鳞状细胞癌（精选8篇）
鳞状细胞癌 篇1
鼻腔鼻窦鳞状细胞癌(nasal cavity and paranasal sinuses squamous cell carcinoma,NSCC)占全部鼻腔鼻窦恶性肿瘤的55.3%[1]。由于鼻窦结构隐蔽,不能及早发现早期肿瘤,只有在肿瘤突入鼻腔并有症状时才得以发现,一旦达到晚期,治疗效果相对较差,因此,早发现、早治疗可以提高患者的生存率,血清鳞状细胞癌抗原(squamous cell car cinoma antigen,SCCAg)是用于检测鳞癌的一种较好的肿瘤标志物[2]。本研究采用全自动快速微粒子酶免疫分析系统检测NSCC治疗前后SCCAg的表达水平,探讨SCCAg水平与NSCC患者临床分期及治疗预后关系,现报道如下:
1 对象与方法
1.1 研究对象
所选的研究对象均为河北省邢台市眼科医院2006年2月～2012年9月收治的NSCC患者29例,设立为NSCC组,均经病理诊断证实,29例NSCC患者中,男18例,女11例;年龄45～84岁,平均(54.2±2.8)岁;其中有淋巴结转移的2例,无淋巴结转移的27例;临床TNM分期按国际抗癌协会(UICC)标准第5版(1997)方案[3],其中早期(Ⅰ+Ⅱ期)17例,中晚期(Ⅲ+Ⅳ期)12例;分化程度:高分化11例,中分化12例,低分化6例;其中28例手术切除加术后放疗,1例行放疗后手术切除再放疗加化疗,1年内复发者3例。19份对照血清来自鼻中隔偏曲无其他疾病的健康人,设立为对照组,其年龄为42～80岁,平均(52.2±3.1)岁。两组的性别、年龄等基线资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2 检测方法
采用微粒子酶免疫法测定血清中SCCAg,具体方法是采集患者术前及术后、放疗化疗后空腹静脉血2 mL,分离血清后测定。仪器采用美国雅培公司IMX酶免疫分析仪和SCCAg诊断试剂盒。试剂药盒提供正常值范围SCCAg≤1.5μg/L,>1.5μg/L则为阳性[4]。
1.3 统计学方法
全部数据处理均应用SPSS 11.0软件,NSCC血清SCCAg浓度为计量资料,以均数±标准差表示,组间比较进行t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 NSCC患者SCCAg阳性率与分期、治疗的关系
NSCC组中25例SCCAg>1.5μg/L,对照组2例>1.5μg/L,SCCAg敏感性86.2%(25/29),特异性89.5%(17/19)。治疗后NSCC组有28例SCCAg≤1.5μg/L,半年后有3例SCCAg>1.5μg/L,3例为复发病例。NSCC组的SCCAg阳性率治疗前与对照组比较,差异有高度统计学意义(P<0.01)。NSCC组的SCCAg阳性率治疗后与治疗前比较,差异有高度统计学意义(P<0.01)。NSCC组的SCCAg阳性率治疗后与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。从表1可见,随着肿瘤分期的进展,SCCAg阳性率逐渐增多(P<0.05)。
注:与对照组比较,*P<0.05;与治疗后比较,#P<0.01
2.2 鼻腔鼻窦鳞状细胞癌患者鳞状细胞癌抗原阳性的浓度治疗前后的变化情况比较
25例NSCC患者SCCAg抗原阳性的浓度手术治疗后2 d检测下降至正常,术后放疗后SCCAg值仍正常,见表2,与治疗前相比,不同分期SCCAg抗原阳性的浓度明显降低,差异有高度统计学意义(P<0.01),但术后与行放疗后比较无差异(P>0.05)。不同分期间比较差异也无统计学意义(P>0.05)。3例NSCC在1年内出现肿瘤复发,测得SCCAg>1.5μg/L,再次行手术加放疗治疗后下降至正常。
注:与同期治疗前比较,*P<0.01
3 讨论
鼻腔鼻窦鳞状细胞癌是常见的头颈恶性肿瘤,由于鼻腔及鼻窦的黏膜相互延续,肿物病理性质一致,所以统称为鼻腔鼻窦鳞状细胞癌,原发鼻腔时较早出现症状,易早发现早治疗,原发鼻窦时发现较晚,发现时已侵犯鼻腔或窦旁组织或远处转移,鼻窦鳞癌早期诊断率很低,不足10%,就诊时病变多己达中晚期,临床治疗效果差。局限于鼻腔或鼻窦的早期鼻腔鼻窦鳞癌可完全切除,配合化疗放疗,患者5年生存率可达90%,因此早期诊断及治疗尤为重要,一旦病变进入晚期,有周围组织侵犯,特别是侵犯翼腭窝或伴有远处淋巴结转移,临床治疗比较棘手,即使手术彻底切除病变,也会给患者带来面部畸形,吞咽困难,严重影响患者的生活质量,随着肿瘤病理学,分子生物学和基因学的加速发展,以及在医学领域的广泛研究,应用于临床对肿瘤早期发现以及对治疗和预后监测,能显著提高鳞癌患者的生存水平和生活质量。
肿瘤标志物可作为肿瘤的辅助诊断、分析病理、指导治疗、判断疗效、监测复发、转移和判断预后[4]。肿瘤相关抗原TA-4是从人类宫颈癌组织中提取的1种糖蛋白,分子量为48 kD[5],SCCAg是肿瘤相关抗原TA-4的提纯亚单位,最早由Kato等[2]从子宫颈SCC中分离出来。然后学者们在肺、头颈、食管、上皮等部位肿瘤中也相继发现[6,7,8]。广泛用于宫颈、食管、肺等鳞癌的诊断、临床分期、病情监测及预后判断[6,7],分子学研究和基因克隆揭示SCCAg是由两列几乎完全相同的基因(95%的核苷酸序列相同)SCCAg1和SCCAg2转录而来的,主要是SCCAg1。
NSCC患者的SCCAg值明显高于正常值,检测敏感性为86.2%(25/29),特异性89.5%(17/19),SCCAg能作为NSCC检测的一个有价值的指标,SCCAg值在治疗前和治疗后变化有差异,说明治疗是有效的,充分破坏了肿瘤组织,减少了肿瘤SCCAg分泌,如无肿瘤转移或复发,SCCAg可长期保持正常水平,术后对肿瘤SCCAg的监测,可有效的预测NSCC的复发或转移[9]。SCCAg可用于监测肿瘤是否完全切除,提供良好的监测疗效的方法[10]。在肿瘤分期检测中可见早期(Ⅰ+Ⅱ期)17例中有14例(82.4%)、中晚期(Ⅲ+Ⅳ期)12例中有11例(91.6%)SCCAg超过正常值,随分期进展,SCCAg阳性率增多(P<0.01),文献有一致报道[11]。早期(Ⅰ+Ⅱ期)患者SCCAg值为(4.98±0.56)μg/L;中晚期(Ⅲ+Ⅳ期)患者SCCAg值为(7.33±1.20)μg/L,个别病情较重或有远处转移者SCCAg值更高,提示SCCAg与病变分期及病变程度正相关,可作为判断NSCC病变程度的指标。本组实验结果显示,NSCC术后SCCAg值有显著降低,一般在术后2 d检测就降至正常,有明显统计学意义,再经过放疗和化疗后SCCAg值变化不明显,说明手术是切除肿瘤最有效的治疗,对于晚期有远处转移NSCC,术前术后SCCAg值降低不明显,再经放疗和化疗后SCCAg值可降至正常值,所以SCCAg也可作为有无淋巴结转移的参考指标,随病情复发,SCCAg值再次升高,表明NSCC患者治疗前后SCCAg水平变化可作为治疗效果判断及预后检测的指标。本组实验中有3例中晚期(Ⅲ+Ⅳ期)患者在治疗后半年到1年间肿瘤复发,表现术腔内表面不光滑新生物,取活检确诊,检测SCCAg值升高,Lara等[12]有类似报道,经再次局部手术肿物切除并术后放疗化疗,检测1年内SCCAg值正常。
因此,对NSCC患者行术前术后SCCAg检测,可以监测NSCC临床病情及治疗效果,在目前尚未有一个敏感性和特异性理想的肿瘤标志物的前提下,SCCAg值可用于NSCC可疑性筛查,判断手术加放疗和化疗的效果,在NSCC发现和疗效评价中有重要意义。
摘要：目的 探讨血清鳞状细胞癌抗原(SCCAg)水平与鼻腔鼻窦鳞状细胞癌(NSCC)患者临床分期及治疗预后关系。方法 采用微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测河北省邢台市眼科医院29例NSCC患者治疗前后血清SCCAg水平。结果 29例NSCC患者血清SCCAg阳性率为86.2%(25/29),SCCAg阳性率与NSCC的TNM分期有关。治疗前后患者血清鳞状细胞癌抗原水平变化差异有统计学意义(P<0.05)。复发患者SCCAg明显升高。结论 血清SCCAg可作为鼻腔鼻窦鳞癌的相关肿瘤标志物,对判断鼻腔鼻窦鳞癌治疗效果、预后有重要的临床意义。
关键词：鼻腔鼻窦,鳞状细胞癌,微粒子酶免疫分析法,鳞癌抗原
鳞状细胞癌 篇2
[关键词] 食管鳞状细胞癌；FEZ1；免疫组化
[中图分类号] R735.1???[文献标识码] B???[文章编号] 2095-0616（2012）10-132-02
食管癌在我国发病率比较高，在我国恶性肿瘤死亡率中占第4位，也是世界上常见的十种恶性肿瘤之一，严重威胁人类健康。食管癌的癌变机制至今不是很清楚，近年来随着分子生物学的进展，已发现与食管癌的发生或演进有关的多个可能相关基因或相关的未知基因片段。近期很多资料也表明，亮氨酸拉链肿瘤抑制基因（fasciculation and elongation protein zeta-1，FEZ1）是抑癌基因，并且FEZ1基因的异常表达在人类多种肿瘤中均可检测到。本研究通过采用免疫组化法，分析FEZ1基因在食管鳞状细胞癌中的表达情况，探讨其在食管癌进展中所起的作用及与患者病理指标间的关系，为临床判断预后提供新的依据。
1 材料与方法
1.1?标本来源
120例标本均来自承德医学院附属医院病理科2007年1月~2009年12月手术切除食管鳞状细胞癌石蜡包埋标本，选取20例食管癌远端病理证实的正常黏膜。所有标本术前未经放疗、化疗及免疫治疗，均常规固定后规范取材，将患者的性别及年龄、肿瘤长度详细记录，有经验的病理医师通过双盲法进行复诊，镜检肿瘤组织学类型、浸润深度及淋巴结转移情况。将4 μm厚的相应的常规石蜡包埋组织制成的切片用于免疫组织化学染色。
1.2?资料分组
食管癌患者年龄划分为：年龄＜40岁4例、40~60岁93例、＞60岁23例；食管癌长度划分：肿瘤长径＜3 cm 45例，≥3 cm 75例；根据肿瘤病理的浸润深度分为早癌组5例、浅肌层及深肌层组21例，纤维膜及周围软组织组94例。
1.3?SP免疫组化染色
小鼠抗FEZ1单克隆抗体购自Cell signaling公司，采用免疫组化SP法，FEZ1单克隆抗体稀释倍数为 1︰50，实验步骤按说明书进行，DAB显色，苏木素复染，分化，返蓝，常规脱水、透明、中性树胶封片。PBS代替一抗作为阴性对照，已知肺癌阳性切片作为阳性对照。
1.4?结果判断标准
FEZ1结果评价，以细胞浆出现背景清晰的黄色或棕黄色颗粒为阳性。参照文献[1]， 在高倍视野下（400×）随机选取5个视野（每个视野观察不少于200个细胞），按阳性细胞所占的百分比及着色强度进行结果判定：按着色强度评分： 0分为无着色，1分为浅黄色，2分为黄色，3分为棕黄色；按阳性细胞数占同类细胞数的百分比评分：0分为阴性，1分为阳性细胞数10%，2分为11%~50%，3分为51%~75%，4分为＞75%。取两项评分的乘积作为总积分，0~3分为阴性，3分以上为阳性。
1.5?统计学处理
应用SPSS17.0统计软件包，蛋白表达与临床病理指标之间的关系采用卡方检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
２?结果
2.1?FEZ1蛋白在不同食管组织中的表达
FEZ1阳性表达可见于食管黏膜上皮及鳞癌细胞中胞浆内出现棕黄色颗粒，呈灶状或弥漫分布，大小不一，着色轻重不等。120例食管鳞癌中FEZ1阳性率为36.67%（44/120），明显低于正常食管黏膜60.00%（12/20），差异有统计学意义（P＜0.05）。食管癌组织中FEZ1阳性与阴性表达见图1、2。
2.2?FEZ1的表达与食管鳞癌临床病理参数的关系
鳞癌中早癌组、肌层组外膜组FEZ1蛋白的阳性率分别为80.00%、47.62%、31.91%，阳性率随浸润深度的增加呈降低趋势（P＜0.05）；实验结果显示淋巴结转移组FEZ1蛋白表达缺失，与无转移组差异明显；随着食管癌患者年龄的增长及肿瘤长度的增加，该蛋白表达亦呈降低趋势。见表1。
３?讨论
食管癌是常见的消化道恶性肿瘤，食管癌发病机制及预后的相关性研究，亦是国内外研究的热点。Ishii[2]在8p22 的D8S261位点附近分离出FEZ1基因，研究证明，该基因在正常组织中表达较高，而在许多人类肿瘤中存在异常表达。原志庆等[3]发现甲状腺组织中FEZ1 蛋白和mRNA 的表達均显著高于甲状腺腺瘤和PTC 组织，Vecchione 等[4-5]检测了胃癌、膀胱移行细胞癌中FEZ1 蛋白的表达，结果发现所有的细胞系中几乎均不能检测到该蛋白的表达。本实验中120例食管鳞癌中FEZ1阳性率明显低于正常食管黏膜，差异有统计学意义（P＜0.05），与以上研究结果一致，提示FEZ1蛋白可能对食管鳞癌的发生、发展起抑制作用。本实验亦研究了FEZ1表达与食管癌临床指标之间的关系，表明其表达与浸润深度及淋巴结转移呈负相关，李娜等[6]研究发现食管癌中淋巴结转移组FEZ1 mRNA的阳性表达率和表达水平显著低于无淋巴结转移组。陈刚等[7]研究表明，肺癌中恶性度较高的小细胞癌中FEZ1表达水平明显高于低分化鳞状细胞癌，均与本实验结果一致。迄今为止，人们对FEZ1基因了解较少，一般认为在细胞周期中FEZ1通过cAMP 依赖激酶高磷酸化，阻滞细胞产生G2/M期，细胞的生长抑制，肿瘤的发生受到抑制。还与微管组分有关，通过S- G2/M期与P34cdc2的相互作用抑制生长，通过调节有丝分裂异常进而细胞生长失控。随着深入的对FEZ1基因和其他食管癌相关基因研究，从分子生物学水平阐明食管癌的发生发展机制，为食管癌的早期诊断和基因治疗提供理论依据和技术手段，具有一定帮助。
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猕猴上皮鳞状细胞癌的诊断 篇3
1 材料与方法
1.1 临床观察
观察患猴的临床表现并做详细记录，用数码相机对该动物病变部位拍照。
1.2 病理组织学观察
活体采取该患猴臀部的增生组织块(直径约1 cm)，以10%中性福尔马林固定液固定，脱水，石蜡包埋，切片，HE常规染色，显微镜下观察并记录病理组织学变化，并用Nicon数码显微摄相机照相。
2 结果
2.1 临床观察
2010年6月底发现该猴臀部经常出血，遂隔离至检疫舍单独饲养;最初用双氧水、碘酊进行外伤清洗消毒，并用青霉素等药物做抗菌消炎处理，但治疗无效。2011年2月份左右，患猴精神、食欲尚佳，每天能正常采食约180 g饲料，随病程发展，患猴采食量渐减，身体逐渐消瘦，精神萎靡，被毛粗乱，腹泻。臀部皮肤增生呈凹凸不平的结节状，呈肉红色，蹲坐后易出血，且不易止血。增生范围几乎波及整个无毛区，用手触摸不易推动。当切除一小块病变区域后，生长速度急速。
2.2 病理形态学观察
增生组织表面有大量蓝染的细菌团块附着，皮肤正常结构不可见，被大量来源于棘细胞层的肿瘤细胞占据摧毁，形成不规则的巢状或条索状肿瘤细胞团块，间质中富含小静脉和毛细血管，少量巢状的癌细胞中央见有单个不全角化的细胞，肿瘤组织中见有坏死灶。在肿瘤细胞生长区域未见有毛囊、皮脂腺及汗腺等皮肤附属结构。肿瘤细胞异型性明显，细胞体积大小不等，并多见瘤巨细胞和多核瘤巨细胞，肿瘤细胞中的核仁肥大或见有多个核仁;病理性核分裂相多见，表现为双极不对称分裂、三极核分裂、或奇异型核分裂。瘤细胞连接较松散，部分区域可见细胞间桥。
3 讨论及分析
在病例中，猕猴的臀部皮肤恶性增生，组织的生长速度迅速，并伴有出血、坏死和溃疡的发生，抗菌抗炎治疗无效，结合其进行性消瘦的体征特点，初步推断其患有肿瘤性疾病，后经病理学诊断确诊为上皮鳞癌。
资料报道，根据癌细胞分化程度将皮肤鳞癌分为4级：Ⅰ级为分化成熟的鳞形细胞，具有细胞间桥和癌珠;Ⅱ级以棘细胞为主要成分，并具有明显的异型性，包括细胞体积增大、核大小不等，染色深浅不一、核分裂相多见，癌珠少见，且其中央有角化不全;Ⅲ级细胞分化差，表皮层大部分细胞排列紊乱，细胞体积增大，核大且异型明显，核分裂相多见，无癌珠，但有个别细胞呈角化不良;Ⅳ级为未分化型，无棘细胞，也无细胞间桥和癌珠，癌细胞小而呈梭形，核细长而染色深，伴有坏死和假腺样结构。
此次诊断中，病理组织学观察发现肿瘤细胞分化程度低，组织异型性和细胞异型性均明显，表现为与原发组织的形态差异大，细胞呈巢状分布，癌珠少见;细胞大小不等，瘤巨细胞多见，病理性核分裂相较多，具备恶性上皮鳞状细胞癌的特征。根据上皮鳞癌分级标准，恶性度应为Ⅱ级。
鳞状细胞癌 篇4
1 材料与方法
1.1 标本来源
标本来源于2003~2008年遵义医学院第五附属医院的存档病例,均经HE染色,光镜观察、确诊。皮肤BCC组18例,男性10例,女性8例;颜面部17例,背部1例;皮肤SCC组,男性13例,女性7例;颜面部13例,下肢5例,头顶部2例。两组病例临床均未提示有转移。正常皮肤组织对照10例。
1.2 试剂
兔抗人Cx43多克隆抗体购自美国Zymed公司;S-P免疫组织化学试剂盒、DAB显色试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司;人Cx43原位杂交试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。
1.3 实验方法及步骤
石蜡包埋标本BCC 18例、SCC 20例,正常皮肤组织10例,连续切片4张,切片厚4μm,备用。
1.3.1 常规HE染色
光镜观察、确诊。
1.3.2 Cx43的免疫组织化学染色(S-P法)
以子宫平滑肌为阳性对照组织,以PBS代替一抗作为阴性对照。切片常规脱蜡至水,微波抗原修复,操作步骤按试剂盒说明书进行,经DAB显色,苏木素复染,脱水干燥、透明,中性树胶封片。
1.3.3 Cx43 mR NA原位杂交
切片滴加没有探针的预杂交液作为阴性对照,以子宫平滑肌为阳性对照组织。操作步骤按原位杂交试剂盒说明书进行,每张切片滴加20μL含Cx43 m RNA寡核苷酸探针杂交液,40℃杂交过夜,DAB显色,苏木素复染,脱水干燥、透明,中性树胶封片。
1.4 结果判断
采用CCD成像结合图像分析系统,在200倍光镜下,分析测定每个显示屏的表达水平(阳性染色面积代数和/分析区域面积比值)和表达强度(平均灰度值:值越小,表明阳性细胞着色越深,表达量越高)。
1.5 统计学方法
运用SPSS13.0统计软件包,数据均以(±s)表示,对结果进行t检验和相关分析,以P<0.05有统计学意义。
2 结果
2.1 Cx43蛋白和Cx43 mRNA的表达
Cx43蛋白、Cx43 m RNA阳性染色定位于细胞浆,为棕黄色颗粒。结果如图1-4和表1。
Cx43蛋白、Cx43 m RNA在正常皮肤表皮中呈强阳性表达,在皮肤基底细胞癌组织中呈阳性表达(图1,图3),在皮肤鳞状细胞癌组织中呈阳性或弱阳性表达(图2)。另外,在分化较好的鳞状细胞癌组织中,癌巢中央的角化珠呈阳性表达,周边的癌细胞呈阴性表达(图4)。Cx43蛋白及其m RNA在正常表皮中的表达水平(阳性面积)、表达强度(平均灰度值)均明显高于BCC和SCC,P<0.01;在BCC中的表达水平、表达强度明显高于SCC,P<0.01,均有显著性差异。
注:S代表阳性面积代数和/分析区域面积的平均值;G代表平均灰度值;1)BCC/SCC与正常表皮比较,P<0.01;2)Bcc与SCC比较,P<0.01
2.2 Cx43蛋白与Cx43 mRNA表达的相关性
经过相关性分析,Cx43蛋白与Cx43 m RNA在BCC中的表达成正相关(r=0.744,P<0.05)。
3 讨论
Cx43是人体内1种主要的细胞间隙连接蛋白,由它组成的连接子在质膜上形成间隙连接斑,其数量直接影响功能。已有研究显示,肿瘤和转化细胞普遍存在GJIC的缺失,GJIC功能改变与多种肿瘤的发生关系密切[1]。有报道,在胃癌、宫颈癌、胶质细胞瘤等多种肿瘤中,Cx43蛋白的表达均显著降低[2,3]。另外,在鼻咽癌、宫颈癌及大鼠肝癌细胞中,还有其它Cx蛋白(Cx26、Cx32)表达的降低。本组研究结果显示,与正常皮肤相比,Cx43蛋白、Cx43 m RNA在BCC和SCC两种肿瘤中都有低表达的现象,但是Cx43、Cx43 m RNA在基底细胞癌中的表达水平(阳性面积)、表达强度(平均灰度值)均明显高于鳞状细胞癌,P<0.01,有显著性差异。经过相关性分析,Cx43蛋白与Cx43 m RNA在BCC中的表达成正相关。另外,在分化较好的鳞状细胞癌组织中,癌巢中央的角化珠Cx43蛋白与Cx43 m RNA呈阳性,周边的癌细胞呈阴性。这些研究结果提示:(1)与正常皮肤比较,无论是BCC还是SCC均有Cx43蛋白水平的降低,说明Cx43蛋白的低表达,与皮肤BCC和SCC的发生、发展相关。(2)Cx43蛋白表达的强度与肿瘤的分化程度有关,分化较差的肿瘤组织或癌细胞比分化较好的肿瘤组织或癌细胞Cx43蛋白降低的水平要高,提示Cx43蛋白与细胞的分化成熟程度有关。(3)Cx43基因表达降低与上述肿瘤的发生和发展有关,这从另一个侧面说明Cx43基因抑癌功能的降低有可能导致了肿瘤的发生,进一步支持Cx43蛋白具有抑癌作用,是一种抑癌基因的观点。
NICOLSON[4]首次提出,肿瘤组织中GJIC功能降低与肿瘤的转移有关。认为Cx43蛋白表达改变导致细胞间的间隙连接或GJIC异常,使肿瘤细胞间的结合力发生改变,还能逃避正常生长控制及免疫监视,所以易于生长扩散和转移。研究表明,胃癌、胰腺癌、前列腺癌的转移均与Cx43蛋白的异常表达密切相关[5,6]。本研究发现,虽然BCC和SCC都有Cx43蛋白及其m RNA的降低,但Cx43蛋白、Cx43m RNA在BCC组织中呈强阳性表达,在SCC组织中呈阳性或弱阳性表达,且BCC组的表达水平、表达强度均明显高于SCC组,有统计学意义。说明Cx43基因和蛋白在BCC中的高表达,与BCC生长缓慢及极少转移的生物学特性有关。提示Cx43基因和蛋白的表达强度,可能在这两种恶性肿瘤的生物学行为方面发挥重要作用,支持Cx基因具有抑制肿瘤转移功能的说法。
关于BCC局部浸润和极少转移的生物学特征,KANITAKIS等[8]研究发现,nm23-H1蛋白产物在BCC中表达最强,而在SCC中表达最低,认为nm23-H1基因对抑制BCC的转移起了一定作用。TADA等[9]研究认为,BCC侵袭生长的能力可能与桥粒芯糖蛋白(Dsg)有关,而转移能力的低下可能是E-cad参与了阻止肿瘤细胞从原发灶中的逃逸。还有报道证实[10,11]BCC瘤细胞均不表达CD44及CD44v6,认为BCC肿瘤细胞不能与基质中透明质酸相结合,限制了瘤细胞向基质游离生长。因此,BCC临床表现以局部浸润生长为主,基本上不发生远处转移。总之,BCC是人类机体所患肿瘤中几乎不发生转移的恶性肿瘤,探讨BCC临床生物学特征的相关因素特别是分子机制,对恶性肿瘤的基因治疗、遏制恶性肿瘤的转移等,能提供新的途径与思路。
参考文献
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鳞状细胞癌 篇5
1 材料与方法
搜集我院2007年4月～2008年12月间,保存在PACS统并经病理组织学证实的舌鳞癌15例进行了MRI分析。其中,4例手术切除病灶并放射治疗后,进行过1次或者多次MRI复查。15例中病理证实为高分化鳞癌者14例,中分化鳞癌1例。本组男性患者10例,女性5例。发病年龄32～89岁间,平均年龄52.9岁。临床表现主要为舌部新生物或者硬结、经久不愈的舌部溃疡及局部疼痛等。
使用PHILIPS Achieva 1.5T超导磁共振扫描机,采用横断面T1WI和T2WI扫描,其TR/TE时间分别为500/30和3 600/100,扫描范围从上颌区扫至喉部声门下区;冠状位或横断位压脂成像SPAIR或STIR技术,其TR/TE时间分别为5 300/100和1 600/23;横断位和/或矢状位增强扫描,部分病例辅以冠状位压脂增强扫描,增强扫描所用对比剂为Gd-DTPA,剂量0.1～0.2 mmol/kg。
2 结果
本组15例中,肿瘤侵犯舌体1侧(图6、7)或者两侧者9例,同时侵犯舌体及舌根者5例(图1-3),单独累及舌根者仅1例(图4、5)。肿瘤侵犯舌体者总共有14例,其中13例病变累及舌缘部,1例侵犯1侧舌腹部。肿瘤侵犯舌周围组织结构者3例,包括侵犯口咽侧壁1例(图2),侵犯软腭1例,另1例侵犯舌下间隙。舌鳞癌病变以横断位及冠状位显示较好,舌深面浸润的较大肿瘤块,冠状位能较好地显示病变的边界及侵犯范围。
MRI表现:T1WI呈等信号灶4例、稍低或低信号灶11例;T2WI呈等信号灶1例、稍高或高信号灶14例。压脂成像(SPAIR或STIR)15例均呈高信号病灶。增强扫描病灶显示不同程度的强化,较明显强化者9例、轻度强化4例、2例无明显强化。压脂增强扫描3例,均呈对比鲜明的高信号病灶。本组较大的肿瘤病灶(短径大于2 cm)6例,MRI各序列均能较清楚地显示病灶;较小的肿瘤病灶(长径小于1.5cm)5例,在T1WI上多数不能显影,T2WI上显影模糊或者不显影,但在压脂成像(SPAIR或SITR)和压脂增强扫描上,均能够清楚地显示病灶。本组1例舌根部小肿瘤,只在压脂增强扫描图像上显示(图4、5)。
MRI上易于发现短径大于0.8 cm的肿大淋巴结。本组发现一侧或者双侧颈动脉鞘区淋巴结肿大8例,颌下淋巴结肿大2例和颏下淋巴结肿大1例,其中2例颈动脉鞘区肿大淋巴结和1例颏下淋巴结肿大,被病理证实为淋巴结转移。该3例中,MRI显示淋巴结中心坏死1例,2例有包膜外侵征象。
4例舌鳞癌手术和放疗后进行了MRI随访和复查,与手术前MRI扫描片对比,显示3例患者治疗后舌部病灶消失,未见肿瘤残留或者复发。其中,1例患者切除病灶加皮瓣填塞及放疗术后,多次MRI和术区病理活检,无肿瘤复发的证据(图8、9);另1例患者术后MRI复查显示肿瘤复发。
图1～3分别为同一患者的T1WI、T2WI及增强扫描像,显示右侧舌体癌累及同侧舌根部,病灶呈长T1、稍长T2信号,增强扫描呈均匀性明显强化,境界清楚,并可见肿瘤侵犯口咽右侧壁。图4、5分别为同一病例的横断位及冠状位压脂(STIR)增强扫描,显示局限于左侧舌根的小结节状肿瘤病灶。图6～9为同一患者,图6和图7分别为T1WI和T2WI像,显示右侧舌体部肿块病灶的前份,见一长T1和长T2的坏死囊变区;图8为手术切除肿瘤并皮瓣移植术后,移植填充物T2WI上呈不均匀性高信号灶,其形态不规则。图9为压脂成像(SPAIR),显示移植皮瓣填充物呈低信号灶。该例患者术后曾行多次MRI和病理检查,均未发现肿瘤复发证据。
3 讨论
3.1 舌鳞癌的M R I检查方法
MRI是微创性检查技术,其软组织分辨率高,且有多种成像方位和序列可供选择,因此特别适合于舌鳞癌的观察。常规MRI检查T1WI和T2WI时,可发现较大的肿瘤病变和转移淋巴结,增强扫描能够发现较小的肿瘤病变和较小的转移淋巴结,故增强扫描应是舌鳞癌MRI检查中不可缺少的步骤。
除此之外,有条件的医疗单位,还应将压脂成像或压脂增强扫描技术,列为舌鳞癌的常规检查技术方法,以提高小肿瘤病灶的显示率,参见图4、5。
3.2 舌鳞癌的M R I表现特征
舌鳞癌好发于舌体周边的舌缘部分,较广泛浸润的肿瘤病变常同时侵及舌体和舌根,局限于舌根的肿瘤少见,本组仅见1例。MRI上肿瘤表现为结节状或斑块状异常信号灶,当肿瘤表面形成溃疡和结节时,MRI上表现为局部凹凸不平。大多数肿瘤病灶MRI上显示其轮廓不规整,边缘比较模糊,肿瘤沿舌内、外肌或黏膜面向周围组织和间隙内广泛蔓延。舌体癌主要沿舌内肌束浸润舌深面,沿舌外肌扩散至舌骨、下颌骨附着处,也可沿黏膜下层蔓延至口底、舌底、扁桃体及咽侧壁。舌根癌则容易侵及舌下间隙及颌下间隙,向下侵犯会厌及下咽部[3]。
MRI的信号特征:大多数肿瘤在T1WI呈等或稍低信号灶,T2WI呈稍高信号灶,增强扫描呈不同程度的强化。压脂(SPAIR或STIR)成像上,在脂肪被压抑信号降低的背景上,突出地显示肿瘤病变呈对比鲜明的高信号灶。
舌咽部因具有丰富的淋巴管引流,因此淋巴结转移早,发生率高。淋巴结转移大多数累及颈深上组淋巴结及颌下淋巴结组。有关转移淋巴结的诊断标准各家报道不一,有的作者以肿瘤的浸润深度[4]或者肿瘤的厚度[3]来推测淋巴结转移发生的机率。据竺嘉华等[3]的研究报道:MRI测量肿瘤厚度在>2 cm和<2 cm两组中,其淋巴结转移发生率分别为84.4%和10%,因此认为,肿瘤厚度测量可作为预测淋巴结转移的参考指标。国外有作者提出[6]:测量肿大淋巴结的最短径如果大于或者等于8 mm可作为转移淋巴结的诊断标准。这种测量方法并不十分可靠,因为有较多的假阳性和假阴性结果出现。例如,本文MRI检出11例肿大淋巴结中,只有3例最后被病理学证实为淋巴结转移。国内还有作者报道:淋巴结的中心坏死和包膜外侵,是淋巴结转移的可靠诊断指标[5]。他们在一篇研究报告中指出,MRI显示的76个淋巴结中心坏死和34个包膜外侵淋巴结中,100%被病理证实为淋巴结转移。鉴于淋巴结的包膜外侵是指淋巴结的边缘模糊、轮廓不规则及周围脂肪层消失,特别是周围血管等结构形成包绕,因而我们的分析结论也支持上述的观点。
3.3 舌鳞癌的M R I诊断价值和限度
MRI具有软组织分辨率高、多方位和多序列成像的优势,能够准确的提供舌鳞癌的发生部位、大小和范围。通过测量肿瘤的厚度和浸润深度,肿瘤向周围结构的浸润和蔓延情况,以及颈淋巴结转移等信息,能为临床诊断分期、制定治疗方案及评估患者预后提供重要的依据,同时也是治疗后随访复查的有效方法。MRI对舌鳞癌的诊断和治疗意义,已经得到国内、外学者的充分肯定。
MRI检查的限度在于对单纯的浅表性舌缘和舌根部小肿瘤,有时候容易被遗漏。应用压脂或者压脂增强扫描技术可提高其显示率。其次,MRI对于早期的骨皮质的侵蚀和破坏、直径小于1 cm的转移淋巴结,以及转移淋巴结与非转移性淋巴结,例如淋巴结核、化脓性淋巴结炎和放疗后淋巴结坏死的鉴别,尚存在一定程度的困难性。
摘要：目的探讨舌鳞状细胞癌的磁共振成像(MRI)影像表现和诊断价值。方法分析了15例舌鳞状细胞癌患者的MRI图像,并与手术和病理结果进行对照。结果本组病例MRI上均能较好地显示肿瘤病变及其侵犯的深度和范围,发现和识别转移淋巴结。结论肿瘤的MRI表现、侵犯范围和颈淋巴结转移,有助于改善并提高舌鳞状细胞癌诊断分期的准确性。MRI是诊断舌鳞状细胞癌的首选检查方法。
关键词：舌鳞状细胞癌,磁共振成像,诊断
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原发性甲状腺鳞状细胞癌1例 篇6
患者, 女, 78岁。颈部包块1年伴吞咽不适、声音改变1月余入院。近来自觉包块逐渐增大, 且有吞咽不适、声音嘶哑现象。PE:颈部不对称, 气管轻度右偏, 颈前饱满感, 甲状腺Ⅱ度肿大, 左侧可触及大小约4cm×4cm、右侧可触及约大小3cm×3cm界不清包块, 随吞咽上下移动, 质硬, 结节感, 无压痛, 活动度差, 两侧颈部未及肿大淋巴结, 局部未闻及血管杂音。超声示:甲状腺左叶厚31mm, 右叶厚20mm, 峡部厚4mm, 形态饱满, 腺体探及多个结节, 部分结节为实型结节, 部分为囊实性, 最大者49mm×36mm, 为囊实性结节, 位于左叶, 边界清晰, 回声不均匀, 内见多个细小强回声斑及不规则液性暗区, 液性暗区内透声差, CDFI:最大者内见血流信号, PW:动脉阻力指数为0.90。甲状腺右叶探及长约3mm弧形强回声斑, 后方伴声影。双侧颈部探及多发低回声结节, 较大者22mm×8mm (右叶) , 20mm×6mm (左侧) , 边界清晰, 内部回声欠均。CT示:左侧甲状腺体积增大, 边界欠清, 密度减低, 呈等低混杂密度块状结构, 且内见点状钙化灶, 范围约4.2cm×4.5cm×5.0cm, 注射对比剂后行双期扫描见肿块非均匀性强化, 扫描野见双侧颈部肿大淋巴结影。CT诊断:左侧甲状腺癌并颈部淋巴结转移。实验室检查:TSH、FT3、FrT4均在正常范围内。于 2012年7月19 日在气管插管全身麻醉下行手术。术中见:甲状腺弥漫性增大, 质地硬, 与颈前肌群浸润粘连颈前组织水肿, 气管右偏, 左侧甲状腺体内有大小约6cm×5cm包块, 侵占整个腺体, 内有多个液化灶, 内为米汤样液, 混有坏死物, 外侧侵及颈血管鞘, 难以解剖, 肿瘤无包膜, 向后延伸至气管食管旁沟, 并侵及气管食管外膜, 右侧甲状腺质地硬, 并与左侧肿块连成一体。术中送快速病理示甲状腺癌。因肿瘤广泛浸润周围组织, 难以解剖, 将左侧甲状腺叶及颈前粘连部分肌肉一并切除, 行姑息性手术。术后病理示: (左) 甲状腺高分化鳞状细胞癌, 癌组织大小为4.5cm×4cm×2cm, 免疫组化染色肿瘤组织:CK5/6 (+) 、P53 (+) 、P63 (+) 、TG (-) 、Ki-67 (+) >40%。
讨论
原发性甲状腺鳞状细胞癌是一种比较罕见的甲状腺恶性肿瘤, 发病率仅占甲状腺恶性肿瘤的0.2%～1.1%[1], 临床上好发于50岁以上的中老年人。该病早期无典型症状, 常易忽视。
原发性甲状腺鳞状细胞癌人群发生率为2～3/10万左右[2]。发病率极低, 与性别无明显关系。肿瘤常位于腺体一叶, 肿大后常常侵犯两侧叶, 导致气管移位, 颈部淋巴结肿大。肿瘤侵袭性很强, 常会侵及临近的喉返神经、食管等, 导致声嘶、吞咽不适等。
甲状腺来源于内胚层分泌腺, 并无鳞状上皮成分。对于原发性甲状腺鳞状细胞癌的组织来源存在较多争议, 主要有以下几种: (1) 滤泡上皮发生鳞状化生进而恶变; (2) 胚胎发育过程中甲状舌骨、后腮体或腮弓的残留组织中鳞状上皮恶变形成鳞癌; (3) 甲状腺内异常的胸腺上皮恶变; (4) 甲状腺原基属外胚叶来源, 可以分化为鳞状上皮而发生鳞癌; (5) 直接从腺癌转变而来[3]。 多数学者更倾向于由滤泡上皮转化或化生而来[4]。
鉴于本病进展快, 早期诊断困难等临床特点, 对于该病的诊断应特别警惕。当临床患者出现甲状腺肿块及不明原因的声嘶、吞咽不适等症状时, 应考虑到该病的可能。及时行甲状腺超声、CT、喉镜甚或MRI检查以明确病变部位及周围器官侵犯情况。穿刺细胞学检查是一项简单快速的细胞病理检查手段, 有助于明确诊断, 但准确性因穿刺水平不同而差异较大。对于该病的确诊, 组织病理学仍是诊断的金标准。
本病需与来源于气管、食管、喉等邻近结构的鳞状细胞癌相鉴别, 同时应与肺部、肾等部位的转移性鳞状细胞癌相鉴别[5]。纤维喉镜、纤维支气管镜、胸部影像学检查及全身检查结果常可辅助鉴别诊断。另外, 某些甲状腺疾病, 例如腺瘤样甲状腺肿和慢性甲状腺炎鳞化现象也较常见, 滤泡癌中也可出现鳞化灶。免疫组化染色有助于鉴别此类病变。
本例患者曾行胸部CT及胃镜、腹部超声检查, 排除其他脏器病变。肿瘤组织免疫组化染色也支持原发于甲状腺。
甲状腺鳞状细胞癌具有较强的抗射线辐射能力及药物不敏感性, 因此治疗方法较局限。有研究称, 原发性鳞状细胞癌的临床特点和治疗方案与甲状腺未分化癌相似, 建议应用外科手术治疗加用局部放疗[6], 化疗药物的应用不能改变疾病的进程[7]。
手术治疗为首选治疗方案。手术切除范围包括患侧腺叶、峡部及部分对侧腺体, 并行颈部淋巴结清扫。目前认为, 术后辅助根治性或超量放疗可以提高患者生存率, 并能降低肿瘤复发机会。对于丧失手术时机的患者, 穿刺细胞学明确诊断后施以放疗可以延缓病情发展, 提高生存质量。本例患者采取手术治疗, 术中探查发现肿瘤侵润广泛, 无法行根治切除, 遂行姑息性左侧甲状腺叶切除, 术中将左侧甲状腺体及颈前粘连部分肌肉一并切除。术后行局部放疗。
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鳞状细胞癌 篇7
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2013 年3 月~2013 年12 月期间在广西医科大学口腔医院住院行手术切除的OSCC患者标本46例, 其中男32 例, 女14 例;年龄17~74 (平均56.12) 岁;≥55岁28 例, <55 岁18 例;舌癌21 例, 舌根癌6 例, 颊癌6 例, 口底癌9 例, 牙龈癌4 例。 依据世界卫生组织 (WHO) 组织学分化度标准将病例分类, 高分化32 例、中分化10 例、低分化4 例。 术后病理结果颈淋巴结转移者:17 例, 无淋巴结转移者:29 例。收集所有病例术前均未行化疗或放疗, 并经口腔医学院病理科术前术后病理诊断证实为鳞状细胞癌, 无远处转移及其他恶性肿瘤病史。 手术切除下病灶后马上切取收集新鲜活体癌标本。 切除下来OSCC新鲜标本组织进行原代癌细胞培养、传代、冻存、复苏。
1.2 方法
1.2.1 进行MTT溶液的配制。
1.2.2 在96 孔板上接种对数生长期细胞, 参照化疗药物血浆高峰浓度 (PPC) 及通过预实验设定出5 个药物梯度浓度。根据实验设定方案, 参照陆新萍[4]实验方法, 使用MTT比色法检测。
上述药物的加入每孔最终梯度浓度如下:
5-FU:5ug/ml, 10ug/ml, 20ug/ml, 50ug/ml, 100ug/ml
PYM:2.5ug/ml, 5ug/ml, 10ug/ml, 25ug/ml, 50ug/ml
CDDP:10ug/ml, 20ug/ml, 30ug/ml, 40ug/ml, 50ug/ml
放入细胞培养箱中静置培养24h后, 观察, 继续培养4h, 终止培养, 加入二甲基亚砜 (DMSO) 按实验要求充分溶解结晶物, 测量各孔的吸光值OD;实验结果用细胞存活率表示。细胞存活率=OD药物组/OD对照组×100%。
1.3 统计学处理 数据采用SPSS 16.0 统计学软件进行分析。 连续性变量资料采用±s表示。 同一种药物之间的不同浓度之间的比较及三种化疗药物同种浓度之间敏感性比较使用随机区组设计的方差分析, P<0.05 差异有统计学意义。
2 结果
2.1 实验成功培养出28 例OSCC原代癌细胞。
2.2 MTT法检测28 例原代癌细胞对三种化疗药物的敏感性的结果
2.2.1 细胞对5-氟尿嘧啶 (5-FU) 的敏感性检测 同一种药物之间的不同浓度之间的比较统计结果 (P<0.05) 。 见表1。
2.2.2 细胞对平阳霉素 (PYM) 的敏感性检测 同一种药物之间的不同浓度之间的比较统计结果 (P<0.05) 。 见表2。
2.2.3 细胞对顺铂 (CDDP) 的敏感性检测 同一种药物之间的不同浓度之间的比较统计结果 (P<0.05) 。 见表3。
2.2.4 三种化疗药物同种浓度之间敏感性比较 表中各数值为百分存活率均值 (P<0.05) 见表4。
3 讨论
由于近年来恶性肿瘤发病率增高, 化疗药物广泛应用, 制定化疗方案时化疗药物选择随意性, 患者中断治疗或反复用药, 再加上治疗过程缺药后换用其它替代药物等原因, 导致临床治疗上化疗药物出现明显耐药及交叉耐药提高。 针对出现这些问题, 人们试图在行化疗之前, 治疗期间, 治疗完成后定期行化疗药物敏感性试验, 用以监测是否出现明显耐药及交叉耐药。 本文通过实验, 进行临床研究, 希望能制定合理化疗方案, 使患者用药后临床疗效显著。
本实验关键之处能培养出原代癌细胞用于实验, 通过查阅相关文献资料, 本作者经过反复实验得出培养原代癌细胞成功率较高方法。 在本实验方法中, 在收集活体癌标本时, 尽量远离癌肿溃烂坏死组织, 切取肿物硬结周缘, 该部位因为癌细胞生长旺盛, 成活率高, 不易污染, 尽量缩短取材到培养放入培养瓶时间, 清洗浸泡组织块最后使用两性霉素B, 能有效预防真菌污染。 大多数培养细胞学者认为培养癌细胞培养基血清浓度10%已经足够支持癌细胞生长, 但仅适用于培养成熟的细胞株。 经过本实验反复对比研究, 得出在含血清浓度为14%的培养基原代癌细胞生长最旺盛, 同时能有效抑制成纤维细胞生长。 纯化细胞使用胰蛋白酶消化传代的手段, 需2 次以上, 所培养的细胞形态学观察, 显微镜下见癌细胞胞质丰富, 呈多角形, 细胞致密成片生长, 如铺路石一样紧密嵌合在一起, 细胞边界清楚, 胞质粗糙, 核仁不明显。 可排除成纤维细胞、内皮细胞, 同时经细胞HE染色鉴定, 证实培养的细胞为口腔鳞癌上皮细胞[5]。
平阳霉素临床上被认可为作用于口腔鳞癌 (OSCC) 疗效好及副作用少的常用的化疗药物[6], 其大部分作用于鳞状上皮组织中, 通过细胞毒作用和细胞凋亡能抑制多种癌细胞株, 在头颈部鳞癌最为敏感, 可单独使用, 为细胞周期非特异性抗生素类化疗药物, Bloom DC[7]等认为应用PYM对OSCC化疗治疗效果良好。 同时PYM对头颈部鳞状细胞癌有效化疗能提高手术根治率和治疗效果己经得到公认[8]。 顺铂 (CDDP) 归类为其他常用化学的抗肿瘤药物在口腔颌面癌瘤中常用, 可联合5-氟尿嘧啶 (5-Fu) 作为基础治疗方案, CDDP主要通过在DNA链内形成交联和加合物, 干扰DNA复制以及转录[9]。 DNA损伤修复系统可识别并清除铂剂所致的链内交联和加合物, 恢复扭曲的双螺旋结构。 过度修复则可对抗铂类的抗瘤效果, 导致耐药。 因此CDDP原发及继发性肿瘤耐药限制了化疗疗效。最早应用的抗代谢化疗药物是5-FU, 该药在肿瘤治疗中占有非常重要的地位, 广泛应用于治疗各种实体肿瘤。 MTT比色法是一种常规用来检测细胞的存活、生长的方法。 对人体无损伤, 操作简单, 快速, 重复性较好, 灵敏度高, 成本低, 无放射性污染等优点, 被广泛应用于药物筛选, 细胞毒性试验, 是目前最常用的体外肿瘤药敏试验方法[10]。
本研究通过培养原代癌细胞, 选择具有代表性5-FU、PYM、CDDP三种化疗药物行体外药敏试验, 检测各药物对细胞的敏感性, 了解各药物对细胞毒性, 通过MTT比色法检测, 得出三种化疗药物对OSCC癌细胞均具有一定的抗肿瘤活性, 药物随着药物浓度的增加, 其癌细胞存活率逐渐降低, 差别有统计学意义 (P<0.05) , 通过本实验, 临床上进行化疗时可以考虑选择这三者药物, 对头颈部鳞状细胞癌耐药性研究可考虑体外培养技术, 当然, 体内环境与体外培养有很大差异, 主要是组织离体后, 在人工环境与体内完全不同, 但可作为参考有应用价值, 对化疗药物的合理选择和把握正确的剂量具有重要的临床意义, 为OSCC的临床治疗提供实验依据, 为进一步深入研究耐药机制提供新的思路。
综上所述, 5-氟尿嘧啶、平阳霉素、顺铂三种化疗药物的细胞毒性与药物浓度有关, 均具有一定的抗肿瘤活性。 在临床上值得选择及继续应用。
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鳞状细胞癌 篇8
1、材料与方法
1.1 组织标本
选择2003-2006年在湘雅附一医院口腔颌面外科手术的原发口腔鳞癌患者78例, 对照快速冰冻切片, 术中切取同一患者鳞癌组织和癌旁正常黏膜新鲜组织各1份, 放入甲醛固定, 石蜡包埋。其余标本病理确诊为鳞癌。其中男性58例, 女性20例;舌癌41例, 口底癌8例, 牙龈癌15例, 颊癌14例;平均年龄55岁。所有患者术前未做放、化疗。
1.2 主要试剂
兔抗人ID-3多克隆抗体购自Santa Cruz公司 (工作液1:50) , En Vision二抗和DAB显色试剂盒购自Dako Cytomation公司。
1.3 实验步骤
石蜡切片4?m, 常规脱蜡至水, PBS洗3min×3次;3%H2O2作用20min以消除内源性过氧化物酶的活性, PBS洗3min×3次;切片置于0.01mol/L PH6.0柠檬酸缓冲液中抗原修复, 100℃水浴煮沸20min自然冷却至室温;PBS洗3min×3次;加1:50 ID一抗, 4℃过夜, 次日室温下复温1h;PBS洗3min×3次;加En Vision二抗室温下孵育40min;PBS洗3min×3;0.04%DAB显色1-5min, 镜下控制显色;苏木素复染, 脱水, 树脂封片。根据阳性细胞数量, 阴性记为0分;弱阳性=1-25%记为1分;中度阳性=26-50%记为2分;强阳性>50%记为3分。
2、结果
口腔鳞癌组织钟ID-3呈异质性表达, 主要定位于肿瘤的细胞质。在78例口腔癌组织中, ID-3呈100%阳性染色, 而癌旁组织中不表达或表达很弱, 两组之间表达强度差异有显著性 (P<0.01) 。ID-3蛋白表达强度与肿瘤分化程度存在相关性 (P<0.01) , 高分化鳞癌中表达较低, 中分化鳞癌中表达较高, 低分化鳞癌中呈强阳性表达。ID-3蛋白的表达强度与患者的性别、年龄、肿瘤部位、侵袭程度以及术后生存率未见明显相关性
(P>0.05) 。
3、讨论
ID蛋白的HLH结构域由两条兼性的α螺旋以及两条螺旋之间的绊环结构构成, 其中绊环结构的长度以及氨基酸序列在HLH蛋白之间存在很大差异, 在此高度保守的HLH结构域之外, 不同的ID蛋白显示广泛的序列差异性。ID蛋白靶蛋白之一的b HLH转录因子是多种哺乳类生物组织特异性基因表达的关键调节因子[1], 故ID蛋白家族的差异性表达和组织特异性表达模式有其结构和功能基础。笔者对78例原发性口腔癌组织的研究未发现ID-3的表达与肿瘤细胞的分化程度存在相关性。随着分化程度的升高, ID-3的表达水平逐渐下降。这些结果提示ID-3可以作为肿瘤分化程度的标记物, 为病理分级提供参考;同时也提示ID-3的上调可能是导致肿瘤发生发展的因素之一, 其可能是潜在的基因治疗靶点。
摘要：研究分化抑制因3 (ID-3) 在口腔鳞癌中的表达及其与临床病理的联系。应用免疫组化方法, 采用统计学分析。说明ID-3在口腔鳞癌中表达降低, 可能与肿瘤的发生发展和组织分化有关。
关键词：分化抑制因子3,免疫组织化学,口腔鳞癌
参考文献
[1]Ruzinova MB, Benara RL.ID proteins in development, cell cycle and cancer[J].Trends Cell Biol, 2003, 13 (8) :410-418.[1]Ruzinova MB, Benara RL.ID proteins in development, cell cycle and cancer[J].Trends Cell Biol, 2003, 13 (8) :410-418.