抗酸杆菌（精选6篇）
抗酸杆菌 篇1
近年来, 由于耐药结核病的发生与传播, 高感染人群或高危人群的流动或移民以及对结核病控制放松等因素, 全球结核病疫情呈现回升趋势[1]。结核杆菌细菌学检查是确定结核病诊断和化疗方案的重要依据, 也是考核疗效、评价治疗效果的可靠标准[2]。传统的抗酸染色法是结核杆菌细菌学检查的常用方法, 该染色方法在染色时间以及温度上不易控制。本文旨在探讨该染色方法的最适温度及染色时间, 以便改进结核杆菌染色效果。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
本实验所用卡介苗为成都生物制品研究所产品, 痰标本为本室制作并保存, 萋-纳氏抗酸染色液为杭州天和微生物试剂公司产品。
1.2 模拟痰标本结核杆菌抗酸染色
将卡介苗用2 m L生理盐水稀释, 充分混匀后取适量卡介苗稀释液加入到正常人痰液中, 混匀后涂片, 按照以下方法进行染色:制作模拟痰标本涂片, 固定后分别滴加石炭酸复红染液, 将其放入恒温水浴箱的传热铝板上, 分别在50, 60, 70, 80, 85℃温度下加热3, 5, 10 min;再加盐酸酒精脱色1 min, 流水冲洗;加美蓝染液复染30 s, 流水冲洗, 待干后用显微镜油镜观察细菌的染色性和形态。染色结果判断: (++) , 结核杆菌呈亮红色, 结核杆菌数目≥10条/视野, 背景色较淡, 对比度清晰;+, 结核杆菌呈亮红色, 3条/视野≤结核杆菌数目<10条/视野;-, 结核杆菌呈红色, 结核杆菌数目<3条/视野。
2 结果
结核杆菌模拟痰标本在不同温度和时间下的抗酸染色效果表明, 在染色温度为70℃、染色时间为5 min的条件下, 结核杆菌染色阳性率高, 染色鲜艳, 对比度好, 背景清晰。见表1.
3 讨论
抗酸染色法是结核杆菌细菌学检查的常用方法[3], 其特点为快速、简便、实用, 检出时间短, 对器械要求不高, 一直被基层医院使用, 医学院校在教学过程中也广泛应用该方法。但该方法的染色温度及时间不容易掌握, 在开放空间进行, 有传染风险。本文采用卡介苗来替代结核杆菌进行抗酸染色影响因素研究, 有效地降低了结核杆菌的传染风险。
传统的抗酸染色试验采用酒精灯加热, 难以精确控制染色温度。本文采用水浴加热来代替酒精灯加热, 避免了酒精灯火焰温度过高带来的染液蒸发过快干涸和受热不均等问题, 保证了染色效果。本文结果也显示了水浴加热方式能改进结核杆菌抗酸染色效果, 在染色温度为70℃、染色时间为5 min的条件下, 结核杆菌染色阳性率高, 染色鲜艳, 对比度好, 背景清晰。提示:对临床痰标本进行抗酸染色法检查时, 需要注意染色温度和时间对染色效果的影响, 采用上述染色条件, 有助于获得良好的染色效果。
摘要：目的探讨结核分枝杆菌抗酸染色效果的影响因素。方法将卡介苗涂片放于不同温度和不同时间下的恒温水浴箱中进行初染, 经脱色、复染后, 采用显微镜观察染色效果。结果染色温度为70℃、染色时间为5min时, 结核杆菌染色更鲜艳, 背景清晰。结论加热时间与加热温度是影响抗酸染色法染色效果的重要因素。
关键词：分枝杆菌,结核病,抗酸染色,卡介苗
参考文献
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抗酸杆菌 篇2
1 资料与方法
1.1 标本来源
选取2012年1月-2012年12月来我院就诊的可疑肺结核患者的合格痰标本150份, 容器为一次性无菌玻璃瓶。
1.2 试剂
专用抗酸染液 (潍坊康华公司生产) , 包括5%石碳酸复红溶液, 盐酸乙醇脱色液, 0.03%亚甲蓝复染液, 操作过程按说明书严格执行。
1.3方法
取痰标本10ml于消毒处理过的广口瓶中, 加5倍量蒸馏水, 经121℃高压蒸汽灭菌20min, 冷却后备用。
1.3.1离心集菌法
取上述处理后的痰液10ml放入50ml的离心管内, 加蒸馏水稀释至50ml, 离心30min, 转速3000r/min, 取沉淀物涂片。
1.3.2漂浮集菌法:
取上述处理的痰液10ml置于100ml的细口玻璃容器中, 加入灭菌蒸馏水30ml, 再加入二甲苯0.3ml, 置振荡器上震荡10min, 取出, 加灭菌蒸馏水至满, 静置15min, 取载玻片盖于瓶口, 静置15min, 取下玻片, 干后染色。
1.4 结果判断标准
显微镜下 (目镜10×, 油镜100×) 所见结果报告标准如下:镜下计数100个视野 (观察时间≥4min) , 未发现抗酸菌者继续观察至300个视野, 仍未发现抗酸菌者报告抗酸菌阴性 (-) ;镜检100~300个视野找到抗酸杆菌1~2条者, 报告抗酸杆菌可疑 (±) , 重新涂片或重留标本复检;镜检100个视野找到抗酸杆菌3~9条者, 报告抗酸杆菌阳性 (1+) ;镜检10个视野找到抗酸杆菌1~9条者, 报告抗酸杆菌阳性 (2+) ;镜检每个视野找到抗酸杆菌1~9条者, 报告抗酸杆菌阳性 (3+) ;镜检每个视野找到抗酸杆菌>9条者, 报告抗酸杆菌阳性 (4+) 。
1.5统计学方法
计数资料以率 (%) 表示, 组间比较采用χ2检验, P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
150份痰标本中, 离心集菌法检测阳性75份 (50%) , 阴性75份 (50%) ;漂浮集菌法检测阳性42份 (28%) , 阴性108份 (72%) , 离心集菌法阳性率高于漂浮集菌法, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。
3 讨论
我国目前结核病发病率仍较高, 局部地区有上升趋势。临床上主要依据痰涂片、痰培养、结核抗体检测、X线片等诊断肺结核。实践证明, 结核病的细菌学检查优于X线片, 检测结核抗体无法明确既往感染和现在感染, 虽痰培养在结核病诊断方面具有决定意义[2], 但时间太长, 不宜在临床广泛推广, 目前痰涂片检测抗酸杆菌仍是诊断肺结核和观察临床疗效最直接、简便和有效的方法。
目前, 我院应用浓缩集菌法, 具有操作简单、快速、直观、经济, 无需特殊高端仪器等优点, 适合于各等级的实验室开展, 是发现肺结核传染源的直接手段[3]。笔者采取护理干预收集标本, 固定人员染色和阅片, 选择了能在临床工作中常规使用的浓缩集菌法和漂浮集菌法2种涂片方法进行阳性率比较。本结果显示, 离心集菌法的阳性率高于漂浮集菌法, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。离心集菌法涂片中的细胞、细菌数量较多, 查出抗酸杆菌的几率也较大, 适用于常规检测, 值得临床推广应用。总之, 结核病的细菌学检测是结核病控制、流行病学调查及临床诊断与鉴别诊断的“金标准”, 应引起临床的高度重视和实验室的广泛应用。
摘要：目的 探讨一种操作简单、阳性检出率高的抗酸杆菌痰涂片检查方法。方法 对可疑肺结核患者的痰标本150份采用离心集菌和漂浮集菌2种方法进行检测。比较2种涂片方法的阳性率。结果 离心集菌法的阳性率为50%高于漂浮集菌法的28%, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。结论 痰涂片检测抗酸杆菌仍是诊断肺结核病和观察临床疗效最直接、简便和有效的途径, 并且浓缩集菌法中的离心集菌法优于漂浮集菌法。
关键词：抗酸杆菌,离心集菌法,漂浮集菌法,肺结核
参考文献
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[2] 陈鸣.结核病实验室诊断研究现状[J].临床检验杂志, 2012, 30 (10) :769-771.
抗酸杆菌 篇3
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2009年1月至2015年12月来我院门诊就诊和住院有发热、咳嗽、咳痰等症状的563例患者, 给患者3个无菌痰杯, 嘱其认真留取晚间、清晨和即时的三次由深部咳出的痰液。对送检的痰液性质进行分类并及时涂片, 以火焰固定, 同一病人若多次涂片找到抗酸杆菌, 只计1次阳性。患者年龄为19~97岁。其中男性325例, 女性238例。
1.2 仪器和试剂
仪器为日本OLYMPUS显微镜, 油镜100倍, 目镜10倍。抗酸杆菌染色所使用的染液试剂由珠海贝索 (台资) 生物技术有限公司提供。镜油亦由珠海贝索 (台资) 生物技术有限公司提供。
1.3 方法
痰液涂片后按《全国临床检验操作规程》第3版相关章节的抗酸染色法对标本进行操作, 结果按照抗酸杆菌涂片镜检的报告方式规范报告。对涂片阴性的标本镜检不得少于300个视野, 最好能检查完整个涂片, 同时作详细记录。
2 结果
从563例患者标本中, 共检测出抗酸杆菌35例, 占总数的6.21%。563例不同性状痰液标本与找到抗酸杆菌情况果见表1。并对31例找到抗酸杆菌 (以下简称“涂阳”) 的患者标本进行比对, 结果见表2。从两个表中可以看出各种类型的痰液都找到了抗酸杆菌, 而送检的三次痰液显示不同程度的阳性。因此, 我们在工作中应当慎重对待每一位患者和每一次的痰液标本, 常规痰液涂片找抗酸杆菌是重要的检查方法, 其检测结果倍受临床关注, 同时也需要我们对手工镜检加以重视。
3 讨论
目前, 对结核病的检查方法较多, 有痰液涂片、痰液培养、放射影像检查、血液检查、胸水检查、脑脊液检查、尿液检查结核杆菌等[1,2,3]。而痰液涂片找抗酸杆菌应用较为广泛, 很受临床重视, 掌握好留痰的时间及方法[4], 或是对水样痰进行离心, 取沉淀物检查有助于提高阳性率, 也是实验室的经典检查方法[5]。
表1中对563例患者痰液标本进行了常规方法检查, 阳性率达6.21%, 可见在我们身边可能存在着结核病菌的危险, 应当引起高度重视。其中在364例粘液痰中涂片就找到19例阳性, 占有较高的比例, 而其他各种痰液都检出抗酸杆菌不同程度的阳性, 以脓性痰占比例最高[6], 65例痰液检出9例抗酸杆菌, 阳性率达13.84%。其次, 对35例涂阳的标本进行了比对, 可看出三次涂阳最多达26例, 占阳性率74.28%。一次和两次涂阳也有相当高的比例, 应当引起重视。可见在工作中, 检验技师不能随意对待任何一份标本, 要有高度的责任感, 切实为临床合理用药及时提供有力的依据。
对于临床上出现发热、咳嗽、咳痰等体征支持及胸部X线异常者, 必须嘱病人留痰送检找抗酸杆菌, 为临床提供有力的检验依据, 使病人能够尽早得到诊断、治疗。抗酸染色特异性强, 操作简便, 很适合基层医疗卫生单位对结核病的检查, 结合临床症状, 对于发现传染源、确定诊疗方案、考核疗效、评价防治效果具有重要意义。
摘要：目的 对563例不同性状痰液查找抗酸杆菌检出情况进行分析。方法 采用直接涂片, 使用BASO抗酸杆菌染色液对标本进行镜检。结果 563例患者的不同性状痰液标本与抗酸杆菌检出情况有明显的差异。结论 抗酸杆菌是诊断结核病的“金标准”, 倍受临床关注, 应当慎重对待不同性状和不同时间的每一次痰液标本。
关键词：痰液性状,镜检,抗酸杆菌
参考文献
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抗酸杆菌 篇4
1 材料与方法
1.1 标本来源377例痰标本均为我所2011年住院患者, 临床诊断为肺结核。
1.2 实验室检测方法
(1) 痰标本直接厚涂片法:采用国际防痨协会及中国防痨协会推荐的萋尔-尼尔逊抗酸染色法, 镜检结果按照结核病细菌学检验规程的标准报告[1], 抗酸染色试剂采用珠海贝索生物技术有限公司试剂。 (2) 改良罗氏培养法:培养基采用珠海贝索生物技术有限公司酸性罗氏培养管。
1.3 统计学方法
计数资料计算百分率, 采用χ2检验, P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果与讨论
痰标本直接厚涂片法抗酸染色镜检, 阳性1 1 3例 (30.0%) ;改良罗氏培养法镜检, 阳性168例 (44.6%) ;两组比较差异有高度统计学意义 (χ2=17.16, P<0.01) 。改良罗氏培养法可以提高抗酸杆菌阳性检出率, 与施鸿生等的报道一致[2]。两种方法阳性检出率均高于王莉等[3]的报道, 可能与本组病例为住院病人, 留取的痰标本多为夜间及清晨痰有关。
结核分枝杆菌培养不但对肺结核诊断具有决定性意义, 培养阳性的病例还可进一步做药敏试验, 进行耐药监测。我国耐药结核病疫情非常严重, 是27个耐药结核病高负担国家之一, 耐多药患者数量位居全球第二位, 作为中-盖项目实施单位, 改良罗氏培养法及比例法药敏试验还可验证涂阳病例的基因芯片耐药情况, 进行当地的耐药情况监测。但是由于肺结核病强调早期诊断、早期治疗, 改良罗氏培养法虽然阳性率高, 但周期长, 所以痰涂片检查作为现代防痨策略的重要组成部分, 仍将作为检查结核杆菌的首选方法。痰涂片阳性率与患者排菌量明显相关, 阳性涂片时痰液中菌量必须大于1×104/ml, 所以提高痰涂片阳性率, 痰标本质量是关键[4]。据施鸿生等[2]报道, 患者的清晨痰及夜间痰均为合格的痰标本, 而即时痰阳性率较低。为提高阳性率, 应对病人加强宣教, 指导患者配合留取合格的痰标本, 对于细胞数小于1 0个/H P的稀水痰, 应嘱病人重新留取。同时, 按照《痰涂片镜检标准操作及质量保证手册》[5]保证痰涂片镜检的质量。
痰标本直接厚涂片法镜检可以早期发现和诊断肺结核, 提高痰涂片的阳性率, 但应重视留痰的质量和保证镜检质量;而培养法可以提高肺结核的确诊率, 并进行耐药监测。所以临床医生应重视痰标本的留取质量, 确保痰涂片镜检质量, 对进一步提高肺结核病的实验室诊断水平具有重要临床意义。
参考文献
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抗酸杆菌 篇5
1 资料与方法
1.1 资料来源
2008年1～12月结核病门诊接诊的咳嗽、咳痰超过2周、胸透异常的可疑肺结核症状者三份痰标本 (即时痰、夜间痰、清晨痰) 的抗酸杆菌直接涂片检查结果。
1.2 实验方法
采用直接涂片法, 萋尔-尼尔逊染色 (热染法) , 双目光学生物显微镜镜检 (目镜10×, 物镜100×) 。结果分级报告标准见《痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册》[1～2]。
1.3 数据统计
使用EXCEL软件建立数据库, SPSS 11.5软件进行统计分析。
2 结果
(1) 3249份痰标本中抗酸杆菌涂片检查检出阳性标本617份, 检出率为19.00%, 即时痰、夜间痰和清晨痰的检出率分别为10.43%、15.79%和30.75%, 清晨痰检出率最高最高 (χ2=156.069, P<0.01) , 不同咳痰时间痰标本的涂片检查的阳性检出情况见表1。干酪痰、血痰、粘液痰和唾液检出率分别为70.03%、39.52%、15.14%和1.48%, 干酪痰检出率最高 (χ2=930.464, P<0.01) 。
(2) 617份不同留置时间阳性标本的菌量在2+以上的涂阳比例清晨痰最高为67.0% (223/333) , 即时痰最低35.40% (40/113) 。 (χ2=16.556, df=2, P<0.01)
注:χ2=156.069, df=2, P<0.01
注:χ2=6.80, df=1, P<0.01
(3) 617份阳性标本不同性状的菌量在2+以上的涂阳比例干酪样痰最高为93.0% (239/257) , 其次为血痰为62.61% (72/115) , 粘液痰38.86% (89/229) , 唾液6.25% (1/16) 。 (χ2=181.842, df=3, P<0.01) 。
(4) 215份标本分别同时进行目视挑取干酪样、脓样或可疑部分涂片和随意挑取痰标本涂片, 阳性检出率分别为26.05% (56/215) 和17.67% (38/215) 。目视挑取干酪样、脓样或可疑部分标本进行涂片可以提高抗酸杆菌涂片检查的阳性检出率。 (χ2=6.80, P<0.01) 。
3 讨论
(1) 本研究结果显示, 3249份初诊可疑肺结核就诊者痰标本抗酸杆菌涂片检查的阳性检出率为19.0%, 不同留置时间的痰标本涂片阳性检出率存在明显差异, 据施鸿生报道[3], 夜间痰和晨痰均为合格的痰标本, 两者检出率水平不相上下, 而即时痰涂阳检出率最低。本文结果痰涂片阳性检出率依次为清晨痰>夜间痰>即时痰, 原因在于患者清晨更容易从肺部深部咳出干酪样痰、血痰等可疑的痰标本, 排菌量大, 菌量在2+以上的涂阳比例清晨痰最高。不同留置时间的痰标本在2+以上的涂阳标本间存在明显差异。
(2) 在四组不同性状的痰标本中, 涂片检出率以干酪样痰最高, 其次为血痰, 粘液痰, 唾液。菌量在2+以上的涂阳比例干酪痰最高, 唾液标本即使其涂片阳性, 大多数标本的菌量均小于2+。2+以上的涂阳标本在不同性状的痰标本间存在明显差异。
(3) 本文对215份标本分别同时进行目视挑取可疑部分涂片和随意挑取痰标本涂片, 萋-尼氏抗酸染色、双目光学生物显微镜镜检 (目镜10×, 物镜100×油镜) , 结果目视挑取干酪样、脓样或可疑部分涂片检查阳性率可提高10.24%, 提示在实际工作中应积累工作经验, 加强工作的责任心, 认真对标本观察后进行涂片检查, 以提高阳性检出率。
抗酸杆菌 篇6
1 材料与方法
1.1 标本来源
本院2006~2009年门诊肺结核病人痰液(包括即时痰、晨痰或夜间痰),共采集标本8071份。
1.2 方法
将送检痰液标本按其性状分为4类,I脓样,干酪样痰;II血痰;III脓性粘稠痰类;IV泡沫痰,水样痰。按2006年中国防痨协会基础专业委员会制定的《结核病诊断实验室检验规程》中检验方法,用直接涂片法制片、萋纳氏法染色、镜检、报告。在检验过程中,实验室内应进行全程质量控制,报告发放后检验人员应采用自查和互查的方式,至少抽查复检当日10%涂片,并作好记录以备检查。做好室内质量控制的同时,也要参与室间质量比对。其方法是根据与其它网络实验室(中间级实验室和中心实验室)比较批量测试和盲法复检结果,以评价实验室抗酸染色镜检能力。
2 结果
不同性状痰液抗酸杆菌检验结果见表1。按国家结核病控制规划中合格痰液标本应为脓样/干酪样、血样、脓粘样,泡沫痰、水样痰为不合格痰。痰液标本合格率对抗酸杆菌检出率的影响见表2。
3 讨论
表1中可以看出脓痰、血痰检出率最高,脓粘痰次之,泡沫痰、水样痰极低,并且脓痰、血痰的检出菌量亦明显高于泡沫痰水样痰,这是由于脓痰、血痰来自下呼吸道炎症部位,在镜检时多见假性纤毛柱状上皮细胞。泡沫痰、水样痰来自上呼吸道,镜检时可见来自口腔黏膜、舌部、喉部特征的、脱落的鳞状上皮细胞,并且可见到多种口腔内的细菌。国内有文献报道,不同标本性状其阳性检出率差别很大:干酪样痰48.1%、脓痰35.0%、黏液痰7.7%、口水样痰1.8[2]。我们的统计显示在8071份标本中,泡沫痰、水样痰占38.9%(3142/8071),如果摒弃这两类痰液,则总阳性率由17.5%提高到28.6%,可提高11.1%,故痰标本性状的优劣直接影响抗酸杆菌检出率。
从表2中可以看出痰标本合格率高则检出率高。正确的留取痰标本应该按如下面的步骤进行:在采集标本前,患者应以清水漱口,这样可以去掉口腔内的大部分染菌,然后鼓励病人用力咳嗽(如有出血危险的病人应避免用力咳嗽)尽力将气管深部的痰液咳出,并将咳出的痰液放于清洁(最好消毒过的)容器内并加盖,马上送检,直接涂片检查。采集痰液的最好时间是清晨起床时咳出的痰:据国内文献报道不同时间段阳性率有显著性差异,其中即时痰阳性率16.1%夜间痰阳性率23.9%,清晨痰阳性率36.4%[2]。另一个必须注意的问题是,有的病人无痰,咳嗽也很少,而为了应付查痰就将唾沫作为痰标本进行检查,这样的检验结果是不可靠的。因此,医务人员必须认真向病人讲解留取痰标本的重要性、注意事项及正确的留取办法。
提高抗酸杆菌检出率,还必须提高检验人员的素质,加强检验人员对痰检工作的责任心,减少误检、漏检。查找痰中的结核菌是一项耐心细致的工作,工作上稍有疏忽就有可能使痰菌的检出率下降。比如表1所示的泡沫痰和水样痰,虽然这样的标本不合格,但还是有3.2%的阳性检出率。如果检验过程中,检验人员对此类标本粗心疏忽,就很容易漏检。因此我们要求检验人员在显微镜下镜检时必须仔细搜索每一个镜下视野,按要求检查完300个视野。如果能严格按照上述要求操作,将有利于提高痰结核菌的检出率。
摘要：目的:探讨痰液标本不同性状对抗酸杆菌检出率的影响。方法:将我院2006～2009年痰涂片结果进行回顾性分析。结果:8071份痰液抗酸杆菌阳性检出率为17.5%(1409/8071),4种不同性状的痰液(干酪样痰、血痰、脓粘痰、泡沫水样痰)抗酸杆菌阳性检出率分别为52.5%、42.4%、22.8%、3.2%,合格性状痰液标本(干酪样痰、血痰、脓粘痰)抗酸杆菌阳性检出率明显高于不合格痰液标本(泡沫水样痰)。结论:痰液标本性状直接影响抗酸杆菌阳性检出率,留取合格的痰液标本是提高抗酸杆菌直接涂片检出率的关键。
关键词：抗酸杆菌,痰液,涂片
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