人乳头状瘤病毒检测

人乳头状瘤病毒检测（共8篇）

人乳头状瘤病毒检测 篇1

人乳头状瘤病毒 (HPV) 是一种双链DNA病毒, 高危型HPV感染与宫颈癌密切相关。宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一, 为了妇女高危型人乳头瘤病毒感染状况, 对1255例妇女采用荧光定量PCR检测妇女宫颈分泌物, 检测高危型人乳头瘤病毒感染检测结果总结如下。

1资料与方法

1.1 一般资料

2011年2月-2012年12月在南宁市妇幼保健院就诊的患者和体检查妇女, 年龄18～62岁。

1.2 方法

采用荧光定量PCR检测妇女宫颈分泌物, 检测高危型人乳头瘤病毒感染状况, 随机收录统计1255例标本检测结果。

2结果

采用荧光定量PCR检测妇女宫颈分泌物, 共检测高危型人乳头瘤病毒HR-HPV-DNAⅧ型 (16、18、31、33、45、52、56、58亚型) 1255例, 检出高危型人乳头瘤病毒感染75例, 检出阳性率5.98%。

3讨论

本调查表明, 采用荧光定量PCR检测妇女宫颈分泌物, 高危型人乳头瘤病毒感检出阳性率5.98%, 在妇女中HPV的感染状况, 文献报道各有特点, 根据罗宇迪等[1]报道, 玉林市862例女性宫颈人类乳头状瘤病毒检测, 高危亚型检出12个亚型157例次, 高危亚型HPV检出率18.21%, 高危亚型HPV首位是HPV16, 占高危亚型的27.39%, 依次为HPV52占26.11%, HPV58占14.01%, HPV18占10.83%, HPV31占3.18%。根据张春蕾等[2]报道, 采用聚合酶链反应 (PCR) 和DNA反向点杂交相结合的DNA芯片技术对670例女职工进行HPV感染检测, 感染率为12.39% (83/670) , 其中单纯高危型感染占78.31% (65/83) 。根据冯淑燕等[3]报道, 厦门市思明区已婚育龄期1026例育龄妇女的宫颈细胞进行DNA定量分析及宫颈细胞TCT检查, HPV感染人数119例, HPV感染率11.6%, 其中高危型HPV感染105例, 感染率10.2%。本调查表明, 高危型人乳头瘤病毒感检出阳性率相对较低。

人乳头状瘤病毒是一种具有种属特异性的嗜上皮病毒, 属双链闭环的小DNA病毒, 包含约8000个碱基对。人乳头瘤病毒感染与宫颈癌关系的研究成为肿瘤病毒病因研究的热门课题, HPV感染引起癌变与HPV病毒DNA整合入宿主染色体密切相关, HPV的DNA链通常在E1或E2开放读码框内断裂, 使HPV DNA整合入染色体脆弱区, 改变了细胞生长周期的调控机制, 使细胞永生化和对恶性变的防御进一步受到影响[4]。HPV16感染是引发宫颈癌最常见原因, 而与HPV16致癌密切相关的基因为DNA分子上的E2、E6蛋白, E6是病毒癌基因, 它不仅可直接转化细胞, 还可干扰正常细胞的周期调控, 导致细胞无限增殖;E2蛋白是一种特异性DNA束缚蛋白, 可以调节病毒mRNA和其它癌基因的转录及DNA的复制[5]。值得注意的是, 并非所有感染HPV的妇女都会发展为宫颈癌, HPV感染上皮细胞后, 可以呈游离状态持续存在于染色体外, 不引起任何病变, 或引起良性病变[6]。

HPV感染与宫颈癌的发生密切相关, 因此有学者认为, 宫颈癌是一种感染性疾病, 采用抗感染治疗可达到预防宫颈癌发生, HPV感染检测已成为筛查和预防宫颈癌的关键问题之一。防治HPV感染是预防宫颈癌的有效方法, 荧光定量PCR检测妇女高危型人乳头瘤病毒方法简单、准确, 为高危型人乳头瘤病毒感染者治疗提供可靠实验依据, 是降低宫颈癌发生的有效措施。

参考文献

[1]罗宇迪, 邓国生.玉林市862例女性宫颈人类乳头状瘤病毒感染状况分析[J].中国临床新医学, 2009, 2 (12) :1270-1272.

[2]张春蕾, 张青, 袁小林, 等.某院女职工人乳头瘤病毒感染及基因分型检测结果分析[J].国际检验医学杂志, 2012, 33 (6) :689-690, 692.

[3]冯淑燕, 冯淑玲.1026例育龄妇女HPV感染情况调查及分析[J].中国妇幼保健, 2011, 26 (9) :1374-1377.

[4]姚岚.宫颈细胞学检查结合高危型人乳头瘤病毒检测2221例结果分析[D].导师:金仙玉.大连医科大学, 2011.

[5]王金桃.雌孕激素与HPV在宫颈癌发生中的交互作用及相关因素研究[D].导师:高尔生.复旦大学, 2004.

[6]石一复, 李娟清.重视子宫颈疾病的防治[J].中国实用妇科与产科杂志, 2004, 20 (7) :5-6.

人乳头瘤病毒的真情告白 篇2

我的家族成员很多，有100多个，但实际上给宫颈造成麻烦的多半是HPV16和HPV18两个成员而已。

我非常自豪，因为我成就了一名叫豪森的德国老伯，他发现我（HPV）与宫颈癌之间存在明确因果关系，并由此获得了2008年度的诺贝尔医学奖。

其实，我只是个“小角色”而已，与其他 “大腕”，如引起肝癌的乙型肝炎病毒HBV和丙型肝炎病毒HCV，以及引起艾滋病的人类免疫缺陷病毒HIV相比，我只在女性朋友的宫颈上闹点事儿，而且只要您稍有警惕（每两年做1次宫颈癌筛查），我就难成大事。

至于我是如何缠上您的，有时是天知地知您知我知，但很多时候是真的谁也不知。不过通常是通过性行为，但接触不干净的卫生洁具和用品后也可能沾染上我。

其实，并不是一沾上我就会得宫颈癌，只有长期的、持续的、高负荷地与我亲密接触，才会引起宫颈的癌前病变和宫颈癌。

据说，40%的女性在一生中的某个时期都会与我有过接触，但我通常作为访客出现，多半会自动离开。不过如果您的状态不好（免疫力下降）、环境适宜（多个性伴侣、不洁性生活），我就会在您体内定居！

如果妇科医生发现我缠上了您，您当然会紧张和不快，但是，从另一个角度来说，对您也是一件比较幸运的事情。因为，我被暴露后，我的家族的后续破坏工作多半就做不成了。

那么，什么时候要怀疑到我并对我展开调查呢？如果做宫颈薄层液基细胞学检查（即TCT）提示有意义不明的非典型鳞状细胞（称为ASCUS）或者更高程度的病变，那就要进行HPV检测了。如果证实我不在现场（即HPV阴性），您就大可以放心，半年之后复查TCT即可;如果证实我确实在现场（即HPV阳性），您需要进一步检查，做阴道镜和活检。如果TCT发现为更高级别的病变，我就基本应该出来自首了，检查只是留底备案而已。

对我进行调查，有几个途径：一是宫颈薄层液基细胞学检查（TCT）的报告单上会提示;二是其他方法，报告HPV16、HPV18阳性;三是杂交捕获的人乳头瘤病毒检查（HC2），除了报阳性之外，还报具体数值（是半定量，和HPV的量有一定相关性，但不绝对平行），是目前最先进的检查方法。

如果准备怀孕的妇女沾染上我，我建议您还是先把我的大部队打发走了之后再怀孕（HPV 值明显降低）。因为潜伏下来的少量成员一般不会影响妊娠结局。

即使我已经给您带来了伤害（如各种类型的宫颈癌前病变），您仍然是可以搞定我的。狂轰烂炸的攻击（各种针对宫颈病变的物理治疗和锥切）能将我的部队大部消灭，即所谓“治病即治毒”，留下的残兵一般很难组织有效进攻。而且，您自身的免疫能力有可能最终将我“请出”。

基本可以负责任地说，目前还没有口服药物能对付我。在宫颈局部使用干扰素可能有一定效果。目前西方国家已经开发出了新式武器，即治疗性HPV疫苗和预防性HPV疫苗（主要针对HPV16和HPV18）。据他们官方发布的消息，效果还是不错的。

总之，我并非可怕至极，但您的确需要关注我，否则，我真的会闹出点动静来。

人乳头状瘤病毒检测 篇3

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2011年12月-2013年12月在笔者所在医院就诊的98例疑似宫颈病变患者进行研究, 所有患者均经病理学检查确诊, 年龄23~60岁, 平均 (45.3±5.3) 岁;孕次最少0次, 最多4次, 平均 (2.2±0.5) 次;产次最少0次, 最多3次, 平均 (1.5±0.4) 次。按照随机数字表法将患者分为两组, 观察组49例, 对照组49例, 两组宫颈病变患者患者一般资料经均衡性检验差异均无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2 方法

对照组行单纯TCT检测, 观察组行TCT联合高危人乳头状瘤病毒DNA检测, 并对其检测符合率展开对比分析。

TCT检查:利用无菌棉签擦拭宫颈表面分泌物, 然后对患者宫颈外口鳞柱状交接部位和宫颈管处脱落的细胞进行收集, 收集时应选用专门的毛刷进行, 收集后将脱落细胞置入专用保存瓶中, 保存瓶中应置入适量Thin prep, 并将其支撑薄层的细胞涂片, 利用95%的乙醇进行固定, HE染色, 并在光镜下阅片。

高危人乳头状瘤病毒DNA检测, 在患者宫颈口内插入无菌棉拭子, 旋转5周, 然后再无菌试管中置入无菌棉拭子, 根究第二代杂交捕获试验法, 采用免疫学技术检测标本中所含有的13种高危型人乳头状瘤病毒进行检测。高危型人乳头状瘤病毒主要包含:人乳头状瘤病毒16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型。

1.3 判定标准

TCT检测结果:低度鳞状上皮内病变 (LSIL) 、无上皮内病变的不典型鳞状细胞和腺细胞病变 (ASCUS) 、鳞状细胞癌 (SCC) 、不典型腺细胞 (AGC) 、高度鳞状上皮内病变 (HSIL) 。

高危人乳头状瘤病毒DNA检测结果:以受检标本相对发光单位为标准, 阳性:对照标本中HPV-DNA负荷量≥1.0 pg/ml;阴性:HPV-DNA负荷量<1.0 pg/ml[1]。

1.4 统计学处理

采用SPSS 18.0软件对所得数据进行统计分析, 计量资料用均数±标准差 (±s) 表示, 比较采用t检验;计数资料比较采用X2检验, P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

采用TCT联合高危人乳头状瘤病毒DNA检测方式对观察组患者开展宫颈癌前病变诊断, 其诊断符合率和采用单纯TCT检测的对照组相比差异有统计学意义 (P<0.05) , 具体见表1。

3 讨论

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤疾病, 其发生率仅低于乳腺癌, 据统计全球每年约有46.9万人发生宫颈癌, 而我国每年宫颈癌新发病例则占全球每年新发病例的28.8%, 对女性健康造成严重的威胁[1,2]。患者多为绝经后妇女, 近些年也逐渐趋向年轻化;且研究表明宫颈癌具有发现晚、病变重、致死率高等特征。虽然宫颈癌的恶性程度较高, 然而该病具有较长的进展期, 患者自宫颈瘤样上皮病变发展至宫颈癌所需时间大约可长达十年。因而, 及早进行诊断, 早期发现宫颈瘤样上皮病变对减少宫颈癌发生、降低患者死亡率有着不可替代的作用。

有研究表明人乳头瘤病毒是导致宫颈癌发生的一项高危因素, 高危型人乳头瘤病毒持续感染是导致宫颈发生癌前病变及浸润性宫颈癌的一项重要因素。研究表明宫颈癌细胞学及病理学诊断疾病越高, 其发生人乳头瘤病毒的感染的几率也就越大, 据调查, 感染人乳头瘤病毒的患者发生宫颈癌的几率可增长250倍[3]。然而并非所有感染人乳头瘤病毒的患者均存在有不同程度的宫颈病变, 多数单纯感染人乳头瘤病毒的患者其人乳头瘤病毒感染症状表现为一过性, 通常可在8~10个月左右消失。临床上通常将人乳头瘤病毒作为细胞学检测的一项重要组成部分, 以有效的提高宫颈病变的诊断率, 减少宫颈癌发生。故而, 及早诊断人乳头瘤病毒感染, 并展开针对性治疗, 降低宫颈癌发病率就显得尤为重要。

TCT检测是目前临床上检测宫颈病变的常用方式之一, 该诊断方式在宫颈病变诊断方面有较大的优势, 其不仅可收集宫颈管细胞, 而且还可将宫颈黏液和炎性细胞去除, 从而可有效的提高宫颈病变的诊断率[4]。

人乳头瘤病毒是一种环状双联DNA病毒, HPV-DNA多数以整合形式在宿主细胞基因中生存, 故而, 临床上通常将人乳头瘤病毒检测作为诊断宫颈癌前病变的一项常用方式[5]。该检测方式是一种液相杂交和信号放大的HPV-DNA检测技术, 其操作方法较为简单, 且具有较高灵敏度、特异度[6]。另外, 该检测方式还可通过定量分析的方式对TCT检测中所存在的不足之处进行弥补。对两种检测方式进行联合应用可为宫颈癌前病变的诊断提供更加可靠的依据。

本研究中采用TCT联合高危人乳头状瘤病毒DNA检测方式对观察组患者开展宫颈癌前病变诊断, 其诊断符合率和采用单纯TCT检测的对照组相比差异有统计学意义 (P<0.05) , 这就表明采用TCT联合高危人乳头状瘤病毒DNA检测方式诊断宫颈癌前病变的准确率较高, 可为临床诊疗提供依据, 值得推广应用。

摘要：目的:探讨液基薄层细胞学 (TCT) 联合高危人乳头状瘤病毒 (HPV) DNA检测在宫颈癌前病变诊断中的应用价值。方法:收集98例经病理学检测确诊为宫颈癌前变的患者, 按照随机数字表法将患者分为两组, 观察组49例, 行TCT联合高危人乳头状瘤病毒DNA检测, 对照组49例, 行单纯TCT检测, 对其检测符合率展开对比分析。结果:TCT联合高危人乳头状瘤病毒DNA检测在宫颈癌前病变诊断方面的诊断符合率明显高于单纯进行TCT检测的对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。结论:采用TCT联合高危人乳头状瘤病毒DNA检测方式诊断宫颈癌前病变的准确率较高, 可为临床诊疗提供依据, 值得推广应用。

关键词：TCT,高危人乳头状瘤病毒,宫颈癌前病变

参考文献

[1]梁媛哲, 玛依努尔·尼亚孜, 朱开春.新疆妇女宫颈癌前病变中高危HPV型别与HPVL1壳蛋白表达的相关性研究[J].现代预防医学, 2014, 41 (13) :2359-2361.

[2]徐永君, 蔡少妃, 张云云.人乳头瘤病毒定性检测与液基薄层细胞学检查在绝经后宫颈癌前病变中的诊断价值分析[J].中国妇幼保健, 2014, 29 (16) :2586-2588.

[3]刘丽燕, 刘丽丽, 赵正云, 等.液基细胞学检查与阴道镜对宫颈癌前病变的诊断价值[J].检验医学与临床, 2014, 11 (15) :2041-2042, 2046.

[4]陈听华, 虞永麟.宫颈HPV感染、CIN及宫颈癌3年发生情况分析[J].中国妇幼保健, 2011, 26 (13) :1945-1946.

[5]黄川英.液基细胞学与人乳头瘤状病毒联合检测分析对宫颈癌筛查的临床价值[J].中外医学研究, 2011, 9 (35) :6-8.

人乳头状瘤病毒检测 篇4

1 资料与方法

1.1 研究对象

1.1.1 对象

从我院2010年1月—2015年1月期间收治的宫颈细胞学异常患者中随机抽取2 820例进行人乳头状瘤病毒检测, 其中, 年龄20岁~30岁患者830例;年龄31岁~40岁患者1 171例;年龄41岁~50岁患者687例;年龄51岁~60岁患者99例;年龄60岁以上患者33例。

1.1.2 纳入标准

①宫颈细胞学检查异常。②宫颈癌及其癌前病变等。

1.2 检测方法

1.2.1 第二代捕获杂交法

第二代捕获杂交法是利用分子生物学技术在分子 (DNA) 水平直接检测引起宫颈癌的元凶, 是目前全球最有效、最准确的宫颈癌早期检测手段;是所有人乳头状瘤病毒检测方法中惟一获得美国FDA认证的技术, 同时也获得欧洲CE及中国SDA认证。

1.2.2 核酸杂交技术检测

是一种理想的人乳头状瘤病毒检测及准确分型检测方法, 人乳头状瘤病毒核酸扩增分型检测试剂盒可以快速准确诊断妇女宫颈细胞样本21种人乳头状瘤病毒的存在。

我院采用核酸杂交技术, 核酸分子杂交技术不仅能对人乳头状瘤病毒进行确诊, 而且还能对人乳头状瘤病毒进行分型。其利用放射性核素或生物标记的HPV-DNA探针来检测标本中是否存在互补的核酸链[2]。

对所有患者采取同样的基础治疗与饮食条件, 这些过程由专业人员来进行操作检测, 并严格执行。

2 结果

2.1 人乳头状瘤病毒各亚型分布

对2 820例患者进行人乳头状瘤病毒检测, 感染患者共计1 023例, 其中高危型644例, 低危型124例, 中国人常见亚型89例, 混合感染166例;高危型包括13种, 低危型包括5种, 中国人常见亚型包括3种。见表1。

2.2 人乳头状瘤病毒感染患者年龄分布

在不同年龄段, 人乳头状瘤病毒感染率呈现出明显的差异。20岁~30岁患者中有32.65%感染HPV;31岁~40岁患者中有37.83%感染HPV;41岁~50岁患者中有38.86%感染HPV;51岁~60岁患者中有21.21%感染HPV;60岁以上患者中, 有63.64%例被感染HPV。见表2。

3 讨论

人乳头状瘤病毒感染大体上可分为黏膜表面感染和皮肤感染, 但这种差别并不是绝对的。临床表现则多种多样, 感染可以是无症状的, 或产生可察觉到的良性疣, 或产生反复发作的逐渐生长的不易治疗的病理损伤, 还有的可转为侵入性肿瘤, 是引发宫颈癌的主要原因。感染病毒后潜伏期最短6周, 最长2年[3]。有性生活的女性可以在30岁以后开始进行HPV-DNA检查, 检查结果为阴性的, 说明没有被HPV感染, 在很长一段时间内不会有患子宫颈癌的危险, 可以隔3年再做此项检查;检查结果为阳性的, 也不一定就会发展成子宫颈癌, 因为体内的免疫系统有可能将病毒消灭掉, 只是有发展成子宫颈癌的可能。

其感染情况在不同年龄段中呈现明显规律性变化, 60岁以上患者人乳头状瘤病毒的感染率为63.64%, 是所有年龄段中感染率最高的;51岁~60岁患者感染率最低, 为21.21%;20岁~30岁患者、31岁~40岁患者及41岁~50岁患者的感染率相近, 均在35%左右。主要原因是随着年龄的增长, 女性性生活频率会逐渐增加, 生育的机会也大大提高, 导致感染人乳头状瘤病毒的概率大大提高;60岁以上女性虽然性生活频率降低、生育减少, 但是由于自身免疫力的退化, 导致对普通病毒感染抵抗力大大降低, 因此60岁以上女性更易感染人乳头状瘤病毒, 从而导致宫颈癌、阴道癌的发生。

本文调查结果表明, 60岁以上女性更易感染人乳头状瘤病毒, 从而引发宫颈癌, 因此, 年龄在60岁以上的女性应该更加注意对人乳头状瘤病毒的检测, 从而可以大大降低由人乳头状瘤病毒引发的肛门癌、宫颈癌、舌癌、喉癌等癌症[4]。目前人乳头状瘤病毒高危型在人群中最为普遍, 应当加强对高危型人乳头状瘤病毒的检测和治疗研究。宫颈人乳头状瘤病毒的感染检测效果显著, 适用范围广, 值得临床推广。

参考文献

[1]侯萌, 李娜, 朱广霞, 等.妇科门诊患者宫颈人乳头状瘤病毒的感染情况分析[J].西安交通大学学报 (医学版) , 2013, 34 (2) :229-233.

[2]陈友军, 唐双阳, 李乐.衡阳地区2 749例女性宫颈人乳头状瘤病毒感染情况分析[J].中国现代医药杂志, 2013, 11 (1) :7-10.

[3]魏红, 陈竹, 曾义岚, 等.抗梅毒治疗对妊娠梅毒预后的影响分析[J/CD].中华实验和临床感染病杂志 (电子版) , 2013, 14 (4) :571-572.

人乳头状瘤病毒检测 篇5

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取梅州市人民医院2012年12月-2013年12月门诊及住院病人送检的宫颈分泌物。以阴道张开器暴露宫颈，将宫颈刷置于宫颈口，轻轻搓动宫颈刷使其顺时针旋转5圈，慢慢取出宫颈刷，将其放入标有对应患者编号的取样管中，取样管内已加有专用细胞保存液，拧紧瓶盖，马上送检标本。不能马上送检者于4℃保存，2周内进行检测。

1.2 主要仪器及试剂

PCR扩增仪、凯普医用核酸分子快速杂交仪、潮州凯普生物化学有限公司人乳头状瘤病毒分型检测试剂盒(PCR+膜杂交法)。

1.3 研究方法

1.3.1 HPV-DNA的提取

取500μL临床样本，14000 rmp离心1 min，去上清液，沉淀中加入400μL溶液Ⅰ(事先在45℃水浴中预热)，振荡混匀，100℃加热15 min；点动离心，加入400μL溶液Ⅱ，振荡混匀后，室温下放置2min,14000 rmp离心5 min，去上清；室温放置2 min，加入60μL溶液Ⅲ充分溶解，静置10 min,14000 rmp离心1min，得待测HPV-DNA悬液。

1.3.2 HPV-DNA的扩增及杂交

取PCR反应管若干，分别加入23.25μL PCRMix、0.75μL Taq酶和1μL HPV-DNA悬液，混匀后6000 r/min瞬间(3～5 s)离心，将各反应管放入PCR仪，按下列条件扩增：95℃9 min预变性，然后按95℃20 s→55℃30 s→72℃30 s扩增，共40个循环，最后72℃延伸5 min。杂交前试剂先配置，然后采用凯普杂交仪杂交，显色反应结束后，用吸水纸吸去膜条表面多余水分，根据显色情况判断HPV感染情况及其亚型。

1.4 质量控制

每张膜条含Biotin对照点和内对照点(IC),Biotin点反映酶与显色液反应，在检测中为阳性，IC点为质控模板DNA探针，若扩增反应体系中没有抑制因素，IC点出现。

1.5 统计学分析

应用SPSS 17.0统计软件，计数资料比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV基因型感染分布情况

8387例标本共检出20种亚型(35型未检出)，总感染率为13.85%(1162/8387)，高危型检出率为12.56%(1053/8387)，低危型检出率为1.30%(109/8387)。检出率较高者分别为:低危型6型5.82%，高危型16型4.30%、58型2.22%、52型2.49%、18型0.98%、53型0.95%。其中，46～55岁的16型发病率达10.63%,>55岁的16型发病率为9.06%。

2.2 HPV高危型主要型别的年龄分布情况，见附表。

注：*与该型其他年龄段感染率相比，P<0.05

16型，18型，53型36～45岁的发病率均较其他年龄组低，呈现两边高，中间低趋势；18型，52型，53型，58型的≤25岁的发病率均较其他年龄组高。将不同年龄分组比较，发现16型、53型、58型的总分组比较，P<0.05，差异具有统计学意义。其中，16型中的36～45岁的发病率与其他年龄组比较，P<0.05，差异具有统计学意义，可以认为36～45岁的发病率与其他年龄组的发病率不同；53型、58型中的≤25岁的发病率与其他年龄组比较，P﹤0.05，差异具有统计学意义。另外，16型中的≤25岁和26～35岁分别于其他年龄组比较，P<0.05，差异也具有统计学意义，但两组之间比较P=0.513，差异没有统计学意义。表明36～45岁的妇女是HPV16型感染的高危人群，≤25岁的妇女是HPV53型、58型感染的高危人群，人群中应加强两个年龄组的HPV感染的筛查。

2.3 HPV基因型多重感染情况

HPV感染阳性的1162例中以单基因型感染为主(988例，占85.03%)，双重感染(同时感染两种基因型)146例，占12.56%，三重感染21例，占1.81%，四重感染5例，占0.43%，六重感染2例，占0.17%。未检测到五重感染的。

3 讨论

近年来，HPV病毒感染的患者在不断增加，严重危害社会的健康。HPV病毒能引起细胞变异，并可导致皮肤产生寻常疣、生殖器官产生尖锐湿疣。HPV病毒高危型(16型、18型)感染是导致宫颈癌的高危因素。而宫颈癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一，仅次于乳腺癌，在全球女性恶性肿瘤中占第二位[1]。梅州地处偏远山区，医疗条件相对落后，探讨HPV感染基因型与年龄分布的关系，有助于发现高危感染人群，有针对地筛查易感人群，预防宫颈癌等难治性疾病的发生。

HPV总感染率为13.85%，高危型检出率为12.56%，低危型检出率为1.30%，与国内报道的基本一致，但有一定的区域特征[2,3,4]。说明本研究采用的基因扩增及反向点导流杂交技术能准确检测出HPV并分型，是HPV-DNA分析较理想的一种方法。有文献报道HPV亚型分布具有地域性，HPV16型在国内外较多见[5]。本研究探讨的梅州地区HPV16型的占4.30%，仅次于6型的5.82%，但6型属于低危型，在高危型中，除16型检出率最高外，58型、52型、18型、53型的检出率也较高。均符合亚洲地区高HPV流行状况。综上，基因扩增及导流杂交法可准确进行HPV基因分型，且快速、敏感，是较理想的宫颈癌筛查方法。

HPV感染率高低主要取决于人群的年龄和性行为习惯。生殖道HPV在有性活动的人群中普遍存在，在有性生活的女性中,至少有75%将在人生中的某个时间感染HPV，染HPV后绝大多数人可以自然消退[6]。本研究HPV感染具有的年龄分布特征，可能因为≤25岁的年轻人思想较为开放，婚前性行为活跃，导致HPV感染概率上升。>55岁的妇女，虽然性生活减少，年轻时感染的HPV可能已经被机体消除，但机体抵抗力下降可能是导致HPV感染概率上升较主要的因素。所以应加强≤25岁和>55岁的妇女的筛查，并对HPV感染的女性进行随访，以便及早发现高危型HPV的感染，及早进行治疗，防止病情向宫颈癌等方向恶化。

本研究人群为医院门诊体检患者及部分妇科住院患者，HPV是导致官颈癌及癌前病变的主要原因之一。对宫颈疾病患者进行HPV亚型检测及流行病学调查，对本地区宫颈癌的早期预防、治疗及治疗效果监测都有重要意义。

参考文献

[1]董爱荣.HPV引发宫颈癌的机制研究[J].中国现代医师,2012,50(34):33-34.

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人乳头状瘤病毒检测 篇6

1 资料与方法

1.1 研究对象

笔者研究78例宫颈CIN(包括CINⅠ级28例、CINП级25例、CINШ级25例)石蜡包埋组织均来自广西医科大学第一附属医院病理科2006~2009年经病理证实的存档病例,所有病例均行HE染色复查筛选,年龄22~72岁,平均(39.1±4.9)岁,标本取材前均未行放疗和化疗。

1.2 材料与试剂

HPV分型检测试剂盒为深圳亚能生物技术有限公司产品,检测的HPV亚型包括18种高危型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66,68、73、83和MM4)和5种低危型(6、11、42、43和44)。阳性对照为亚能(深圳)生物技术有限公司提供的HPV35阳性病例,空白对照以蒸馏水取代DNA提取液。

1.3 实验方法

宫颈CIN石蜡组织标本4μm切片5片置EP管底,加入裂解液100μL,100℃水浴10 min后立即13 000 r/min离心10 min,取中层DNA溶液5μL加入含有通用引物的20μL PCR反应体系进行扩增,PCR扩增条件为:50℃15 min,95℃10 min,94℃30s,42℃90 s,72℃30 s,40个循环后72℃延伸5min。将固定了23种探针的膜条标记后与PCR产物一起放入6 mL杂交液A(2×SSC,0.1%SDS)中,100℃变性10 min后置于51℃杂交箱进行杂交1.5h,杂交后将膜条置51℃预温的洗涤液B(0.5×SSC,0.1%SDS)漂洗5 min,再用POD酶溶液(1∶2 000)于室温轻振摇30 min,A液摇洗2×5 min,C溶液(0.1 M柠檬酸钠)洗涤2 min,然后放入新配的显色液中显色20 min后肉眼判读结果。

1.4 统计学分析

应用SPSS 13.0统计软件进行数据分析,率的比较采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 结果判读

阳性内对照(PC)位点出现蓝色斑点显示结果为有效结果,本研究的阳性对照为HPV35阳性,阴性对照未见显色。受检样本的阳性在对应的HPV亚型探针位点出现蓝色圆点(附图)。

注:PC为阳性内对照,均出现蓝色圆点。阳性对照显示为HPV35阳性,阴性对照未见显色。基因膜芯片阳性显示为蓝色圆点,出现在相应的HPV亚型探针区域

2.2 CIN病例中HPV感染率

在本研究的78例CIN病例中,HPV阳性53例,阳性率为67.9%。其中CINⅠ级28例中HPV阳性13例,阳性率为46.4%;CINⅡ级25例中HPV阳性16例,阳性率为64.0%;CINⅢ级25例中HPV阳性24例,阳性率为96.0%。HPV阳性率随着CIN级别升高而增加,CINⅢ级明显高于CINⅠ级和CINⅡ级(P<0.05),但CINⅡ级与CINⅠ级差异无统计学意义。

2.3 CIN中HPV高、低危亚型的分布

本研究除CINⅠ级存在2例单纯HPV低危亚型感染,CINⅡ级和CINⅢ级各有1例HPV高、低危亚型复合感染以外,其余均为HPV高危亚型单一或者多重感染。

2.4 CIN中检出HPV亚型的频度分布

基因芯片技术检测的23种HPV亚型中,共检出了13种(HPV6、11、16、18、31、33,45、51、52、56、58、59和66)。在各级别CIN中,HPV16和58亚型均感染率最高,其中HPV16为最常见的感染亚型,CINⅠ级、CINⅡ级和CINⅢ级的感染率依次为14.3%(4/28)、20.0%(5/25)和52.0%(13/25)。HPV58是第2常见感染亚型,CINⅠ级、CINⅡ级和CINⅢ级的感染率分别为10.7%(3/28)、12.0%(3/25)和28.0%(7/25)。随着CIN级别不同,所感染的HPV亚型亦有区别,CINⅠ级感染的HPV亚型依次(递减)为HPV16(4/28)、HPV58(3/28)、HPV52(2/28)、HPV66(1/28)、HPV6(1/28)和HPV11(1/25);CINⅡ级为HPV16(5/25)、HPV58(3/25)、HPV18(3/25)、HPV52(2/25)、HPV33(1/25)和HPV51(1/25);CINⅢ级为HPV16(13/25)、HPV58(7/25)、HPV33(4/25)、HPV18(2/25)、HPV31(2/25)和HPV52(1/25)。

2.5 CIN中HPV单一感染和多重感染

在HPV阳性的53例样本中,单一HPV感染44例(83.0%),双重HPV感染8例(15.1%),三重HPV(HPV16、33和59)感染1例(1.9%)。其中在CINⅠ级HPV阳性的13例中,单一感染12例(92.3%),未见双重感染,三重感染1例(7.7%);在CINⅡ级HPV阳性的16例中,单一感染15例(93.8%),双重感染1例(6.2%),未见三重或以上多重感染;在CINⅢ级HPV阳性的24例中,单一感染17例(70.8%),双重感染7例(29.2%),未见三重或以上多重感染。所检出的13种HPV亚型中,除了HPV31只见双重感染以外,其他亚型均存在单一感染。

3 讨论

目前,对宫颈癌的发病原因尚未完全明确,流行病学调查认为,宫颈癌的发生与其他肿瘤一样,是一个多因素参与、多基因改变、多阶段、多途径的发展演进过程。而至今得到公认的是宫颈癌从CIN逐步发展而来,在这个过程中,高危型HPV持续感染被认为是最重要的作用因素,是导致宫颈癌发生的必要条件[2]。因此,HPV检查在疾病诊断以及妇女健康普查中都倍受人们的重视,检查方法多样化,而近年发展起来的基因芯片技术的原理是集基因扩增和核酸杂交技术于一体,针对HPV E1基因设计通用引物,对目的基因进行PCR扩增,然后与固定在尼龙膜上的23种HPV亚型(包括18种高危亚型HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83、MM4和5种低危亚型HPV6、11、42、43、44)探针杂交,通过显色直接肉眼阅读感染的HPV亚型,具有高通量、高敏感性、强特异性的特点。此技术目前多应用于新鲜组织标本或者脱落细胞的HPV分型检测,用于石蜡标本检测尚少见报道,而笔者的研究结果证实了基因芯片技术应用于石蜡包埋组织中HPV分型检测的可行性,可以作为病理诊断的辅助手段,具有广阔的应用前景。

笔者研究检测的78例CIN病例中,HPV的感染率高达67.9%。其中CINⅠ级、CINП级和CINШ级的HPV检出率分别为46.4%、64.0%和96.0%,结果显示,CIN患者存在着极高的HPV感染,且随着病变级别的上升HPV感染率呈明显升高趋势,与LIU等[3]的研究结果相似,但各病变组的HPV感染率比他们报道的稍低。该结果恰好解释了HPV感染是宫颈CIN逐步发展的必要因素,在低度病变组(CINⅠ)中,部分患者存在HPV感染,当机体免疫清除不利时,HPV病毒得以持续感染,与宿主肿瘤细胞相整合,分别与细胞内肿瘤抑制物p53、p Rb结合使肿瘤抑制物失活,宿主细胞中原癌基因与肿瘤抑制基因发生突变的可能性大大增加,从而导致细胞异常增殖[4,5,6]。在CINⅢ级,HPV感染率明显高于CINⅠ级和CINⅡ级,也进一步证实了HPV持续感染是CIN逐步向前发展的危险因素之一。

笔者的研究结果发现,53例HPV阳性中有51例为高危型(96.2%),此结果解释了高危型HPV持续感染是CIN(尤其是高度病变CINП级、CINШ级)发生、发展的重要因素。但在宫颈CINⅠ级中也出现高危型HPV感染为主,13例HPV阳性病例中仅2例为单纯低危型,与现有报道[7,8,9]CINⅠ级主要感染低危型的HPV6和11亚型不完全一致。分析对比各个研究的实际情况,出现这种差别的原因可能存在以下几点:(1)HPV感染存在地区差异,可能在广西地区各级别CIN患者中均以高危型HPV常见;(2)所选的病例数仅有28例,不一定能全面代表CIN I级HPV感染的整体分布情况;(3)提示CIN I级感染HPV高危亚型的患者具有更进一步往高级别CIN,甚至宫颈浸润癌发展的可能,其预后可能较差。因此,应该对此类患者进行密切随访和定期复查。

与WILEY[8]和SASLOW等[9]的文献报道相一致,笔者研究的CIN病例中,HPV16为最常见的HPV高危亚型,感染率明显高于其他型别,且随着CIN级别上升其感染率逐渐升高,当到达CINШ级时,HPV16感染率超过50%,可见HPV16是导致CIN发生和病变向前发展的最主要亚型。仅次于HPV16的高危亚型是HPV58,这与GUO等[10]研究结果相一致。但频度位于第3及之后的HPV亚型分布在本研究CIN各级别中未见明显规律,可能预示HPV感染具有竞争性,随着CIN级别的上升及机体免疫力的增强,致病力较低的HPV亚型竞争能力较弱,易被机体免疫清除,仅存致病力较高的HPV持续感染而导致疾病向高级别进一步发展。

目前,学者们对HPV单一感染和多重感染与宫颈疾病之间的关系持不一致的观点。陶萍萍等[11]的研究认为,HPV多重感染与宫颈病变呈正相关性,随着宫颈病变级别上升多重感染率呈增加趋势。然而与之相反,CHANG等[12]的研究显示,随着宫颈病变级别上升,多重感染率趋于下降,且宫颈鳞癌HPV感染倾向于单一高危型。本研究结果显示,在各级别CIN中均多以单一感染占优势,多重感染在CINⅠ级和CINⅡ级中的比率未见明显差异,而在CINⅢ级多重感染的比率明显高于CINⅠ级和CINⅡ级。这与前者结论一致,多重感染提示机体免疫机制清除病毒不利,是病毒持续感染的危险因素,从而导致病情的进展,最终发展为高级别CIN甚至宫颈癌。

综上所述,基因芯片技术可以作为临床病理诊断的辅助手段,并且具有独特的优点。利用此技术对HPV进行分型检测,根据感染的亚型预测CIN进一步发展的可能,有利于为CIN患者制定合理的治疗方案,有利于评估CIN的手术效果和药物疗效,同时还能够针对性地指导HPV预防疫苗和诊断疫苗的开发,最终有效地降低宫颈癌的发生率和死亡率。

摘要：目的 探讨广西地区宫颈上皮内瘤变(CIN)石蜡包埋组织中人类乳头状瘤病毒(HPV)分型检测的临床意义及基因芯片技术的应用。方法 应用基因芯片技术分别对CINⅠ级28例、CINП级25例、CINШ级25例病理石蜡包埋组织标本进行HPV分型检测。结果 CINⅠ级HPV阳性率为46.4%(13/28),其中单一感染12例,三重感染(HPV16,33,59)1例;HPV亚型的感染频度依次为(前3位):HPV16(14.3%)、58(10.7%)和52(7.1%)。CINП级阳性率为64.0%(16/25),其中单一感染15例,双重感染(HPV11,18)1例;HPV亚型的感染频度依次为(前3位):HPV16(20.0%)、58(12.0%)和18(12.0%)。CINШ级HPV阳性率为96.0%(24/25),其中单一感染17例,双重感染7例(HPV16和58双重感染为主,共3例);HPV亚型的感染频度依次为(前3位):HPV16(52.0%)、58(28.0%)和33(16.0%)。结论 HPV16和58是广西地区各级CIN中最常见的感染亚型,HPV分型检测能够早期发现病原并且指导后续的治疗;基因芯片技术敏感性高,特异性强,可应用于病理石蜡包埋组织HPV分型检测。

关键词：宫颈上皮内瘤变,人类乳头状瘤病毒,基因芯片技术

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人乳头状瘤病毒检测 篇7

1 材料

1.1 标本来源

收集2007年12月—2009年12月厦门及周边地区18～65岁妇女752例宫颈细胞标本。

1.2 仪器

MastereyelegadientPCR仪(德国Eppendorf公司),荧光定量PCR分析仪(AB 17500)(美国应用生物系统公司)。

1.3 试剂

人乳头瘤状病毒(16/18型)核酸扩增荧光检测试剂盒(深圳匹基生物工程股份有限公司),HPV 16、18型引物序列[6]分别为:上游引物:5'-TACAGGTTCTAAAACGAAAGT-3';5'-TGCATGTTTTAAAACGAAAGT-3'。下游引物:5'-TTCCACTTCAGTATTGCCATA-3';5'-TTCCACTTCAGAACAGCCATA-3'。荧光探针序列为:FAM-5'-ATAATCTCCTTTTTGCAGCTCTACTTTGTTTTT-3'TAMRA;TET-5'-CCGCCTTTTTGCCTTTTTCTGCCCACTATT-3'TAMRA。

2 方法

2.1 标本采集及细胞DNA的提取

细胞学检查采用传统涂片方法,用刮棒刮取宫颈细胞直接涂片。细胞学检查按照The Bethesda System(TBS)分类,对细胞学检查异常病例,用体积约1.5 cm×0.8 cm×0.8 cm无菌棉签插入宫颈口,均匀用力旋转3周将棉签放入装有生理盐水的无菌试管内震荡洗涤,弃棉签,离心沉淀,用沉淀的细胞提取DNA。随后在阴道镜指引下行活检。

2.2 检测与诊断标准

宫颈组织病理学诊断分为:正常或慢性炎症;CIN按轻、中、重分为3级:CINⅠ(相当于宫颈轻度不典型增生)、CINⅡ(相当于宫颈中度不典型增生)和CINⅢ(相当于宫颈重度不典型增生和原位癌)。

2.3 FQ-PCRHPV-16、18DNA定量检测

2.3.1 取试剂盒中HPV 16、HPV 18阳性标准品(浓度为1×107copies/ml),按梯度稀释成1×107、1×106、1×105、1×104copies/ml。20 μl反应体系包括:17.8 μ1 HPV 16、HPV 18反应混合液(含羧基荧光素(FAM)标记的引物及三磷酸脱氧核糖核苷(dNTP)、MgCl2等),0.2 μl TaqDNA聚合酶,0.06 μl尿嘧啶糖苷酶(UCG)(作用:消除反应体系中可能混有的污染),2 μl DNA模板。反应条件为:37 ℃5 min,94 ℃ 1 min;95 ℃ 5 s,60 ℃ 40 s,40次反应循环。每批标本均设阴性对照,阴性对照品为试剂盒提供。

2.3.2 测定各原发灶病毒载量,按照上述反应体系和反映条件测定各标本中的病毒载量。各标本重复测定3次得到平均Ct值,并根据标准曲线推算出各标本的病毒平均拷贝数。

2.3.3 统计学方法 采用SPSS 11.0统计软件,采用χ2检验和Spearman秩相关统计分析结果。

3 结果

3.1 各组感染HPV16及病毒载量检测结果

健康检查者及宫颈炎、CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级患者感染HPV 16阳性率分别为0.63%、25.8%、30.6%、60.7%、71%;χ2检验和Spearman秩相关统计分析随着宫颈病情的进展HPV 16型阳性率逐渐升高(P<0.01),感染率和病毒载量之间有正相关关系(rs=1,P<0.01)(表1) 。

3.2 各组感染HPV18及病毒载量检测结果

健康检查者以及宫颈炎、CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级患者感染HPV 18阳性率分别为0.41%、7.8%、14.6%、10.7%、7.7%。经χ2检验和Spearman秩相关统计分析显示,宫颈炎、CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级患者HPV 18阳性率均比健康体检患者明显增加(P<0.01),宫颈炎、CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级患者HPV 18阳性率差别无统计学意义(P>0.05),感染率和病毒载量之间无正相

4 讨论

目前人乳头状瘤病毒的感染有3个方面:临床感染(有明显湿疣皮损可经肉眼判断的感染,容易识别),亚临床人乳头状瘤病毒感染(需借助醋酸白试验与放大技术相结合可以识别,如阴道镜检查),潜伏性人乳头状瘤病毒。由于潜伏性HPV感染缺乏形态学变化,只有DNA检测是惟一的诊断方法,目前对于HPVDNA的检测主要是通过FQ-PCR技术[7],它不仅从根本上解决了PCR扩增产物污染和不能定量的问题,而且通过探针杂交进一步提高了检测人乳头状瘤病毒特异性,是灵敏、快速、准确的检测方法,常用于检测HPV 16、18型感染,特别是对高危人群的筛查,是目前临床上常用的宫颈病变检查方法。

本实验采用FQ-PCR技术对752例标本HPV 16、18型DNA进行检测,结果显示,健康检查者以及宫颈炎、CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级患者感染HPV 16、18阳性率均比健康检查者明显增加(P<0.01,P<0.05),并且随着宫颈病变的进展HPV 16DNA病毒拷贝数逐渐增加,经过秩和检验二者呈显著正相关关系(rs=1,P<0.01)。这说明宫颈病变患者比正常健康检查者感染HPV 16、18型的概率明显增加,提示HPV 16、18与宫颈病变的发生密切相关,是宫颈癌变的高危因素;其中HPV 16型DNA在宫颈炎、CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级细胞内高拷贝数逐渐增加,说明HPV 16型可能是导致宫颈不典型增生向宫颈癌转化的一个至关重要的因素。

由于宫颈癌是子宫颈不典型增生(轻、中、重)—原位癌—早期浸润癌—浸润癌的连续发展过程,且目前分子生物学已证实大部分HPV感染是一过性的,约90%的HPV阳性者在4～6个月会自动转阴,只有高危型HPV持续感染后病毒DNA整合到宿主细胞DNA中,使其基因表达和蛋白功能发生改变,进而才会导致宫颈肿瘤的发生。因此对健康人群用FQ-PCR的方法对HPV 16、18进行普查,对于宫颈癌的筛查、癌前病变的预防和转归,病情进展的评价方面都具有重要的意义。

摘要：目的 探讨人乳头状瘤病毒(humanpa pillomavirus,HPV)16、18型在宫颈病变进展中表达意义。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real timefluorescence qaantitativePCR,PQ-PCR)分别对健康检查妇女480例、宫颈炎116例、宫颈上皮内瘤样病变(cervicalintraepithelial aeoplasia,CIN)Ⅰ级(轻度宫颈不典型增生)48例、CINⅡ级(中度宫颈不典型增生)56例、CINⅢ级(重度宫颈不典型增生及宫颈原位癌)52例进行HPV16、18型的定性、定量检测。结果 健康检查者以及宫颈炎、CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级患者感染HPV16阳性率分别为0.63%、25.8%、30.6%、60.7%、71%,HPV16型阳性标本平均拷贝数分别为6.3×102、4.1×104、8.9×105、5.6×106、3.8×107;随着宫颈病情的进展HPV16型阳性率逐渐升高(P<0.01),感染率和病毒载量之间有正相关关系(rs=1,P<0.01);HPV18阳性率分别为0.41%、7.8%、14.6%、10.7%、7.7%,HPV18型阳性标本平均拷贝数分别为1.2×103、4.6×104、5.4×104、3.6×103、6.9×104,宫颈炎、CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级患者HPV18阳性率均比健康检查者明显增加(P<0.01),宫颈炎、CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级患者HPV18阳性率差别无统计学意义(P>0.05),感染率和病毒载量之间无正相关关系(rs=0,P>0.05)。结论 宫颈病变程度与HPV16、18型感染密切相关,且宫颈病情进展和HPV16型病毒DNA负荷呈正相关。

关键词：宫颈病变,人乳头状瘤病毒,病毒载量

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人乳头状瘤病毒检测 篇8

1 资料与方法

1.1 一般资料

自2006年1月至2008年12月, 遂川县人民医院共有163例患者经病理组织学诊断为CIN并HPV感染。其中CINⅠ91例、CINⅡ56例、CINⅢ16例。年龄21～68岁 (其中21～30岁41例、31～40岁91例、41～50岁26例、50岁以上5例) , 平均36.5岁。产次0～7次, 平均1.8次。

1.2 方法

对随机前来遂川县人民医院门诊妇科或皮肤性病科就诊的有性生活史的妇女, 进行常规妇检, 对宫颈涂片细胞异常或有临床可疑症状者, 进行阴道镜检查, 经阴道镜在宫颈出现异常转化区或有可疑病变处进行多点活检, 将取出的病理组织固定于10%多聚甲醛溶液中送检, 由专职病理学医师将固定的标本用石蜡包埋, 制成4μm厚的切片进行病理组织学诊断。根据细胞异型程度和上皮累及范围, 病理学将CIN分级为CINⅠ (轻度不典型增生) 、CINⅡ (中度不典型增生) 、CINⅢ (重度不典型增生和原位癌) [3]。然后采用原位杂交检测法对CIN阳性病例进行HPV6/11、16/18 DNA分型, 以半定量判定结果。所有阳性病例均经江西省妇幼保健院的资深病理学专家证实。

1.3 统计学方法

两样本率的比较, 采用u检验, P<0.05有显著差异。

2 结果

163例阳性患者中, HPV6/11 (+) 、16/18 (-) 者58例, 占35.6%;HPV16/18 (+) 、6/11 (-) 者24例, 占14.72%;HPV6/11 (+) 、16/18 (+) 同时存在的75例, 占46%;HPV6/11 (-) 、16/18 (-) 的其他亚型感染6例, 占3.68%。HPV6/11、16/18亚型在各年龄段的分布情况和在CIN各级中的检出率详见列表1、表2。

3 讨论

3.1 HPV在人群中普遍存在, 每个妇女一生中都有可能暴露于一种或多种HPV亚型, 文献报道正常育龄妇女HPV感染率为5%～50%, 宫颈HPV感染的高峰年龄为15～20岁, >30岁的妇女HPV感染率下降[4]。而本组资料的发病高峰年龄为30～40岁, 说明从初次感染HPV到上皮发生改变要经过10～25年漫长过程。而宫颈癌的发病高峰年龄为45～50岁, 相差5～15年。若在此时间内及时诊断, 正确处理, 可以阻断癌变发生, 有效降低宫颈癌的发病率。从表1中看出, HPV6/11感染致CIN在每个年龄段均有发生, 但主要集中在21～40岁的妇女, 占86.21%。

3.2 HPV是一种无包膜的小DNA病毒, 具有强烈嗜上皮性, 高度组织和宿主特异性, 可致人类皮肤和黏膜异常增生。HPV6/11属低危型, 感染后常引起尖锐湿疣等性传播疾病, 但反复持续感染可导致CIN的发生。表2中数据表明, HPV6/11在CIN每个级别中都存在。在CINⅠ中, HPV6/11的检出率明显高于HPV16/18, 二者比较差异显著 (P<0.05) ;而在CINⅡ中, HPV6/11与HPV16/18两者检出率无显著差异 (P>0.05) ;在CINⅢ中, 75%是由HPV6/11、16/18混合感染导致, 单一HPV16/18感染, 只占18.75%, 单一HPV6/11也有1例存在, 占6.25%。HPV6/11、16/18混合感染与单一HPV16/18感染在CIN各级中检出率比较, 经u检验 (u分别为2.106、2.781、6.82;P<0.05) 均有显著差异, 且级别越高, 差异越显著。上述统计结果与以往定义的高、中、低危HPV亚型感染所致病变类型有所差异。HPV6/11虽为低危型, 但感染后可导致多数CINⅠ、部分CINⅡ和个别CINⅢ, 当HPV6/11与HPV16/18混合感染时, 其致癌风险较单一HPV16/18感染增加3～4倍。这反映出无论哪类HPV感染只要是高病毒负荷或持续反复感染或交叉感染, 都有可能是CIN或宫颈癌的致病因素, 混合感染更为主要致癌因素。

总之, 由HPV6/11感染导致CIN的发病风险不容忽视, 尤其是长期反复发作的年龄在21～40岁的持续感染者, 应积极治疗, 定期复查。主张凡患过外生殖器尖锐湿疣等良性病变的妇女, 每半年进行一次宫颈涂片细胞学检查, 有条件的采用免疫组织化学 (PCR技术) 、杂交捕获二代 (HC-Ⅱ) 等手段检测HPV DNA, 细胞异常或HPV阳性者阴道镜下多点病理活检, 以早发现、早诊断、早治疗CIN, 阻断宫颈癌变的发生。

参考文献

[1]Zur Hause H.Papillomariruses and cancer:from basic studies to clinical application[J].Nat Rev Cancer, 2002, 2 (5) :342-350.

[2]陶萍萍, 卡美璐.女性生殖道人乳头状瘤病毒基因型研究进展[J].中国实用妇科与产科杂志, 2005, 21 (8) :507.

[3]乐杰.妇产科学[M].6版.北京:人民卫生出版社, 2005:286-287.