15.0统计软件进行统计分析, 数据用均数±标准差 (x-±s) 表示, 两样本比较用t检验。P<0.01为差异有统计学意义。
2.2 CTGF的表达检测结果
见表1。
3 结论
狼疮小鼠肾小管上皮细胞内CTGF m RNA及蛋白表达均明显高于正常对照 (P<0.01) , 经GSH干预培养后, 狼疮小鼠肾小管上皮细胞内CTGF m RNA及蛋白表达均降低 (P<0.01) 。
4 讨论
在对终末期肾病肾小管间质病变中, 已经证实免疫性炎症联合氧化损害可以引起TGF-β1合成和分泌, 刺激肾小管上皮细胞分泌C T G F, C T G F作用于间质细胞及肾小管上皮细胞, 促使胶原合成和细胞外基质的堆积、成肌纤维细胞的形成, 使肾间质纤维化发展。既往研究证实, 在LN病理中, 炎症损害导致活性氧分子大量产生, 致使抗氧化防御稳态失衡;同时机体内最重要的抗氧化因子GSH水平下降[4], 导致肾小管上皮细胞CTGF合成增加, 加速肾间质纤维化发展。本研究证实, 在狼疮小鼠肾小管上皮细胞中, CTGF表达高于正常对照组, 国内也有研究发现正常肾组织没有或只有极少量CTGFm RNA转录和蛋白表达[5], LN患者肾组织CTGF表达量显著增加, 并与肾小管间质病变程度成正比[6], 进一步说明在狼疮小鼠肾小管上皮细胞中CTGF的高度表达, 参与介导了肾间质纤维化改变。
既往研究证实, 在狼疮患者脂质过氧化与肾脏和动脉病变存在统计学关联[7], LN患者体内普遍存在氧化应激, 与免疫性炎症一起参与肾病的发病与病程进展, 机体内抗氧化功能相对或绝对的降低, 出现氧化/抗氧化失平衡, 导致肾组织氧化损害。GSH是抗氧化防御系统中的最主要成分, 可以直接对抗活性氧自由基, 减少氧自由基对肾组织的损伤作用。目前研究证实:在SLE患者体内GSH水平明显降低[8]。在本研究中, 经过GSH干预培养的肾小管上皮细胞内CTGF表达明显降低, 说明GSH可能通过改善细胞氧化应激状态降低CTGF的表达, 从而对其介导的胶原增生有一定的阻断作用。这种阻断效应可用于改善狼疮性肾病的长期预后, 减缓间质纤维化进程, 保护残存肾单位功能。目前在多种肾病的临床治疗过程中已经使用GSH抗氧化损害, 对于肾功能及预后有所改善[9,10], 进一步的研究需要监测经过GSH治疗的SLE患者肾组织CTGF以及纤维化程度, 评估其对肾间质纤维化的治疗效果, 可能为探索抗纤维化治疗提供的更多依据。
摘要：目的 研究还原型谷胱甘肽 (GSH) 对MRL/lpr小鼠 (狼疮小鼠) 肾小管上皮细胞结缔组织生长因子 (CTGF) 的表达, 明确抗氧化药GSH对肾小管上皮细胞表达CTGF的影响。方法 传代培养正常小鼠及狼疮小鼠肾小管上皮细胞至第3代, 使用GSH干预生长MRL/lpr小鼠肾小管上皮细胞, 培养5 d后检测CTGF蛋白及mRNA的表达。结果 狼疮小鼠肾小管上皮细胞内CTGF表达明显高于正常对照组 (P<0.01) 。经GSH干预后MRL/lpr小鼠模型肾小管上皮细胞CTGFmRNA表达较未处理组显著降低 (P<0.01) 。结论 狼疮小鼠肾小管上皮细胞内CTGF表达明显升高, 抗氧化剂GSH干预可抑制狼疮小鼠肾小管上皮细胞CTGF表达。
关键词：还原性谷胱甘肽,肾小管上皮细胞,结缔组织生长因子
参考文献
[1]Llacuna L, MaríM, Lluis JM, et al.Reactive oxygen species mediate liver injury through parenchymal nuclear factor-kappaB inactivation in prolonged ischemia/reperfusion[J].Am J Pathol, 2009, 174 (5) :1776-1785.
[2]平芬, 牛占丛, 马国强, 等.N-乙酰半胱氨酸对慢性阻塞性肺疾病急性加重患者氧化应激的影响[J].河北医药, 2013, 35 (9) :1285-1287.
[3]姜红, 罗钢, 王淑兰.狼疮肾炎患者氧化损伤及抗氧化功能的评价[J].中华风湿病学杂志, 2003, 7 (7) :181-183.
[4]Libetta C, Sepe V, Esposito P, et al.Oxidative stress and inflammation:Implications in uremia and hemodialysis[J].Clin Biochem, 2011, 44 (14/15) :1189-1198.
[5]张丽英, 梦雅平.CTGF在IgA肾病肾组织中的表达与临床病理关系[J].中国中西医结合肾病杂志, 2012, 13 (1) :67-69.
[6]吴平, 陈孝文, 江黎明, 等.狼疮肾炎患者肾组织中结缔组织生长因子的转录表达及意义[J].中华风湿病学杂志, 2004, 8 (5) :269-272.
[7]Morgan PE, Sturgess AD, Davies MJ.Increased levels of serum protein oxidation and correlation with disease activity in systemic lupus erythematosus[J].Arthritis Rheum, 2005, 52 (7) :2069-2079.
[8]Tewthanom K, Janwityanuchit S.Correlation of lipid peroxidation and glutathione levels with severity of systemic lupus erythematosus:a pilot study from single center[J].J Pharm Pharm Sci, 2008, 11 (3) :30-34.
[9]张婷英.还原谷胱甘肽联合巴曲酶治疗慢性肾小球肾炎的疗效分析[J].黑龙江医药科学, 2013, 36 (4) :82-82.
CTGF水平 篇6
1 资料与方法
1.1 一般资料
所有病例均为2010年12月~2012年12月在本院肾内科就诊的门诊及住院病例中符合诊断标准和纳入标准的患者, 共84例, 按就诊先后顺序随机分为对照组和观察组各42例。观察组中男28例, 女14例;年龄28~72岁, 平均 (48.2±22.8) 岁;其中慢性肾炎21例, 糖尿病肾病14例, 高血压肾病3例, 痛风性肾病2例, 狼疮性肾病2例。对照组中男26例, 女16例;年龄25~70岁, 平均 (45.9±18.8) 岁;其中慢性肾炎20例, 糖尿病肾病15例, 高血压肾病4例, 痛风性肾病1例, 狼疮性肾病2例。两组在性别、年龄、病种构成比方面均无显著性差异 (P>0.05) , 具有可比性。慢性肾功能衰竭按以下标准加以标准:有慢性肾脏病史和慢性肾功能衰竭临床表现, 内生肌酐清除率 (CCr) <50%, 血清肌酐 (SCr) >177μmol/L, 肾脏超声检查有双肾血流稀疏或肾脏萎缩。排除妊娠或哺乳期妇女及对本药过敏者、精神病患者, 以及合并心血管疾病、严重肝功能不全、内分泌及风湿系统疾病、严重感染和肿瘤等患者。
1.2 治疗方法
两组患者均给予低优质蛋白饮食、积极控制血压、纠正贫血、纠正水电解质紊乱和酸碱失衡、利尿剂的使用等基本治疗, 合并感染者使用抗生素。观察组在基本治疗的基础上, 给予尿毒清胶囊5粒, 3次/d, 1月为1疗程, 连续治疗2个疗程;对照组在基本治疗的基础上加服包醛氧淀粉5克, 3次/d, 疗程同观察组。2月后统计临床疗效, 包括临床症状及各项生化指标的变化。
1.3 观察指标
两组患者均于入院后次日晨抽取空腹静脉血10 m L, 于治疗后12周再次抽空腹静脉血进行检测。所有血样均在冷藏于-20℃之冰箱中密闭保存待用。双抗体夹心酶联免疫吸附法 (ELISA) 测定血清TGF-β1和CTGF, 测定试剂盒购自上海生工生物工程技术有限公司, 按操作说明书进行检测。血BUN和Scr、肌酐清除率 (Ccr) 测定均用常规生化方法检测。
1.4 疗效标准
显效:治疗后, 症状或体征明显减轻或消失, Scr降低≥30%;有效:治疗后, Scr降低≥20%, 自觉症状改善;无效:不符合显效或有效条件者, 自觉症状无改善。
1.5 统计学方法
所有数据用采用SPSS 17.0统计软件进行统计学分析, 计量资料以均数±标准差 (±s) 表示, 组间比较采用t检验, 检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 两组疗效比较
观察组总有效率为85.7%, 明显高于对照组总有效率66.7%, 差异有显著性 (P<0.05) 。见表1。
2.2 两组治疗前后肾功能指标比较
两组患者在治疗后各项指标与治疗前比较, 两组BUN、Scr均明显降低, 差异有显著性 (P<0.05) ;但治疗后对照组患者Ccr升高不明显 (P>0.05) 。观察组在治疗后, BUN、Scr降低较对照组更为明显, Ccr升高更为明显 (均P<0.05) 。见表2。
注:1) 与治疗前比较, P<0.05;2) 与对照组比较, P<0.05
2.3 两组治疗前后血清CTGF、TGF-β1变化情况
注:1) 与治疗前比较, P<0.05;2) 与对照组比较, P<0.05
观察组在降低CTGF、TGF-β1上有明显疗效, 治疗前与治疗后比较有非常显著性差异 (P<0.05) 。对照组CTGF、TGF-β1水平在治疗前与治疗后比较差异无显著性 (P>0.05) 。见表3。
2.4 两组不良反应
两组患者均未出现严重不良反应, 观察组仅少数患者出现腹胀和腹泻, 经对症治疗后缓解, 两组均未观察到发热、皮疹等过敏反应, 所有患者均耐受治疗。
3 讨论
尿毒清颗粒是以清除尿毒素为主的中药复方制剂, 其能够降低血肌酐、尿素氮, 稳定肾功能, 改善贫血, 提高血钙, 降低血磷、血脂, 广泛应用于慢性肾功能衰竭 (chronic renal failure, CRF) 的各期治疗。尿毒清颗粒的主要成分是由大黄、黄芪、甘草、何首乌、白芍、茯苓、白术、丹参和川芎等组成[4]。其中大黄能减少肠道氨的重吸收, 抑制尿素合成, 增加尿素和肌酐排泄;降低血浆中分子物质;影响肾内的细胞因子IL-6和TNF-α的产生从而抑制系膜细胞增生, 抑制TGF-β1刺激的细胞外基质合成;抑制氧自由基产生, 改善脂质代谢紊乱。黄芪、首乌和白芍具有益气生血、利水消肿等作用, 有调节免疫和减轻肾小球纤维化及明显降低尿蛋白、保护肾脏的作用。茯苓、白术和党参具有健脾益肾和利水消肿作用;丹参和川芎具有活血化瘀、扶正祛邪、健脾益肾、通腑降浊和活血化瘀等功效。有文献报道, 黄芪合用川芎嗪注射液治疗糖尿病肾病取得较好疗效, 其机制与改善血液流变性, 从而抑制肾组织纤维化有关[5]。
肾纤维化是各种肾脏疾病慢性进展到最后导致慢性肾功能衰竭的共同机制, 而以肾间质细胞外基质沉积为主要表现的肾间质纤维化过程是影响肾脏功能的重要因素。目前认为TGF-β1是导致肾间质纤维化的最重要的致病因子, TGF-β1是一组新发现的调节细胞生长和分化的TGF-β超家族成员之一。它是糖尿病肾病发生发展过程中致肾小球硬化和间质纤维化的最重要的细胞因子, TGF-β1具有促使肾组织细胞外基质聚集的作用, 它能在蛋白质转录和翻译水平上影响和上调胶原蛋白m RNA的表达, 还能使胶原组织合成增加。并且通过下调基质金属蛋白酶的表达以及促进纤溶酶原激活物抑制剂 (matrix metalloproteinases, MMPs) 和组织金属蛋白酶抑制剂 (tissue inhibitor of matrix metalloproteinases, TIMPs) 的合成使细胞外基质的降解减少。而大量实验已证实结缔组织生长因子 (connective tissue growth factor, CTGF) 是TGF-β1的下游信号因子, 在TGF-β1诱导下, 可由多种细胞分泌并介导TGF-β1的促进细胞增殖和细胞外基质 (ECM) 合成等作用, TGF-β1导致肾间质纤维化的作用是由CTGF完成的。CTGF作为TGF-β1的下游因子, 与肾间质纤维化的关系成为研究的热点。目前, 国内外有关TGF-β1和CTGF在肾间质纤维化中的研究以系膜增生性肾病、糖尿病肾病、Ig A肾病、狼疮性肾炎等肾脏疾病较多见。
本研究发现, 观察组加用尿毒清颗粒治疗在临床疗效方面明显优于对照组, 同时尿毒清胶囊能使血清尿素氮、肌酐均显著下降, 内生肌酐清除率升高, 较对照组有明显优势。上述结果表明, 尿毒清胶囊不仅能改善慢性肾功能衰竭患者的临床症状, 更能降低血清中尿素氮、肌酐水平, 提高内生肌酐清除率, 从而改善肾功能, 改善患者的整体状况, 延缓透析治疗。同时本实验也发现, 尿毒清颗粒明显降低了观察组患者血CTGF、TGF-β1水平, 提示尿毒清可通过降低CTGF、TGF-β1在肾组织的表达, 减少细胞外基质的聚集, 抑制成纤维细胞的增值和胶原合成等作用而达到护肾与抑制纤维化作用。其作用机制可能与尿毒清颗粒中的大黄、黄甚、丹参等成分有关。国内也有研究报道尿毒清胶囊对肾功能衰竭大鼠肾组织胶原沉积、TGF-β1表达具有抑制作用[6]。
虽然透析疗法和肾移植已成为慢性肾功能衰竭替代治疗的有效方法, 但因费用昂贵使其在基层医院的开展受到很大的限制。以尿毒清为主的中西医结合治疗方法能值得基层医院推广使用。同时, 研制以CTGF为靶点的药物可能成为减轻CRF患者肾脏组织纤维化进展从而延缓病情进展的一条可行途径。
参考文献
[1]MOE SM, CHEN NX.Pathophysiology of vascular calcification in chronic kidney disease[J].Circ Res, 2004, 95 (6) :560-567.
[2]COZZOLINO M, DUSSO AS, SLATOPOLSKY E.Role of calciumphosphate product and bone-associated proteins on vascular calcification in renal failure[J].J Am Soc Nephrol, 2001, 12 (11) :2511-2516.
[3]RAGGI P, BOULAY A, CHASAN-TABER S, et al.Cardiac calcification in adult hemodialysis patients.A link between end-stage renal disease and cardiovascular disease[J].J Am Coll Cardiol, 2002, 39 (4) :695-701
[4]曾瑜.尿毒清治疗慢性肾功能衰竭病人的疗效观察[J].广西医学, 2005, 27 (9) :1445-1446.[4]ZENG Y.Efficacy of Niaoduqing treatment of chronic renal failure patients[J].Guangxi Medical Journal, 2005, 27 (9) :1445-1446.Chinese
[5]韦明欣.慢性肾功能衰竭早期中西医结合治疗32例报告[J].广西医学, 2000, 22 (2) :312-313.[5]WEI MX.Clinical reported of 32 cases of chronic renal failure and early treatment of integrative medicine[J].Guangxi Medical Journal, 2000, 22 (2) :312-313.Chinese