耐异烟肼结核（共5篇）
耐异烟肼结核 篇1
耐药结核病已被公认为现代结核病控制的难题。至2012年出现了耐十几种抗结核药物的全耐药结核病 (TDR-TB) [1]。2010年全国结核病耐药性监测报告显示新发结核患者中INH耐药率为28.2% (68/241) [2]。荧光定量PCR探针熔解曲线法可快速检测痰标本中结核杆菌耐异烟肼相关的基因突变, 该研究对培养阳性的痰标本进行结核分枝杆菌耐异烟肼的检测, 评价其在结核病控制中的价值。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2013年1月-2014年2月周口市传染病医院以及国家耐药基线调查监测点扶沟筛查出的痰培养阳性患者的检测结果。
1.2 比例法药敏试验
对分离培养出的菌株同时进行结核分枝杆菌菌种和异烟肼药敏试验, 菌种鉴定使用对硝基苯甲酸 (PNB) 鉴别培养基, 异烟肼药敏试验 (0.2μg/m L) 为比例法, 以上试验均按照《结核病诊断实验室检验规程》进行。
1.3 熔解曲线法检测INH耐药
按照熔解曲线法结核分枝杆菌异烟肼耐药突变检测试剂盒 (批号:14060401, 厦门致善生物科技有限公司) 说明书操作。
1.4 质量控制
对熔解曲线法与比例法药敏试验检测结果不一致的样本进行测序验证, 测序由河南省疾病控制中心结核病参比室所协助完成。采用SPSS 17.0软件对结果进行数据分析。
2 结果
2.1 比例法药敏检出情况
共收集涂阳标本352例, 重症涂阴痰标本161例进行分离培养和菌种鉴定。352例涂阳标本去除污染、培阴和非结核分枝杆菌6例, 获得346株菌株;161例涂阴标本34例培养阳性, 剔除污染1例, 获得33株菌株。经比例法药敏试验验证分离出的379株结核分枝杆菌, 284株异烟肼敏感, 95株异烟肼耐药。
2.2 熔解曲线法检出情况
对379例培养阳性的痰标本经熔解曲线法检测, 其中91株为异烟肼耐药株, 288株为异烟肼敏感菌株。熔解曲线法检测典型结果见图1。
注:图中A、B、C、D分别为四个检测通道的典型熔解曲线结果。A图1:510 CAG→CAC突变型, 2:511 CTG→CCG突变型, 3:野生型;B图1:516 GAC→TAC突变型, 2:516 GAC→GTC突变型, 3:野生型;C图中1:526 CAC→TAC突变型, 2:523GGG→GAG突变型, 3:野生型;D图1:531 TCG→TGG突变型, 2:531TCG→TTG突变型, 3:野生型。图中纵坐标“d F/d T”表示荧光强度对温度的负倒数
2.3 灵敏度和特异度 (见表1)
2.4
测序验证 (见表2)
3 讨论
近年来, 随着理化技术与生物技术的发展, 不断涌现出以分子生物学为基础的耐药结核分枝杆菌快速检测手段, 为快速筛选耐药结核病打开了广阔的前景[3,4]。结核分枝杆菌分子耐药主要通过检测结核分枝杆菌的基因位点是否突变实现, 突变能引起INH耐药的基因有Kat G、inh A、achp C、ndh、Kas, 其中Kat G和inh A为两个主要的结核杆菌耐INH的突变方式[5]。DNA微阵列芯片技术晶芯 (中国, 博奥) [6]和线性探针膜杂交技术Geno Type MTBDRplus assay (德国, HAINS) [7], 这两种方法均只检测Kat G和inh A位点, 而荧光PCR探针熔解曲线法在以上基础上又增加了ahp C启动子区 (-44~-30以及-15~3位点) [8], 因此也获得更高的灵敏度。该研究中出现有3例假阴性结果 (熔解曲线法敏感比例法耐药, 测序为突变型) , 分析原因可能为菌株存在杂合子 (同时存在敏感与耐药菌株) 。试验中也有部分杂合子被熔解曲线法检测出突变, 说明熔解曲线法检测杂合子的灵敏度与敏感耐药菌株所占比例有关, 但也可能受仪器的检测精度影响。
该研究结果表明, 熔解曲线法可以直接用痰标本3 h左右获得药敏结果, 为临床早期抗结核化疗合理用药缩短了时间, 适用于耐多药结核病的快速筛查。且与线性探针以及Gene expert需要昂贵的专用设备不同, 熔解曲线法用现有的实时荧光定量PCR分析仪就能操作, 不需另外购买设备, 适合在市级医院推广。
摘要：目的 评价荧光定量PCR探针熔解曲线法快速筛选痰中耐异烟肼结核分枝杆菌菌株的检测效能。方法 筛选收集培养阳性肺结核患者的痰标本, 对鉴定为结核分枝杆菌的痰标本同时使用比例法药敏试验和PCR探针熔解曲线法进行耐异烟肼检测。结果 与比例法比较, 熔解曲线法检测异烟肼灵敏度为86.31% (82/95) , 特异性为96.83% (275/284) , 二者一致率为94.20% (357/379) 。结论 荧光PCR探针熔解曲线法可快速检测培阳痰标本中的结核分枝杆菌耐异烟肼突变基因, 适用基础结核病实验室对耐异烟肼结核病患者的快速筛查。
关键词：痰,结核分枝杆菌,熔解曲线法,异烟肼
参考文献
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耐异烟肼结核 篇2
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物SPF级昆明种小鼠80只, 雌雄各半, 体重18~22g, 由成都达硕生物科技有限公司提供。
1.1.2实验菌株实验采用的inhA基因突变耐异烟肼菌株由四川省疾病预防控制中心结核病防治研究所提供。
1.1.3治疗用药肺痨康水煎液:蒸百部、白及、天门冬、川贝母、猫爪草、北沙参、阿胶、蛤蚧粉等12味中药组成。药液制备:将全方药物 (阿胶、蛤蚧粉除外) 按常规煎煮方法熬制, 用电子恒温水箱60℃低温浓缩成1g生药/mL的药液, 加入阿胶、蛤蚧粉, 放4℃冰箱保存备用, 临用时加热。异烟肼片:沈阳红旗制药有限公司, 批号:1309021, 1mg/片, 研粉, 加生理盐水稀释。
1.1.4 主要试剂DNeasy Blood and Tissue Kit (Qiagen, 69504) ;TruSeq DNA LT Sample Preparation Kit (Illumina, FC-121-2001) ;Agencourt AMPure XP Beads (Beckman, A63881) ;Qubit dsDNA HS Assay Kit (Invitrogen, Q32854) ;Agilent High Sensitivity DNA Kit (Agilent, 067-4626) ;HiSeq PE Cluster Kit v4 (Illumina, PE-401-4001) ;HiSeq SBS Kit v4 (Illumina, FC-401-4003) 。
1.1.5 主要仪器及设备4℃冰箱 (海尔集团) ;Qubit 2.0Fluorometer (Invitrogen) ;Magnetic Stand-96 (Life Technologies) ;GeneAmp PCR System 9700 (Life Technologies) ;MicroCentrifuge (Eppendorf) ;Agilent 2100Bioanalyzer (Agilent) , ;ThermalStat Plus (Eppendorf) ;cBot Clonal Amplification System (Illumina) 。
1.2 实验方法
1.2.1 肺结核小鼠模型制备及分组参照文献[6]采用小鼠尾静脉注射法建立肺结核动物模型。选取80只SPF级昆明种小鼠, 雌雄各半, 随机分为空白组、异烟肼组、肺痨康组、异烟肼联合肺痨康组, 每组20只, 每组小鼠尾静脉注射耐异烟肼菌悬液0.1mL (含105cfu细菌) 。
1.2.2 治疗给药各组动物于造模1 周后开始灌胃治疗。1肺痨康组:参照前期实验研究结果[2], 并按国家中药管理局的相关规定, 以6g/kg为高剂量进行灌胃治疗;2异烟肼组:给予同体积的异烟肼灌胃。参照相关指南[7], 对耐药结核病给予高剂量异烟肼 (0.016~0.02g·kg-1·d-1) 治疗, 以正常成人体重70kg, 小鼠体重20g按体表面积比 (0.002 6) 等效剂量进行换算, 小鼠给药量为0.15g·kg-1·d-1;3异烟肼联合肺痨康组:给予同体积的异烟肼及肺痨康混悬液灌胃 (配伍比例1∶1) ;4空白组:分别给予同体积的生理盐水灌胃。以上6组均每日灌胃1次, 连续灌胃56天。
1.3 基因组测序
颈椎脱臼法处死小鼠, 用75% 酒精消毒小鼠体表5min, 无菌条件下解剖小鼠, 分离出肺脏, 在接种菌株的各实验组随机取1~2只小鼠肺组织标本, 分离出结核分枝杆菌。采用DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen, 69506) 按照生产厂商提供的操作流程进行结核分枝杆菌DNA抽提及纯化, 纯化后的DNA经Qubit 2.0Fluorometer和0.8%琼脂糖凝胶电泳进行质检, 质检合格的DNA进行后续的测序实验。按照实验说明书对基因组DNA进行片段化、末端修复、3’末端加A、连接接头、富集等步骤, 完成测序样本文库构建。所建文库使用Qubit 2.0Fluorometer检测浓度, 按照cBot User Guide所示相应流程, 在Illummina HiSeq2500测序仪配套的cBot上完成Cluster生成和第一向测序引物杂交。按照HiSeq 2500User Guide准备测序试剂, 将携有cluster的flow cell上机测序。测序过程由Illumina提供的data collection software进行控制, 并进行实时数据分析。
1.4 数据处理
测序得到的原始图像文件, 经过碱基识别及误差过滤, 得到可以用于分析的原始测序片段, 它包括序列的碱基组成信息以及其对应的序列质量信息, 对测序得到Reads进行过滤, 去除总体质量偏低的reads, 将质量大于20碱基所占比例小于50%的reads去除;去除3’端质量Q低于10的碱基, 即碱基错误率小于0.1;去除长度小于20的测序片段 (reads) 等。使用bwa软件 (version 0.7.8) 对预处理后的reads进行序列对比 (Mapping) (参考基因组为肺结核杆菌H37RV标准菌 (REF) , 参考基因组下载链为:http://ftp.ncbi.nih.gov//genomes/Bacteria/Mycobacterium_tuberculosis_H37Rv_uid57777) , 生成的比对结果为BAM文件, 结果由GATK Unified Genotyper对样品bam文件同时处理, 得到的vcf文件, snpEff软件完成突变的注释, 各组与参考序列进行对比, 如果碱基一致用0标志, 不一致用1, 比如0/1就表示该位点的碱基两者都有可能存在, 突变对应的位置注释有NON_SYNONYMOUS_CODING (非同义编码序列) 和SYNONYMOUS_CODING (同义编码序列) , SnpEff推定影响Effect程度。HIGH:表示该变异导致的Effect作用强烈, 导致蛋白质功能无法行使;MODERATE:表示该变异导致的Effect影响相对HIGH较小, 导致表达的蛋白质量上有所改变;LOW:表示该变异导致的Effect影响小, 在功能和表达量上不会有影响;MODIFIER表示该变异位于非编码区, 影响很小。“-”表示软件没有给出该信息。变异类型有SILENT:沉默突变, MISSENSE:错义突变, NONSENSE:无义突变。通过Perl脚本处理得到最终的注释结果放在同一个excel表格下进行筛选比较。
2 结果
手工筛选各Excel表中snpEff软件完成突变的注释, 发现有多个单核苷酸多态性位点 (SNPs) , 组间对比后筛选肺痨康干预后碱基的改变, 筛选出相关性较大的突变位点, 见表1、表2, 可以看出840329、1637656、3192198、3732194位置突变属于错义突变 (MISSENSE) 、影响程度中等 (MODERATE) , 在840329位置碱基是G或者A, 说明此位置为多态性位点, 用药后, 肺痨康、联合组该位置碱基成为了G, 而联合组、异烟肼组依然是多态位点, 此位置突变影响到了基因PE_PGRS10, 该位置密码子所编码的氨基酸也由天冬氨酸变为天冬酰胺;1637656 位置空白组的碱基是C, 而治疗组该位点是C或者G, 成为了多态性位点, 肺痨康组有一个还完全成为了C, 该位点突变可引起PE_PGRS28基因的改变, 第192位密码子所编码的氨基酸也可能从亮氨酸变为缬氨酸;3192198位置碱基是T或者C, 此位置为多态性位点, 用药后, 肺痨康组一个样本的碱基变为T, 此位置突变可影响基因frr, 该位置密码子所编码的氨基酸由异亮氨酸变为缬氨酸;3732194位置碱基是G或者A, 用药后, 肺痨康组一个样本的碱基变为T, 此位置突变可影响基因PPE54, 该位置密码子所编码的氨基酸由异亮氨酸变为苏氨酸。另外, 3399055、3732194、4359165位置突变属于沉默突变 (SILENT) 。
注:0表示与参考碱基一致, 1表示与样本碱基一致, 如0/1表示该位点可能存在突变或多态性。
注:氨基酸简写:天冬氨酸 (D) , 异亮氨酸 (I) , 天冬酰胺 (N) , 亮氨酸 (L) , 脯氨酸 (P) , 苏氨酸 (T) , 色氨酸 (W) , 缬氨酸 (V) 。
3 讨论
肺痨康是临床治疗肺结核的经验方, 前期研究发现肺痨康治疗肺结核可以促进结核病患者临床症状和肺部体征消失, 促进肺部病变吸收, 痰涂片转阴, 对结核分枝杆菌, 对耐异烟肼等耐药结核分枝杆菌有抗菌作用, 但其具体分子机制尚不明确。
PE、PPE家族为结核分枝杆菌基因组中一个数量庞大的家族, 因其编码蛋白的N端富含脯氨酸- 谷氨酸 (ProGlu) , 脯氨酸-脯氨酸-谷氨酸 (Pro-Pro-Glu) 的基序, 所以被命名为PE和PPE家族基因, 它们是一组富含甘氨酸和丙氨酸的蛋白[8], 总共编码有168个蛋白, 大约占分枝杆菌基因组8%的编码份额, PE家族有99个成员, PPE家族有69个成员[8]。PE家族中又有63个成员其N端和其它家族成员都包含约110个氨基酸残基的Pro-Glu重复基序, 但其C端区域多包含甘氨酸-甘氨酸-丙氨酸 (Gly-Gly-Ala) 或甘氨酸-甘氨酸-天门冬酞胺 (Gly-Gly-Asn) 的重复基序, 在此区域基因序列GC含量可高达约80%, 因此也被称为PE-PGRS (polymorphic GC-rich repetitive sequences) 蛋白, 在PGRS区域Gly-Gly-Ala-Gly-Gly-X (X代表任意氨基酸) 的基序排列最为常见。Cole, S.T.等[9]提出其家族蛋白PGRS序列富含甘氨酸和丙氨酸, 和EB病毒的核心抗原EBNA的序列相似, 而EBNA经研究其可以抑制MHC I类分子的抗原提呈功能, 而MHC I类分子提呈诱导的细胞毒性作用缺失可导致机体对结核分枝杆菌的易感。所以PEPGRS家族的成员很有可能和结核分枝杆菌的致病性相关。而其PGRS段的多变序列也很有可能和结核分枝杆菌的抗原变异性相关。多位研究者[10]对不同PE和PPE家族成员的研究均表明其成员多能诱导机体产生不同类型和不同程度的免疫反应。Yeddula Narayana等[11]研究发现PE家族成员Rv1169c, Rv0978c和Rv1818c在不同类型的临床病人中可以诱导出强度不一的体液免疫反应。而Rv1818c的PE端也被其它研究者验证可以在小鼠诱导保护性细胞免疫。而Rv1196 (PPE18) 的蛋白则在结核病重组疫苗Mtb72中为核心成员[12]。课题组推测肺痨康抗耐异烟肼分子机制是否与基因突变有关, 并开展相关实验。实验对比发现肺痨康干预后, 结核分枝杆菌的840329、1637656、3192198、3732194位置突变属于错义突变 (MISSENSE) 、影响程度中等 (MODERATE) , 该位点可影响627、193、3、1581位密码子的编码, 以及影响基因PE_PGRS10、PE_PGRS28、PPE54等, 它们属于PE、PPE家族基因成员, 研究证明在PE和PPE家族成员中有可以诱导机体保护性免疫反应的成员。本实验中, 肺痨康对耐异烟肼结核杆菌的分子机制推测可能与通过干预PE和PPE家族成员, 诱导机体产生不同类型和不同程度的免疫反应有关。 实验中3399055、3732194、4359165 位置突变属于沉默突变 (SILENT) , 对核苷酸影响较小 (LOW) 。然而目前关于家族成员PE_PGRS10、PE_PGRS28、PPE54 基因的研究资料尚少, 需要进一步研究。
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耐异烟肼结核 篇3
1 资料与方法
1.1 一般资料
整群选取2012年12月—2014年12月该院收治的耐药结核病患者166例, 均为继发性肺结核患者, 随机分为两组, 其中治疗组83例, 男41例, 女42例;年龄16~66岁, 平均年龄 (45±2.54) 岁;30例伴有空洞, 发热25例, 咳嗽20例, 咳血8例;病程1~18年, 平均为 (10±2.15) 年。对照组83例, 男43例, 女40例;年龄15~68岁, 平均年龄 (46±2.34) 岁;25例伴有空洞, 发热28例, 咳嗽19例, 咳血11例;病程1~19年, 平均为 (10±2.33) 年。下列情况不能入选: (1) 有严重肝肾等功能不全者; (2) 对卷曲霉素或对氨基水杨酸异烟肼过敏的患者; (3) 精神病患者或癫痫病患者; (4) 孕妇。两组的患者的年龄、性别、病情及病程等一般资料比较差异无统计学意义 (P>0.05) , 具有可比性。
1.2 治疗方法
1.2.1 对照组采用卷曲霉素治疗耐药结核病患者
将卷曲霉素750 mg加入到0.09%的氯化钠溶液液250 m L中, 1次/d, 静脉滴注, 疗程为3个月。试验期间不得使用影响卷曲霉素在体内代谢的药物。治疗过程中, 要根据每个患者的具体情况给药, 并且制定出个性化、规范化的治疗方案, 严格控制给药量和给药时间。严禁患者擅自停药等行为。
1.2.2 治疗组采用卷曲霉素联合对氨基水杨酸异烟肼治疗耐药结核病患者
将对氨基水杨酸异烟肼300 mg, 顿服, 1次/d。将卷曲霉素750 mg加入到0.09%的氯化钠溶液液250 m L中, 1次/d, 静脉滴注, 疗程为3个月。每天详细记录患儿的发热、咳嗽、咳血的具体情况。在治疗过程中, 患儿不可以服用其他影响耐药结核病患者在体内吸收、分布、代谢、排泄的药物, 严格控制患者服用药物的时间、次数、规定用量, 保证患者的用药安全。
1.3 疗效判定标准
显效:病情明显好转, 痰菌阴转, 发热、咳嗽、咳血等症状明显消失, 空洞关闭;有效:痰菌有所减少, 发热、咳嗽、咳血等症状有所减轻, 空洞有所改善, 但未完全关闭;无效:痰菌未见好转或者增多, 空洞没有改善或加重, 症状无明显变化或加重, 显效与有效两者合计算总有效率[7]。
1.4 统计方法
采用SPSS 19.0软件来完成对数据的统计与处理, 观察记录并比较两种治疗方法所得到的数据, 对显效率、有效率、无效率、总有效率进行χ2检验。P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 疗效对比
治疗组与对照组数据比较, 见表1。将结果进行χ2检验, χ2=13.547, P=0.016, P<0.05, 说明经统计学处理两组数据差异有统计学意义。
注:与对照组比较*P<0.05。
2.2 不良反应
在治疗过程中, 不良反应主要是头晕、头痛、眩晕、耳鸣的表现, 治疗组和对照组患儿分别出现5例、10例, 不良反应发生率分别为6.02%和12.05%, 经对应症适当处置后均恢复正常。两组比较χ2=5.127, P=0.031, P<0.05表示差异有统计学意义。
3 讨论
人类面对的严峻现实:抗结核病药物种类有限, 而且结核药物之间存在交叉耐药性, 这使得结核病患者可用的药物大大减少, 结核病难以根治, 造成有病却无药可用的尴尬局面, 结核病是一种很强的呼吸道传染病, 不仅危及着患者的健康, 周围人的身心健康也受到严重的威胁[8]。耐药结核病病情重, 病程长, 并发症较多, 治疗过程很复杂, 而且不易治愈。治疗耐药结核病所需的医药费很昂贵, 加上各项检查和培训, 将是正常结核病患者所需费用的200倍。尽管目前对耐药肺结核病的诊断治疗关注度明显提高, 极大地提高对耐药结核病的重视, 然而, 耐药肺结核病造成的威胁仍不断增加。
卷曲霉素是一种消炎抗生素药物, 属于多肽类抗生素, 主要应用在结核病方面, 通过抑制细菌蛋白的合成来抑制结核杆菌, 抑菌作用强。但口服吸收差, 但肌注吸收快, 可迅速分布全身。单独应用易产生耐药性, 需配合其他抗结核药物联合发挥作用, 如与对氨基水杨酸异烟肼的联合应用。对氨基水杨酸异烟肼是化学合成物, 对氨基水杨酸主要使生长繁殖期的分枝杆菌的细胞壁破裂, 从而发挥抑菌作用。异烟肼有效地延缓了对氨基水杨酸在体内的乙酰化过程。这不仅增强了药物的杀菌作用, 同时也延迟了细菌耐药性的产生。二者联合应用在耐药结核病中既可降低产生耐药性的不足, 又能互相弥补, 增强抑菌作用, 效果比单独应用时都好。通过结果得出临床上应用卷曲霉素与对氨基水杨酸异烟肼的疗效比较显著, 尽管对照组仅采用卷曲霉素也具有66.26%的总有效率, 但治疗组的总有效率为89.16%明显高于对照组。由此可见应用卷曲霉素与对氨基水杨酸异烟肼治疗耐药结核病可以达到很好的治疗效果。此外通过结果中两组患者的用药后不良反应的发生情况, 治疗组中不良反应的发生率 (6.02%) 明显低于对照组中的不良反应发生率 (12.05%) 。说明治疗组中应用卷曲霉素与对氨基水杨酸异烟肼联合应用的副作用小, 治疗效果安全可靠, 与陆晓静[9]研究结果一致。
综上所述, 卷曲霉素与对氨基水杨酸异烟肼联合应用治疗耐药结核病有明显的协同作用, 与单独应用卷曲霉素治疗耐药结核病相比, 疗效得到显著改善, 持久平稳, 值得临床推广, 有广阔的应用前景。
摘要：目的 探讨用卷曲霉素联合对氨基水杨酸异烟肼治疗耐药结核病的疗效, 用于指导临床用药。方法 整群选取2012年12月—2014年12月该院收治的耐药结核病患者166例, 随机分为治疗组和对照组, 每组83例, 将治疗组用卷曲霉素联合对氨基水杨酸异烟肼治疗, 对照组仅用卷曲霉素治疗, 进行疗效比较观察。结果 治疗组显效52例 (62.65%) , 总有效率89.16%;对照组显效34例 (40.96%) , 总有效率66.26%。治疗组不良反应发生率是6.02%, 而对照组不良反应发生率是12.05%。治疗组明显优于对照组, 经统计学处理差异有统计学意义 (P<0.05) 。结论 应用卷曲霉素联合对氨基水杨酸异烟肼治疗耐药结核病, 安全有效, 不良反应少, 值得临床推广。
关键词：卷曲霉素,对氨基水杨酸异烟肼,临床疗效
参考文献
[1]苗雅.卷曲霉素和丁胺卡那霉素在耐药结核中的对比观察[J].中国社区医师, 2013, 15 (4) :200.
[2]潘微.对氨基水杨酸钠异烟肼片治疗广泛耐药结核病的临床疗效分析[J].中国保健营养, 2014, 24 (7) :658.
[3]蔡清河.含卷曲霉素方案治疗耐多药肺结核疗效观察[J].海南医学院学报, 2013, 9 (15) :264-266.
[4]常慧澜.硫酸卷曲霉素在复治性肺结核中应用分析[J].中外医疗, 2013, 32 (12) :129.
[5]丁海榕.部分抗结核分枝杆菌药物的耐药机理研究进展[J].中国防痨杂志, 2013, 35 (8) :121.
[6]蔡建军.卷曲霉素致药物超敏综合征一例报告[J].山东医药, 2012, 52 (37) :107.
[7]张建旭.赵锋辉.国内卷曲霉素联合左氧氟沙星治疗耐药肺结核疗效和安全性的meta分析[J].中国临床研究, 2012, 25 (6) :133.
[8]李兆东.莫西沙星、阿米卡星、克拉霉素等药物联合治疗耐多药肺结核的近期疗效观察[J].中国现代医生, 2014, 52 (34) :109.
耐异烟肼结核 篇4
1 资料与方法
1.1 一般资料
所有病例均符合《实用结核病学》成人结核性脑膜炎诊断标准[3], 其中男6例, 女3例, 年龄16~38岁, 平均年龄 (26.4) 岁。所有病例均行头颅CT除外脑血管意外、颅内肿瘤。
1.2 临床表现
头痛8例, 发热7例, 恶心、呕吐6例, 癫痫1例, 复视1例, 直肠膀胱功能障碍1例, 昏迷1例, 精神异常1例。6例存在急性或亚急性血播型肺结核;1例曾患有结核性腹膜炎;1例无结核病病史。入院时存在脑积水1例。
1.3 脑脊液检查
结核抗体阳性6例, 阴性3例;蛋白>450mg/L 9例;糖正常1例, 降低8例;氯化物正常1例, 降低8例;所有患者脑脊液细胞数均>10×106/L;脑脊液压力>200mm H2O 8例, 蛛网膜阳性4例, 阴性5例。
1.4 治疗方法
对照组 (9例) :每日肌肉注射链霉素0.75g, 口服利福平0.6g, 异烟肼0.6g, 吡嗪酰胺1.5g, 泼尼松30mg;治疗组 (9例) :在对照组治疗的基础上进行腰椎穿刺, 先缓慢放出脑脊液1m L, 再注入异烟肼100mg+地塞米松5mg, 注入速度应慢 (>5min) 每周2次。针对症状的治疗方法 (如甘露醇脱水) 两组相同。
2 结果
治疗组平均住院时间明显缩短, 头痛、恶心等症状持续时间较对照组减少3~10d。8例颅内压增高者中有1例治疗前后颅内压力无明显变化。9例患者中有8例于治疗结束时脑脊液蛋白降到正常范围内。
3 讨论
结核性脑膜炎的治疗中除早期准确诊断及时治疗外, 应尽快使脑脊液中蛋白浓度降至正常范围, 以尽可能的减少由此导致的蛛网膜粘连、椎管梗阻、脑积水等[4]。蛋白浓度的降低又有利于鞘内给药后药物的扩散。同时鞘内给药使脑脊液内异烟肼的有效药物浓度能快速提高, 有利于对结核杆菌的杀灭。地塞米松的应用可以减轻脑膜的防御反应, 减轻脑水肿, 减少炎性渗出, 抑制或减缓蛛网膜上肉芽肿的形成。抑制纤维蛋白原转化为纤维蛋白, 减少颅底粘连。同时颅内压的降低可减少脱水药的使用时间, 减少对肾脏的损伤及水、电解质紊乱发生的概率。
鞘内给药操作简单, 在腰穿的基础上不需要增加设备, 有利于减少患者的经济负担。在实际操作中放脑脊液的速度应慢, 对梗阻性脑积水且头颅CT可见脑脊液在侧脑室前、后角有外渗者尤其要注意脑疝形成的危险性。在行鞘内给药时, 速度不宜过快, 浓度不宜过高, 以免大剂量异烟肼刺激后形成药物性蛛网膜炎.表现为于鞘内注射后数小时发生弛缓性瘫痪、大小便潴留等症状, 停止鞘内给药后多在3~5d内可自行恢复。
本组研究显示, 鞘内注药同常规静脉用药对比有如下优点: (1) 鞘内注药可提高脑脊中INH和激素有效浓度, 形成局部高浓度的杀灭结核菌的环境, 有利于治疗; (2) 避免INH全身给药通过肝脏乙酰化形成乙酰异烟肼; (3) 对降低脑脊液中细胞数和蛋白含量迅速, 使脑脊液恢复正常时间快1/2。并有效地预防和治疗椎管内脑脊液的阻塞; (4) 能减轻脑水肿, 防止脑疝形成, 降低病死率。鞘内给药治疗结核性脑膜炎安全有效。
参考文献
[1]葛艳玲.小儿结核性脑膜炎的诊断新进展闭[J].外医学儿科学分册, 2001, 28 (6) :302-304.
[2]安得仲.神经系统疾病鉴别诊断学[M].北京:人民卫生出版, 2000:392-396.
[3]刘同伦.实用结核病学[M].沈阳:辽宁科学技术出版社, 1987:433-442.
耐异烟肼结核 篇5
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2008年1~12月在我院住院的结核性包裹性积液患者116例, 年龄18~60岁, 无糖尿病、精神病及心、肝、肾等合并症, 非孕妇患者, 对该药物无过敏者。入选病例按计算机随机方法分为两组, 观察组60例, 男46例, 女14例, 平均年龄35岁;对照组56例, 男42例, 女14例, 平均年龄37岁。两组患者在性别、年龄、病情方面有可比性。
1.2 治疗方法
我院选用GE Logiq7型彩色多普勒超声诊断仪, 18G PTC穿刺针。两组患者均应用3HREZ/9HRE方案抗结核治疗, 并均采用B超引导下胸腔穿刺, 观察组和对照组分别在胸腔穿刺抽尽液体后注入异烟肼0.3加尿激酶5万单位, 隔日一次, 连注3次及注入异烟肼0.3加泼尼松龙125mg, 每4天一次 (见表1) 。
1.3 观察项目
每周复查胸腔彩超并检测胸水量及胸膜肥厚粘连程度:每个月查血常规、血沉、肝、肾功能:每月复查胸片, 每3月复查胸部CT:观察两组患者在胸腔穿刺注药后的反应。
1.4 疗效标准
显著吸收:指胸部X线检查示病灶吸收面积≥原病灶的1/2;部分吸收:病灶吸收面积<原病灶的1/2;不变:病灶无明显变化;恶化:病灶扩大或扩散。
1.5 统计学方法
两样本比较采用Ridit分析。
2 结果
2.1 病灶变化情况
观察组显效56例, 总有效率93.3%;对照组显效39例, 总有效率69.6%, 其中1例出现胸壁结核行手术治疗。观察组总有效率明显优于对照组, 差异有统计学意义。
统计采用两样本Ridit分析, 结果如下:观察组:治疗=0.434265, 总体R治疗均数95%的CI为 (0.376591, 0.491940) ;对照组:对照=0.570430, 总体R对照均数95%的CI为 (0.495638, 0.645222) 。对照组与观察组两组95%CI无重叠, 按a=0.05水准, 观察组总有效率明显优于对照组, 差异有统计学意义。
2.2 不良反应
观察组在胸腔穿刺注药后有3例出现发热, 体温最高达39℃, 经用退热药物后好转, 未出现其它不良反应。
3 讨论
结核性包裹性胸腔积液是胸水吸收不完全, 并被纤维组织包裹而形成。分析本组患者出现包裹性积液的原因:延误诊断;早期抗结核治疗方案不规范;胸水未抽尽;患者不重视病情, 未充分休养等。大量的纤维蛋白沉着, 导致胸膜的肥厚粘连及分房, 使治疗变得较为棘手, 如果患者治疗不规范, 病情进展, 可能会导致结核性脓胸及支气管胸膜瘘等严重的并发症, 使肺功能明显减退, 对患者危害极大。治疗结核性包裹性胸腔积液, 单纯的化学药物抗结核治疗是不够的, 对结核性包裹性胸腔积液进行胸腔介入治疗显得较为重要, 介入治疗对于胸水的消除价值较大, 具有标本兼治的作用, 往往能很好的改善预后。
本项研究我院选用GE Logiq7型彩色多普勒超声诊断仪, 配备穿刺导向器, 定位准确, 可观察到积液的情况, 抽水彻底, 尤其对多房性胸腔积液效果更佳。尿激酶 (UK) 是纤维蛋白溶酶原的激活剂, 可使胸腔中的纤维蛋白溶解, 清除胸膜粘连及分隔, 使胸液稀释、增多, 利于引流排除, 从而减轻胸膜肥厚粘连, 达到治疗目的, 本项研究, 观察组患者胸液抽尽注入异烟肼加尿激酶后显效56例, 总有效率93.3%;对照组显效39例, 总有效率69.6%, 明显优于对照组, 差异有统计学意义。观察组有3例出现发热, 未出现其它不良反应。该研究效果显著, 应用较为安全有效, 值得临床推广应用。
摘要：目的 探讨胸腔内注入异烟肼加尿激酶治疗结核性包裹性积液的疗效与安全性。方法 选取结核性包裹性积液患者116例, 按计算机随机方法分为两组, 观察组60例, 胸腔穿刺, 抽尽液体后注入异烟肼0.3加尿激酶5万单位。对照组56例, 胸腔穿刺抽尽液体后注入异烟肼0.3加泼尼松龙125mg。观察两组患者的总有效率, 并对患者胸水量、胸膜肥厚、胸膜粘连分别在治疗前及治疗后进行评价。结果 观察6个月, 观察组显效56例, 总有效率93.3%, 对照组显效39例, 总有效率69.6%。观察组总有效率明显优于对照组, 差异有统计学意义。观察组有3例出现发热, 未出现其它不良反应。结论 胸腔内注入异烟肼加尿激酶治疗结核性包裹性积液, 疗效显著, 应用较为安全有效。
关键词：包裹性积液,异烟肼,尿激酶
参考文献